摘要糖精钠是有机化工合成产品，是食品添加剂。是一种甜味剂。除了在味觉上引起甜的感觉外，对人体无任何营养价值。相反，当食用较多的糖精时，会影响肠胃消化酶的正常分泌，使食欲减退。因此，糖精钠的含量的控制很有必要。为此南京科捷应用LC-600液相色谱仪器对糖精钠的分析方法进行了研究，可同时应用高效液相色谱法对橙汁、碳酸饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠的含量进行检测，检测快速，结果准确可靠。关键词：食品添加剂 饲料添加剂饮料 糖精钠中山梨酸 苯甲酸 橙汁 甜味剂 液相色谱法1.苯甲酸、山梨酸、糖精钠（0.04mg/mL）高效液相色谱图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/05/201105311535_297105_2242538_3.jpg2.本方法的应用范围 1） 食品：冷饮、饮料、果冻、凉果、蛋白糖等 2） 饲料添加剂：猪饲料、香甜剂等 3） 日化行业：牙膏、嗖口水、眼药水等 4） 电镀行业：电镀光亮剂3.仪器配置检测项目苯甲酸、山梨酸、糖精钠本项目实验单位南京科捷分析仪器应用研究所实验仪器型号及配置LC-600液相色谱仪P600宝石恒流泵 1台UV600紫外检测器 1台7725i六通进样阀 1只WS600色谱工作站 1套[
1 引言根据我国食品卫生法(1995年)的规定，食品添加剂是为改善食品色、香、味等品质，以及为防腐和加工工艺的需要而加入食品中的人工合成或者天然物质。苯甲酸可以用作食品、饲料、乳胶、牙膏的防腐剂。在酸性条件下，对霉菌、酵母和细菌均有抑制作用，但对产酸菌作用较弱。苯甲酸分子态的抑菌活性较离子态高，故PH小于4时，抑菌活性高，抑菌的最适pH值为2.5～4.0，一般以低于pH值4.5～5.0为宜。由于苯甲酸对水的溶解度低，故实际多是加适量的碳酸钠或碳酸氢钠，用90℃以上热水溶解，使其转化成苯甲酸钠钠后才添加到食品中。若必须使用苯甲酸，可先用适量乙醇溶解后再应用。由于苯甲酸对水的溶解度比苯甲酸钠低，因此在酸性食品中使用苯甲酸钠时，要注意防止由于苯甲酸钠转变成苯甲酸而造成沉淀和降低其使用效果。苯甲酸在酱油、清凉饮料中可与对-羟基苯甲酸酯类一起使用而增效。糖精，曾是一种饱受争议的甜味剂。研究人员曾对它做过一些动物实验，实验结果表明该物质具有致癌作用，因此FDA于1977年明令禁用该物质。但因餐饮行业（以及节食者）的坚持，糖精至今仍在市场上出售。但到了20世纪90年代末，包含糖精的产品包装上均贴有警告标签，指出糖精对实验室动物具有致癌作用。而美国热量控制委员会指出，人们不会像老鼠一样患上膀胱癌，因此，应该除去这个警告标签。在2000年，美国国会废除了相关法规，糖精产品不必进行健康警告标签。安赛蜜是一种食品添加剂，是化学品，类似于糖精，易溶于水，增加食品甜味的，没有营养，口感好，无热量，具有在人体内不代谢、不吸收（是中老年人、肥胖病人、糖尿病患者理想的甜味剂），对热和酸稳定性好等特点，是当前世界上第四代合成甜味剂。它和其它甜味剂混合使用能产生很强的协同效应，一般浓度下可增加甜度30%~50%。安赛蜜具有强烈甜味，甜度约为蔗糖的130倍，呈味性质与糖精相似。高浓度时有苦味。安赛蜜为人工合成甜味剂，经常食用合成甜味剂超标的食品会对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对老人、孕妇、小孩危害更为严重。如果短时间内大量食用，会引起血小板减少导致急性大出血。咖啡因是一种黄嘌呤生物碱化合物，是一种中枢神经兴奋剂，能够暂时的驱走睡意并恢复精力，临床上用于治疗神经衰弱和昏迷复苏。有咖啡因成分的咖啡、茶、软饮料及能量饮料十分畅销，因此，咖啡因也是世界上最普遍被使用的精神药品。2 材料与方法2.1 材料2.1.1 材料与试剂空白可乐样品: 可口可乐原味(无咖啡因)(美国可口可乐公司); 样品: 可口可乐。苯甲酸钠; 糖精钠; 安赛蜜; 咖啡因;甲醇; 乙酸铵。2.1.2 仪器与设备Agilent 1260 高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);天平; 离心机。2.2 实验方法2.2.1 标准品(1)标准储备液的配制精密称取苯甲酸钠、糖精钠、安赛蜜和咖啡因标准物质60、65、50、50 mg(精确至0.1 mg),分别置于50 mL 容量瓶中, 用水溶解并稀释至刻度,摇匀, 得到相应标准储备液, 4℃冰箱保存。(2)混合标准中间溶液的配制精密量取苯甲酸钠、糖精钠、安赛蜜和咖啡因标准储备液2.0 mL, 置同一10 mL 容量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 得到混合标准中间溶液, 临用新制。(3)混合标准工作溶液的配制精密量取标准中间溶液适量, 置于10 mL 容量瓶中, 用水稀释至刻度, 摇匀, 配制成系列线性标准工作溶液, 供高效液相色谱仪测定。2.2.2 样品处理样品经超声脱气后, 精密量取1 mL 至2 mL 容量瓶中, 加水稀释至刻度, 摇匀, 经0.45 μm 滤膜过滤, 滤液供高效液相色谱仪测定。2.2.3 液相色谱条件色谱柱为月旭色谱柱，Ultimate XB-C18 4.6 x250,5um(part Number 00201-31043 Serial Number 211302350 Lot Number 2101.77)流动相A: 乙酸铵缓冲液(0.02mol/L), 流动相B: 甲醇, 梯度洗脱程序: 0~0.5 min, 流动相B 5%;0.5~6.0 min,5%~10%; 6.0~9.0 min, 10%~20%, 20%维持2min;11.0~16.0 min, 20%~75%, 75% 维持3min,19.0~20.0 min, 75%~5%, 5%维持7 min。流速1.0mL/min;进样量为20 μL; 柱温30 ℃; 检测波长230 nm 和272 nm。3 结果与分析3.1 方法的线性范围和检出限将 2.2.1(3)系列线性标准工作溶液(浓度范围为2.0~200 μg/mL)在2.2.3 仪器条件下进行分析, 建立标准曲线, 苯甲酸、糖精钠、安赛蜜和咖啡因的相关系数r 均大于0.999。以逐渐降低样品中标准溶液添加量的方法进行实验, 以峰面积相当于基线噪音的3倍(S/N=3)计算检出限。苯甲酸钠、糖精钠、安赛蜜和咖啡因的保留时间、检测波长、检测限等见表1。表1 检测波长、检出限、相关系数 化合物 检测波长 (nm) [alig
大家有做CNCA-09- B15 饮料中甜味剂(糖精钠,安塞蜜),防腐剂(对羟基苯甲酸甲,乙,丙酯)分析能力验证 的吗，互相讨论一下吧呵呵
防腐剂是一类重要的食品添加剂，它延长了食品的贮存期和货架期，防止了有毒微生物的危害，对食品工业的发展发挥了巨大的作用。但是它在促进食品工业发展的同时，也在食品安全方面产生了巨大的隐患，影响了人们的身体健康。这就需要我们能够准确地测量食品中添加剂的含量。本文采用高效液相色谱发来测定，具有方法简单，灵敏度高的特点。关键词：高效液相 防腐剂1 仪器与药品伍丰LC-100等度系统。包括泵LC-100P，柱温箱LC-100 CO，检测器UV-100Arcus 5 自动进样器等。超声波清洗机，PH计，电子天平。苯甲酸、山梨酸、糖精钠对照品（中国药品生物制品检定所）市售雪碧甲醇为HPLC级，醋酸铵为分析纯2 分析条件仪器： LC-100高效液相色谱仪色谱柱： Athena C18， 4.6*250mm， 5um流动相： A：B=5:95A: 甲醇 B: 醋酸铵水溶液（称量1.54g乙酸铵溶于1L水中）流速： 1mL/min检测波长：230nm进样量： 10uL柱温： 28℃ 3 样品处理对照品溶液：分别将苯甲酸，山梨酸，糖精钠标准品配成1mg/mL的溶液。然后分别用甲醇将苯甲酸钠，山梨酸钾溶液稀释成0.32mg/mL，0.16mg/mL，0.08mg/mL，0.04mg/mL，0.02mg/mL的溶液。糖精钠溶液用水稀释成0.32mg/mL，0.16mg/mL，0.08mg/mL，0.04mg/mL，0.02mg/mL的溶液。样品制备：称取雪碧10.003g，用水稀释至25mL，用1:1的氨水调PH至中性。用0.45um滤膜过滤后待用。4 实验步骤4.1 线性关系考察吸取上述对照品溶液各10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图以及苯甲酸、山梨酸、糖精钠的峰面积。以三种物质的质量浓度对峰面积进行线性回归。结果表明，三种物质质量浓度0.02mg/mL-0.32 mg/mL范围内有良好的线性，线性相关系数r均大于0.999。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110937_549809_1635904_3.png 图1：苯甲酸校准曲线http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110937_549809_1635904_3.png 图2：山梨酸校准曲线http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110937_549810_1635904_3.png 图3：糖精钠校准曲线4.2 实际样品分析将上述配好的雪碧溶液吸取10 μL注入液相色谱仪记录色谱峰面积，使用外标法计算含量。测得市售雪碧中苯甲酸的含量为0.14g/kg。小于国家规定的0.2g/kg的标准。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110939_549811_1635904_3.png 图4：对照品谱图 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110939_549812_1635904_3.png 图5：雪碧样品 5讨论与建议本方法对于市售雪碧中防腐剂做了相关实验，选取相关浓度的标准品对三种添加剂做标准曲线，线性范围良好，线性相关系数r大于0.999。根据标准曲线得出市售雪碧的苯甲酸含量，重复性好。数据表明，LC-100适合对食品中苯甲酸，山梨酸，糖精钠进行检测。该方法操作简单简单，分析时间短，专属性强。可以满足饮料中防腐剂测定。
液相色谱同时分析饮料中山梨酸、苯甲酸、糖精钠及五种合成色素的标准色谱图，急用！谢谢！可以发我邮箱zjchen3189@126.com
防腐剂是一类重要的食品添加剂，它延长了食品的贮存期和货架期，防止了有毒微生物的危害，对食品工业的发展发挥了巨大的作用。但是它在促进食品工业发展的同时，也在食品安全方面产生了巨大的隐患，影响了人们的身体健康。这就需要我们能够准确地测量食品中添加剂的含量。本文采用高效液相色谱发来测定，具有方法简单，灵敏度高的特点。关键词：高效液相 防腐剂1 仪器与药品伍丰LC-100等度系统。包括泵LC-100P，柱温箱LC-100 CO，检测器UV-100Arcus 5 自动进样器等。超声波清洗机，PH计，电子天平。苯甲酸、山梨酸、糖精钠对照品（中国药品生物制品检定所）市售雪碧甲醇为HPLC级，醋酸铵为分析纯2 分析条件仪器： LC-100高效液相色谱仪色谱柱： Athena C18， 4.6*250mm， 5um流动相： A：B=5:95A: 甲醇 B: 醋酸铵水溶液（称量1.54g乙酸铵溶于1L水中）流速： 1mL/min检测波长：230nm进样量： 10uL柱温： 28℃ 3 样品处理对照品溶液：分别将苯甲酸，山梨酸，糖精钠标准品配成1mg/mL的溶液。然后分别用甲醇将苯甲酸钠，山梨酸钾溶液稀释成0.32mg/mL，0.16mg/mL，0.08mg/mL，0.04mg/mL，0.02mg/mL的溶液。糖精钠溶液用水稀释成0.32mg/mL，0.16mg/mL，0.08mg/mL，0.04mg/mL，0.02mg/mL的溶液。样品制备：称取雪碧10.003g，用水稀释至25mL，用1:1的氨水调PH至中性。用0.45um滤膜过滤后待用。4 实验步骤4.1 线性关系考察吸取上述对照品溶液各10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图以及苯甲酸、山梨酸、糖精钠的峰面积。以三种物质的质量浓度对峰面积进行线性回归。结果表明，三种物质质量浓度0.02mg/mL-0.32 mg/mL范围内有良好的线性，线性相关系数r均大于0.999。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508200902_561638_1635904_3.jpg 图1：苯甲酸校准曲线http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110937_549809_1635904_3.png 图2：山梨酸校准曲线http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110937_549810_1635904_3.png 图3：糖精钠校准曲线4.2 实际样品分析将上述配好的雪碧溶液吸取10 μL注入液相色谱仪记录色谱峰面积，使用外标法计算含量。测得市售雪碧中苯甲酸的含量为0.14g/kg。小于国家规定的0.2g/kg的标准。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110939_549811_1635904_3.png 图4：对照品谱图 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/06/201506110939_549812_1635904_3.png 图5：雪碧样品 5讨论与建议本方法对于市售雪碧中防腐剂做了相关实验，选取相关浓度的标准品对三种添加剂做标准曲线，线性范围良好，线性相关系数r大于0.999。根据标准曲线得出市售雪碧的苯甲酸含量，重复性好。数据表明，LC-100适合对食品中苯甲酸，山梨酸，糖精钠进行检测。该方法操作简单简单，分析时间短，专属性强。可以满足饮料中防腐剂测定。
