如何选择动物血细胞分析仪人的血液和动物血液很多形态都不同的,简单的例子,很多动物的红细胞有核,人血红细胞有核的很少,同剂量同浓度的溶血剂可以完全破坏人血红细胞但对某些动物血却无能为力,那么就会再白细胞的lym前出现大量的影子图形,会造成一些静态界标的设备白细胞计数假性增高,甚至影子细胞与lym重叠,造成单项分类偏高。如果改变溶血剂浓度或者剂量,那么白细胞的破坏也会变得明显,这样就会造成分类严重不准确。其实,就动物学来讲,计数和分类的准确还是以五分类为标准,三分类确实很勉为其难的。就仪器本身来说没有区别的,所谓区别就是正常值范围,分类原则,以及提示界定方面,同时相应的试剂和孵育时间等也是有区别的。而这些标准都是以默克兽医手册来作为指导的。除了为动物开发的五分类能够提供较为准确的计数和分类外,其他2、3分类的动物血球或者动物模式血球仅仅起到筛查参考作用,就像人用血球一样,血球本身就是筛查机器,确诊还是要结合其他方法的。动物的血和人的血没有什么大的区别,主要区别在成熟和幼稚上,人的成熟,动物的幼稚,动物的血球的在血小板,和红细胞上来看,它们的体积比较接近,在白细胞上来看各个细胞的区别不明显,不容易分类,所以只有在中国做动物的血球计数仪时有分类,在其他国家是不准用人用血球计数仪做动物的白血球分类的,动物和人的最大区别是红血球的体积上,和白细胞的分类组成上。做动物的分类最好用5分类血球,我们国家的做动物的仪器号称很多,其实真正的是做人的仪器来代替做动物的,虽然可以做象狗这样和人的血象差不多的哺乳类动物,但其实是很勉强的,也没有相应的试剂配套。如果你正在考虑买一台动物血细胞分析仪,请坚持要求销售商允许您和您的职员亲自操作这台仪器。从您的实验角度来评估它的:• 操作简便性• 得出结果所需的时间• 所需要的样本量• 可检测的动物种类• 维修需求• 数据库容量和功能上海曼普生物科技有限公司电话:021-54281184传真:021-54390360邮箱:wanlifang221@yahoo.com.cnhttp://www.manpubio.com.cn/地址:上海徐汇区罗秀路107号501室
全自动血细胞分析仪——能依靠它们去计数吗?库尔特原理库尔特原理指出:悬浮在电解液中的颗粒随电解液通过小孔管时,在恒电流设计的电路中导致小孔管内外两电极间电阻发生瞬时变化,产生电位脉冲。脉冲信号的大小和次数与颗粒的大小和数目成正比。这主要是根据血细胞与稀释剂相比,血细胞是不良导体的特性而提出的。起初,原始的库尔特计数器只能计算和测量红细胞。后来,随着技术的不断发展和设备的不断改进,临床医生还可以利用它来计算和测量白细胞。到20世纪70年代,技术的进一步发展使技术人员能够分离血小板。全自动细胞计数器的演进传统意义上的血细胞计数器是通过研究外周血涂片,使用血细胞仪和白细胞分类计数而手动完成的(也称为100个细胞涂片分类,手动白细胞分类计数或手动计数器)。根据库尔特原理导致了库尔特计数器的发明,随后又开发出了技术先进的全自动血液细胞分析仪。自此,仪器的技术水平得到不断提高。由于技术的进步,一台仪器可以分析越来越多的参数,从而大大提高了血液检测的效率,减少在多台仪器上分析一个样品的情况。现代的细胞分析仪能够测量白细胞(WBC)、白细胞分类(五分类)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血小板体积,并且可以自动计算血细胞比容(HCT)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度,血小板比积和血小板分布宽度。自动分析仪的其他重要因素包括它们运行的速度和每批次可以处理的样本数量(大处理容量可以减少周转时间)。即时检验(POCT)即时检验([/
目前血细胞分析仪检测原理包括电学和光学两种,电学包括电阻抗法和射频电导法,光法包括激光散射法和分光光度法。电阻抗法根据Coulter原理及血细胞非传导的性质,以电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测为基础,进行血细胞计数和体积测定。当有细胞通过小孔时,由于电阻增加,于瞬间引起电压变化及通过脉冲。细胞体积越大,脉冲振幅越高,细胞数量越多,脉冲数量也越多。脉冲信号经过:放大、阈值调节、甄别、整形、计数而得出细胞技术结果。电阻抗法可准确量出细胞(或类似颗粒)的大小,是三分类血液分析仪的主要应用原理,并与光学检测原理组合应用于五分类血液分析仪中。激光散射法应用了流式细胞术检测原理及细胞通过激光束被照射时,产生与细胞特征相应的各种角度的散射光。对经信号检测器接受的散射光信息进行综合分析,即可准确区分正常类型的细胞。激光散射法在区别体积相同而类型不同的细胞特征时,比电阻抗法分群更加准确。故激光散射法已成为现代五分类血液分析仪的主要检测原理之一。射频电导法是用高频电磁探针渗入细胞膜脂质可测定细胞的导电性,提供细胞内部化学成分、细胞核和细胞质、颗粒成分等特征信息。射频电流是每秒变化大于10000次的高频交流电磁波,能够通过细胞壁。分光光度法是所有类型的血细胞分析仪检测血红蛋白的原理,它利用血红蛋白与溶血剂在特定波长下比色,吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成比例。
iCELLigence全自动细胞分析仪让您远离MTT实验不断重复还无法得到统一结果的烦恼,让您不再因只看到其中的一个点而损失了其它的细胞生物学信息而无计可施,因为它可以清楚的记录下细胞完整的一生! 一:全自动细胞分析仪仪器原理 iCELLigence实时无标记全自动细胞分析仪是一款新型的细胞分析平台,具有实时监测、高信息量、无需标记、全自动化、高灵敏度和高准确性等独特优点。该细胞分析仪通过嵌在E-plate板上孔底的微电子感应器阻抗变化去感受细胞的有无以及贴壁、黏附和生长程度的改变。在细胞毒性检测中,可实时、直观的反应细胞增殖、存活、凋亡、形态变化等细胞生物学变化。 二:全自动细胞分析仪仪器优势 iCELLigence全自动细胞分析仪的传感器阻抗技术在细胞分析中具有其独特的优势:它为整个的细胞毒性检测分析过程中提供了全程无损伤的监控,实时、连续显示的数据让您可以更加自信更加清楚的进行细胞毒性检测操作和其它的细胞分析,而不是假定细胞处于合适的处理阶段。一连串实时获取和显示的数据让您处理每一步结果都可以通过机理来预测,同时也可以结合全自动细胞分析仪实时的读数来决定传统终点细胞毒性检测分析的最佳时间点。只需几个简单的操作步骤您就可以获得高信息量的、直观的、准确的结果,就可以让您的细胞实验变得更加省时高效。 三:全自动细胞分析仪的应用领域基于iCELLigence全自动细胞分析仪的技术优势,该系统在基础生命科学领域具有广泛的应用,如细胞质量控制、细胞毒性检测、细胞粘附和细胞伸展等。
自去年我公司推出全自动核酸分析系统的免费试用后,今天我们又再次为各位老师奉上强大的细胞分析平台:一款可以解决您MTT实验烦恼、无需标记、全自动化,带给您高信息量、高灵敏度和高准确性的iCELLigence全自动细胞分析仪将会出现在您的面前。iCELLigence全自动细胞分析仪通过嵌在E-plate板上孔底的微电子感应器阻抗变化去感受细胞的有无以及贴壁、黏附和生长程度的改变,无需标记即可实时、直观的反应细胞增殖、存活、凋亡、形态变化等细胞生物学变化。iCELLigence全自动细胞分析仪的传感器阻抗技术在细胞分析中具有其独特的优势:它为整个的实验分析过程包括细胞黏附、细胞增殖和细胞融合提供了全程无损伤的监控,实时、连续显示的数据让您可以更加自信更加清楚的进行细胞操作和细胞增殖等分析,而不是假定细胞处于合适的处理阶段。一连串实时获取和显示的数据让您处理每一步结果都可以通过机理来预测,同时也可以结合iCELLigence全自动细胞分析仪连续的读数来决定传统终点细胞分析的最佳时间点。只需几个简单的操作步骤您就可以获得高信息量的、直观的、准确的结果,就可以让您的细胞增殖等分析实验变得更加省时与高效。莫再犹豫,快来参加体验吧,经历过你就会发现有时候细胞增殖等实验会是这么的easy。赶快报名,免费的试用在等着您哦···活动期间,凡是参与试用的用户均可获得昊诺斯8GU盘或瑞士军刀背包一个(奖品以实物为准)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191656_647437_1622715_3.jpg真心英雄活动第二关试用报名网址:http://www.instrument.com.cn/custom/SH100700/20130522/free.shtml另外,您也可以致电北京昊诺斯科技有限公司市场部产品负责人孙健13710746995sunjian@herosbio.com(因为区域划分,活动仅限北方区域,具体问题欢迎来电垂询)。
全自动血液分析仪是临床实验室最常用的分析仪器之一,其检测结果是否准确对疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。一、血液分析仪校准的一般要求 (一)为了保证检测结果的准确性,要求对每一台血液分析仪进行校准。仪器安装时必须由厂家进行校准并提供校准记录,否则不能用于临床标本的检测。 (二)实验室需按“建议”的要求建立适合本实验室使用的血液分析校准程序并写成文件。内容包括:使用校准物的溯源性、来源、名称及其保存方法;校准的具体方法和步骤;何时要求进行校准、由何人负责实施等。 (三)血液分析仪进行校准后,必须开展室内质量控制以监测仪器的检测结果是否发生漂移。 二、校准物
