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全自动蛋白免疫印迹定量分析系统

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全自动蛋白免疫印迹定量分析系统相关的论坛

  • 免疫荧光法和免疫印迹法区别

    [font=宋体]免疫荧光法和免疫印迹法是生物学领域中两种常用的实验技术，它们在原理、操作过程和应用方面有着显著的区别。本文将详细探讨这两种技术的区别，以便更好地理解它们的特点和应用价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]首先，我们来了解免疫荧光法。免疫荧光法是一种利用荧光物质标记的特异性抗体来检测细胞内或细胞表面抗原的技术。其基本原理是抗原抗体反应，通过荧光显微镜观察荧光标记的抗原，从而实现对抗原的定位和定量分析。免疫荧光法具有高灵敏度、高特异性和定位准确的特点，广泛应用于细胞生物学、微生物学、免疫学等领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]相比之下，免疫印迹法则是通过检测细胞或组织提取物中特定抗原的存在和分布，以了解其在生物学过程中的作用。这种方法通常涉及到蛋白质的提取、分离、转移和检测等步骤。免疫印迹法能够检测蛋白质的分子量、表达水平以及与其他分子的相互作用，为生物学研究提供了重要的信息。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在操作过程上，免疫荧光法主要涉及细胞的固定、通透、抗体孵育和荧光显微镜观察等步骤。而免疫印迹法则需要进行蛋白质的提取、电泳分离、膜转移、抗体孵育和显色等复杂操作。因此，从操作难度和复杂性来看，免疫印迹法相对更为繁琐。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在结果解读和应用方面，免疫荧光法能够提供直观、定位准确的抗原分布信息，有助于研究细胞的结构和功能。而免疫印迹法则能够揭示蛋白质的表达水平、分子量和相互作用，为疾病诊断、药物研发和生物学机制研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]此外，免疫荧光法和免疫印迹法在应用领域上也有所不同。免疫荧光法广泛应用于细胞生物学、微生物学、免疫学等领域，特别是在病毒检测、细胞信号转导和细胞凋亡等研究中发挥着重要作用。而免疫印迹法则更多地应用于分子生物学、生物化学和病理学等领域，对于研究蛋白质的结构、功能和调控机制具有重要意义。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]免疫荧光法和免疫印迹法优缺点介绍：[/font][/b][font=宋体] [/font][table][tr][td][font=宋体]技术[/font][/td][td][font=宋体]优点[/font][/td][td][font=宋体]缺点[/font][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center][font=宋体]免疫荧光法[/font][/align][/td][td][font=宋体]特异性强[/font][/td][td][font=宋体]非特异性染色问题尚未完全解决[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]敏感性高[/font][/td][td][font=宋体]操作程序较复杂[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]速度快[/font][/td][td][font=宋体]需要特殊的昂贵仪器（荧光显微镜）[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]早期诊断价值[/font][/td][td][font=宋体]染色标本不能长期保存[/font][/td][/tr][tr][td=1,3][align=center][font=宋体]免疫印迹法[/font][/align][/td][td][font=宋体]操作简便[/font][/td][td][font=宋体]对于低丰度的抗原可能不够敏感[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]所需实验材料相对简单[/font][/td][td][font=宋体]无法提供抗原在细胞或组织中的定位信息[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]对某些特定抗原的检测具有较高的灵敏度[/font][/td][td][font=宋体]需要一定的实验技能和经验[/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述，免疫荧光法和免疫印迹法是两种具有不同特点和应用领域的实验技术。免疫荧光法注重抗原的定位和定量分析，操作简便直观；而免疫印迹法则关注蛋白质的表达和相互作用，操作相对复杂但能提供深入的信息。在实际应用中，我们需要根据研究目的和需求选择合适的技术手段，以获取准确、可靠的实验结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光（[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]IF[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]）检测服务[/b][/url]，更多详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 仪器介绍 II:拜耳ACS 180SE 全自动免疫分析仪

    仪器介绍 II:拜耳ACS 180SE 全自动免疫分析仪

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/04/201204261141_363473_1699466_3.jpg ACS全自动化学发光免疫分析系统由拜耳公司生产，采用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合的免疫分析系统。20世纪90年代初首次推出全自动化学发光免疫分析系统ACS：180。90年代中期推出第二代产品为ACS：180SE分析系统(图2)，最 近该公司又推出了ACS：CENTAUR。第二代产品将微机与主机分开，软件程序加以改进，使操作更灵活，结果准确可靠，试剂贮 存时间长，自动化程度高等优点。 1.仪器测定原理 该免疫分析技术有两种方法：一是小分子抗原物质的测定采用竞争法；二是大分子的抗原物质测定采用夹心法。该仪器所用固相磁粉颗粒 极微小，其直径仅1.0µ m，这样大大增加了包被表面积，增加抗原或抗体的吸附量，使反应速度加快，也使清洗和分离更简便。其反应基本过程：⑴竞争反应： 用过量包被磁颗粒的抗体，与待测的抗原和定量的标记吖啶酯抗原同时加入反应杯温育，其免疫反应的结合形式有两种，一是标记抗原与 抗体结合成复合物；二是测定抗原与抗体的结合形式。⑵夹心法：标记抗体与被测抗原同时与包被抗体结合成一种反应形式，即包被抗体 -测定抗原-发光抗体的复合物。 上述无论哪种反应凡所结合的免疫复合物均被磁铁吸附于反应杯底部，上清液吸出后，再加入碱性试剂；其免疫复合物被氧化激发，发射 出 430nm波长的光子，再由光电倍增管将光能转变为电能，以数字形式反映光量度，计算测定物的浓度。竞争法是负相关反应。夹心法 是正相关反应。 2.实验操作 本仪器测定所用试剂均包括两种：固相磁粉和液相发光试剂。每套试剂可放置于试剂托盘的任意位置上，由仪器扫描标签条码后自动加样 。根据测定项目不同，试剂用量在50~450µl之间。测定标本必须用血清，禁止用血浆，以防纤维蛋白将管路堵塞。 由于是自动化仪器，其操作极其简单：①将样品编号排入样品盘。②按试验项目将所用试剂放入试剂盘，并观察辅助试剂。③自由编排程 序，按“START”键运行，根据所编工作表，在微机的控制下，仪器自动放置反应杯，自动加样与试剂，并根据实验项目不同进行温育。温育时间一般在 2.5~7.5分。从第一个测定开始至16分钟，分析仪自动计算报告结果。然后每20秒有一个结果报出，即每一分钟报告3个结果 。如果60个样品同时测定，120个实验项目仅用一个小时即可完成。④随时可加入急诊检查项目。⑤打印报告方式可有三种：按测定 混合项目排列报告；按病人编号排列报告；按每一种项目排列报告。 3.仪器组成及特点 该仪器由主机和微机两部分组成。主机部分主要是由仪器的运行反应测定部分组成，它包括原材料配备部分、液路部分、机械传动部分及光路检测部分。微机系统是该仪器的核心部分，是指挥控制中心。该机设置的功 能有程控操作，自动监测，指示判断，数据处理，故障诊断等，并配有光盘。主机还配有预留接口，可通过外部贮存器自动处理其他数据 并摇控操作，以备实验室自动化延伸发展。 ACS：180SE分析仪为台式，其主要特点为：①测定速度：每小时完成180个测试，从样品放入到第一个测试结果仅需要15分 钟，以后每隔20秒报一个结果。②样品盘：可放置60个标本，标本管可直接放于标本盘中，急诊标本可随到随做，无需中断正在进行 的测试。③试剂盘：可容纳13种不同的试剂，因此每个标本可同时测定13个项目。④全自动条码识别系统：仪器能自动识别试剂瓶和 标本管，加快了实验速度。⑤灵敏度：达到放射免疫分析的水平。 4.测定项目 现有检测项目 47项，更多的项目还在开发之中。①甲状腺系统：总、游离T3，总、游离T4，促甲状腺素，超敏促甲状腺素，T3摄取量。②性腺 系统：绒毛膜促性腺激素，泌乳素，雌二醇，雌三醇，促卵泡成熟素，促黄体生成素，孕酮，睾酮。③血液系统：维生素B 12，叶酸，铁蛋白。④肿瘤标记物：AFP，CEA，CA15-3，CA125，CA19-9，β2 微球蛋白，PSA。⑤心血管系统：肌红蛋白，肌钙蛋白T，肌酸激酶-MB。⑥血药浓度：地高辛，苯巴比妥，茶碱，万古霉素，庆大 霉素，洋地黄，马可西平。⑦其他：免疫球蛋白E，血清皮质醇，尿皮质醇，尿游离脱氧吡啶。