食品、饮料中防腐剂苯甲酸、山梨酸、糖精钠高效液相色谱检测防腐剂是食品添加剂中的重要组成部分，在食品生产、储存等环节起着非常重要的作用，但添加多了也会带来很多负面影响，尤其是对人体的影响。所以对食品添加剂的限量规定和检测是非常关键的。下面我们就一起来看看常见的食品添加剂（防腐剂苯甲酸、山梨酸、糖精钠）高效液相色谱检测。1. 实验项目（参考GB/T23495-2009）饮料、食品中防腐剂苯甲酸、山梨酸、糖精钠测试2. 实验内容测试检出限、校正曲线、重复性（RSD）、饮料、酱油样品等检测3. 仪器高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱+在线脱气机等）4. 色谱条件检测器：紫外检测器色谱柱：月旭Welchrom-C18 (250 mm × 4.6 mm，5μm)Serial Number：W13212255检测波长：230nm流动相：甲醇：0.02mol乙酸铵溶液=5:95（V:V）流速：1.0ml/min柱温：室温进样量：20ul5. 色谱图20.0ug/ml谱图 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311901_533698_2498430_3.bmphttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311911_533707_2498430_3.png20.0ug/ml谱图比较 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311903_533699_2498430_3.bmp苯甲酸校正曲线 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311904_533700_2498430_3.bmp山梨酸校正曲线 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311904_533701_2498430_3.bmp糖精钠校正曲线 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311905_533702_2498430_3.bmp某饮料样品色谱图 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311910_533704_2498430_3.png该饮料样品加标色谱图 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/01/201501311911_533705_2498430_3.png
使用高效液相色谱仪能否使用同一根柱子同时分析白酒和香料中的糖精钠、安赛蜜、山犁酸和苯甲酸？如果可以，其分析方法如何？
第九届原创离子色谱法测定饮料中的山梨酸、苯甲酸和糖精钠黄选忠 杜宏山 邹大喜（湖北兴山县疾病预防控制中心，443711）摘要 建立了用国产SH-AC-1型阴离子交换柱为分离柱，以1.5 mmol/LNa2CO3为淋洗液，流量为1.5mL/min，采用等度洗脱的方式测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的方法，山梨酸、苯甲酸的线性范围为0～30.0mg/L,糖精钠的线性范围为0～15.0mg/L,方法应用于饮料等样品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的测定，其结果与气相色谱法相吻合，加标回收率分别为：97.9%～104.5%、96.3～100.9%和100.3%～104.5%，5次平行测定的相对标准偏差分别为：1.68%～3.92%、2.32～4.08%和2.02%～3.95%（n=5），按样品稀释50倍计方法的检出限分别3.5、2.5和1.5 mg/L。关键词 离子色谱法，饮料，山梨酸，苯甲酸，糖精钠食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的测定方法国家标准推荐的主要有气相色谱法和高效液相色谱法等，其中，气相色谱法样品前处理方法繁杂，而高效液相色谱法虽然样品前处理方法简单但仪器价格偏贵基层实验室少有配置，使其应用受到限制。离子色谱法以其灵敏、快速、试剂消耗少、无环境污染等优点而备受广大分析工作者的青睐，已应用于食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠等多种添加剂的分析，但这些方法大多使用的是进口色谱柱并采用KOH淋洗液梯度洗脱方式进行测定，而进口色谱柱特别是具有梯度洗脱功能的离子色谱仪的价格普遍偏贵，目前基层实验室装备较少难以应用，因此研究用国产普通色谱柱和普通色谱仪测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠是一项有意义的工作，本工作研究了用国产普通色谱柱和色谱仪测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的各种条件和可行性，结果表明，以1.5 mmol/LNa2CO3溶液作淋洗液，流量为1.5ml/min,用SH-AC-1型阴离子交换柱为分离柱，采用等度洗脱的方式可使山梨酸、苯甲酸和糖精钠较好分离，各组分的峰面积与其浓度在一定的范围内具有良好的线性关系，且各组分的保留时间在14 min以内，具有分析应用价值。据此，建立了用国产SH-AC-1型阴离子交换柱为分离柱，以1.5 mmol/LNa2CO3为淋洗液等度洗脱的方式测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的方法，山梨酸、苯甲酸的线性范围为0～30.0mg/L,糖精钠的线性范围为0～15.0mg/L,方法应用于饮料等样品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的测定，获得了满意的结果。1、实验部分1.1主要仪器CIC-200型离子色谱仪（青岛盛翰色谱公司），抑制器：检测器：电导检测器，定量环体积为25μL；分离柱，SH-AC-1型阴离子交换柱（250×4.0mm i.d,青岛盛翰色谱公司，批号：1404016）；1.2 仪器工作条件 柱箱温度35℃，电流：50mA。1.3主要试剂山梨酸、苯甲酸和糖精钠标准溶液：1000 mg/L，按照文献方法配制。临用时用纯水将各种标准溶液稀释成含山梨酸、苯甲酸各250.0 mg/L、 糖精钠125.0mg/L的混合标准应用液；75 mmol/LNa2CO3淋洗液贮备液，临用时用纯水稀释50倍使用。实验所用试剂均为AR及以上级，实验用水为超纯水（18.25ΜΩ·cm）。1.4 实验方法1.4.1标准曲线的绘制 取0.10、0.20、0.60、1.00、2.00和3.00 mL混合标准液于25mL容量瓶中加纯水至刻度，混匀，配制成含山梨酸、苯甲酸1.0、2.0、6.0、10.0、20.0、 30.0mg/L和糖精钠0.5、1.0、3.0、5.0、10.0和15.0mg/L标准系列，各进样1 mL上机（测试条件为，柱箱温度：35℃，电流：50mA；淋洗液：1.5mmol/L Na2CO3溶液；淋洗液流量：1.5mL/min；量程：1档）测定各成份峰面积（S），以S对浓度绘制工作曲线。1.4.2样品测定 将样品稀释50倍经0.45μm滤头过滤后进样1 mL上机（条件同1.4.1）测定各成份峰面积（S），以标准曲线法定量。2、结果与讨论2.1 Na2CO3浓度的选择 在高效液相色谱法中选择适当的淋洗液是改善分离度(R)的有效方法，为保证山梨酸、苯甲酸和糖精钠的有效分离，同时当以Na2CO3作淋洗液时，NO3-的保留时间与苯甲酸的保留时间比较接近，考虑到样品中可能存在的NO3-对苯甲酸测定的影响，为此进行了Na2CO3淋洗液浓度的选择实验，结果见表1。从表1可见，当Na2CO3浓度在1.0～表1 Na2CO3浓度对分离度和保留时间的影响（流量1.0 ml/min） 组分/浓度(mg/L) 1.0mmol/L 1.5mmol/L 2.0mmol/L 保留时间（min） R 保留时间（min） R 保留时间（min） R 山梨酸(20) 11.487 2.68 9.630 2.66 8.438 2.29 苯甲酸(20) 19.09 1.46 15.598 1.16 13.463 1.03 NO3-(10) 22.509 1.78 17.870 1.63 15.212 1.60 糖精钠(10) 26.048 / 20.645 / 17.543 / [/td
离子色谱法测定饮料中的山梨酸、苯甲酸和糖精钠黄选忠 杜宏山 邹大喜（湖北兴山县疾病预防控制中心，443711）摘要 建立了以青岛盛翰色谱公司生产的SH-AC-1型阴离子交换柱为分离柱，以1.5 mmol/LNa2CO3为淋洗液，流量为1.5mL/min，采用等度洗脱的方式测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的方法，山梨酸、苯甲酸的线性范围为0～30.0mg/L, 糖精钠的线性范围为0～15.0mg/L,方法应用于饮料等样品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的测定，其结果与气相色谱法相吻合，加标回收率分别为：97.9%～98.4%、96.5～96.8%和100.6%～104.4%，5次平行测定的相对标准偏差分别为：1.68%～3.92%、2.32～4.08%和2.02%～3.95%（n=5），按样品稀释50倍计方法的检出限分别3.5、2.5和1.5 mg/L。关键词 离子色谱法，饮料，山梨酸，苯甲酸，糖精钠食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的测定方法国家标准推荐的主要有气相色谱法和高效液相色谱法等，其中，气相色谱法样品前处理方法繁杂，而高效液相色谱法虽然样品前处理方法简单但仪器价格偏贵基层实验室少有配置，使其应用受到限制。离子色谱法以其灵敏、快速、试剂消耗少、无环境污染等优点而备受广大分析工作者的青睐，已应用于食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠等多种添加剂的分析，但这些方法大多使用的是进口色谱柱并采用KOH淋洗液梯度洗脱方式进行测定，而进口色谱柱特别是具有梯度洗脱功能的离子色谱仪的价格普遍偏贵，目前基层实验室装备较少难以应用，因此研究用国产普通色谱柱和普通色谱仪测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠是一项有意义的工作，本工作研究了用国产普通色谱柱和色谱仪测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的各种条件和可行性，结果表明，以1.5 mmol/LNa2CO3溶液作淋洗液，流量为1.5ml/min,用SH-AC-1型阴离子交换柱为分离柱，采用等度洗脱的方式可使山梨酸、苯甲酸和糖精钠较好分离，各组分的峰面积与其浓度在一定的范围内具有良好的线性关系，且各组分的保留时间在14 min以内，具有分析应用价值。据此，建立了以青岛盛翰色谱公司生产的SH-AC-1型阴离子交换柱为分离柱，以1.5 mmol/LNa2CO3为淋洗液等度洗脱的方式测定食品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的方法，山梨酸、苯甲酸的线性范围为0～30.0mg/L, 糖精钠的线性范围为0～15.0mg/L,方法应用于饮料等样品中山梨酸、苯甲酸和糖精钠的测定，获得了满意的结果。1、实验部分1.1主要仪器CIC-200型离子色谱仪（青岛盛翰色谱公司），抑制器：检测器：电导检测器，定量环体积为25μL；分离柱，SH-AC-1型阴离子交换柱（250×4.0mm i.d,青岛盛翰色谱公司，批号：1404016）； 1.2 仪器工作条件 柱箱温度35℃，电流：50mA。1.3主要试剂山梨酸、苯甲酸和糖精钠标准溶液：1000 mg/L，按照文献方法配制。临用时用纯水将各种标准溶液稀释成含山梨酸、苯甲酸各250.0 mg/L、 糖精钠125.0mg/L的混合标准应用液； 75 mmol/LNa2CO3淋洗液贮备液，临用时用纯水稀释50倍使用。实验所用试剂均为AR及以上级，实验用水为超纯水（18.2ΜΩ·cm）。1.4 实验方法1.4.1 标准曲线的绘制 取0.10、0.20、0.60、1.00、2.00和3.00 mL混合标准液于25 mL容量瓶中加纯水至刻度，混匀，配制成含山梨酸、苯甲酸1.0、2.0、6.0、10.0、20.0、 30.0mg/L和糖精钠0.5、1.0、3.0、5.0、10.0和15.0mg/L标准系列，各进样1 mL上机（淋洗液：1.5mmol/L Na2CO3溶液；流量：1.5mL/min；量程：1档）测定各成份峰面积（S），以S对浓度绘制工作曲线。1.4.2 样品测定 将样品稀释50倍经0.45μm滤头过滤后进样1 mL上机（条件同1.4.1）测定各成份峰面积（S），以标准曲线法定量。2、结果与讨论2.1 Na2CO3浓度的选择 在高效液相色谱法中选择适当的淋洗液是改善分离度(R)的有效方法，为保证山梨酸、苯甲酸和糖精钠的有效分离，同时当以Na2CO3作淋洗液时，NO3-的保留时间与苯甲酸的保留时间比较接近，考虑到样品中可能存在的NO3-对苯甲酸测定的影响，为此进行了Na2CO3淋洗液浓度的选择实验，结果见表1。从表1可见，当Na2CO3浓度在1.0～表1 Na2CO3浓度对分离度和保留时间的影响（流量1.0 ml/min）组分/浓度(mg/L)1.0mmol/L1.5mmol/L2.0mmol/L保留时间（min）R保留时间（min）R保留时间（min）R山梨酸(20)11.4872.689.6302.668.4382.29苯甲酸(20)19.091.4615.5981.1613.4631.03NO3-(10)22.5091.7817.8701.6315.2121.60糖精钠(10)26.048/20.645/
