气相色准曲线十七内标加入量

请问做有机氯农药标准曲线的时候加入内标物（TCMX）和不加内标物，对所作的标准曲线有影响吗？相同浓度的混标加入内标和不加内标其跑出来的图积分面积会不一样吗？因为样品处理过程中我加了内标，不知道做标准曲线的时候是否需要加入内标？希望大神给予知道。。十分感谢~

我对内标法不是很懂，有一些问题需要求教大家。 我用TCD 测一个含盐的三元混合物（水，DMAC，三氯甲烷，这三种物质的量都要测），选择丙酮做内标物，用内标标准曲线法。 1.先分别称取这三种物质的五中不同的质量，然后用相同浓度的丙酮分别稀释到和内标物丙酮一样的浓度。 2.然后用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]测这15个标样，做三条标准曲线（横坐标为对照品/内标物浓度，纵坐标为对照品的峰面积除以对应的内标的峰面积）。 3.取待测样品，加入相同浓度的丙酮，进入[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]。问题：这样的做法对么，待测样品中加入的丙酮的量是多少呢。在做标准曲线的时候，因为是三个成分要测，而且各个组分占混合物的质量分数不同，那么丙酮溶液的稀释浓度是跟三个组分中含量最大的浓度一致么?

我检索了好多文献，发现他们在稀释好标准曲线溶液后再加入内标溶液混合，这样标准曲线的原浓度不是被改变了吗。会影响后边的结果吗？求大佬解答

各位大神 （[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]、液相）用内标法测含量时，需要每次都要重新计算相对较正因子么？ 已经建立好的内标法标准曲线，需要每次检验前重新建立么

最近在做气相，由于用的内标法，标准中要求每天做随行标准曲线。发现不同天甚至上下午，虽然配置相同浓度的六个点做标曲，然而得到的每个浓度点的F值（待测物峰面积比内标物峰面积）相差很大，有时差好几倍呢。同时最后绘制的标准曲线的截取和斜率相差很大。 我想问，既然待测物质和内标物质是不变的，浓度和配置方法也是相同的，仪器是同一台仪器。为什么标曲会相差很大呢，这会不会造成定量的不准确啊。

问题：加内标是为了校正仪器信号的不稳定，加入内标做标准曲线，纵坐标变成待测同位素和内标同位素的相应比，横坐标是含量比吗？看了些帖子，大家似乎都没有讨论到内标吸入的稳定性。大家觉得蠕动泵的转速能稳定到什么程度呢？能到几位有效数字呢？此外，大家如何减小在线加入内标带来的样品稀释，灵敏度减小的弊端？