1、搅拌式动物细胞培养罐 搅拌式培养罐靠搅拌桨提供液相搅拌的动力,它有较大的操作范围、良好的混合性和浓度均匀性,因此在生物反应中被广泛使用。但由于动物细胞没有细胞壁的保护,因此对剪切作用十分敏感,直接的机械搅拌很容易对其造成损害,传统的用于微生物的搅拌培养罐用作动物细胞的培养显然是不合适的。所以,动物细胞培养中的搅拌式培养罐都是经过改进的,包括改进供氧方式、搅拌桨的形式及在培养罐内加装辅件等。 (1)供氧方式的改进 一般情况下搅拌式培养罐还常伴有鼓泡,为细胞生长提供所需氧分。由于动物细胞对鼓泡的剪胞生长提供所需氧分。由于动物细胞对鼓泡的剪切也很敏感,所以人们在供氧方式的改进上做了许多工作。笼式供氧是搅拌式动物细胞培养罐供氧方式的一种,即气泡用丝网隔开,不与细胞直接接触。培养罐既能保证混合效果又有尽可能小的剪切力,以满足细胞生长的要求。北野昭一报道了一个经过改进的搅拌式动物细胞培养罐,整体呈梨形,搅拌置于培养罐底部,在搅拌轴外装了一个锥形不锈钢丝网与搅拌轴一起转动。轴心处的鼓泡管在丝网内侧鼓泡,丝网外侧的细胞不与气泡直接接触。 (2)搅拌桨的改进 搅拌桨的形式对细胞生长的影响非常大,这方面的改进主要考虑如何减小细胞所受的剪切力。有人对搅拌桨的形式作了改进,并在反应器内加装了辅件,实验证明改进后的反应器适用于对剪切力敏感的细胞进行高密度培养。反应器采用了一个双螺旋带状搅拌桨,顶部的法兰盖上安装了3块表面挡板。每块挡板相对于径向的夹角为30°,垂直插入液面。挡板的存在减小了液面上的旋涡。这个反应器维持了较小的剪切力,实验中用于昆虫细胞的培养,最终的培养密度达到6×106个/mL,成活率在98%以上。 2、非搅拌式动物细胞培养罐 搅拌式细胞培养罐用于动物细胞培养存在的最大缺点是剪切力大,容易损伤细胞,虽然经过各种改进,这个问题仍很难避免。相比之下,非搅拌式培养罐产生的剪切力较小,在动物细胞培养中表现出了较强的优势。 (1)填充床反应器填充是在反应器中填充一定材质的填充物,供细胞贴壁生长。营养液通过循环灌流的方式提供,并可在循环过程中不断补充。细胞生长所需的氧分也可以在反应器外通过循环的营养液携带,因而不会有气泡伤及细胞。这类反应器剪切力小,适合细胞高密度生长。 (2)中空纤维反应器中空纤维培养罐由于剪切力小而广泛用于动物细胞的培养。这类培养罐由中空纤维管组成,每根中空纤维管的内径约为200μm,壁厚为50~70μm。管壁是多孔膜,O2和CO2等小分子可以自由透过膜扩散,动物细胞贴附在中空纤维管外壁生长,可以很方便地获取氧分。 (3)气升式细胞培养罐气升式生物反应器(airliftbioreactor)也是实现动物细胞高密度培养的常用设备之一,其特点是结构简单,操作方便。有人在气升式反应器中利用微载体培养技术,研究了Vero细胞高密度培养的工艺条件。证明气升式反应器中悬浮微载体培养Vero细胞,在加入适量保护剂、营养供应充足的情况下,细胞可以正常生长至长满微载体表面,终密度可达1.13×106个/mL。
尿干化学法分析仪和传统显微镜镜检是基于两种不同原理的检验手段,因此检测结果可能存在一定程度的差异。临床中两种诊断血尿方法常配合使用以达到检测效率与质量的统一,总结起来,对检测结果的影响因素主要有以下几方面。 3.1 假阳性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阳性,但镜检却呈阴性 。其原因包括:(1)尿液分析仪潜血实验可与完整红细胞阳性反应,也能够与血红细胞释放的血红蛋白(hemoglobin,Hb)进行反应,这与显微镜只能够观察到完整的红细胞存在差异。健康人群尿Hb水平极低,定为阴性;(2)肌红蛋白(myoglobin,Mb)分子中包含Hb基团,当骨骼肌、心肌严重受损,血MB浓度升高,经肾排泄,导致尿液MB水平升高,潜血反应因此呈阳性,而显微镜检查却呈阴性;(3)部分患者尿中存在对热不稳定的酶,也可导致试剂块发生颜色变化,发生潜血反应;氧化性物质的污染也是造成潜血反应假阳性因素;高温或标本存放时间过长导致潜血反应阳性率增高 ;(4)尿试纸条超过保质期,或没有妥善保存、操作不当、仪器故障等均可能造成假阳性。 3.2 假阴性 即尿干化学分析仪潜血实验呈阴性,但镜检却呈阳性。其原因包括:(I)食物、药物影响:某些饮食、药物可引起尿液成份的改变如当尿液中存在大量的维生素时,维生素具有的强还原性使其竞争性结合反应产生的氧,导致尿试纸条无法出现潜血反应即出现假阴性反应;(2)高蛋白、高比重尿样削弱了试剂块潜血反应的敏感度,使能够发生反应的成分被包裹,反应试剂无法接触到,从而出现假阴性结果。 3.3 离心对检测结果的影响 离心中若速度过快,致使有形成分遭到破坏;但过慢时,沉渣中可能无法找到,以至于漏掉。因此对检验结果出现怀疑时,可实验潜血证实进行验证。总之,随着尿干化学分析仪普及,工作效率得到了极大提升,也使检测红细胞敏感度提高,但显微镜镜检也是无法替代的。对于疑似阳性反应的病例,应采用尿沉渣镜检进行复测,以求结论准确,提高检测可靠性。
一、细胞因子的概念细胞因子(cytokine)是由机体多种细胞分泌的小分子蛋白质,通过结合细胞表面的相应受体发挥以调节免疫应答为主的生物学作用。细胞因子具有 非常广泛的生物学活性,包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和细胞杀伤效应,促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达,促进炎症过程,影响细胞代谢 等。二、细胞因子的命名细胞因子按其来源可分为:由单个核吞噬细胞产生的细胞因子称为单核因子(monokine);由淋巴细胞产生的细胞因子称为淋巴因子 (lymphokine)等。按其作用可分为干扰素、集落刺激因子、肿瘤坏死因子、生长因子和趋化因子等。部分由不同细胞分泌的细胞因子,其基因及编码蛋 白与结构清楚者,在免疫调节、造血和炎症中发挥重要作用,又称为白细胞介素(interleukin,IL)。也可以依据结构或者其受体结构分类,我们的 趋化因子目前没有受体产品。三、细胞因子的特征1、低分子量;一般为<60kD的多肽或糖蛋白。多以单体形式存在,少数为二聚体,三聚体。2、天然细胞因子由抗原、丝裂原或其他刺激物活化的细胞所分泌,通过旁分泌(paracrine)、自分泌(autocrine)或内分泌(endocrine)方式在局部发挥短暂作用。3、一种细胞因子可由多种细胞产生,同一种细胞可产生多种细胞因子。4、需通过与靶细胞表面相应受体结合后发挥其生物学效应。5、具有高效性、多效性、叠性、拮抗性、协同性和网络性。四、细胞因子的分类1、白细胞介素(interleukin,IL-s)最初是指由白细胞产生又在白细胞间发挥作用的细胞因子。2、干扰素(interferon,IFN)最早发现的细胞因子,有干扰病毒感染和复制的能力。分α、β和g三种类型。3、肿瘤坏死因子超家族(tumor necrosis factor,TNF)1975年发现的一种能使肿瘤发生出血坏死的物质。4、集落刺激因子(colony-stimulating factor,CSF)指能够刺激多能造血干细胞和不同造血祖细胞增殖分化,在半固体培养基中形成相应细胞集落的细胞因子。包括G-CSF(粒细胞)、M-CSF(巨噬细胞)、 GM-CSF(粒细胞、巨噬细胞)、Multi-CSF(多重)(IL-3)、红细胞生成素(EPO)、干细胞生长因子(SCF)、血小板生成素 (TPO)等。5、趋化因子(chemokine)主要功能是招募血液中的单核细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等进入特定的淋巴器官和组织以及感染发生的部位。根据趋化因子近N端半胱氨酸(Cys)的位置、排列方式和数量,可分为CC、CXC、C、CX3C四个亚家族。6生长因子(growth factor,GF)生长因子(GF)是具有刺激细胞生长作用的细胞因子。五、细胞因子的生物学活性1.介导自然免疫、参与抗肿瘤和抗感染2.调节T、B细胞活化、生长和分化,介导细胞免疫和体液免疫3.刺激造血生成、刺激骨髓祖细胞生长和分化为各种成熟血细胞4.在炎症、感染和内毒素血症中的作用5.在超敏反应和自身免疫病中的作用6.细胞因子通过激活其相应受体(CKR),导致细胞的增殖与分化或分泌某种蛋白质。六、四种蛋白表达体系比较表达细胞优点缺点原核E. coli繁殖快、成本低、产量高遗传背景及基因表达调控机制清楚易于大规模培养,成本低廉蛋白常为包涵体,纯化困难无糖基化(分泌蛋白,细胞膜上蛋白不可用),生物活性不定无翻译后修饰,内毒素含量高酵母Pichia使用简单,表达量高,His-tag便于纯化,一定的翻译后加工可进行糖基化修饰,操作简单,适合大规模生产可诱导表达,也可分泌表达,产物便于纯化有时会出现蛋白切割问题糖基化不能满足要求昆虫High-5产量高 ,翻译后加工与哺乳动物相似对于部分有毒性或较难表达蛋白有优势无内毒素污染蛋白活性不如哺乳动物适合表达激酶等定位于细胞内的真核蛋白哺乳CHO HEK293完善的翻译后加工,活性接近天然蛋白周期长、技术要求高表达产量低
