毛细管流动滤膜孔径分析仪

[b]毛细管流动孔径分析仪[/b] Capillary Flow Porometer用于测定材料孔径大小测定，原理为有小孔的材料被润湿液体完全润湿后，液体受到表面张力的作用而保留于材料内部，如果要想将液体挤出材料就需要外加一个气体压力。能够克服表面张力将材料孔内的液体完全挤出时所需要的最小压力，就是该材料的泡点值压力，也就是我们常说的起泡点，基于这种原理的测试方法，就是起泡点测试法。这也是应用最为广泛的一种非破坏性完整性测试方法。以下为泡点值计算公式：d=K*C*t/PP = 泡点压力d = 最大孔径k = 形状矫正因子C = 液固接触角t =表面张力泡点值直接与过滤器孔径相关联。不同孔径大小的泡点不同，开孔压力也不同，随着压力的增加，大孔，小孔都打开，直到足够压力，所有孔都打开后，气体从孔洞出来， 气体流量随气体压力增加而增加，最后成线形关系。这样的一条气体流量和压力的一条线，我们称为湿线，刚出来流量时的压力为泡点压力，根据上述公式计算出最大孔径。如果材料没浸润液体，一直处于开孔状态，气体流量会随着压力的增加而增加，是个线形关系。我们再根据一个干线和湿线拟合一条半干线，模拟计算出孔径的分布图。但是有些材料在随着压力增大时，有可能被压扁，变形，特别是一些高分子材料，柔性材料，这时候在压力变大到一定时，气流量和气压力就不是一条很好的线形曲线了，在拟合曲线时就不是很好看，但是我们可以找个气通量曲线和目标材料差不多的样品，做一条干线，然后保存，再数据处理下（data editor），就会做得很漂亮。具体看视频。

请问石墨垫孔径的大小和毛细管柱的内径等有什么关系

[目的] 简便现场采样设备、提高分析速度、延长色谱柱使用寿命，为硅胶管采集样品、大孔径毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法测定车间空气中丙烯酰胺含量的可行性提供依据。[方法]2005年3月至2005年8月，在某丙烯酰胺生产场所布设4个采样点，采用硅胶管采集样品20份，用大孔径毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法测定车间空气中丙烯酰胺含量，同时用GBZ/T160.62法采样检测多组平行样作对比。[结果] 测定结果经过检验，表明两种方法无明显差异（配对t检验。t=0.61，p0.05）。[结论] 硅胶管采样、大孔径毛细管柱[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法检测丙烯酰胺，不仅可达到国标法的同样效果，而且具有采样简便，分析速度快，简化操作的优点。

