循环肿瘤细胞快速分析筛选系统

[font=&][size=16px][color=#343a40] 肿瘤免疫治疗是一种利用人体免疫系统来战胜肿瘤的治疗方案。成功与否的关键就在于免疫系统能否被激活到足够去特异性地杀死肿瘤的程度。在临床实验前，人们需要借助体外实验先行评估治疗方案的效力。 Axion BioSystems公司革命性地推出了使用生物电感应技术的Maestro Z/ZHT平台，完美具备评估体外效力的必要条件。它能在免除标记物影响的同时，在长达几天的时间中，以非侵入的方式对细胞的健康和活动开展监测，并自动且实时地获得多至384个样本的完整实验信息。其秘诀就是通过埋设在微孔板底部的高灵敏度电极来进行生物电阻抗的测试。这种技术能够追踪微小的细胞变化，从而能够揭示出远低于其它技术最低检出限的生物学信息。[/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]--利用Maestro Z/ZHT评估T细胞对胶质母细胞瘤的杀伤效力（car T治疗）：[/b][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]人体免疫系统中的效应T细胞，对肿瘤细胞有着高特异性和与生俱来的细胞毒性，在未来的脑胶质瘤治疗中被人们寄予很高的期望。Maestro Z的阻抗测试有着高灵敏、无标记及无损的特点，能够实时监测肿瘤细胞的增殖和T细胞介导的细胞溶解等过程，在体外评估免疫治疗的效价方面有着突出的优势。美国乔治亚大学的科学家们借助Maestro Z平台，对不同条件活化后的T细胞，开展了恶性胶质母细胞瘤杀伤效力的对比评估。详情点击:[url=http://www.axionbio.cn/page_1.html]CAR-T治疗 (axionbio.cn)[/url][/b][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]--利用Maestro Z 评估药物对COVID-19病毒感染力的中和作用:[/b][/color][/size][/font][color=#343a40][b][font=&][size=16px]病毒学研究的重点就在于开发抗病毒药物用于预防和治疗病毒感染。其中的挑战在于筛选到能够选择性抑制病原体复制并对宿主没有损害的化合物。病毒导致的细胞病变效应（CPEs）常常和靶细胞在形态、胞间贴合度、附着力及活力等方面的变化相关联。研究者可在体外联合使用宿主细胞、病原体和药物来模拟三者在体内的互作，借助 Maestro Z 定量CPE引起的阻抗变化。轻松实现在筛选药效的同时，完成安全性的初步评沽。[b]详情点击:[/b][url=http://www.axionbio.cn/page_4.html]page_4 - (axionbio.cn)[/url][/size][/font][/b][/color][font=&][color=#343a40][b][font=&][/font][/b][/color][/font]

[size=24px][b]课程详情[/b][/size]肿瘤的发生及发展机制是当前生命科学和基础医学的重要研究领域，对应的抗肿瘤药物和细胞治疗方法的研发也是行业研究热点。本次讲座将围绕肿瘤细胞和细胞治疗研究方法，介绍赛多利斯提供的活细胞水平检测方法及整体解决方案。[size=18px][b]讲师简介：[/b][/size]黄雯琪:黄雯琪，女，就职于赛多利斯公司生物分析部门，负责细胞检测产品线的应用支持、产品培训等业务，在细胞生物学检测技术及实验方法方面具有丰富的经验。[size=18px][b]相关领域：[/b][/size](生物产业)-(综合)[size=18px][b]相关仪器：[/b][/size](生命科学仪器及设备)-(细胞生物学仪器)-(高内涵细胞成像分析系统)点击链接立即报名：[url]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_13888.html[/url]

流式细胞胞仪的分析及分选原理流式细胞仪由液流系统、光学与信号转换测试系统和数字信号处理及放大的计算机系统三大基本结构组成。在对细胞悬液中的单个细胞或其超微结构进行多参数快速自动分析过程中，每秒钟能测量数千个至数万个细胞，能在分析过程中按实验设计要求对特定细胞进行分析，带细胞分选系统的流式细胞仪还可按实验设计要求分选出具相同特征的同类型细胞，用于培养或进一步研究。一、工作原理流式细胞仪的工作原理借鉴了荧光显微镜技术，将荧光显微镜的激发光源改为激光，使其具有了更好的单色性与激发[/

http://www.bioon.com/biology/UploadFiles/201208/2012080216013081.jpg癌症研究人员可以测定肿瘤细胞基因组的序列，扫描其异常的基因活性，剖析其突变的蛋白质和研究它们在实验室培养皿中的生长，但研究者一直无法跟踪细胞形成肿瘤的过程。现在三个独立研究小组在小鼠体内做到了这一点。他们的研究结果支持这样的观点：一小部分细胞驱动肿瘤的生长，而想要治愈癌症可能需要将这些所谓肿瘤干细胞清除。目前还无法确认，这些从脑瘤，肠癌和皮肤癌研究的结论是否适用于其他类型肿瘤，但是得克萨斯大学西南医学中心的路易斯·帕拉达认为，如果它们适用于其他肿瘤，"将深刻地改变目前的化疗疗效评价和临床疗法的制定标准"。 不仅是看某种疗法是否缩小肿瘤，研究人员将更关注是否杀死了正确的细胞。帕拉达和他的同事们想检测是否特异性标识健康成人神经干细胞的一个遗传标记，也可标识神经母细胞瘤中的癌症干细胞。他们发现，所有神经母细胞瘤样本中至少有几个标记细胞 - 大概是干细胞。未标记细胞可被标准化疗杀死，但肿瘤可迅速恢复。进一步的实验表明，未标记细胞起源于标记的细胞祖先。当研究者把化疗与抑制标记细胞的遗传手段相结合进行治疗时，帕拉达说，肿瘤显著缩小到"残留遗迹"的水平。在另一项研究中，荷兰乌得勒支Hubrecht研究所的干细胞生物学家们把注意力瞄着了肠道。利用药物驱动的荧光素标志物表达系统，他们在小鼠体内证实，多种不同类型的肿瘤细胞，其实是来源于同一干细胞的。而且，这些干细胞是肿瘤发展的驱动力。对皮肤癌的研究，Blanpain和他的小组标记单个肿瘤细胞，而不是特异地标记干细胞。他们发现，细胞表现出两种不同的分工模式：它们要么在慢慢耗尽前分裂出少数细胞，或者产生许多细胞。这再次证实，一类独特的细胞亚群是肿瘤生长的驱动力。研究者说，下一步的研究计划将是，搞清楚这些实验所跟踪的细胞如何与通过多年移植实验所确定的，假定的癌症干细胞相联系的。研究人员已经紧锣密鼓地在寻找杀死这些细胞的方法;现在他们有更多的工具来测试这样的策略是否会奏效。