  • N-糖链/糖肽纯化与免疫球蛋白G Fc糖基化定量分析

    [b][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【序号】：4【作者】： 曹翠岩【题名】：N-糖链/糖肽纯化与免疫球蛋白G Fc糖基化定量分析[/back][/color][/font][/b][align=left][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【期刊】：大连理工大学 博士论文[/back][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【年、卷、期、起止页码】：2022[/back][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][/color][/font][font='微软雅黑',sans-serif][color=black][back=white]【全文链接】：[/back][/color][/font][url=https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=3uoqIhG8C447WN1SO36whLpCgh0R0Z-ia63qwICAcC3-s4XdRlECrS5ECsmZMDd20ZXc0ZZUotUGtkXc-cNy_5YsXaID81b6&uniplatform=NZKPT]N-糖链/糖肽纯化与免疫球蛋白GFc糖基化定量分析研究 - 中国知网 (cnki.net)[/url][/align][align=left] [/align]

  • 全自动酶标仪检测什么

    全自动酶标仪检测什么

    [size=16px]　　全自动酶标仪是一种常用于生物化学和分子生物学实验室的设备，用于检测各种生物分子的存在和浓度，特别是蛋白质和核酸。酶标仪通过测量样本中的光信号来定量分析目标分子的含量。主要的应用包括：　　蛋白质浓度测定： 酶标仪可以用于测定样本中蛋白质的浓度，这在许多生物学研究中非常重要。常见的方法包括BCA法、Lowry法、Bradford法等。　　酶活性测定： 可以通过酶标仪来测定酶的活性。这可以帮助研究人员了解酶在不同条件下的活性变化，从而深入了解生物化学反应。　　蛋白质相互作用研究： 酶标仪也可以用于研究蛋白质与其他分子之间的相互作用，例如蛋白质-蛋白质相互作用或蛋白质-小分子相互作用。　　免疫学研究： 酶标仪可用于测定样本中特定抗体或抗原的浓度，从而进行免疫学研究，如ELISA(酶联免疫吸附实验)等。　　核酸测定： 酶标仪也可以用于测定核酸(DNA、RNA)的浓度，如吸光度法测定。　　细胞增殖和细胞毒性测定： 酶标仪可用于测定细胞增殖和细胞毒性相关的指标，如MTT(3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四氮唑)分析。　　总之，云唐全自动酶标仪在生命科学研究中发挥着关键作用，可以用于许多不同类型的实验和应用。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311624430975_909_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 仪器介绍 I:ELECSYS 2010 电化学发光全自动免疫分析仪

    仪器介绍 I:ELECSYS 2010 电化学发光全自动免疫分析仪

    Elecsys 2010 电化学发光全自动免疫分析仪产于Roche公司（罗氏公司），Roche公司是世界上最大的检验产品提供商之一。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203300841_358158_1699466_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203300841_358157_1699466_3.jpgElecsys 2010全自动电化学发光免疫分析仪是应用先进的电化学发光(ECL)技术的全自动台式分析仪。电化学发光(ECL)技术己应用于甲状腺,激素,心肌损伤和肿瘤标志、传染病、贫血、骨代谢等广泛的测定项目。Elecsys 2010仪器全自动数据处理的特点是使用了二维条形码技术,避免了手工操作,保证数据输入的准确。 Elecsys 2010的临床应用: 广泛应用于甲状腺、激素、心肌损伤和肿瘤标志、传染病、贫血、骨代谢等的测定项目。目前我院已开展项目： 甲状腺功能：游离甲状腺素（F T4），游离三碘甲状腺原氨酸（FT3），促甲状腺素（TSH），抗甲状腺球蛋白抗体（Anti-TG），抗甲状腺过氧化物酶抗体（Anti-TPO） 性激素类：绒毛膜促性腺激素β亚单位（β-HCG）,雌二醇（E2）,促黄体生成激素（LH），促卵泡激素（FSH），泌乳素（PRL）,孕酮（PROG）,睾酮(TesTo） 肿瘤标记：甲胎蛋白（AFP）,癌胚抗原（CEA）,乳腺癌相关抗原（CA153）,卵巢癌相关抗原（CA125）,胰腺癌相关抗原（CA199） 肝炎病毒类: 乙肝表面抗原(HBsAg),乙肝表面抗体(Anti-HBs),乙肝核心抗体(Anti-HBc),乙肝e抗体(Anti-HBe),乙肝e抗原(HBeAg) 糖尿病检测：胰岛素（Ins），C-肽（CP） 化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、分析方法简便快速、标记物稳定性好、无污染、结果稳定、误差小、安全性好等优点更免除了使用放射性物质。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者，是免疫分析重要的发展方向。化学发光免疫分析的优点： 1．灵敏度高：这是CLIA关键的优越性，其灵敏度可达1E-16mol/L（RIA为1E-12mol/L）。又如化学发光底物（如AMPPD）可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏5E5倍。 2．宽的线性动力学范围：发光强度在4～6个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度（OD值）为2.0的范围相比，优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动力学范围，但放射性限制了其应用。 3．光信号持续时间长：辉光型（glow type）的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。 4．分析方法简便快速：绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂（或复合试剂）的一步模式。 5．结果稳定、误差小：样品系直接自己发光，不需要任何光源照射，免除了各种可能因素（光源稳定性、光散射、光波选择器等）给分析带来的影响，使分析结果灵敏稳定可靠。 6．安全性好及使用期长：在上述优点前提下，更免除了使用放射性物质。到目前为止，还未发现CLIA的危害性。

  • 几种常用的蛋白鉴定方法

    传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1 图象分析技术（Image analysis）“满天星”式的2-DE图谱分析不能依靠本能的直觉，每一个图象上斑点的上调、下调及出现、消失，都可能在生理和病理状态下产生，必须依靠计算机为基础的数据处理，进行定量分析。 在一系列高质量的2-DE凝胶产生（低背景染色，高度的重复性）的前提下，图象分析包括斑点检测、背景消减、斑点配比和数据库构建。 首先，采集图象通常所用的系统是电荷耦合CCD（charge coupled device）照相机；激光密度仪（laser densitometers）和Phospho或Fluoroimagers，对图象进行数字化。 并成为以象素（pixels）为基础的空间和网格。 其次，在图象灰度水平上过滤和变形，进行图象加工，以进行斑点检测。 利用Laplacian，Gaussian，DOG（difference of Gaussians） opreator使有意义的区域与背景分离，精确限定斑点的强度、面积、周长和方向。图象分析检测的斑点须与肉眼观测的斑点一致。 在这一原则下，多数系统以控制斑点的重心或最高峰来分析，边缘检测的软件可精确描述斑点外观，并进行边缘检测和邻近分析，以增加精确度。 通过阈值分析、边缘检测、销蚀和扩大斑点检测的基本工具还可恢复共迁移的斑点边界。 以PC机为基础的软件Phoretix-2D正挑战古老的Unix为基础的2-D分析软件包。 第三，一旦2-DE图象上的斑点被检测，许多图象需要分析比较、增加、消减或均值化。 由于在2-DE中出现100%的重复性是很困难的，由此凝胶间的蛋白质的配比对于图象分析系统是一个挑战。 IPG技术的出现已使斑点配比变得容易。 因此，较大程度的相似性可通过斑点配比向量算法在长度和平行度观测。 用来配比的著名软件系统包括Quest，Lips，Hermes，Gemini等，计算机方法如相似性、聚类分析、等级分类和主要因素分析已被采用，而神经网络、子波变换和实用分析在未来可被采用。 配比通常由一个人操作，其手工设定大约50个突出的斑点作为“路标”，进行交叉配比。 之后，扩展至整个胶。例如：精确的PI和MW（分子量）的估计通过参考图上20个或更多的已知蛋白所组成的标准曲线来计算未知蛋白的PI和MW。 在凝胶图象分析系统依据已知蛋白质的pI值产生PI网络，使得凝胶上其它蛋白的PI按此分配。 所估计的精确度大大依赖于所建网格的结构及标本的类型。 已知的未被修饰的大蛋白应该作为标志，变性的修饰的蛋白的PI估计约在±0。25个单位。 同理，已知蛋白的理论分子量可以从数据库中计算，利用产生的表观分子量的网格来估计蛋白的分子量。 未被修饰的小蛋白的错误率大约30%，而翻译后蛋白的出入更大。 故需联合其他的技术完成鉴定。2 微量测序（microsequencing）蛋白质的微量测序已成为蛋白质分析和鉴定的基石，可以提供足够的信息。 尽管氨基酸组分分析和肽质指纹谱（PMF）可鉴定由2-DE分离的蛋白，但最普通的N-末端Edman降解仍然是进行鉴定的主要技术。 目前已实现蛋白质微量测序的自动化。 首先使经凝胶分离的蛋白质直接印迹在PVDF膜或玻璃纤维膜上，染色、切割，然后直接置于测序仪中，可用于subpicomole水平的蛋白质的鉴定。 但有几点需注意：Edman降解很缓慢，序列以每40 min 1个氨基酸的速率产生；与质谱相比，Edman降解消耗大；试剂昂贵，每个氨基酸花费