Cellscreen系统第一次实现了可重复对细胞培养进行观察。无需染色、无需制样,通过光学图像分析将细胞培养的生长曲线保存;与其它现有测试方法相比,Cellscreen系统对细胞培养无损伤性,独立性。第一次实现了对同一细胞培养区域进行多次测量。Cellscreen技术证明是一种精确的、可靠的、自定义实验条件、操作方便、节省成本的方法。Cellscreen能优化和加速新产品和测试程序的开发。 Cellscreen应用领域 Cellscreen模块化设计能适用于更广范的领域,例如: 制药研究:Cellscreen系统能缩短常规科研究时间,能拍摄细胞生长因子的各种因素,如毒性测试及生物适应性的测试。 生物技术研究:Cellscreen系统适用于增殖研究、过程(培养基)最优化、质量控制。另外,用于拍摄克隆细胞实验的新性质,如应用在新的治疗蛋白和抗体的研究。 Cellscreen系统的优势: l缩短制药研发的时间周期 l对细胞培养无损伤—细胞可再用于其它研究 l可扩展的详细的结果描述,对细胞培养过程的文档和图像存档 l与现有的方法相比,更精确——可靠、重复性、自定义 l很容易融入到日常实验 l很容易操作Multiwellplate l特别低的操作成本-对所有的测量只需要一个培养皿,不需试剂、不需对细胞染色。 l节省时间—不需样品制备 l技术成熟—innovatesAG图像识别技术 l模块化设计—系统可扩展其它分析模块 Cellscreen系统模块化设计: 为满足广泛的分析需求,Cellscreen系统是按模块化设计,能运行不同的软件系统。硬件由一个双处理器电脑及控制单元组成,控制单元通过高精度电机台自动聚焦、自动调光来控制显微镜;不同的软件模块对数码相机获取的图像进行分析,分析所得的图像和数据存储在终端数据库。 软件模块包括: l悬浮细胞的增殖研究模块(PS模块) l贴壁细胞的增殖研究模块(PA) l克隆细胞实验模块(CL) 细胞增殖研究模块(PS和PA)能重复观测细胞培养的生长因子,CL模块观察克隆细胞,并能追随到起源的单克隆细胞。 克隆细胞实验模块(CL) 在整个培养过程中,CL模块自动监控单个克隆细胞到群体的生长过程;为了证明细胞群体的单克隆细胞起源,需要监控整个生长过程。 Cellscreen系统用40倍放大系数抓取容器低部的16幅图像,它能代表整个容器的状态。 所有获得的图像和数据存档到数据库,因此可以跟踪任何生物群体的成长过程,证明生物群体起源的单克隆细胞。 很好的保护—Cellscreen的培养器 Cellscreen的培养器精确的安装在显微镜上,在测量过程中,对您贵重的细胞培养,它保持一个稳定的环境。对温度和CO2的浓度能精确的控制。培养器可以长时间或频繁的监控微量滴定盘,而不需移动它。 贴壁细胞的增殖研究模块(PA) PA模块通过测量细胞覆盖区域,用户可以观察到贴壁细胞的增殖。PA以40放大倍数获得图像。系统可以自由选择培养皿的区域。这系统适用于所有通用的微量滴定盘规格(6-96眼)。结果以图像和曲线的形式表示出来。PA模块将所有的图像和结果存档,输出格式CSV(兼容Excel格式)。 PA模块精确的测量至少80%细胞的生长因子,用于科研、发展、研制新产品。 悬浮细胞的增殖研究模块(PS) PS模块通常应用在对细胞生长因子影响的研究。为了获得生长曲线,悬浮液里培育的细胞数量被重复的量化——时间、原料、操作的消耗成本。对同一培养皿里的细胞生长,PS模块能重复计数、消除对每次测量都需要更换盘子的影响。 另外,Cellscreen系统对每个细胞进行计数,相对现存的细胞计数方法,它有很高的精确性。PS模块用的是100放大倍数,它获得的图像有很好的分辨率,能提供出细胞直径和细胞形状的一些信息。 Cellscreen系统概述 很容易综合到您的日常工作中——易学易用 实验和测量的标准化 在准备阶段,用户按要求设定实验配置。对实验条件有详细选择和描述,例如:微量滴定盘上的哪个培养皿,培养皿里哪个区域需要检测;另外一些参数需要选定,如:体积、细胞类型、培养方法、细胞直径。因为无需吸液管,其它方法中隐含的误差就很容易避免。 图像清晰、分析准确 现在的测量方法里,用CCD相机拍摄图像,对每一幅图片用相同的技术指标聚焦。 Cellscreen精确的控制技术保证,在每一个测量过程中,准确的拍摄培养皿的同一区域;因此对每一选择的区域,用户可以跟踪细胞的生长过程;PS软件对选定区域的细胞进行计数;CL和PA软件用来测定克隆细胞和悬浮细胞的表面区域。 广泛和详细的结果陈述 用户可以选择结果的描述方式:如照片、生长曲线、细胞浓度曲线图或幻灯片,用来证明细胞生长发育的全过程。所有的信息,如实验设置、图像的获得、处理结果以及一些简单的实验文档都自动保存在终端数据库。
科技日报讯 据物理学家组织网近日报道,美国斯克里普斯研究所开发出一种“液体活组织检查”技术,通过检查血液中有没有一种叫做循环内皮细胞(CECs)的特殊标记,能确认病人是否处于心脏病发作的高风险中。相关论文发表在最新一期的英国物理学会(IOP)刊物《生物医学》上。 血管内皮细胞排列在动脉壁上,当它们在血液中循环时,就和心脏病发作的进程密切相关。研究人员认为,这些循环内皮细胞所到之处会出现病变斑块、组织断裂和溃疡,造成动脉发炎。这些损害会形成血管阻塞,妨碍血液在动脉中流通,最终导致心脏病发作。 预测检查技术的原理是用健康的对照组来识别循环内皮细胞(CECs),并找出那些最近曾因心脏病发作而接受过治疗的病人。为此,研究人员开发出一种叫做“高清循环内皮细胞”(HD-CEC)化验的程序,探测并描绘出79名病人血液样本中的CEC特征。这些病人已经历过一次心脏病发作。他们用了两个控制对照组作为对比,包括25个健康人士和7个身患血管病并经过治疗的病人。该检测能从外形上以及循环内皮细胞与特殊抗体的反应中识别出它们,经过心脏病发作的人循环内皮细胞水平明显升高。 “在经历一次心脏病发作后,病人体内能可靠地探测到循环内皮细胞,而健康对照组中却没有。研究论文的目标是建立证据,我们已成功做到了这一点。”负责该研究的斯克里普斯研究所副教授彼得·库恩说,“相比于健康对照组,我们的结果非常明显。下一步就是要评估这项检测在心脏病发作早期识别中的有用性了。” 研究人员认为,这种技术现已能对那些显出征兆但尚未心脏病发作的人进行检测。此前尚无针对心脏病的预测检查,至少预测准确性无法令人满意。 他们还把检测结果与一种已经商业化的CellSearch检查进行了对比,CellSearch已获美国食品和药物管理局批准,用于检查癌症病人肿瘤细胞的数量。HD-CEC测试对循环内皮细胞显示出了更高的特异性,因为它用的是直接分析法,避免了浓缩阶段的偏差。“我们的检测能有效分析数百万个细胞,效率更高,但要保证你分析的是病人所有的可疑细胞。”(常丽君)来源:中国科技网-科技日报 2014年01月21日
超微量细胞自动分析技术在常规的细胞学实验中,无论是对于细胞培养中的细胞数量检测,还是药物对于细胞的毒性杀伤作用研究,或者是在下游实验前的细胞密度确认,都需要对细胞进行计数,有些时候还需要以染色的方法进行细胞存活率分析。目前,大部分实验室仍旧采用的是显微镜结合细胞计数板的计数方法,虽然成本低廉,但是操作繁琐,大部分细胞需要先稀释再计数,并且计数结果因人而异,系统偏差较大,另外计数板需要清洗,一旦清洗不够彻底会带来样品的交叉污染,因此,一旦样品较多就会消耗大量时间,影响研究的效率。也有一些实验室购置了能够自动进行细胞计数的仪器,可是当前的细胞计数仪均存在需要专门的试剂清洗以及样品进样针容易被细胞团堵塞等问题,无论是使用成本还是维护成本都居高不下。这些问题的存在不仅影响了自动化细胞计数的普及,同时也继续使细胞计数成为常规研究中的速度瓶颈。一款使用维护成本低,自动化程度高的细胞计数仪成为了许多细胞学研究者的呼声。根据这些用户的需求,GE Healthcare Life Sciences 最新推出了具有革命性进化设计的全自动细胞计数分析仪--Cytorecon,该仪器采用了高分辨率的CCD成像技术及自動軟件分析功能,仪器可以快速完成包括贴壁细胞、悬浮细胞、白细胞、培养细胞、酵母细胞等细胞样品的计数和浓度计算,结合成熟的台盼蓝染色技术,还可以快速完成细胞存活率的分析。除了细胞样品以外,仪器出色的性能甚至支持一些细菌和微生物样品的浓度计算。在进样的设计上,Cytorecon采用了20孔的特制样品盘设计,只需要用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液枪[/color][/url][/color][/url]在样品盘上点上11ul样品,即可直接检测。即使超过107浓度的细胞,也能不需稀释即完成浓度分析。采用样品盘进样不仅通量高,而且一次规避了后续运行需要购买专门试剂、样品需要稀释、进样针会堵塞、不能同时测多个样品等一系列传统细胞计数仪器存在的问题。仪器内置了方便上手的控制分析软件,通过简单的参数设置就可以设定拍摄的样品数量,以及完成细胞大小、对比度和存活性的定义。有了如此方便的帮手,相信细胞计数将会变得无比轻松,您再也无需枯燥地对着显微镜,以损耗视力的代价通过人工逐个逐个进行细胞计数了。
