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极性可逆质谱毛细管电泳高压电源

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极性可逆质谱毛细管电泳高压电源相关的论坛

  • 【原创大赛】毛细管电泳高压电源DIY经历

    最近看见色谱版区有一个仪器DIY 活动,我仔细想了半天终于想到了一些题材。我硕士阶段读的是分离科学,研究方向是毛细管电泳分离。导师的仪器是一台国产的彩陆毛细管电泳仪,叫做彩陆CL-1030高效毛细管电泳仪,该仪器配有一个可调式的高压电源(最高可达30kV)。所用色谱工作站为 HW-2000 chromatography workstation,由上海千谱软件公司研制。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311201309_478333_2428063_3.gif1. HV power supply 2. Capillary 3.buffer A 4. Buffer B 5. Detector 6. computer它的结构就是这么个结构。有一次另外一个研究小组的老师想测试一下他自己设计的高压电源效果如何,预算我首先把电源卸下来,然后把他提供的高压电源分别插到缓冲溶液的两边。DIY以后,原有的许多设计就用不上了。正常情况下,仪器的舱门是关闭的,当时当时由于有外部电源的线路,所以电源也无法关闭。最后老师配了个阿司匹林溶液让我在柱子上走了一下,发现效果不错,而后又走了几个茶叶水样品,感觉也没问题。这一次DIY还是很成功的。检测过程中,老师发现我的毛细管吸光度非常高,然后他让我把毛细管卸下来,他在显微镜下面一看,原来我的毛细管检测窗口上面附着了一根纤维,估计是脱脂棉的纤维,是我烧检测器窗口的时候,不小心遗留下来的。后来我的同门照着这个方法测试,只不过是从正高压换成了负高压,结果高压电源被烧毁了。此次DIY的经历是难忘的。我认为色谱仪器DIY的原则有以下几条:第一,不能破坏仪器原有的结构,仪器的设计者经过多少次的尝试才设计出如今的仪器,他们的思想基本上是成型的,所以我在DIY的过程中没有破坏仪器结构;第二,熟悉仪器的原理,只有读懂这台仪器才能够DIY,我在那次实验中就把毛细管电泳分离的机理了然于心;第三,DIY是一种创新精神,创新就有可能失败,我的同门在换成负高压以后,电源就毁坏了。第四,DIY的过程有风险,毕竟25KV的高压体系下,舱门打开,安全性能还是值得质疑的。几年过去了,我挺佩服当年自己的自信还有一颗勇敢的心。国外仪器设计复杂,技术成熟,留给我们DIY的余地几乎为零。关键和核心部门注意千万不能DIY!

  • 毛细管电泳仪器系统

    毛细管电泳仪器系统

    毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统,如图1所示。[align=center][img=,220,174]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212291520503108_4240_3237657_3.jpg!w220x174.jpg[/img][/align][align=center]图1 毛细管电泳仪器简图[/align][align=center]1-温度控制系统;2-高压电源;3-高压电极槽;4-毛细管;5-检测器;6-低压电极槽;7-铂丝电极;8-记录/数据处理[/align]检测器由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检测方法,但是受到仪器、单波长等因素的限制。目前应用最广泛的是二极管阵列(PDA)检测器。常规的检测器还有灵敏度很高的激光光热(LIP)和荧光(FL)检测器。近些年,在实际应用中还产生了激光诱导荧光(LIF)、有良好选择性的安培(EC)、通用性很好的电导(CD)助以及可以获得结构信息的质谱(MS)等多种检测器。迄今为止,除了电感耦合等离子体(ICP)和红外(IR)技术没有和CE联用,其他的检测方法均和CE联用并且大部分实现商品化。使用CE时应该根据所分析物质的特点,选择相应分离模式和检测器,以扬长避短,得到最佳分析效果。

  • 质谱的高压电源漏电怎麽办?

    我们实验室的质谱仪的高压电源漏电,致使离子源毛细管顶端出现电火花,请教各位大侠有什么办法解决或是能够缓解出现电火花的状况!

  • 高压电源的应用技术

    这次北京第十届科仪展,我有幸参与其中,令我印象最深刻的就是,有很多人不清楚高压电源具体是怎么用的,用在哪里的,说实话,我开始也搞不清楚,别说刚接触这个的时候,就说现在,基本还是一知半解,所以,在这里,介绍一点资料以供大家参考和讨论学习交流,希望我也能从中学到知识啊,这方面的技术人才我是很崇拜的! 1、X光机http://www.wismanhv.com/web/images/gyjs1_clip_image002_0000.jpg X光机电源是X光机的关键部件,一种比较精密的高压电源,其可分为高压电源和灯丝电源两部分,其中灯丝电源用于为X光管的灯丝加热,高压电源的高压输出端分别加在阴极灯丝和阳极靶两端,提供一个高压的电场使灯丝上活跃的电子加速流向阳极靶,形成一个高速的电子流,当高速电子流撞击原子和外围轨道上电子,使之游离且释放出能量,就产生了X光。 2、油烟净化、空气净化http://www.wismanhv.com/web/images/gyjs1_clip_image002_0002.jpg 油烟净化或空气净化电源是高压电源的一种,是油烟净化和空气净化设备的关键部件,主要用于产生高压静电电场,通过高压电场的作用使空气电离,并使空气中的油烟、粉尘以及化学物质颗粒带电,带电的粒子在电场的作用下受力而定向运动从而吸附在收集电极板上,这样使空气中的粉尘得到过滤,达到空气净化的目的。 3、静电喷涂http://www.wismanhv.com/web/images/gyjs1_clip_image002_0003.jpg 静电喷涂需要用高压电源产生静电,被喷涂和工件应接地为正极、喷枪出粉口处接有放电针枪内产生的负高压通过放电针就会产生电晕放电现象。此时带负电荷的粉末微粒在静电和压缩空气气流的作用下,到达工件表面,由于静电力吸引,使粉末均匀地吸附在工件表面长时间不会脱落然后工件进入固化炉流平固化,控制好湿度或时间,最后形成紧密的并和工件结合牢固的均匀光滑致密的涂层。 4、半导体制造设备http://www.wismanhv.com/web/images/gyjs1_clip_image002_0004.jpg 半导体生产过程中的粒子注入、 物理汽相沉积(PVD)、 用于纳米光刻的电子束投影曝光技术。 5、真空/等离子处理http://www.wismanhv.com/web/images/gyjs1_clip_image002.jpg 离子束沉积、离子束辅助沉积、电子束蒸发、电子束焊接、离子源、直流磁控反应溅射、玻璃/织物镀膜、辉光放电、微波处理等。 6、医疗学诊断和治疗系统http://www.wismanhv.com/web/images/gyjs1_clip_image002_0008.jpg 毛细管电泳 高压电源是毛细管电泳仪的重要组成部分,它的输出电压的稳定性决定着电泳迁移时间的重现性,因为重现性是进行定性鉴别的基础。一般认为,用于毛细管电泳的高压源,首先,其电压波动必须控制在0.2%以内。第二,高压源的安全性能也是一个重要的指标,当操作者意外靠近高压电极时,它必须立即停止工作。其输出电流也必须限制在安全电流以下。第三,作为仪器,其使用寿命应该足够长,以免维修带来不便。第四,其造价也是一个考虑的因素,它涉及该仪器能否利于普及和推广应用 X射线荧光光谱分析 X射线荧光光谱仪主要由激发、色散、探测、记录及数据处理等单元组成。激发单元的作用是产生初级X射线。它由高压发生器和X光管组成。后者功率较大,用水和油同时冷却。 7、测试设备 高压电容测试、CRT显示器测试、高压电缆故障测试(PD testing)、TWT测试、H-POT测试。 8、科学研究  粒子加速器、自由电子激光、中子源、回旋加速源器、电容电感脉冲发生网络、Marx高压脉冲发生器、电容充电器。 9、微波加热、射频放大、纳米技术应用、静电技术应用、静电纺丝制备纳米纤维。 随着社会的发展和科技的进步,高压电源产品必将用于更多的应用领域。。。医疗学诊断和治疗系统

