中空纤维超滤膜测试中涉及到紫外分光光度计与光电分光光度计,这两种分光光度计差异在哪? 是不是紫外是用的紫外光源,那么光电又是什么光源呢?哪种更实用些?谢了!
咨询大家个问题,有没有1万左右的能扫描紫外光谱的分光光度计?
可见分光光度计和紫外分光光度计的区别是测定波长范围不同,一般可见光波长范围是400~1000 nm,紫外光波长范围是200~400 nm。所谓紫外可见分光光度计也就是说这个仪器可以通过更换光源形成紫外和可见的光区,能够测定吸收峰在紫外和可见光部分的化合物。一般测定波长在200~1000nm。
[em53] 求助752型紫外光栅分光光度计透光率不显示100%的相关可能原因?尝试激发H灯后,显示屏数字由0变为93.8,但马上又变为0,请问各位专家是否为H灯坏了?
紫外分光光度计用来测紫外光时,石英皿用来调零时不稳定,是由那些原因?
可见分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。 通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外可见分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。紫外可见分光光度计测的是分子在紫外光区的吸收强度,紫外可见分光光度计可用于大部分有色物质的定量监测,通常需要使用各种各样的显色剂。紫外可见分光光度计的常用参数: 紫外可见分光光度计的吸光度范围:-0.301-1.999A紫外可见分光光度计的波长范围:200-1000nm 浓度显示范围:0-1999波长准确度:±2nm 杂散光:≤0.5%T@220nm、360nm波长重复性:1nm 稳定性:±0.003A/小时光谱带宽:4nm 配有RS232通讯接口透射比准确度:±0.5%T 打印机:支持透射比重复性:0.2%T 应用软件:支持透射比范围:0.0-125%T
可见分光光度计和紫外可见分光光度计为同一类型的仪器,都是属于分光光度计,但是其功能又存在区别。用来测量待测物质对可见光的吸光度,并进行定量分析的称为可见分光光度计;用来测量待测物质可见光或紫外光的吸收度,并进行定量分析的称为紫外可见分光光度计。 可见分光光度计和紫外可见分光光度的区别,具体包括以下几个方面: 1.光学器件: 由于玻璃能吸收紫外波,而对可见到近红外端有比较好的透过性,因此,可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃,而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件,一般使用适应光学部件。 2.接收器: 由于紫外可见分光光度计多了紫外波,因此,在接收器上,多了对紫外波的灵敏响应功能,这类接收器的价格比可见分光光度计的接收器昂贵。 3.光源: 可见分光光度计的光源一般只用钨灯,而紫外可见分光光度计是用钨灯和氘灯俩个电源,这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段,氘灯主要在紫外端。
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如何选择紫外分光光度计?主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,已经形成了一种能解决广泛难题的仪器,从单一波长的测量到高性能多光谱的测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。光源和检测方法(LIGHT SOURCES AND DETECTION)分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。 Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。样品类型(SAMPLE FORMAT)在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。数据管理(DATA MANAGEMENT)大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。(生物通:亚历)(http://www.ebiotrade.com/)
请教大虾一个问题,我今天用紫外光分光光度计测吸光度得出了好几组负值,不知道正常不正常?出现问题的原因我怎么也找到!!