气相色谱柱膜厚是不是就代表毛细管内径？我测的分子量比较大，孔径小的容易堵，想找个孔径大的，是不是就找个膜厚的？还是有专门的孔径大的毛细管柱？

做液相时，流动相要用微孔滤膜过滤；供试液要用针头滤膜过滤。不知道注意过没有，你们的微孔滤膜和针头滤膜的孔径是一致的吗？

整体柱在毛细管电色谱中的应用 毛细管电色谱（CEC）是近年来建立在电泳技术不断发展和液相色谱理论日趋完善的基础上，利用电渗流或电渗流结合压力来推动流动相移动的微分离法。由于它结合了毛细管电泳及高效液相两种分离机制，因而具有快速，高效，使用范围广等特点，不管是中性物质还是带电物质都可以达到理想的分离效果。 CEC的毛细管柱主要有3种类型：填充柱、开管柱和整体柱。填充柱是发展最快使用最多的一类，95％的据报道都是使用填充柱进行分析，灵敏度高，重现性好。但填充柱需要在柱尾制作塞子，由此带来柱塞效应，引入了非均匀性因子引起气泡的产生，进而使谱带展宽。同时，塞子的制备具有一定的难度，条件控制不好将影响填充的均匀性，孔隙若太大流动相渗出，太小则易被污染甚至被样品中的“脏物”阻塞。开管柱虽没有塞子问题，固定相均匀，可使用较高的电压，但相比小，柱容量低，检测困难。整体柱不需要封口，避免了塞子制作的困难以及产生的气泡问题，且具有更好的多孔性和渗透性，即具有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔，利于实现生物大分子的快速分离。 溶胶-凝胶技术是指溶胶的凝胶化过程，光聚合法制备溶胶凝胶整体柱有许多优点，如可控制孔径，柱渗透性好，低温制备避免柱体变形，柱效高等。光聚合整体柱的进一步修饰，对于生物大分子而言具有更强的分析能力。Kato等采用两种方法修饰光聚合溶胶-凝胶整体柱，分离氨基酸混合物。一是与二甲基十八烷基氯硅烷反应，二是与二甲基十八烷基氯硅烷反应后，用氯三甲基硅烷进行封端反应。为提高检测灵敏度，将氨基酸衍生化，4-氟-7-硝基-2，1，3苯并二唑为荧光试剂。用第二种方法修饰的封端整体柱在流动相为 50 mmol·L-1醋酸铵（pH2.5）-水-乙腈（1:1:8）条件下，天冬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸在7 min内得到了很好的分离，柱效在每米58000～105000，亮氨酸与异亮氨酸具有相同的相对分子质量，在此条件下也得到了很好的分离。而使用未封端的整体柱由于吸附氨基酸，柱效比封端柱低 50％～67％。 微型化是未来分析仪器的发展方向，由于微芯片具有分析速度快，携带方便等优点越来越受到人们的关注，学者们已开始将整体柱制备技术应用于微芯片中。Daniel等将丙烯酸酯有机整体柱通过光聚合作用蚀刻到微芯片通道中作为固定相分离肽和氨基酸。整体柱技术与微芯片技术的结合将为生物大分子的分离分析带来极大的便利。

整体柱在毛细管电色谱中的应用 毛细管电色谱（CEC）是近年来建立在电泳技术不断发展和液相色谱理论日趋完善的基础上，利用电渗流或电渗流结合压力来推动流动相移动的微分离法。由于它结合了毛细管电泳及高效液相两种分离机制，因而具有快速，高效，使用范围广等特点，不管是中性物质还是带电物质都可以达到理想的分离效果。 CEC的毛细管柱主要有3种类型：填充柱、开管柱和整体柱。填充柱是发展最快使用最多的一类，95％的据报道都是使用填充柱进行分析，灵敏度高，重现性好。但填充柱需要在柱尾制作塞子，由此带来柱塞效应，引入了非均匀性因子引起气泡的产生，进而使谱带展宽。同时，塞子的制备具有一定的难度，条件控制不好将影响填充的均匀性，孔隙若太大流动相渗出，太小则易被污染甚至被样品中的“脏物”阻塞。开管柱虽没有塞子问题，固定相均匀，可使用较高的电压，但相比小，柱容量低，检测困难。整体柱不需要封口，避免了塞子制作的困难以及产生的气泡问题，且具有更好的多孔性和渗透性，即具有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔，利于实现生物大分子的快速分离。 溶胶-凝胶技术是指溶胶的凝胶化过程，光聚合法制备溶胶凝胶整体柱有许多优点，如可控制孔径，柱渗透性好，低温制备避免柱体变形，柱效高等。光聚合整体柱的进一步修饰，对于生物大分子而言具有更强的分析能力。Kato等采用两种方法修饰光聚合溶胶-凝胶整体柱，分离氨基酸混合物。一是与二甲基十八烷基氯硅烷反应，二是与二甲基十八烷基氯硅烷反应后，用氯三甲基硅烷进行封端反应。为提高检测灵敏度，将氨基酸衍生化，4-氟-7-硝基-2，1，3苯并二唑为荧光试剂。用第二种方法修饰的封端整体柱在流动相为 50 mmol·L-1醋酸铵（pH2.5）-水-乙腈（1:1:8）条件下，天冬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸在7 min内得到了很好的分离，柱效在每米58000～105000，亮氨酸与异亮氨酸具有相同的相对分子质量，在此条件下也得到了很好的分离。而使用未封端的整体柱由于吸附氨基酸，柱效比封端柱低 50％～67％。 微型化是未来分析仪器的发展方向，由于微芯片具有分析速度快，携带方便等优点越来越受到人们的关注，学者们已开始将整体柱制备技术应用于微芯片中。Daniel等将丙烯酸酯有机整体柱通过光聚合作用蚀刻到微芯片通道中作为固定相分离肽和氨基酸。整体柱技术与微芯片技术的结合将为生物大分子的分离分析带来极大的便利。

