色谱工作站计算校正曲线方法

[align=center][font=宋体]标准曲线计算浓度为负值的工作站处理方法[/font][/align][align=center][font=宋体]概述[/font][/align][font=宋体]补充合适的校准点可能是较为合理的方法，也可以通过校准曲线的修改，给予其他方式的解决。[/font][font=宋体] [/font][align=center][font=宋体]简介[/font][/align][font=宋体]GCMS[font=宋体]分析中可能会遇到外标标准曲线在浓度轴上产生负截距的情况，当待测样品的峰面积较小，代入标准曲线之后浓度计算结果会出现负值。[/font][/font][font=宋体]当然，根据分析的基本原则，标准曲线的范围是不可以外延的，高于标准系列响应值最高点或者低于标准系列最低点响应值的数据，标准曲线计算给出结果是不可靠的。[/font][font=宋体]较为稳妥的方法是增加更低浓度的标准品数据，使标准曲线的响应范围囊括待测样品，但是无疑会大大提高色谱工作者的工作量，这样的操作也未必会被以验证的分析方法允许。[/font][align=center][font=宋体]工作站处理手段[/font][/align][font=宋体][font=宋体]色谱工作者也可以采用工作站的修正手段来解决这个问题，较为合理的手段是采用权重因子。通过建立加权标准曲线的方法，使标准曲线更加[/font]“逼近”低浓度数据点，以减弱或者抑制标准曲线的负截距。这个方法可以减小标准曲线本身的低浓度误差，但不会完全杜绝标准曲线负截距的问题。[/font][font=宋体][font=宋体]理论上不太建议采用[/font]“标准曲线强制过零”的方法，虽然会杜绝样品浓度为零的现象。“强制过零”的处理方式会修改原始的回归方程，可能对回归方程带来较大的误差，尤其是低浓度端。痕量[font=Calibri]GCMS[/font][font=宋体]分析中，低浓度段往往是最为重要的数据区域。[/font][/font][font=宋体]Shimadzu[font=宋体]的[/font][font=Calibri]GCMSsolution[/font][font=宋体]提供了另一个对标准曲线零点的解决手段——“到级别[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]的线”，如图所示：[/font][/font][align=center][img=,690,404]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009172244197310_6552_1604036_3.png!w690x404.jpg[/img][font=Calibri] [/font][/align][font=宋体][font=宋体]在[/font]GCMSSolution[font=宋体]工作站的“定量参数”选项卡中的“零点”选项中，选中“到级别[/font][font=Calibri]1[/font][font=宋体]的线”选项，可以在不修改回归方程的情况下，建立一条“折线”方式的回归曲线。如图所示：[/font][/font][align=center][img=,690,355]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009172244299080_3480_1604036_3.png!w690x355.jpg[/img][font=Calibri] [/font][/align][align=center][font=宋体]原始标准曲线和回归方程[/font][/align][align=center][img=,690,359]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2020/09/202009172244386535_7755_1604036_3.png!w690x359.jpg[/img][font=Calibri] [/font][/align][align=center][font=宋体]修改之后的标准曲线和回归方程[/font][/align][align=center][font=宋体] [/font][/align][align=center][font=宋体] [/font][/align][align=center][font=宋体] [/font][/align][align=center][font=宋体]小结[/font][/align][font=宋体]GCMSSolution[font=宋体]的使用小技巧，修改标准曲线[/font][/font]