  • 毛细管电泳仪的主要部件和其性能要求介绍

    毛细管电泳系统的基本结构包括进样系统、两个缓冲液槽、高压电源、检测器、控制系统和数据处理系统。 由于毛细管内径的限制,检测信号是CE系统最突出的问题。紫外可见法(UV)是CE常用的检测方法,但是受到仪器、单波长等因素的限制。目前应用最广泛的是二极管阵列(PDA)检测器。常规的检测器还有灵敏度很高的激光光热(LIP)和荧光(FL)检测器。近些年,在实际应用中还产生了激光诱导荧光(LIF)、有良好选择性的安培(EC)、通用性很好的电导(CD)助以及可以获得结构信息的质谱(MS)等多种检测器。迄今为止,除了电感耦合等离子体(ICP)和红外(IR)技术没有和CE联用,其他的检测方法均和CE联用并且大部分实现商品化。使用CE时应该根据所分析物质的特点,选择相应分离模式和检测器,以扬长避短,得到最佳分析效果。毛细管电泳仪的主要部件和其性能要求如下:(1)毛细管用弹性石英毛细管,内径50μm和75μm两种使用较多(毛细管电色谱有时用内径再大些的毛细管)。细内径分离效果好,且焦耳热小,允许施加较高电压,但若采用柱上检测因光程较短检测限比较粗内径管要差。毛细管长度称为总长度,根据分离度的要求,可选用20~100cm长度,进样端至检测器间的长度称为有效长度。毛细管常盘放在管架上控制在一定温度下操作,以控制焦耳热,操作缓冲液的黏度和电导度,对测定的重复性很重要。 (2)直流高压电源采用0~30kV(或相近)可调节直流电源,可供应约300μA电流,具有稳压和稳流两种方式可供选择。 (3)电极和电极槽两个电极槽里放入操作缓冲液,分别插入毛细管的进口端与出口端以及铂电极,铂电极接至直流高压电源,正负极可切换。多种型号的仪器将样品瓶同时用做电极槽。(4)冲洗进样系统每次进样之前毛细管要用不同溶液冲洗,选用自动冲洗进样仪器较为方便。进样方法有压力(加压)进样、负压(减压)进样、虹吸进样和电动(电迁移)进样等。进样时通过控制压力或电压及时间来控制进样量。 (5)检测系统紫外-可见光分光检测、激光诱导荧光检测、电化学检测和质谱检测均可用作毛细管电泳的检测器。其中以紫外-可见光分光光度检测器应用最广,包括单波长、程序波长和二极管阵列检测器。将毛细管接近出口端的外层聚合物剥去约2mm一段,使石英管壁裸露,毛细管两侧各放置一个石英聚光球,使光源聚焦在毛细管上,透过毛细管到达光电池。对无光吸收(或荧光)的溶质的检测,还可采用间接测定法,即在操作缓冲液中加入对光有吸收(或荧光)的添加剂,在溶质到达检测窗口时出现反方向的峰。 (6)数据处理系统与一般色谱数据处理系统基本相同。

  • [资料]毛细管电泳知识介绍

    电泳现象   电泳是指带电粒子在电场作用下向电性相反的方向迁移的现象。利用这种现象对某些化学或生物化学物质进行分离分析的技术称为电泳技术,可完成电泳分离的仪器称为电泳仪。    不同的物质粒子在同一电场中,由于它们之间有效电荷、形状、大小的差别,它们的电泳迁移就会不同,所以有可能得到分离。也就是说,物质粒子在电场中迁移速度的不同是电泳分离的基础。   毛细管电泳是将电泳的场所置于毛细管中的一种电泳分离方法,它的装置结构非常简单,通常由高压电源、铂电极、缓冲液池、样品池、毛细管、检测器和分析记录仪构成。   利用上述的仪器,我们就可以进行毛细管电泳分离。它的基本流程有进样、分离和检测三步骤。   总的来说,毛细管电泳非常广泛地应用于生命科学中生物样品的分离分析,特别是蛋白质分离、糖分析、DNA测序、手性分离、单细胞分析等。

  • 【原创】毛细管电泳知识介绍

    电泳现象   电泳是指带电粒子在电场作用下向电性相反的方向迁移的现象。利用这种现象对某些化学或生物化学物质进行分离分析的技术称为电泳技术,可完成电泳分离的仪器称为电泳仪。    不同的物质粒子在同一电场中,由于它们之间有效电荷、形状、大小的差别,它们的电泳迁移就会不同,所以有可能得到分离。也就是说,物质粒子在电场中迁移速度的不同是电泳分离的基础。   毛细管电泳是将电泳的场所置于毛细管中的一种电泳分离方法,它的装置结构非常简单,通常由高压电源、铂电极、缓冲液池、样品池、毛细管、检测器和分析记录仪构成。   利用上述的仪器,我们就可以进行毛细管电泳分离。它的基本流程有进样、分离和检测三步骤。   总的来说,毛细管电泳非常广泛地应用于生命科学中生物样品的分离分析,特别是蛋白质分离、糖分析、DNA测序、手性分离、单细胞分析等。

  • 【讨论】毛细管电泳和毛细管电色谱的比较

    毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE):以高压电场为驱动力,以电解质为电泳介质,以毛细管为分离通道,样品组分依据淌度和分配行为的差异而实现分离的色谱方法。它有多种分离模式,可以采用液相色谱中的各种检测方法。CE既可以分离带电荷的溶质,也可以通过毛细管胶束电动色谱等分离模式分析中性溶质,CE的高分离效率、高检测灵敏度,样品用量极少等特点使它在生物医药样品的分析中显示出突出的优越性。 毛细管电色谱(capillary electrochromatography, CEC):毛细管电色谱结合了毛细管电泳的高柱效和高效液相色谱的高选择性,已成为近年来色谱领域研究的热点之一。是以电渗流(或电渗流结合高压输液泵)为流动相驱动力的微柱色谱法。CEC是液相色谱与毛细管电泳相结合的产物,它的分离机理包含有电泳迁移和色谱固定相的保留机理,一般而言,溶质与固定相间的相互作用对分离起主导作用。所用色谱柱为填充了HPLC填料的填充型毛细管柱和管内壁涂渍了固定相功能分子的开管毛细管柱。CEC还处在发展阶段,主要应用在药物、手性化合物和多环芳烃的分离分析。另外CEC与质谱联用既可解决LC/MS的分离效率不高的问题,又可克服CE/MS中质量流量太小的缺陷。