这是我多多师父发起的一个5月份的活动，说过要支持的，要说到做到。月末了，今天搜肠刮肚，把几年来做CE的经验跟大家分享一下，不多，但希望对大家有用。1 断流的可能原因 a、有气泡。解决办法：所有进入毛细管的液体都要超声排气，特别是容易起气泡的溶液，如SDS。 b、有沉淀物。解决办法：所有进入毛细管的液体都要过滤，滤膜孔径要比毛细管内径小。 c、毛细管有裂口，最容易裂的地方是窗口处和毛细管出口端，有时候看不出来，因为加压注水的时候仍能看到液滴出来，需要用手碰一碰才能发现。2 基线漂移 a、毛细管没活化好：需要用0.1 M氢氧化钠多冲一冲 b、毛细管没平衡好：冲完氢氧化钠和水后需要用buffer再冲一段时间，这个时间得根据buffer的组成而定。必要时候需要跑空白一段时间。 c、灯接近寿命：查看灯的使用时间，如果已经两千多个小时接近三千小时的话，可以考虑换灯了。 d、毛细管寿命已到。毛细管是有使用寿命的，这个寿命长短说不好，得看你怎么保养，当然，还跟使用的buffer有关。有些buffer特别伤管子的。3 常见缓冲溶液的使用 缓冲溶液一般是先配好stock solution，使用的时候再进行稀释。但是stock solution也不能长时间存放，0.1 M 的磷酸、硼砂等溶液常温下一个星期就会有变化，再长时间可以看到有沉淀析出。但是也不能因此放到冰箱去，因为放到冰箱也会有沉淀析出，最好常温存放，然后每星期重配一次。另外，配置硼砂的时候要稍微加热帮助溶解，不然溶解不了。但加热也不要太猛烈，不然溶解效果也是不好。4 sds使用注意事项sds在配置过程中容易产生气泡，所以如果用容量瓶来配置是不实际的。这时候就不能对sds的浓度做精确要求。所以，一般用量筒或者离心管配置就好了，加水的时候用玻棒引流，小心的搅拌，边配置边超声促进溶解。5 毛细管的使用和维护避免用强碱溶液长时间冲洗，比如1 M氢氧化钠，内壁会被腐蚀的。长时间不用的时候应该吹干，两端密封保存。也有人建议用水封存。6 UV灯的使用注意事项不要暴力关电，要在操作界面按关灯键。一般不超过两小时暂停检测不需要关灯，因为开关灯都是会对灯造成损害的。

我们现在使用的特氟隆膜是2um孔径，但一般文献中的是0.2um或0.25um孔径的，请问孔径不同的滤膜之间有什么不同？

伴随着分析试样的多样化、分析项目以及分析试样数量的增加，人们对提高分析效率的关心也随之增高。为提高[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的分析效率，缩短分析时间是最简便的解决措施。为此，考虑到缩短色谱柱，增加流量，提高柱温等若干方法。本应用文集介绍利用内径0.22mm×长8m以下的短毛细管柱缩短有机氯类和有机磷类的分析时间的实例。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=165829]缩短毛细管GC的分析时间—使用短毛细管柱的农药分析[/url]

微孔滤膜孔径0.22和0.45微米分别能过滤什么？主要的微孔滤膜孔径就这两种吗？

滤膜孔径不同，像有0.45UM,有的是0.22UM 一般都是如何要求的？

请教各位大侠一根中性柱毛细管柱的膜厚多分析同一样品有什么影响，膜厚和柱效有哪些关系。

毛细管电泳中的毛刺峰我在做一肝素钠样品时，样品和空白（milli-Q)水都用0.22um的微孔滤膜过滤了，但在样品出峰前位置，在空白和样品中均出现同一毛刺峰，峰宽只有0.01，峰面积2.4；大家觉得这是一杂质峰吗？我认为不是，但它很尖对称性好，导师顺口说是，毛细管电泳中也会出系统峰吗？而且，每次的峰高，响应都有些许的不同。

毛细管柱的膜厚对分析样品有什么影响？谢谢！[em01]