紫外分光光度计组成的简介紫外分光光度计 1.光源:钨灯或卤钨灯——可见光源 350~1000nm氢灯或氘灯——紫外光源 200~360nm 2.单色器:包括狭缝、准直镜、色散元件其中色散元件:1.棱镜——对不同波长的光折射率不同分出光波长不等距2.光栅——衍射和干涉分出光波长等距3.吸收池:玻璃——能吸收UV光,仅适用于可见光区石英——不能吸收紫外光,适用于紫外和可见光区要求:匹配性(对光的吸收和反射应一致)4.检测器:将光信号转变为电信号的装置1)光电池2)光电管3)光电倍增管4)二极管阵列检测器5.记录装置:讯号处理和显示系统
俺们实验室用的还是752紫外光栅分光光度计问题多多,尤以不稳定显著经常使用也摸出一点心得了现拿出来与大家共享---------------通常老式的机子里面都是有干燥剂的(一般为变色硅胶)以前认为一个礼拜换一次差不多了后经实践表明:若真是要使用起来每天都得更换,这样752才能一方面预热时间可以减少,同时也比较稳定。------------------
[align=left]紫外分光光度计大量用于实验室研究。如何选择和购买紫外分光光度计对于研究人员来说是很重要的。紫外分光光度计该如何选择呢?[/align][align=left]紫外分光光度计的选择主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。[/align][align=left]研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,这种能解决广泛难题的仪器可以从单一波长的测量到高性能多光谱进行测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)[/b][/color][/align][align=left]一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。[/align][align=left]双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。[/align][align=left][color=#4687dd][b]数据管理(DATA MANAGEMENT)[/b][/color][/align][align=left]大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。[/align][align=left]另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光源和检测方法(LIGHT SOURCES AND DETECTION)[/b][/color][/align][align=left]分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。如果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。[/align][align=left]紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。[/align][align=left]一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。[/align][align=left]分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。[/align][align=left]为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。[/align][align=left][color=#4687dd][b]样品类型(SAMPLE FORMAT)[/b][/color][/align][align=left]在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。[/align][align=left]用小试管cuvette装样品容量一般从1μl~5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。[/align]
我们如何来评价一台紫外可见分光光度计的优劣呢? 首先,我们要来考察它的外观。然后,我们探讨一下会对仪器的使用有很大影响的几个重要指标: 1、 杂散光 它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源。这个值当然越小越好了。 2、 光度准确度 光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的直接要求,每个用户都必须重视。 3、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。4 、光谱带宽 指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。表征仪器的光谱分辨率。按照比耳定律,光谱带宽应该是越小越好的,但是如果仪器的光源能量弱,光学传感器的灵敏度低时,光谱带宽小了,也得不到理想的测量结果的。所以,选择和使用仪器时一定注意。5、 稳定性 稳定性是使用者最关注的指标之一。仪器的宗旨就是稳定可靠,不稳定更谈不上可靠了。6、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。7、 波长的准确度和重复性 仪器的每个值都是在一定的波长下测得的,如果所示的波长和实际波长偏差万里,那么测出的值和真值的吻合度从何谈起呢?可见这个指标的重要性。 总之,这几个指标都是相互独立又相互关联的,每个指标对仪器的使用都有很大影响。希望大家在选购紫外、可见分光光度计时,多做比较,多做判断,切实找到一个稳定可靠的好帮手。我们选择时需要根据自己实验室的需要 ,主要考虑光学构造和光源、检测方法、样品类型和数据处理等因素。 1.光学构造 一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。1单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。2.样品类型在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。3.光源和检测方法 分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。 紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。 有的仪器可以选择 多种光源 :紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。分光光度计通常使用光电倍增管和光敏二极管测量吸光值。 4.样品类型在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。5.数据管理 大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。 由此可见紫外、可见分光光度计是一种常规的实验室分析仪器。可广泛用于无机物、有机物的定性、定量分析中,在科研、制药、化工、环保、卫生、防疫等领域中发挥重要的作用。
紫外分光光度计是一种常用的光度计产品类型,可用于药品的鉴别、纯度检查及含量测定,被广泛用于生物、化工、制药、科研等领域中。紫外分光光度计的作用是什么呢?下面小编就来具体介绍一下,希望可以帮助用户更好的应用产品。紫外分光光度计的作用1 检定物质根据吸收光谱图上的一些特征吸收,特别是最大吸收波长λmax和摩尔吸收系数ε是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中,已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中,为药物分析提供了很好的手段。2 与标准物及标准图谱对照将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中,在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。若两者是同一物质,则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样,也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。这种方法要求仪器准确,精密度高,且测定条件要相同。3 比较最大吸收波长吸收系数的一致性4 纯度检验5 推测化合物的分子结构6 氢键强度的测定实验证明,不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同,这可以利用紫外光谱来判断化合物在不 同溶剂中氢键强度,以确定选择哪一种溶剂 。7 络合物组成及稳定常数的测定8 反应动力学研究9 在有机分析中的应用有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学,它是在有机化学和分析化学的基础上发展起来的综合性学科。
我们就做常规的环境监测,紫外光的话就只有做总氮(210左右)会使用,各位版友有没有好的紫外可见分光光度计推荐啊,
罗丹明B的最大吸收峰为554nm,不是在可见光区吗?可以用紫外分光光度计测量吗?我看到一篇文章就是这么做的,但没有具体步骤。配出来的是有颜色的,是不是紫外分光光度计也可以测量紫外光区、可见光区和红外光区?
