一 固相萃取固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术，由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来，由于其高效、可靠及耗用溶剂量少等优点，在环境等许多领域得到了快速发展。在国外已逐渐取代传统的液-液萃取而成为样品预处理的可靠而有效的方法。SPE技术基于液相色谱的原理，可近似看作一个简单的色谱过程。吸附剂作为固定相，而流动相是萃取过程中的水样。当流动相与固定相接触时，其中的某些痕量物质（目标物）就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱，即可得到富集和纯化的目标物。固相萃取可分为在线萃取线萃取前者萃取与色谱分析同步完成；而后者萃取与色谱分析分步完成，两者在原理上是一致的。一般固相萃取的操作步骤包括固相萃取柱（即吸附剂）的选择、柱子预处理、上样、淋洗、洗脱。在实验过程中需要具体考虑的因素如下：1）吸附剂的选择a.传统吸附剂在环境分析中最为常用的反相吸附剂较适用于水样中的非极性到中等极性的有机物的富集和纯化。其中有代表性的键合硅胶C18和键合硅胶C8等。该类吸附剂主要通过目标物的碳氢键同硅胶表面的官能团产生非极性的范德华力或色散力来保留目标物。正相吸附剂包括硅酸镁、氨基、氰基、双醇基键合硅胶及氧化铝等，主要通过目标物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团的极性相互作用（氢键作用等）来保留溶于非极性介质的极性化合物。由于其特殊的作用原理，在环境分析中常用于与其它类型的吸附柱联用，吸附去除干扰物，实现样品纯化。离子交换吸附剂则主要包括强阳离子和强阴离子交换树脂，这些树脂的骨架通常为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物，主要是通过目标物的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团相互静电吸引实现吸附的。b.抗体键合吸附剂（Immunosorbents-IS）这类新型吸附剂充分利用了生物免疫抗原-抗体之间的高灵敏性和高选择性，尤其适应于水中痕量有机物的富集与分离。其特点为，由于绝大多数有机污染物为低分子量物质，不能在动物体内引发免疫反应，所以需把待定污染物键合到牛血清白蛋白的生物大分子载体上，使其具有免疫抗原活性，再注入纯种动物体内（如兔或羊），产生抗体，经杂交瘤技术制得相应于该有机污染物的单克隆抗体。将抗体键合到反相吸附剂的硅胶表面或聚合物表面（如C18固定相），就制得了抗体键合吸附剂，可用于分离、富集特定污染物。研制开发能专门检测各种优先污染物的单克隆抗体或多克隆抗体已成为SPE技术的前沿研究领域。抗体键合吸附剂洗脱时一般可采用20%～80%的甲醇-水溶液，该类吸附剂经冷藏保存可多次使用。进行SPE操作时应根据目标物的性质选择适合的吸附剂。表1- 1给除了常用的吸附剂类型及其相关的分离机理、洗脱剂性质和待测组分的性质。吸附剂的用量与目标物性质（极性、挥发性）及其在水样中的浓度直接相关。通常，增加吸附剂用量可以增加对目标物的保留，可通过绘制吸附曲线确定吸附剂用量。
兽药残留引发的畜产品安全问题已成为公认的食品安全问题，引起社会的广泛关注。建立简便、快速、灵敏的兽药残留检测方法无疑成为检测和控制兽药残留的重要前提。兽药残留分析是复杂混合物中痕量组分的分析技术，最显著的特点是需要严格的样本前处理步骤。在兽药残留检测中60%～80%的工作量和操作成本花在样品前处理。样品前处理包括液液萃取、离心、沉淀、蒸馏等传统技术和固相萃取、凝胶净化、分子印迹等现代分离技术。传统方法由于自动化程度低、净化效率低、选择性差、成本高、劳动强度大、环境污染严重等缺点而逐渐不能满足兽药残留分析的发展要求。 固相萃取技术由于其溶剂使用量少、操作简单、选择性高、重现性好，已发展成为分离和浓缩各种样品中痕量分析物质的一种强有力的工具。1978 年商用固相萃取柱问世以后，固相萃取技术更被广泛应用于复杂基质的前处理，目前已成为兽药残留分析前处理的主流技术。 1 固相萃取技术基本原理 固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）技术基于液相色谱原理，可近似看作一个简单的色谱过程。原理是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。固相萃取可分为在线萃取和离线萃取。前者萃取与色谱分析同步完成，而后者萃取与色谱分析分步完成，两者在原理上是一致的。 2 基本操作过程 2.1 柱预处理（柱活化） 用适当的溶剂淋洗SPE 柱，以使吸附剂保持湿润，可以吸附目标化合物或干扰化合物。不同模式固相萃取小柱活化用的溶剂不同，其目的有2 个：一是除去填料中可能存在的杂质；二是使填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。 2.2 上样 将液态或溶解后的固态样品倒入预处理后的SPE 柱，然后利用抽真空、加压或离心的方法使样品通过SPE 柱，在该步骤中，分析物被保留在吸附剂上。 2.3 淋洗和洗脱 样品进入SPE 柱、目标化合物被吸附后，视分离模式和样品性质而定，可采用适当的洗脱剂将目标化合物直接淋洗下来；也可先将干扰化合物淋洗掉，再用适当的洗脱剂将目标化合物洗脱，通常采用后一种方法更有利于样品的净化。淋洗和洗脱同上所述，可采用抽真空、加压或离心的方法使淋洗液或洗脱液流过吸附剂。 3 影响因素 3.1 吸附剂 目前常用的吸附剂有正、反相吸附剂、离子交换吸附剂和抗体键合吸附剂等，试验时尽量选择与目标化合物极性相似的吸附剂，其用量大小与目标物性质（极性、挥发性）及其在水样中的浓度直接相关。 3.2 洗脱溶剂 在SPE 中，洗脱溶剂的选择与目标物性质及使用的吸附剂有关，楼蔓藤等给出了常见有机溶剂的极性和洗脱强度，试验过程中可根剧被测物的物理、化学性质选用。洗脱剂体积应以淋洗完全为前提，体积最小的为最佳，可通过多次洗脱法（小体积），根据回收率的变化曲线找到最佳的洗脱液体积，显然，洗脱体积越小富集倍数越高。 3.3 保留体积在加样过程中，保留体积是SPE 技术的关键因素之一，它代表了进行痕量富集时能有效处理的水样体积。根据色谱分析仪的最小检出量和水样中有机物的浓度，可以估算出欲富集的最小水样体积。另外，样液的pH 值也影响样品的吸附效率。 3.4 流速 流速的控制对SPE 至关重要，流速过大将引起SPE 柱的穿漏，流速太小则处理速度太慢。柱预处理过程中流速适中，保证溶液充分湿润吸附剂即可，上样和洗脱过程则要求流速尽量慢些，以使分析物尽量保留在柱内或达到完全洗脱，否则会导致分析物流失，影响回收率的大小。尤其离子交换过程，进行比较缓慢，应采用较低的流速（0.5~2.0 mL/min）。 4 结语固相萃取技术以其既可用于复杂样品中微量或痕量目标化合物的提取，又可用于净化、浓缩或富集的优势，不仅在兽药残留分析领域中担任重要的角色，而且在农药残留中也成为主要的前处理工具。随着人们对食品安全问题的关注，固相萃取技术不断得到发展与完善，多样化、标准化、仪器化和自动化的SPE 样品处理技术越来越成熟，将会更加广泛地应用于复杂样品的前处理中，成为目前样品前处理的主流技术。