地表水体的富营养化引起藻类及其它浮游生物迅速繁殖,导致溶解氧下降,水质恶化,鱼类和其它生物大量死亡,甚至引发供水危机。色素是藻类光合作用时吸收、转化和传递光能的主要物质,叶绿素以多种形式存在于藻类植物中,大约占有机物干重的1-2%,是估算其生物量的重要指标,快速准确测定水体中叶绿素a浓度对于评价水体营养状态和水质管理具有重要意义。 叶绿素测定方法有很多,大致分为萃取测定、荧光活体测定及水华遥感监测。萃取分析利用有机溶剂萃取植物细胞叶绿素进行光谱光度测定,根据分析技术的不同分为分光光度法、荧光法和高效液相色谱法。萃取分析只要操作准确,提取完全,可以得到准确和重复性好的结果,但是过程繁琐,不方便用于连续监测。 AOA在线藻类分析仪利用叶绿素荧光特性进行分类定量分析,活体测量,无需样品预处理,仪器操作简单,可以快速地获得大量叶绿素数据,广泛运用在在线监测。为保证在线分析仪的有效运行,需要用标准样品来校准、性能考核和日常数据质量控制,但国内还未开发叶绿素的标准样品和质控样品,已知叶绿素含量(用萃取方法测定)的浮游植物悬浮液被认为是最好的标样替代品。当水体发生水华,生物多样性下降,往往是一种藻类成为绝对优势,可作为纯种藻类标准样品,本文将几个代表性的比对实验整理分析,探讨误差原因。[b]1.比对方法[/b]1.1清洗AOA在线藻类分析仪蠕动泵、测量室及其底盖,检查纯水透光率值。1.2水样不经任何处理,测量叶绿素浓度值。1.3剩余水样酌量加入1%碳酸镁悬浊液(按1升水量加入1ml),防止酸化。1.4带回实验室,尽快分析,实验室分析方法依据《无水乙醇热浴超声法测定淡水中的叶绿素a》[sup][/sup]。[b]2实验2.1微囊藻水样2.1.1样品来源[/b] 2014年8-10月某水库出现铜绿微囊藻水华,采集水华“浓密”处水样作为标准储备液,分别取0、2、5、10、15、20、25、50、100ml,用纯水稀释成500ml,检查两种方法叶绿素a和藻密度线性。取水库水华严重区、进水口、湖心和出水口四个水样,做实际水样比对分析。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011537059882_3331_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img][b]2.1.2实验结果[img=,690,361]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011538312332_220_3247383_3.png!w690x361.jpg[/img][/b]表1微囊藻稀释水样比对结果[b][img=,622,352]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011539397062_938_3247383_3.png!w622x352.jpg[/img][/b]图2微囊藻水样线性比对[img=,690,215]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011611492722_7678_3247383_3.png!w690x215.jpg[/img]表2含微囊藻实际水样比对表1、表2和图2表明,两种测量方法的结果与藻类数量之间存在非常显著的相关性,但AOA在线分析仪测量结果低于分光光度法,浓度越高,差异性越大。[b]2.1.3结果分析[/b]2.1.3.1分光光度法误差分析 萃取后叶绿素,对光照和氧气很敏感,极易造成不可逆的分解,因此,节时高效是分光光度法的质量保证,而温度是质控措施的关键。在超声波萃取过程,提高温度加快叶绿素溶出速度,同时,叶绿素降解的速度也是加快的,最佳超声波萃取条件:60℃萃取25分钟,2小时内完成测定。另外,实验室遮光也是必要。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011541253150_3659_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img]2.1.3.2AOA荧光法误差来源 AOA在线藻类分析仪原理:叶绿素具有荧光特性,一定的激励光,任何一种藻产生的荧光强度与其所含叶绿素a成正比,几种不同藻混合体产生的荧光强度等于各自荧光的总和。采用325纳米、450纳米、525纳米、570纳米、590纳米和610纳米作为激励光,其中325纳米是用来补偿黄色物质(有机物),测定685nm的光强,计算总叶绿素a值和不同藻的浓度。(1)水样原始性状发生变化暗室环境下,激励光照到藻上,能量分成三部分:光合作用、叶绿素自发荧光和热能辐射。如果藻的活性强,光合作用消耗的能量就越多,产生荧光的强度越小,反之,如果藻的活性弱,荧光强度就强。荧光能量和光合作用的能量是相互竞争的,叶绿素荧光常常被认为光合作用无效指标的依据。比对实验的样品,从采样经实验室样品处理,到水质自动监测站仪器分析,剩余样品送回实验室做分光光度法比对,再紧凑也需要3-4天完成,运输、保存过程,叶绿素在活体内也和其它物质处于不断更新变化中,可能衰老、也可能分解破坏,比对实验要求的同步水平也不可能实现,这是比对误差不可忽视的部分。(2)微囊藻特殊的细胞结构使水样分布不均匀微囊藻群体有胶鞘和伪空泡,可以自由漂浮在水中,水样在实验室静置一天后,出现明显的分层,测量过程难以保证均匀分布。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011542423667_4598_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img](3)工作温度与校准温度不一致参考各类荧光法仪器说明书,浮游生物悬浊液的荧光反应受温度的影响很大,有些仪器的温度补偿2%⁄ ℃,但这种经验补偿不能保证准确的现场测量,因为每一种浮游植物的荧光强度随温度变化程度不同。这台AOA藻类分析仪安装测试在冬季,这次比对实验在9月份进行,温差亦有影响。(4)浊度的影响 实验室分光光度法经过0.8um滤纸过滤,比色扣除750nm吸光度值,只要操作正确,浊度的影响很小。水中的悬浮颗粒物对激励光和产生的荧光有反射、散射和阻挡的作用,造成激励光和荧光产量的下降,YSI3026传感器检测结果:1NTU的 浊度影响大约是0.03ug/L叶绿素。 除色素以外的细胞结构(细胞壁、胶被、储藏物质)以溶解有机碳为主要成分,对紫外光和蓝光具有强烈的吸收,也可视为影响测定的悬浮物,AOA在线藻类分析仪称之为黄色物质,用325纳米补偿。铜绿微囊藻细胞壁分为两层,内层是纤维素,外有胶鞘,有相当的厚度,互相溶合形成多细胞群体。图5显示黄色物质与叶绿素含量相关,AOA的测量结果反映了铜绿微囊藻细胞群体特征。分光光度法和AOA扣除浊度方法各有不同,是否有可比性,有待进一步了解。[img=,586,305]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011543564741_5446_3247383_3.png!w586x305.jpg[/img]图5(5)水样镜检微囊藻绝对优势,视野内不见其它藻类,AOA分析结果有少量绿藻、硅藻,其它的比对实验也出现藻类识别错误。[b]2.2薄甲藻水样[img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011545089042_4958_3247383_3.jpg!w690x920.jpg[/img][/b]图6[b]2.2.1实验结果[/b][img=,690,289]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011547036798_1735_3247383_3.png!w690x289.jpg[/img]表3薄甲藻水样比对结果2.2.2结果分析2.2.2.1镜检视野内为单一薄甲藻,与AOA定性结果相差较大。从图7可知,绿藻和硅甲藻的光谱图很相似,从光谱图识别绿藻和硅甲藻是困难的,AOA的藻类分类和藻密度估量值仅能作为参考,要将监测数据做水体生态评估的依据,必须结合实验室镜检和萃取分析方法。[img=,690,496]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011547417547_4700_3247383_3.png!w690x496.jpg[/img]图72.2.2.2薄甲藻AOA测量值约为光度法的1/3,薄甲藻有鞭毛,可以自由游动,离开有利的生活条件则很快失去活性,沉入水底不再活动,且细胞内容物溶出。不能保证水样原始性状,是叶绿素a比对测定误差的主要来源。[img=,690,690]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011548482013_3683_3247383_3.jpg!w690x690.jpg[/img][color=#423B3B]2.2.2[/color][color=#423B3B].3[/color][color=#423B3B]薄甲藻细胞内容物溶出后,显微镜照片清楚看到细胞壁很薄,AOA测量结果印证黄色物质影响极小。