[align=center][size=18px]新手看过来，教你如何使用[/size][size=18px]Masshuner SIM[/size][size=18px]数据建立校正曲线[/size][/align]在日常分析工作中，数据处理是一个很关键的步骤，在数据处理之前，我们往往首先需要用校正标样走一下校正曲线各个浓度点，然后利用软件采集校正曲线各个浓度点的数据以此来建立我们常说的“校正曲线”。当我们遇到一个新的工作站时，往往不知道从何下手，此次以Masshuner工作站为例，给大家演示一下如何建立校正曲线。1.首先我们新建批处理，将来这个批处理中不仅存有原始数据，还包括我们后续建立的校正曲线，所有对样品的操作记录都存储在这个对应的批处理中，相当于给这一整套流程操作进行了“打包处理”，也方便了以后我们调用查看数据。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325575436_6301_3141805_3.png[/img]2.点击菜单栏文件-添加样品，确认类型选择校正，级别处输入级别号，根据浓度从小到大依次输入1~5级别，然后选择方法菜单下编辑进入方法编辑界面。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325578785_2326_3141805_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325579556_225_3141805_3.png[/img]3．在色谱图上鼠标右键选择色谱峰，选择后双击出现质谱图，在定量离子上鼠标点击出现蓝色箭头，鼠标右键选择新建化合物，然后输入化合物名称，在定性离子上鼠标点击出现蓝色箭头，鼠标右键选择新建定性离子。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325582662_4223_3141805_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325584019_3535_3141805_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325585250_4590_3141805_3.png[/img]4.如果是内标法，请参考下面截图，设置好内标，需要设置的有3列（ISTD化合物名称、ISTD标记、ISTD浓度），如果是外标法，就没有这些设置步骤。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325586188_4940_3141805_3.png[/img]5.在方法菜单下选择从校正样品创建级别，并且输入化合物浓度[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325587487_1245_3141805_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325588316_2151_3141805_3.png[/img]6.全部输入好后进行校正曲线验证，验证查看有无错误提示，如果没有错误提示那说明此次建立校正曲线成功，然后保存曲线退出并将此曲线应用于该批处理。如果验证有错误，那说明建立曲线有问题，可能是哪个地方漏输入什么参数或者漏了步骤，那就回过头来查看一遍，重复此前的操作，直至曲线验证通过。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111091325589781_5681_3141805_3.png[/img]

[color=black]Labsolution色谱数据工作站保留指数校正的操作方法[/color][align=center][color=black]概述[/color][/align][color=black]保留指数本质上是规范化的保留时间，在确定的分析条件下，与固定相性质相关，当色谱柱的尺度规格发生变化时，采用保留指数校正功能自动计算和校准定量方法中目标组分的保留时间。[/color][align=center][color=black]一 保留指数校正的原理介绍[/color][/align][color=black]保留指数本质上是规范化的保留时间——是以正构烷烃保留时间为标尺，规范待测组分的保留时间。对于一根确定的色谱柱，在相同的温度和流量操作条件之下，如果色谱柱的具体尺寸规格发生了一定程度的变化，并不影响待测目标物质的保留指数的具体数值。[/color][color=black]例如在农残分析的场合下，色谱工作者在一次进样中可能同时需要处理数十至数百个目标组分的分析。当方法运行一段时间之后，色谱柱需要进行维护。常见的情况下，色谱柱的长度会被明显截短，那么目标组分的保留时间会发生显著的变化。[/color][color=black]此时如果将所有目标组分的保留时间进行重新校准，无疑色谱工作者会面临较大的工作量。如果使用保留指数校正功能的话，只需要重新进样测试一下正构烷烃标准品（前提是方法最初开发时，事先进样过正构烷烃标品），修正分析方法即可，这样可以显著的提高分析效率。[/color][color=black]下文以Labsolution Workstation为例予以说明。[/color][align=center][color=black]二 Labsolution 色谱数据工作站的操作步骤[/color][/align][color=black]假设某项色谱分析，色谱柱原始长度为30m，进样正构烷烃标品获得数据文件为alkane-30.gcd；进样标准样品获得数据文件为AART-30m.gcd。[/color][color=black]当分析进行一段时间之后，色谱柱经过不断维护后长度变成24m。