纳升级毛细管液相色谱系统

摘　要: 利用有机聚合物的原位聚合反应, 在0132 mm内径的弹性石英毛细管内制备了3 mm长的柱上筛板,该筛板可以耐受至少40MPa的压力。将5μm C18填料填充到带有筛板的毛细管内, 制备了毛细管液相色谱柱, 色谱分离结果令人满意。用该筛板制备的色谱柱结构最大程度地避免了柱后死体积的产生。关键词: 毛细管液相色谱柱 柱上筛板 整体柱 原位热聚合

因为不同的药物对映体经常表现出明显不同的生物活性，因此对映体分离是药物分析中的一个重要目标。目前用于外消旋混合物手性分离的方法主要基于手性固定相（CSPs）。现在有几种CSPs可直接用于分离和测定药物对映体和外消旋体。特别是β -环糊精（β -CD）及其衍生物，因其具有特殊的分子结构，可增加额外的识别位点，最常用于不同色谱模式的对映体分离。β -CD作为手性固定相，已成功用于毛细管电色谱中对映体的分离检测。β -CD分离对映体主要有三种模式：开管柱毛细管电色谱、填充柱毛细管电色谱和整体柱毛细管电色谱。但是，到目前为止，尽管β -CD在反相和正相高效液相色谱系统下，已成功地引入手性分离领域，但其作为手性固定相用于高效微流电动液相色谱系统的研究却未见报道。因此，研究这种手性固定相的高效微流电动液相色谱技术是值得的。

加压毛细管电色谱（pCEC）是综合了高效液相色谱（HPLC）与毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的一种高效微型分离技术，在继承了液相色谱的高选择性以及毛细管电泳的高效率特性的基础上，克服了毛细管电泳难以分离中性物质的缺陷，同时解决了微小颗粒固定相由于输液泵的耐压能力在常规HPLC中的应用限制。 本文是利用加压毛细管电色谱技术进行手性分离的应用文章。

加压毛细管电色谱（pCEC）是综合了高效液相色谱（HPLC）与毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的一种高效微型分离技术，在继承了液相色谱的高选择性以及毛细管电泳的高效率特性的基础上，克服了毛细管电泳难以分离中性物质的缺陷，同时解决了微小颗粒固定相由于输液泵的耐压能力在常规HPLC中的应用限制。 本文是加压毛细管电色谱－质谱联用技术在多肽和蛋白质领域的应用技术文章。

毛细管电色谱（CEC）结合了毛细管电泳（CE）和高效液相色谱（HPLC）的最佳特点：CE的分离效率高，高效液相色谱的多选择性和大样本容量。近年来，对映体的分离受到了广泛关注，许多HPLC中常见的手性固定相被用在CEC中，例如环糊精、纤维素、大环内酯类抗生素、阴离子交换型固定相和分子印迹聚合物等。然而，当在没有压力的情况下使用CEC时，特别是对于填充柱，仍然存在与气泡形成和柱干涸相关的问题和困难，在开管和整体柱中不会出现这个问题。熔融玻璃管壁似乎是形成气泡的重要因素。对于填充柱中出现的气泡和柱干涸的问题，可以通过高效微流电动液相色谱（eHPLC）系统解决，其流动相由压力流和电渗流（EOF）共同驱动。在eHPLC系统中，可以在毛细管色谱柱的出口端和进口端施加一个大于1000 psi的压力，这样就可以避免在使用CEC模式时出现气泡和柱干涸等问题。同时，eHPLC系统中样品可通过旋转式注射器实现定量引入。另外，EOF可以与整个流动相的方向相同或相反，因此可以影响样品洗脱顺序。更重要的是EOF适用于梯度洗脱模式。因此，通过eHPLC系统，CEC的优势可以充分的实现。我们选取一种大环内酯类抗生素-万古霉素作为手性固定相，建立了eHPLC系统分离检测手性药物的方法。