毛细管电泳模式分类毛细管区带电泳 (capillary zone electrophoresis，CZE)毛细管凝胶电泳 (capillary gel electrophoresis，CGD)、胶束电动毛细管色谱 (micellar electrokinetic capillary chromatography，MECC)、毛细管等电聚焦 (capillary bodec trie focusing，CIEF)毛细管等速电泳 (capiliary isotador-phoresis，CITP)不同的电泳模式具有不同的分离机制和应用范围一、毛细管区带电泳毛细管区带电泳 (capiliary zone electrophoresis，CZE) 是指溶质在毛细管内的背景电解质溶液中以不同速度迁移而形成一个一个独立的溶质带的电泳模式。突出特点：简单，方法限制：因中性物质的淌度差为零所以不能分离中性物质。CZE 是 CE 中最简单、应用最广泛的一种操作模式，是其他操作模式的基础。定量分析也类似于 HPLC，根据电泳峰的峰面积或峰高进行定量分析。溶质的迁移时间 为： 当 时，理论塔板数 为 (15-26)式中， 为扩散系数。溶质 1 和溶质 2 的分离度 为 (15-27)式中， 和 分别为溶质 1 和溶质 2 的淌度； 为两溶质的平均淌度。溶质的迁移时间 为： 当 时，理论塔板数 为 (15-26)式中， 为扩散系数。溶质 1 和溶质 2 的分离度 为 (15-27)式中， 和 分别为溶质 1 和溶质 2 的淌度； 为两溶质的平均淌度。二、毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳 (capillary gel electrophoresis，CGE) 是在毛细管中装入凝胶作支持物进行的电泳。凝胶物理性质及影响多孔性-起类似分子筛的作用，使溶质按分子大小逐一分离。凝胶的黏度大，可减少溶质的扩散，使被分离组分峰形尖锐，能达到 CE 中最高的柱效。毛细管凝胶柱的制备:常用聚丙烯酰胺在毛细管内交联制成凝胶柱.但制备麻烦，使用寿命短。用途:可分离分析蛋白质和 DNA 的分子量或碱基数用黏度低的线性聚合物，如甲基纤维素代替聚丙烯酰胺，可形成无凝胶但有筛分作用的无胶筛分 (nongel sieving) 介质。比凝胶柱制备简单，寿命长，但分离效能较凝胶柱略差。三、毛细管等电聚焦毛细管等电聚焦 (capillary isoelectric focusing，CIEF)分离的基本原理:基于两性电介质在分离介质中的迁移造成的 pH 梯度，由此可以使物质根据它们不同的等电点达到分离的目的。具有一定等电点的物质顺着这一梯度迁移到相当于其等电点的那个位置，并在此停下，产生非常窄的聚焦带，并使不同等电点的蛋白聚焦在不同位置上，如图 15-10(b) 所示。 CIEF 有极高的分辨率，例如可以分离等电点差异小于 0.01pH 单位的两种蛋白质。为了在毛细管内实现等电聚焦过程，必须减小电渗流，使已聚焦的区带移动，接受检测而又不引起很大的区带展宽。一般认为将亲水聚合物质键合到毛细管管壁表面可减小电渗流，以防吸附及破坏稳定的聚焦区带；通过调节两性电介质溶液可使聚焦区带移动。四、毛细管等速电泳毛细管等速电泳 (capillary isouchor-phoresis，CITP) 先导电介质和尾随电解质选择与分离原理:选用淌度比样品中任何待测组分的淌度都高的电解质作为先导电介质用淌度比样品中任何待测组分的淌度都低的电解质作为尾随电解质夹在前导电解质和尾随电解质之间的样品组分根据各自的有效淌度不同而分离达到平衡时，各组分区带上电场强度的自调节作用使各组分区带具有相同的迁移速率如图 15-10(c) 用途:分离离子型物质。五、胶束电动毛细管色谱胶束电动毛细管色谱 (micellar eiectrokinetic capillary chromatography，MECC 又称电动色谱)原理:采用 CZE 技术并结合色谱原理而形成。它将电化合物或带电分子聚集体溶解于缓冲液以充当载体。溶质在载体 (不固定于柱的准固定相) 与周围介质 (流动相) 之间的分配，同时两相在高压电场中具有不同的迁移，如图 15-11 所示。