  • 【资料】--毛细管电泳的发展历史

    本文简要的回顾了毛细管电泳的发展历史,对其发展和应用现状进行概述,并对未来的发展提出一些设想,作为我们研究课题的重点,特别对毛细管电泳安培检测技术进行了较为详细的评述。从电导检测、电位检测和安培检测的三种方法用于毛细管电泳这项分离技术的发展过程,到基础理论的研究、检测池的设计与改进、电极的改进及其应用的简单介绍到未来的发展动向等方向逐一涉及,一般的药物、氨基酸和糖类的分析到目前应用的热点进行了综述。从毛细管电泳安培检测技术需要进一步完善和发展考虑,提出了本论文的设想,在毛细管电泳安培检测的方法学研究及其在药物分析中的应用方面做出一些有意义的工作。 鉴于在毛细管电泳安培检测技术中,用于分离的高压电场对安培检测有着严重干扰,影响检测的灵敏度,而且分离毛细管与工作电极对接也存在一定困难等原因,前人已做了大量的研究工作,并提出了种种解决办法,但还存在不尽如人意的地方。在原有的工作基础上,我们进一步进行了毛细管电泳安培检测的研究工作,设计制作了一种高压电场隔离接口和相应的安培检测池,并对工作电极进行了改进,兹将主要研究内容报告如下: 第一部分 概述了毛细管电泳的发展历史,对电导检测、电位检测特别是安培检测的基本原理及其应用工作进行了详细介绍,指出了三种检测技术的优缺点,以及人们为降低噪音、提高检测度方面所做的一些工作,最后还简单介绍了本文的目的、意义和内容。 第二部分 设计制作了一种电场隔离接口和安培检测池,并对检测电极做了进一步改进。对高压电场隔离接口的强度、稳定性、平衡时间、导电效率及隔离电场性能等进行了详细的研究。结果表明:该接口稳定,隔离电场效果好,可以满足实际工作的需要;制作的安培检测池可以解决分离毛细管与工作电极对接困难的问题,其工作电极可以方便的插入分离毛细管而不碰壁。组装了一套毛细管电泳安培检测系统,并利用该系统分离检测了三中种对苯二酚,结果令人满意。此外,我们通过对电极的改进,削弱了在毛细管电泳安培检测中存在的峰扩展现象,进一步提离了分离效率。 第三部分 在自组装的毛细管电泳安培系统上,进行了毛细管电泳安培检测在药物分析中的方法学研究,建立了此种药物的毛细管电泳安培检测方法。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=18768]毛细管电泳的发展历史[/url]来源于中国色谱网。

  • 08年的 毛细管电泳技术发展及应用前景

    3的情况下,其内表面带负电,和缓冲液接触时形成双电层,在高压电场的作用下,形成双电层一侧的缓冲液由于带正电荷而向负极方向移动形成电渗流。同时,在缓冲液中,带电粒子在电场的作用下,以不同的速度向其所带电荷极性相反方向移动,形成电泳,电泳流速度即电泳淌度。在高压电场的作用下,根据在缓冲液中各组分之间迁移速度和分配行为上的差异,带正电荷的分子、中性分子和带负电荷的分子依次流出,带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳淌度和电渗流的矢量和,各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离;在毛细管靠负极的一端开一个视窗,可用各种检测器。目前已有多种灵敏度很高的检测器为毛细管电泳提供质量保证,如紫外检测器(UV)、激光诱导荧光检测器(LIF)、能提供三维图谱的二极管阵列检测器(DAD)以及电化学检测器(ECD)。由于毛细管的管径细小、散热快,即使是高的电场和温度,都不会向常规凝胶电泳那样使胶变性,影响分辨率。 毛细管电泳技术的分离模式和检测模式的发展同样也是多方面的,经典的分离模式有毛细管区带电泳、毛细管胶束电动色谱、毛细管凝胶电泳等;新方法的发展研究难度大,但近年来却有不小的进展,其中建立新的分离模式和联用技术最为突出。比如建立了阵列毛细管电泳(CAE),亲和毛细管电泳技术(ACE),芯片毛细管电泳(CCE),非水毛细管电泳技术(NACE)。毛细管电泳技术发展迅速,是色谱最活跃的领域之一。一般地说, 这种发展主要涉及毛细管电泳的分离模式、进样技术和检测器。一、毛细管电泳技术分离模式:1、毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis, CZE)毛细管区带电泳是以具有pH缓冲能力的电解质溶液为载体,以毛细管为分离室的一种高压区带电泳,是应用最早也最为广泛的一种分离模式。其分离原理是根据被分析物的电泳淌度不同实现分离。在外加电场作用下,具有不同电泳淌度的分离对象将在彼此分开的区带中迁移,而具有相同电泳淌度分离对象将在同一个区带中共迁移。毛细管区带电泳除具有一般的电泳迁移外,还受到电渗的影响。电渗流指的是溶液在外加电场作用下整体向一个方向运动的现象, 它是伴随着电泳而产生的一种电动现象。在毛细管电泳分离中起着重要作用。在毛细管区带电泳中,毛细管内壁如果没有进行修饰,正离子迁移的方向与电渗方向一致,负离子迁移的方向与电渗方向相反。因此,正离子在毛细管的迁移速度加快, 负离子在毛细管的迁移速度减慢。多数情况下,电渗的速度比电泳速度快5-7倍,故在毛细管中负离子也总是向负极移动。所以在毛细管区带电泳中利用电渗流可将正/负离子和中性分子一起朝一个方向。如阴极方向产生差速迁移。在一次毛细管区带电泳操作中同时完成正/负离子的分离分析。 需要说明的是,分析阳离子时,由于电渗流方向与离子移动的方向一致,不必处理毛细管内壁;但分析阴离子时,电渗流方向通常与离子移动的方向相反。故必须用烷基铵盐,如十二烷基三甲基溴化铵类物质处理毛细管内壁,以使电渗流反向。2、胶束电动毛细管色谱(Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography, MECC)1984 年Terabe 等首次提出MECC 模式, 采用十二烷基硫酸钠(SDS) 作为表面活性剂形成准固定相, 并加入电中性的环糊精, 分离强疏水性的多环芳烃。MECC 模式是基于CZE, 在运行缓冲液中加入相当浓度的表面活性剂, 当表面活性剂的浓度高于胶束临界浓度时, 表面活性剂的单体就聚集形成球形胶束而起准固定相的作用。常用的表面活性剂有阳离子表面活性剂如溴化十六烷基三甲基铵(CTAB )、阴离子表面活性剂如十二烷基硫酸钠(SDS)、胆汁酸盐(SC) 或去氧胆酸盐(SDC) , 在近期报道中也有用混合胶束作为准固定相。实际操作中,应根据所分离成分的性质选择不同的表面活性剂。在CZE 中无法分离的中性粒子可按自身疏水性的不同在M ECC 中得以分离, 扩展了毛细管电泳的应用范围,尤其在应用于天然药物及其制剂中有效成分——生物碱、黄酮类化合物、蒽醌类化合物等分析上有突出表现。3、毛细管凝胶电泳(Capillary Gel Electrophoresis, CGE)凝胶电泳在传统电泳中的应用最广泛。凝胶是一种抗对流介质,并具有分子筛作用,常用的凝胶有聚丙烯酞胺(polyacrylamide)和琼脂糖(agarose),应用最多的是前者。在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶。主要用于DNA、RNA片段分离和顺序、PCR产物分析及蛋白质等大分子化合物的检测。4、毛细管电色谱,(Capillary Electrochromatography, CEC)毛细管电色谱法( CEC) 是在毛细管中填充或在毛细管壁涂布、键合色谱固定相, 用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相的一种液相色谱法, 是高效液相色谱法和高效毛细管电泳的有机结合。它不仅克服了液相色谱中压力流本身流速不均匀引起的峰扩展的问题,而且峰扩展只与溶质扩散系数有关, 从而获得了接近于毛细管电泳水平的高柱效, 同时还具备了液相色谱的选择性。在CEC 中, 按照固定相的装填方式不同可以分为: 填充毛细管电色谱( PCCEC) , 开管毛细管电色谱( OTCEC) , 整体式毛细管电色谱( MCEC) 。PCCEC 是将固定相装填在毛细管中, OTCEC 是将固定相涂渍或键合在毛细管内壁上, MCEC 是通过在毛细管内原位聚合或固化的方法, 制成的具有多孔结构的整体式固定相。CEC还具有其自身的特点,其采用高压直流电源代替高压泵, 用电渗流来驱动流动相, 流速在管中不是呈抛物线轮廓, 而是呈扁平的塞子流型, 因而在毛细管中没有流速梯度, 谱带展宽效应十分小, 这是CEC 比HPLC 柱效高的根本原因。CEC 没有背压问题, 可以使用粒度更小的填料与更长的毛细管柱, 具有更高的分辨率。在高pH 值下, 毛细管内壁硅醇基的电离度大, 电渗流也大, 可以解决中性化合物的分离问题, 有利于与质谱仪联用; 在低pH 值条件下, 如果选择合适的填料还可以将带电组分很好地分离。此外, 在加电压的同时, 又可附加一定的压力驱动流动相, 这样既可避免分离过程中气泡的产生, 提高稳定性, 又可用压力来控制流速, 缩短分析时间, 实现梯度洗脱。因此,CEC在生物医药与环境分析等领域具有广泛的应用前景。5、毛细管等电聚焦电泳(Capillary Isoelectric Focusing, CIEF)CIEF 最早由Hjertén 等根据平板等电聚焦电泳( IEF) 的原理建立。它是将带有两性基团的样品、载体两性电解质、缓冲剂和辅助添加剂的混合物注入毛细管内,当在毛细管两端加上直流电压时,载体两性电解质可以在管内形成一定范围的pH 梯度,样品组分依据其所带电性向阴极或阳极泳动,柱内pH 值与该组分的等电点(pI) 相同时,溶质分子的净电荷为零,宏观上该组分将聚集在该点不再进一步