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-1996，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-1996，即可开展实验。苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。2 样品前处理的注意事项 GB/T5009.28-1996和GB/T5009.29-1996 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。GB/T5009.29-1996使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。3 检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。原因如下：3.1 液相色谱法所用的样品处理方法远比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法简单，且不需使用有机试剂。尤其对于高油脂样品（如月饼）若采用碱化－排油－酸化－提取－挥干－溶解等步骤，再上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]检测，工作量大，试剂毒性也大，且结果由于处理步骤太多而难以保证准确。3.2 用液相色谱法还可同时完成糖精钠项目的检测，而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法只能做苯甲酸、山梨酸的检测。3.3 液相色谱仪所用的紫外检测器比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的氢火焰检测器灵敏，可进行更低含量的检测。如用二极管阵列检测器，还可辅助定性，这更是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]氢火焰检测器不可比拟的。4 选用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]时的注意事项 GB/T5009.29-1996所用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱为 5％DEGS＋1％磷酸固定液的60－80目 Chromosorb W AW，。这种柱有性能稳定、重复性好、保留时间稳定的优点，但同时也有稳定时间较长的缺点。该柱的适用的样品提取溶剂为石油醚或乙醚，如果用甲醇或乙醇，则溶剂峰拖尾效应较大，对山梨酸的测定有影响。如用毛细管柱，能取得更好的峰形和灵敏度，但其稳定性及特异性不如填充柱。一般可用非极性毛细管柱，0.530mm内径，10－15m长度。色谱条件可能需用程序升温。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上的出峰次序为先出山梨酸，后出苯甲酸。糖精钠不能直接用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行检测，必须衍生化后才能汽化进样。5 选用液相色谱仪的注意事项 按照GB/T5009.29-1996，流动相应为5：95的甲醇：0.02M醋酸铵溶液，但是这个比例仅是个参考值，我们在工作中应根据实际情况进行调节。 为什么用甲醇溶液？甲醇有两个作用，（1）防腐，液相色谱柱最怕流动相长菌，尤其霉菌。甲醇可使蛋白质变性，有杀菌作用。（2）调节流动相极性，这是最重要的一点。甲醇在溶液中比例的较小变化都会使苯甲酸、山梨酸、糖精钠的保留时间发生明显的改变，因此可以通过改变流动相中甲醇含量，以调节这几个组分的出峰和分离，以得到较理想的色谱图。5：95是一个通用的比例，如减少甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间变慢，扩散效应增大，峰形较差，但这三组分的分离情况较好。如增加甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间提前，扩散效应较小，峰形尖锐，但这三组分的分离情况可能受影响，产生重叠。在选择条件时，只能通过实验手段，如配制3：97，4：96，5：95，6：96，7：93的流动相，综合考虑分离效果和分离时间选择最佳比例。不同柱的最适比例不同，举例来说，色谱科公司的液相柱最适比例为4：96，而岛津公司液相柱的最佳比例为7：93。就是同一根柱，一年前和一年后的极性也会有变化，需调节溶液配比。为什么使用0.02M醋酸铵溶液？加入醋酸铵是为了调节离子强度，使待测物的峰形不致于变坏。如果单独检测苯甲酸和糖精钠，加不加醋酸铵没有什么关系，都可以得到较好的峰形；但是检测山梨酸时流动相一定要加醋酸铵，否则得不到一个完整的色谱峰，峰形呈破裂状。醋酸铵溶液浓度不需严格控制，0.01M、0.02M、0.04M均可。苯甲酸、山梨酸、糖精钠在液相上的出峰次序很有特点。在流动相5：95及以下比例时，次序是苯甲酸、山梨酸、糖精钠（注意一下[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]的出峰次序），逐步增大甲醇含量，苯甲酸、山梨酸的出峰时间逐步提前，而糖精钠是出峰时间迅速提前，随着甲醇比例的逐步增大（15％－30％），原先在最后出峰的糖精钠集次和前面的山梨酸、山梨酸重叠，并位于最前面，其次序变为糖精钠、苯甲酸、山梨酸。再提高甲醇浓度，次序不变。用高甲醇比例条件（甲醇15％以上）做出的三种标准物质色谱图峰形较好，出峰时间也较快，但做实际样品时干扰较大；因此建议尽量使用低甲醇比例条件（甲醇5％左右）。6 苯甲酸、山梨酸超标时的判断苯甲酸、山梨酸超标的样品较多，由于它们往往牵涉到一批货物是否合格，因此责任重大。由于该方法定量较准确，因此遇到超标样品时应将精力集中于定性方面。如同时有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]和液相色谱仪，建议用这两种性质相差较大的仪器进行对照，如定量结果差不多，即可确认。如只有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]，应利用其在填充柱保留时间稳定的特性，同时进五针标准液和五针样品液（注：峰面积应差不多，否则需对一方按比例稀释），如标准和样品液的保留时间相差时间超过1 秒，可认为不是。（如进针的技术不过关，请不要做此实验）如用液相色谱仪，当检测器为二极管阵列检测器时，根据保留时间和紫外吸收图结合定性，当只有紫外检测器时，改检测波长为220nm，230nm，250nm，重复进标准和样品液，由标准和样品在不同波长的峰高比值看是否吻合。如有微生物检测手段，可加样品于有菌培养基中，观察有无抑菌现象，如无抑菌现象则无防腐剂。不是很推荐用双柱法，因为有时柱极性相差不大，反而会影响最终判断。7 糖精钠超标时的判断当检测糖精钠超标时，除了采用二极管阵列检测器或波长验证，还可以利用糖精钠的荧光特性，用荧光检测器进行验证。荧光条件是激发波长为277nm，荧光波长为410nm。只有当用荧光检测器和用紫外检测器做出的定量结果相差不多，才可以判断为是。还有一个简单粗糙、却也行之有效的验证方法，即感官法。糖精钠是一种甜味剂，用舌头可以感觉到它的甜味，如果含量超标，一定能尝出来。8 标准溶液的配制贮存问题苯甲酸、山梨酸、糖精钠的标准溶液如用水、乙醇作基体，一般几个月后会严重降解，。如用甲醇溶解再放于冰箱冷冻层，可保持稳定一两年。因此推荐用甲醇作溶剂。在配制标准溶液时，初学者常犯的错误多为用甲醇溶解苯甲酸钠，用水溶解苯甲酸，晃了半天才发现怎么也不没溶解。应该用弱碱性水溶解苯甲酸钠、山梨酸钾，用甲醇溶解苯甲酸、山梨酸。9 苯甲酸、山梨酸的应用范围首先应注意到，并不是所有食品都需要加入防腐剂，只有那些富含营养物质，且需要长时间暴露于空气的才有这样的需要，否则对厂家来说会增加不必要的成本。酱油、酱料、咸菜、浓缩果汁等由于开封后不可能短期内吃完，月饼等需在货架上摆放，如不加防腐剂很快会发霉变质，有添加防腐剂的必要。而利乐装或易拉罐装的饮料由于很快可以食用完毕，即在细菌大量繁殖前己被消化了，因而没有添加的必要。苯甲酸、山梨酸如果要起到防腐的作用，含量就不能太低。如果我们检测样品时只有几个ppm的浓度，有可能是从原料中带来的或由其它添加剂转化来的，而不是厂家出于防腐目的加入的。苯甲酸、山梨酸也只是防腐剂中的两种。并不是所有需要加入防腐剂的食品都会添加苯甲酸、山梨酸，有可能使用防霉剂或其它种类的防腐剂，或自行规定需冷藏（如某些月饼）。因此有些食品检测不出也属正常。另外，我们应该比较清楚地理解苯甲酸与苯甲酸钠、山梨酸与山梨酸钾之间的关系。在食品中添加防腐剂通常以苯甲酸钠、山梨酸钾形式加入，它们不易汽化，易溶于水，但不溶于甲醇等有机试剂；而苯甲酸、山梨酸易汽化，易溶于有机试剂，但
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-1996，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-1996，即可开展实验。苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。2 样品前处理的注意事项 GB/T5009.28-1996和GB/T5009.29-1996 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。GB/T5009.29-1996使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。具体操作步骤如下：取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。3 检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。原因如下：3.1 液相色谱法所用的样品处理方法远比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法简单，且不需使用有机试剂。尤其对于高油脂样品（如月饼）若采用碱化－排油－酸化－提取－挥干－溶解等步骤，再上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]检测，工作量大，试剂毒性也大，且结果由于处理步骤太多而难以保证准确。3.2 用液相色谱法还可同时完成糖精钠项目的检测，而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法只能做苯甲酸、山梨酸的检测。3.3 液相色谱仪所用的紫外检测器比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的氢火焰检测器灵敏，可进行更低含量的检测。如用二极管阵列检测器，还可辅助定性，这更是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]氢火焰检测器不可比拟的。4 选用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]时的注意事项 GB/T5009.29-1996所用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱为 5％DEGS＋1％磷酸固定液的60－80目 Chromosorb W AW，。这种柱有性能稳定、重复性好、保留时间稳定的优点，但同时也有稳定时间较长的缺点。该柱的适用的样品提取溶剂为石油醚或乙醚，如果用甲醇或乙醇，则溶剂峰拖尾效应较大，对山梨酸的测定有影响。如用毛细管柱，能取得更好的峰形和灵敏度，但其稳定性及特异性不如填充柱。一般可用非极性毛细管柱，0.530mm内径，10－15m长度。色谱条件可能需用程序升温。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上的出峰次序为先出山梨酸，后出苯甲酸。糖精钠不能直接用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行检测，必须衍生化后才能汽化进样。5 选用液相色谱仪的注意事项 按照GB/T5009.29-1996，流动相应为5：95的甲醇：0.02M醋酸铵溶液，但是这个比例仅是个参考值，我们在工作中应根据实际情况进行调节。 为什么用甲醇溶液？甲醇有两个作用，（1）防腐，液相色谱柱最怕流动相长菌，尤其霉菌。甲醇可使蛋白质变性，有杀菌作用。（2）调节流动相极性，这是最重要的一点。甲醇在溶液中比例的较小变化都会使苯甲酸、山梨酸、糖精钠的保留时间发生明显的改变，因此可以通过改变流动相中甲醇含量，以调节这几个组分的出峰和分离，以得到较理想的色谱图。5：95是一个通用的比例，如减少甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间变慢，扩散效应增大，峰形较差，但这三组分的分离情况较好。如增加甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间提前，扩散效应较小，峰形尖锐，但这三组分的分离情况可能受影响，产生重叠。在选择条件时，只能通过实验手段，如配制3：97，4：96，5：95，6：96，7：93的流动相，综合考虑分离效果和分离时间选择最佳比例。不同柱的最适比例不同，举例来说，色谱科公司的液相柱最适比例为4：96，而岛津公司液相柱的最佳比例为7：93。就是同一根柱，一年前和一年后的极性也会有变化，需调节溶液配比。为什么使用0.02M醋酸铵溶液？加入醋酸铵是为了调节离子强度，使待测物的峰形不致于变坏。如果单独检测苯甲酸和糖精钠，加不加醋酸铵没有什么关系，都可以得到较好的峰形；但是检测山梨酸时流动相一定要加醋酸铵，否则得不到一个完整的色谱峰，峰形呈破裂状。醋酸铵溶液浓度不需严格控制，0.01M、0.02M、0.04M均可。苯甲酸、山梨酸、糖精钠在液相上的出峰次序很有特点。在流动相5：95及以下比例时，次序是苯甲酸、山梨酸、糖精钠（注意一下[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]的出峰次序），逐步增大甲醇含量，苯甲酸、山梨酸的出峰时间逐步提前，而糖精钠是出峰时间迅速提前，随着甲醇比例的逐步增大（15％－30％），原先在最后出峰的糖精钠集次和前面的山梨酸、山梨酸重叠，并位于最前面，其次序变为糖精钠、苯甲酸、山梨酸。再提高甲醇浓度，次序不变。用高甲醇比例条件（甲醇15％以上）做出的三种标准物质色谱图峰形较好，出峰时间也较快，但做实际样品时干扰较大；因此建议尽量使用低甲醇比例条件（甲醇5％左右）。6 苯甲酸、山梨酸超标时的判断苯甲酸、山梨酸超标的样品较多，由于它们往往牵涉到一批货物是否合格，因此责任重大。由于该方法定量较准确，因此遇到超标样品时应将精力集中于定性方面。如同时有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]和液相色谱仪，建议用这两种性质相差较大的仪器进行对照，如定量结果差不多，即可确认。如只有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]，应利用其在填充柱保留时间稳定的特性，同时进五针标准液和五针样品液（注：峰面积应差不多，否则需对一方按比例稀释），如标准和样品液的保留时间相差时间超过1 秒，可认为不是。（如进针的技术不过关，请不要做此实验）如用液相色谱仪，当检测器为二极管阵列检测器时，根据保留时间和紫外吸收图结合定性，当只有紫外检测器时，改检测波长为220nm，230nm，250nm，重复进标准和样品液，由标准和样品在不同波长的峰高比值看是否吻合。如有微生物检测手段，可加样品于有菌培养基中，观察有无抑菌现象，如无抑菌现象则无防腐剂。不是很推荐用双柱法，因为有时柱极性相差不大，反而会影响最终判断。7 糖精钠超标时的判断当检测糖精钠超标时，除了采用二极管阵列检测器或波长验证，还可以利用糖精钠的荧光特性，用荧光检测器进行验证。荧光条件是激发波长为277nm，荧光波长为410nm。只有当用荧光检测器和用紫外检测器做出的定量结果相差不多，才可以判断为是。还有一个简单粗糙、却也行之有效的验证方法，即感官法。糖精钠是一种甜味剂，用舌头可以感觉到它的甜味，如果含量超标，一定能尝出来。8 标准溶液的配制贮存问题苯甲酸、山梨酸、糖精钠的标准溶液如用水、乙醇作基体，一般几个月后会严重降解，。如用甲醇溶解再放于冰箱冷冻层，可保持稳定一两年。因此推荐用甲醇作溶剂。在配制标准溶液时，初学者常犯的错误多为用甲醇溶解苯甲酸钠，用水溶解苯甲酸，晃了半天才发现怎么也不没溶解。应该用弱碱性水溶解苯甲酸钠、山梨酸钾，用甲醇溶解苯甲酸、山梨酸。9 苯甲酸、山梨酸的应用范围首先应注意到，并不是所有食品都需要加入防腐剂，只有那些富含营养物质，且需要长时间暴露于空气的才有这样的需要，否则对厂家来说会增加不必要的成本。酱油、酱料、咸菜、浓缩果汁等由于开封后不可能短期内吃完，月饼等需在货架上摆放，如不加防腐剂很快会发霉变质，有添加防腐剂的必要。而利乐装或易拉罐装的饮料由于很快可以食用完毕，即在细菌大量繁殖前己被消化了，因而没有添加的必要。苯甲酸、山梨酸如果要起到防腐的作用，含量就不能太低。如果我们检测样品时只有几个ppm的浓度，有可能是从原料中带来的或由其它添加剂转化来的，而不是厂家出于防腐目的加入的。苯甲酸、山梨酸也只是防腐剂中的两种。并不是所有需要加入防腐剂的食品都会添加苯甲酸、山梨酸，有可能使用防霉剂或其它种类的防腐剂，或自行规定需冷藏（如某些月饼）。因此有些食品检测不出也属正常。另外，我们应