[b][color=#5f9cef]归一化法[/color][/b]把所有出峰的组分含量之和按100%计的定量方法，称为归一化法。各成分校正因子一致时可用该法，该法简便、准确，特别是进样量不容易准确控制时，进样浓度及进样量的变化的影响很小。其他操作条件，如流速、柱温等变化对定量结果的影响也很小。GC应用广于HPLC。[b][color=#5f9cef]外标法（标准曲线法、直接比较法）[/color][/b][color=#ff8124]首先用欲测组分的标准样品绘制标准工作曲线。[/color]具体作法是：用标准样品配制成不同浓度的标准系列，在与欲测组分相同的色谱条件下，等体积准确量进样，测量各峰的峰面积或峰高，用峰面积或峰高对样品浓度绘制标准工作曲线，此标准工作曲线应是通过原点的直线。若标准工作曲线不通过原点，说明测定方法存在系统误差。[color=#ff8124]标准工作曲线的斜率即为绝对校正因子。[/color]当欲测组分含量变化不大，并已知这一组分的大概含量时，也可以不必绘制标准工作曲线，而用单点校正法，即直接比较法定量。单点校正法实际上是利用原点作为标准工作曲线上的另一个点。因此，当方法存在系统误差时（即标准工作曲线不通过原点），单点校正法的误差较大。因此规定，y=ax+b 。b的绝对值应不大于100%响应值是y的2%。[b][color=#47c1a8]标准曲线法的优点：[/color][/b]绘制好标准工作曲线后测定工作就很简单了，计算时可直接从标准工作曲线上读出含量，这对大量样品分析十分合适。特别是标准工作曲线绘制后可以使用一段时间，[color=#ff8124]在此段时间内可经常用一个标准样品对标准工作曲线进行单点校正，以确定该标准工作曲线是否还可使用[/color]。[b][color=#47c1a8]标准曲线法的缺点：[/color][/b]每次样品分析的色谱条件（检测器的响应性能，柱温度，流动相流速及组成，进样量，柱效等）很难完全相同，因此容易出现较大误差。另外，标准工作曲线绘制时，一般使用欲测组分的标准样品（或已知准确含量的样品），因此对样品前处理过程中欲测组分的变化无法进行补偿。[b][color=#5f9cef]内标法[/color][/b]选择适宜的物质作为欲测组分的参比物，定量加到样品中去，依据欲测组分和参比物在检测器上的响应值（峰面积或峰高）之比和参比物加入的量进行定量分析的方法称为内标法。[color=#ff8124]内标法的关键是选择合适的内标物。内标物应是原样品中不存在的纯物质，该物质的性质应尽可能与欲测组分相近，不与被测样品起化学反应，同时要能完全溶于被测样品中[/color]。内标物的峰应尽可能接近欲测组分的峰，或位于几个欲测组分的峰中间，但必须与样品中的所有峰不重叠，即完全分开。一般会选择标准物质的同位素物质作为内标物。[color=#47c1a8][b]内标法的优点：[/b][/color]进样量的变化，色谱条件的微小变化对内标法定量结果的影响不大，特别是在样品前处理（如浓缩、萃取，衍生化等）前加入内标物，然后再进行前处理时，可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失。[color=#ff8124]若要获得很高精度的结果时，可以加入数种内标物，以提高定量分析的精度。[/color][b][color=#47c1a8]内标法的缺点：[/color][/b]选择合适的内标物比较困难，内标物的称量要准确，操作较麻烦。使用内标法定量时要测量欲测组分和内标物的两个峰的峰面积（或峰高），根据误差叠加原理，内标法定量的误差中，由于峰面积测量引起的误差是标准曲线法定量的2-2，但是由于进样量的变化和色谱条件变化引起的误差，内标法比标准曲线法要小很多，所以总的来说，内标法定量比标准曲线法定量的准确度和精密度都要好。[b][color=#5f9cef]标准加入法[/color][/b]标准加入法实质上是一种特殊的内标法，是在选择不到合适的内标物时，以欲测组分的纯物质为内标物，加入到待测样品中，然后在相同的色谱条件下，测定加入欲测组分纯物质前后欲测组分的峰面积（或峰高），从而计算欲测组分在样品中的含量的方法。[b][color=#47c1a8]标准加入法的优点：[/color][/b]不需要另外的标准物质作内标物，只需欲测组分的纯物质，进样量不必十分准确，操作简单。若在样品的前处理之前就加入已知准确量的欲测组分，则可以完全补偿欲测组分在前处理过程中的损失，是色谱分析中较常用的定量分析方法。[b][color=#47c1a8]标准加入法的缺点：[/color][/b]要求加入欲测组分前后两次色谱测定的色谱条件完全相同，以保证两次测定时的校正因子完全相等，否则将引起分析测定的误差。[align=center][img]https://mmbiz.qpic.cn/mmbiz_gif/XslFyqkxCHKp0wBdGYkgSLCoUUFQNe1D1eNo0eq458jxWAUTIchiaXtSAhRjZIjn1xjZ0Jk15xqZ5298oYIMK0w/0?wx_fmt=gif&tp=webp&wxfrom=5&wx_lazy=1[/img][/align]来源：食品实验室服务

小女子为初涉气相的新人，正在学习气相色谱知识，很多问题需要向高手请教，望不吝赐教，感激不尽！现在实验室用岛津-2014，SE54柱子，内标法测含量。问题如下：1.微量的液体内标物怎么精确加入，保证每个瓶中加入的量一样？感觉每个瓶中加的量都不一样。2.溶剂峰和样品的峰没有完全分开（或离得很近），做内标曲线不用面积积分，用峰高可以吗？3.样品和内标物的保留时间相差很远一个在2.34一个在19.26有没有影响？4.为什么用做出来的内标曲线算储备标样的浓度（应该3000ppm）只有800多？怀疑是内标曲线做的有问题，但是不知道错在哪。 做内标曲线的浓度梯度为600ppm,1200ppm,1800ppm,2400ppm,2800ppm谢谢大家

用内标标准曲线法定量，内标浓度和加入量都是一致的，但是曲线一直很不理想，横坐标是浓度比，纵坐标是面积比。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/12/202012131909197674_8180_4178238_3.png[/img]