微孔滤膜的孔径有好几种，那么一般来说什么样的孔径适合除去什么样的杂质呢？有没有一般的规定？谢谢！

微孔滤膜的孔径有好几种，那么一般来说什么样的孔径适合除去什么样的杂质呢？有没有一般的规定？谢谢！

3的情况下，其内表面带负电，和缓冲液接触时形成双电层，在高压电场的作用下，形成双电层一侧的缓冲液由于带正电荷而向负极方向移动形成电渗流。同时，在缓冲液中，带电粒子在电场的作用下，以不同的速度向其所带电荷极性相反方向移动，形成电泳，电泳流速度即电泳淌度。在高压电场的作用下，根据在缓冲液中各组分之间迁移速度和分配行为上的差异，带正电荷的分子、中性分子和带负电荷的分子依次流出，带电粒子在毛细管缓冲液中的迁移速度等于电泳淌度和电渗流的矢量和，各种粒子由于所带电荷多少、质量、体积以及形状不同等因素引起迁移速度不同而实现分离；在毛细管靠负极的一端开一个视窗，可用各种检测器。目前已有多种灵敏度很高的检测器为毛细管电泳提供质量保证，如紫外检测器（UV）、激光诱导荧光检测器（LIF）、能提供三维图谱的二极管阵列检测器（DAD）以及电化学检测器（ECD）。由于毛细管的管径细小、散热快，即使是高的电场和温度，都不会向常规凝胶电泳那样使胶变性，影响分辨率。 毛细管电泳技术的分离模式和检测模式的发展同样也是多方面的，经典的分离模式有毛细管区带电泳、毛细管胶束电动色谱、毛细管凝胶电泳等；新方法的发展研究难度大，但近年来却有不小的进展，其中建立新的分离模式和联用技术最为突出。比如建立了阵列毛细管电泳（CAE），亲和毛细管电泳技术（ACE），芯片毛细管电泳（CCE），非水毛细管电泳技术（NACE）。毛细管电泳技术发展迅速，是色谱最活跃的领域之一。一般地说, 这种发展主要涉及毛细管电泳的分离模式、进样技术和检测器。一、毛细管电泳技术分离模式：1、毛细管区带电泳（Capillary Zone Electrophoresis, CZE）毛细管区带电泳是以具有pH缓冲能力的电解质溶液为载体，以毛细管为分离室的一种高压区带电泳，是应用最早也最为广泛的一种分离模式。其分离原理是根据被分析物的电泳淌度不同实现分离。在外加电场作用下，具有不同电泳淌度的分离对象将在彼此分开的区带中迁移，而具有相同电泳淌度分离对象将在同一个区带中共迁移。毛细管区带电泳除具有一般的电泳迁移外，还受到电渗的影响。电渗流指的是溶液在外加电场作用下整体向一个方向运动的现象， 它是伴随着电泳而产生的一种电动现象。在毛细管电泳分离中起着重要作用。在毛细管区带电泳中，毛细管内壁如果没有进行修饰，正离子迁移的方向与电渗方向一致，负离子迁移的方向与电渗方向相反。因此，正离子在毛细管的迁移速度加快， 负离子在毛细管的迁移速度减慢。多数情况下，电渗的速度比电泳速度快5－7倍，故在毛细管中负离子也总是向负极移动。所以在毛细管区带电泳中利用电渗流可将正/负离子和中性分子一起朝一个方向。如阴极方向产生差速迁移。在一次毛细管区带电泳操作中同时完成正/负离子的分离分析。 需要说明的是，分析阳离子时，由于电渗流方向与离子移动的方向一致，不必处理毛细管内壁；但分析阴离子时，电渗流方向通常与离子移动的方向相反。故必须用烷基铵盐，如十二烷基三甲基溴化铵类物质处理毛细管内壁，以使电渗流反向。2、胶束电动毛细管色谱（Micellar Electrokinetic Capillary Chromatography, MECC）1984 年Terabe 等首次提出MECC 模式, 采用十二烷基硫酸钠(SDS) 作为表面活性剂形成准固定相, 并加入电中性的环糊精, 分离强疏水性的多环芳烃。MECC 模式是基于CZE, 在运行缓冲液中加入相当浓度的表面活性剂, 当表面活性剂的浓度高于胶束临界浓度时, 表面活性剂的单体就聚集形成球形胶束而起准固定相的作用。常用的表面活性剂有阳离子表面活性剂如溴化十六烷基三甲基铵(CTAB )、阴离子表面活性剂如十二烷基硫酸钠(SDS)、胆汁酸盐(SC) 或去氧胆酸盐(SDC) , 在近期报道中也有用混合胶束作为准固定相。实际操作中,应根据所分离成分的性质选择不同的表面活性剂。在CZE 中无法分离的中性粒子可按自身疏水性的不同在M ECC 中得以分离, 扩展了毛细管电泳的应用范围，尤其在应用于天然药物及其制剂中有效成分——生物碱、黄酮类化合物、蒽醌类化合物等分析上有突出表现。3、毛细管凝胶电泳（Capillary Gel Electrophoresis, CGE）凝胶电泳在传统电泳中的应用最广泛。凝胶是一种抗对流介质，并具有分子筛作用，常用的凝胶有聚丙烯酞胺(polyacrylamide)和琼脂糖(agarose)，应用最多的是前者。在毛细管中装入单体，引发聚合形成凝胶。主要用于DNA、RNA片段分离和顺序、PCR产物分析及蛋白质等大分子化合物的检测。4、毛细管电色谱，（Capillary Electrochromatography, CEC）毛细管电色谱法( CEC) 是在毛细管中填充或在毛细管壁涂布、键合色谱固定相, 用电渗流或电渗流结合压力流来推动流动相的一种液相色谱法, 是高效液相色谱法和高效毛细管电泳的有机结合。它不仅克服了液相色谱中压力流本身流速不均匀引起的峰扩展的问题,而且峰扩展只与溶质扩散系数有关, 从而获得了接近于毛细管电泳水平的高柱效, 同时还具备了液相色谱的选择性。在CEC 中, 按照固定相的装填方式不同可以分为: 填充毛细管电色谱( PCCEC) , 开管毛细管电色谱( OTCEC) , 整体式毛细管电色谱( MCEC) 。PCCEC 是将固定相装填在毛细管中, OTCEC 是将固定相涂渍或键合在毛细管内壁上, MCEC 是通过在毛细管内原位聚合或固化的方法, 制成的具有多孔结构的整体式固定相。CEC还具有其自身的特点，其采用高压直流电源代替高压泵, 用电渗流来驱动流动相, 流速在管中不是呈抛物线轮廓, 而是呈扁平的塞子流型, 因而在毛细管中没有流速梯度, 谱带展宽效应十分小, 这是CEC 比HPLC 柱效高的根本原因。CEC 没有背压问题, 可以使用粒度更小的填料与更长的毛细管柱, 具有更高的分辨率。在高pH 值下, 毛细管内壁硅醇基的电离度大, 电渗流也大, 可以解决中性化合物的分离问题, 有利于与质谱仪联用; 在低pH 值条件下, 如果选择合适的填料还可以将带电组分很好地分离。此外, 在加电压的同时, 又可附加一定的压力驱动流动相, 这样既可避免分离过程中气泡的产生, 提高稳定性, 又可用压力来控制流速, 缩短分析时间, 实现梯度洗脱。因此，CEC在生物医药与环境分析等领域具有广泛的应用前景。5、毛细管等电聚焦电泳（Capillary Isoelectric Focusing, CIEF）CIEF 最早由Hjertén 等根据平板等电聚焦电泳( IEF) 的原理建立。它是将带有两性基团的样品、载体两性电解质、缓冲剂和辅助添加剂的混合物注入毛细管内,当在毛细管两端加上直流电压时,载体两性电解质可以在管内形成一定范围的pH 梯度,样品组分依据其所带电性向阴极或阳极泳动,柱内pH 值与该组分的等电点(pI) 相同时,溶质分子的净电荷为零,宏观上该组分将聚集在该点不再进一步