采用Agilent ZORBAX 超高压快速高分离度（RRHD）HILIC Plus，2.1 × 50 mm，1.8 μm 色谱柱对吗啡及其三种代谢物（去甲吗啡、吗啡-3-b-D-葡萄糖苷酸 [M3G]、吗啡-6-b-D-葡萄糖苷酸[M6G]）进行LC/MS/MS 分析。M3G 和M6G 是同分异构体，流出时间非常接近。将它们分别用配有0.12 mm 内径标准毛细管的Agilent 1290 Infinity液相色谱常规系统，以及配有0.075 mm 内径毛细管的1290 Infinity 液相色谱优化系统进行分析，后者采用的是超低扩散管线工具包中的毛细管，可以使其柱外死体积最小（与常规配置相比，柱外死体积减少了60% 以上）。两种配置均与Agilent 6410A 三重四极杆LC/MS 系统联用。同分异构体M3G 和M6G 的基线色谱分离切实得到了改善，也提高了LC/MS/MS 的检测灵敏度，更易于获得重现性更好的定量结果。

一种加压、梯度毛细管电色谱(pCEC)仪已经设计生产出来。这种多用仪器能够使用三种分离模式，加压梯度毛细管电色谱(pCEC)、微径高效液相色谱(μHPLC)和毛细管电泳(CE)。在pCEC模式中结合了电动力和压力推动样品经过毛细管填充柱，不需要改变流动相的组成就能进行好的选择性调节。这项技术也易于进行梯度洗脱，更利于对复杂的混合物进行分离。这项研究通过对一有机酸和中性哒嗪酮衍生物混合物的分离同μHPLC相比较及评估。实验用的pCEC使用一根熔融石英毛细管柱并填充3μm粒径的十八烷基键合相硅胶(ODS)。在适宜的条件下十种哒嗪酮衍生物都实现了基线分离。比较用μHPLC方法的分离结果，pCEC对于分离所有的中性物质和带电物质比μHPLC的分离更强。对于压力、泵的流速以及电压对分离的影响也做了研究。

爆炸物及其降解产物的鉴定在法医及环境上的应用很重要。用反相液相色谱完全分离这些结构相近的化合物一直是个挑战。现在我们用毛细管电色谱分析14种一系列的硝化及三硝基苯的化合物。在7分钟里我们就实现了所有化合物的基线分离，达到的柱效超过500000理论塔板数/米。 进一步改进条件, 我们在2分钟里就实现了14种化合物的分离。

液相色谱 (LC) 微型化通常是为了提高灵敏度，这是蛋白质组学检测低丰度肽和蛋白质的必然要求。微型化的其他优点还包括提高与质谱连接的效率并降低溶剂的消耗。如今，微型化液相色谱更容易使用，它的仪器操作和连接方式均与常规液相色谱系统一样。这为微型化液相色谱特别是毛细管和微流液相色谱应用于新的工作流程和应用领域提供了更多机会。

毛细管电泳法用于茶叶和茶叶制品、咖啡和咖啡制品、可可和可可制品和膳食补充剂中咖啡因和可可碱的质量分数的测定。毛细管电泳法可以在波长254 nm下直接通过紫外检测来鉴定和定量测定咖啡因和可可碱的含量。样品中防腐剂（山梨酸和苯甲酸）、甜味剂（安赛蜜、糖精钠、甜蜜素）、谷氨酸钠、合成染料、维生素B、维生素C、香兰素等对样品中咖啡因和可可碱的测定不产生影响。与HPLC法测定咖啡因和可可碱的含量相比，毛细管电泳法具有以下优点：1.比高效液相色谱分离效率高；2.快速分析；3.低分析成本；4.不需要昂贵的色谱柱。

在当前全球倡导的低碳经济中，有关毛细管离子色谱的研究在离子色谱领域得到了高度的重视。目前，美国戴安公司最新出品的ICS-5000使用了毛细管技术，耗材的使用量减少为常规离子色谱的1%，大大节省了流动相的消耗，使用毛细管技术，毛细柱更短、更细，因而耗费昂贵的填料减少，同时耗费样品也很少（有时样品非常珍贵）。ICS-5000除了涵盖之前的免化学试剂技术、离子色谱电解样品前处理技术等应用技术外，该离子色谱加入了毛细管离子色谱的概念，可以检测低至纳克/升的离子含量。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

测定啤酒中的有机酸，对于啤酒生产的各阶段是十分重要的。特别是在控制发酵过程和成品味道的离子浓度。传统上，水溶液中有机离子的检测是采用离子色谱和高效液相色谱。毛细管电泳法在啤酒酿造过程代表着新的、快速和可靠的同时分析有机酸的方法。毛细管电泳法检测有机离子浓度是基于这些离子在电场中因电泳强度的不同而产生的有差别迁移和分离。定性和定量检测离子是间接测量紫外吸收。毛细管间接检测的分析有机酸离子有：酒石酸、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、乳酸和其他酸。浓度范围通常是 0.1-300 mg/L。