我用的是安捷伦的ICP-MS，使用说明上提到了内标法与标准加入法，以前做过内标法，使用的是在线内标。手册中提到标准加入法，向基质中添加标准，配置标准曲线，已降低机制干扰，且无需加入内标，于是试了试，以标准参考物质为样本，但测定值超出了参考范围。又加入在线内标，同样使用标准加入法测定，这次的测定值都在参考范围内。有个疑问，既然手册中说无需加入内标，为什么测不准呢？而且内标法与标准加入法，都是为了降低机制效应，同时使用这种方法不知道正确否？希望和大家讨论一下。谢谢了。

我的样品包括水样和沉积物样，标曲里面是加入了100ng的内标物，内标物浓度是100ppb。预处理水样是进行固相萃取，沉积物样先进行提取，提取后再进行固相萃取。如果我是1L水样进行富集，应该加多少内标物？如果换成500ml水样富集，应该是加多少？还有就是沉积物提取，我看文献是取三次提取液，然后定容至500ml/200ml，这里500和200会影响加入内标物的量吗？内标物加入量主要取决于什么呀？

1、内标法需要用不同梯度浓度的标液绘制标准曲线，这个梯度浓度的选择我有个疑问，比如待测样中估算浓度为100ng/L，那我梯度浓度的中间值最好就是100ng/L，但要是我1L水样通过固相萃取，浓缩成了1ml，那我梯度浓度需要改变吗？不改变的话，进色谱的话，待测物的浓度会超过其线性范围2、和上述一样，内标物的添加量问题，如果前处理过程就加入话，内标会因为前处理，浓度发生变化，这时梯度浓度的标曲中内标物浓度应该为多少？3、涉及多种待测物（假设三种待测物质，梯度浓度设为5），那么我需要用相应的三种不同梯度的标准溶液（加入内标），共15个需要进行色谱？?

前段时间，求助了内标的相关问题，近日也进行了大量的试验，测试的时候一般是，固定加入1ml的内标到样品里，然后稀释，上机测试后，代入内标标准曲线，随即产生了几个问题：1、1ml的内标是否必须准确，实际测试发现如果加多了峰面积就会变低，直接影响到了测试结果；2、样品中加入的内标物的浓度是否要与内标标准曲线浓度一致，还是说有其他要求？

用内标法测样品，标品的浓度为4.0mg/mL，标准曲线转移的的标品量为1mL，2mL，4mL，6mL，8mL，10mL，加入到50毫升萃取液中，萃取液配置比例为异丙醇:内标（茴香脑）=1L：0.5mL，以内标峰为参考峰。为什么在新建校正表中 1 标品的含量（ng/ul)一列输入浓度依次为1,8,16,24,32,402 每个校正点的缺省含量都设为1 3 内标的含量（ng/ul)一列含量为 1 只有这个结果出来才会对的？为什么是这样额

本人使用ICP-MS，采用标准加入法测试印刷纸中的砷含量。现请教关于内标法的加入方式：1.采用在线加内标，通入另一管路，选择Rh做内标。2.直接选择纸中的另一元素Pb做内标。在实际工作中发现，两种方式测试结果相差无几。想请教各位，方法2究竟是否存在错误？个人感觉这种选择方式有点问题，但说不上具体哪里不妥，师傅说是没问题的

求助各位前辈:今天测榨菜中的挥发性成分，我试了加0.05微克的癸酸乙酯内标，第一幅图中红色的是内标物的峰，绿色的是疑似风味成分的物质峰，我的内标物加入量是否合适呢？（第二幅图是没有上色的原图）[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807211831018680_3779_3439583_3.jpeg[/img][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807211831016825_2789_3439583_3.jpeg[/img]

样品中需要测定两个物质A、B，A含量一个在5%，B含量在15%左右，用同一个内标进行一点校正。 结果发现加入内标量不一样的时候测定结果差别较大。内标加入量接近A、加入量接进B的时候分别测定，结果的相对差能相差8%。所以也不确定用哪个加入量更合适。这种情况下采用内标曲线法测定，结果比内标一点法会准确吗？检测器是fid，前期试验表明，样品在稀释后的实验条件下，线性还好。