各国争相发展的重点项目　　iPS技术，即诱导性多能干细胞技术，是一种将成体成熟、分化的体细胞重编程获得类似胚胎干细胞的新兴技术。2007年11月美国和日本科学家分别独立宣布可将人类皮肤细胞转化为iPS细胞。这一发现被《自然》和《科学》杂志分别评为2007年第一和第二大科学进展。之后，iPS细胞研究迅猛发展，不同的国家和实验室纷纷报道了多种方法建立的iPS细胞系。就连世界第一只体细胞克隆动物多利羊的培育者伊恩·威尔莫特也宣布放弃人类胚胎干细胞克隆研究，转而进行 iPS 细胞研究，因为他认为这种细胞比胚胎干细胞更具潜在优势。　　我国连续多年将干细胞研究列入“863”、“973”、国家自然基金重点项目。国务院2006年发布的《国家中长期科学和技术发展规划纲要（2006-2020年）》中，干细胞作为五项生物技术之一成为未来15年我国前沿技术的重点研究领域。　　致瘤风险浮出水面　　Yamanaka研究组在《自然·生物技术》上发表的文章显示，用iPS细胞诱导的神经干细胞，即使不含c-Myc（曾被认为是导致肿瘤的主要原因），在植入NOD/SCID免疫缺陷小鼠后仍有很强的致瘤性，甚至高于胚胎干细胞。　　　他们共研究了36个iPS细胞克隆，在诱导方式上，有些诱导剂配方中含有c-Myc基因，有些没有，因此具有较好的代表性。同时他们选择了3株胚胎干细胞作为对照。在45周的观察中，移植胚胎干细胞来源神经干细胞的34只小鼠有4只长出肿瘤。在100只移植胚胎成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中34只发现肿瘤，概率和胚胎干细胞相当。在55只移植成人成纤维细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中46只发现肿瘤，概率远高于胚胎干细胞。在36只移植肝细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中10只发现肿瘤，概率高于胚胎干细胞。8只移植胃上皮细胞来源的iPS神经干细胞小鼠中未发现肿瘤。病理学检查证实肿瘤均为畸胎瘤，部分为恶性畸胎瘤。　　研究还发现，以前认为致瘤性很强的c-Myc在去掉后并没有减少iPS神经干细胞的致瘤性，相反以前认为没有致瘤性的Nanog基因却可以明显增强iPS神经干细胞的致瘤性。　　这次试验的另一个意外结果是并未发现在生成的肿瘤细胞中有c-Myc或其他基因的激活。以前的观点认为，转入的癌基因是iPS致瘤性的基础，只要在iPS细胞诱导成功后通过各种方法去除已完成使命的癌基因即可使iPS细胞免于致瘤性。这次试验的结果无疑给这些想法留下了阴影，而且使iPS致瘤的机制更加扑朔迷离。

[font=Calibri][size=10.5pt][font=宋体]仪器信息网于[/font]5[/size][/font][font=Calibri][size=10.5pt][font=宋体]月[/font]19[font=宋体]日组织召开[/font][b] “安捷伦免疫治疗与肿瘤免疫细胞分析”网络研讨会[/b][/size][/font][font=Calibri][size=10.5pt][font=宋体]，特邀嘉宾[url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/News/expert?id=3142]David Ferrick(安捷伦)[/url][/font][font=宋体]，带来报告[b]《[url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/News/expert?id=3142]调谐免疫细胞效力、命运和适应性的代谢驱动因素[/url]》[/b]；[/font][/size][/font][font=宋体]欢迎感兴趣的你，报名参会！[/font][url=https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/6604/][b][u][font='Times New Roman'][color=#0563c1]https://www.instrument.com.cn/webinar/meetings/immunotherapy/[/color][/font][/u][/b][/url]

作者：丁香园网友Docofsoul《每日科学》2011年9月1日报道——由瑞士联邦理工学院（ETH）Yaakov Benenson教授与麻省理工Ron Weiss教授率领的研究小组成功地将生物“计算机”诊断网络导入人类细胞。该网络有识别某些肿瘤细胞的能力，利用五种肿瘤特异性分子因子的逻辑组合，进而触发肿瘤细胞毁灭过程。http://img1.jiansuo.net/cms/upload/userfiles/image/2011/09/04/1315042501_small.jpg细胞微机布线图：所有五种因子必须处于相应的正确状态，由此触发细胞死亡（图片来源：y Benenson Y. 教授 R. Weis教授）开发活体细胞内运作的生物电脑，是ETH苏黎世分院合成生物学教授Yaakov (Kobi) Benenson孜孜以求的目标，其职业生涯的大部分时间都倾注于此。他想建立既能侦测细胞生存状况、又能在细胞异常时对相应信息进行处理以提供合适的治疗响应的生物微机。目前，通过与麻省理工教授Ron Weiss以及团队成员（包括博士后学者Zhen Xie 与 Liliana Wroblewska、博士生Laura Prochazka）合作，他向这一目标迈出了重大一步。这一研究成果已发表于《Science》（见本文所附参考文献），论文介绍了一种多基因合成“电路”；此电路负责鉴别正常细胞与肿瘤细胞、继而进一步摧毁肿瘤细胞。其工作方式是：对细胞内五种肿瘤特异性分子因子及其出现频率进行抽样与综合；只有当所有这些因子在细胞内同时出现时，该电路才会作出正识别响应。这种方式使得侦测肿瘤的准确率非常高。研究者希望这一成果能够为高特异性抗癌治疗奠定基础。对肿瘤细胞的选择性破坏本研究对实验室培养的两种类型人类细胞进行了基因网络测试：海拉细胞（子宫颈癌细胞）与正常细胞。当基因生物微机被导入这两种不同的细胞类型时，只有海拉细胞被摧毁，而正常细胞则安然无恙。当然，取得这一结果需要做大量的基础工作。首先必须找出海拉细胞特有的分子组合。Benenson及其他小组成员在属于小RNA分子（MicroRNA或miRNA）这一类化合物的分子中找，终于确认其中一个miRNA组合（或者说“可识别属性”）只有海拉细胞才有，其它健康细胞类型内则不存在。发现这种可识别属性是一项颇具挑战性的任务。人体内既存在250种不同的健康细胞类型，此外也存在为数众多的肿瘤细胞的变异型（其中数百种可作实验室培养）。但miRNA多样性则更是不让须眉花样繁多，人类细胞中已得以描述的即达500到1000不同种类。Benenson指出：“每种健康或病损细胞类型都有其不同的miRNA分子处于开放或关闭状态。”可识别肿瘤属性中的五种因子确立一种miRNA“可识别属性”与发现一组症状以可靠诊断一种疾病有所不同。教授说：“一种症状，比如说发热吧，不可能由此概括出一种疾病。医生获得的信息越多，其诊断才越可靠。”　一年半前他从哈佛大学到ETH后，研究小组找到了几种因子，可由此可靠地将海拉细胞从所有其它健康细胞中鉴别出；结果表明，仅仅五种特定miRNA的组合（其中某些以高水平出现，某些则以极低水平出现）就足以将海拉细胞从其混迹的健康细胞中揪出来。与微机运作相似的网络Benenson介绍说：“这些miRNA因子在细胞内进行逻辑代数运算；该生物微机运用诸如‘与’与‘非’等逻辑操作将这些因子进行组合，并且，当全部因子的整体运算结果为逻辑‘真’值时，只产生所需要的结果——那就是细胞死亡。”　确实，研究者已经能够显示该网络在活体细胞内可以非常稳定地运作，可正确组合所有细胞内因子并给出正确的诊断。Benenson认为，这一成果代表该领域的一项重大成就。动物模型与基因疗法该研究小组想在下一步在合适的动物模型上测试该细胞计算方法，以期在未来创建诊断与治疗工具。这听起来可能象科幻小说，但Benenson相信其可行性；不过，仍有不少棘手的问题需要解决。比如，如何有效、安全地将外源基因导入细胞？这种DNA递送在目前情况下颇具挑战性。尤其是，该方法需要将外源基因暂时而不是永久导入细胞。现有的病毒导入法或化学导入法均未充分开发，需要进一步完善。Benenson说：“为人类提供一种功能完善的治疗方法还非常遥远。不过这一工作是重要的第一步，显示了单一细胞水平上这样一种选择性诊断方法具有可行性。”参考文献：1. Z. Xie, L. Wroblewska, L. Prochazka, R. Weiss, Y. Benenson. Multi-Input RNAi-Based Logic Circuit for Identification of Specific Cancer Cells. Science, 2011; 333 (6047): 1307 DOI: 10.1126/science.1205527