[/color][b]2.3小球藻[img=,690,920]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011550015246_3694_3247383_3.jpg!w690x920.jpg[/img]图9 小球藻[/b]垃圾渗滤液水样,实验室放置几周,变绿,镜检结果:小球藻绝对优势,少量硅藻。[b]2.3.1实验结果[/b][img=,690,367]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011551332128_4472_3247383_3.png!w690x367.jpg[/img]表4小球藻水样比对[b]2.3.2结果分析[img=,537,303]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011552368052_2948_3247383_3.png!w537x303.jpg[/img][/b]图10小球藻水样线性分析2.3.2.1藻类分类与实验室镜检结果基本吻合;2.3.2.2低浓度出现少量蓝藻,因为仪器刚做完微囊藻样品,检测室可能有少量残留,比对实验之前彻底清洗检测室很有必要;2.3.2.3分光光度法相关系数小于AOA,并非方法不可行,而是叶绿素萃取太依赖分析人员的操作,稍有疏忽就会造成萃取损失,相比之下仪器要稳定可靠些。2.3.2.4小球藻叶绿素a测量结果AOA/分光光度法比值0.7-1.5,高于铜绿微囊藻和薄甲藻。两种方法测量结果比较接近的原因是因为小球藻不会运动,活体样品保持比较稳定的悬浮液状态,而AOA测量结果高于分光光度法的误差,一方面来自叶绿素和藻密度系数的确定,一方面来自萃取的损失。[img=,601,407]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011554177672_7731_3247383_3.png!w601x407.jpg[/img]图11AOA仪器校正界面 荧光测定仪校准即确定叶绿素和藻密度相关系数,可以给活体叶绿素传感器提供的最好标准物是浮游植物悬浮液,此悬浮液亦有部分用萃取方法测定叶绿素含量,并且应该从监测地点获得,这样的标准物质产生的荧光可以尽可能接近现场的生物体。荧光测定同时受浊度、温度、细胞活性、不同藻的种类、大小、形状、和叶绿素种类的影响,这些都大大限制活体测量的准确度。2.4不同水体样品分析[img=,690,267]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011555277271_2806_3247383_3.png!w690x267.jpg[/img]表5不同水体样品分析2.4.1与单一藻类样品结果一致,绿藻含量高的水样AOA测量值偏高,微囊藻水样上浮分层、甲藻和裸藻活性降低下沉造成水样不均匀分布,是比对结果偏低的一个因素。而在线监测时,水样中的藻类足够鲜活,吻合度会好些。2.4.2按照AOA提供的分类方法(图12),绿藻和蓝藻分类结果与镜检匹配,单一种类薄甲藻检测结果显示为绿藻、隐藻、蓝藻、极少量甲藻,镜检中数量可观的硅藻、裸藻在AOA测量结果中未见。[img=,600,350]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807011602453540_1118_3247383_3.jpg!w600x350.jpg[/img]图122.4.3水库水质良好,杂质少,其它水体有机杂质含量相对高,AOA黄色物质测量结果与水体洁净程度吻合。[b]小结[/b]:萃取分析耗时长,不方便用于连续监测,需要有经验、高效率的分析人员才能得到准确、重复性好的结果。活体荧光法简便易操作,但准确度受更多因素的限制。两种方法不可互相替代,而应该取长补短,互为参照。参考文献 王丽娟,章岳蓬,郭步平等. 无水乙醇热浴超声法测定淡水中的叶绿素a.当代环保,2010,2(4):14-17.
热销细胞网推出的流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来.细胞热销网是针对细胞的一个专业平台,在这里有关于细胞的设备,仪器等产品。
为活体研究和临床诊断提供了一种全新的技术手段2013年05月09日 来源: 中国科技网 作者: 吴长锋 最新发现与创新 中国科技网讯 中国科学技术大学光学与光学工程系李银妹课题组,近日与上海交通大学魏勋斌教授合作,采用活体动物内的细胞,发展了动物体内细胞三维光学捕获技术。日前,国际著名学术期刊《自然·通讯》在线发表了这项研究成果,网站还以《医学研究:用光清除血管被堵塞的血管》为题对该研究工作进行报道。 在活的动物体内研究细胞生长、迁移、细胞及蛋白质间相互作用等生物学过程,对生命科学、医学研究及临床诊断具有重大意义,因此体内研究技术一直是活体研究热点之一。 李银妹课题组利用光镊技术,首次对活体动物内的细胞实现光学捕获。研究表明,光镊可以直接深入到活体内,对细胞进行有效操控。研究人员用光镊穿过小鼠耳朵真皮层,到达深度约50微米毛细血管中,捕获和操控血管中的红细胞。将光镊固定在血管中心,血管中快速流动的细胞经过光阱时被逐渐减速,直到一个细胞停留在光阱中,光镊将细胞捕获,并实现了三维操控。 课题组还利用光陷阱的作用聚集红细胞,人为制造出血管堵塞;针对血管中已聚集的细胞团簇,拖拽其中一个细胞引导疏通,使聚集的细胞逐渐疏散开,恢复正常血液流动,从而实施非接触手术式的血管疏通。 过去,光镊技术在生物医学领域的应用仅限于体外的单分子和细胞研究。李银妹课题组的这项研究技术能直接深入到动物活体内,对细胞进行实时观察、操控与测量,实施非接触式手术的实验取证,从而开拓了光镊技术研究活体动物新领域,为活体研究和临床诊断提供了一种全新的技术手段。(记者 吴长锋) 《科技日报》(2013-5-9 一版)
[font=&][size=16px][color=#333333]点击链接查看更多:[url]https://www.woyaoce.cn/service/info-39892.html[/url]服务背景[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][font=宋体][size=16px]中广测动物实验检测领域主要从事食品及保健食品、洗涤消毒产品、化妆品、化学品的毒理学检测工作,可出具CMA认证检测报告。[/size][/font][font=宋体][size=16px][/size][/font][font=宋体][size=16px]实验室位于中山市火炬高技术开发区,场地面积800m2,其中动物实验区域400m2,其他实验区域400m2。动物实验饲养区域包括屏障设施(180m2)及普通设施(90m2)。配套有细胞实验室、微生物实验室、分子生物学实验室、临床病理检验室等。实验动物房建成于2018年,经广东省科技厅验收合格后投入使用。2019年取得广东省科学技术厅颁发的《实验动物使用许可证》,许可使用实验动物种类包括SPF级大、小鼠,普通级兔、豚鼠。[/size][/font][font=&][size=16px][color=#333333]检测内容[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][align=center][font=宋体][size=16px][img=000.jpg]https://img2.17img.cn/pic/kind/20220706/20220706155246_0476.jpg[/img][/size][/font][/align][font=宋体][size=16px][/size][/font][font=宋体][size=16px]服务范围[/size][/font][font=宋体][size=16px]毒理学试验项目主要有:急性吸入毒性试验、急性经口毒性试验、急性经皮毒性试验、眼刺激试验、皮肤刺激试验、皮肤致敏试验、光毒性试验,也可开展Ames试验、哺乳动物骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验、哺乳动物骨髓细胞染色体畸变试验、致畸试验等体内体外遗传毒性试验,以及亚慢性、慢性毒性试验。同时可开展药品的成药性评价(非GLP)工作。[/size][/font][font=宋体][size=16px]在科学研究方面,可开展中医药特色动物模型的构建与中药药效评价工作,为各大药企、科研院所及高校提供动物实验科研辅助管家服务。[/size][/font][font=宋体][size=16px] [/size][/font][font=宋体][size=16px]设备仪器[/size][/font][font=宋体][size=16px]全身全相态动态染毒柜、烟熏箱、吸入麻醉机、高压灭菌器、高速离心机、超净工作台、生物安全柜、全自动生化分析仪、全自动凝血分析仪、动物五分类血液细胞分析仪、肺功能检测仪,全套自动化病理设备、生化培养箱、光照培养箱、CO2培养箱 、万级洁净室、超低温冰箱、正倒置显微镜、冷冻离心机、冷冻研磨仪、台式恒温震荡摇床、超微量紫外分光光度计、荧光定量[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]仪等设备。[/size][/font][font=&][size=16px][color=#333333]检测标准[/color][/size][/font][font=&][color=#333333][/color][/font][table][tr][td]产品名称[/td][td]检测项目[/td][td]检测标准[/td][/tr][tr][td]动物实验[/td][td]动物实验[/td][td]动物实验[/td][/tr][/table]