[em09]毛细管[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]分析条件的选择 由于毛细管色谱柱柱效很高，对一般的样品备用三种极性的柱子就能解决大部分问题，但对同分异构体要严格选用专用毛细管色谱柱。*色谱柱的选择 按样品极性选择: 弱极性样品，可选OV-1，SE-30，OV-101，SE-52，SE-54。 中极性样品，可选OV-17，OV-1701，XE-60，OV-225，OV-210。 极性样品，可选PEG-20M,FFAP,OV-275,DEGS。 按酸碱性选择: 碱性样品：弱碱性可选OV-1，SE-30等； 强碱性可选碱性PEGB 酸性样品：FFAP 按沸点选择: 高沸点物质可选OV-1，SE-30，SE-54等交联柱，薄液膜*毛细管内径的选择 成品分析：小口径 0.25mm，0.32mm ，薄液膜 痕量组分分析：大口径，厚液膜，0.53mm*汽化温度 比样品沸点高20～30℃*柱温 首选在样品沸点的0.7倍处，再看分离情况调整。*检测温度 》柱温 ；》 120℃（FID）*分流比 小口径》100:1 ；大口径10～50:1或不分流进样（用专用接头）*尾吹：15～30ml/分（满足FID要求）； 隔膜清扫气：1～5ml/分*进样量：0.3～0.5μl* 定性与定量 定性与填充柱色谱一样，或GC/MS 定量 一般用归一法或内标法定量