  • 毛细管电泳法的特点&优点

    3的情况下,其内表面带负电,与缓冲液接触时形成双电层,在高压电场作用下,形成双电层一侧的缓冲液由于带正电而向负极方向移动,从而形成电渗流。同时,在缓冲溶液中,带电粒子在电场作用下,以各自不同速度向其所带电荷极性相反方向移动,形成电泳。带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳和电渗流的矢量和。各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离。 目前,毛细管电泳的分离模式有以下几种。 (1)毛细管区带电泳,用以分析带电溶质。为了降低电渗流和吸附现象,可将毛细管内壁涂层。 (2)毛细管凝胶电泳,在毛细管中装入单体,引发聚合形成凝胶,主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质,如葡聚糖、聚环氧乙烷,装人毛细管中进行分析,称毛细管无胶筛分电泳,故有时将此种模式总称为毛细管筛分电泳,下分为凝胶和无胶筛分两类。 (3)胶束电动毛细管色谱,在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基硫酸钠,形成胶束,被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移,达到分离。本模式能用于中性物质的分离。 (4)亲和毛细管电泳,在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基,以亲和力的不同达到分离目的。 (5)毛细管电色谱,是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相,以电渗流为流动相驱动力的色谱过程,此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制。 (6)毛细管等电聚焦电泳,是通过内壁涂层使电渗流减到最小,再将样品和两性电解质混合进样,两个电极槽中分别为酸和碱,加高电压后,在毛细管内建立了pH梯度,溶质在毛细管中迁移至各自的等电点,形成明显区带,聚焦后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值使溶质通过检测器。 (7)毛细管等速电泳,采用先导电解质和后继电解质,使溶质按其电泳倘度不同得以分离。 以上各模式以(1)、(2)、(3)种应用较多。 电极槽和毛细管内的溶液为缓冲液,可以加入有机溶剂作为改性剂,以及加入表面活性剂,称作运行缓冲液。运行缓冲液使用前应脱气。电泳谱中各成分的出峰时间称迁移时间。胶束电动毛细管色谱中的胶束相当于液相色谱的固定相,但它在毛细管内随电渗流迁移,故容量因子为无穷大的成分最终也随胶束流出。其他各种参数都与液相色谱所用的相同。 一、对仪器的一般要求 所用的仪器为毛细管电泳仪。正文中凡采用毛细管电泳法测定的品种,其所规定的测定参数,除分析模式、检测方法(如紫外光吸收或荧光检测器的波长、电化学检测器的印加电位等)应按照该品种项下的规定外,其他参数如毛细管内径、长度、缓冲液的pH值、浓度、改性剂添加量、运行电压或电流的大小、运行的时间长短、毛细管的温度等,均可参考该品种项下规定的数据,根据所用仪器的条件和预试验的结果,进行必要的调整。 二、系统适用性试验 同高效液相色谱法项下,按各品种项下的要求,进行预试验,并调节各运行参数使达到规定指标,方可正式测定。 三、测定法 同高效液相色谱法项下。目前毛细管电泳仪的进样精度较高效液相色谱法低,定量分析时以用内标法为宜。

  • 毛细管电泳简介

    毛细管电泳简介

    [b]一、毛细管电泳的原理简介:毛细管电泳[/b]又称“高效毛细管电泳 ”,指以高压电场为驱动力,以[b]毛细管[/b]为分离通道,依据试样中各组分[b]间淌度和分配行为[/b]上的差异而实现分离的一种分离技术。[align=center][img=,427,360]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212291436449476_2284_3237657_3.jpg!w427x360.jpg[/img][b]图1 毛细管电泳简易装置[/b][/align][align=left][b]二、毛细管电泳的专业术语:[/b][/align][b][/b][align=left][b]1)电泳:[/b]在电解质溶液中,[b]带电粒子[/b]在[b]电场[/b]作用下,以[b]不同的速度[/b]向其所带电荷[b]相反方向迁移[/b]的现象叫[b]电泳[/b]。[/align][align=left][b]2)电渗:[/b]在充满电解质溶液的毛细管柱中,柱内层氧化硅与溶质的界面上形成[b]双电层[/b]。当[b]高电压[/b]通过此含有缓冲溶液的[b]毛细管柱[/b]时,而此时双电层中的水合阳离子引起[b]流体整体[/b]朝负极方向[b]移动的现象叫电渗[/b]。[/align][align=left][b]3)电渗流(EOF):[/b]当高电压通过含有缓冲溶液的毛细管柱时,管内的[b]溶质[/b]向阴极或阳极[b]移动[/b],产生[b]电渗流[/b]。在柱内层氧化硅与溶质的界面上形成[b]双电层[/b]是[b]电渗流[/b]产生的原因。[/align][align=center][img=,526,231]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212291441064961_4781_3237657_3.jpg!w526x231.jpg[/img][b]图2 毛细管双电层与电渗流示意[/b][/align][align=left]粒子在电解质中的[b]迁移速度[/b]等于[b]电泳和电渗流(EOF)[/b]两种速度的[b]矢量和[/b]。[/align][align=left]阳离子的移动方向和电渗流一致,最先流出;中性粒子的电泳流速度为“0”,其迁移速度等于电渗流速度;阴离子的移动方向和电渗流相反,但因电渗流速度一般都大于电泳速度,它将在中性粒子之后流出,从而实现分离。[/align]

  • 求助 毛细管电泳仪不出峰

    各位大侠们,,,我们实验室现有一台 彩陆高效毛细管电泳仪cl1030现在出现的问题是进样后电泳仪不出峰但是我直接把样品用注射器推进柱子 约5s,,,,而后再换上缓冲溶液 不加高压电 也可以看到样品的一个很大的峰出现这种现象的可能原因有哪些?????求助各位大侠