传统流式细胞仪繁琐的实验步骤是否一直困扰着您?它结果输出的不方便是否也影响着您的实验效率?大量用于流式细胞仪上机样本的得到是否也让您很烦躁?现在这些都将成为过去式……MuseTM智能触控细胞状态分析仪——一款新型基础型流式细胞仪可以成功的解决您的这些问题。以细胞活力分析为例,MuseTM只需三步即可搞定:细胞悬液内加入Muse检测试剂,室温孵育5分钟,上机检测——内置的Pad触控式操作系统让您只需动动手指就可以直接读数。采用的独特微毛细管液流系统,样本需要量只有传统流式细胞仪的1/10,为您节省大量宝贵的实验样本。另外,MuseTM智能触控细胞状态分析仪创新的微毛细管液流设计摒弃了传统流式细胞仪必须依赖鞘液的流体动力学聚焦原理,最大程度的保护细胞不受到高速鞘液流冲击的影响,保持上机前的细胞状态。精湛的紧凑型光路设计可以为您分析直径范围在2-60μm的广泛样本,让您的细胞状态分析实验与众不同。预置的多套实验方案以及高品质的预包装试剂盒,让您无需为复杂的试验参数设定头痛不已,获取与分析变得能够轻松掌握。在快速细胞计数,细胞活力分析,细胞凋亡分析,细胞周期等分析领域,MuseTM智能触控细胞状态分析仪定会为各位老师带来不同凡响全新的实验体验。想切身感受这炎热的夏天里MuseTM智能触控细胞状态分析仪为您实验带来的小清新吗?赶快报名,免费的试用在等着您哦•••活动期间,凡是参与试用的用户均可获得昊诺斯8GU盘或瑞士军刀背包一个(奖品以实物为准)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307231142_453122_1622715_3.jpg真心英雄活动第二关试用报名网址:http://www.instrument.com.cn/custom/SH100700/20130522/free.shtml另外,您也可以致电北京昊诺斯科技有限公司市场部产品负责人孙健13710746995 sunjian@herosbio.com(因为区域划分,活动仅限北京区域、山西及内蒙古,具体问题欢迎来电垂询)。
[color=#444444]定性分析藻细胞分泌液中的主要组分(糖类和小分子酸),负责[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]的老师说糖类他们不能检测会把柱子弄坏,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]的老师说含有糖类需要先衍生化。[/color][color=#444444]查阅了好久也不知道衍生化到底怎么做,怎么定性分析分泌液的组分。[/color][color=#444444]有没有大神指点一二,分泌液的组分主要有糖类和小分子酸,含量未知,如何进行衍生化转化糖类以便用于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]检测啊?衍生化试剂和反应过程怎么选择呢[/color]
发酵过程中,细胞浓度是一个非常重要的生理参数,不但可以计算比生长速率,底物消耗速率、生物量产率和维持系数等参数,还可以及时判断是否有染菌等异常情况发生。目前测量细胞浓度的方法主要有化学法(DNA/RNA分析)和物理法(干重、光密度、呼吸商等)两大类。一般来说,与物理法相比,化学法能较准确的测量有代谢活性的生物量,缺点是花费时间长,而利用物理法测量,无法区分区分处于悬浮状态的颗粒和微生物,也无法分别活死细胞。 实现在线活细胞浓度一直是发酵领域的热门话题,仅些年来出现了不少的测量方法,依据的工作原理也是五花八门,其中最具代表性的有声学,激光散色、荧光、核磁、量热或电容。 其中法国fogale公司的测量仪器,以电容法为工作原理,直接将传感器安装与发酵罐上,可承受121℃高温灭菌,理论技术也比较成熟,是目前最为理想的适合工业级别的在线活细胞传感器。工作原理:电容传感器采用活细胞的介电特性,实时连续测量活细胞的生物体积,可应用于实验室桌面型的反应器或者是工业规模的大型反应器两对对电极位于传感器的顶部,一对用于在培养基中产生交变的电场,在电场范围内,带有完整细胞膜的细胞会在培养基中发生极化现象,发生极化的细胞可以认为是极小的电容,死细胞或者其他粒子没有完整的细胞膜,所以不能形成电容型号。另一对电极用于检测培养基中的介电信号,培养基中的介电信号和细胞的浓度是精确关联的。细胞的极化率和电场的频率纯在函数关系,当频率增加时,培养基中细胞的介电常数由低频峰(最大极化)降低到高频峰(最小极化)。这种随频率增加极化率降低的现象称为β-散射。传感器采用双频测量模式:培养基的基线在10MHz左右得到,细胞的信号在临界频率区域获得,在曲线的拐点,(动物细胞和细菌在1MHz,酵母在2MHz)我们获得了最佳的信号线性。应用:这项技术可广泛应用于各种细胞培养,生物发酵过程。已被文献证实可应用的细胞如下:动物细胞:CHO, BHK, MDCK, PERC6, NSO, HEK, Hela,Hybridoma, Vero细 菌:E.Coli, Bacillus Thuringensis, Salmonella,Streptomyces, Lactic Bacteria酵 母:Pichia Pastoris, Saccharomyces Cervisiae, PolymorphaHasenula昆虫细胞:sf9, Hi-5真 菌:Absidia
超声波细胞破碎仪是利用超声波在液体中的分散效应,使液体产生空化的作用,从而使液体中的固体颗粒或细胞组织破碎。常规使用方法是把要破碎的材料放到烧杯中,开电源设定时间(震动时间和间歇时间),将破碎仪的探头放到材料中。使用过程中,超声波发生器电路将50/60Hz的市电转换成18-21KHz的高频高压电能,因此破碎过程中会大量产热,一般在冰浴下破碎。超声波细胞破碎仪的两大组成部件为超声波发生器和换能器(有的配置有隔音箱)。1、超声波发生器:工作原理:由信号发生器来产生一个特定频率的信号,这个特定频率就是换能器的频率,一般应用在超声波设备中的超声波频率为20KHz、25KHz、28KHz、33KHz、40KHz、60KHz。2、换能器组件:换能器组件主要由换能器和变幅杆组成。3、隔音箱:可以有效地的降低工作过程中的所发出的噪音,保持实验室安静。超声波细胞破碎仪在我国的行业推广已进入成熟阶段,而应用仍不够普及!该仪器(设备)应用范围非常广泛,这是其它仪器设备所不能比拟的。也正因如此,该仪器(设备)的市场潜力很大,所以生产厂家也日趋增多,这也同时造成了超声清洗行业及市场的相对混乱,可以用八个字来形容“鱼龙混杂,良莠不齐”!超声波细胞破碎仪分类如下:一、按探头(“tip”)直径分类处理不用体积的样品需要选择不同“tip”头的超声波破碎仪。由于各制造厂家的产品结构不同,其“tip”头直径不尽相同。一般“tip”头从微量5mm(适合1ml处理量)到25mm(适合1000ml处理量),有连续流探头,处理量可达80升/小时。可能会发生磨损的高能应用中会用到可更换“tip”头。当能量通过“tip”头被传递时,金属表面留下痕迹的地方会发生腐蚀。随着时间的推移,发生腐蚀的地方会产生轻微的蚀损斑。“tip”头可以用砂纸或纱布来打磨,除非是损坏到一定的程度;当这种情况发生时,“tip”头将很难进行调谐频率,取而代之的可能是发出长而尖的噪音,最终产生裂纹。 要有效地加工给定剂量的样品,有两个主要的因素需要考虑:“tip”头尺寸和输出功率。这两个因素必须同时匹配才能获得最佳效果。小功率大“tip”头,则“tip”头无法工作;而太大的功率则“tip”头可能损坏。购买时请注意所需型号附件。二、按功率分类超声波细胞破碎仪的功率大小是客户的首选指标,它决定着被破碎物的数量、大小、质量及效果。所以各生产厂家对此指标也都非常重视。一般情况下,实验室、化验室、研究所、药品检验所等科研单位,使用的功率都不大,(一般在500W以下);而生物公司、制药厂、化工企业等生产单位,所用的功率大都在500W-2000W左右。由于各制造厂家的产品结构不同,其功率的标注方法也不尽相同。不过按照用户常用的惯例,一般有以下几种:50W、100W、150W、250W、300W、350W、500W、1000W、2000W。一般超声波细胞破碎仪输出功率可根据需要适度调节。 标准超声波细胞粉碎机产品的额定工作频率是20千赫兹。一些超声波细胞粉碎机有自动调谐功能可以使频率在一个小的范围内变化。