固相萃取水样中的极性有机物，哪些固相萃取柱比较好？如果萃取非极性有机物又可以用哪一些呢？以上都想直接过水样。
现在在做水样前处理，饮用水中酚类物质测试，要先将水样固相萃取后，再用溶剂定容至1mL，采用液相色谱法测试，请问在做固相萃取前需要对水样体积进行准确定量吗？做加标回收率时也是要准确知道水样体积吗？恳请指教，如果有详细步骤更好。谢谢！
hotdoglet发表了比较全面的样品前处理方法作品。本人分别对目前应用较多的固相萃取和较有潜力的固相微萃取应用中的概念性原理性的知识稍作详细深入地介绍一下。（禁止转载，欢迎收藏）一 固相萃取固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）是一种基于液-固分离萃取的试样预处理技术，由柱液相色谱技术发展而来。SPE技术自70年代后期问世以来，由于其高效、可靠及耗用溶剂量少等优点，在环境等许多领域得到了快速发展。在国外已逐渐取代传统的液-液萃取而成为样品预处理的可靠而有效的方法。SPE技术基于液相色谱的原理，可近似看作一个简单的色谱过程。吸附剂作为固定相，而流动相是萃取过程中的水样。当流动相与固定相接触时，其中的某些痕量物质（目标物）就保留在固定相中。这时用少量的选择性溶剂洗脱，即可得到富集和纯化的目标物。固相萃取可分为在线萃取线萃取前者萃取与色谱分析同步完成；而后者萃取与色谱分析分步完成，两者在原理上是一致的。一般固相萃取的操作步骤包括固相萃取柱（即吸附剂）的选择、柱子预处理、上样、淋洗、洗脱。在实验过程中需要具体考虑的因素如下：1）吸附剂的选择a.传统吸附剂在环境分析中最为常用的反相吸附剂较适用于水样中的非极性到中等极性的有机物的富集和纯化。其中有代表性的键合硅胶C18和键合硅胶C8等。该类吸附剂主要通过目标物的碳氢键同硅胶表面的官能团产生非极性的范德华力或色散力来保留目标物。正相吸附剂包括硅酸镁、氨基、氰基、双醇基键合硅胶及氧化铝等，主要通过目标物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团的极性相互作用（氢键作用等）来保留溶于非极性介质的极性化合物。由于其特殊的作用原理，在环境分析中常用于与其它类型的吸附柱联用，吸附去除干扰物，实现样品纯化。离子交换吸附剂则主要包括强阳离子和强阴离子交换树脂，这些树脂的骨架通常为苯乙烯-二乙烯基苯共聚物，主要是通过目标物的带电荷基团与键合硅胶上的带电荷基团相互静电吸引实现吸附的。
我们实验做的是水环境（农药废水、医药废水、化工废水）当中的苯系物、丙烯腈、硝基苯类化合物和氯苯类化合物，不萃取水样，直接过滤（0.45um滤膜）后进色谱柱有什么影响？会污染存管，色谱柱，杂质增多，还有什么影响？各位大侠用的是什么品牌的固相萃取装置？萃取效果如何？能否推荐一下？本人菜鸟一枚，急需指导。
本人用过聚四氟乙烯空管填装过材料做在线固相萃取，但是压力太大，漏液。大家做的在线萃取用什么做空柱管？本来买色谱柱预柱做的，不过没有空柱管卖？求指点。。。
请问有人用过在线固相萃取液相色谱仪吗？上面用的固相萃取柱是不是就是截短的普通色谱柱？能不能用保护柱来代替？还是说对填料粒径有要求，太小容易堵，一般在10-20um？一般用什么品牌的SPE柱比较多？Waters的一根HLB材质的Online-SPE柱好贵，要五六千，用不起，有便宜点的SPE柱品牌推荐吗？
安谱固相萃取（Solid Phase Extraction）简介固相萃取（SPE）是一种广泛使用的样品前处理技术，适用于样品的分离或纯化。在过去的20多年里，固相萃取技术发展非常迅速，SPE的使用不但增加了色谱系统的使用寿命，同时提高了分析物的定量限。使用固相萃取法能避免液－液萃取所带来的许多问题，比如，不完全的相分离，较低的定量分析回收率，昂贵易碎的玻璃器皿和大量的有机废液。与液－液萃取相比，固相萃取更有效，容易达到定量萃取、快速和自动化，同时也减少了溶剂用量和工作时间。SPE主要用于从各类复杂的基质中提取目标分析物，使目标物在色谱分析前达到浓缩或纯化的目的，各类基质包括生物流体（血液和尿液）、水样、土壤、食品等。固相萃取小柱CNW可提供两个系列的SPE小柱：CNWBOND 系列包括硅胶基质和吸附类型的SPE小柱，这两类小柱是使用最广泛的SPE。CNWBOND 系列的SPE小柱纯度高、重现性好，使样品的纯化效果达到最佳以便可直接用于下一步的色谱进样分析。Poly-Sery 系列是聚合物基质的SPE，包括了不同功能性基团修饰的共聚物类型。这种类型的小柱由于其快速的操作、高稳定性、强保留性和选择性、以及更广的pH耐受性等特殊的性质，越来越多地被现代SPE技术所采用，使您的方法开发变得更简单、更快捷、更高效。一些常用的小柱填料基质反相正相离子交换硅胶C18氨基SCX 强阳离子C8氰基WCX 弱阳离子苯基PSASAX 强阴离子C4硅胶WAX 弱阴离子无机吸附材料 -
[B][center]近年国内固相萃取-色谱分析的进展(1)[/center][/B] 这一讲座是有关近年国内固相萃取-色谱分析的进展的综述报告，它的浓缩性综述论文发表在《分析试验室》,2007,26(2):100-122上。本讲座是对这一综述的展开性报告的第1部分. 色谱在半个多世纪的发展过程中，成为十分普及的分析方法，而进行色谱分析之前的样品前处理又是十分关键的步骤，目前在色谱分析样品前处理中固相萃取（Solid Phase Extraction,SPE）成为极其重要的方法， SPE 的主要目的是把痕迹量被测定组分进行浓缩（富集），使样品组成简化（样品净化），把介质转移（把被测定组分从样品基体中转移到溶剂或气体中）。 自从70年代后期商品化SPE问世以来，发展迅速，目前 SPE无疑是一种最常使用的样品前处理方法，不仅适于萃取富集空气中痕量有机化合物，而且也广泛用于水样的预处理，而且适合于许多生物样品中被测定组分的富集。全世界有50多个公司生产SPE的试剂及装置 [1]。美国分析化学两年一次的重要分析方法综述，从2004年新增加了《现代萃取方法》[2，3]，其中吸附萃取方法中SPE是其重点，可见这一样品处理方法的重要性。国内使用SPE作色谱分析样品前处理的工作很多，积累了很多经验，本文就固相萃取-色谱分析的研究工作在近两年的发展和应用情况做一综述。 1．国内近两年涉及固相萃取的综述报告 由于在很多领域使用色谱分析时，在其样品前处理工作中应用固相萃取技术，因而各个领域的研究人员从不同角度对固相萃取进行综述评论，所以出现了许多有关固相萃取方法的综述，不过大部分都是针对某一领域使用固相萃取技术的阐述，在环境分析、农残分析、食品分析领域中居多。其中固相萃取技术在农药残留分析中的应用[4]，限进介质固相萃取及其应用[5]，环境样品中多环芳烃的前处理技术[6]，都引用了大量文献，对SPE有详细的阐述。这些涉及 SPE 的综述报告文章见以后各讲中列表详述。文献[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/11/200911101201_183360_1912472_3.jpg[/img]