  • 【资料】-毛细管电泳与质谱联用技术

    [i]国外医学临床生物化学与检验学分册;2002年,第23卷,第6期:352-353[/i][b]毛细管电泳与质谱联用技术[/b][i]李廷富[/i]摘  要:毛细管电泳与质谱联用技术是近年来发展起来的一种新型分离检测技术。它综合了毛细管电泳的高效、快速与质谱强大的检测功能等优点,广泛应用于生命科学研究各领域,成为分析生物大分子的重要工具之一。关键词:毛细管电泳 ;质谱;预浓缩  毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)是 80 年代初发展起来的一种基于待分离物组份间淌度和分配行为差异而实现分离的电泳新技术。具有快速、高效、分辨率高、重复性好、易于自动化等优点。质谱分析技术(MS)是通过对样品离子的质量和强度的测定进行定量和结构分析的一种分析方法。具有分析灵敏度高、速度快等优点。这两种技术的联用 (CE/ MS)综合二者优点成为分析生物大分子物质的有力工具。本文对近年来 CE/ MS中的接口及样品预浓缩技术作一综述。1  仪器结构  任何一种类型质谱仪诸如傅立叶变换离子回旋加速共振质谱(FT-ICR) 、飞行时间质谱、离子陷阱质谱和三级四极杆质谱等均可与 CE联用,但四极杆质谱与 CE 联用最常见。在各种 CE与质谱联用中,区带毛细管电泳(CZE) 最常用。其它如毛细管等电聚焦电泳、胶束电动毛细管色谱、毛细管凝胶电泳、毛细管等速电泳等应用较少。电子喷雾离子化 (Electro-sprayIonization, ESl) 是质谱首选的离子源。其理由有二 : ESI 可用于检测多种高质量的带电分子;其次,从 CE 分离出来的分子经过接口可以直接进入质谱仪。2  接口技术CE末端接口是影响整个检测的一个关键因素,所有 CE/ESI-MS 接口的目标都是为了获得稳定的雾流 (Spray-Current)和高效的离子化。由于 CE需要较高离子强度、挥发性低的缓冲液,而 ESI需要相对较低的盐浓度才能获得好的雾化及离子化。因此接口技术必须优化,使其尽可能提供好的电子接触,同时尽量减少对 CE分离效率的影响。此外,对于每一种接口应选择相应的缓冲液。CE/ ESI-MS 接口共有三种类型:同轴液体鞘流(Coaxial Liquid Sheath Flow) 、无鞘接口、液体连接。2.1  同轴液体鞘流  此种类型接口是最常见的连接 CE 与ESI-MS 的方法。该接口是一个同心的不锈钢毛细管套在电泳毛细管末端,鞘内充有鞘液。再在此不锈钢套外再套一个同心的钢套,鞘内通鞘气。鞘液与毛细管电泳缓冲液液体在尖端混合,同时被鞘气雾化。鞘液流量通常为每分钟纳升至数微升之间,但却显著高于 CE 流速。由于鞘液的稀释作用,雾流稳定性得到改善。理想的鞘液缓冲液盐浓度应在高分离 (高盐浓度)和高雾化(低盐浓度)间优化。由于鞘液在雾化过程中也完全蒸发,鞘液的稀释并不显著降低检测灵敏度。但混合液体的体积应尽可能小,以避免谱带展宽。

  • 毛细管电泳与质谱接口问题

    毛细管电泳与质谱接口讨论了很多年,但真正能用起来的几乎没几个。大多都是风声大雨点小,那么小弟想问问,毛细管电泳与质谱接口存在什么问题使得其难以实现?如今毛细管电泳与质谱接口又有何发展?

  • MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪

    技术参数 1.MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪—多功能化学发光检测仪: * 测量动态范围:大于5个数量级 * 测量精度优于0.05% 2.MPI-A/B型多功能化学发光检测器: * 波长范围:300—650nm * 灵敏度:SP1000A/Lm 3.MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪—电化学分析仪: * 电位范围:-10V—10V * 电流范围:±250 mA * 参比电极输入阻抗:10E12Ω * 灵敏度:1x10E-12—0.1A 共16个量程 * 输入偏置电流:50pA * 电位增量:1mV * 扫描速率:0.0001—200V/S * 测试方法:循环伏安法(CV),线性扫描伏安法(LSV),计时电流法(CA) 计时电量法(CC),控制电位电解库伦法(BE),开路电压—时间曲线(OCPT) 4.MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪—毛细管电泳高压电源: * 输出电压:0—20KV * 输出电流:0—300uA 技术文章 1.毛细管电泳电化学发光检测技术及其在生命科学中的应用2.Analytical applications of the electrochemiluminescence of tris(2,2''-bipyridyl) ruthenium and its derivatives 主要特点 1.用于药物、氨基酸、多肽、蛋白质及核酸检测分析 2.用于蛋白质与药物、核酸相互作用研究。 仪器介绍 电化学发光检测是近几年发展迅速的毛细管电泳分析中的一种新型检测方法,它将毛细管的分离技术与电化学发光检测相结合,可在临床分析及医药、病毒、免疫等科学试验中大大简化分析的技术难度,提高分析结果的准确性。   MPI-A型毛细管电泳电化学发光检测仪系结合毛细管电泳分离和电化学发光检测于一体的多测试界面、多分析参数、多控制部件系统集成仪器。它可同时对被测样品实现毛细管电泳在线分离、电化学发光实时检测,并同步显示化学发光信号、电化学电位扫描信号、电化学电极电流信号及毛细管电泳电流信号并对其进行详细分析。

  • 【资料】毛细管电泳的基本原理

    分离的原因:电泳迁移,电渗迁移电泳迁移:在高压电场下,带电离子向相反的方向移动。电渗迁移:当毛细管内充满缓冲溶液时,毛细管壁上的硅羟基发生解离,生成氢离子溶解在溶液中,这样就使毛细管壁带上负电荷与溶液形成双电层,在毛细管的两端加上直流电场后,带正电的溶液就会整体的向负极端移动,这就形成了电渗流。在操作缓冲溶液中,带电粒子的运动速度等于电泳速度和电渗速度的矢量和,电渗速度一般大于电泳速度,因此即使是阴离子也会从阳极端流向阴极端。加大缓冲溶液的酸度、在缓冲溶液中加入有机试剂都会减少硅羟基的解离,减小电渗流。分离模式 毛细管电泳的分离模式有以下几种。 (1)毛细管区带电泳(CZE) 将待分析溶液引入毛细管进样一端,施加直流电压后,各组分按各自的电泳流和电渗流的矢量和流向毛细管出口端,按阳离子、中性粒子和阴离子及其电荷大小的顺 序通过检测器。中性组分彼此不能分离。出峰时间称为迁移时间(tm),相当于高效液相色谱和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中的保留时间。 (2)毛细管凝胶电泳(CGE) 在毛细管中装入单体和引发剂引发聚合反应生成凝胶,这种方法主要用于分析蛋白质、DNA等生物大分子。另外还可以利用聚合物溶液,如葡聚糖等的筛分作用进 行分析,称为毛细管无胶筛分。有时将它们统称为毛细管筛分电泳,下分为凝胶电泳和无胶筛分两类。 (3)毛细管等速电泳(CITP) 采用前导电解质和尾随电解质,在毛细管中充入前导电解质后,进样,电极槽中换用尾随电解质进行电泳分析,带不同电荷的组分迁移至各个狭窄的区带,然后依次通过检测器。 (4)毛细管等电聚焦电泳(CIEF) 将毛细管内壁涂覆聚合物减小电渗流,再将样品和两性电解质混合进样,两个电极槽中分别加入酸液和碱液,施加电压后毛细管中的操作电解质溶液逐渐形成pH梯 度,各溶质在毛细管中迁移至各自等电点(pI)时变为中性形成聚焦的区带,而后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值的办法使溶质通过检测器。 (5)胶束电动毛细管色谱(MEKC或MECC) 当操作缓冲液中加入大于其临界胶束浓度的离子型表面活性剂时表面活性剂就聚集形成胶束,其亲水端朝外憎水非极性核朝内,溶质则在水和胶束两相间分配,各溶 质因分配系数存在差别而被分离。对于常用的阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠,进样后极强亲水性组分不能进入胶束,随操作缓冲液流过检测器(容量因子k′= 0);极强憎水性组分则进入胶束的核中不再回到水相,最后到达检测器(k′=∞)。其他常用的胶束试剂还有阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵,胆酸 等。 (6)毛细管电色谱(CEC) 将细粒径固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂覆固定相以电渗流驱动操作缓冲液(有时再加辅助压力)进行分离。