用途: 流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指标,而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说,它的细节 分辨率为零。 流式细胞仪主要由四部分组成。它们是:流动室和液流系统;激光源和光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统 参数测量原理荧光信号主要包括两部分:①自发荧光,即不经荧光染色细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光;②特征荧光,即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光,其荧光强度较弱,波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号,在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中,对于结合水平不高的荧光抗体来说,如何提高信噪比是个关键。一般说来,细胞成分中能够产生的自发荧光的分子(例核黄素、细胞色素等)的含量越高,自发荧光越强;培养细胞中死细胞/活细胞比例越高,自发荧光越强;细胞样品中所含亮细胞的比例越高,自发荧光越强。 减少自发荧光干扰、提高信噪比的主要措施是:①尽量选用较亮的荧光染料;②选用适宜的激光和滤片光学系统;③采用电子补偿电路,将自发荧光的本底贡献予以补偿。仪器的操作和使用 ①打开电源,对系统进行预热; ②打开气体阈,调节 压力,获得适宜的液流速度;开启光源冷却系统; ③在样品管中加入去离子水,冲洗液流的喷嘴系统; ④利用校准标准样品,调整仪器,使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上,0和90散射的荧光强度最强,并要求变异系数为最小; ⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等,在同样的工作条件下测量样品和对照样品;同时选择计算机屏上数据的显示方式,从而能直观掌握测量进程; ⑥样品测量完毕后,再用去离子水冲洗液流系统; ⑦因为实验数据已存入计算机硬盘(有的机器还备有光盘系统,存贮量更大),因此可关闭气体、测量装置,而单独使用计算机进行数据处理; ⑧将所需结果打印出来。热销细胞网是采用Accuri 型2号流式细胞仪,指示符®软件和工作站电脑供应在对市场价格领先的系统的一小部分的功能齐全的流式细胞仪的所有功能。在C6系统包括蓝色和红色激光,四色探测器和正向和侧向散射检测器加上软件,非常直观,你通常将和内收到您的Accuri小时运行的系统。
北京华威中仪科技代理的由美国Seahorse Bioscience 公司最新研发的XF生物能量测定仪(细胞代谢呼吸动态分析仪)XF extracellular analyzer是世界首创使用24孔及96孔微孔盘为平台,采用无损伤专利固态探针侦测技术即时同步侦测有氧呼吸O2(OCR)以及糖酵解作H+(OCAR)、 CO2产率(CDPR)的动态分析仪,透过此系统的协助,研究者得以更快的速度、更简易的设计了解细胞以及线粒体如何运用不同的受质作为能量的来源、评估疾病与氧代谢及线粒体运作状态之交互作用、分析代谢调节药物对于生理的效应、建立细胞品管系统、快速筛选出具开发潜力之药物及药物毒性评估等多种不同应用。此系统现已被广泛应用于免疫学、药物筛选、肝脏及外源性毒理、糖尿病及肥胖症、老化、干细胞、细胞生理、药物转化等各个领域,哈佛大学等名校已借助该系统在nature、cell上发表文章几十篇,其他SCI高影响因子文章200多篇,现在就拥有Seahorse Bioscience 公司的细胞代谢呼吸动态分析仪,领先下一个细胞与线粒体研究的黄金十年。
[size=4] 喹诺酮为一类具有4一喹诺酮环结构的药物。第一代药物萘啶酸(1962),第二代药物吡哌酸和氟甲喹(1974),抗菌作用较弱,国内较少使用。第j代为氟喹诺酮类(具有6一氟一 7一哌嗪一4一诺酮环结构)。喹诺酮类药物结构相似,取代位点较多,抗菌谱较广,活性高,从其结构一活性关系上探索开发新品种己成为喹诺酮类药物的研究热点,因而发展迅速, [/size][size=4] 尤以人药领域的喹诺酮类药物发展为最陕。最近几年又推出了数十种之多的新品种,其中有些还未命名,只给出了试验编号。 [/size][size=4] 喹诺酮类药物广泛地用于畜禽的细菌、霉形体病防治,已投人使用或即将进人兽医领域的药物有10多种,主要有两类,一类从人医用移植转化而来,如诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、培氟沙星、洛美沙星等。另一类是动物专用品种,己批准上市的兽医专用喹诺酮类药物有恩诺沙星(德国拜耳公司)、沙拉沙星(美国雅培公司)、单诺沙星(美国辉瑞公司)、二氟沙星(美国雅培公司)、倍诺沙星(日本武田制药),奥比沙星(日本大日本制药)和麻保沙星(瑞士罗氏公司),其中,后三种在我国还未见上市。 [/size][size=4] 诺酮类药物与细菌DNA复制所需的DNA一~rase的亚基A(Subunit)结合而抑制DNA复制化,此外由于细菌细胞具有强烈的穿透力,故具有强大的杀菌作用。这些药物的抗菌作用与疗效可与第j代头孢菌素媲美,已成为兽用抗菌药物中最活跃的研究领域之一,随之而来的这类药物的分析分析显得十分重要,相关文章也比较多,但大多数文章,例如彭六保等从四代喹诺酮类药物分类综述了该类药物的分析进展,其针对性不强;还有一些文章,如王玉忠、张加玲等从各种分析方法进行综述,与上面存在同样的问题。所以本文仅对兽医常用的九种喹诺酮类药物分析进展综述,以期对兽药临床及生产具有一定的帮助。现将常用的分析方法方法介绍如下。 [/size]
目前血细胞分析仪在国内外医院都是进行血常规检查的必备仪器,它不但减轻了工作人员劳动强度,提高了实验结果的准确性,还提供了更多的相关实验指标,对疾病的诊断和鉴别诊断起了重要的作用。1检测系统 按照过去的老观念,添置设备就是买仪器,货比三家按性价比来选购仪器。但是传统的与当今理念显然存在差距,随着对检验管理的完善,政府对检验科开展的每个检验项目提出了更高的要求,卫生部关于印发《医疗机构临床实验室管理办法》的通知(卫医发〔2006〕73号)(下面简称《管理办法》)指出:“医疗机构临床实验室应当保证检测系统的完整性和有效性”。什么叫检测系统?《全国临床检验操作规程》3版明确指出:完成一个检验项目的检测所涉的仪器、试剂、校准品、质控品、消耗品、操作程序、维护保养程序等的组合,称为检测系统,若是人工操作,还必须包括操作人员。2检测系统重要性 检测系统的好坏将直接影响检测结果精密度、准确性和溯源性,但是如果每一个临床实验室对每一检验项目都做检测系统的评价是无法完成的,因此,国外厂商除了提供仪器以外,还将提供配套试剂、配套校准品,也规定了操作程序,形成了可靠的有溯源性的检测系统。上个世纪九十年代美国FDA、欧盟有关部门己经明确规定,在申报产品许可证时,不再是一台仪器的认可,而是要整个检测系统的申报与认可。用户按规定的检测系统(即封闭系统)去检测病人标本,质量是有保证的。现在我国有关部门也十分重视,有一定规模的国产血细胞分析仪厂家除了提供仪器以外,还可提供配套试剂、配套校准品和质控品,以及相应的检测系统评价报告,包括结果的溯源性。长期实践证明,只有形成固定的组合的检测系统才能保证检测结果的准确性和可靠性。选择单一的血细胞分析仪或是具有溯源性评价的检测系统,既是传统与当今理念的区别,笔者认为选择后者才能保证检测质量,保证结果的准确性。
我做实验,现在对五分类不是很精,谁是搞医学检验的,给我发点血细胞五分类的东东! wlqs@yahoo.cn
多功能血细胞计数器是由数字处理芯片、集成电路,以及显示屏、按键组成,与各种显微镜配合使用,由微电脑进行自动分类计数的数字化专用产品,能对骨多功能血细胞计数器髓细胞、外周血细胞、小巨核细胞进行全面的分类计数并自动计算出各项指标,能对细胞化学染色后的积分进行计算,并兼有常用的四则运算。 哺乳动物细胞现在能够执行电子计算机的功能:进行逻辑运算。来自瑞士的研究人员给细胞装配了一个复杂的基因网络使得它不仅仅能完成如1加1的简单任务。相关研究论文发表在6月3日的《自然》(Nature)杂志上。 这项研究由来自瑞士苏黎世联邦理工学院生物系统系生物技术与生物工程学教授Martin Fussenegger领导。在文章中,研究人员构建了一个能够执行逻辑运算的基因网络,并由此启动了特异的代谢步骤。“我们开发出了第一个真正的细胞计算器,”Fussenegger说。 利用生物成分,研究人员开发出了一套不同的元件可在不同的组合中相互连接,并随后执行逻辑运算。这些术语称之为“逻辑门”的电路元件利用了苹果分子根皮(phloretin)和抗生素红霉素作为输入信号。基于布尔逻辑(Boolean logic)进行计算。 通过组合和相互连接几个逻辑门,生物技术人员最终获得了“半加器”( “half-adder)和“半减器”( half-subtractor),这两种计算机技术中的中心电路元件。半加器是一种基本的数字电路可以合计二进制数;另一方面,半减器负责减去它们。这两种元件存在于每个数字计算器中,负责执行大部分的运算。在细胞结构试验中,两个生物计算机元件生成了实质的结果。 其他一些科学家已经在酵母和细菌中实现了不同的电路元件。在新系统中,所有都存在于单个细胞里,基于哺乳动物细胞的复杂性其轻易就超越了酵母和细菌。 相比于改变细菌或酵母细胞,研究人员因此更加接近治疗应用。对于Fussenegger教授而言,可以想象如果有必要,细胞计算器可在遥远的未来和步骤中用于监控患者的新陈代谢。可将这些智能细胞植入到糖尿病患者体内,例如通过开发一个电路识别疾病相关代谢产物,调控具治疗效应物质的释放,例如胰岛素。然而目前研究人员离这样的应用仍相距甚远。