在什么项目的前处理适合使用固相萃取技术，即用固相萃取会比普通的溶剂萃取更理想，个人认为有以下几种情况： （一） 水中有机物的前处理。 此类常规处理基本上是用与水不相溶的有机溶剂振荡萃取，用固相萃取的优势在于 （1） 可以定量地重复前处理过程。 溶剂振荡的操作一般只能要求到控制时间的程度，却无法控制振荡频率，强度，动作，我们知道，每个人的振荡动作是不同的，就是同一个人，也很难保证始终划一的动作。所以说，溶液萃取的动作是不定量，不能重复的。 而在应用固相萃取时，比较容易保持过柱和洗脱速度的均一和稳定，因此，固相萃取的萃取过程是可以重复，可定量的。 （2） 现场处理。 水中有机物的分析有一个长期困扰我们的瓶颈。即有机物在池塘水库等环境中能保持相对稳定，但是一旦进入采样瓶这个小环境中，就会迅速发生变化，所以很多水的有机物分析方法要求即采即分析，最多不能超过4 个小时，可一般的情况是，从取水回到实验室的时间就远远不止4 小时了，样品发生了变化，分析结果的可靠性可想而知。 如果引入固相萃取技术，由于其设备简单，体积小，易于携带，完全可以做到在现场一边采样，一边进行前处理。采样者带回实验室的是固相萃取柱，而不是水样。这样就能保证我们处理的是真正成份稳定的水样。 从实际应用来说，在水的检测中用固相萃取技术取代传统液液萃取还有相当的工作需要摸索，目前尚不能完全取代，但是其发展的前景很值得看好。 （3） 有机试剂消耗量的减少。 在处理水样时，如果用固相萃取，则只需要在洗脱时用到有机溶剂，用量比传统液液萃取要少数十倍以上。对于实验者的人身保护和环境保护有着积极的意义。 （二） 批量生物材料的药物成分萃取 这是固相萃取在实际应用中比较成功的范例，主要是指在医院中检测血样和尿样时的前处理工作，由于对药物成份的吸附是固相萃取的优势，加上样品单一，组成固定，在确定方法后很适合大规模批量的净化操作。 （三）免疫亲和固相萃取。 萃取的理想状态就是特异性富集或特异性排斥，可是不论是溶液萃取还是固相萃取，基本上是相似相溶的，最多做到“某一类”层次上的萃取，而无法达到“某一种”层次的萃取。 在固相萃取柱的基础上加上免疫亲和技术，可以利用其生物特异性选择吸附，能够达到近于理论的完美萃取。 实际困难在于虽然其概念很好，但是由于技术难度相对较高，可供应用的更少。
刚刚看到的一些SPE理论知识，在此分享给大家，希望对大家的工作有所帮助。固相萃取技术属于色谱技术的一种。化合物要么保留要么流过，吸附剂种类选择众多，选择性与 HPLC 类似，但与HPLC 不能等同。为什么使用固相萃取（Solid Phase Extraction）技术：1 高回收率、高净化效果2 快速简便3 减少昂贵、易碎的特殊玻璃装置的使用4 减少有机溶剂的大量消耗样品浓缩，提高分析灵敏度5 避免污染物对色谱柱的伤害，延长使用寿命两种不同方法萃取鸦片样品的效果比较：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151559_451452_2468127_3.jpg固相萃取的基本模式活化→上样→淋洗→洗脱http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151559_451453_2468127_3.jpg活化：也就是对填料进行溶剂化，使官能团充分展开，为吸附目标化合物提供最佳状态。在低真空≤-3 in. Hg下向SPE柱中加入有机溶剂，每100 mg填料加入1.5 mL甲醇或乙腈。然后加去离子水去除多余溶剂（干扰疏水作用），每100 mg填料加入1 mL水。如果填料意外干掉，需重新进行（甲醇或乙腈）溶剂化和（水）冲洗。当使用离子柱时，在（水）冲洗后，加入1mL的缓冲液，以确保填料的pH处于填料-分析物作用的最佳条件下。上样：流速是确保样品在通过填料时充分接触的关键，对于离子交换过程尤为重要，因为离子交换动力学过程比反相或正相机理要慢。建议上样的流速约为1-2 mL/min。淋洗：建议使用在允许范围内最强和最大体积的淋洗液，却不会导致分离物质的漂移或洗脱。淋洗后需对柱子进行抽干，以避免淋洗液干扰洗脱的效果。最简单的方法是在最大的真空度下抽干柱子5min。洗脱：在洗脱中，最好是用尽可能少的溶剂将提取物完全地洗脱下来。洗脱溶剂的强度应该是在能完全地破坏分析物的所有结合作用的前提下最弱的。固相萃取的不同萃取机理反相萃取Non-Polar Extractionshttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151600_451454_2468127_3.jpg 正相萃取Polar Extractionshttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151600_451455_2468127_3.jpg离子交换Ion Exchange Mechanismshttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151602_451456_2468127_3.jpg混合模式萃取Mixed Mode/Copolymeric Extractions http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/07/201307151603_451457_2468127_3.jpg国标中有些方法根本不可行，很多时候还是需要我们优化。但固相萃取的整个过程还是蛮复杂的，往往开展一个实验下来，需要耗费很多时间。掌握好了基础理论知识，可以帮助我们更快地优化方法，从而节省时间。各位亲，我们以后多多交流下SPE的经验吧。我们单位的SPE柱一年的需求量很大，先后使用过一些品牌如Waters，Agilent，Supleco,Sepax-UCT,艾杰尔。Waters，Agilent在国标中有应用，特别是Waters Oasis HLB，MCX在国家标准中应用的很广泛，所以直接参考国家标准就可以使用，但就是价格偏高。Agilent和Supelco的小柱我们实验室用过C18小柱，效果也很不错，价格相对Waters便宜点。Sepax-UCT小柱是去年经朋友推荐开始使用的，据说创始人是SPE发明人之一，价格相比其他几家便宜。艾杰尔是国产的品牌，价格便宜没的说，就是批次重现性不太好。不知各位亲现在使用的是哪家的小柱？可以分享下。