紫外及可见光分光光度计的可测波长范围为200一1000 nm,也有波长范围为200- 400 nm的[url=http://www.chinanoted.com/]紫外分光光度计[/url],但前者较为普遍。紫外及可见光分光光度计的构造原理与可见光分光光度计(如721型分光光度计)相似。由于玻璃吸收紫外光,因此单色器要用石英棱镜或光栅。(一)光a(light source)有钨丝灯及氢灯(或氛灯)两种。可见光区(360一1000 nm)使用钨丝灯 紫外光区 (200一360 nm)则用氢灯或氛灯。(二)吸收池(absorption cell)由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材质。(三)检浏器(detector)检侧器使用两只光电管,一为氧化艳光电管,用于625一1000 nm波长范围 另一只是锑艳光电管,用于200一625 nm波长范围。光电倍增管亦为常用的检测器,其灵敏度比一般的光电管高2个数量级。图8一22是紫外及可见光分光光度计原理图。[img=,452,200]http://www.yi7.com/file/upload/201201/10/15-02-26-80-3596.jpg[/img]紫外及[url=http://www.chinanoted.com/]可见光分光光度计[/url]分单光束和双光束型。单光束型仪器使用前一般需要预热以使仪器稳定,缺点是难以消除与补偿由于光源与电子测量系统不稳定等所引致的误差。双光束型仪器能够消除与补偿由于光源、电子测量系统不稳定等所引致的误差,所以其测盘的精确度就提高了。双光束型仪器的工作原理如图8一23所示。[img]http://www.yi7.com/file/upload/201201/10/15-02-26-97-3596.jpg[/img]其工作原理可描述为:由光源(钨丝灯氘灯,根据波长而变换使用)发出的光经人口狭缝及反射镜反射至石英棱镜或光栅,色散后经过出口狭缝而得到所需波长的单色光束。然后由反射镜反射至由马达转动的调制板及扇形镜上。当调制板以一定转速旋转时,时而使光束通过,时而挡住光束,因而调制成一定频率的交变光束。之后扇形镜在旋转时,将此交变光束交替地投射到参比溶液(空白溶液)及试样溶液上,后面的光电倍增管接受通过参比溶液及为试样溶液所减弱的交变光通量,并使之转变为测量信号。此信号经放大并用解调器分离及整流,然后以电位器自动平衡此两直流信号的比率,并依照记录器记录得到吸收曲线。
今天想使用这个紫外可见分光光度计,待测的数据是紫外光,波长是275nm,调波长至275nm,不能调0,特别不稳定,一直来回的跳动,这是为什么啊?球解答啊……
本人最近做紫外光谱,用双光路紫外分光光度计,在做扫描的时候常常出现负吸收,将两个样品池调换,负值变正,问什么原因?