  • 毛细管电泳-质谱联用

    Olivares,Smith和Henion等分别在1987-1988年提出毛细管电泳-质谱联用(CE-MS)技术,在CE中,紫外检测器由于通过样品的光程较短导致灵敏度较低,特别对一些紫外吸收较弱的化合物的检测。近年由于大气压电离(API)、电喷雾电离(ESI)及新型质谱仪的快速扫描等新技术的出现,足以满足CE窄峰形的特点,使得CE-MS,CE-MS-MS均得到快速发展,并正在成为实验室的重要常规分析方法之一。质谱检测器有如下特点:1)与紫外,激光诱导荧光和电化学检测器相比,更是一种通用型检测器;2)由于质谱的选择性和专一性,弥补了样品迁移时间变化的不足;3)质谱检测的灵敏度优于紫外分光光度法;4)质谱在检出峰的同时还能给出分子量和结构信息;5)某些质谱技术可以给出多电荷离子,对分析大分子如糖,蛋白质等与CE联用更有利。CE的许多模式,如CZE,MEKC,CITP,CGE和ACE以及CEC等都能与质谱检测器成功地连接,其中应用较多的仍是CZE-MS。MEKC由于添加表面活性剂形成的胶束会抑制样品离子的信号,所以MEKC-MS使用较少。与CE相连的MS最常用的电离方式是ESI,可以直接把样品分子从[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]转移到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url],而且可以测定分子量较大的样品。与CE相连的质谱仪主要有三元四极(QQQ)质谱仪,离子阱(TTT)质谱仪,傅立叶转换离子回旋加速器共振(FT-ICQ)质谱仪和飞行时间(TOF)质谱仪等,前两者较为常用。CE-MS常用的接口有无套管接口,液体接合接口和同轴套管流体接口等三种,后两种接口均在毛细管流出部分引入补充流体,以维持一个稳定的电喷雾流。CE-MS所使用的缓冲液最好是易挥发、低浓度,可获得较好的离子流响应。与质谱相连的CE中常使用加入较高含量的有机溶剂(例如甲醇、乙睛)的缓冲液或者使用非水毛细管电泳,有利于离子喷雾过程,可以增进检测的灵敏度。天然植物药各组分之间以及药物与其代谢产物之间往往结构比较相似,用CE-MS无论对分离及鉴定都显示了优势。Henion等用同轴套管流体接口,全扫描质谱方式分离了8种合成的异哇琳生物碱,对威氏黄柏(Phenllodendron wilsonii)树皮中的8种组分进行了分离并鉴定了其中的6种。Unge等用同样接口将卢竹碱等巧种叫垛类生物碱和生物胺基线分离。此外,离子喷雾(Ionspray,ISP),大气压化学电离(APCI)等也被应用在CE-MS中。

  • 高压电源如何选型?

    [color=#333333]高压电源选型,是较为复杂的一项工作,如何选择威思曼高压电源的高压电源产品?现概述如下:[/color][color=#333333]  1.确定您需要的高压电源的最高输出电压。威思曼高压电源的所有产品,都是从最低电压到最高输出电压连续可调。您只要确认您需要的高压电源的最高电压就可以了,如果您实际使用40KV,我们建议您选择45KV就足以,不需要选择太高的电压。[/color][color=#333333]  2.确定您需要的高压电源的最高输出电流。这块我们建议也不需要留太大的余量,倒是需要在订货的时候,您将您的使用要求,及您实际使用工作状况较为详细的描述给威思曼高压电源的销售工程师,有的工作状况下,不是电流越大就能很好的完成您的工作,比如静电纺丝,耐压试验,电容充放电等复杂工作状况,需要高压电源有特别的保护,单纯依靠增加电流,增加功率,增加了成本,但并不见得能出色完成工作。[/color][color=#333333]  3.确定您需要的高压电源的最高输出功率。功率=电压X电流,但某些特殊高压电源,比如X射线管高压电源,功率,电压,电流可以按照您的需要提出,在不超出功率的要求下,电压电流可以有多种组合。[/color][color=#333333]  4.体积:根据您的需要,选择合适体积的高压电源,同等电压,电流,功率的情况下,体积越小,价格越贵。[/color][color=#333333]  5.稳定度:根据您的需要,选择合适的稳定度,同等电压,电流,功率的情况下,稳定度越高,价格越贵。[/color][color=#333333]  6.温度漂移:指高压电源的温度每变化1摄氏度,输出电压的变化情况。同等电压,电流,功率的情况下,温度漂移越小,高压电源价格越贵。[/color][color=#333333]  7.纹波:指高压电源的开关噪声和交流纹波的总和。根据您的需要,选择合适的纹波要求,同等电压,电流,功率的情况下,纹波越小,价格越贵。[/color][color=#333333]  8.接口形式:威思曼高压电源的高压电源接口有模拟接口,数字接口。威思曼高压电源的模拟接口有不同的基准电压,用户根据需要,可以选择给定和显示电压为3V,4.5V,5V,10V等任何一种。威思曼高压电源数字接口包含:USB,RS-232,RS-422,网口,CAN总线,您可以根据您的需求选择。[/color][color=#333333]  9.高压电缆:根据您的需求,选择合适的高压电缆。威思曼高压电源有柔性高压电缆,普通高压电缆。[/color][color=#333333]  10.其它需求:根据需要,您提出的其他特殊需求,威思曼高压电源会按照您的需求制作。[/color]

  • 【求助】如何选择毛细管电泳的正负电源

    本人是新生,特来请教。我们在使用毛细管电泳的时候,通常会提供正电源和负电源,我们应该怎么选啊? 还有我看书知道 毛细管电泳分离的原理是 在柱子两端,一段是正电压,一段是负电压,这样才能工作。那提供正负电源又和这个是什么关系?还望各位 大虾 指教指教。

  • 【分享】毛细管电泳工作原理(capillary electrophoresis, CE)