腐胺、尸胺、组胺、亚精胺和精胺是最常见的五种生物胺，具有一定的生理活性，但摄入过量将促使肾上腺素和去甲肾上腺素的释放加剧，诱发恶心、心悸、呼吸紊乱等强烈过敏反应，甚至危害生命安全。动植物尸体在微生物作用下，体内的氨基酸等含氮化合物可转变产生大量生物胺，我国水产品卫生标准GB2733-2005[1]就曾明确限定了市售、非活水产品中组胺的含量。地质灾害以及某些特定事故常致使大量动物体尸体不能被及时有效地处理，尸体腐败变质后释放出的大量生物胺将浸入地下水系统，引发水体污染，如浸入供水系统，将严重危害公共饮用水安全。因此，必须建立一种快速响应的生物胺分析测定方法，以保障在特定事件发生后迅捷地完成地下水中生物胺含量的实时监测，保障周边居民饮用水安全。目前，生物胺的准确定量测定方法主要有气质联用、液相色谱法[2]和离子色谱法[3]等。其中仅离子色谱法无需将生物胺经过繁琐的柱前衍生或预衍生处理，以离子交换分离为基础，简单而迅捷地实现了腐胺、尸胺等五种生物胺的分离测定。毛细管离子色谱的诞生，是离子色谱发展的重要里程碑，标志着离子色谱进入了低消耗、低成本、高效率时代。其微升级的流量，极大地降低了淋洗液的消耗，配合淋洗液自动发生装置使用，可实现长达18个月的连续开机运转，有效地保证了各种突发事件发生时，离子色谱总能在第一时间内完成对应的应急样品测定。本文以毛细管离子色谱为依托，选用高效阳离子交换分离柱IonPac CS19，以甲基磺酸淋洗液发生器在线产生甲基磺酸溶液，梯度淋洗，完成了地表水、自来水样品中痕量腐胺、尸胺等五种常见生物胺的分离分析。方法重复性较好，准确性较高。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

2020年版药典二部和四部进一步扩大了现代分析技术的应用，丰富了色谱检测器的类型，加强了没有紫外吸收品种液相色谱检测器的应用指导，如采用毛细管电泳法检查佐米曲普坦分散片中的光学异构体等。毛细管电泳法在药典中的使用日益增多，药典通则0542中提到以（1）毛细管区带电泳（CZE）和胶束电动毛细管色谱（MEKC）使用较多，常用来解决异构体拆分，也可用于无机离子检测等，LUMEX公司的Capel 系列 CE可以进行多种方式的分离检测，提供可靠的分析方法。本实验采用依据2020版《中华人民共和国药典》使用LUMEX毛细管电泳仪Capel 205建立手性分离方法并检查佐米曲普坦光学纯度，通过手性拆分剂种类及浓度、缓冲液pH及浓度、温度及电压的优化，选择较佳的手性分离条件，基线分离了佐米曲普坦及其对映体。实验结果表明通过Capel205建立的毛细管电泳法可用于佐米曲普坦的手性分离，分离良好，为产品的质量控制提供了可靠准确的分析方法。

离子色谱分离脉冲安培检测器测定糖分离度好灵敏度高，在糖类物质的研究中应用非常广泛。毛细管离子色谱常用色谱柱直径为0.4mm，流速为10 μ L/min，其进样体积通常为0.4 μ L，与常规分析型离子色谱相比，其灵敏度是常规离子色谱的近百倍，且。毛细管离子色谱的流速是10 μ L/min，符合质谱对低流速的需求；且经过抑制器后，淋洗液中的钾离子被交换到废液中，进入质谱的流动相基本为水，与质谱具有很好的兼容性，在需要进行定性研究时可连接质谱。并且在进入质谱前，可以通过一个三通引入部分乙腈以增加质谱的雾化效率，增加仪器的稳定性。本方法在柱后乙腈溶液中添加了少量乙酸钠，以提高糖在质谱中的重现性。毛细管离子色谱质谱联用测定糖方法操作简便，重复性好，线性范围内相关性好，准确度高，进一步拓展了毛细管离子色谱的应用范围，具有较高的实用价值。