此时进样正构烷烃标品，获得数据文件alkane-24.gcd；进样标准样品获得数据文件为AART-24m.gcd。[/color][color=black]然后基本操作步骤如下：[/color][color=black]2.1 输入原始正构烷烃的保留指数[/color][color=black]进入Labsolution的“再解析”模块，打开alkane-30m.gcd此数据文件，在“方法”界面下，编辑化合物表。此时将正构烷烃的化合物名称、保留时间和保留指数输入到表格中。[/color][color=black]然后保存此数据。[/color][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108261803071420_5701_1604036_3.png[/img][/align][color=black]2.2 标准样品的保留指数计算[/color][color=black]打开标准样品数据AART-30m.gcd，然后点击“方法”界面下的“保留指数”选项卡，点击“从数据文件加载”图标，并选择“alkane-30m”此数据文件。[/color][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108261803072435_8318_1604036_3.png[/img][/align][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108261803072559_6125_1604036_3.png[/img][/align]然后点击“助手栏”中的“向导”图标，依次点击“下一步”，创建完成方法文件，并保存。此时Labsolution色谱柱数据工作站会自动计算出各个目标组分的保留指数。此时保存方法文件为“标样采集方法”。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108261803074199_3900_1604036_3.png[/img][/align]2.3 保留指数的校正当色谱柱长度变为24m后，标样数据中的待测物质保留时间均发生缩短。此时打开柱长24m获得的正构烷烃数据“alkane-24m.gcd”，然后编辑化合物表，填写保留指数，并保存数据问题。然后点击“编辑”菜单，选择“自动修改保留时间AART”。在依次点击“下一步”，此时方法文件中所有目标组分的保留时间，已经同时自动修正为24m下的保留时间。[align=center]小结[/align][color=black]利用保留指数校正功能，可以明显缩短[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析方法修改消耗的时间，以提升分析效率。[/color][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/08/202108261803075254_5487_1604036_3.png[/img][/align]

N2000型色谱工作站的有关概念 1、本工作站需用到的部分色谱专业术语 1.1 色谱图的有关概念色谱图：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或者说载气流出体积的曲线图色谱峰：色谱柱流出组分通过检测器系统时所产生响应信号的微分曲线。基线：峰的起点与终点之间所连接的直线峰高：从峰的最大值到峰基线的距离峰宽：在峰两侧拐点处所作切线与峰基线相交两点之间的距离半峰宽：通过峰高的中点作平等于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离峰面积：峰与峰基线之间的面积1.2 峰处理参数 色谱峰检测、基线漂移的修正、峰起落点的确定、分割分离不完全的峰、测定峰面积等谱峰处理，都是根据设定的峰处理参数（如峰宽、斜率、漂移量、最小峰面积、时间变参、时间程序表及积分事件表）等进行的，其有关概念见下表：[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/03/200703102333_44277_1632583_3.jpg[/img] 注：表中括号内数据为系统默认值。2、色谱处理的相关概念 2.1.数据采集：在采集数据的过程中，分析仪器所输出的信号在采集器中由模拟信号转化为数字信号。数字信号传送到N2000色谱工作站并保存在信号数据文件中。2.2.积分：积分是从信号曲线上确定峰并计算其大小。积分是定量计算必不可少的。N2000色谱工作站积分时，先是辨别每一个峰的开始及结束时间，并用“|“符号标记这些点，同时寻找这些峰的顶点，确定保留时间，建立基线，计算峰面积、峰高及峰宽。这些过程由积分参数表、时间表、手动积分事件表控制。 在实际运行中，色谱工作站常常必须处理非常复杂的色谱问题。在一次运行中，峰的大小可能变化很大，而且峰经常是以很小的浓度出现。系统噪声，漂移等干扰会影响工作站用来计算峰面积和高度的基线，最终会导致色谱过程难以完全将峰分离。只要有可能，就优化色谱分析方法来产生分离效果。当由于某些原因而难以做到时，色谱工作站必须处理复杂峰。 因此，我们知道峰的积分是一项复杂的工作，尽管我们浙江大学智能信息工程研究所的增强型智能算法尚不能对极差的色谱峰完全补偿，但我们的N2000型色谱工作站能够克服噪声、漂移和峰的不完全分离等问题，并从较差的色谱图中获得可重复的结果。 