请问哪位高人知道生物梅里埃公司的全自动致病菌筛选系统的价位是在多少？

多数抗肿瘤药物因其本身的难溶性而无法实现有效的靶向递送，进而严重影响其在临床方面的应用。紫杉醇（Paclitaxel, PTX）是目前临床上应用较为广泛的难溶性抗肿瘤药物之一，其对肺癌、卵巢癌、乳腺癌等均具有很好的治疗作用。为了解决其难溶问题，现用临床注射制剂（Taxol®）是将其溶解于聚氧乙烯蓖麻油和无水乙醇的混合溶媒后再行给药。然而，该制剂因缺乏靶向性，对其他正常组织产生明显的毒副作用；而且添加的聚氧乙烯蓖麻油在体内降解时会释放组胺，引起严重的过敏反应。因此，开发方便安全的靶向给药系统对PTX的临床应用有重要的研究意义。 近日，中科院过程工程研究所马光辉研究员领导的团队开发出了一种新型的难溶性抗肿瘤药物的纳米靶向给药系统（如图所示）。首先，利用O/W/O复乳液法并结合程序升温法，成功地将PTX以纳米晶形式原位装载于亲水性材料羧化壳聚糖纳米球中，并结合快速膜乳化技术实现了纳米球粒径的均一性。在此基础上，研究人员利用纳米球表面的羧基，引入具有隐形效果的聚乙二醇（PEG）链和靶向肿瘤细胞的RGD肽，最终制得兼具隐形和靶向能力的纳米给药系统。 后续的体外细胞及体内荷瘤小鼠模型实验表明，该制剂能够有效延长药物在体内的循环周期，改善纳米球对肿瘤细胞的亲和能力，提高药物生物利用度。另外，与传统的注射制剂相比，该制剂还具有很低的毒副作用。 上述研究工作已发表在Molecular Pharmceutics（2012, 9, 1736-1747）上，审稿人认为这是一项有趣的工作，方法新颖。该研究工作受到973项目（2009CB930300）和国家自然科学基金（20820102036, 21161160555）的资助。http://www.cas.cn/ky/kyjz/201207/W020120720343496926834.jpg PTX靶向纳米给药系统示意图

我想做一下肿瘤细胞的P谱，但以前没有做过，制备样品是把肿瘤细胞制成细胞悬液就行了吗？内标和普通样品的内标一样吗？是不是应该先做一下细胞培养液的P谱？求大神帮助！！

科技日报讯 据物理学家组织网近日报道，美国斯克里普斯研究所开发出一种“液体活组织检查”技术，通过检查血液中有没有一种叫做循环内皮细胞（CECs）的特殊标记，能确认病人是否处于心脏病发作的高风险中。相关论文发表在最新一期的英国物理学会（IOP）刊物《生物医学》上。 血管内皮细胞排列在动脉壁上，当它们在血液中循环时，就和心脏病发作的进程密切相关。研究人员认为，这些循环内皮细胞所到之处会出现病变斑块、组织断裂和溃疡，造成动脉发炎。这些损害会形成血管阻塞，妨碍血液在动脉中流通，最终导致心脏病发作。 预测检查技术的原理是用健康的对照组来识别循环内皮细胞（CECs），并找出那些最近曾因心脏病发作而接受过治疗的病人。为此，研究人员开发出一种叫做“高清循环内皮细胞”（HD-CEC）化验的程序，探测并描绘出79名病人血液样本中的CEC特征。这些病人已经历过一次心脏病发作。他们用了两个控制对照组作为对比，包括25个健康人士和7个身患血管病并经过治疗的病人。该检测能从外形上以及循环内皮细胞与特殊抗体的反应中识别出它们，经过心脏病发作的人循环内皮细胞水平明显升高。 “在经历一次心脏病发作后，病人体内能可靠地探测到循环内皮细胞，而健康对照组中却没有。研究论文的目标是建立证据，我们已成功做到了这一点。”负责该研究的斯克里普斯研究所副教授彼得·库恩说，“相比于健康对照组，我们的结果非常明显。下一步就是要评估这项检测在心脏病发作早期识别中的有用性了。” 研究人员认为，这种技术现已能对那些显出征兆但尚未心脏病发作的人进行检测。此前尚无针对心脏病的预测检查，至少预测准确性无法令人满意。 他们还把检测结果与一种已经商业化的CellSearch检查进行了对比，CellSearch已获美国食品和药物管理局批准，用于检查癌症病人肿瘤细胞的数量。HD-CEC测试对循环内皮细胞显示出了更高的特异性，因为它用的是直接分析法，避免了浓缩阶段的偏差。“我们的检测能有效分析数百万个细胞，效率更高，但要保证你分析的是病人所有的可疑细胞。”（常丽君）来源：中国科技网-科技日报 2014年01月21日

[align=center]肿瘤干细胞学说[/align][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]关于肿瘤起源，目前讨论较多的是肿瘤干细胞学说。肿瘤干细胞学说认为，肿瘤细胞中存在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]一[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]小部分[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]具有自我更新和分化能力[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的细胞，是[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]真正驱动肿瘤发生和发展的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]“[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]动力[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]”[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，在维持肿瘤的恶性增殖、侵袭、耐药、转移、复发等方面起着决定性的作用[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][6, 7][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]且在多种恶性肿瘤中已成功分离出了肿瘤干细胞。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]虽然其在肿瘤组织中数量极少[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]([/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000][/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1%), [/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]但是对于肿瘤的预后及治疗意义重大，可能成为肿瘤诊断标志物及治疗靶点。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][8-10][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][10][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]ABCG2[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][11][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]LGR5[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][12, 13][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]SOX2[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][14][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]是目前研究相对较多的潜在的肿瘤干细胞标志物。研究显示，与非小细胞肺癌相比，小细胞肺癌的肿瘤干细胞数量明显增加[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][15][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]肿瘤干细胞显示胚胎干细胞的许多特征，具有高度的致瘤性，并经常表现出参与发育和组织稳态的一个或多个高度保守的信号通路的持续激活，包括[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Notch[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Hedgehog[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]W[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]nt[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]通路，所有这些[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]通路[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]SCLC[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]中都可能[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]表现活跃[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][4][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]、[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]为目前已知的肿瘤干细胞标志物，其在小细胞肺癌细胞中也是呈[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]高表达[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的。通过[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Western blot[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]技术[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]可[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]检测其在蛋白质水平的表达。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]已有研究表明，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]与[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的表达成正相关，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000]+[/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的细胞[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]表达量明显升高，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]与[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]双阳性表达在结直肠癌的转移及浸润有着重要的协同作用[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][69][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Wang[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]等人发现[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000]+[/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]细胞及干细胞样球形肿瘤细胞中表达，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]敲低表达[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]抑制球形菌落形成，并且降低了[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的表达[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][26][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。小细胞肺癌细胞的[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]表达量降低后，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]表达量也下降，表明[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]与[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD133[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]存在共表达，但两者之间相互调控机制尚不清楚，需进一步研究。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]是一种跨膜受体蛋白，属于黏附分子家族，是第一个发现并证实是实体瘤干细胞表面标志分子[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][70][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]，研究显示，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]也可能是肺癌肿瘤干细胞的标志物，并可能成为治疗新的靶点[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][71][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]可以作为透明质酸的受体将信号传导入胞内激活下游信号通路如[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Wnt/β-catenin[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][72][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。研究显示，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]在肝细胞癌中，肝癌干细胞的干细胞性质与[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]和[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的表达有关[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][73][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]调节[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000]+[/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]肿瘤干细胞诱导结直肠癌的发生的过程，并且增强肿瘤干细胞的耐药[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。在神经胶质瘤中，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]促进肿瘤干细胞标志物[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的表达[/color][/size][/font][font='times new roman'][sup][size=16px][color=#000000][74][/color][/size][/sup][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]。[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]同样影响[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]的表达，而[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]与[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Wnt[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]通路相互作用，那么，[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]MSI1[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]与[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]CD44[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]可能是通过调控[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]Wnt[/color][/size][/font][font='times new roman'][size=16px][color=#000000]通路相互影响。[/color][/size][/font]