化验室的752分光光度计坏了,10多年了不想修了,还有一台755B的,只能说是垃圾,不好用。欲新购一台紫外可见分光光度计。要求如下: 配置1~5CM普通比色皿,1CM石英比色皿。 紫外光测定和可见光测定用的灯源具有独立开关,在不用紫外光法时能关掉氘灯,用紫外线时能关掉卤灯,象755B那种用反光板来切换光源的东西不要说了。操作简单,只要能直接读出T值A值即可,没机会配上电脑、打印机之类的外设的,老板不会同意的。工作稳定,不易出问题,易于维护,进口国产不限。以上要求不高吧,求各位兄弟们介绍下哪种型号的合适http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif
化验室的752分光光度计坏了,10多年了不想修了,还有一台755B的,只能说是垃圾,不好用。欲新购一台紫外可见分光光度计。要求如下: 配置1~5CM普通比色皿,1CM石英比色皿。紫外光测定和可见光测定用的灯源具有独立开关,在不用紫外光法时能关掉氘灯,用紫外线时能关掉卤灯,象755B那种用反光板来切换光源的东西不要说了。操作简单,只要能直接读出T值A值即可,没机会配上电脑、打印机之类的外设的,老板不会同意的。工作稳定,不易出问题,易于维护,进口国产不限。以上要求不高吧,求各位兄弟们介绍下哪种型号的合适http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif
光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。
一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。1单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。2双光束型则是通过一个斩光轮(mirroredchopperwheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lampdrift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。有的仪器可以选择多种光源:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3,000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。分光光度计通常使用光电倍增管和光敏二极管测量吸光值。
紫外分光光度计的光谱带宽一般是2nm或更小,而液相色谱仪紫外检测器的光谱带宽却多为4-8nm
紫外分光光度计根本作业原理和红外光谱仪类似,使用必定频率的紫外可见光照耀被剖析的有机物质,导致分子中价电子的跃迁,它将有挑选地被吸收。一组吸收随波长而改变的光谱,反映了试样的特征。在紫外可见光的范围内,关于一个特定的波长,吸收的程度正比于试样中该成分的浓度,因而测量光谱可以进行定性剖析,而且根据吸收与已知浓度的标样的对比,还能进行定量剖析。 紫外-可见分光光度计 紫外-可见分光光度计的类型很多,但可概括为三种类型,即单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。 1、单光束分光光度计 经单色器分光后的一束平行光,轮番经过参比溶液和样品溶液,以进行吸光度的测定。这种简便型分光光度计结构简略,操作方便,维修容易,适用于惯例剖析。 2、双光束分光光度计 经单色器分光后经反射镜分解为强度持平的两束光,一束经过参比池,一束经过样品池。光度计能主动对比两束光的强度,此比值即为试样的透射比,经对数变换将它变换成吸光度并作为波长的函数记载下来。 双光束分光光度计通常都能主动记载吸收光谱曲线。由于两束光一起别离经过参比池和样品池,还能主动消除光源强度改变所导致的差错。 3、双波长分光光度计 由同一光源宣布的光被分红两束,别离经过两个单色器,得到两束不同波长1和2 的单色光;使用切光器使两束光以必定的频率替换照耀同一吸收池,然后经过光电倍增管和电子控制系统,最后由显示器显示出两个波利益的吸光度差值。关于多组分混合物、混浊试样(如生物组织液)剖析,以及存在布景搅扰或共存组分吸收搅扰的情况下,使用双波长分光光度法,通常能进步办法的灵敏度和挑选性。使用双波长分光光度计,能取得导数光谱。 经过光学系统变换,使双波长分光光度计能很方便地转化为单波长作业方式。假如能在1和2处别离记载吸光度随时刻改变的曲线,还能进行化学反应动力学研讨.
[font=微软雅黑][size=16px]自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,已经形成了一种能解决普遍难题的仪器,从单一波长的测量到高性能多光谱的测量分析。实验室选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。瓦赛带您了解如何选择紫外可见分光光度计。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]一、光学构造[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]双光束型则是通过一个斩光轮将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以至小化光漂移和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]二、光源和检测方法[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]分光光度计的带宽很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]三、样品类型[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]用小试管cuvette装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]四、数据管理[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。[/size][/font]另外一个值得考虑的因素是数据的使用。各单独实验室都有各自感兴趣的实验结果。
今天对淀粉样进行400-900nm光谱扫描,所得结果和文献上基本一致,但在波长为530左右时吸光度骤然下降,一直持续到423nm之后又升高。换了多个样品都是一样的趋势,让后自己在可见光分光度计上重复测了这一段波长的吸光度发现紫外可见光分光光度计比可见光光度计在这一波段的吸光值低了0.035左右。个人觉得是紫外可见分光光度计没调试好,或者是仪器有问题,但不知道该如何处理。。。。。
紫外分光光度计是基于朗伯比尔定律设计的,利用物质对某种波长的光具有选择性吸收的特性来鉴别物质或测定其含量的一种仪器。通常紫外可见分光光度计由光源、单色器、吸收池、检测器、显示装置五部分组成。紫外分光光度计的光源是氘灯,用于提供稳定的紫外光谱;单色器用以产生高纯度单色光束;吸收池是石英池,用于盛放样品使用;检测器是将光信号转换为电信号;显示装置将检测到的数据进行保存读出,报告于使用者。
双束光紫外分光光度计在调零的时候,只放了一个参比溶液到参比槽,样品槽是空的,会有怎样的结果。