  • 【原创1+1系列活动】全自动核酸分析系统免费体验开始

    【原创1+1系列活动】全自动核酸分析系统免费体验开始

    您还在为做胶时小心翼翼对待如EB类的核酸染料而苦恼吗?还在为胶分辨率低，没办法获得差异结果而头疼吗?还在为同样的PCR产物用不同大小的Marker估算，但结果不同而纠结吗?还在为传统电泳繁杂的步骤耽误时间而痛苦吗?现在你可以对这一切说NO了，免费体验全自动核酸分析系统Qsep100（点击查看详情）开始了!这款分析系统，是利用微毛细管电泳技术检测双链DNA的新仪器，PCR后您不用再制胶，不用再接触EB，不用再浪费时间跑胶和花心思分析胶上的结果。全自动毛细管核酸分析系统（点击查看详情）Qsep100，承担您所有的实验步骤，节省您宝贵的时间，提高您实验结果的精确性。　　全自动核酸分析系统Qsep100，采用毛细管电泳原理，对DNA 片段进行分离和检测。该系统包含检测模块、分析模块、样品进样器和可替换的Pen-shape 卡夹。最快3分钟完成一个样本检测，检测样本灵敏度低至0.1ng/ul，可分辨出1-4bp差异的DNA片段，可对结果进行定性和定量分析。电泳峰图、凝胶电泳图、DNA片段差异的分析都可以通过软件来完成。只需简单几个操作，您就可以获得直观、精准的检测结果，让您的实验标准、精准、自动、高效。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_648236_1604352_3.gif　　凡报名的网友在活动期间，昊诺斯科技将携带仪器上门免费为您做体验。　　免费体验期，参加体验互动活动，将有精美礼品奉上哟\(^o^)/~　　参加方式一：仪器信息网上注册，发帖并加入昊诺斯-鼎昊源真心英雄队(发帖时“选择主题”请选择“第五届原创”;“参加原创团队”点“是”，记得选择“昊诺斯-鼎昊源真心英雄队”哟)，累积积分，还有机会获得仪器信息网的礼品呢O(∩_∩)O~http://bbs.instrument.com.cn/images/HomeFocus/2012081614290062.jpg点击加入我们，让我们成为朋友吧！　　参加方式二：关注并发微博@昊诺斯生物(新浪微博)http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209141410_390911_2507958_3.gif　　发帖内容可涉及以下3方面：（分享试用感受可同时参加原创大赛获得双重奖励！）　　1、 使用全自动毛细管核酸分析系统Qsep100的体验照片和体验感觉，奖励礼品：计时器或手机座。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210251416_399232_2961690_3.jpg　　2、 具体实验的数据和分析结果，奖励礼品：U盘。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210251419_399233_2961690_3.jpg　　3、 使用全自动毛细管核酸分析系统Qsep100得到实验数据，并以此发表的文章，将有现金奖励。(SCI文章500元，核心期刊300元)　　欢迎垂询北京昊诺斯科技有限公司市场部产品负责人曹迪 18601371910 caodi@herosbio.com，(因为区域划分，活动仅限北方区域，具体问题欢迎来电垂询)。　　温馨提醒：您发帖后，请您发邮件到heros@herosbio.com或致电市场专员董丽芳座机010-64842431-315及时和我们联系，我们核实完后将尽快将送出礼品。

  • 【资料】几种常用的蛋白鉴定方法

    传统的蛋白鉴定方法，如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comigration分析，或者在一个有机体中有意义的基因的过表达通常耗时、耗力，不适合高流通量的筛选。 目前，所选用的技术包括对于蛋白鉴定的图象分析、微量测序、进一步对肽片段进行鉴定的氨基酸组分分析和与质谱相关的技术。1 图象分析技术（Image analysis）“满天星”式的2-DE图谱分析不能依靠本能的直觉，每一个图象上斑点的上调、下调及出现、消失，都可能在生理和病理状态下产生，必须依靠计算机为基础的数据处理，进行定量分析。 在一系列高质量的2-DE凝胶产生（低背景染色，高度的重复性）的前提下，图象分析包括斑点检测、背景消减、斑点配比和数据库构建。 首先，采集图象通常所用的系统是电荷耦合CCD（charge coupled device）照相机；激光密度仪（laser densitometers）和Phospho或Fluoroimagers，对图象进行数字化。 并成为以象素（pixels）为基础的空间和网格。 其次，在图象灰度水平上过滤和变形，进行图象加工，以进行斑点检测。 利用Laplacian，Gaussian，DOG（difference of Gaussians） opreator使有意义的区域与背景分离，精确限定斑点的强度、面积、周长和方向。图象分析检测的斑点须与肉眼观测的斑点一致。 在这一原则下，多数系统以控制斑点的重心或最高峰来分析，边缘检测的软件可精确描述斑点外观，并进行边缘检测和邻近分析，以增加精确度。 通过阈值分析、边缘检测、销蚀和扩大斑点检测的基本工具还可恢复共迁移的斑点边界。 以PC机为基础的软件Phoretix-2D正挑战古老的Unix为基础的2-D分析软件包。 第三，一旦2-DE图象上的斑点被检测，许多图象需要分析比较、增加、消减或均值化。 由于在2-DE中出现100%的重复性是很困难的，由此凝胶间的蛋白质的配比对于图象分析系统是一个挑战。 IPG技术的出现已使斑点配比变得容易。 因此，较大程度的相似性可通过斑点配比向量算法在长度和平行度观测。 用来配比的著名软件系统包括Quest，Lips，Hermes，Gemini等，计算机方法如相似性、聚类分析、等级分类和主要因素分析已被采用，而神经网络、子波变换和实用分析在未来可被采用。 配比通常由一个人操作，其手工设定大约50个突出的斑点作为“路标”，进行交叉配比。 之后，扩展至整个胶。例如：精确的PI和MW（分子量）的估计通过参考图上20个或更多的已知蛋白所组成的标准曲线来计算未知蛋白的PI和MW。 在凝胶图象分析系统依据已知蛋白质的pI值产生PI网络，使得凝胶上其它蛋白的PI按此分配。 所估计的精确度大大依赖于所建网格的结构及标本的类型。 已知的未被修饰的大蛋白应该作为标志，变性的修饰的蛋白的PI估计约在±0。25个单位。 同理，已知蛋白的理论分子量可以从数据库中计算，利用产生的表观分子量的网格来估计蛋白的分子量。 未被修饰的小蛋白的错误率大约30%，而翻译后蛋白的出入更大。 故需联合其他的技术完成鉴定。

  • 汉邦科技蛋白纯化仪

    汉邦科技蛋白纯化仪

    [size=18px] 汉邦全自动蛋白纯化系统是公司自主研发的一款高效、快速、可靠的全自动蛋白纯化系统。可用于微克到克级水平的蛋白、多肽和核酸等生物分子的快速高效纯化。该系统采用模块化设计、配套智能化软件并结合公司的各类层析柱，可满足实验室各类生物大分子的纯化需求。它的模块化设计、智能化软件并结合汉邦科技的各类层析柱，可以满足实验室中各类生物大分子的纯化挑战！ 欢迎来电咨询：18952338196 [img=,690,469]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/05/202205261525020323_4695_2788731_3.jpg!w690x469.jpg[/img][/size]