[font=宋体][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法是一种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法，近几年通过优化改良在临床肿瘤治疗上取得很好的效果，是一种非常有前景的，能够精准、快速、高效，且有可能治愈癌症的新型肿瘤免疫治疗方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]一、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法是如何治疗肿瘤疾病的？治疗的流程是什么样？[/font][/b][/font][font=宋体][font=宋体]步骤一：分离[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞[/font][/font][font=宋体][font=宋体]从患者身上分离[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，通过白细胞分离术收集患者的外周血单核细胞，再分离出特定的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞亚群。[/font][/font][font=宋体][font=宋体]步骤二：[/font] [font=宋体]改造[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞[/font][/font][font=宋体][font=宋体]被改造过的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞如同带有[/font][font=Calibri]GPS[/font][font=宋体]导航的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，能够随时准备找到癌细胞，并发动自杀性袭击，与之同归于尽。[/font][/font][font=宋体]步骤三：扩增[/font][font=宋体][font=宋体]在体外培养，大量扩增[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞，一般一个病人需要几亿个[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞。[/font][/font][font=宋体]步骤四：回输[/font][font=宋体][font=宋体]把扩增好的[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞输回病人体内。[/font][/font][font=宋体]步骤五：监护[/font][font=宋体]再回输治疗后，严密监护患者的身体状况。[/font][font=宋体][b][font=宋体]二、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法有哪些优势？[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、治疗更精准[/font][/font][font=宋体][font=宋体]由于[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞是应用基因修饰病人自体的[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞，利用抗原抗体结合的机制，能克服肿瘤细胞通过下调[/font][font=Calibri]MHC[/font][font=宋体]分子表达以及降低抗原递呈等免疫逃逸，让肿瘤细胞无所逃遁；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、多靶向更精准[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]既可以利用肿瘤蛋白质抗原，又可利用糖脂类非蛋白质抗原，扩大了肿瘤抗原靶点范围，[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞作用过程不受[/font][font=Calibri]MHC[/font][font=宋体]的限制；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、杀瘤范围更广[/font][/font][font=宋体][font=宋体]鉴于很多肿瘤细胞表达相同的肿瘤抗原，针对某一种肿瘤抗原的[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]基因构建一旦完成，便可以被广泛利用；[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]4[/font][font=宋体]、杀瘤效果更持久[/font][/font][font=宋体][font=宋体]新一代[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]结构中加入了促进[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞增殖与活化的基因序列，能保证[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞进入体内后还可以增殖，[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞具有免疫记忆功能，可以长期在体内存活。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b][font=宋体]三、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞疗法适用于哪些患者？[/font][/b][/font][font=宋体][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]目前在部分白血病和淋巴瘤的治疗中效果非常好，在多发性骨髓瘤治疗中也取得了巨大进展。针对实体肿瘤的治疗，全球有多项针对不同靶点的临床研究正在开展，一些早期研究结果证实了在实体瘤中应用的安全性和初步有效性。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]目前义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy][b]综合性的[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy][b]CAR-T[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy][b]细胞疗法开发解决方案[/b][/url]，从[/font][font=Calibri]CAR[/font][font=宋体]开发、[/font][font=Calibri]T[/font][font=宋体]细胞激活、慢病毒包装、[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞扩增到[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]细胞质量控制的完整解决方案，全面支持药企进行[/font][font=Calibri]CAR-T[/font][font=宋体]研究。覆盖开发全流程，详情可以参看：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/car-t-cell-immunotherapy[/font][/font]

[b][url=http://www.f-lab.cn/cell-analyzers/ctc-enumeration.html]CTC细胞计数成像系统[/url][/b]集细胞荧光成像和罕见细胞计数功能于一体,自动聚焦成像，能够探测超级罕见细胞,包括[color=#333333]循环肿瘤[/color]细胞(Circulating Tumor Cells, CTCs),CTCs细胞。CTC细胞计数成像系统采用Nikon Ti-2倒置荧光显微镜,配备自动扫描显微镜载物台,自动聚焦器件,高灵敏度荧光CCD相机和LED激发光源组建而成。[img=CTC细胞计数成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/CTCs-enumeration.JPG[/img][img=CTC细胞计数成像系统]http://www.f-lab.cn/Upload/CTC-enumeration.JPG[/img]CTC细胞计数成像系统：[url]http://www.f-lab.cn/cell-analyzers/ctc-enumeration.html[/url][b][/b]

北京华威中仪科技代理的由美国Seahorse Bioscience 公司最新研发的XF生物能量测定仪(细胞代谢呼吸动态分析仪)XF extracellular analyzer是世界首创使用24孔及96孔微孔盘为平台，采用无损伤专利固态探针侦测技术即时同步侦测有氧呼吸O2(OCR)以及糖酵解作H+(OCAR)、 CO2产率(CDPR)的动态分析仪，透过此系统的协助，研究者得以更快的速度、更简易的设计了解细胞以及线粒体如何运用不同的受质作为能量的来源、评估疾病与氧代谢及线粒体运作状态之交互作用、分析代谢调节药物对于生理的效应、建立细胞品管系统、快速筛选出具开发潜力之药物及药物毒性评估等多种不同应用。此系统现已被广泛应用于免疫学、药物筛选、肝脏及外源性毒理、糖尿病及肥胖症、老化、干细胞、细胞生理、药物转化等各个领域，哈佛大学等名校已借助该系统在nature、cell上发表文章几十篇，其他SCI高影响因子文章200多篇，现在就拥有Seahorse Bioscience 公司的细胞代谢呼吸动态分析仪，领先下一个细胞与线粒体研究的黄金十年。