在线固相萃取组件怎么讲啊
固相萃取技术及应用 ——迪马科技论坛在线技术讲座 在我国，食品安全日益成为亿万消费者关注的热点。固相萃取技术是食品安全检测过程中最重要的前处理技术，为了给食品安全检测领域的各位友人以支持，迪马科技特举办本次在线技术讲座，欢迎大家积极参与并讨论。一、讲座举办时间：在线时间：2010年4月14日 14：00~16：30活动时间：2009年4月14日——2009年4月20日奖品发放时间：2009年4月26日二、讲座举办地点：仪器信息网——论坛——行业应用——食品监测（食品检验检疫）三、讲座内容：1 主讲人：godblesschina（迪马技术工程师）2 主题：固相萃取技术及应用 内容提纲第一部分 引言第二部分 固相萃取过程中涉及的作用力第三部分 ProElut SPE产品介绍第四部分 ProElut SPE产品的优势第五部分 固相萃取方法的建立第六部分 SPE常见问题及解决方法第七部分 固相萃取技术分析案例
我昨天做了一个水样的前处理，用固相萃取的，要做加标，我也是第一次做，所以没做出来，方法上说的又很简单很抽象，所以我想请教一下有没有谁做过的，有经验吗
(1)固相萃取柱的预处理 在萃取样品之前，吸附剂必须经过适当的预处理，一足为了润湿和活化固相萃取填料，以使目标萃取物与固相表面紧密接触，易于发生分子间相互作用；二是为了除去填料中可能存在的杂质．减少污染。采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理，甲醇润湿吸附剂表面和渗透键台烷基相，便于水更有效地润湿硅胶表面。然后用水或缓冲溶液替换滞留在柱中的甲醇，以使样品水溶液与吸附剂表面有良好的接触，提高萃取效率。正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所在的有机溶剂来预处理。离子交换填料一般用3—5ml。去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。 固相萃取填料从预处理到样品加入都应保持湿润，如果在样品加入之前，萃取柱中的填料于了，需要重复预处理过程。并且在重新引入有机溶剂之前，先要用水冲洗革取柱内缓冲溶液中的盐分。 (2)上样 将样品倒^活化后的SPE小柱，然后利用加压、抽真空或离心的方法使样品进入吸附剂（如图2—2所示）。采取手动或泵以正压推动或负压抽吸方式，使液体样品以适当流速通过固相萃取柱，此时，样品中的日标萃取物被吸附在固相萃取柱填料上。 (3)洗击干扰杂质 洗涤的目的是为r除去吸附在固相萃取柱上的少量基体下扰组分。一般选择 中等强度的混合溶剂，尽可能除去基体中的干扰组分，又不会导致目标萃取物流失。如反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶剂水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。 （4洗脱及收集分析物 选择适当的洗脱溶剂洗脱被分析物，收集洗脱液，挥干溶剂以备后用或直接进行在线分析。为了尽可能将分析物洗脱，使比分析物吸附更强的杂质留在SPE柱上，需要选择强度合适的洗脱溶剂。
第一次用固相萃取做水样中的农残，纯水淋洗完，需要氮气将固相萃取小柱吹干。请问是直接把氮吹仪的针伸进固相萃取小柱管内吗？这样氮气还是只从表面吹了一下，下层的很不容易干，还是要接什么装置？有没有做过的请教一下怎么做，大概需要吹多久？另外怎么判断干了没？
比如固相萃取与高效液相色谱的在线与离线分析，主要区别是什么？结果会有很大不同吗
[align=center]固相萃取常见问题浅析与案例分析[/align][align=left] 固相萃取（SoildPhase Extraction，简称SPE）是色谱分析过程中常见的样品前处理方法，主要用于样品净化、待测组分的富集以及溶剂的转换，其原理与液相色谱中的色谱分离相似。固相萃取操作过程中经常会遇到筛板堵塞、流速缓慢、净化效果不理想、重现性差以及回收率不理想等问题，本文拟针对上述问题进行简单分析，并例举一些实验过程中遇到的案例，提供发现问题和解决问题的方法，与各位老师一起探讨学习。 1、筛板堵塞 常见的固相萃取柱通常由柱管、筛板和填料3部分组成，其中筛板是一种具有多孔结构的材料，起到固定填料和过滤溶液的作用。当上样液中含有较多颗粒杂质时，这些颗粒杂质会在筛板上不断聚集，在筛板上端形成一层颗粒层，随着压力的增加以及时间的延长，颗粒层会越来越严实，最终导致筛板完全堵死，溶液无法通过固相萃取柱。遇到这种情况，可以在上样前先高速离心或者过滤，然后取上清液或者滤液过固相萃取柱，减少颗粒杂质的影响。例如食品中人工合成着色剂的测定，当样品为饮料、配制酒等液体时，过聚酰胺固相萃取柱或者G3垂融漏斗还是很轻松的，而当样品为糕点、谷物制品以及果冻时，上样前需先高速离心或者过滤，否则就很容易出现筛板堵塞的现象。 2、流速缓慢 固相萃取过程中流速不能太快，流速太快不利于目标化合物在填料上的保留以及溶剂与目标化合物或者填料的相互作用，从而影响保留或者洗脱过程。当然流速也不能太慢，否则会大大延长前处理的时间。固相萃取过程中导致流速缓慢的原因有：（1）样品粘度高，例如食品中遇到浓缩汁、糖果时，需要对样品充分稀释，降低上样液的浓度；（2）填料较多或者太紧密，此时需要增强负压或者减少填料的使用量；（3）溶剂极性不匹配，例如SN/T1924-2011中淋洗固相萃取柱时，先用水、甲醇，接着用正己烷淋洗，正己烷与前两者的极性不同，从而导致流速很慢，遇到这种情况，可以增加负压或者选用合适的溶剂进行过渡。 3、净化效果不理想 通常固相萃取柱有两种净化模式，一种是采用保留目标化合物的模式，另一种是采用保留杂质的模式，不管采用哪种模式都需要选择合适的填料，使得目标化合物或者杂质能吸附在填料中，同时不需要保留的组分尽可能多的随着溶剂一同流出固相萃取柱。在保留化合物模式下净化样品时，通常会经历上样、淋洗和洗脱三个步骤。淋洗和洗脱溶剂选择的不合适也会使得净化效果不理想。