2.3.定量：使用峰面积或峰高来确定样品中化合物的浓度，包括以下过程：弄清并鉴别您所分析的化合物；建立分析含有这种化合物样品的方法；分析含有已知化合物浓度的一个或几个标准样品，以获得该浓度下的响应，并计算出响应因子；分析未知浓度的化合物样品，以得到未知浓度的响应；将未知浓度的样品与标准样品进行比较，并利用标准样品的校正因子来确定未知样品中化合物的浓度。 为了获得未知样品响应与标准样品的有效比较，必须在相同的条件下采集和处理数据。2.4.校准：校准是通过进样分析指定的准备好的标准样品，来确定计算绝对组分浓度的响应因子的过程。 重复次数：同一浓度的标准样品平行进样的次数。 校准点数：由一个校准不同样品浓度的校准点组成。 标准样品：也叫校准样品或标准混合物，是含有用于定量的已知数量的化合物样品。标准样品可从国家标准试剂供应商处买到。 标准曲线：是从一个或多个标准样品中获得的化合物的数量与响因数据的图形表示。2.5.报告：报告包含所分析样品的质及量的信息。报告可以直接打印，或在屏幕上显示，报告可包括运行中所测峰的详细信息及所得的信号图。 3、本工作站的特有概念介绍：积分方法、组分表、谱图、ORG文件、MDY文件、DAT文件、手动积分事件表等。3.1.方法(.MTD文件) 方法是指控制工作站对色谱仪的信号进行显示、采样保存、分析计算、打印、同时记录试验条件的一个程序，包括采样控制、积分参数、组分表、谱图显示控制、报告编辑格式、仪器条件等。 本工作站所用的方法有三类：贮存方法、缺省方法、现用方法，扩展名为.MTD 针对不同的样品设置相应的方法，可以使您更准确更快速更方便地进行样品测试，并真实地记录样品的实验条件。所以，在日常的操作中应养成良好习惯；即取一个简单直观的方法文件名并及时地保存修改过的方法。[img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2007/03/200703102333_44278_1632583_3.jpg[/img]3.2.组分表(即ID表) 工作站组分表就是用来鉴别峰，判定组分名称，进行非归一法计算时的依据。3.3.谱图DAT文件 即只包含色谱数据信息的文件，与原N型和UPPER色谱工作站兼容。3.4.ORG文件 原始处理数据文件，除了谱图数据以外，还包括实验信息与样品分析方法、仪器条件、积分及定量计算结果、结果报告等信息。这是只可查看不可编辑的二进制文件，因而可确保结果的原始性，符合ISO9000系列及美国GMP认证规定。后处理时不许对其进行修改，修改后保存为MDY文件。3.5.MDY文件 对原始处理数据（ORG文件）进行修改后保存的文件。3.6.实验日志 即您利用本工作站时对方法的操作、数据的采集等在线工作站的自动记录。 可记录整个系统的运行情况，包括方法的建立、保存、另存、加载、实验数据的采集及文件的保存。3.7.手动积分事件表 即您对谱图手动画基线等手动积分事件的集合。

[align=center][size=24px]Labsolutions色谱数据工作站计算回收率的方法[/size][/align][align=center][color=black]概述[/color][/align][color=black]Labsolutions 色谱数据工作站操作教程——回收率的计算。[/color][color=black]在色谱分析过程中，如果待测样品经过某些方式的前处理（例如衍生化、萃取、超声或溶剂提取等），那么就会存在目标物质在前处理过程中是否存在损失的问题，往往需要对前处理方法的准确性作出评价，常用的手段是测定分析方法的回收率。[/color][color=black]常见的实验方式是在样品中添加确定含量的标准物质，然后将样品进行处理之后，测定目标物质的含量，与理论含量的比值为回收率。方法的回收率越高，表示分析方法的准确性越高。 [/color][align=center][color=black]利用Labsolution 色谱数据工作站的QAQC功能计算回收率的操作步骤[/color][/align][color=black]下面以较为简单的单点校准为例进行说明。假设某项色谱分析获得标准品数据为std-01，加标之后的样品用于前处理并测定之后获得的数据为data-01，假设进行加标的待测组分为甲苯，标准品中甲苯含量为100mg/L，样品加标量为400mg/L。[/color][color=black]1 创建分析方法[/color][color=black]在Labsolution的“再解析”部分中，点击“数据处理”模块，打开std-01文件，按照向导创建外标的组分表。[/color][color=black]然后在工作站界面的右下方“方法视图”、“化合物”表中，点击右键，选择“表样式”，增加“添加量”项目。[/color][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110050010276955_1942_1604036_3.png[/img]然后点击“方法”菜单、“QA/QC参数”，编辑回收率选项，注意此时的文件类型为“未知样品”。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110050010284244_8991_1604036_3.png[/img]然后保存方法文件，注意保存方法文件时，必须要选中“QA/QC”参数选项。