[align=center][font='times new roman'][size=21px]肿瘤细胞分泌的外[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=21px]体在机体内的作用[/size][/font][/align][font='times new roman'][size=16px]摘要[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤细胞通过产生，释放和利用外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体来促进肿瘤发生发展。肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体在肿瘤中的作用机制以成为目前的研究热点。外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体作为信息载体，可将遗传信息从肿瘤细胞传递到位于近处或远处的正常或其他异常细胞。所有体液中[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]均[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]发现了肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体，与靶细胞接触后，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]会改变受体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的表型和功能属性，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]起到促进[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]血管生成，血栓形成，免疫抑制，肿瘤转移和耐药的作用。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在抑制宿主抗肿瘤反应和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]介导[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]耐药中发挥重要作用。肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可能会干扰癌症患者的免疫治疗。它们在癌症进展以及癌症治疗中的生物学作用表明肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体是致癌转化的关键组成部分。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]关键词[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体；肿瘤转移；耐药；免疫抑制；血栓形成[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]多细胞生物[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]中相邻细胞之间的通讯通常包括细胞内物质的交换和共享，这些[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]过程[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]是通过细胞间连接、突触或通过吞噬作用形成的，都需要细胞接触并且在短距离内进行。相反，外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌体代表[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]了信息传递的独特形式，既可以在短距离传递，也可以在长距离下进行信息交流。肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可以将信号从肿瘤细胞转移到远端组织和器官。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]存在于机体循环中，并可以随时进入身体的各个部位。它们带有能够与内皮细胞接触并促进外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体进入血管和组织的表面成分[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]1,2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。但是肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体仅占患者血浆中总外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]一[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]小部分，且该部分的含量可根据肿瘤进展而改变。[/size][/font]1. [font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体在肿瘤转移中的作用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的转移过程[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]开始[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]于肿瘤细胞经历[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]了[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]上皮间质转化（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Epithelial-to-mesenchymal transition[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）。肿瘤细胞[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]获得[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]迁移[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]能力，并[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]进入血液[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]淋巴系统[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，逐渐[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]转移[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]到其他组织[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]这些[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤细胞产生具有独特分子特征的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]主要包含[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]相关的蛋白质与迁移和侵袭所需的分子，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]如[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]前列腺癌释放的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中的α[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]v[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]β[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]6[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]整联蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][3][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，白血病[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]或[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]乳腺癌衍生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Wnt[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]通路[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]成分[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][4,5][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，以及胃肠道间质瘤（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]GIST[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）产生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]KIT [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][6][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。这些外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中缺氧诱导因子[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]HIF[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的含量增加，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]促炎因子[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的含量也增加[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][7][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。准备迁移的肿瘤细胞产生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可与机体的血管、基质成分和免疫细胞相互作用，完成转移前的准备[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][8][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。黑色素瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体显示在前哨淋巴结中积累，刺激血管生成，重塑细胞外基质并诱导黑色素瘤细胞富集到淋巴结中[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][9][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Peinado[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]研究团队证明了，从高度转移的鼠类黑[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]色素瘤细胞衍生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体能够将骨髓重编程为转移前的生理状态。现在已有研究支持肿瘤细胞分泌的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体与高度侵袭性的黑色素瘤细胞的发展有关，与空白对照组相比，实验组小鼠先前外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体进行过注射处理，其体内黑色素瘤细胞的增殖和转移速率明显提高[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][10][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。在许多有关鼠类和人体肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的近期研究中，已证明这些外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体还携带微小[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]RNA[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]分子，将其转移至正常细胞并诱导其遗传和蛋白质谱发生变化，从而有利于转移形成[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][11,12][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体已被证明带有[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD39[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD73[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，它们是催化腺苷产生的外核苷酸酶[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][13][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。腺苷在机体内可[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]介[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]导免疫抑制，发挥促进血管生成并驱动细胞基质重塑的重要作用，所有这些功能都促进肿瘤细胞迁移及其进入淋巴结。肿瘤外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌体支持[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]转移的能力可以通过腺苷参与不同类别的分子途径[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][14][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font]2. [font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体在肿瘤耐药性中的作用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤对放射和化学药物的抵抗作用是肿瘤患者临床治疗中面对的严重问题，至今尚未得到解决。值得注意的是有研究指出肿瘤分泌的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体在肿瘤的耐药性中起重要作用；肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体通过多种机制促进耐药性的发展，例如肿瘤细胞可以将化学治疗性药物（例如顺铂）浓缩并通过外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体从细胞质中去除[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][15][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]；此外肿瘤细胞还可以简单地将化疗药物包装到外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中以保护自己免受细胞毒性作用。耐药性肿瘤细胞可以通过外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体将抗性传递给敏感细胞，从而产生新的耐药性肿瘤细胞株。例如，已显示某些[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]RNA[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]miR-100[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]miR-222[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]miR-30a[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]miR-17[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）在外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中从抗阿霉素和多[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]西他赛[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的乳腺癌耐药细胞系转移至敏感细胞[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]系[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]赋予抗药性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][16][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。有研究报道，在乳腺癌中，由[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]HER2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞系或[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]HER2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的肿瘤患者[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]产生的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]携带[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]HER2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]可以[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]清除特异性抗肿瘤药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]物曲妥珠单[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]抗[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][17,18][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。多[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]西他赛[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]耐药性已在前列腺癌中进行了研究，发现其抗药性是通过多药耐药蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]-1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MDR-1 / P-[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]gp[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌体转移[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]而赋予的，多药耐药蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]-1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]是一种[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]P-[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]糖蛋白转运蛋白，通常在耐药肿瘤中过表达[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][19][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]顺铂耐药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的卵巢癌产生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中富含其他转运蛋白，例如[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MDR-2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]ATP-7A[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]ATP-7B [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][15][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。最近的研究表明，耐药性部分归因于外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]miRNA[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]从耐药性癌细胞向敏感性癌细胞的细胞间转移[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][16][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。黑色素瘤动物模型的体内研究表明，质子泵抑制剂（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]PPI[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）和低[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]pH[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]剂的联合使用可有效降低外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]对顺铂的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]耐药性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][20][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。尽管现有的研究表明外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体与肿瘤的耐药[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]性转移有关，但更详细的分子和遗传学分析对于确认上述研究并确定该过程中的潜在机制是十分重要的。[/size][/font]3. [font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体对宿主免疫功能的影响[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]不仅仅在[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤微环境[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]起[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]免疫抑制或免疫刺激作用，与循环[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]系统[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]以及各种淋巴器官中的免疫细胞也[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]可以[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]相互[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]作用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]例如，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]白血病胚泡衍生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体在血浆中[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]聚集[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]并直接与免疫细胞作用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][21][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。在肿瘤存在的情况下，外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体与周围免疫细胞的相互作用会导致免疫抑制[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][22][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]实验性小鼠模型的体内研究表明，注射肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体后，外周免疫细胞的功能发生改变，这些改变[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]导致[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤生长和更短的生长周期[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][23][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。将离体分离的人[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]B[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞或[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]NK[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞与肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体共同孵育，导致[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]其[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]介[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]导的抗肿瘤功能部分或完全丧失，其机制与上述中外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的机制相同。癌症患者血液和淋巴器官中常见免疫抑制因子，并且似乎与血浆中外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的水平相关。循环肿瘤源性外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的分子和遗传特征部分反映了在肿瘤细胞中发现的分子和遗传特征，这些特征正在作为鉴定癌症进展的非侵入性生物标志物的潜在方法被广泛研究[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][24][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤源性外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的免疫抑制机制之一是癌症患者循环中活化的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]效应细胞的凋亡。癌症患者循环中几乎所有的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]淋巴细胞都表达表面[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD95[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，同时有许多表达[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]PD-1 [/size][/font][font='times new roman'][size=16px][25][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。因此，它们分别受到携带[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]FasL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]膜形式[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体或携带[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]PD-L1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的凋亡影响。这些凋亡诱导分子在外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体中的表达水平与癌症患者循环中对细胞凋亡敏感的活化[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞的频率相关。此外，循环中的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞的“自发凋亡”与疾病分期和预后之间存在显着相关性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][26][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]TEX[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]介[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]导的导致活化[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞凋亡的信号与靶细胞中的早期膜变化（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]即膜联蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]V[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]结合）、半[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]胱天冬酶[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]3[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]裂解、线粒体细胞色素[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]C[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]释放、线粒体膜电位（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MMP[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）的损失以及最后的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]DNA[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]片段[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]化有关[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][27][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] PI3K / AKT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]途径成为活化的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞中肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的主要靶标。有研究发现调节[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]PI3K-AKT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]信号的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]PTEN[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]是外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的组成成分，并[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]介[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]导受体细胞中的磷酸酶活性。将活化的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞与肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体共同孵育会导致严重的时间依赖性[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]AKT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]去磷酸化，并同时下调抗凋亡蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Bcl-2[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]，[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Bcl-xL[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MCl-1[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的表达水平，同时，肿瘤细胞分泌的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体会上调促凋亡蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Bax[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][28][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。这些研究表明，肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体通过参与外在和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]内在的凋亡途径来诱导活化的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]CD8[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]+[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞凋亡[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][22][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。体外数据与癌症患者循环[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]T[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]细胞中促凋亡或抗凋亡家族成员表达的类似变化的报道一致[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][7][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可能会激活宿主的免疫系统。由于发现了肿瘤相关抗原（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]TAA[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）、[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]MHC[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]分子、伴侣蛋白（例如热休克蛋白[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]HSP-70[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]和[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]HSP-90[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）等，因此，研究人员对肿瘤衍生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的免疫刺激作用进行了详细的研究。实际上，肿瘤细胞释放并被免疫系统内化的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体是开发抗肿瘤疫苗中[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]TAA[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的良好来源[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][29,30][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。有研究报道在鼠类肿瘤模型中进行的疫苗接种研究证实，使用肿瘤衍生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体进行有效的疫苗接种可诱导小鼠产生强大的抗肿瘤免疫力和肿瘤排斥反应[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][31][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。基于这些报告，在人类临床试验中，肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体分别被认为是疫苗佐剂和治疗性疫苗的设计的免疫激活剂和免疫原性抗原的贡献者。[/size][/font]4. [font='times new roman'][size=16px]外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体在血栓形成过程中的作用[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]晚期恶性肿瘤患者可能会产生足以危及生命的血栓。有研究指出，携带转移因子（[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Tf[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]）的肿瘤来源外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可以诱导癌症相关的血栓形成[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][32][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px] [/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Tf[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]也被称为凝血因子，其在患者体内的过表达与肿瘤的进展和转移密切相关[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][33][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。当癌细胞发生[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]EMT[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]过程时，它们开始释放含有高水平[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Tf[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体。这些富含[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Tf[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可以被内皮细胞内化，并诱导其快速转化为促凝血表型。癌症患者血浆中存在大量促凝囊泡是一种不良预后因素[/size][/font][font='times new roman'][size=16px][32][/size][/font][font='times new roman'][size=16px]。但是，目前尚不清楚外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌体转移[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]Tf[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]及其促血栓作用如何促进癌症进展和转移形成。[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]总结[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在过去的[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]10[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]年里，外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体作为细胞间传递信息的载体而被熟知。虽然信息传递可能是外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的主要生物学作用，但这种囊泡通讯机制似乎超越了几乎所有的细胞功能，并调节所有正常和异常细胞的分子和遗传特征。肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体引起了人们的兴趣，因为人们认为它们不仅能将肿瘤的信息传递给附近或远处的正常细胞，而且还能改变这些靶细胞的表型和功能，从而促进肿瘤的进展。在[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]TME[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]中，这些外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体直接或间接有助于肿瘤的发生发展。在癌症中，循环外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体的负荷和功能与健康供体不同。肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体是血浆内容物的重要组成部分，它们的分子和基因图谱在疾病或治疗过程中发生变化，并且部分反映了母体肿瘤细胞的特征。此外，通过自分泌或旁分泌信号，肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体调节肿瘤生长，驱动新生血管形成、细胞分化、迁移和生存，并协调转移性肿瘤扩散。肿[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌体似乎[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]在整个癌变过程中发挥作用，并被肿瘤细胞设定为促进癌变的过程。它们还能抑制抗肿瘤免疫反应。此外，它们还可以将癌基因和致癌蛋白或其转录本从肿瘤细胞中转移到正常细胞。有趣的是，正常造血或组织细胞产生的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体可以[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]介[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]导抗肿瘤反应并维持体内平衡。区分好的和坏的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌体成为[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]未来沉默肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体疗法的主要挑战。肿瘤来源的外[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]泌[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]体作为治疗靶点或癌症生物标志物进入这个领域之前，还需要进行更多的基础和临床工作。[/size][/font][align=center][font='times new roman'][size=21px][color=#000000]参考文献[/color][/size][/font][/align][1] [font='times new roman']Skog J, W[/font][font='times new roman']ü[/font][font='times new roman']rdinger[/font][font='times new roman'] T, Van Rijn S, et al. Glioblastoma [/font][font='times new roman']microvesicles[/font][font='times new roman'] transport RNA and proteins that promote [/font][font='times new roman']tumour[/font][font='times new roman'] growth and provide diagnostic biomarkers[/font][font='times new roman'][J].[/font][font='times new roman'] Nature Cell Biology, 2008, 10(12):1470-1476.[/font][2] [font='times new roman']Al-[/font][font='times new roman']Nedawi[/font][font='times new roman'] K, Meehan B, [/font][font='times new roman']Kerbel[/font][font='times new roman'] R S, et al. Endothelial expression of autocrine VEGF upon the uptake of tumor-derived [/font][font='times new roman']microvesicles[/font][font='times new roman'] containing oncogenic EGFR[J].[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']Proceedings of the National Academy of Sciences,[/font][font='times new roman'] [/font][font='times new roman']2009, 106(10):3794-3799.[/font][3] [font='times new roman']Bretz[/font][font='times new roman'] N P, [/font][font='times new roman']Ridinger[/font][font='times new roman'] J, Rupp A K, et al. Body fluid exosomes promote secretion of inflammatory cytokines in monocytic cells via Toll-like receptor signaling[J]. The Journal of biological chemistry, 2013, 288(51):36691.[/font][4] [font='times new roman']Chalmin[/font][font='times new roman'] F, [/font][font='times new roman']Ladoire[/font][font='times new roman'] S, Grégoire M, et al. 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铂类药物是一类重要的肿瘤化疗药物，在临床中得到广泛的应用，成为治疗包括肺癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌、睾丸癌等常见恶性肿瘤的一线药物。然而，目前临床使用的铂类抗癌药物对肿瘤细胞缺乏选择性，在杀死肿瘤细胞的同时，对正常细胞也有较大伤害，导致明显的临床毒副作用。同时，肿瘤病人容易对铂类药物产生耐药性，导致化疗失败。 针对铂类药物存在的以上两大问题，中国科学院昆明植物研究所李艳研究组与昆明贵金属研究所刘伟平研究组合作，发现mixed-NH3/cyclopentamine和不对称的3-X-1,1-cyclobutanedicarboxylato与Pt(II)配合物对肿瘤细胞显示出明显的选择性，能选择性诱导肿瘤细胞的凋亡，而对正常细胞影响很小，同时对顺铂耐受的非小细胞肺癌和卵巢癌细胞株有较高的杀伤活性，显示出重要的研究开发前景。 近日，这类化合物的结构和用途已经获得国家发明专利授权（ZL20101027465.2）。