    不知有没有重复。 毛细管电泳(capillary electrophoresis, CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE), 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离, 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten 建立了毛细管等电聚焦, Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳。1988~1989年出现了第一批毛细管电泳商品仪器。短短几年内, 由于CE符合了以生物工程为代表的生命科学各领域中对多肽、蛋白质(包括酶,抗体)、核苷酸乃至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求, 得到了迅速的发展。  CE是经典电泳技术和现代微柱分离相结合的产物。CE和高效液相色谱法(HPLC)相比, 其相同处在于都是高效分离技术, 仪器操作均可自动化, 且二者均有多种不同分离模式。二者之间的差异在于:CE用迁移时间取代HPLC中的保留时间, CE的分析时间通常不超过30min, 比HPLC速度快;对CE而言, 从理论上推得其理论塔板高度和溶质的扩散系数成正比, 对扩散系数小的生物大分子而言, 其柱效就要比HPLC高得多;CE所需样品为nl级, 最低可达270fl, 流动相用量也只需几毫升, 而HPLC所需样品为μl级, 流动相则需几百毫升乃至更多;但CE仅能实现微量制备, 而HPLC可作常量制备。  CE和普通电泳相比, 由于其采用高电场, 因此分离速度要快得多;检测器则除了未能和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]及红外光谱连接以外, 其它类型检测器均已和CE实现了连接检测;一般电泳定量精度差,而CE和HPLC相近;CE操作自动化程度比普通电泳要高得多。总之, CE的优点可概括为三高二少:高灵敏度, 常用紫外检测器的检测限可达10-13~10-15mol,激光诱导荧光检测器则达10-19~10-21mol;高分辨率, 其每米理论塔板数为几十万;高者可达几百万乃至千万, 而HPLC一般为几千到几万;高速度, 最快可在60s内完成, 在250s内分离10种蛋白质, 1.7min分离19种阳离子, 3min内分离30种阴离子; 样品少, 只需nl (10-9 L)级的进样量;成本低, 只需少量(几毫升)流动相和价格低廉的毛细管。由于以上优点以及分离生物大分子的能力, 使CE成为近年来发展最迅速的分离分析方法之一。当然CE还是一种正在发展中的技术, 有些理论研究和实际应用正在进行与开发。   “CE”统指以高压电场为驱动力, 以毛细管为分离通道, 依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。其仪器结构包括一个高压电源, 一根毛细管, 一个检测器及两个供毛细管两端插入而又可和电源相连的缓冲液贮瓶。在电解质溶液中, 带电粒子在电场作用下, 以不同的速度向其所带电荷相反方向迁移的现象叫电泳。  CE所用的石英毛细管柱, 在pH3情况下, 其内表面带负电, 和溶液接触时形成了一双电层。在高电压作用下, 双电层中的水合阳离子引起流体整体地朝负极方向移动的现象叫电渗, 粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗流(EOF)两种速度的矢量和, 正离子的运动方向和电渗流一致, 故最先流出;中性粒子的电泳流速度为“零”,故其迁移速度相当于电渗流速度;负离子的运动方向和电渗流方向相反, 但因电渗流速度一般都大于电泳流速度, 故它将在中性粒子之后流出, 从而因各种粒子迁移速度不同而实现分离。  电渗是CE中推动流体前进的驱动力, 它使整个流体像一个塞子一样以均匀速度向前运动, 使整个流型呈近似扁平型的“塞式流”。它使溶质区带在毛细管内原则上不会扩张。但在HPLC中,采用的压力驱动方式使柱中流体呈抛物线型, 其中心处速度是平均速度的两倍, 导致溶质区带本身扩张, 引起柱效下降, 使其分离效率不如CE。  理论分析表明, 增加速度是减少谱带展宽、提高效率的重要途径, 增加电场强度可以提高速度。但高场强导致电流增加, 引起毛细管中电解质产生焦耳热(自热)。自热将使流体在径向产生抛物线型温度分布, 即管轴中心温度要比近壁处温度高。因溶液粘度随温度升高呈指数下降, 温度梯度使介质粘度在径向产生梯度, 从而影响溶质迁移速度, 使管轴中心的溶质分子要比近管壁的分子迁移得更快, 造成谱带展宽, 柱效下降。  一般来说温度每提高1℃, 将使淌度增加2% (所谓淌度, 即指溶质在单位时间间隔内和单位电场上移动的距离)。此外, 温度改变使溶液pH值、粘度等发生变化, 进一步导致电渗流、溶质分子的电荷分布(包括蛋白质的结构)、离子强度等的改变, 造成淌度改变、重复性变差、柱效下降等现象。降低缓冲液浓度可降低电流强度, 使温差变化减小。高离子强度缓冲液可阻止蛋白质吸附于管壁, 并可产生柱上浓度聚焦效应, 防止峰扩张, 改善峰形。减小管径在一定程度上缓解了由高电场引起的热量积聚, 但细管径使进样量减少, 造成进样、检测等技术上的困难。因此, 加快散热是减小自热引起的温差的重要途径。液体的导热系数要比空气高100倍。现在有的采用液体冷却方式的毛细管电泳仪可使用离子强度高达0.5mol/L的缓冲液进行分离, 或使用200 μm直径的毛细管进行微量制备, 仍能达到良好的分离效果和重现性。

  • 威思曼高压电源如何改变输出极性?

    大部分高压电源使用称为电压倍压整流器的电路来产生所需的高压输出。 电压倍压整流器电路由电容器和二极管排列而成。二极管的方向决定设备的输出极性。在上面的示例中,所示的二极管将产生相对于地面的正极输出极性。如果每个二极管的方向均逆转,电压倍压整流器将会将产生相对于地面的负极输出电压。 半波倍压,如果总共使用四个二极管,就是2级。全波电压倍压整流器更有效,并且使用更多电容器和二倍多的二极管。为了生成威思曼电源通常的高压,许多倍压级串联在一起。如果制作一个 12 级全波倍压,共需要 48 个二极管。 通常情况下,用于构成电压倍压整流器组件的电容和二极管直接焊接到单个或者多个(有时)印刷线路板。该组件常封装起来以实现高压绝缘目的。 为简化极性反转过程(如在 DL 系列中),还提供了第二个 8kV以上的“反极”倍压模块。交换倍压模块时只需要一把螺丝刀和几分钟时间。由于采用简化设计,模块式电源通常不能在使用现场改变极性。

  • 【转帖】毛细管电泳及其应用(capillary electrophoresis,CE)

    【转帖】毛细管电泳及其应用(capillary electrophoresis,CE)

    [b][color=#800080]一、毛细管电泳的概述:[/color][/b]毛细管电泳又称高效毛细管电泳,它是在熔融的石英毛细管(内径为25~100μm)中进行电泳,其管内填充缓冲液或凝胶,是近年来进展最快的分析方法之一。毛细管电泳是电泳技术和现代微柱分离相结合的产物,它具有效率更高、速度更快、样品和试剂消耗量特少的特性。毛细管电泳仪的基本结构:[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/07/201007071040_229156_1716330_3.jpg[/img][align=center]1、高压电极槽与进样机构 2、填灌清洗机构 3、毛细管 4、检测器 5、铂丝电极 6、低压电极槽 7、恒温机构 8、记录/数据处理[/align][align=left]毛细管的结构:毛细管电泳通常使用内径为25~100μm的弹性(聚酰亚胺)涂层熔融石英管。 [/align]毛细管的特点是:容积小;侧面/截面积大而散热快、可承受高电场;可使用自由溶液、凝胶等为支持介质;在溶液介质下能产生平面形状的电渗流。