一、自动生化分析仪的功能及特点 自动生化分析仪是将生化分析中的取样、加试剂、混合、保温、比色、结果计算、书写报告等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成。它可进行定时法、连续监测法等各种反应类型的分析测定。除了一般的生化项目测定外,有的还可进行激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物的测定以及酶免疫、荧光免疫等分析方法的应用。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量等特点。 二、自动生化分析仪的分类 自动生化分析仪有多种分类方法,最常用的是按其反应装置的结构进行分类。按此法可将自动生化分析仪分为流动式和分立式两大类。 所谓流动式自动生化分析仪是指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。过去说得多少通道的生化分析仪指的就是这一类。存在较严重的交叉污染,结果不太准确,现已淘汰。 分立式自动生化分析仪与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的,不易出现较差污染,结果可靠。
http://photocdn.sohu.com/20120710/Img347740451.jpg 加州大学洛杉矶分校的工程师们开发了一种全新的光学显微镜,显微镜上配备了世界上最快速的相机,可用于探测“流氓”癌细胞。 【搜狐科学消息】据国外媒体报道,美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)的工程师们近日研制出了一款世界上最快速的相机,可用于探测难以捉摸的“流氓”癌细胞。这一科研成果的研究报告发表在了最新一期的《美国国家科学院院刊》上。 从大量各类正常细胞中识别和分离出一些罕见细胞对于某些疾病的早期发现、监测和治疗来说正在变得越来越重要。这些罕见细胞中,在体内自由移动的癌细胞就是一个很好的例子。通常情况下,在10亿个健康细胞中也只有一小撮癌细胞,然而它们会抢先转移,癌细胞扩散导致癌症患者的死亡率高达约90%。这样的“流氓”细胞除了癌细胞以外,还包括用于再生医学的干细胞及其它类型的细胞。不幸的是,检测这样的细胞是很困难的。要取得良好的统计准确性需要一台自动化、高通量的仪器,可以在相当短的时间内对数以百万计的细胞进行检测。配备了数码相机的显微镜是目前分析细胞的唯一设备,但是该设备对于这项研究来说速度显得太慢了。 现在,美国加州大学洛杉矶分校(UCLA)的工程师们开发了一种全新的光学显微镜,可以让这项艰巨的任务变得轻松许多。加州大学洛杉矶分校电气工程学院的工程师巴赫拉姆•贾拉利(Bahram Jalali)说:“为了抓拍到这些难以捉摸的细胞,相机必须具备在非常高的帧速率下持续捕获并对数百万张图像进行数字化处理的能力。传统的CCD和CMOS摄像头达不到这样的速度和灵敏度,因为从像素阵列读取数据需要时间,它们在速度极快的情况下对光变得不那么敏感。” 目前的流式细胞仪具有较高的通量,但是因为它依靠单点的光散射而不是拍照,在检测非常罕见的细胞类型时还不够灵敏,比如对于那些目前处于早期阶段或癌细胞转移前的癌症患者不适用。为了克服这些限制,巴赫拉姆•贾拉利和UCLA的的生物工程学副教授迪诺•迪•卡罗( Dino Di Carlo)领导的一个包括生物技术、光学、高速电子和微流体的跨学科研究团队开发出了高通量流式光学显微镜,这款显微镜非常灵敏,具备实时探测含量为百万分之一的罕见细胞的能力。 贾拉利的团队以他们在2009年创建的光子时间飞梭相机技术为基础,研制出了世界上最快的连续运行的相机。贾拉利、迪•卡罗和他们的同事在报告中描述了他们如何将这台相机与先进的微流体和实时图像处理技术进行整合,以对血液样本中的细胞进行分类。新的血液筛查技术每秒可筛查10万个细胞,比传统的基于成像的血液分析仪高出约100倍的通量。迪•卡罗说:“这项科研成果需要与一些尖端技术进行整合,通过生物工程部门、电气工程部门和加州纳米技术研究院的合作,并采用了UCLA细胞诊断学部门开发的重要的技术基础设施。”贾拉利和迪•卡罗均是加州大学洛杉矶分校的加州纳米技术研究院的成员。 他们的研究演示了如何实时辨别血液中罕见的乳腺癌癌细胞。初步结果表明,这种新技术有可能迅速地在大量血液中检测到极稀少的循环癌细胞,并将提高癌症早期检测、监测药物和放射治疗的效率。加州大学洛杉矶分校的电气工程和生物工程的项目经理本田惠介(Keisuke Goda)说:“这项技术可以大大减少错误,并将降低医疗诊断成本。” 研究人员通过将实验室生长的癌细胞与模拟现实生活中的病人的不同比例的血液进行混合得到了检测结果。加州纳米技术研究院的一名成员格达(Goda)说:“为了进一步验证该技术的临床应用效果,我们目前正在与临床医生合作进行临床试验。这项技术也将可能用于进行尿液分析、水质监测和相关的应用。”(尚力)
各位大虾,请问有谁在用Beckman的细胞活力分析仪的,型号是VI-CELL?我司现有一台,由于太久没用,现在要装到电脑上的数据采据卡驱动已不见,上网又找不到(由于太旧了02年的),现正着急等用啊,也已求助了代理商,但还没消息,如有哪位大侠公司也有用此设备的请麻烦帮找一下,小弟在此万分感谢!
谈到血常规检查,大家马上会想到WBC、RBC计数,虽然现在各种全自动和半自动的三分类、五分类血球分析仪已经普及,但在广大基层单位,条件尚不许可,仍然是一台显微镜加一块计数板,“目视计数法”还有顽强的生命力,及很强的实用价值,即使在仪器铺天盖地,大口吞噬“人工检验市场”的今天,我们依旧需要手工法进行样本复检、机器校正等工作。目视计数法在我们的印象中无非是数数方格,传统的计数法是按操作规程之规定,先找到相应的方格,但老方法中几十年来都一成不变的计数区域用到实际工作中并不让人感觉舒适和便利,当出现细胞数过多,堆得密密麻麻时,更容易视觉疲劳和出错;且动辄采血20μl,有些病人不易采足量(在同时进行多项检验时,更易出现采不到量而必须多次穿刺,增加了病人的痛苦)。因此,改进一下计数区域和采血量,寻找一种人性化的方法就很有其必要性了。对于这个问题,我研究了一套解决方案,并在工作中使用了近十年,一直感觉良好。下面,我就把该方案贴出来,和大家做一交流。一、RBC、PLT计数改进法:1. RBC:取血10μl加入红细胞稀释液3.0ml内混匀充池(即稀释300倍)2. PTL:取血10μl加入血小板计数液0.29ml内混匀充池(即稀释30倍)下面是计数池中间的那部分结构图,以红笔勾出的阴影部分为本法计数区域(两个细长长条区域)http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224036.jpg【计算】RBC数 / L = 计数区红细胞总数 / 100 ×10^12 / LPLT数 / L = 计数区血小板总数 ×10^9 / L二、WBC计数改进法:方法1:此法又可称为“盘龙法”,它覆盖面广,可较好的中和细胞不易分布均匀的固有误差,适用于精确计数。【操作】(同原法) 取血20μl加入白细胞计数液0.38ml内混匀充池(稀释20倍) 计数区域见下图所标示(蓝色箭头示意为计数起止方向)http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224121.jpg【计算】(亦同原法) WBC数 / L= 计数区白细胞总数 / 20 ×10^9 / L方法2:此法较上法简便而易于操作,采血量少,更不易疲劳和利于连续计数多量标本,且可灵活应对白细胞过低和过高的特殊情况,但准确性和精密度比上法稍差,适用于日常工作。【操作】取血10μl加入白细胞计数液0.29ml内混匀充池(即稀释30倍)(1)当白细胞数在合理区间时的计数区域(即用红线勾出的四个长条形区域):http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224324.jpg【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 / 10 ×10^9 / L(2)当白细胞数低于4.0 ×10^9 / L时,不必加量采血重做,计数区域:http://bbs.labsky.com/uploads/2010-5/2010-05-12_224506.jpg【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 / 20 ×10^9 / L(3)当白细胞数高于80 ×10^9 / L时,亦不必进行二次稀释,计数区域与新法计数RBC或PLT的计数区域相同,请见上面的第一幅贴图【计算】WBC数 / L = 计数区白细胞总数 ×10^9 / L我的这套方法好用与否,大家一试便知。最终的计算公式是怎么推导来的,这里我就不做详细论述,大家可以自己试着推导一下,如果对我的文章有疑异的,可以随时和我联系,欢迎大家批评和指正。我的QQ:59889501 作者:景德镇第二医院检验科 黄知进