简单介绍一下关于药物高通量筛选技术的知识一.概念高通量筛选(High throughput screening，HTS)技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础，以微板形式作为实验工具载体，以自动化操作系统执行试验过程，以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据，以计算机对实验数据进行分析处理，同一时间对数以千万样品检测，并以相应的数据库支持整个体系运转的技术体系。二. 高通量筛选技术体系的组成1. 化合物样品库化合物样品主要有人工合成和从天然产物中分离纯化两个来源。其中,人工合成又可分为常规化学合成和组合化学合成两种方法。2.自动化的操作系统自动化操作系统利用计算机通过操作软件控制整个实验过程。操作软件采用实物图像代表实验用具，简洁明了的图示代表机器的动作。自动化操作系统的工作能力取决于系统的组分，根据需要可配置加样、冲洗、温解、离心等设备以进行相应的工作。3.高灵敏度的检测系统检测系统一般采用液闪计数器、化学发光检测计数器、宽谱带分光光度仪、荧光光度仪等。4.数据库管理系统数据库管理系统承担4个方面的功能: 样品库的管理功能;生物活性信息的管理功能; 对高通量药物筛选的服务功能; 药物设计与药物发现功能。三. 高通量筛选模型常用的筛选模型都在分子水平和细胞水平，观察的是药物与分子靶点的相互作用，能够直接认识药物的基本作用机制。1. 分子水平的药物筛选模型:受体筛选模型;酶筛选模型;离子通道筛选模型1.1受体筛选模型:指受体与放射性配体结合模型。以受体为作用靶的筛选方法,包括检测功能反应、第二信使生成和标记配体与受体相互作用等不同类型。1.2酶筛选模型:观察药物对酶活性的影响。根据酶的特点,酶的反应底物,产物都可以作为检测指标,并由此确定反应速度。典型的酶筛选包括1) 适当缓冲液中孵化;(2)控制反应速度,如:温度,缓冲液的pH值和酶的浓度等;(3)单时间点数器, 需测量产物的增加和底物的减少。1.3离子通道筛选模型: (1)贝类动物毒素的高通量筛选,其作用靶为Na+通道上的蛤蚌毒素结合位点，用放射性配体进行竞争性结合试验考察受试样品。(2)用酵母双杂交的方法高通量筛选干扰N型钙通道β3亚单位与α1β亚单位相互作用的小分子，寻找新型钙通道拮抗剂。2.细胞水平药物筛选模型观察被筛样品对细胞的作用,但不能反映药物作用的具体途径和靶标,仅反映药物对细胞生长等过程的综合作用。包括: 内皮细胞激活; 细胞凋亡; 抗肿瘤活性; 转录调控检测; 信号转导通路; 细菌蛋白分泌; 细菌生长。四.问题及展望高通量筛选技术与传统的药物筛选方法相比有以下几个优点:反应体积小；自动化；灵敏快速检测；高度特异性。但是，高通量筛选作为药物筛选的一种方法,并不是一种万能的手段，特别是在中药研究方面，其局限性也是十分明显的。首先，高通量筛选所采用的主要是分子、细胞水平的体外实验模型，因此任何模型都不可能充分反映药物的全面药理作用；其次，用于高通量筛选的模型是有限的和不断发展的，要建立反映机体全部生理机能或药物对整个机体作用的理想模型，也是不现实的。但我们应该相信，随着对高通量筛选研究的不断深入，随着对筛选模型的评价标准、新的药物作用靶点的发现以及筛选模型的新颖性和实用性的统一，高通量筛选技术必将在未来的药物研究中发挥越来越重要的作用。