例如淋洗液洗脱强度太弱，淋洗时不能将杂质淋洗掉，或者洗脱液的强度太强，洗脱时将杂质一并洗脱下来，这两种情况均会导致净化效果不理想。由此可见，采用固相萃取柱净化样品时，填料、淋洗液和洗脱液的选择尤为重要。当遇到一些复杂样品，一种填料不能满足净化效果时，可以选择串联固相萃取柱或者采用混合填料的方式进行操作。 4、重现性差 固相萃取中重现性差通常与产品质量、流速以及操作有关。固相萃取柱中填料的质量、均匀性和松紧度都可能影响到方法的重现性，因此选择质量可靠的厂家很重要，遇到重现性差的实验，可以选择用标准溶液考察一下固相萃取柱的重现性。固相萃取过程中流速的快慢也是影响重现性的重要因素之一，上样、淋洗、洗脱过程中适当降低流速，通常而言，流速低于5mL/min时结果较为稳定，有些实验可能需要更慢的流速。当然，操作者水平的高低也会影响到结果的重现性。例如，通常上样前需要活化固相萃取柱，上样过程中不能让填料干涸，浓缩过程不能有损失，复溶的时候需要充分溶解等等，这些都与操作技能息息相关。 5、回收率不理想 在实验中，操作者关注较多的可能也是关于加标回收率的问题，固相萃取柱质量的优劣、固相萃取方法是否合适、操作者操作技能的高低都可以通过加标回收实验进行验证。原则上加标回收率应在80%~120%之间，当然对于多组分目标物同时检测时，这一指标可适当放宽。回收率的问题通常体现在以下3个方面：（1）目标物没有回收；（2）目标物的回收率较低；（3）目标物的回收率过高。遇到上述情况时，需要对固相萃取过程进行排查，找到问题后对症下药，对实验方法就行修正。如何才能找到问题，其实不难。在一次完整的固相萃取过程中，目标化合物只可能存在于样品的流出液、淋洗液、洗脱液和填料中，我们只需要对这3种液体逐个测定，便能发现问题。 下面例举一些实验中遇到的案例。案例一、洗脱液对回收率的影响- SCX固相萃取柱净化测定克伦特罗 实验方法：依次用5mL甲醇、5mL水和5mL 0.03mol/L盐酸溶液活化固相萃取柱，将加标的蜂蜜样品提取液全部转移至活化后的固相萃取柱中，分别用5mL水和5mL甲醇淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，真空抽干2min，最后用5mL氨水-甲醇溶液（体积比5：95）进行洗脱，收集洗脱液。洗脱液在50℃下氮气吹干，准确加入1mL水溶解残渣，过0.22μm滤膜后，进样测定。 说明：在建立固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗残留量方法时，采用SCX固相萃取柱对加标的蜂蜜样品进行净化并测定，发现回收率为零。发现问题：采用高浓度的标准工作溶液稀释后直接上样过SCX固相萃取柱，按照上述方法进行净化，分别收集过柱液、淋洗液和洗脱液，并分别对上述3种液体进行测试。过柱液和淋洗液不浓缩，直接上样测定，洗脱液中由于含有氨水，浓缩后上样测定，测试结果见下图。[/align][align=center][img=,572,424]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301541_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 测定结果表明，在上述过程中均未检测到克伦特罗，增加洗脱液体积后克伦特罗的回收率依然为零。产生这种结果的原因可能有（1）克伦特罗没有被洗脱下来；（2）氮吹过程中损失；（3）复溶时没有溶解。针对后两种原因，直接将标准工作溶液进行氮气吹干，然后用水复溶，测定结果表明，氮吹和复溶过程对回收率的影响较小，那么只用一种可能，那就是克伦特罗没有被洗脱下来，仍然吸附在填料上面。增加洗脱液体积也没有效果，只能更换洗脱液了，参考文献方法用氨水-甲醇-乙酸乙酯溶液（体积比5：45：50）进行洗脱，效果并不理想。经过一系列的尝试，最后发现氨水有问题，原先使用的氨水开瓶时间较长，用的只剩下一点了，而且氨水具有挥发性，降低了氨水的浓度，导致洗脱液的碱性不够，于是找了一瓶新的氨水，重新配制氨水-甲醇洗脱液溶液，再次实验发现克伦特罗的回收率提高至90%左右。[/align][align=center][img=,349,243]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301542_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]案例二、淋洗液对回收率的影响- WCX固相萃取柱净化测定克伦特罗 实验方法：依次用5mL甲醇和5mL水活化固相萃取柱，将加标的蜂蜜样品提取液全部转移至活化后的固相萃取柱中，分别用5mL水和5mL 甲醇淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，真空抽干2min，最后用10氨水-甲醇溶液（体积比5：95）进行洗脱，收集洗脱液。洗脱液在50℃下氮气吹干，准确加入1mL水溶解残渣，过0.22μm滤膜后，进样测定。 说明：在建立固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗残留量方法时，采用WCX固相萃取柱对加标的蜂蜜样品进行净化并测定，发现回收率较低，只有60%左右。发现问题：采用高浓度的标准工作溶液稀释后直接上样过WCX固相萃取柱，按照上述方法进行净化，分别收集过柱液、淋洗液和洗脱液，并分别对上述3种液体进行测试。过柱液和淋洗液不浓缩，直接上样测定，洗脱液中由于含有氨水，浓缩后上样测定，测试结果见下图。[/align][align=center][img=,559,426]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301547_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left] 测定结果表明，采用甲醇进行淋洗时有部分克伦特罗被洗脱下来，从而影响了最终的回收率，因此采用极性较低的乙醇进行淋洗，回收率提高到90%以上。案例三、试剂空白对回收率的影响-MIP-BAP固相萃取柱净化测定苯并芘 采用MIP-BAP固相萃取柱净化测定食品中苯并芘含量时，发现试剂空白中检出了苯并芘，微量的试剂空白对高浓度的样品或许影响并不明显，但是对于低浓度的样品就会产生较大的误差，在低浓度加标时很可能出现回收率偏高的现象。排查方法和排查过程参考帖子：[url]http://bbs.instrument.com.cn/topic/6025769[/url]案例四、环境条件对回收率的影响 通常固相萃取柱对保持条件、使用温度和保质期都没有太多的要求，但是有些固相萃取柱，需要在规定的条件下保存和使用，否则就可能影响回收率。