![[原创]——食品生活：奶茶饮料中糖精钠的测定](https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/04/201804290323580538_7909_2166779_3.jpg)
奶茶饮料中糖精钠的测定奶茶饮料中糖精钠的测定检验依据：GB 5009.28-2016；仪器：Waters液相色谱仪（配PDA检测器）；色谱柱：月旭色谱柱：Ultimate Plus C18；4.6mm×250mm, 5um Lot Number: 26007 Serial Number:P18171620样品处理及仪器条件：[img=,690,127]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/04/201804290302311201_1590_2166779_3.png!w690x127.jpg[/img]样品质量：2.00克，定容体积：50mL空白、标准溶液、样品堆栈检测色谱图：[img=,690,451]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/04/201804290309092599_5095_2166779_3.png!w690x451.jpg[/img]混合标液中糖精钠的3D（210~400nm）扫描光谱图：[img=,690,340]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/04/201804290312561166_8740_2166779_3.png!w690x340.jpg[/img]样品糖精钠3D光谱图：[img=,690,338]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/04/201804290315165482_6617_2166779_3.png!w690x338.jpg[/img][img=,452,153]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/04/201804290315256505_1029_2166779_3.png!w452x153.jpg[/img]与糖精钠光谱库会相匹配，样品中的糖精钠经PDA光谱扫描确认后是糖精钠。而另一样品的糖精钠经PDA检测后确认不是糖精钠。[img=,684,520]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/04/201804290323580538_7909_2166779_3.jpg!w684x520.jpg[/img]而这个样品的糖精钠与糖精钠标准溶液谱库不相匹配。对于有检出糖精钠的奶茶饮料：查GB2760-2014中的饮料/茶饮料为不得使用，由于是奶茶饮料，其配方中含有熟豆制品（其产品标签明示的），此时就要考虑由其带入的了（即GB 2760-2014中的3.4带入原则）：
[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=72339]反相高效液相色谱法同时测定饮料中安赛蜜 苯甲酸 山梨酸 糖精钠[/url]
高效液相色谱法测定白酒中糖精钠的方法探讨摘要 本文主要参照GB5009.28-2016标准从三个方面：改变流动相配比、改变色谱柱、改变液相色谱的检测器，运用高效液相色谱法将白酒特别是酱香型白酒中存在的干扰糖精钠检测的物质：糠醇、糠醛得以分离，以达到对白酒中糖精钠准确测定的目的。关键词 白酒；参照GB 5009.28-2016标准；糖精钠；糠醇；糠醛[b]1 前言[/b]白酒是深受人们喜爱的一种饮料，近年来有一些不法商家为了改善白酒的口感，会人为的添加糖精钠等非法甜味剂，糖精钠在GB2760-2014[sup][/sup]中明确规定为不得使用。因此，国抽、省抽等监督指令性任务中有要求检测白酒中是否有违规添加糖精钠的项目。糖精钠的检测依据为GB5009.28-2016[sup][/sup],依此法检测白酒这类样品时，常常会在糖精钠标准溶液的出峰时间附近出现“假的色谱峰”而液相色谱法是根据保留时间进行定性的，由此造成误判。由于白酒为粮食类原料经微生物发酵、酿造而成，成分复杂。有的酒中含有香味物质：糠醛、糠醇，特别是酱香型白酒[sup][/sup]。糠醛、糠醇与糖精钠结构相近，均为带呋喃环类的物质，极有可能产生干扰糖精钠定性的色谱峰。下面通过三个方面：改变流动相配比、改变色谱柱、改变液相色谱的检测器来将糠醛、糠醇与糖精钠得以有效的分离，并通过PDA检测器来验证白酒中确实存在着糠醇、糠醛，从而提高糖精钠检测结果的正确性。[b]2 实验方法与材料2.1 标准物质、样品[/b] 糖精钠标准溶液浓度：1.00mg/mL，（中国计量科学院，证书号： GBW（E）10080）；糠醛、糠醇，分析纯，购于安谱公司；色谱纯甲醇、优级纯乙酸铵，购于国药集团；密理博超纯水：自制；酒样品（监督抽样，有清香型，浓香型，酱香型，兼香型白酒）[b]2.2 仪器及设备[/b]电子天平：AL-204； 恒温水浴锅：上海精密科学仪器有限公司； Waters e2695 HPLC（配紫外检测器及PDA检测器）；色谱柱A：ZORBAX SB-C18：4.6mm×250mm， 5um；色谱柱B：Sunfire C18：4.6mm×250mm， 5um[b]2.3 实验方法 [/b]酒样经水浴加热去除酒精度后，补足蒸发去除的水份，然后直接进色谱分析。色谱条件A：依GB 5009.28-2016 《食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定》：液相色谱条件：流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸铵=5：95； 色谱柱A ；流速：1.0mL/min；进样量：10uL；检测器：紫外检测器，230nm；色谱条件B：将方法A中的流动相：甲醇：0.02mol/L乙酸铵=5：95调整为甲醇：0.02mol/L乙酸铵=3：97；其余条件一样； 色谱条件C：将方法A中的色谱柱A改为色谱柱B，其余条件一样； 色谱条件D：将方法C中的紫外检测器改为PDA检测器，其余条件一样，主是是对糠醛、糠醇、糖精钠进行光谱扫描，看它们的光谱图是否相似，以利于对它们进行准确定性；[img=,690,223]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011345_01_2166779_3.png[/img][img=,690,307]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011345_02_2166779_3.png[/img]图2 糠醇、糠醛、糖精钠混合标准溶液色谱图（色谱条件A）[img=,690,253]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011351_01_2166779_3.png[/img][img=,690,265]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011351_02_2166779_3.png[/img][img=,690,254]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011351_03_2166779_3.png[/img][img=,690,276]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011351_04_2166779_3.png[/img][img=,690,253]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011351_05_2166779_3.png[/img][img=,690,267]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011351_06_2166779_3.png[/img] 图3 酱香型白酒测定色谱图（色谱条件A）[b] 从图2可以看出：糖精钠、糠醛、糠醇在色谱条件A下，它们的保留时间非常接近，前言中也提到白酒为粮食类经微生物发酵酿造、蒸馏而成的，成分复杂，极有可能产生微量的糠醇、糠醛干扰糖精钠的测定，因此本文通过改变色谱条件，尝试着将糠醇、糠醛、糖精钠得以有效分离，以达到对白酒中糖精钠的准确测定。3.2 改变色谱条件 [/b]在现有的实验条件下，采用色谱条件B，通过改变流动相中的甲醇比例，来尝试糠醇、糠醛、糖精钠能否达到基线分离，由于甲醇在流动相中的比例越高的话，糠醇、糠醛、糖精钠在C18柱反相色谱中应该是出峰时间更快的，因此为了尽量使三者分离，应该减少流动相中的甲醇比例，采用色谱柱耐受甲醇的极限比例：甲醇：0.02mol/L乙酸铵=3：97进行实验，结果见图4~5。[img=,690,289]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011354_01_2166779_3.png[/img][img=,690,288]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011354_02_2166779_3.png[/img][img=,690,289]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011354_03_2166779_3.png[/img][img=,690,291]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011354_04_2166779_3.png[/img] 图4 糠醇、糠醛、糖精钠混合标准溶液色谱图（甲醇：0.02mol/L乙酸铵 = 8：92 ）[img=,690,253]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011356_01_2166779_3.png[/img][img=,690,227]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011356_02_2166779_3.png[/img] 图5 糠醇、糠醛、糖精钠混合标准溶液色谱图（色谱条件B即甲醇：0.02mol/L乙酸铵 = 3：97 ）从图5可以看出：该方法虽然也能将糠醇、糠醛、糖精钠三者实现基线分离，由于流动相中缓冲盐的比例高，运行时间长了，会极大地缩短色谱柱的使用寿命，为此根据实验室的条件， 尝试更换色谱柱及检测器，根据GB 5009.28-2016 及色谱条件C、D进行实验，其结果见图6及图7。[img=,649,416]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011358_01_2166779_3.png[/img][img=,672,538]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011358_02_2166779_3.png[/img][img=,286,129]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707011359_03_2166779_3.png[/img] 图7 酱香型白酒样品的测定结果从图6可以看出：在色谱条件C下糠醇的出峰时间为18.15min、 糠醛的出峰时间为19.207min、而糖精钠的出峰时间则为24.875min；因此比较色谱条件A及色谱条件C，色谱柱A与色谱柱B同样为C18柱，但是由于它们之间填料的差异，虽然再同样的流动相下，还是会造成各化合物在色谱柱中有不同行为的。通过PDA检测器对三者进行光谱扫描，它们三者的光谱图也有明显的区别，因此在色谱条件C或D下能对白酒中的糖精钠进行准确定性，从图7可以看出白酒中的确存在着不同量的糠醇、糠醛这两种物质，干扰着白酒的糖精钠的测定。4 结论 本文主要参照GB 5009.28-2016标准从三个方面：改变流动相配比、改变色谱柱、改变液相色谱的检测器，运用高效液相色谱法将白酒特别是酱香型白酒中存在的干扰糖精钠检测的物质：糠醇、糠醛得以分离，以达到对白酒中糖精钠准确测定的目的。参考文献 GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准[s] . GB 5009.28-2016 食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定[s] . 许汉英. 白酒中糠醛含量与香型之间关系的研究. 酿酒. 2002, 29 (5) : 37—39.[/s][/s]