什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。 在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值? 影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。 由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。 化学方面的因素包括： 1、内标物在样品里混合不好； 2、内标物和样品组分之间发生反应， 3、内标物纯度可变等。 对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变，这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠，而色谱固看来也是正常的话，应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是：面积比可变，而峰高比保持相对恒定， 在制作内标标准曲线时应注意什么? 在用内标法做色话定量分析时，先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析，测量峰面积，做重量比和面积比的关系曲线，此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致，因此，在制作标准曲线时，不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等)，还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时，各点并不完全落在直线上，此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差，在使用过程中应定期进行单点校正，若所得值与平均值的偏差小于2，曲线仍可使用，若大于2，则应重作曲线，如果曲线在铰短时期内即产生变动，则不宜使用内标法定量。

[color=#444444][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析中，采用 内标标准曲线法定量，这个标准曲线的做法中用到纯品和内标物，请问，它们各自的量怎么确定呢？而且，所用容剂对纯品溶解度较小！[/color]

用内标曲线法进行定量分析时，样品中内标物质的峰面积与标准曲线中相差较大时，是否还可以用于定量？通常情况下：1.制作标准曲线时，内标物质的浓度相同，待测物一定梯度，则可得曲线： Ai/As=ax+B 其中x是进样溶液中待测物与内标质量（浓度）比，由此，x的量只于面积比相关。2.我遇到这样的问题。样品分别要经皂化，萃取，浓缩定容再进样。在皂化反应之前把内标物质加入（加入量设计为最终进样溶液与标准曲线时浓度相等），然后乙醚萃取两次，水洗乙醚两次，旋转蒸发干，用1ml甲醇溶解，然后上样，结果内标物质的面积只有70左右，而标准曲线中内标的面积有90多，在这样的情况下，定量是否准确？？？

各位老师，大家好，我是做环境样品中抗生素检测（用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]/MS）的，看了许多文献，都是在样品前处理（过萃取柱）前加入了内标，之后定容的时候（上样前）就没在说过加内标的事情了，所以我产生了几个疑问：1.这样的话不就是把内标当作了回收率指示物了嘛？2.内标物在前处理加的话，处理过后会有损失，内标物就不准了，也就无法知道内标物浓度，如何定量？3.有些文章做的标准曲线是 纵坐标为峰面积比，横坐标为物质浓度，而不是浓度比，就是通过加内标样中样品峰面积和内标峰面积比来定量，这样真的能定量嘛？我也才开始学习这些，可能有些地方表述不太清，希望各位老师能帮忙解答一下，感谢各位！

[em09509]有一批螯合态的　铜，铁，锰，锌。把它们混合在一起，制成一个混合样。铜，铁，锰含量大致都为：2.5ppm，锌大致为0.3ppm。标准溶液也混在一起，铜，铁，锰的标准曲线都为：0,1,2,3,4,5ppm，锌为0.1,0.2,0.3,0.4,0.5ppm。现在想向标准曲线中加入EDTA二纳，不知道该加入多少？我这样想的：EDTA二纳加入宜多不宜少，就按标准曲线中金属离子浓度最高的为标准，来计算edta二纳的加入量。曲线中浓度最高为5ppm的，那么金属离子总浓度为：5+5+5+0.5＝15.5ppm这几个金属中锌的原子量最大，就以65来算。那么金属离子　量浓度c=（15.5／1000）／65＝0.000238mol/L ,EDTA二纳与金属离子以一比一的比例来螯合，分子量为237.那么我把EDTA二纳的浓度至少配成0.000238mol／Ｌ，一升中加入EDTA二纳质量为：237*0.000238＝0.080361538g　即每升中加入EDTA二纳质量为0.080361538g该实验结果准确度要求并不高，只验证样品中含量是不是够数。不知道这样的想法有没有问题？若有更简单易行的方法，请大家指点！！