【序号】：4【作者】：关冀弛1刘丹1陈艳阁【题名】：肿瘤细胞三维培养技术研究进展【期刊】：沈阳医学院学报. 【年、卷、期、起止页码】：2022,24(06)【全文链接】：https://kns.cnki.net/kcms2/article/abstract?v=jDUTNXVfqCoielzE7h4t-am9E_oe5xlONsBgDY0mru9ikUWnSCWY-vAr_o11tuIPp8SE-GcSkchfkDV9lHEHuYxiCn8FEd3Lbjmjqrittf1kZtDlew_w2B3buwZk8Pby6mtVJrb8XkZlCD0rkc_znw==&uniplatform=NZKPT&language=CHS

WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT、WST-1或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点，成为细胞增殖与活性测定新选择。国际知名生化试剂供应商Cayman Chemical提供的WST-8 Cell Proliferation Assay Kit（WST-8细胞增殖分析试剂盒）及WST-8，因其超高性价比，受到国内外科研工作者的追捧！ WST-8是一种水溶性四唑盐，常用于评估细胞的代谢活性。在中性pH值及中间电子受体存在的情况下，被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的蓝/紫色甲臜产物（formazan）。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已被广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。http://www.bio-review.com/wp-content/uploads/2016/04/WST.jpg图1：WST-8作用原理以前，客户习惯用MTT、WST-1法测定细胞增殖，WST-8是MTT的一种升级替代产品，和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点：WST-8溶液对细胞的毒性非常低，细胞在WST-8法检测后仍然可以正常生长MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。WST-8比XTT和MTS更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽，灵敏度更高。WST-8和WST-1相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。WST-8 Cell Proliferation Assay Kit（WST-8细胞增殖分析试剂盒，货号：10010199）及WST-8（货号：18721）。http://www.bio-review.com/wp-content/uploads/2010/06/ads1-earthox.gif产品名称及描述品牌货号产品说明WST-8 Cell Proliferation Assay KitCayman10010199 WST-8 Cell Proliferation Assay Kit特点：比色法、无放射性测定细胞活性及增殖可定量的细胞密度高达5×106cells/ml，每孔可定量2,000-500,000的细胞快速分析，2-4h得结果操作简便、灵敏度高、数据可靠、重现性好这么无敌的试剂盒，价格还便宜！该试剂盒含两种Cayman Chemical专利组分：WST-8 Developer Reagent及Electron Mediator Solution。简便的试剂盒操作步骤如下：将WST-8 Developer Reagent和Electron Mediator Solution等比混合，制成混合物将混合物加入细胞（如果需要测细胞毒性，此过程中加待测药物），共孵育450nm，读取吸光值。http://www.bio-review.com/wp-content/uploads/2016/04/result-1.png图2：白血病细胞活性测定结果建议参考文献：Li, Li, et al. "Protective effects of decursin and decursinol angelate against amyloid β-protein-induced oxidative stress in the PC12 cell line: the role of Nrf2 and antioxidant enzymes." Bioscience, biotechnology, and biochemistry 75.3 (2011): 434-442.Lin, Tzu-yin, et al. "Targeting canine bladder transitional cell carcinoma with a human bladder cancer-specific ligand." Molecular cancer 10.1 (2011): 1.Li, Li, et al. "Decursin Isolated from Angelica gigas Nakai Rescues PC12 Cells from Amyloid-Protein-Induced Neurotoxicity through Nrf2-Mediated Upregulation of Heme Oxygenase-1: Potential Roles of MAPK." Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine 2013 (2013).Martinesi, M., et al. "Biocompatibility studies of low temperature nitrided and collagen-I coated AISI 316L austenitic stainless steel." Journal of Materials Science: Materials in Medicine 24.6 (2013): 1501-1513.l向全球科学工作者提供多研究领域的生化、免疫试剂和分析试剂盒，其产品被广泛应用于肿瘤、氧化氮、神经学、凋亡、氧化性损伤、内分泌学等不同研究领域。Cayman Chemical还提供各种有机化合物和生物化合物的定制合成服务，被视为全球最复杂和最不稳定化合物合成的唯一供应商。作为Cayman Chemical在中国的区域总代理，将为中国客户提供最全面的Cayman Chemical产品及客户订制化服务。如果您对以上产品及Cayman Chemical产品感兴趣，

用途： 流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节 分辨率为零。 流式细胞仪主要由四部分组成。它们是：流动室和液流系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统 参数测量原理荧光信号主要包括两部分：①自发荧光，即不经荧光染色细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光；②特征荧光，即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光，其荧光强度较弱，波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中，对于结合水平不高的荧光抗体来说，如何提高信噪比是个关键。一般说来，细胞成分中能够产生的自发荧光的分子（例核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞/活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。　　减少自发荧光干扰、提高信噪比的主要措施是：①尽量选用较亮的荧光染料；②选用适宜的激光和滤片光学系统；③采用电子补偿电路，将自发荧光的本底贡献予以补偿。仪器的操作和使用　　①打开电源，对系统进行预热；　　②打开气体阈，调节　压力，获得适宜的液流速度；开启光源冷却系统；　　③在样品管中加入去离子水，冲洗液流的喷嘴系统；　　④利用校准标准样品，调整仪器，使在激光功率、光电倍增管电压、放大器电路增益调定的基础上，0和90散射的荧光强度最强，并要求变异系数为最小；　　⑤选定流速、测量细胞数、测量参数等，在同样的工作条件下测量样品和对照样品；同时选择计算机屏上数据的显示方式，从而能直观掌握测量进程；　　⑥样品测量完毕后，再用去离子水冲洗液流系统；　　⑦因为实验数据已存入计算机硬盘（有的机器还备有光盘系统，存贮量更大），因此可关闭气体、测量装置，而单独使用计算机进行数据处理；　　⑧将所需结果打印出来。热销细胞网是采用Accuri 型2号流式细胞仪，指示符®软件和工作站电脑供应在对市场价格领先的系统的一小部分的功能齐全的流式细胞仪的所有功能。在C6系统包括蓝色和红色激光，四色探测器和正向和侧向散射检测器加上软件，非常直观，你通常将和内收到您的Accuri小时运行的系统。

定义：单细胞研究，就是针对单个细胞的研究，这是相对于群体细胞的研究。研究意义：细胞是生命活动的基本单位，研究细胞的结构功能及行为，有利于揭示复杂生命体的生命活动规律，探究生理生化现象，获得统计平均结果。然而，现代研究表明，单个细胞内的成分存在巨大差异，平均分析结果不能反映单个细胞内成分的真实情况，会带来误导信息。癌症等疾病总是从个别细胞的变异开始，极少量异常细胞信号会被群体信号所掩盖，不能及时获得有关病变的信息。另外，细胞间的信号传导，应激反应等活动在细胞内迅速发生，传统方法无法做到实时监测。对于数量较少且较为珍贵的细胞样本，如干细胞、元祖细胞及患者样本，传统分析方法需要大量的细胞样本，并不适宜。关于物质在细胞内的空间分布，亚细胞结构如细胞器的分析，传统方法也不能满足。这些都要求我们在一定范围内从单细胞水平研究细胞的生命活动。单细胞分析方法：毛细管电泳、微流控芯片、图像分析、动力学分析及纳米技术等。目前单细胞分析存在的难点：首先无论是针对一个特异性大分子，还是在OMIC水平上进行分子分析，都存在单细胞提取物数量少，难以分析的困难，这甚至可以说是不可能完成的，因此增加灵敏度势在必行。除此之外高通量分析也是一个瓶颈，要想获得单细胞分析确切的分析结果，研究人员必须快速而准确的分析多个细胞，这并不容易。另外单细胞分析也常常需要进行多种方式分析，这不仅是由于细胞存在于一种异质性环境汇总，而且也在同一时间，也需要测量多个参数。