一、毛细管柱与填充柱的区别与填充柱相比，毛细管柱的特点为：1.分离效能高 2.分析速度快 3.样品用量少可在几十分钟内分离出包含几百种化合物的汽油馏分，然而样品用量仅有数微克在快速分析方面，可在几秒钟内分离含十几个组份的样品。其独特的特点在于：渗透性大，分析速度快传质阻力小，可用长柱，并得高的总柱效。色谱动力学认为：填充柱可看作是一束长毛细管的组合，其内径约等于粒子粒度，因其弯曲，多径扩散严重，故理论板数少。毛细管柱完全没有这些缺陷，故理论板数可高大106数量级。用毛细管柱，有利于：提高色谱分离能力，加快色谱分析速度，促进色谱的应用都是十分必要的： 二、毛细管色谱法的相关理论在毛细管柱，柱内只有一个流路，故多径项2ldp为0，弯曲因子g=1，且用其液膜厚代替了填充柱中载体的颗粒直径dp。2．毛细管柱的最小理论板高毛细管柱的H—U图也是一个双曲线，在U值是最佳值时，H值最小。式中Cg、C1的大小取决于分配系数及柱的几何性（以相比β为代表），但一般毛细管柱液膜薄，β值较大，液相传质阻力C1项不起控制作用。当被测物质的k﹥10时，如果每米理论板数大于1000/d时，则所用柱子的性能较好表中为K值很大时最好柱效(每米板数)值，其值由H/L = 1000 / d 一般认为直径在0.1—0.7mm较好 小于0.1mm，入口压力增加，柱负荷减少 大于0.7mm，虽柱负荷增大，但柱效下降目前流行0.53mm的大口径管，不必分流。3．载气线速从速率方程可知，最小板高时的最佳线速为：如果Cl很小，则有：可见，细管径，轻载气更适合于快速分析。 4．样品容量一根色谱柱的最大允许进样量，约为一块理论板的有效体积。可见最大允许进样量与柱半径、柱长、分配比成正比，与塔板数成反比比较填充柱和毛细管柱的柱容量一根长20米，内径为0.25毫米的毛细管柱，一般可涂上6 mg的固定液，柱内体积而一根长两米，内径3毫米的不锈钢填充柱，柱内体积按12：100的液载比，可涂上800mg固定液。可见，一根2米长的填充柱中固定液的含量是一根20米长毛细管柱中固定液含量约150倍，故允许进样量也在一百倍以上。5、柱效能毛细管柱每米塔片数通常在2000－5000之间，长20米的毛细管柱总柱效为4万至10万。填充柱每米塔片数在1000－1500之间，长2米的填充柱的柱效为2000－3000所以毛细管柱的总柱效可以比填充柱高10－100倍。根据上式，分离度正比于总塔片数N。即 毛细管柱色谱总效高，其分离效能也高。如果柱效高，K值也大是最理想的，目前流行大孔厚膜毛细管柱可望具有这两重性质。6、分析时间根据公式,样品的保留时间正比于柱长，在以氮为载气时，毛细管柱的线速可达16厘米/秒，而填充柱在4厘米/秒毛细管柱可采用很高的载气线速来缩短保留时间。且毛细管柱的K值比填充柱小，因此保留时间小。故：毛细管柱上可实现快速分析。三、毛细管柱的色谱系统与填充柱系统基本一样。因毛细管柱内径细，柱容量小，出峰快、峰形窄，因此对色谱仪本身(如进样系统、检测器、记录器等)有些特殊的要求。1、进样系统毛细管柱进样量必须极小（一般液样10—2～10—3微升，气样约1微升）。要引进如此微量样品，可采用分流法进样。即在气化室出口分两路，绝大部分放空，极小部分进柱子，这两部分比例叫分流比。分流法又分为动态法和静态法两种。对分流器的要求为使分流后的样品不改变组成：1、分流后样品混合物中各峰的相对大小应与未分流的严格一致。2、分析不同浓度的混合物时，峰面积必须正比于浓度。3、当柱温、分流比、流速改变时各色谱峰的相对大小要保持恒定。A．动态分流法是目前毛细管柱进样系统最常用的分流方法，不同仪器上的分流有不同的形式。