[align=center][/align][align=left][font='calibri'][size=13px]CNS[/size][/font][font='calibri'][size=13px]-[/size][/font][font='calibri'][size=13px]19.001糖精钠[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=18px]李一辰[/size][/font][/align][align=left][/align][align=center][font='宋体'][size=18px]二〇[/size][/font][font='宋体'][size=18px]二一[/size][/font][font='宋体'][size=18px]年[/size][/font][font='宋体'][size=18px]七[/size][/font][font='宋体'][size=18px]月[/size][/font][font='宋体'][size=18px]二十二[/size][/font][font='宋体'][size=18px]日[/size][/font][/align]1、 [size=18px]概述及理化性质[/size]糖精钠（Saccharin Sodium），学名邻苯甲酰磺酰亚胺钠，化学式C[font='calibri'][size=13px]7[/size][/font]H[font='calibri'][size=13px]4[/size][/font]NO[font='calibri'][size=13px]3[/size][/font]SNa，结构式见右图。糖精钠是糖精的钠盐，又被称可溶性糖精，颜色呈无色或略带白色，无臭或有微弱香气，呈结晶性粉末，干燥样品熔点为226℃-230℃，易溶于水，略溶于乙醇，水溶液呈微碱性，其在水溶液中的热稳定性优于糖精。因其甜度较高，约为蔗糖的400倍，故而应用较为广泛。糖精钠于1879年开发，是最早应用的人工合成非营养型甜味剂。1879年，约翰霍普金斯大学的研究生康斯坦丁法尔伯格正在进行甲苯系列衍生物合成的研究，他在午餐的时候偶然间发现手中的面包特别的甜，于是对实验过程中合成的一系列甲苯化合物进行了分析研究，最后发现了糖精。1886年，康斯坦丁 法尔伯格迁居到德国，进入一家从煤焦油中提炼糖精的工厂进行工作研究和产品推广，此后糖精作为人工甜味剂被人们广泛使用，自此正式进入人类的生活之中。[font='calibri'][size=13px][1][/size][/font]在甜度方面，糖精钠分解出来的阴离子有强甜味，而在分子状态下没有甜味，反感到苦味，故糖精钠的稀溶液显强甜味，浓度高时显苦味。在酸性条件下，加热会使糖精钠分解成带有苦味的[font='arial'][size=13px][color=#333333]邻氨基磺酰苯甲酸[/color][/size][/font]，使溶液甜味消失；在弱碱性条件下，加热会使糖精钠分解为邻磺酰胺苯甲酸，但溶液甜味不变。2、 [size=18px]糖精钠的应用[/size]1. [size=16px]代糖[/size]糖精钠[font='arial'][size=13px][color=#333333]是最早应用的人工合成非营养型甜味剂[/color][/size][/font][font='arial'][size=13px][color=#333333]，[/color][/size][/font][font='arial'][size=13px][color=#333333]只提供甜味，不提供热量，只要使用很少的量即可获得目标的甜味，被广泛使用于食品及医药生产中。糖精钠的成本在合成甜味剂中相对很低，某些非法商家可能会在生产时超量投入，以代替天然甜味剂，以牟取更大的利润。这种行为侵犯了消费者的合法权益，是不可取的。[/color][/size][/font]2. [size=16px]电镀光亮剂[/size][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262027054694_9905_1608728_3.png[/img]随着国民经济的发展和人民生活水平的提高，要求电镀镀层兼具功能性和装饰性，向镀液中加入一定成分的光亮剂，能有效提高镀层的光泽度，改善镀层的装饰效果。糖精钠作为最常用的电镀镍基合金镀层的初级光亮剂，不仅能提高镀层的平整性和光泽度，还能提高镀层的耐蚀性。这是因为糖精钠的加入降低了镀层沉积过程中形成的内应力，使镀层表面裂纹减少；同时，随着糖精钠的质量浓度的增加，阴极极化作用增强，阴极过电位提高。阴极过电位越高，形核率越大，电结晶越细密。分析糖精钠的质量浓度对阴极极化曲线的影响（如右图），可知：向镀液中加入糖精钠，阴极极化曲线负移，并且随着糖精钠的质量浓度的增加，阴极极化曲线负移的程度增大，阴极极化作用增强，沉积过电位提高。沉积过程中，糖精钠微粒吸附在阴极表面，阻碍金属离子还原沉积。同时，部分糖精钠还能与金属离子发生配位反应，使金属离子的放电变得困难，阴极极化作用增强，有利于形成致密、光亮的镀层。分析糖精钠的质量浓度对镍基镀层的沉积速率及阴极电流效率的影响（如下右图）。可知：随着糖精钠的质量浓度的增加，镀层的沉积速率和阴极电流效率均降低。一方面，糖精钠微粒选择性地吸附在阴极表面，减小了反应的有效表面积，起到封闭作[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262027056568_157_1608728_3.png[/img]用，抑制金属离子在阴极的还原沉积；另一方面，增加糖精钠的质量浓度，使阴极极化增强，析氢副反应加剧，析氢消耗的电能增大。[font='calibri'][size=13px][2][/size][/font]3. [size=16px]其他[/size]因为糖精钠热量为0，不易被细胞吸收，但可以随大小便排出体外，所以也被用作血液循环测定剂等用途。3、 [size=18px]糖精钠的限量标准[/size]糖精钠作为人工合成甜味剂，对于人体的影响无法忽视，并认为由于会改变尿液理化性质，可能存在致癌风险。所以各国对糖精钠的使用进行了限量。根据GB1886.18-2015，我国对糖精钠的使用进行了如下限制。[font='calibri'][size=13px][3][/size][/font][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262027057164_3811_1608728_3.png[/img][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262027058052_2948_1608728_3.png[/img][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=center][/align][align=left][/align][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262027059384_1653_1608728_3.png[/img]使用五种人工甜味剂（糖精钠、三氯蔗糖、安赛蜜、甜蜜素、阿斯巴甜）处理Caco-2细胞 24 h后，测定细胞的增殖活力削减程度，结果如下图。由图可知，五种甜味剂的细胞抑制率均表现出剂量正相关性，且糖精钠对Caco-2细胞的活力影响更大，说明糖精钠的使用确实会对肠胃造成一定的影响，对糖精钠使用的限量具有其必要性。[font='calibri'][size=13px][4][/size][/font]4、 [size=18px]糖精钠的检测方法[/size]1. [size=16px]液相色谱-质谱连用法[/size]根据国标GB5009.28-2016，可以使用液相色谱法，通过外标法对糖精钠的含量进行分析，分析步骤如下：1）标准溶液配制糖精钠(以糖精计)标准储备溶液(1000mg/L):准确称取糖精钠0.117g(精确到0.0001g),用水溶解并定容至100mL。于4℃贮存,保存期为6个月。苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)标准中间溶液(200mg/L):准确吸取糖精钠标准储备溶液10.0mL于50mL容量瓶中,用水定容。于4℃贮存,保存期为3个月。糖精钠(以糖精计)标准系列工作溶液:准确吸取糖精钠标准中间溶液0mL、0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL和10.0mL,用水定容至10mL,配制成质量浓度分别为 0 mg/L、1.00 mg/L、5.00 mg/L、10.0 mg/L、20.0 mg/L、 50.0mg/L、100mg/L和200mg/L的标准系列工作溶液。临用现配。2） 材料：水相微孔滤膜:0.22μm； 塑料离心管:50mL。3） 仪器和设备：高效液相色谱仪:配紫外检测器 ；分析天平:感量为0.001g和 0.0001g； 涡旋振荡器 ；离心机:转速8000r/min ；匀浆机 ；恒温水浴锅 ；超声波发生器。[align=left][font='fzhtk--gbk1-0'][size=12px][color=#000000]试样制备[/color][/size][/font][/align]4） 试样制备取多个预包装的饮料、液态奶等均匀样品直接混合 非均匀的液态、半固态样品用组织匀浆机匀浆 固体样品用研磨机充分粉碎并搅拌均匀 奶酪、黄油、巧克力等采用50 ℃~60 ℃加热熔融,并趁热充分搅拌均匀。取其中的200g装入玻璃容器中,密封,液体试样于4 ℃保存,其他试样于-18 ℃保存。5）试样提取[font='宋体']①[/font]一般性试样准确称取约2g(精确到0.001g)试样于50mL具塞离心管中,加水约25mL,涡旋混匀,于50℃水浴超声20min,冷却至室温后加亚铁氰化钾溶液2mL和乙酸锌溶液2mL,混匀,于8000r/min离心 5min,将水相转移至50mL容量瓶中,于残渣中加水20mL,涡旋混匀后超声5min,于8000r/min离 心5min,将水相转移到同一50mL容量瓶中,并用水定容至刻度,混匀。取适量上清液过0.22μm 滤膜,待液相色谱测定。[font='宋体']②[/font]含胶基的果冻、糖果等试样准确称取约2g(精确到0.001g)试样于50mL具塞离心管中,加水约25mL,涡旋混匀,于70℃水浴加热溶解试样,于50 ℃水浴超声20min,之后的操作同[font='宋体']①[/font]。[font='宋体']③油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂试样[/font][font='宋体']准确称取约2g(精确到0.001g)试样于50mL具塞离心管中,加正己烷10mL,于60℃水浴加热约5min,并不时轻摇以溶解脂肪,然后加氨水溶液(1+99)25mL,乙醇1mL,涡旋混匀,于50 ℃水浴 超声20min,冷却至室温后,加亚铁氰化钾溶液2mL和乙酸锌溶液2mL,混匀,于8000r/min离心 5min,弃去有机相,水相转移至50mL容量瓶中,残渣同①再提取一次后测定。[/font]6）[font='宋体']仪器参考条件[/font][font='宋体']①色谱柱:C18柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或等效色谱柱。 [/font][font='宋体']②流动相:甲醇+乙酸铵溶液=5+95。[/font][font='宋体']③流速:1mL/min。[/font][font='宋体']④检测波长:230nm。[/font][font='宋体']⑤进样量:10μL。[/font][font='宋体']注:当存在干扰峰或需要辅助定性时,可以采用加入甲酸的流动相来测定,如流动相:甲醇+甲酸-乙酸铵溶液= 8+92。[/font]7） 标准曲线的制作将标准系列工作溶液分别注入液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以标准系列工作溶液的 质量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。8）试样溶液的测定将试样溶液注入液相色谱仪中,得到峰面积,根据标准曲线得到待测液中糖精钠(以糖精计)的质量浓度。9）分析结果的表述试样中苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)的含量按式（1）计算:[align=left][size=13px]…………………………………………（1）[/size][/align]式中:X ———试样中待测组分含量,单位为克每千克(g/kg) ρ ———由标准曲线得出的试样液中待测物的质量浓度,单位为毫克每升(mg/L) V ———试样定容体积,单位为毫升(mL) m ———试样质量,单位为克(g) 1000———由 mg/kg转换为g/kg的换算因子。结果保留3位有效数字。10） [color=#000000]精密度[/color][color=#000000]在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。[/color]11） [color=#000000]其他[/color][color=#000000]按取样量2g,定容50mL时,糖精钠(以糖精计)的检出限为0.005g/kg,[/color][color=#000000] [/color][color=#000000]定量限为0.01g/kg[/color][color=#000000].[/color][font='calibri'][size=13px][5][/size][/font]2. [size=16px]滴定法[/size]根据国标GB1886.18-2015，可以用滴定法测定样品中糖精钠的含量。1） 试剂和材料冰乙酸；乙酸酐；结晶紫指示液 5g/L 高氯酸标准滴定溶液：c(HClO[font='calibri'][size=13px]4[/size][/font])=0.1mol/L。