近日，美国麻省理工学院利用造价低廉的激光开发出一种从样品中分离某些细胞的新系统。该系统能在普通的玻璃载玻片上分离出1万多种细胞，这将有助于研究人员轻松完成许多在以前看来不可能的生物实验。而且，与其他细胞分离方法相比，该系统分离速度快、操作简单且价格便宜。这一研究结果刊登在12月15日的《分析化学》（Analytical Chemistry）上。 此前，细胞分离系统都是将样品与可跟特定蛋白质或其他成分反应的标记物混合，然后根据样品是否发出荧光来分离细胞。新系统将根据细胞中某些特定部分的反应来进行更加细致的细胞分离。另外，系统还能根据反应速度的快慢以及持续时间的长短来分离细胞，而用传统分离办法完成这些工作是不可能的。 新系统仅利用一个固定在普通玻璃载玻片上的透明有机硅薄层。硅层中分布了很多小空穴，使样品溶液中的细胞能沉淀在其中。经过如此改装的载玻片就能帮助研究人员分离出上万个细胞。 通过显微镜，研究人员或计算机系统能仔细察看细胞是否在特定区域或时间发出荧光。一旦发现发出荧光的细胞，计算机将自动记录其位置。然后，所有被记录下来的细胞将在激光束的作用下从空穴中浮出，最后这些细胞经液体冲刷后就可收集到容器中。 该系统的研发人员称，用激光束使细胞从空穴中浮出来，就像用消防管的水推动一个充气球。但激光的作用非常轻柔，不会使细胞受到损伤。 与光镊等昂贵的分离技术不同，这个系统的成本仅为几千美元，因此可广泛应用于生物实验室和临床研究机构。研究人员预计，该系统将在临床试验与诊断、基因筛选以及克隆研究等方面发挥重要作用。（来源：科技日报 徐玢） （《分析化学》（Analytical Chemistry），79 (24), 9321 -9330, 2007. 10.1021/ac071366y S0003-2700(07)01366-2，J. R. Kovac and J. Voldman）

细胞培养FAQ： 1 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可， 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 3 可否使用与原先培养条件不同之培养基？ 不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基， 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基， 细胞大都无法立即适应， 造成细胞无法存活。 4 可否使用与原先培养条件不同之血清种类？ 不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源， 所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清， 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。 5 何谓FBS, FCS, CS, HS ? FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思， 两者都是指胎牛血清， FCS 乃错误的使用字眼， 请不要再使用。CS (calf serum) 则是指小牛血清。HS (horseserum) 则是指马血清。 6 培养细胞时应使用5 % 或10% CO2？或根本没有影响？ 一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作为pH 的缓冲系统， 而培养基中NaHCO3 的含量将决定细胞培养时应使用的CO2 浓度。当培养基中NaHCO3 含量为每公升3.7 g 时，细胞培养时应使用10 % CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5 g 时， 则应使用5 % CO2 培养细胞。 7 何时须更换培养基？ 视细胞生长密度而定， 或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。 8 培养基中是否须添加抗生素？ 除于特殊筛选系统中外， [font=宋

激光扫描共聚焦显微镜是近十年发展起来的医学图像分析仪器，与传统的光学显微镜相比，大大地提高了分辨率，能得到真正具有三维清晰度的原色图像。并可探测某些低对比度或弱荧光样品，通过目镜直接观察各种生物样品的弱自发荧光。能动态测量Ca2+ 、pH值，Na+、Mg2+等影响细胞代谢的各种生理指标，对细胞动力学研究有着重要的意义。同时激光扫描共聚显微镜可以处理活的标本，不会对标本造成物理化学特性的破坏，更接近细胞生活状态参数测定。可见激光扫描共聚焦显微镜是普遍显微镜上的质的飞跃，是电子显微镜的一个补充，现已广泛用于荧光定量测量，共焦图像分析，三维图像重建、活细胞动力学参数分析和胞间通讯研究等方面，在整个细胞生物学研究领域有着广阔的应用前景。1. 定量荧光测量ACAS可进行重复性极佳的低光探测及活细胞荧光定量分析。利用这一功能既可对单个细胞或细胞群的溶酶体，线粒体、DNA、RNA和受体分子含量、成份及分布进行定性及定量测定，还可测定诸如膜电位和配体结合等生化反应程度。此外，还适用于高灵敏度快速的免疫荧光测定，这种定量可以准确监测抗原表达，细胞结合和杀伤及定量的形态学特性，以揭示诸如肿瘤相关抗原表达的准确定位及定量信息。2. 定量共聚焦图像分析借助于ACAS激光共焦系统，可以获得生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像。可得到完整活的或固定的细胞及组织的系列及光切片，从而得到各层面的信息，三维重建后可以揭示亚细胞结构的空间关系。能测定细胞光学切片的物理、生物化学特性的变化，如DNA含量、RNA含量、分子扩散、胞内离子等，亦可以对这些动态变化进行准确的定性、定量、定时及定位分析。3. 三维重组分析生物结构ACAS使用SFP进行三维图像重组，SFP将各光学切片的数据组合成一个真实的三维图像，并可从任意角度观察，也可以借助改变照明角度来突出其特征，产生更生动逼真的三维效果。4. 动态荧光测定Ca2+、pH 及其它细胞内离子测定，利用ACAS能迅速对样品的点，线或二维图像扫描，测量单次、多次单色、双发射和三发射光比率，使用诸如Indo-1、BCECF 、Fluo-3等多种荧光探针对各种离子作定量分析。可以直接得到大分子的扩散速率，能定量测定细胞溶液中Ca2+对肿瘤启动因子、生长因子及各种激素等刺激的反应，以及使用双荧光探针Fluo-3和CNARF进行Ca2+和pH的同时测定。5. 荧光光漂白恢复（FRAP）——活细胞的动力学参数荧光光漂白恢复技术借助高强度脉冲式激光照射细胞某一区域，从而造成该区域荧光分子的光淬灭，该区域周围的非淬灭荧光分子将以一定速率向受照区域扩散，可通过低强度激光扫描探测此扩散速率。通过ACAS可直接测量分子扩散率、恢复速度，并由此而揭示细胞结构及相关的机制。6. 胞间通讯研究动物细胞中由缝隙连接介导的胞间通讯被认为在细胞增殖和分化中起非常重要的作用。ACAS可用于测定相邻植物和动物细胞之间细胞间通讯，测量由细胞缝隙连接介导的分子转移，研究肿瘤启动因子和生长因子对缝隙连接介导的胞间通讯的抑制作用，以及胞内Ca2+、PH和cAMP水平对缝隙连接的调节作用。7. 细胞膜流动性测定ACAS设计了专用的软件用于对细胞膜流动性进行定量和定性分析。荧光膜探针受到极化光线激发后，其发射光极性依赖于荧光分子的旋转，而这种有序的运动自由度依赖于荧光分子周围的膜流动性，因此极性测量间接反映细胞膜流动性。这种膜流动性测定在膜的磷脂酸组成分析、药物效应和作用位点，温度反应测定和物种比较等方面有重要作用。8. 笼锁-解笼锁测定许多重要的生活物质都有其笼锁化合物，在处于笼锁状态时，其功能被封闭，而一旦被特异波长的瞬间光照射后，光活化解笼锁，使其恢复原有活性和功能，在细胞的增值、分化等生物代谢过程中发挥功能。利用ACAS可以人为控制这种瞬间光的照射波长和时间，从而达到人为控制多种生物活性产物和其它化合物在生物代谢中发挥功能的时间和空间作用。9. 粘附细胞分选ACAS是目前唯一能对粘附细胞进行分离筛选的分析细胞学仪器，它对培养皿底的粘附细胞有两种分选方法： ① Coolie-CutterTM法，它是Meidian公司专利技术，首先将细胞贴壁培养在特制培养皿上，然后用高能量激光的欲选细胞四周切割成八角形几何形状，而非选择细胞则因在八角形之外而被去除，该分选方式特别适用于选择数量较少诸如突变细胞、转移细胞和杂交瘤细胞，即使百万分之一机率的也非常理想。 ② 激光消除法，该方法亦基于细胞形态及荧光特性，用高能量激光自动杀灭不需要的细胞，留下完整活细胞亚群继续培养，此方法特别适于对数量较多细胞的选择。10. 细胞激光显微外科及光陷阱技术借助ACAS可将激光当作“光子刀”使用，借此来完成诸如细胞膜瞬间穿孔、切除线粒体、溶酶体等细胞器、染色体切割、神经元突起切除等一系列细胞外科手术。通过ACAS光陷阱操作来移动细胞的微小颗粒和结构，该新技术广泛用于染色体、细胞器及细胞骨架的移动。