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110050010286731_1710_1604036_3.png[/img]2 运行批处理点击Labsolution再解析部分中的“批处理再解析”模块，编写批处理表，将标准品std-01（用来获取标准曲线）和测定回收率样品data-01加入表格。此时注意两个数据文件的文件类型——std-01数据的文件类型为“标准”，data-01数据的文件类型为“未知”。[align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110050010289029_7043_1604036_3.png[/img][/align]点击“批处理设置”，勾选“执行QAQC”。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110050010289250_1603_1604036_3.png[/img]然后保存并且执行此批处理文件，最终可以获得回收率结果，可以用txt文本方式、网页文本方式或者表格方式输出。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/10/202110050010291812_3608_1604036_3.png[/img]

前天，与网友分享了单点校正表建立，有网友私下聊天说，非常简单实用，而且图例清晰，对工作帮助很大，让我尽快把多点的也写一下。淳朴的新坛友，像当年的我一样。废话少说，正题。首先，调用一个信号，建立单点校正表。依然是Chemstation 工作站，前提是至少配制5个级别的对照品溶液。如图1，图1[img=,690,55]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061433_01_2700892_3.png[/img]工具栏中选择“Clibration”，下拉菜单，选择“New Calibration Table”，如图2：图2[img=,348,375]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061435_01_2700892_3.png[/img]缺省浓度根据实际配置浓度填写，如图3，图3[img=,690,313]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061438_01_2700892_3.png[/img]其次，添加级别。调用需要的信号，依然工具栏中选择“Clibration”，下拉菜单，选择“Add Level”，如图4：图4[img=,281,186]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061440_01_2700892_3.png[/img]输入相应的浓度，即可。校正表中化合物“compound”根据需要更改。依次调用信号，按如上操作添加级别。最后，校正曲线生成。当所有需要级别都添加以后，校正曲线就生成了，线性方程及相关系数都清晰可见。如图5：图5[img=,690,239]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061445_01_2700892_3.png[/img]校正表生成后，工具栏中选择“Report”，下拉菜单，选择“Specify Report”，如图6，选择ESTD，即外标法，即可。图6[img=,690,427]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061500_01_2700892_3.png[/img]综上，就简单的几步，在研发型实验室，建立校正曲线，即通俗的线性，对数据分析非常实用，省去了做EXCEL的大量工作。当然，如果觉得校正曲线不靠谱的，可以EXCEL验证一下，排除仪器自动生成数据的小数点位数，结果是可靠的。如图7，即校正表生成的曲线。图7[img=,690,369]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061452_01_2700892_3.png[/img]这张图，可以从工作站里面拷出来。EXCEL生成的线性关系图，如图8：图8[img=,540,340]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061455_01_2700892_3.png[/img]对比一下，结果是一致的。调用任意一个供试品溶液的信号，即可直接在图谱里显示结果，如下图：[img=,690,554]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707061512_01_2700892_3.png[/img]简单说几句，建立校正表，由此生成线性关系，或许一部分人非常熟悉，但是，很多人是不熟悉的，熟悉了以后，对工作效率的提高很有帮助。同样，在方法验证中，也可以使用校正表，Agilent的工作站，国内国际都是认可的。愿对网友有所帮助。