例如，免疫亲和柱对储存和使用温度有明确的要求，通常要求在2-8℃储存，但是千万不可冰冻保存，而且在使用前需要恢复至室温25℃左右，否则就可能影响免疫亲和柱的回收率。[/align][align=center][img=,690,199]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301549_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]案例五、流速对回收率的影响 上面已经讨论过流速对回收率的影响，这里再举一例。 在使用免疫亲和柱净化样品的步骤中通常要求在洗脱前使2~3mL空气通过柱体，但是这一步骤很容易导致填料萎缩，如果洗脱速度太快，洗脱液不能充分润湿填料，则可能出现回收率较低的现象，如果洗脱液沿着柱管直接流出来，则回收率可能只有零。因此洗脱时可以先堵住柱管的流出端，使得洗脱液充分润湿填料，使得填料重新舒展开后再进行洗脱。说明书中标明流速需要控制在1滴/秒。[/align][align=center][img=,423,536]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301550_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]案例六、填料与洗脱体积对回收率的影响 填料的规格、类型都可能对回收率有影响，在建立固相萃取-高效液相色谱法测定蜂蜜中克伦特罗残留量方法时比较了填料对回收率的影响（帖子链接：[url]http://bbs.instrument.com.cn/topic/6585726_1[/url]），免疫亲和柱的产品说明中也明确规定了柱容量。如果上样液中目标组份含量超过固相萃取柱的吸附容量时则会出现吸附“过载”的现象。“过载”不一定非要上样液中目标组份含量高，如果上样液中杂质组份也能吸附在填料上，则会对目标组份产生竞争吸附，降低固相萃取柱对目标组份的吸附量，从而影响回收率，因此并非所有的样品经过简单提取后都可以直接上样，有时对上样液也要进行预处理。 将目标组份从固相萃取柱上洗脱下来时，不仅要考虑洗脱液的强度，同时要考虑洗脱液的体积，体积太少目标组份不能充分洗脱，影响回收率，洗脱体积太大，影响后续浓缩的时间。固相萃取柱规格、上样量和洗脱液体积之间的关系可以参考下表。[/align][align=center][img=,492,259]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709301551_01_1669358_3.jpg[/img][/align][align=left]小结 （1）在对回收率问题进行排查时，不要选择样品的提取液做为上样液，因为可能会有竞争吸附和测定时杂质干扰的现象，可以直接选择高浓度的标准工作溶液甚至储备液上样测定，如果过柱液中检测出目标物质，需要考虑固相萃取柱“过载”，适当降低上样液浓度。如果是要考察柱容量，则需要选择高浓度的上样液，并让填料充分吸附； （2）固相萃取过程仅仅是影响回收率的一个因素，样品的提取、浓缩以及复溶过程都可能影响回收率，当实验结果显示回收率异常时，需要从多方面进行排查； （3）以上均属个人经验之谈，非常浅显地探讨了固相萃取过程中经常会遇到的问题，内容中不正确的地方，欢迎批评指正，共同学习。本文部分内容来源于《ProElut固相萃取技术与应用》，该书开篇部分对固相萃取做了非常详细的阐述，个人觉得很有学习的价值，推荐给大家，共同学习。[/align]
在分析化学中，尤其是复杂基质样品的分析，如食品安全，环境，生物医药等，样品前处理是一个非常重要的步骤。样品前处理的好坏不仅直接影响分析结果的灵敏度和重现性，而且还影响分析仪器的使用寿命和维护成本。再加上，若是能有一款自动化的前处理净化仪器设备，将能减轻检测实验室检验员的工作业务量，为此很多分析科学家认识到样品前处理的重要性，不断地研究，改进样品前处理的技术和方法，以提高它的准确性，有效性，快捷性。 现将人工净化处理和全自动机械化净化处理对比如下： 一、人工净化处理 1. 人工前处理流程 如图1http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313244920_01_2275853_3.png 图1.人工前处理大概流程图 2.存在的问题及危害 a) 对人员要求高，多个样品进行，稍不留意就会发生添加顺序混乱的情况，从而导致所有样品作废，必须重新萃取。 b) 重现性无法保证。同样的负压条件，但每根固相萃取柱差异导致每根SPE 的流速都不同。 c) 实验室操作人员的安全性。手动操作需要人为添加溶剂，必须有人看管，长时间暴露于弥漫着有机溶剂的实验室中，对实验室操作人员的健康带来巨大的危害。 二、全自动固相萃取净化仪器 1. 全自动固相萃取仪 ：全自动固相萃取仪专门针对小体积样品中有机物残留，如农药残留、兽药残留、食品添加剂、药物等分析而设计的前处理设备。全自动进行萃取柱的活化、上样、淋洗、吹干、洗脱，使固相萃取变得更安全、更轻松。全自动固相萃取净化仪器见下图2。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313290498_01_2275853_3.png 图2. 全自动固相萃取净化仪 2.针对全自动固相萃取仪的应用优势分析 a).多通道同时活化、上样、洗脱与收集。效率高一致性好，提高实验速度和平行性，见图3；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313310591_01_2275853_3.png 图3 多通道同时净化图 b). 采用高精度注射泵，正压上样，保证稳定的流速，大大提高了分析结果的精密度，见图4；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313323762_01_2275853_3.png 图4. 高精度注射泵 c). 采用独特的倒置上样模式，保证样品的全转移；采用样品管喷淋清洗技术，耗用有机溶剂量更少，样品管壁清洗得更干净，降低了交叉污染的几率，见图5；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313335254_01_2275853_3.png 图 5. 倒置上样图 d). 可选择串柱模式，比如：将C18反相柱和SCX强离子交换柱叠加使用，见图6；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015052313352268_01_2275853_3.png 图6. 串柱图 e). 内置加热浓缩功能，大大提高样品前处理效率，见图7；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505231336_547165_2275853_3.png 图7. 加热浓缩分解图 通过详细专业比较，小伙伴们，怎么选择不用再重复讲了吧！ 试想一下，如此方便、快捷，安全、环保，省事、稳定，而且准确，复现性好等性能优良的设备，谁不想拥有一台呢？