  • 【参数解读总结篇】毛细管电泳仪的技术参数解读与使用

    【参数解读】毛细管电泳仪的技术参数解读与使用毛细管电泳仪主要部件有0~30kV可调稳压稳流电源,内径小于100μm(常用50~75μm)、长度一般为30~100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器,前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。由于毛细管电泳有很多分离模式,所以不同仪器差异会很大。有些是普遍适用型,有些则具有专一性,只适用于某种模式或者某种物质的分离分析。普遍适用型的如Agilent 7100,Beckman PA800 plus,专一性的如毛细管电泳液相色谱一体机,这个就只能做电色谱(CEC),类似于HPLC,通常需要有填充物质,但又比HPLC多了个高压系统。再比如iCE280分析仪,其实是一台成像毛细管等电聚焦电泳仪,只能用于蛋白质的分离分析,分离模式固定为毛细管等电聚焦电泳(cIEF)。〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓请您来解析:1、空气制冷和冷凝液制冷,哪个效果更好?冷凝方式,液体冷凝会比较稳定,液冷效果好。只是这样一来还要另外买冷凝液,增加分析成本。2、注意过样品盘的温控范围吗?你的仪器范围多大?什么范围内才比较好?控温范围直接决定了仪器的适用范围,控温的准确度又决定了重现性的好坏,所以,这个参数至关重要。安捷伦的样品温度最低高达10度,如果做生物样品的话就被动了。beckman最低4度,比较有优势。我见过最低温度的是Lumex的毛细管电泳仪,低到-10度。控温的最高值也值得关注,如果毛细管堵住了的话,常温经常冲洗不了,这是提高温度往往会有惊喜(越高越好)。3、毛细管出口端的长度什么情况下会对分离分析产生重要影响?如何评价毛细管的质量好坏?出口端长度是指的是窗口到出口端的距离吗?会影响场强和进样量。在出口端进样模式下,出口端的长度有重要意义,因为较长的有效距离能够提供更好的分离度。4、影响仪器分离度的因素有哪些?仪器的哪些参数会影响分离度?电压、温度、管长、管内径、溶液等;仪器的温度、电压等会影响。5、目前市场上已有一些用途比较专一的毛细管电泳仪,比如毛细管电泳液相色谱一体机和毛细管等电聚焦电泳仪等。普通毛细管电泳仪如Agilent 7100和Beckman PA800 plus等也能完成以上这两种特制仪器的工作吗?可以的,还可以和质谱联用。6、谈谈你的CE仪在使用过程中容易出现的问题和解决办法。常见的是管子容易断或者污染什么的,解决办法就是“换”和“洗”。SDS-MEKC很容易有气泡,解决办法就是超声。如果毛细管里面有气泡,引起断流,断流后如果不及时发现,积聚的热量就有可能烧坏毛细管。欢迎大家参与讨论,补充自己想交流的参数,说说自己的认识或者提出自己的疑问!!!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

  • 【求购】光谱仪负高压电源替换指导

    [b][color=#ba4b01][size=4]如果你的光谱仪负高压电源,因故损坏而确实无法维修或修复,用原厂提供的原配负高压电源又太贵,可以用国产负高压电源替换。只要你提供仪器负高压电源的一些关键参数,我可以根据我个人的一些维修经验,给你一些指导性建议,帮助你想办法修复光谱仪。大家互相学习,共同提高。为了避免一些纠纷,可以把有关信息发到我的邮箱 [/size][/color][/b][email=wccd@163.com][b][color=#ba4b01][size=4]wccd@163.com[/size][/color][/b][/email][b][color=#ba4b01][size=4] 或QQ 邮箱[/size][/color][/b][email=594181191@qq.com][b][color=#ba4b01][size=4]594181191@qq.com[/size][/color][/b][/email]

  • [资料]毛细管电泳的模式及应用

    毛细管电泳模式分类毛细管区带电泳 (capillary zone electrophoresis,CZE)毛细管凝胶电泳 (capillary gel electrophoresis,CGD)、胶束电动毛细管色谱 (micellar electrokinetic capillary chromatography,MECC)、毛细管等电聚焦 (capillary bodec trie focusing,CIEF)毛细管等速电泳 (capiliary isotador-phoresis,CITP)不同的电泳模式具有不同的分离机制和应用范围一、毛细管区带电泳毛细管区带电泳 (capiliary zone electrophoresis,CZE) 是指溶质在毛细管内的背景电解质溶液中以不同速度迁移而形成一个一个独立的溶质带的电泳模式。突出特点:简单,方法限制:因中性物质的淌度差为零所以不能分离中性物质。CZE 是 CE 中最简单、应用最广泛的一种操作模式,是其他操作模式的基础。定量分析也类似于 HPLC,根据电泳峰的峰面积或峰高进行定量分析。溶质的迁移时间 为: 当 时,理论塔板数 为 (15-26)式中, 为扩散系数。溶质 1 和溶质 2 的分离度 为 (15-27)式中, 和 分别为溶质 1 和溶质 2 的淌度; 为两溶质的平均淌度。溶质的迁移时间 为: 当 时,理论塔板数 为 (15-26)式中, 为扩散系数。溶质 1 和溶质 2 的分离度 为 (15-27)式中, 和 分别为溶质 1 和溶质 2 的淌度; 为两溶质的平均淌度。二、毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳 (capillary gel electrophoresis,CGE) 是在毛细管中装入凝胶作支持物进行的电泳。凝胶物理性质及影响多孔性-起类似分子筛的作用,使溶质按分子大小逐一分离。凝胶的黏度大,可减少溶质的扩散,使被分离组分峰形尖锐,能达到 CE 中最高的柱效。毛细管凝胶柱的制备:常用聚丙烯酰胺在毛细管内交联制成凝胶柱.但制备麻烦,使用寿命短。用途:可分离分析蛋白质和 DNA 的分子量或碱基数用黏度低的线性聚合物,如甲基纤维素代替聚丙烯酰胺,可形成无凝胶但有筛分作用的无胶筛分 (nongel sieving) 介质。比凝胶柱制备简单,寿命长,但分离效能较凝胶柱略差。三、毛细管等电聚焦毛细管等电聚焦 (capillary isoelectric focusing,CIEF)分离的基本原理:基于两性电介质在分离介质中的迁移造成的 pH 梯度,由此可以使物质根据它们不同的等电点达到分离的目的。具有一定等电点的物质顺着这一梯度迁移到相当于其等电点的那个位置,并在此停下,产生非常窄的聚焦带,并使不同等电点的蛋白聚焦在不同位置上,如图 15-10(b) 所示。 CIEF 有极高的分辨率,例如可以分离等电点差异小于 0.01pH 单位的两种蛋白质。为了在毛细管内实现等电聚焦过程,必须减小电渗流,使已聚焦的区带移动,接受检测而又不引起很大的区带展宽。一般认为将亲水聚合物质键合到毛细管管壁表面可减小电渗流,以防吸附及破坏稳定的聚焦区带;通过调节两性电介质溶液可使聚焦区带移动。四、毛细管等速电泳毛细管等速电泳 (capillary isouchor-phoresis,CITP) 先导电介质和尾随电解质选择与分离原理:选用淌度比样品中任何待测组分的淌度都高的电解质作为先导电介质用淌度比样品中任何待测组分的淌度都低的电解质作为尾随电解质夹在前导电解质和尾随电解质之间的样品组分根据各自的有效淌度不同而分离达到平衡时,各组分区带上电场强度的自调节作用使各组分区带具有相同的迁移速率如图 15-10(c) 用途:分离离子型物质。五、胶束电动毛细管色谱胶束电动毛细管色谱 (micellar eiectrokinetic capillary chromatography,MECC 又称电动色谱)原理:采用 CZE 技术并结合色谱原理而形成。它将电化合物或带电分子聚集体溶解于缓冲液以充当载体。溶质在载体 (不固定于柱的准固定相) 与周围介质 (流动相) 之间的分配,同时两相在高压电场中具有不同的迁移,如图 15-11 所示。

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