[align=center]浅谈香精香料香气香味样品的定量问题2----内标法[/align][align=center] [/align]香精香料样品或香气香味类市场应用样品里面的成分比较复杂，成分种类数目多，可能达数千种。浓度范围很宽。化学性质，结构都各不相同，有非极性，也有极性很强的。有各种酯、醇、醛、酮、酸、醚、萜烯、含氮化合物、含硫化合物等。有的香气香味物质的浓度虽然很低，但它的气味很明显。样品包括日化香精、食品香精、香原料、香精油、食品、日化产品、药品等。其定量也是比较麻烦的事情。因为通常要同时分析多个香气香味组分，可能几十种到几百种不等，或甚至更多，并且每个样品或每次样品里面的组分是不同的，浓度大小差别很大。这样就给定量带来不少困难。归一化有前面提到的局限和不足。采用一般的外标曲线法是不现实的，或者难以实现，除非能承受巨大的工作量和经受不小的时间耗费。[b]所以采用内标法定量是一个不错的选择。[/b]对某些样品，例如香精油，一些可全部在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]上出峰的香精样品，也可用归一化法进行考察或进行质量控制。对高纯度的香料，可用归一化法测定其纯度和杂质。对于非常痕量的组分或基质复杂时，用选择离子(SIM)来定量不失为一个好的选择。如果没有独立[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]，用SIM来定量，不用TIC来定量。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]图比TIC的基质效应小，且信噪比（S/N）高. 所以[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]图能给出更稳定的定量数值。但同时要对多个香气香味组分进行定量，每个化合物要选择其定量和特征离子，还要制作定量校正表，很麻烦。另外每个组分的含量不一样，又高有底，每次还不一样，要把所有组分的浓度调整到曲线的范围也是很麻烦的事情。在实际的香精检测，是不现实而难以做到的。[b]1 内标法[/b]内标法----在待测的样品中准确加入一定量的内标物，根据被测物和内标物的量及其在色谱图相应的峰面积比取出此被测定组分的含量。样品中加入内标物，利用被测物与内标物校正因子的比值不变来进行定量的。首先用被测物标准品（i）和内标物（s）配制标准溶液，求得相对定量校正因子f’[sub]i/s[/sub]：f’[sub]i/s[/sub]= f’[sub]i[/sub] / f’[sub]s[/sub] = m[sub]i[/sub] A[sub]s[/sub] /( m[sub]s[/sub]A[sub]i[/sub]) (1)式中：m[sub]i[/sub] -----i组分的量；f’[sub]i[/sub] -----i组分的校正因子；A[sub]i[/sub]----i组分的峰面积m[sub]s[/sub] -----内标的量；f’[sub]s[/sub] -----i内标物的校正因子；A[sub]s[/sub]----内标物的峰面积在样品中准确加入内标物后，再由它和样品的峰面积来计算：m[sub]i[/sub] =（A[sub]i[/sub] /A[sub]s[/sub] ）*m[sub] s[/sub]* f’[sub]i/s [/sub]（2）举例：假如化合物B为基准物（或内标物，面积:3000，含量100），则化合物A (面积:2500，含量: 80)的相对定量校正因子(相对于B)是：f [sub]A/ s[/sub]= 3000*80/(2500*100) = 0.96对于FID，一般可以配0.05-0.1%的不同组分混合标准标液，进样后来根据实际含量和峰面积来相对校正因子。但每组里面的化合物必须能够完全分离。由于FID的浓度线性范围宽，还可以适当放宽浓度范围甚至到1%。由于MSD的浓度线性范围较窄，配制标样的浓度要更低一些。