  • 厂商活动：真心英雄第二关全自动核酸分析系统免费体验风暴来袭

    厂商活动：真心英雄第二关全自动核酸分析系统免费体验风暴来袭

    您还在为做胶时小心翼翼对待如EB类的核酸染料而苦恼吗？还在为胶分辨率低，没办法获得差异结果而头疼吗？还在为同样的PCR产物用不同大小的Marker估算，但结果不同而纠结吗？还在为传统电泳繁杂的步骤耽误时间而痛苦吗？现在你可以对这一切说NO了，免费体验全自动核酸分析系统Qsep100开始了！这款分析系统，是利用微毛细管电泳技术检测双链DNA的新仪器，PCR后您不用再制胶，不用再接触EB，不用再浪费时间跑胶和花心思分析胶上的结果。全自动核酸分析系统，承担您所有的实验步骤，节省您宝贵的时间，提高您实验结果的精确性。 全自动核酸分析系统Qsep100，采用毛细管电泳原理，对DNA 片段进行分离和检测。该系统包含检测模块、分析模块、样品进样器和可替换的Pen-shape 卡夹。最快3分钟完成一个样本检测，检测样本灵敏度低至0.1ng/ul，可分辨出1-4bp差异的DNA片段，可对结果进行定性和定量分析。电泳峰图、凝胶电泳图、DNA片段差异的分析都可以通过软件来完成。只需简单几个操作，您就可以获得直观、精准的检测结果。此毛细管电泳技术让您的实验标准、精准、自动、高效。还等什么，快来参加体验吧，凡报名的老师在活动期间，我们将携带仪器上门免费为您做体验。免费体验期，参加体验互动活动，还可获得昊诺斯8GU盘或瑞士军刀背包一个（奖品以实物为准）。\(^o^)/~http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647449_1622715_3.jpg真心英雄活动第二关试用报名网址：http://www.instrument.com.cn/custom/SH100700/20130522/free.shtml另外，您也可以致电北京昊诺斯科技有限公司市场部产品负责人杜广红 13910514003 duguanghong@herosbio.com（因为区域划分，活动仅限北方区域，具体问题欢迎来电垂询）。

  • 60万！武汉血液中心全自动化学发光免疫分析系统及新冠抗体化学发光试剂采购项目

    [quote]项目概况武汉血液中心全自动化学发光免疫分析系统及新冠抗体化学发光试剂采购项目 采购项目的潜在供应商应在武汉市江汉区新华路151号纽宾凯国际酒店23楼2308室现场领取/网上领取获取采购文件，并于2023年02月01日 09点30分（北京时间）前提交响应文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号：WHCSIMC2023-9516003ZF(W)项目名称：武汉血液中心全自动化学发光免疫分析系统及新冠抗体化学发光试剂采购项目采购方式：竞争性磋商预算金额：60.0000000 万元（人民币）采购需求：[table][tr][td][align=center][font=inherit]序号[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]货物名称[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]数量[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]单位[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]采购[/font][font=inherit]预算（[/font][font=inherit]万元[/font][font=inherit]）[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]全自动化学发光免疫分析系统[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]套[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]新型冠状病毒抗体试剂[/align][/td][td][align=center]60000[/align][/td][td][align=center]人份[/align][/td][td][align=center]40[/align][/td][/tr][tr][td=4,1][align=center]合计[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][/tr][/table]合同履行期限：交货期：设备交货期为合同签订后10天内；试剂按采购人要求分批次送货，接到订单后7个工作日内送货质保期：设备自验收合格之日起免费维修、保养、校验五年（含所有相关耗材、零配件及人工费用），每年一次以上免费的保养（含所有相关耗材、零配件及人工费用）；试剂有效期≥12个月本项目( 不接受 )联合体投标。