各位老师，想请教一下固相萃取容量的问题：分析水样的时候也不是柱子填装量越大越好吧。比如我现在大概知道水体里面物质的浓度只有18mg/L.如果我只取50mL过固相萃取柱富集，也就是说过柱的总量只有0.9mg，是不是不必选择大容量柱子呢，比如500mg的？小容量的60mg的柱子也应该够用了吧？换句话说，柱子的容量和填装量之间是一种什么关系，在节约金钱的情况下，我们应该怎样选择合适柱子的填装量。谢谢！
样品经固相萃取后可以直接进样么/大家知道进液相的流动相和样品都要经过0.45um的过滤膜进行过滤那么进气相的溶剂呢？样品固相萃取后能否直接进样？需要用.45um的过滤膜过滤么
各位好。我用固相萃取做有机磷，进行加标回收，可是回收率非常低。有机磷用的甲醇溶解，用的方法是EPA-608，我也看过别人的一些萃取方法，觉得大同小异，基本步骤都差不多，用的二氯甲烷洗脱的，可回收率就是低，各位帮忙分析一下原因，或者有好的方法可以借鉴一下。另外，请问对于水样需要调节PH值么？水样中加入氯化钠对回收率有影响么？
固相萃取技术（Solid Phase Extraction, SPE）液液分配（LLE）有许多局限性，例如需要大量不互溶溶剂；样品处理步骤复杂；样品回收率和精密度不理想；处理过程中乳液的形成，和溶剂蒸发时产生的样品损失等等。固相萃取（SPE）主要用于样品分析前的净化或浓缩富集。与传统的液－液萃取相比，由于其采用了高效、高选择性的固定相，能显著减少溶剂用量，简化样品预处理过程，同时所需费用也有所减少，一般来说，固相萃取所需时间为液－液萃取的1／12，费用为液液分配的1／5。固相萃取能用于气相色谱、液相色谱、红外光谱、质谱、核磁、紫外和原子吸收等各种分析方法的样品预处理。正因为固相萃取柱独特的性能，自70年代问世以来，其全球需求量迅速增长。总的来讲，固相萃取法改进了样本制备技术：1可批量进行；2节省时间；3减少溶剂使用和废物产生；4多种键合固定相选择性；5可富集痕量分析物；6可消除乳化现象；7易于自动化；8回收率高、重现性好。一个固相萃取柱由三部分组成：（l）柱管；（2）烧结垫；（3）固定相。柱管由血清级的聚丙烯制成，一般做成注射器形状。一些厂家也提供玻璃的柱管。柱管下端有一突出的头，此头的尺寸已标准化，可用于各种不同的固相萃取多管真空装置。烧结垫除能固定固定相外，也能起一些过滤作用。聚乙烯是常见的烧结垫材料，对于特殊要求也可采用特氟隆或不锈钢片。固定相是固相萃取柱中最重要的部分。最常见的固相萃取固定相是键合的硅胶材料。一般采用孔径60A不规则形状的40u硅胶微粒作为原材料，然后将各种官能团键合上去。也有一些非硅胶基质的固定相被广泛应用。其一般操作步骤是：液态或溶解后的固态样品倒入活化过的固相萃取柱，然后利用抽真空、加压或离心等方式使样品进入固定相。为了同时处理多个样品，往往需要一个固相萃取柱多管真空装置。一般来说，固相萃取柱将保留所需要的组分和类似的其他组分，并尽量减少不需要的样品组分的保留。弱保留组分的样品可用一溶剂冲洗掉，然后用另一溶剂把感兴趣的分析物从固定相上洗脱下来。另外，也可让感兴趣的组分（分析物）直接通过固定相而不被保留，同时大部分干扰物质被保留在固定相上，从而得到分离。在多数情况下，使分析物得到保留更有利于样品净化。固相萃取柱类型1. 键合相技术 (固相分配柱技术)2. 固相吸附柱技术在细的、分散的载体（或固定相）表面涂有一层与流动相互不相溶的固定液或化学键合相，当液体流动相流经固定相时，由于有很大的界面，使分析物和提取物在两相间按分配系数分配。分析物与提取物的分离能力取决于：1.两相间极性的差异 2.物质在两相间的亲和力和溶解度是一种液液分配色谱技术固定相：涂渍在惰性载体上的液体或化学键合在载体上的各种有机基团流动相：与固定相互不相溶的液体流动相中的样品组分在两相间进行平衡分配，由于样品组分在两相中的相对溶解度不同，以不同的速度流出色谱柱而得到分离。选择适宜的固定相和流动相，可对非常广泛样品类型进行分离。目前常用的多为化学键合固定相是利用化反应的方法，通过化学键把不同极性化合物键合到载体表面。先将硅胶进行酸洗、中和、干燥活化，使其表面保持自由硅醇基，如酯化键合：又如聚合键合固定相： 〡 〡 〡 Cl3SiR 〡 〡 〡[
[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/12/200912221515_191304_1644659_3.jpg[/img]萃取售后及服务所占比重 固相萃取(SPE)技术已商品化二十多年，至今仍在发现更多的应用领域。这项技术的发展似乎可归功于供应商可在特定领域提供应用支持，尤其是在临床科学、制药、毒理学、杀虫剂以及残留物分析领域。 SPE市场可以分为三种产品类型：自动化系统、非自动化系统和相关的售后产品。非自动化系统指的是和SPE柱、板和盘等组合使用的硬件产品的组合，而这些硬件产品包括真空泵、管路和蒸发系统，这些产品几乎不需要维修，并且容易操作和安装。由于相对较低的成本，上述硬件产品主要用在通量要求低的实验室，对于这些实验室，购买全自动系统就不那么必要了。 自动化的SPE系统在某种程度上显得有些昂贵，价格从25,000美金到100,000美金不等，但在制备大量样本时自动化系统或许是最实用的。许多自动SPE系统均是液体处理工作站，这些工作站通常用于组合化学、药物研发等高通量需求的实验室。其它的自动SPE系统可以直接将纯化和浓缩的样本注入HPLC、GC、MS或NMR系统，进行在线的自动SPE。 然而，SPE通常还是手动操作技术。大多数情况下，SPE易于使用、价格低廉以及一次使用的特点，使得手动操作SPE小柱、盘以及板优于自动化系统。小柱是最通用的方式，它比盘和板对于固相具有更广的选择性。盘的价格较比小柱稍高，但其能够承载更高的流速，在许多环境应用方面具有一定优势。 SPE在通用的萃取技术中所占比重最大，通用的萃取技术包括索氏液-液萃取(LLE)、加速/高压溶剂萃取(ASE/PSE)以及超临界流体萃取(SFE)，SPE占据了三分之二的萃取市场需求。SPE广泛用于包括医院/临床的制药实验室和合同研究/组织(CRO)实验室。