2） 分析步骤称取约0.3g干燥后的试样，精确至0.0002g，加入20mL冰乙酸和5mL乙酸酐，溶解后，加2滴结晶紫指示液，用高氯酸标准滴定液滴定至溶液呈蓝绿色。3） 结果计算糖精钠含量的质量分数[font='宋体']ω[/font][font='calibri'][size=13px]1[/size][/font][font='calibri']，按式（2）计算：[/font][align=left]………………………………（2）[/align][font='cambria math']式中：[/font][font='cambria math']V——消耗的高氯酸标准滴定溶液的体积，单位为毫升（mL）；[/font][font='cambria math']M——1mL 0.1mol/L高氯酸标准滴定溶液相当于0.02052g的糖精钠（C[/font][font='cambria math'][size=13px]7[/size][/font][font='cambria math']H[/font][font='cambria math'][size=13px]4[/size][/font][font='cambria math']NNaO[/font][font='cambria math'][size=13px]3[/size][/font][font='cambria math']S) [/font][font='cambria math']m——试样的质量，单位为克（g）。[/font][font='cambria math']取两次平行测定结果的算数平均值为测定结果，平行测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的0.2%。[/font]3. [font='cambria math'][size=16px]其他定性检测方法[/size][/font][font='cambria math']根据国标GB1886.18-2015，还有以下定性检测样品中是否含有糖精钠的方法：[/font]1) [font='cambria math']溶液变色反应[/font][font='cambria math']取约20mg试样，加约40mg间苯二酚，混合后加硫酸10滴，用微火加热，至显深绿色，放冷，加10mL水与10mL的氢氧化钠溶液，即成绿色有荧光的溶液。[/font]2) [font='cambria math']焰色反应[/font][font='cambria math']取铂丝，用盐酸溶液湿润后，蘸取试样，在无色火焰中燃烧，火焰即显鲜黄色。[/font]3) [font='cambria math']苯甲酸盐和水杨酸盐试验[/font][font='cambria math']称取0.5g试样，溶于10mL水，加5滴乙酸，再加3滴氯化铁试液，若无沉淀或紫色出现，则试样中不含糖精钠。[/font][font='calibri'][size=13px][6][/size][/font]5、 [size=18px]糖精钠的工业合成[/size]糖精钠生产工艺有多种，按生产采用的主要原料划分可分为甲苯法、苯酐法、邻甲基苯胺法和苯酐二硫化物法，其中甲苯法和苯酐法更常在实际生产中使用，故不详述另两种方法。[size=16px]1.甲苯法[/size]甲苯法是糖精发明者 Fakllerg 最早采用的方法，后人进行了多次改进，成为生产糖精钠较简便的方法，也是我国较早生产糖精钠的方法。其主要生产原料有无水甲苯、氯磺酸、氨水、活性炭、液体氢氧化钠、盐酸、高锰酸钾、亚硫酸钠和碳酸氢钠等，包括氯磺化、胺化、氧化、酸析、中和等化学反应。此法的一种生产方法列举如下：将无水甲苯逐渐加入装有氯磺酸的氯磺化锅中，低温反应，加完后反应 3 h，反应完毕，冷却，使氯磺酸完全分解，放出酸液，然后将所得的磺酰氯油状物进行水洗，于-15～-20℃冷冻12 h，滤出对位异构体结晶，液体即为邻甲苯磺酰氯。在氨化锅内预先放入氨水，加入邻甲苯磺酰氯，在 60℃反应 2 h，冷却，过滤，滤饼经活性炭脱色，在精制锅中分别用盐酸和氢氧化钠溶液精制，得邻甲苯磺酰胺。将邻甲苯磺酰胺、水和液体氢氧化钠加入氧化锅内，于25～35℃将高锰酸钾分次投入，加毕，保温反应 7 h，降温至 25℃，慢慢加入亚硫酸钠溶液至氧化溶液呈无色为止，过滤，含二氧化锰滤饼水洗至无甜味时，合并滤液，加稀盐酸至 pH 为 3，析出未氧化物，过滤，滤液中加入浓盐酸至完全析出沉淀，过滤，滤饼用微酸水洗涤，最后得不溶性糖精。在盛有水的中和锅内交替投入不溶性糖精和碳酸氢钠，加热溶解反应，在反应温度达 70℃时调节反应液至中性，趁热过滤，滤液经结晶、干燥即得糖精钠成品。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262027060753_1124_1608728_3.png[/img]该法的生产流程如下图：该法的主要特点是原料来源广泛、工艺成熟、反应简单、生产技术易于掌握。有采用铬酸氧化邻甲苯磺酰胺的，也有采用电解法将邻甲苯磺酰胺进行电解的，从而达到节约原料、减少污染、降低劳动强度的目的，但总体来讲污染性产物较多且不易治理，且产率相对较低，总收率通常不足40%。[size=16px]2.苯酐法[/size]苯酐法为我国独创，所用原料有苯酐、甲醇、氨水、液体氢氧化钠、液氯、盐酸、硫酸、亚硝酸钠、硫酸铜、液体二氧化硫、甲苯、碳酸氢钠、活性炭等，包括酰胺化、霍夫曼降级、酯化、重氮、置换、氯化、胺化、酸析、中和等化学反应。此法的一种生产方法列举如下：将苯酐和冷冻的氨水依次加入酰胺化反应锅内，升温后缓慢加入氢氧化钠溶液，调 pH=11～12，保温 0.5 h 反应，再排氨3.5 h，得邻甲酰胺苯甲酸钠溶液（简称酰胺化液）。在酯化锅内将酰胺化液降温后，加入冷冻的甲醇和次氯酸钠溶液，在 0℃下反应 45 min 后升温至 30℃，以淀粉碘化钾溶液测试呈无色反应，然后加入适量的亚硫酸氢钠溶液，料液转稀后，再加入热水溶解，静置后分离、过滤，分取油层得邻氨基苯甲酸甲酯（简称甲酯）。先将由水、硫酸与盐酸配制好的混酸置于重氮锅内，冷却后开始缓加甲酯和亚硝酸钠溶液的混合液，重氮温度保持在 25℃以下，反应终点时淀粉碘化钾溶液显淡紫色，产物为邻硫酸（盐酸）重氮苯甲酸甲酯溶液（简称重氮液）。在置换锅内将重氮液降温至 10℃，加入硫酸铜，通二氧化硫进行置换，析出邻亚磺酸苯甲酸甲酯，约 1 h 后用 H 酸测试反应终点应褪色。然后加入甲苯，通氯气氯化，以 2% 联苯胺乙醇溶液测试显深墨绿色为终点，静置分层，有机层为邻甲酸甲酯苯磺酰氯甲苯溶液（简称磺酰氯）。依次将磺酰氯和水加入胺化锅，在 10℃时加氨水胺化，温度可达70℃，pH 值9以上，静置后取下层铵盐液为邻甲酰苯磺酰亚胺铵溶液（简称胺化液）。将胺化液放入酸碱化锅内，加入甲苯和30%的盐酸到 pH 值为 1，酸析后降温至20℃，取甲苯层水洗去氯化铵得不溶性糖精甲苯溶液。将此溶液加热，加入碳酸氢钠中和，调 pH 值至 3.8～4，静置后取水层，加活性炭脱色、过滤，调滤液pH值至7，在70～75℃减压浓缩，趁热过滤，滤液经结晶、干燥得糖精钠。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107262027061659_4297_1608728_3.png[/img]该法的生产流程如下图：该法的主要特点是产品收率高、产品质量稳定且有保证、污染能治理、生产周期比甲苯法短等。生产过程中还可以根据市场需要随时调整生产工艺，采用不用甲苯进行氯化反应或酸析反应，可以得到固体邻甲酸甲酯苯磺酰氯或不溶性糖精，两者都可以用作农药中间体。[size=16px]3.邻甲基苯胺法及苯酐二硫化物法[/size]邻甲基苯胺法采用邻甲基苯胺先在酸性条件下与亚硝酸钠发生重氮反应，然后通二氧化硫进行置换，用液氯进行氯化，从而得到邻甲苯磺酰氯，然后与甲苯法相同，经过胺化、氧化、酸析和中和反应，得到糖精钠。苯酐二硫化物法中苯酐先与氨水和氢氧化钠进行酰胺化反应，之后在碱性条件下与次氯酸钠进行霍夫曼降级反应制得邻氨基苯甲酸，邻氨基苯甲酸与亚硝酸钠在酸性条件下进行重氮反应，接着与二硫化钠进行置换反应得到邻二硫二苯甲酸，邻二硫二苯甲酸与甲醇酯化反应后再被液氯氯化，其后与苯酐法相同，进行胺化、酸析和中和反应，生成糖精钠。上述邻甲基苯胺法受到原料邻甲基苯胺来源限制，原料成本较高，因而不适合于工业化生产。苯酐二硫化物法由于邻二硫二苯甲酸结构上的空间障碍，与甲醇酯化需在高压釜中进行，反应条件较苛刻，对反应设备要求太高，也不适合于工业化生产。[font='calibri'][size=13px][7][/size][/font]6、 [size=18px]参考文献[/size][1] 朱利杰.人工甜味剂糖精钠生产废水处理实验研究.天津工业大学.2020.01[2] 孟庆波,齐海东,卢帅,郭昭,杨海丽.糖精钠对脉冲电沉积Ni-Sn-Mn合金镀层性能的影响[A].电镀与环保,2019，39(1)，40-44[3] GB1886.18-2015[4] 张丽颖.山梨酸钾和糖精钠联合对小鼠小肠细胞生长发育的影响.2020.01[5] GB5009.28-2016[6] GB1886.18-2015[7] 李美菊，蒲帅天，张万青，苏鸿钧.糖精钠生产工艺评述.广东化工,2007,34(1),70-72
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-2003，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2003，即可开展实验。 苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。 2 样品前处理的注意事项 GB/T5009.28-2003和GB/T5009.29-2003 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。 食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。 GB/T5009.29-2003使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。 具体操作步骤如下： 取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。 用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。 3 检测仪器的选择 虽然液相色谱仪操作起来比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。原因如下： 3.1 液相色谱法所用的样品处理方法远比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法简单，且不需使用有机试剂。尤其对于高油脂样品（如月饼）若采用碱化－排油－酸化－提取－挥干－溶解等步骤，再上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]检测，工作量大，试剂毒性也大，且结果由于处理步骤太多而难以保证准确。 3.2 用液相色谱法还可同时完成糖精钠项目的检测，而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法只能做苯甲酸、山梨酸的检测。 3.3 液相色谱仪所用的紫外检测器比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的氢火焰检测器灵敏，可进行更低含量的检测。如用二极管阵列检测器，还可辅助定性，这更是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]氢火焰检测器不可比拟的。 4 选用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]时的注意事项 GB/T5009.29所用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱为 5％DEGS＋1％磷酸固定液的60－80目 Chromosorb W AW，。这种柱有性能稳定、重复性好、保留时间稳定的优点，但同时也有稳定时间较长的缺点。 该柱的适用的样品提取溶剂为石油醚或乙醚，如果用甲醇或乙醇，则溶剂峰拖尾效应较大，对山梨酸的测定有影响。 如用毛细管柱，能取得更好的峰形和灵敏度，但其稳定性及特异性不如填充柱。一般可用非极性毛细管柱，0.530mm内径，10－15m长度。色谱条件可能需用程序升温。 在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上的出峰次序为先出山梨酸，后出苯甲酸。 糖精钠不能直接用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行检测，必须衍生化后才能汽化进样。 5 选用液相色谱仪的注意事项 按照GB/T5009.29，流动相应为5：95的甲醇：0.02M醋酸铵溶液，但是这个比例仅是个参考值，我们在工作中应根据实际情况进行调节。 为什么用甲醇溶液？甲醇有两个作用，（1）防腐，液相色谱柱最怕流动相长菌，尤其霉菌。甲醇可使蛋白质变性，有杀菌作用。（2）调节流动相极性，这是最重要的一点。甲醇在溶液中比例的较小变化都会使苯甲酸、山梨酸、糖精钠的保留时间发生明显的改变，因此可以通过改变流动相中甲醇含量，以调节这几个组分的出峰和分离，以得到较理想的色谱图。 5：95是一个通用的比例，如减少甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间变慢，扩散效应增大，峰形较差，但这三组分的分离情况较好。如增加甲醇含量，苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间提前，扩散效应较小，峰形尖锐，但这三组分的分离情况可能受影响，产生重叠。在选择条件时，只能通过实验手段，如配制3：97，4：96，5：95，6：96，7：93的流动相，综合考虑分离效果和分离时间选择最佳比例。 不同柱的最适比例不同，举例来说，色谱科公司的液相柱最适比例为4：96，而岛津公司液相柱的最佳比例为7：93。就是同一根柱，一年前和一年后的极性也会有变化，需调节溶液配比。 为什么使用0.02M醋酸铵溶液？加入醋酸铵是为了调节离子强度，使待测物的峰形不致于变坏。如果单独检测苯甲酸和糖精钠，加不加醋酸铵没有什么关系，都可以得到较好的峰形；但是检测山梨酸时流动相一定要加醋酸铵，否则得不到一个完整的色谱峰，峰形呈破裂状。 醋酸铵溶液浓度不需严格控制，0.01M、0.02M、0.04M均可。