  • 义翘神州——WB蛋白质印迹FAQ解析

    [font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/category/wb-faq][b][font=Calibri]WB([/font][font=宋体]蛋白质印迹[/font][font=Calibri])[/font][/b][/url][font=宋体]是一种用于检测样本（如细胞提取物或组织匀浆）中特异性蛋白的技术，也用于分析体外合成的重组蛋白。蛋白免疫印迹法还可以根据某种抗原与其相对抗体之间的特殊亲和力来鉴定靶蛋白。蛋白免疫印迹法一般包含三个主要步骤分别为[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]、样品印迹和免疫学检测。通过蛋白免疫印迹法可以获得关于靶蛋白的定性和半定量数据。在蛋白质领域，蛋白免疫印迹法被广泛用于蛋白表达水平的检测。下面针对[/font][b][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]在实验过程中遇到的问题进行罗列及解答：[/font][/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、为什么抗磷酸化酪氨酸抗体会出现高背景或信号减弱？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]请您检查所使用的封闭液并注意封闭以及洗膜的时间。有两种常用的封闭液：脱脂奶粉或[/font][font=Calibri]BSA[/font][font=宋体]。脱脂奶粉成本低但不能用于磷酸化蛋白的封闭，因为脱脂奶粉含有酪蛋白，该蛋白本身就是一种磷酸化蛋白，会结合在膜上并与磷酸化特异性抗体结合导致高背景。并且稀释抗磷酸化酪氨酸抗体与脱脂奶粉中的酪蛋白结合后，用于检测的抗体较少导致信号减弱。此外，避免封闭时间过长，否则会掩盖抗原表位，阻止抗体结合。洗膜时间不宜过长或过短，过长会导致信号减弱（抗体被洗脱），过短则会导致高背景。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]我们建议使用含[/font][font=Calibri]1% BSA[/font][font=宋体]的[/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体]，含吐温[/font][font=Calibri]20[/font][font=宋体]作为封闭液，请勿使用脱脂奶粉。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、为什么随着时间的推移，蛋白免疫印迹法中的抗体活性会降低？[/font][/font][font=宋体]如果您使用我们的一种抗体进行蛋白免疫印迹分析，并且反应性似乎随着时间的推移而降低，可能的原因及解决方案如下：[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①可能的原因一：使用了不同的样本。[/font][font=宋体]解决方案：培养的细胞会随着时间的推移而变性，因此我们建议解冻新鲜细胞。[/font][font=宋体]②可能的原因二：样品在储存期间或反复冻融后降解。[/font][font=宋体]解决方案：制备新鲜样品，避免反复冻融。[/font][font=宋体]③可能的原因三：抗体被污染。解决方案： 旋转小瓶，检查是否有沉淀。[/font][font=宋体]④可能的原因四：二抗失效。解决方案：更换新的二抗。[/font][font=宋体]⑤可能的原因五：蛋白质转膜效率低。解决方案：配置新的转膜液；根据蛋白分子量大小调整转膜时间。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、如何避免转膜不充分或结果不理想的问题？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]确定蛋白质的大小。如果蛋白质大于[/font][font=Calibri]180 kDa[/font][font=宋体]，则需要通过以下方式优化转膜条件：[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 使用[/font][font=Calibri]20% MeOH[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]? 加入[/font][font=Calibri]0.05% SDS[/font][font=宋体]转膜缓冲液。[/font][/font][font=宋体]? 增加裂解物的上样量。[/font][font=宋体][font=宋体]? [/font][font=Calibri]110 V[/font][font=宋体]恒压转[/font][font=Calibri]150 min[/font][font=宋体]，湿法转膜。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、如何避免“斑点状”或不均匀的蛋白免疫印迹？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]为避免进行蛋白免疫印迹法时出现[/font][font=宋体]“斑点状”或不均匀的印迹，有以下几种方法[/font][font=Calibri]: [/font][/font][font=宋体]? 延长封闭时间，以优化封闭效果。[/font][font=宋体]? 延长洗涤次数 （这对组织匀浆样品尤为重要）。[/font][font=宋体]? 在配置封闭液时，确保奶粉完全溶于溶液。[/font][font=宋体]? 在取出抗体溶液使用之前，旋转装有抗体溶液的试管，防止出现蛋白沉淀。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5[/font][font=宋体]、如何避免印迹上出现“点状”、不均匀的斑点？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]为避免印迹上出现[/font][font=宋体]“点状”或不均匀斑点，请尝试以下几种方法：[/font][/font][font=宋体]? 检查所有缓冲液是否被细菌污染。[/font][font=宋体]? 确保在抗体和清洗孵育过程中膜完全浸入。[/font][font=宋体]? 在转膜时，排除薄膜和凝胶之间的所有气泡。[/font][font=宋体]? 将膜放在摇床上，确保均匀地接触。[/font][font=宋体]? 清洗蛋白免疫印迹所需的设备。[/font][font=宋体][font=宋体]? 过滤[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]结合物，除去任何可能的聚集物。[/font][/font][font=宋体]?减少底物暴露时间。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]6[/font][font=宋体]、选择什么作为[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]抗体的阳性对照？[/font][/font][font=宋体]为了使您的蛋白免疫印迹抗体中获得最佳性能，请使用技术数据表中推荐的阳性对照。阳性对照将帮助您按照制定的方案，在实验中获得准确的结果。[/font][font=宋体][font=宋体]我们建议将这些裂解物放置在[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃下长期储存。裂解物非常稳定，它们是细胞制剂，所有酶均变性和灭活。我们做了大量的研究，证实了不同条件下的稳定性。例如，大多数裂解物的完整性和质量不受反复冻融的影响，可在[/font][font=Calibri]25[/font][font=宋体]℃下储存长达[/font][font=Calibri]12[/font][font=宋体]周。但裂解物在[/font][font=Calibri]37[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C[/font][font=宋体]下[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]周时开始降解。然而，根据裂解物的来源，稳定性可能存在一些轻微差异，因此我们建议将其储存在[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]℃下。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]7[/font][font=宋体]、应该分析多少蛋白质？[/font][/font][font=宋体]我们建议：[/font][font=宋体]样本类型[/font][font=宋体]每条泳道[/font][font=宋体]全细胞裂解液[/font][font=宋体][font=Calibri]50 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Calibri]g[/font][/font][font=宋体]细胞核提取物[/font][font=宋体][font=Calibri]25 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Calibri]g[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]8[/font][font=宋体]、应该使用多少浓度的丙烯酰胺凝胶来分离蛋白？[/font][/font][font=宋体]为了更好地分离感兴趣蛋白，丙烯酰胺凝胶的百分比应基于蛋白分子量。我们建议：[/font][font=宋体][font=宋体]蛋白大小（[/font][font=Calibri]kDa[/font][font=宋体]）[/font][/font][font=宋体][font=宋体]丙烯酰胺凝胶百分比（[/font][font=Calibri]%[/font][font=宋体]）[/font][/font][font=宋体][font=Calibri] 80[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]7.5[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]9[/font][font=宋体]、蛋白免疫印迹法应使用哪种印迹膜？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]我们建议使用硝酸纤维素（[/font][font=Calibri]NC[/font][font=宋体]）膜。虽然聚偏二氟乙烯（[/font][font=Calibri]PVDF[/font][font=宋体]）膜、尼龙膜和[/font][font=Calibri]DEAE[/font][font=宋体]纤维素膜也可以使用，但有时会产生升高的背景，特别是实验过程中使用山羊多克隆抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]10[/font][font=宋体]、应该使用什么封闭缓冲液？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]封闭液的选择与目标蛋白有关，我们建议一般使用[/font][font=Calibri]1X TBS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]5%[/font][font=宋体]脱脂奶粉、[/font][font=Calibri]0.05%[/font][font=宋体]吐温[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]作为封闭液，在室温下封闭[/font][font=Calibri]30-60[/font][font=宋体]分钟或在[/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]℃下封闭过夜。请注意，如果封闭过夜，缓冲液中应不加吐温[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]。如果目标蛋白较特殊（如磷酸化），建议使用[/font][font=Calibri]1X TBS[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]1% BSA[/font][font=宋体]并含有吐温[/font][font=Calibri]-20[/font][font=宋体]的封闭液，可得到较清晰条带。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]11[/font][font=宋体]、一抗的稀释倍数一般是多少？[/font][/font][font=宋体]请查看各个抗体的数据表，因为这通常记录起始稀释度。如果数据表上没有具体稀释信息，我们建议您对相关的阳性和阴性对照进行连续滴定。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]12[/font][font=宋体]、为什么实际的蛋白免疫印迹条带大小与预期的不同？[/font][/font][font=宋体][font=宋体]蛋白免疫印迹法是根据蛋白质大小分离蛋白的技术。一般来说，蛋白越小，其在[/font][font=Calibri]SDS-PAGE[/font][font=宋体]凝胶中移动的速度就越快。然而，移动速率也受到其他因素的影响，因此实际条带大小可能与预测不一致。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]可能的原因[/font][font=宋体]备注[/font][font=宋体]①翻译后修饰[/font][font=宋体]例如磷酸化、糖基化等，可增加蛋白质的大小。[/font][font=宋体]②翻译后切割[/font][font=宋体]大多数蛋白质首先合成为前体蛋白形式，再经切割产生活性形式，例如前体半胱天冬酶。[/font][font=宋体]③剪接变体[/font][font=宋体][font=宋体]可变剪切会产生从同一基因产生不同大小的蛋白质。剪接变体的表达具有高度变异性，取决于使用的特定组织和实验条件[/font] [font=宋体]。[/font][/font][font=宋体]④亚型[/font][font=宋体]许多蛋白质表达多种不同大小的亚型。相同靶蛋白不同亚型的表达具有高度变异性，取决于使用的特定组织和实验条件。参照不同的网站，确定特定靶标的亚型。[/font][font=宋体]⑤相对电荷[/font][font=宋体][font=宋体]氨基酸组成（带电[/font][font=Calibri]vs.[/font][font=宋体]不带电）。[/font][/font][font=宋体]⑥多聚体[/font][font=宋体]例如蛋白质二聚化。尽管相互作用可能导致出现较高条带，但在还原条件下需防止该情况。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]13[/font][font=宋体]、为什么蛋白免疫印迹结果信号微弱或完全没有信号？[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]可能的原因[/font][font=宋体]备注[/font][font=宋体]①抗体滴定 [/font][font=宋体][font=宋体]应使用多种抗体浓度进行抗体滴定实验，以确定最佳信噪比的合适抗体浓度。一般而言，滴定浓度应在[/font][font=Calibri]0.2-5.0 [/font][font=宋体]μ[/font][font=Calibri]g/mL[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]②组织[/font][font=Calibri]/[/font][font=宋体]细胞特异性 [/font][/font][font=宋体]靶蛋白表达取决于待测的细胞或组织。应进行文献检索，确保您正在使用的细胞等条件适用于检测靶蛋白。[/font][font=宋体]③复溶 [/font][font=宋体]在重新溶解冻干抗体时应注意，确保抗体全部溶解。尽管冻干抗体沉淀通常位于试管底部，但有时粉末可能位于管壁上。因此，溶解时应覆盖试管的整个表面，以确保抗体完全溶解。然后进行短暂离心，确保将所有粉末收集在试管底部。[/font][font=宋体]④阳性对照 [/font][font=宋体]在您的蛋白免疫印迹中添加阳性对照泳道是评价抗体是否正常工作和实验条件是否适当的最佳方法。另外，基于文献或实验结果的阳性对照也可以用来评估抗体是否正常发挥作用。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多[/font][font=Calibri]WB[/font][font=宋体]蛋白免疫印迹法常见问题详情可以关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/wb-faq[/font][/font][font=宋体][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/western-blot-wb-service][b]Western Blot[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/western-blot-wb-service][b]检测服[/b][/url]务：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/western-blot-wb-service[/font][/font]

  • 全自动酶标仪的主要用途有哪些

    全自动酶标仪的主要用途有哪些

    全自动酶标仪是一种实验室仪器，用于分析生物分子的含量或活性，特别是蛋白质和核酸。它通常用于生物化学、分子生物学、生物医学研究和临床诊断等领域。以下是全自动酶标仪的主要用途：　　酶标记实验：全自动酶标仪可用于测量酶标记的生物分子的含量，例如酶标记的蛋白质或核酸。这些实验通常用于研究基因表达、蛋白质相互作用、药物筛选和分析生物样本中的特定分子。　　免疫测定：酶标法是一种常用于检测抗体、抗原或荷尔蒙等生物分子的方法。全自动酶标仪可以用于 ELISA(酶联免疫吸附测定法)等免疫测定，用于检测疾病标志物、抗体水平和免疫反应。　　酶活性测定：全自动酶标仪可用于测量酶的活性。这对于研究酶的功能以及药物筛选和酶抑制剂的测试非常重要。　　DNA和RNA分析：全自动酶标仪也可以用于测定DNA和RNA的浓度，例如在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url](聚合酶链反应)和核酸电泳实验中。　　药物筛选和生物分子定量：在药物发现和开发中，全自动酶标仪可用于评估药物对生物分子的影响，并用于高通量筛选实验。　　总之，全自动酶标仪是一种多功能的实验室仪器，可用于各种生物化学和生物学实验，帮助研究人员测量、分析和定量生物分子的含量和活性。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/09/202309191044576618_1369_5604214_3.jpg!w690x690.jpg[/img]