举例：准确称取1.0000样品，加入1000ppm（即0.1%）的内标物化合物B标准液0.1000g，即在样品中的内标含量为: 1000ppm*0.1000/1.0000 = 100ppm或0.01%）。测定后得到A的面积为2900，B的面积为2400。则A化合物的含量为：mi =（Ai /As ）*m s * f i/ s =（2900/2400）*100*0.96 = 116 (ppm)或mi =（Ai /As ）*m s * f i/ s =（2900/2400）*0.01*0.96 =0.0 116 (%)[b]2 内标法的缺点：[/b]需要用标样事先测定好校正因子，这个是个不小的工作量。在样品准备时候需要准确加入内标物，多一段手续，增加工作量。[b]3 相对校正因子的转换[/b]可以利用相对校正因子的计算公式来折算不同内标物的校正因子。f’[sub]i/s[/sub]= f’[sub]i[/sub] / f’[sub]s[/sub] = m[sub]i[/sub] A[sub]s[/sub] /( m[sub]s[/sub]A[sub]i[/sub]) （1）f’[sub]i/s[/sub]= f’[sub]i[/sub] / f’[sub]s[/sub] = m[sub]i[/sub] A[sub]s[/sub] /( m[sub]s[/sub]A[sub]i[/sub]) （2）例如，A相对B的相对校正因子是1.10，C对B的相对校正因子是0.85，请问A相对于C的校正因子f’[sub]A/C[/sub]是多少？计算：f’[sub]A/B[/sub] = f’[sub]A[/sub] / f’[sub]B [/sub] （3）f’[sub]C/B[/sub]= f’[sub]C[/sub] / f’[sub]B [/sub] （4）（3）式除以（4）式：f’[sub]C/B[/sub]/f’[sub]A/B[/sub] =（f’[sub]A[/sub] / f’[sub]B[/sub]）/（f’[sub]C[/sub]/ f’[sub]B[/sub]）= f’[sub]A[/sub]/ f’[sub]C [/sub]= f’[sub]A/C [/sub] （5）即：f’[sub]A/C[/sub] = f’[sub]A[/sub] / f’[sub]C[/sub] = f’[sub]C/B[/sub]/f’[sub]A/B[/sub] = 1.10/0.85 = 1.29 （6）[sub] [/sub]例如，A相对B的相对校正因子是1.10，B对C的相对校正因子是1.176，请问A相对于C的校正因子f’[sub]A/C[/sub]是多少？计算：f’[sub]A/B[/sub] = f’[sub]A[/sub] / f’[sub]B [/sub] （3）或f’[sub]A[/sub] = f’[sub]A/B[/sub] * f’[sub]B[/sub] （7）f’[sub]B/C[/sub]= f’[sub]B[/sub] / f’[sub]C [/sub] （4）或f’[sub]C[/sub] = f’[sub]B[/sub] / f’[sub]B/C[/sub] （8）f’[sub]A/C [/sub]=f’[sub]A[/sub] /f’[sub]C[/sub] = f’[sub]A/B[/sub] * f’[sub]B[/sub] /（f’[sub]B[/sub] / f’[sub]B/C[/sub]）= f’[sub]A/B[/sub] * f’[sub]B/C[/sub] =1.10*1.176 = 1.294 （9）注意：（6）式和（9）式一个是相除，一个是相乘。[b]4 有效碳数计算相对校正因子[/b]在有时候无法得到标样或标样纯度不高的情况下而无法测定校正因子时候，可以利用有效碳数来计算FID的相对校正因子，MSD的相对校正因子也可以计算，但浓度线性范围较小。后面专门写一遍讲一下有关有效碳数计算相对校正因子的帖子。