分析白酒中的添加剂，还没有可依据的国家方法标准，试验以下方法，请大家讨论方法的可行性分析白酒中的添加剂（阿斯巴甜、安赛蜜、糖精钠）安捷伦1120液相色谱柱子：C18柱柱温：40℃流动相：甲醇：水=30:70流速：0.8mL/分钟波长：214nm通过试验，此方法对三种添加剂都有相应，分离度开始不错，峰型也可，长时间后不是很理想，保留时间总是在变，峰型越来越馒头状，峰上有怪峰。请教大侠们怎么样能提高分离度，改变峰型，稳定保留时间？[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/04/201004161741_212748_1608710_3.gif[/img]
高效液相色谱仪测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠防腐剂是指天然或合成的化学成分，用于加入食品、药品、颜料、生物标本等，以延迟微生物生长或化学变化引起的腐败。它能抑制微生物的生长繁殖，防止食品腐败变质而延长保质期。防腐剂的防腐原理，大致有如下3种：一是干扰微生物的酶系，破坏其正常的新陈代谢，抑制酶的活性。二是使微生物的蛋白质凝固和变性，干扰其生存和繁殖。三是改变细胞浆膜的渗透性，抑制其体内的酶类和代谢产物产物的排除，导致其失活。 一些厂商为了降低成本赚取暴利，在饮料、果脯甚至专供儿童消费的果冻等食品中，普遍添加对人体有害无益的糖精或糖精钠来代替蔗糖，但在食品标签上却不作任何明示，或冠以“蛋白糖”、“甜宝”等美名掩盖添加剂的事实，损害了消费者的身体健康，严重侵犯了消费者的知情权，已引起了社会各界和广大消费者的密切关注。 现介绍下HPLC 法同时测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠，优点明显，可做参考。具体操作如下：仪器与试剂 仪器 高效液相色谱仪，紫外检测器，超声波，溶剂过滤器，在线脱气机等。 试剂 1. 甲醇（CH3OH） 色谱纯； 2. 乙酸铵（NH4Ac） A.R.； 3. 苯甲酸标准储备液（1.0mg/mL）国家标准物质中心； 4. 山梨酸标准储备液（1.0mg/mL）国家标准物质中心； 5. 糖精钠标准储备液（1.0mg/mL）国家标准物质中心； 6. 纯水 。检测条件 检测器 UV-Vis，λ=230nm； 色谱柱 Welch （4.6mm X 250 mm，5μm）， 流动相 0.02mol/L 乙酸铵-甲醇=（95+5）； 流速 1.0mL/min； 柱 温 ：室温。[align=lef
附件请参考。建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定饮料中安赛蜜、柠檬黄、苯甲酸、新红、苋菜红、糖精钠、靛蓝、山梨酸、胭脂红、日落黄、诱惑红、阿斯巴甜、酸性红、亮蓝、喹啉黄、赤藓红、专利蓝ⅴ共17种食品添加剂的方法。
食品添加剂是指为改善食品色、香、味以及为防腐和加工工艺的需要而加入到食品中的化学合成物质或天然物质。它不是食品的天然成份，所以长期大量摄取会呈现毒性作用，对人体消化道造成刺激，严重者还会损伤肝脏，所以在使用中要严格控制其使用量。 安赛蜜、柠檬黄、苯甲酸、新红、苋菜红、糖精钠、靛蓝、山梨酸、胭脂红、日落黄、诱惑红、阿斯巴甜、酸性红、亮蓝、喹啉黄、赤藓红、专利蓝ⅴ17种食品添加剂的测定，目前国标中尚无同时测定方法。因此对同一样品中不同组分的检测需重复处理及进样分析，检测效率低；若使用普通液相色谱法对以上17种食品添加剂进行同时分析，分析时间显著增长，效率较低。 迪马科技用户建立的超高效液相色谱法同时测定饮料中17种食品添加剂方法，分析时间短，分析效率高，可为食品质量监督提供技术支持。样品前处理：碳酸饮料：称取经超声除气后的样品5.00~10.00 g(精确至0.001 g)于50 mL比色管中，加适量水，超声10 min，加水定容至刻度；经高速离心机(10000 r/min)离心10 min，经0.2 μm滤膜过滤，超高效液相色谱测定。乳饮料：称取5 g左右样品(精确至0.001 g)，于50 mL比色管中，加1 mL乙腈沉淀蛋白后定容至刻度；混匀后经高速离心机(10000 r/min)离心10 min，经0.2 μm的滤膜，超高效液相色谱分析。固体饮料：称取一定量的样品，按样品标注的稀释倍数稀释，移取5.0 mL至50 mL容量瓶中，加水定容，经高速离心机(10000 r/min)离心10 min，过0.2 μm滤膜，超高效液相色谱分析。果蔬汁饮料：称取试样5.00~10.00 g(精确至0.001 g)于50 mL比色管中，加适量水超声10 min后以纯水定容至刻度；经高速离心机(10000 r/min)离心10 min，经0.2 μm滤膜过滤，超高效液相
于近日收到月旭2.7um液相核壳色谱柱开始试用。1.两款色谱柱比较月旭2.7um 4.6*100mm Core-Shell BoltimateTM 另一款 5um 4.6*250mm C18http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191700_667549_1643288_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016042900061565_01_1643288_3.jpg2. 柱效比较：以安赛蜜、糖精钠为指标进行比较安赛蜜、糖精钠是一个食品实验室必要开展的检测项目，目前的检测方法也比较的成熟。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2016042900063264_01_1643288_3.png4.6*250mmC18http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604290006_591875_1643288_3.png月旭柱流动相B 0.02mol/L 乙酸铵+5%甲醇 A 甲醇 梯度洗脱 Time %A %B1 0.00 0.0 0.0 100.02 10.00 0.0 100.03 11.00 95.0 0.0 5.04 19.00 95.0 0.0 5.05 20.00 0.0 100.06 45.00 0.0 100.0两相比较1).柱压的问题：月旭LP-C18 4.6*100mm 2.7μ 这款柱子在1mL/min、乙酸铵-甲醇流动相体系压力表现为170bar ，0.6 mL/min时是135bar，两者峰宽没有明显区别，因此采用0.6 mL/min。2）保留时间 月旭中 安赛蜜在3.4分钟左右出峰 山梨酸7.4分钟普通 苯甲酸在7.6分钟左右出峰 山梨酸18.4分钟3）峰宽 月旭中 0.2分钟左右普通 0.6 分钟左右糕点样品图http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/04/201604290006_591875_1643288_3.png蓝色标准品、红色是糕点样品 样品在安赛蜜处有出峰，但该处属于样品的极性杂质流出区域，很可能是杂质引起误判，因此应当延后保留时间。但这需要将流动相变为纯乙酸铵应可以解决。总结特点：节约仪器时间、节约流动相、改善了分离。
[align=center][b]纳克级激光计数检测器同时测定7种人工甜味剂[/b][/align][b] ——安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖、阿斯巴甜、纽甜、甜菊苷的共同分析[color=#621e0e]使用资生堂色谱产品进行研究、发表的论文有很多，今天资娃就来给大家介绍一篇由中检院老师和资生堂液相色谱技术中心共同发表的论文——[b][color=#621e0e]《纳克级激光计数检测器同时测定 7 种人工甜味剂》。[/color][/b][/color][color=#621e0e][b][/b][/color][color=#621e0e][b][img=,457,622]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709221015_02_2222981_3.jpg[/img] [img=,399,588]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709221022_01_2222981_3.jpg[/img][/b][/color][color=#621e0e][b][/b][/color][/b][align=center]=======================================================================[/align][align=center][b]摘要[/b][/align]目的：建立采用纳克级激光计数检测器(nano quantity analyte detector, NQAD)同时测定7 种人工甜味剂的分析方法。方法：纳克级激光计数检测器系统下，使用CAPCELL PAK C18 MGII (150 mm × 2.0 mm, 5 μm)色谱柱，以20 mmol/L 乙酸铵水溶液(A)-甲醇(B)为流动相进行梯度洗脱，流速0.2 mL/min，柱温40 ℃。结果：7 种常见人工甜味剂得到良好分离与检测，在紫外检测器上难以检出的甜蜜素、三氯蔗糖和甜菊苷3 种成分，在NQAD 检测器上分别得到了0.27、0.17、1.19 μg/mL 的检出限。色谱峰面积精密度RSD＜4.97%；标准曲线得到良好线性关系r^20.994；样品回收率96.69%~105.18%之间。结论：使用新型NQAD 建立了人工甜味剂安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖、阿斯巴甜、纽甜、甜菊苷的高灵敏度共同分析方法，方法简单、专属性高。[b]关键词:[/b] 纳克级激光计数检测器 人工甜味剂 甜蜜素 三氯蔗糖 甜菊苷[color=#621E0E]人工甜味剂可替代糖类物质添加到食品当中，改善食品口感，增加甜度，具有高甜味、低热量、低成本等优点，被广泛用于各种食品加工。但人工甜味剂作为人工合成化学品，使用过量会产生一定毒副作用，因此食品中甜味剂的测定成为食品卫生检验领域一项常规检测工作，在《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中明确规定了不同食品中使用人工甜味剂的添加限量。[/color][color=#621E0E][/color][color=#621E0E]但是，不同种类人工甜味剂性质差别很大，需要根据甜味剂结构，相应选择检测器和检测方法进行分析，如无紫外吸收物质三氯蔗糖需使用示差折光检测器进行检测，甜蜜素也因紫外吸收弱而使用衍生化方法进行检测。但在实际样品分析中，食品类样品前处理工作复杂，不同甜味剂分别检测增加实验工作量，耗费大量时间。[/color][color=#621E0E][/color][color=#621E0E]这里我们使用高灵敏度的通用型检测器——纳克级激光计数检测器（nano quantity analyte detector，NQAD）检测器对7种常见人工甜味剂（安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、三氯蔗糖、阿斯巴甜、纽甜、甜菊苷）进行同时测定，特别是对紫外吸收差的甜蜜素、三氯蔗糖、甜菊苷也可实现良好检出，实现多种甜味剂的同时分析。[/color][color=#621E0E]NQAD [/color][color=#621E0E]是一款气溶胶型通用检测器，其检测原理可简单分为4 个阶段：喷雾、气化、水蒸气凝结、激光计数。[/color][color=#621E0E][/color][color=#621E0E]与传统蒸发光散射检测器(ELSD)相比较，NQAD 在进行流动相喷雾挥发之后，样品颗粒先进入水凝粒子计数器中吸附水蒸汽进行颗粒长大后，再通过激光进行计数检出, 因此能够得到更好的灵敏度与稳定性。作为一款高灵敏度的通用型检测器，NQAD对没有紫外吸收、离子化困难的难挥发和半挥发物质均可进行良好检出。在这里，我们将NQAD 与现行标准中常用的紫外检测器进行对比，对7种人工甜味剂的标准溶液进行分析检测。[/color][color=#621E0E][/color][color=#621E0E]图1和图2是7种人工甜味剂分别使用PDA（二极管阵列检测器）和NQAD检测器的分析比较。由于甜蜜素、三氯蔗糖和甜菊苷紫外吸收弱，缓冲盐使用高氯酸钠-甲醇梯度体系，在浓度200 μg/mL浓度下，只能明显看到紫外吸收良好的安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜、纽甜四个色谱峰，同时基线漂移较大，不利于良好积分。NQAD检测器使用能够挥发的乙酸铵-甲醇流动相体系分析，得到7种人工甜味剂良好检出。[/color][color=#621E0E][/color][align=center][img=,519,260]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709221024_01_2222981_3.jpg[/img][/align][align=center][color=#3E3E3E]图1 标准品(200 μg/mL)紫外分析谱图[/color][/align][align=center][img=,519,285]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709221024_02_2222981_3.jpg[/img][/align][align=center][color=#3E3E3E]图2 标准品(100 μg/mL)NQAD 分析谱图[/color][/align][color=#3E3E3E]同时我们也对方法学进行了验证。与紫外相比难以检出的甜蜜素、三氯蔗糖和甜菊苷在NQAD检测器上分别得到了0.27、0.17、1.19μg.mL-1检出限。色谱峰面积精密度RSD＜5%；标准曲线得到良好线性关系r^20.994；样品回收率96.69%~105.18%之间。图3为饮料样品提取分析结果图。[/color][align=center][img=,516,307]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709221025_01_2222981_3.jpg[/img][/align][align=center][color=#4FC5DE] [/color][color=#3E3E3E]图3 3 个饮料样品加标回收谱图[/color][/align]因此，使用NQAD检测器可在一个简单梯度条件下直接获得安赛蜜、糖精钠、阿斯巴甜、纽甜，以及紫外检测困难的三氯蔗糖、甜菊苷、甜蜜素共7成分同时检测。