  • 蛋白质印迹技术30年“进化”史

    在发明蛋白质印迹法（Western Blot）出现了30多年之后，这项技术仍然是获取特定蛋白可靠鉴定的关键。许多近期涌现的产品利用各种方法来提高蛋白质印迹实验的可重复性、敏感性、定量性以及速度。有三个人都被认为发展了蛋白质的免疫印迹方法，但其中只有一人才算得上是“Western Blotting（蛋白质印迹法）”的命名者，他就是当时在西雅图哈钦森癌症研究中心Bob Nowinski实验室工作的W. Neal Burnette。“Western Blotting”的命名中暗含了Southern Blotting（Edwin Southern在1975年发明的一项技术，使用胶、尼龙膜和吸水纸去鉴定一个复杂个体中特定的DNA序列）、Northern Blotting（随后发明出的相似策略，用于鉴定RNA）以及位于西海岸（West Coast）的Nowinski实验室三者之意。http://www.ibioo.com/data/attachment/portal/201309/22/095234xzm2pso06fsmtbof.jpgBurnette的技术成果直到1981年才得以发表。他回想起来，当时审稿人“特别”反对使用“Western blotting”这一名称。但尽管如此，这个名称还是沿袭了下来，而且蛋白质印迹技术也成为了最广泛使用的免疫化学技术之一。工作原理蛋白质印迹法的第一步涉及到用凝胶电泳（Gelelectrophoresis）按照大小分离蛋白质，然后通过将膜置于胶上，将蛋白质转移到膜上（通常是硝酸纤维素膜或聚偏二氟乙烯膜），并在膜上加上若干片吸水纸，然后将这套堆层放在缓冲溶液中，这样就能通过毛细管作用将蛋白质向上拉拽到膜上。这也就是所谓的湿法或槽式转印法。另外两项技术是干法和半干转印法，这两种方法比传统的湿转印法更快也更规整，但是对于高分子量蛋白质而言，效率更低。对于半干转印方法来说，膜和胶放置在被缓冲液浸泡过的滤纸层之间，将这些都夹在阴极和阳极之间，电流就能驱动蛋白质转移到膜上。三种方法中，干法转印最快，但转印效率也最低。转印结束后，膜被放在稀释过的蛋白质溶液中用来封闭非特异性的蛋白质结合。然后将膜与一抗进行孵育、洗脱，再与标记了信号检测探针的二抗进行孵育。最后一步是检测，通常采用化学发光或者荧光方法。在化学发光检测中，与酶交联的二抗能够与检测抗原产生光发生反应，可以被胶片或成像装置捕获。而在荧光检测中，抗体探针被荧光集团所标记。荧光检测方法的主要优势在于，它可以同时检测多个蛋白质，并且其信号更加一致。因此与化学发光检测相比，也更有利于量化研究。不少制造蛋白质印迹相关设备、软件和消耗品的公司正在努力推动其中一些或所有步骤的自动化，期望能够将这一实验变得更加简单有效。同时在实验中加入了一些验证点，让研究人员能够随时监测实验进展，甚至重新打造整个过程。科学家们寻求的是高效性、稳健性和策略化，从而能够帮助他们避免浪费宝贵的造价高昂的抗体。加速免疫检测过程转印、抗体孵育、上样和洗脱步骤占据了蛋白质印迹法实验80%的时间，EMD Millipore公司“蛋白质印迹法解决方案”产品经理Michele Hatler这样介绍。这家总部位于加州泰梅库拉的公司推出的SNAP i.d. 2.0蛋白质检测系统加速了整个过程，使用真空装置通过膜推入试剂，而不仅仅依赖于扩散作用。这样就能将免疫检测的时间从4小时缩短到30分钟，Hatler表示。她解释说：“我们真正致力于提高蛋白质印迹工作流程的效率。我们仍然是按照传统的步骤走，只是加了一个真空装置。”Hatler指出，2.0版本是于2012年9月推出的，相比之前的版本有几个方面的优势。它可以使用中等大小的凝胶（8.5×13.5厘米）和迷你凝胶（7.5×8.4厘米），之前则只能用迷你凝胶。“这一设备很便宜，操作也很简便，但切实提高了实验效率，节省了实验时间。” Hatler说。伯乐公司（Bio-Rad）的Trans-Blot Turbo蛋白质转移系统是实验台面大小的仪器，能够提供快速而高效的转印。得益于新的转印缓冲液配方，特殊的过滤材料和增强的电流强度（由一个集成电源调节），这一系统能够在短至3分钟的时间内完成转印，并且印迹结果能与槽式转移相媲美。传统的半干转移系统需要15到60分钟时间，而且通常无法提供高分子量蛋白质转移的有力结果。增加验证点以缓解忧虑蛋白质印迹法的高失败率常常令人感到非常沮丧，尤其是你需要若干天来换取一个结果。“这是一项非常不稳定的技术，”伯乐公司“蛋白质印迹组”市场经理Ryan Short说，“我们对用户调查时发现，一半的用户报告他们用此技术的失败率至少是25%。”Short还说：“几乎没有什么机会可以检查实验过程是否满足期望。由此就产生了焦虑。我们正在引入可视验证点的概念来增加信心和确定性。”这家公司的标准和Mini-PROTEAN免染色预制胶，利用其ChemiDoc MP胶成像系统，使得研究者可以快速观测到他们的蛋白是否正确地载入到凝胶上，进而确证高质量的蛋白质转移，便于决定是否应该转向下一个步流程或是重新开始。ChemiDoc MP系统是为化学发光和多元荧光斑点成像技术所设计，能够在个人电脑上用ImageLab软件来操作。这些验证点“真的很有用”，在实验室使用该系统的加州大学戴维斯分校助理教授Aldrin Gomes表示：“我们可以成像这些免染的凝胶，不用加入额外的染料，而且能够快速判断跑在胶上的样品是否出现问题。我们还能在蛋白质转膜之后再去对凝胶成像，如果其中任何一个步骤出现问题，我们都可以在这一点上停止实验进程。”成像和软件提高定量性当许多科学家仍在使用胶片分析蛋白质印迹时，世面上开始出现越来越多的宽范围免胶片凝胶记录成像系统，这些系统可以用来成像并分析化学发光的印迹、荧光的印迹斑点或者同时检测这两种印迹。许多公司开始纷纷努力，争相制造尽可能便捷的成像仪及其分析软件。很多公司提供了按键式成像捕捉系统，其大小可在实验台上操作。Syngene公司于2012年4月推出了非常简洁的一键操作系统PXi，分析化学发光和荧光印迹。该系统是基于该公司的G:BOX成像系统，并配有GeneSys成像软件。2012年10月，赛默飞世尔公司（Thermo Fisher Scientific）推出了myECL成像仪，使用紫外和可见光透射法，专业的滤镜和电荷耦合器件（CCD）摄影技术去捕获和分析蛋白质印迹以及蛋白和核酸凝胶。

  • 8月15日网络会议： AB液质系统对牛奶和高蛋白类食品中双氰胺的定性定量分析

    http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647508_2507958_3.gifAB液质系统对牛奶和高蛋白类食品中双氰胺的定性定量分析主讲人：薛元臻博士 AB SCIEX公司 高级产品顾问 活动时间：2013年8月15日 下午 14:00http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647508_2507958_3.gif【简介】 最早在 2013, 新西兰的牛奶制品中检测到痕量的双氰胺，双氰胺是农业生产中广泛使用的一种肥料，用于减少温室气体排放和过滤硝酸盐排放到水道中，可能是新西兰牛奶污染事件中的主要来源. 另外，双氰胺是一种含氮量高的化合物, 与三聚氰胺的结构和组成类似.含氮量高的化合物曾经被用于非法食品添加物使蛋白含量虚高.使用Eksigent Ultra UHPLC和AB SCIEX QTRAP:emoji: 5500LC-MS/MS系统对牛奶和高蛋白类食品中双氰胺Dicyandiamide 的定性与定量。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、参加及审核人数限制：限制报名人数为120人，审核人数100人。3、报名截止时间：2013年8月15日4、报名参会：http://simg.instrument.com.cn/meeting/images/20100414/baoming.jpg5、参与互动： *参会期间您还可以将有疑问的数据通过上传的形式给老师予以展示，并寻求解答*6、环境配置：只要您有电脑、外加一个耳麦就能参加。建议使用IE浏览器进入会场。7、提问时间：现在就可以在此帖提问啦，截至2013年8月14日8、会议进入：2013年8月15日13:30点就可以进入会议室9、特别说明：报名并通过审核将会收到1 封电子邮件通知函(您已注册培训课程)，请注意查收，并按提示进入会议室!为了使您的报名申请顺利通过，请填写完整而正确的信息哦~http://simg.instrument.com.cn/webinar/20110223/images/zb_11.gif注意：由于参会名额有限，如您通过审核，请您珍惜宝贵的学习交流机会，按时参加会议。如您临时有事无法参会，请您进入报名页面请假。无故不参会将会影响您下一次的参会报名。快来参加吧：我要报名》》》