离子色谱分离脉冲安培检测器测定糖分离度好灵敏度高，在糖类物质的研究中应用非常广泛。毛细管离子色谱常用色谱柱直径为0.4mm，流速为10 μ L/min，其进样体积通常为0.4 μ L，与常规分析型离子色谱相比，其灵敏度是常规离子色谱的近百倍，且。毛细管离子色谱的流速是10 μ L/min，符合质谱对低流速的需求；且经过抑制器后，淋洗液中的钾离子被交换到废液中，进入质谱的流动相基本为水，与质谱具有很好的兼容性，在需要进行定性研究时可连接质谱。并且在进入质谱前，可以通过一个三通引入部分乙腈以增加质谱的雾化效率，增加仪器的稳定性。本方法在柱后乙腈溶液中添加了少量乙酸钠，以提高糖在质谱中的重现性。毛细管离子色谱质谱联用测定糖方法操作简便，重复性好，线性范围内相关性好，准确度高，进一步拓展了毛细管离子色谱的应用范围，具有较高的实用价值。

离子色谱分离脉冲安培检测器测定糖分离度好灵敏度高，在糖类物质的研究中应用非常广泛。毛细管离子色谱常用色谱柱直径为0.4mm，流速为10 μ L/min，其进样体积通常为0.4 μ L，与常规分析型离子色谱相比，其灵敏度是常规离子色谱的近百倍，且。毛细管离子色谱的流速是10 μ L/min，符合质谱对低流速的需求；且经过抑制器后，淋洗液中的钾离子被交换到废液中，进入质谱的流动相基本为水，与质谱具有很好的兼容性，在需要进行定性研究时可连接质谱。并且在进入质谱前，可以通过一个三通引入部分乙腈以增加质谱的雾化效率，增加仪器的稳定性。本方法在柱后乙腈溶液中添加了少量乙酸钠，以提高糖在质谱中的重现性。毛细管离子色谱质谱联用测定糖方法操作简便，重复性好，线性范围内相关性好，准确度高，进一步拓展了毛细管离子色谱的应用范围，具有较高的实用价值。

离子色谱分离脉冲安培检测器测定糖分离度好灵敏度高，在糖类物质的研究中应用非常广泛。毛细管离子色谱常用色谱柱直径为0.4mm，流速为10 μ L/min，其进样体积通常为0.4 μ L，与常规分析型离子色谱相比，其灵敏度是常规离子色谱的近百倍，且。毛细管离子色谱的流速是10 μ L/min，符合质谱对低流速的需求；且经过抑制器后，淋洗液中的钾离子被交换到废液中，进入质谱的流动相基本为水，与质谱具有很好的兼容性，在需要进行定性研究时可连接质谱。并且在进入质谱前，可以通过一个三通引入部分乙腈以增加质谱的雾化效率，增加仪器的稳定性。本方法在柱后乙腈溶液中添加了少量乙酸钠，以提高糖在质谱中的重现性。毛细管离子色谱质谱联用测定糖方法操作简便，重复性好，线性范围内相关性好，准确度高，进一步拓展了毛细管离子色谱的应用范围，具有较高的实用价值。

我国2002年发布的第235号文件规定食物中磺胺类药物残留量不得超过100 μ g/L。磺胺类药物残留检测常用方法有液相色谱-串联质谱检测法( LC-MS )。液相色谱-荧光检测法( LC-FLD)和液相色谱-紫外检测法( LC-UV)。LC-MS 灵敏度高，但设备昂贵，成本较高 LC-FLD 需要对样品进行衍生化，前处理过程复杂繁琐 LC-UV 应用最广泛，但也存在梯度洗脱检测时间较长等问题。本公司以高效微流电动液相色谱系统（eHPLC），结合毛细管色谱柱，充分体现eHPLC 模式下亚微米色谱介质的优势和特点，可快速检测磺胺类药物残留。