大家好，在进行苯酞方法学研究是碰到一些问题，希望大家不吝指教，仪器：安捷伦7890气相色谱，内标物选的是十二烷，溶剂是丙酮，用内标标准曲线法绘制标准曲线，实验操作先配置不同质量浓度浓度的标准溶液，然后取相同体积标准溶液加入相同量的内标物进样。问题：配置不同浓度的标准溶液一般是配置多少浓度的（因为实验室体积测量仪器不精确，所以使用的是质量浓度）？谢谢大家

标准曲线的两层意义？标准曲线是否要加入零点？哪位大神可以帮帮忙？谢谢!

基础知识之：内标法与外标法基础知识之：内标法与外标法一、内标法 什么叫内标法?怎样选择内标物? 内标法是一种间接或相对的校准方法。在分析测定样品中某组分含量时，加入一种内标物质以校谁和消除出于操作条件的波动而对分析结果产生的影响，以提高分析结果的准确度。 内标法在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]定量分析中是一种重要的技术。使用内标法时，在样品中加入一定量的标准物质，它可被色谱拄所分离，又不受试样中其它组分峰的干扰，只要测定内标物和待测组分的峰面积与相对响应值，即可求出待测组分在样品中的百分含量。采用内标法定量时，内标物的选择是一项十分重要的工作。理想地说，内标物应当是一个能得到纯样的己知化合物，这样它能以准确、已知的量加到样品中去，它应当和被分析的样品组分有基本相同或尽可能一致的物理化学性质(如化学结构、极性、挥发度及在溶剂中的溶解度等)、色谱行为和响应特征，最好是被分析物质的一个同系物。当然，在色谱分析条什下，内标物必须能与样品中各组分充分分离。需要指出的是，在少数情况下，分析人员可能比较关心化台物在一个复杂过程中所得到的回收率，此时，他可以使用一种在这种过程中很容易被完全回收的化台物作内标，来测定感兴趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所说的选择原则。 在使用内标法定量时，有哪些因素会影响内标和被测组分的峰高或峰面积的比值? 影响内标和被测组分峰高或峰面积比值的因素主要有化学方面的、色谱方面的和仪器方面的三类。 由化学方面的原因产生的面积比的变化常常在分析重复样品时出现。 化学方面的因素包括： 1、内标物在样品里混合不好； 2、内标物和样品组分之间发生反应， 3、内标物纯度可变等。 对于一个比较成熟的方法来说，色谱方面的问题发生的可能性更大一些，色谱上常见的一些问题(如渗漏)对绝对面积的影响比较大，对面积比的影响则要小一些，但如果绝对面积的变化已大到足以使面积比发生显著变化的程度，那么一定有某个重要的色谱问题存在，比如进样量改变太大，样品组分浓度和内标浓度之间有很大的差别，检测器非线性等。进样量应足够小并保持不变，这样才不致于造成检测器和积分装置饱和。如果认为方法比较可靠，而色谱固看来也是正常的话，应着重检查积分装置和设置、斜率和峰宽定位。对积分装置发生怀疑的最有力的证据是：面积比可变，而峰高比保持相对恒定， 在制作内标标准曲线时应注意什么? 在用内标法做色话定量分析时，先配制一定重量比的被测组分和内标样品的混合物做色谱分析，测量峰面积，做重量比和面积比的关系曲线，此曲线即为标准曲线。在实际样品分析时所采用的色谱条件应尽可能与制作标准曲线时所用的条件一致，因此，在制作标准曲线时，不仅要注明色谱条件(如固定相、柱温、载气流速等)，还应注明进样体积和内标物浓度。在制作内标标准曲线时，各点并不完全落在直线上，此时应求出面积比和重量比的比值与其平均位的标准偏差，在使用过程中应定期进行单点校正，若所得值与平均值的偏差小于2，曲线仍可使用，若大于2，则应重作曲线，如果曲线在铰短时期内即产生变动，则不宜使用内标法定量。 　 二、外标法 用待测组分的纯品作对照物质，以对照物质和样品中待测组分的响应信号相比较进行定量的方法称为外标法。此法可分为工作曲线法及外标一点法等。工作曲线法是用对照物质配制一系列浓度的对照品溶液确定工作曲线，求出斜率、截距。在完全相同的条件下，准确进样与对照品溶液相同体积的样品溶液，根据待测组分的信号，从标准曲线上查出其浓度，或用回归方程计算，工作曲线法也可以用外标二点法代替。通常截距应为零，若不等于零说明存在系统误差。工作曲线的截距为零时，可用外标一点法(直接比较法)定量。

内标曲线法在色谱中用途广泛，特别在控制回收率、控制衍生效果和减少进样量重复性上的优点。偶尔在一份公司的SOP中看到，内标曲线法的最后计算公司是：R=(c*v*d)/w 公式中的各字母意思分别是：样品含量，样液浓度，定容体积，稀释倍数，称样重量，我觉得公式不对，我认为内标法应该是与定容体积无直接关系下面谈谈我的理解，请诸位指正：内标法的最初表述是：m组分/m内标=fi*(A组分/A内标） ---（1） （忽略截距）先用校准标准液（含同质量内标）求得相对校正因子fi，然后在样品中加入一定质量的内标物质，再用（1）式计算样品的m组分，最后的结果应该是组分的质量。内标曲线法在内标法的基础上引入消除相对校正因子fi的组分浓度梯度，通过曲线来消除随机误差和系统误差，校准了相对校正因子fi。内标曲线的二维坐标系是以A组分/A内标为纵坐标，与质量比m组分/m内标为横坐标的体系，又因为为了达到内标物在标准校准液和样品的质量接近（减小组分和内标由于不同浓度带来的响应歧视），所以m内标为相同质量（非决定相当）。所以把m内标也看作一常量。则内标曲线的基本公式可写成：(A组分/A内标）=(M组分/M内标)*fi + B -----（2）（2）式可写成：(A组分/A内标）= M组分* F + B所以我认为内标曲线法的公式应该是：R={[(A组分/A内标）- B]/F}/w

请教如何理解多点内标法这一制作标准曲线的问题。我的理解是这样的，不知可否正确，烦请专家指正。由于内标法要求待测物含量要与内标物含量相当，如果待测物含量有一定的范围的话，为了准确对其定量，则要求内标含量也需与之相当，从而就需配制含有不同内标量不同待测样品量的标准溶液系列（比如5个）。用这些样品在GC上分别用单点内标法测定而得到5个独立的文件，作为多点内标法校正曲线上5个点的来源。

求助各位老师，标准加入法是基体匹配，所以可以消除基质干扰。内标法也是基体匹配，也可以消除基质干扰吧，那这两种方法的作用还有什么区别吗？