  • 关于对《全自动酶联免疫分析仪校准规范》征求意见的函

    [align=center][size=17px][color=#ff0000]全国生物计量技术委员会[/color][/size][/align][align=center][size=17px][color=#ff0000]关于对《全自动酶联免疫分析仪校准规范》征求意见的函[/color][/size][/align][size=15px]各位委员：[/size][size=15px]　　由全国生物计量技术委员会对口负责的《全自动酶联免疫分析仪校准规范》征求意见稿已经起草完成。[/size][size=15px]　　现将征求意见稿（见附件）发送给各位专家及委员广泛征求意见。[/size][size=15px]　　望在百忙之中进行评审并提出意见。请将意见寄（或发电子邮件）给全国生物计量技术委员会秘书处。[/size][size=15px]附件下载：[/size][size=15px]《全自动酶联免疫分析仪校准规范》（征求意见稿）相关材料[/size][align=right][size=15px]全国生物计量技术委员会[/size][/align][align=right][size=15px]2021年9月6日[/size][/align]

  • 请教如何定性定量分析角蛋白材料

    请教如何定性定量分析角蛋白材料

    请教一下该图为一角蛋白材料，请问能分析出有哪些氨基酸成分吗？根据文献内应含约17种，请问应如何分析？能否定量测出各种氨基酸含量？http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/10/201210230158_398636_2032315_3.jpg

  • 全自动酶免分析系统的技术发展与现状

    酶联免疫吸附试验（ELISA/EIA，简称“酶免试验”）是一项现代医学临床检验基本的、常规的检测技术。尽管在90年代初期，由于以聚合酶链反应（PCR）技术为代表分子生物学水平技术的发明，人们纷纷预测，酶免试验将被更高灵敏度、数百万级信号放大的、病原体水平检测的核酸放大试验（NAT）所取代。但由于免疫临床标志物（抗原/抗体）具有无法替代的临床意义、以及酶免试验具有操作简便、技术可靠，特别是，90年代末期ELISA检测系统的灵敏度和特异性以及检测过程的自动化得到了显著提高与完善，因此，酶免试验再也没人怀疑将被淘汰，而成为传染病血清学标志物（如肝炎、艾滋、致畸病原Torch）、肿瘤标志物及内分泌等各种临床免疫指标检测的主导技术。 支持酶免试验技术的进步，酶标板检测仪器朝着二个方向快速发展。一方面，侧重酶免试验的光学检测系统——酶标仪，到90年代末已达到至臻完美状态；随着纳米技术微量加样的发展，酶标仪将很容易由检测传统的96微孔板，转化为检测384微孔板，甚至1536微孔板，达到更高的检测效率。另一方面，侧重酶免试验处理过程技术——酶标分析系统，到90年代末已充分发展；随着多任务软件，如O/S2，Unix及Windows NT等操作平台的完善，满足现代实验室GMP/GLP要求的全自动酶标分析系统，正在世界各种实验室普及。应当指出，在发达国家全自动酶标分析系统的进步，是由法规要求严格、酶免试验结果至关重要的血站实验室需求推动的。这是因为，不同于临床病人检测结果，仅是医生诊断的参考数据，血站血液筛查实验室的检验结果判定，将直接决定血液的安全性。 以日本为代表的“全面实验室自动化”（TLA）运动，对于全自动酶免分析系统产生了巨大的需求。在90年代初期，手工酶免试验操作曾经成为TLA的主要障碍。目前，由于全面实验室自动化具有标准化、高效率、高质量的自动化与网络化特征，正成为临床实验室发展的新趋势。 酶免试验自动化与网络化的时代已经到来，全面实验室自动化不再是一种模型。了解这些技术进步将有助于高效临床实验室的建设 根据美国临床病理学院（CAP）的调查报告，实验室误差（ERROR）产生原因的79%因素，是因为实验过程中样本处理不当造成的。 区别与其他临床检验技术针对于每一反应单元对应于一份标本，酶免试验的样本处理必须基于批量化操作——96孔酶标板。为保障正板内各孔标本孵育时间最小差异，必须采用8通道或12通道快速加样。因此全自动样本处理机是提高实验精度、提高实验效率和避免人为误差和差错的关键设备。 第一代多功能（Robotic）样本处理机，是由瑞士哈美顿（HAMILTON）公司开发于1985年上市的Microlab 2200。这是一台基于机械臂运动和具有管路系统的稀释分配器（Diluter）原理，采用8或12根固定距离的特弗隆探针，由单任务的BASIC程序控制的样本处理机。 随着酶免试验的普及，基于管路稀释分配器原理的样本处理机得到快速发展，先后有数家厂商开发了十余种样本处理机，以满足实验室液体处理需要。如瑞士哈美顿公司的Microlab 4000等。 1989年，哈美顿公司独树一帜，开发上市了以专利技术的可抛弃塑料活塞注射器（Micro-syringe）为原理的，无管路批量样本处理机Microlab AT,试图满足更快的加样（12针）、无污染地加样、主动抛弃可能失去精度的加样针、摒弃不可预测的管路污染与稀释等实验室需求。1997年，AT系列增加改进为Microlab AT plus 2型。这种原理的样本处理机，具有全面的标本质量系统、加样质量保障系统。是唯一获得美国FDA许可，用于血液筛查实验室的产品。在中国自1996年开始引进AT样本处理机，迄今为止已有150余名。 样本处理自动化的最新技术进步，是以瑞士哈美顿公司于2000年8月推出的，第五代斯达尔全自动随机式批量样本工作站（Microlab STARTM,Sequential Transfer Aliquoting Robot）为标志的，这是世界上第一台符合2003年实施的IVD标准的全自动样本处理工作站。其主要技术特征是： 采用专利的压缩导入-O形环扩张（CO-RE）核心技术，实现标准加样的智能化、自动化； 理想的加样体系——气动置换加样原理ADP的实现； 实现任意加样动作编程同时使用不同的加样头（抛弃型加样尖和永久型探针）； 实时实现液体双传感（△C-△P）技术； 全方位液面传感应用，特别是解决了酶标板的液面监测世界难题； 活性洗涤工作站（Active Wash Station）进行平行洗涤加样针，是提高加样速度的关键； 模块化、无管路、独立加样通道系统4——16通道，用户可以根据工作量进行升级； 智能增强的容错纠错系统（Sophisticated Error Handling） 实现全过程控制（TPC），全部步骤都在监控下运行，每个步骤都形成记录文件（TRACE），甚至对加样体积质量进行校验、备份，实现全自动GMP/GLP。 最新一代哈美顿—斯达尔的典型应用为： *血站输出筛选实验室： ——ELISA实验　　——标本留样存档（Archiving）　　——血型正／反定型实验　　 ——转氨酶和梅毒凝集实验　　——NAT汇集实验　　——NAT试验无污染（RNAse/DNAse）加样 *医院检验实验室： ——样本处理中心（对病人标本分项处理（aliquot）生化/免疫/体液/血液/血凝） ——酶免实验室ELISA试验（标本、对照/标准、试剂的分配、稀释） *分子生物学与生物技术药物筛选 ——DNA纯化　　——PCR加样　　——DNA测序加样　　——克隆快速筛选分配　　 ——药物筛选自动分配　　目前，酶免试验样本处理设备已开始在全国血站系统普及，其中哈美顿AT数量最多。样本处理机还是酶免自动化所需主动标本识别（Positive Sample ID）条码阅读的基本设备系统。此外，样本处理机还有下列重要意义。 *提高加标本速度与效率 *减少操作人员劳动强度 *使标本传染操作人员机会最小化 *通过减少人为失误和改善加样精确度与准确性来改善检测分析质量 *采用批量（batch）或随机（random access）进行多种组合与多种模式检测