测定啤酒中的有机酸，对于啤酒生产的各阶段是十分重要的。特别是在控制发酵过程和成品味道的离子浓度。传统上，水溶液中有机离子的检测是采用离子色谱和高效液相色谱。毛细管电泳法在啤酒酿造过程代表着新的、快速和可靠的同时分析有机酸的方法。毛细管电泳法检测有机离子浓度是基于这些离子在电场中因电泳强度的不同而产生的有差别迁移和分离。定性和定量检测离子是间接测量紫外吸收。毛细管间接检测的分析有机酸离子有：酒石酸、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、乳酸和其他酸。浓度范围通常是 0.1-300 mg/L。

测定啤酒中的有机酸，对于啤酒生产的各阶段是十分重要的。特别是在控制发酵过程和成品味道的离子浓度。传统上，水溶液中有机离子的检测是采用离子色谱和高效液相色谱。毛细管电泳法在啤酒酿造过程代表着新的、快速和可靠的同时分析有机酸的方法。毛细管电泳法检测有机离子浓度是基于这些离子在电场中因电泳强度的不同而产生的有差别迁移和分离。定性和定量检测离子是间接测量紫外吸收。毛细管间接检测的分析有机酸离子有：酒石酸、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、乳酸和其他酸。浓度范围通常是 0.1-300 mg/L。

测定啤酒中的有机酸，对于啤酒生产的各阶段是十分重要的。特别是在控制发酵过程和成品味道的离子浓度。传统上，水溶液中有机离子的检测是采用离子色谱和高效液相色谱。LUMEX公司Capel系列毛细管电泳法在啤酒酿造过程代表着新的、快速和可靠的同时分析有机酸的方法。毛细管电泳法检测有机离子浓度是基于这些离子在电场中因电泳强度的不同而产生的有差别迁移和分离。定性和定量检测离子是间接测量紫外吸收。毛细管间接检测的分析有机酸离子有：酒石酸、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、乳酸和其他酸。浓度范围通常是 0.1-300 mg/L。

测定啤酒中的有机酸，对于啤酒生产的各阶段是十分重要的。特别是在控制发酵过程和成品味道的离子浓度。传统上，水溶液中有机离子的检测是采用离子色谱和高效液相色谱。毛细管电泳法在啤酒酿造过程代表着新的、快速和可靠的同时分析有机酸的方法。毛细管电泳法检测有机离子浓度是基于这些离子在电场中因电泳强度的不同而产生的有差别迁移和分离。定性和定量检测离子是间接测量紫外吸收。毛细管间接检测的分析有机酸离子有：酒石酸、苹果酸、琥珀酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、乳酸和其他酸。浓度范围通常是 0.1-300 mg/L。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

高效微流电动液相色谱（eHPLC）是综合了毛细管高效液相色谱（cHPLC）和毛细管电泳（CE）的优势而发展起来的高效电动微分离色谱技术。eHPLC 技术在药物分析、手性拆分和生物样品分析等生命科学领域中具有巨大的应用前景。核壳填料因其柱效高、分离快、载样量大、反压低、耐用性好等优点，受到色谱研究者的广泛关注。但核壳型色谱填料在电色谱中的应用目前仍很少。Fanali 等预测核壳材料在eHPLC 分离模式中会有很好的表现。根据二氧化硅纳米球（KCC-1）的结构特点，再结合核壳结构本身反压和传质阻力小等优点，推测这种新型的核壳色谱填料在毛细管电色谱填充柱的应用中将具有良好的发展前景。

离子色谱分离脉冲安培检测器测定糖分离度好灵敏度高，在糖类物质的研究中应用非常广泛。毛细管离子色谱常用色谱柱直径为0.4mm，流速为10 μ L/min，其进样体积通常为0.4 μ L，与常规分析型离子色谱相比，其灵敏度是常规离子色谱的近百倍，且。毛细管离子色谱的流速是10 μ L/min，符合质谱对低流速的需求；且经过抑制器后，淋洗液中的钾离子被交换到废液中，进入质谱的流动相基本为水，与质谱具有很好的兼容性，在需要进行定性研究时可连接质谱。并且在进入质谱前，可以通过一个三通引入部分乙腈以增加质谱的雾化效率，增加仪器的稳定性。本方法在柱后乙腈溶液中添加了少量乙酸钠，以提高糖在质谱中的重现性。毛细管离子色谱质谱联用测定糖方法操作简便，重复性好，线性范围内相关性好，准确度高，进一步拓展了毛细管离子色谱的应用范围，具有较高的实用价值。