离子色谱法测定饮料中的七种食品添加剂马国军（萧山区质量计量监测中心，浙江杭州）摘要：本文建立了一种用离子色谱-电导检测器测定饮料中丙酸、山梨酸、甜蜜素、苯甲酸、脱氢乙酸、安赛蜜，糖精钠的方法。样品调节pH至9-10后稀释定容过0.22um滤膜，固相萃取柱净化，ionPac AS17-C色谱柱分离，用梯度洗脱方式使待测组分分离，以电导检测器检测。用该方法检测上述七种食品添加剂前处理简单，回收率在94.2%到103.7%之间，RSD小于5%，检出限低，适合于饮料类液体食品中甜味剂、防腐剂的检测。关键词：离子色谱；电导检测器；饮料；食品添加剂；DETERMINATION OF SEVEN KINDS OF FOOD ADDITIVE IN BEVERAGE BY IORN CHROMATOGRAPHYMa GuojunXiaoshan District Quality and Measurement Monitoring Center, 311215, Hangzhou, ZhejiangAbstract: This paper establishes a new method for ion chromatography with conductivity detector to detect additive in beverageincluding propionic acid, sorbic acid, sodium cyclamate, benzoic acid, dehydroacetic acid, Acesulfame-K, saccharin sodium. After adjusting the pH to 9-10 samples diluted to volume over 0.22um membrane, solid-phase extraction (SPE), ionPac AS17-C column chromatography using a gradient elution separation of the analytes to conductivity detector. The method used for detecting the seven kinds of food additives simple pretreatment method ，recoveries between 94.2% to 103.7%, RSD is less than 5%, low detection limit, suitable for detection sweeteners, preservatives in beverageKey words:Ion chromatography; conductivity detector; beverage; food additives1.前言：近年来，随着人们生活水平的不断提高，饮料已成为人们日常生活的一种必备饮品，我们常喝的饮料有包装饮用水、碳酸类饮料、果蔬汁饮料、茶类饮料、乳饮料等等；为改善饮料品质，提高饮料的色、香、味等感官质量，延长保存期和提高产品质量，在生产过程中往往会加入一些食品添加剂，而这些食品添加剂大多是人工合成的，过量使用会对人体造成一定危害。为此国标GB2760《食品添加剂使用卫生标准》对各种添加剂使用限量进行了严格控制。山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸、甜蜜素、糖精钠、安赛蜜、丙酸钠是饮料中常用的几种防腐剂和甜味剂。目前检测上述添加剂多采用气相色谱法和液相色谱法，大多数测定方法只能测定一种或几种添加剂，不能实现一次进样同时检测，而很多饮料中往往含有多种食品添加剂，逐一检测费时、费力、效率又低。尤其是个别添加剂要经过柱前衍生才能进行检测，前处理步骤复杂，回收率较低，同时又不能同时测定其他添加剂。本次研究的七种添加剂分子中带有易电离的阴离子基团，可通过离子色谱阴离子交换色谱柱进行分离，电导检测器进行检测。特别是离子色谱法对样品前处理要求简单，可实现一次进样同时出峰，相比普通液相色谱，离子色谱省时省力，操作简便，不需配制缓冲溶液和有机溶剂，是一项无污染、低成本绿色的检测技术。笔者采用简便的前处理，采用IONPACASl7-C阴离子色谱柱-电导检测器测定饮料中的上述7种食品添加剂，通过优化色谱条件，改进测定方法，建立适合测定饮料类食品中可形成离子态的食品添加剂。2.材料和方法：2.1材料：[size=16
9种甜味剂、防腐剂的检测方法摘要：“民以食为天”，食品安全日益受到民众的关注。国家在《食品添加剂使用卫生标准》中严格规定了食品中各添加剂的添加种类和添加量，但现在任有为了个人利益违法添加非法添加剂或超标添加的事件时有发生。甜味剂是赋予食品或饲料以甜味的食物添加剂，安赛蜜和糖精钠为最为常用的添加剂。防腐剂为抑制微生物生长繁殖，防止食品腐败变质的添加剂，苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸酯类防腐剂在食品中最为常用，对人体健康产生一定影响。为防患食品安全问题，要求仪器行业提高仪器检测能力，寻找各种快速检测方法。实验部分原理通过萃取法-HPLC检测法同时测定蜂蜜样品中安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸正丁酯9种甜味剂和防腐剂的分析方法，采用紫外检测器，检测波长为240nm。萃取方法简单，HPLC检测结果准确，具有良好的标准曲线线性、重复性以及检测结果，该法可在23min内完成全部物质的检测。仪器高效液相色谱仪（配二元高压梯度洗脱装置、紫外检测器）试剂及标样甲醇（色谱纯）无水乙醇：优级醇乙酸铵缓冲液：0.02mol/L盐酸溶液：0.03mol/L安赛蜜（1mg/mL）糖精钠（1mg/mL）苯甲酸（1mg/mL）山梨酸（1mg/mL）脱氢乙酸（≥99.0%）对羟基苯甲酸甲酯（≥99.0%）对羟基苯甲酸乙酯（≥99.0%）对羟基苯甲酸丙酯（≥99.0%）对羟基苯甲酸正丁酯（≥99.0%）标样配制和样品处理1.标准溶液配制分别准确称取0.1g脱氢乙酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸正丁酯（精确到0.001g），甲醇稀释至浓度为1mg/mL作为标准储备液。准确、等量量取安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸正丁酯标准储备液，用甲醇稀释配成100μg/mL的混合标准溶液，用甲醇：水溶液（5:5）逐级稀释混合标准溶液，制备浓度依次为0.1μg/mL、0.5μg/mL[
苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标，苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-2003，糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2003，即可开展实验。 苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目，但是要得到一个准确可靠的结果，也存在一定的难度，许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发，以苯甲酸、山梨酸为着重点，从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面，进行了详细的阐述。 2 样品前处理的注意事项 GB/T5009.28-2003和GB/T5009.29-2003 在文字结构上有缺陷，在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时，只讲述了液体样品的前处理方法，没有涉及对固体样品的前处理。 食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质，对提取极为不利；如处理不干净也会污染色谱柱，影响检测工作。这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂，尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质，且不影响待测物组分的回收率。 GB/T5009.29-2003使用5％硫酸铜溶液沉淀蛋白，对于蛋白质含量较低的食品尚可，对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。如用10％钨酸钠溶液作为沉淀剂，效果好些；如用10％亚铁氰化钾溶液和20％醋酸锌溶液则效果更理想（这是笔者目前用过最理想的沉淀剂）。 具体操作步骤如下： 取一定量样品，捣碎，利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中，加水20ml，浸泡、振荡均匀，加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml，加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液， 9.50mL 20%乙酸锌溶液，定容，振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中，样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。 用这种方法简单易行，接触有机试剂少，重复性和回收率都令人满意；缺点是一定要用液相色谱法检测，有一定局限。 3 检测仪器的选择 虽然液相色谱仪操作起来比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]要复杂，但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。原因如下： 3.1 液相色谱法所用的样品处理方法远比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法简单，且不需使用有机试剂。尤其对于高油脂样品（如月饼）若采用碱化－排油－酸化－提取－挥干－溶解等步骤，再上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]检测，工作量大，试剂毒性也大，且结果由于处理步骤太多而难以保证准确。 3.2 用液相色谱法还可同时完成糖精钠项目的检测，而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法只能做苯甲酸、山梨酸的检测。 3.3 液相色谱仪所用的紫外检测器比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的氢火焰检测器灵敏，可进行更低含量的检测。如用二极管阵列检测器，还可辅助定性，这更是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]氢火焰检测器不可比拟的。 4 选用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]时的注意事项 GB/T5009.29所用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱为 5％DEGS＋1％磷酸固定液的60－80目 Chromosorb W AW，。这种柱有性能稳定、重复性好、保留时间稳定的优点，但同时也有稳定时间较长的缺点。 该柱的适用的样品提取溶剂为石油醚或乙醚，如果用甲醇或乙醇，则溶剂峰拖尾效应较大，对山梨酸的测定有影响。 如用毛细管柱，能取得更好的峰形和灵敏度，但其稳定性及特异性不如填充柱。一般可用非极性毛细管柱，0.530mm内径，10－15m长度。色谱条件可能需用程序升温。 在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上的出峰次序为先出山梨酸，后出苯甲酸。 糖精钠不能直接用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行检测，必须衍生化后才能汽化进样。
果葡糖浆里色谱分析出来的某个峰和糖精钠是同一时间，而且加标后就重叠了，包括蜂蜜也有个和糖精钠重叠的峰，如果蜂蜜和果葡糖浆里没有加过糖精钠，应该怎么区分呢？或者有知道用C18短柱做甜味剂，分析过果葡糖浆的大哥大姐有吗？知道和糖精钠同一时间出峰的那个峰是什么吗
在众多的甜味剂中，由于人工合成甜味剂（糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜等）产生的热量少，对肥胖、高血压、糖尿病、龋齿等患者有益，加之又具有高效、经济等优点，因此在食品工业中被广泛应用。国内外多项研究表明，只要生产厂家严格按照国家规定的标准使用人工合成甜味剂，对消费者的健康就不会造成危害。但如果超量使用，则会危害人体健康，为此国家对甜味剂的使用范围及用量进行了严格规定。方法优势：迪马科技应用实验室建立的烘焙食品中安赛蜜、糖精钠和阿斯巴甜的检测解决方案，使用反相固相萃取柱ProElut C18进行前处理净化，有效去除干扰物，选用对三种甜味剂均具有良好保留效果的极性改性反相色谱柱Suprsil C18-EP进行色谱分析，实现12分钟内三种甜味剂的完全分离。该方法具有操作简便，回收率结果理想，重现性好的优点。可供广大食品分析工作者采用作为烘焙食品中甜味剂的检测方法。样品准备(1) 取2 g样品，加入20 mL甲醇，充分混匀，超声提取15 min；(2) 取出上层清液，再向残渣中加入20 mL甲醇，充分混匀，超声提取15 min，合并上清液；(3) 向上清液中加入1 mL水，在35 ℃条件下减压蒸馏至近干，加入2 mL水，待净化。
液相色谱做糖精钠保留时间漂移,
我准备开展白酒中糖精钠、安赛蜜、山犁酸和苯甲酸的检测，请问各位高手能否用同一台液相色谱同一根色谱柱对以上四种物质进行分析。
我要推广仪器
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