  • 【分享】HC-800全自动离子分析仪与其它产品比较

    《生活饮用水卫生标准》(GB 5749—2006） 饮用水水质指标106项，其中42项为常规指标，这42项常规指标包括了氟、硝酸根、水硬度、氯化物、pH等项目。虽然离子计、离子色谱仪和HC-800全自动离子分析仪都是分析离子性物质的方法，但它们有很大的区别。一、HC-800全自动离子分析仪与离子色谱仪1. 离子色谱仪对检测样品要求高，要进行复杂预处理。对水样品要求电阻18 MQ，无颗粒，用0.45um滤膜过滤。水质不好则结果肯定不好，还可能对仪器和分离柱造成损坏。HC-800全自动离子分析仪对样品适应性比较强，无需过滤，水样混浊、有颜色时也可测定。2. 离子色谱仪目前不能在线实时监测，只能在检测室里检测使用。HC-800全自动离子分析仪有检测室里检测和在线监测两种方式任选。在线监测，可以实现水质的实时连续监测，实时掌握水质的变化。3. 离子色谱仪对所有试剂都应当是分析纯以上，最好是优级纯。淋洗液使用要求更高。淋洗液使用前应过滤、脱气， 以去除其中的颗粒物及气泡。离子色谱经常使用强酸、强碱作为流动相，易对人和环境产生危害。HC-800全自动离子分析仪只要求试剂为分析纯，只有A、B两种标准液，很安全。4. 离子色谱仪对水样中各种离子区分比较复杂（定性），对每种离子波峰留出时间和峰形要与每种离子标准液作比对，才能确认每种离子。HC-800全自动离子分析仪组装各种电极，就可识别离子并同时定量分析。5．离子色谱仪20分钟以内能得到7个常见离子阴离子：F-, Cl-, Br-, NO2-, PO43-, NO3-, SO42-的结果，但对阳离子检测不理想，因为阳离子柱质量不过关。HC-800全自动离子分析仪不但能检测7个常见离子阴离子，而且能检测阳离子Na+, NH4+, K+, Ca2+, Mg2+,只要3分钟能检出3到8种离子的结果。6．离子色谱仪价格较高，动辄十几万到二十几万。结构比较复杂，操作难度大，使用耗材维护费用高，普及程度不高等。HC-800全自动离子分析仪只需几万元，适合普及，定标、进样、测量、冲洗全程自动化，无需人工清洗与维护 。使用耗材费用低廉。二、HC-800全自动离子分析仪与离子计1. 离子计是比较传统的实验室测定离子方法，采用离子选择电极法。手工标定，在测定样品前，先配制7种标准液，分别测定每种标准液电位，人工绘制标准曲线。最后测水样，在标准曲线查找相应的点，查找计算得出水样中某种离子浓度。整个过程耗时耗人力。HC-800全自动离子分析仪A、B装好各种电极和两种标准液，开机，自动标定，自动进样，自动测量，自动出结果，只需3分钟。2. 离子计一次只能测一种离子，只能大概定量。HC-800全自动离子分析仪，装几种电极，一次就能出几种离子的结果。由高性能微处理器处理，能精密定量（0.1级），打印与计算机通讯一并完成。

  • 全自动酶标仪应用范围

    全自动酶标仪应用范围

    [size=16px]　　全自动酶标仪(Automatic Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Analyzer，简称ELISA分析仪)是一种用于进行酶标法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，ELISA)的实验设备，能够在自动化的环境下执行ELISA实验。ELISA是一种广泛用于检测蛋白质、肽、抗体、激素、病原体等生物分子的方法，因此全自动酶标仪在许多不同的应用领域都有用途。　　以下是全自动酶标仪的应用范围示例：　　医学诊断： 全自动酶标仪常用于临床诊断，检测患者体液中的生物标志物，如抗体、抗原、蛋白质等，用于早期疾病诊断、监测疾病进展以及评估治疗效果。　　生物医药研究： 在药物研发过程中，全自动酶标仪可以用来筛选药物候选化合物，评估药物对特定分子的影响，以及研究药物的药代动力学。　　免疫学研究： 全自动酶标仪在免疫学研究中广泛应用，用于检测抗体水平、细胞因子、细胞表面分子等。　　食品安全检测： 全自动酶标仪可以用于检测食品中的有害微生物、残留农药、毒素等，以保障食品安全。　　环境监测： 在环境科学领域，全自动酶标仪可用于监测环境样本中的污染物、重金属、微生物等。　　生物工程和生物技术： 在生物工程领域，全自动酶标仪可用于检测重组蛋白的表达水平，优化发酵过程等。　　兽医学： 全自动酶标仪也在兽医领域中用于动物健康监测、疾病诊断等。　　总之，云唐全自动酶标仪的应用范围非常广泛，涵盖了医学、生物科学、食品安全、环境监测等多个领域。它通过自动化的操作，提高了实验的效率和准确性，有助于科研人员和医疗专业人员更好地进行实验和诊断工作。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311612470083_875_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 全自动化学发光免疫分析仪的原理以及临床应用

    全自动化学发光免疫分析仪的原理以及了临床应用。全自动化学发光免疫分析仪采用光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。是用于检测肿瘤标志物、贫血、甲状腺、孕筛查等项目，是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术，目前应用的自动化分析仪是分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温、比色、结果计算、书写报告和清理等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成，大大提高了工作效率及准确性。

  • 全自动生化分析仪主要测的指标有哪些?

    全自动生化分析仪主要测的指标有哪些?1、肝功能系列如胆红素、总蛋白、白蛋白各种氨基转氨酶等2、肾功能系列参数有尿素、肌酐、尿酸等3、糖尿病系列参数有果糖胺、葡萄糖等4、血脂系列参数有胆固醇、甘油三酯、高低密度胆固醇、脂蛋白等5、心肌酶谱系列参数有肌酸激酶、肌酸激酶同功酶、乳酸脱氢酶等6、胰腺系列参数主要有阿尔法淀粉酶

  • 【原创大赛】针对日立7180型全自动生化分析仪使用的浅谈

    [align=center]针对日立7180型全自动生化分析仪使用的浅谈[/align][align=center]西安国联质量检测技术股份有限公司[/align][align=center]安平中心：张方[/align]目前对于体外诊断的生化分析主要由全自动生化分析仪承担，因此不仅对于仪器的精密度和重复性要求很高，同时对于人员素质和操作也有一定的要求。故对本实验室所使用的全自动生化分析仪的操作进行简单分享。1.仪器的基本构造，该仪器外部配备有供生物样本分析使用的纯水机，防止意外断电的供电装置（UPS），废液桶（不能直接进入下水道），操作电脑及打印机；仪器的内部结构基本包括试剂盘（R1和R2），样品盘（R1和R2），反应盘，加样针，清洗针，清洗剂等。2.仪器的检测项目和方法学以及基本参数的设置，全自动生化分析仪的检测主要包括蛋白类、酶类、脂类等，所涉及的方法学主要有速率法、酶法、免疫法等，基本参数的设置需参考说明书并跟工程师进行有效地沟通。3.仪器的使用，在生化仪开始进行使用前应先进行仪器验证和校准（由厂家进行），验证和校准合格之后仪器方可进行正常运转。应预先打开纯水机，在打开主机和打印机；开机后待仪器测试温度孵育至37±0.1℃，方可进行下一步操作，温度超出该范围，仪器会进行报警，需进行外部及内部条件的排查，确保仪器的正常运转；紧接着进行仪器的维护，首先排除气泡，再是光度计的检查；进行试剂的检查，确保试剂足够完成今天的测试项目；再就是质控品的测试，只有质控品测试在控，才可开始样本的测试，如失控，则需要进行检查和校准直至质控品测试在控；质控测试合格之后方可进行样本的测试。4.仪器的维护保养：测试样本完成后进行日常清洗维并关机，用75%酒精对加样针进行清洁，避免造成堵针。定期清洗反应杯、进行杯空白测试，确保反应杯的正常使用；定期进行光路的清扫，清扫各清洗槽、反应槽、样品盘等，确保仪器的正常且不影响实验结果。5.对仪器要进行定期的验证和校准，并根据具体情况进行外部校准，一般由厂家进行。 以上是本人对于日立7180型全自动生化分析仪使用的一些想法，具体的操作还要根据自己实验室的情况进行确定，并与工程师进行良好的沟通。不足之处还望指出。

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