请问：固相萃取有机磷要不要调节水样PH值？ 如果要，需要调节到多少 我们用的是C18小柱，用什么淋洗液比较好 谢谢！
大家好，我想问下固相萃取的问题：我的是1L的水样，检测里面的待测物质。即将用CNW的固相萃取装置，C18的固相萃取柱，2g/10ml的：方法大致步骤是：1、活化；2、上1L水样，之后用空气干燥 ；3、洗脱 。我想问大家：最后的洗脱液需还要用无水硫酸钠除水吗？有的文献上没提到用无水硫酸钠干燥，有的又说干燥。然后是有文献说1L的水样上样速率是10L/min,这个速度行吗？ 谢谢大家！
固相萃取通常包括4个步骤：1. 活化 2. 上样 3. 淋洗 4. 洗脱，在每个步骤都要使用溶剂，那么针对每个步骤该怎样选择合适的溶剂呢？迪马科技解答选择溶剂固相萃取一般有四个基本步骤：固定相活化、样品上柱、淋洗和分析物洗脱。活化活化的目的是创造一个与样品溶剂相容的环境并除去柱内所有杂质。通常需要两种溶剂来完成上述任务，第一个溶剂（初溶剂）用于净化固定相，另一个溶剂（终溶剂）用于建立一个合适的固定相环境使样品分析物得到适当的保留。每一活化溶剂用量约1-2mL/100mg 固定相。无论固相萃取柱的来源或质量，未经活化都有可观的杂质存在。由于许多杂质能污染萃取后的分析物，故在样品萃取前必须除去这些杂质。除去杂质的最好方法就是用初溶剂，这样就可以除去所有可能与分析物一起洗出的物质；杂质除去不彻底，将导致最终色谱图上额外峰的干扰。终溶剂不应强于样品溶剂，若使用太强的溶剂，将降低回收率。通常采用一个弱于样品溶液的溶剂不会有什么问题。在理想情况下，终溶剂应该与样品溶剂性质相似。例如，一个水样被HCl 调节到pH2，终溶剂（水）也应用HCl 调节到pH2。值得注意的是，在活化的过程中和结束时，固定相都不能抽干，因为这将导致填料床出现裂缝，从而得到低的回收率和重现性，样品也没得到应有的净化。如果在活化步骤中出现干裂，所有活化骤都得重复。在建立固相萃取方法时，柱的活化经常被忽视。其实不当的活化经常是低回收率、失败的样品净化或重现性差的来源。上样上样步骤指的是样品加入到固相萃取柱并迫使样品溶剂通过固定相的过程，这时分析物和一些样品干扰物保留在固定相上。为了保留分析物，溶解样品的溶剂必须较弱。如果溶剂太强，分析物将不被保留，结果回收率将会很低，这一现象叫穿漏（breakthrough）。尽可能使用最弱的样品溶剂，可以使溶质得到最强的保留或者说最窄的谱带。上样时若有强保留，洗脱所需溶剂量小，也可减少杂质的洗出量，只要不出现穿漏，允许采用大体积（0.5-1 L）的上样量。淋洗分析物得到保留后，通常需要淋洗固定相以洗掉不需要的样品组分，淋洗溶剂的洗脱强度是略强于或等于上样溶剂。淋洗溶剂必须尽量地弱以洗掉尽量多的干扰组分，但不能强到可以洗脱任何一个分析物的程度。溶剂体积可为0.5-0.8 mL/100 mg 固定相。淋洗步骤也能确保全部样品与固定相接触，因为上样时部分样品溶剂的小液滴可能还沾在管壁上，淋洗溶剂可把液滴全部洗入固定相。有时候淋洗步骤也许并不十分重要，但淋洗总能得到更干净的样品，从而得到更简单的谱图和更长的GC 或HPLC 柱寿命。洗脱淋洗过后，将分析物从固定相上洗脱。洗脱溶剂用量一般是0.5-0.8 mL/100 mg 固定相，而溶剂必须进行认真选择。溶剂太强，一些更强保留的不必要组分将被洗出来；溶剂太弱，就需要更多的洗脱液来洗出分析物，这样固相萃取柱的浓缩功效就会削弱。收集起来的洗脱液可以直接向色谱柱进样，也可以把它浓缩后溶于另一溶剂中进样和进一步净化。
做苯酚衍生物的液液萃取流程如下：取100mL水样于250mL分液漏斗中,用H2SO4;调节pH值至1-2,加入10mL二氯甲烷,振荡萃取5min,静置5min后转移出二氯甲烷相,再加入二氯甲烷10mL,重复上述操作,合并有机相,使之通过400。C灼烧过的无水硫酸钠柱脱水,之后转移至茄形瓶中,旋转蒸发浓缩至约0.5mL. 进入GC-MS分析我现在想用SPE小柱固相萃取代替以上的液液萃取，是把样品过柱后直接就可以进GC-MS了吗？还是需要其他步骤呢？我做BPA的衍生物流程如下：1. 固相萃取小柱活化:依次使二氯甲烷,甲醇,高纯水(5mL, 5mL,5mL)通过SPE小柱.2. 上样:光照后的反应溶液中加入内标物(IS)菲d10,用H2SO4调节反应液至pH=2,然后以2mL/min的流速通过SPE小柱,之后用含3%甲醇的高纯水(5mL)清洗小柱,冷冻干燥;3. 洗脱:洗脱液为6mL的甲醇:二氯甲烷=3:2(V:V),分两次洗脱,收集洗脱液,氮气吹至近干,用二氯甲烷定容,然后进行GC-MS分析。
固相萃取（SPE）是一个包括液相和固相的物理萃取过程。在固相萃取过程中，固相对分析物的吸附大于液相。当样品通过固相萃取柱时，分析物被吸附在固相表面，其它样品组分则通过柱子。分析物再用适当的溶剂洗脱下来，达到与样品基体和干扰化合物的分离及富集目的。 固相萃取的特点：（1） 取代传统的液液萃取，不需要大量互不相溶的溶剂；（2） 处理过程中不会产生乳化现象；（3） 采用高效、高选择性的吸附剂，使得萃取选择性高，重复性好；（4） 简化样品处理过程，减少费用。固相萃取的机制为：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015050414202111_01_2984502_3.png固相萃取的过程为：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505041421_544650_2984502_3.png（1）吸附剂的预处理 为保证萃取良好的再现性，固相柱在使用前必须用适当的溶剂清洗。——对固相柱进行活化，展开碳氢链增加和分析物作用的表面积；——对固相柱进行清洗，除去柱上吸附的对分析有影响的物质。 注意：加样前预处理好的柱子必须保持湿润。（2）添加样品 将样品加于固相萃取柱中，用正压或负压（常压）使样品通过柱子。样品的流速必须控制，一般在1.5mL/min。以离子交换为作用机理的萃取，速度要适当降低，以保证分析物有足够的时间与柱填料的离子交换官能团发生作用。（3） 固相柱的洗涤 用适当的洗涤剂有选择性地将吸附力弱的杂质洗涤下来，而留分析物于柱上。（4） 固相柱的干燥 用自然或吹氮的方法使固相柱干燥。 注意：在非水溶性有机溶剂为洗脱剂或用GC分析时，柱的干燥尤为重要。（5）分析物的洗脱 选择适当的溶剂将分析物洗脱下来，用于分析或进一步处理。 洗脱剂应满足：——必须有足够的强度，以最小用量将分析物洗脱下来；——必须有足够的选择性，尽可能只将分析物洗脱，而将吸附力强的杂质留在柱上。 小伙伴儿们，你的固相萃取过程顺利吗？欢迎来分享！
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