对分流器设计要求：整个分流器要保持在气化室的温度下，防止样品冷凝；分流前要有一定的混合体积，使试样、载气完全混匀，放空管体积至少要等于样品气化后的体积加载气体积。A为气化样品与载气混合部分，B为分流点，C为喷嘴，引起放空部分与进入部分在分流过程中进一步混合，确保宽沸程样品分流后不失真。然后通过放空阀调节分流比。这种分流器只是在进样时才打开开关阀，几秒钟后就关闭大部分载气，而留下一点出气，防止试样反扩散进柱中。简易分流器在一般填充柱气化室出口，并排插入两根同内径不同长度的不锈钢毛细管，垫上硅橡胶构成，其长度比即分流比。注意 在分流前要有一段混合体积，内装硅烷化玻璃球，可保证分流后组成不失真。2、尾吹毛细管柱内流动相流速低，流量小，组分会因柱后死体积突然增加而发生严重的纵向扩散，从而导致峰形展宽，有可能使在柱中以分离的组分在柱后再次重叠，影响分离。也可在使用FID时受阻于引入的H2压力而出柱困难。增加尾吹气将改善这一状况。3、检测器因流速低，且内径细，只能分析小量样品，约10―5～10－6克，有的组份如占1.0%，则相当于10―7～10－8克，要求高灵敏度检测器。快速分析时因峰宽只有几秒或少于1秒，要求检测器、记录器响应时间快，则检测器和记录器的时间常数，应少于最早峰峰宽的流出时间的1/20。适用的检测器有：高灵敏度的离子化检测器，常用FID。（灵敏度高，死体积趋近于零，响应时间快等。）也可用氩离子化和电子捕获检测器，此时需在毛细管出口外加吹洗气以降低检测器死体积。也可应用特制的微型热丝检测器，微型热敏电阻检测器，但因其属于非商品化检测器，使用频率不高。4、记录系统因毛细管色谱峰很窄，应配备快速记录系统。曾经用示波仪或电流计型记录器记录，其满刻度笔速0.1秒。目前的各种色谱数据处理机和色谱工站已完全能满足记录系统的要求。5、 毛细管柱的种类经典的毛细管柱为壁涂开管柱(WCOT——Wall Coated Open Tubular Column)。因其制备难、柱子的重复性差、内表面小、涂渍量小和β值大，将导致有效塔板数和实际分离能力不高，且热稳定性也较差，故已几无人使用。其他的几种柱子及其性能如下。多孔层壁涂柱（PLOT——Porous Layer Open Tubular Column）：先涂上吸附剂或惰性固体于柱壁，再涂渍固定液。载体壁涂柱（SCOT——Support Coated Open Tubular Column）：把载体和固定液同时涂于壁上制备而成。必须注意，以上两种柱子中的载体只是涂布于毛细管柱的壁上，而非充满整根柱子。熔融石英毛细管柱(FSOT——Fused Silica Open Tubular Column) ：其表面惰性度好，能耐高温，最主要的是有弹性，不易折断。交联毛细管柱(CLOT——Cross-Linked Open Tubular Column)：涂好固定液后再用偶联剂交联键合，柱子性能有很大改善，能耐高温，抗水、抗溶剂。大口径毛细管柱：一般口径在0.53毫米，液膜厚度为0.88~2.65微米，负载大，可不经分流而直接进样分析。微型填充柱(Micro-packed Column)：制备过程和填充柱基本相似，知识所填的载体粒度很小。微填充柱宽有很高的柱效，最低板高可达0.2~0.3毫米。

做化学分析实验，不管是理化还是仪器，经常会用到微孔滤膜。一般常用的是0.45μm和0.22μm的。除了这两中规格之外，还有别的孔径大小的规格吗？为什么选择这样两种孔径的大小呢？出发点是什么呢？

【参数解读】毛细管电泳仪的技术参数解读与使用毛细管电泳仪主要部件有0～30kV可调稳压稳流电源，内径小于100μm(常用50～75μm)、长度一般为30～100cm的石英毛细管、电极槽、检测器和进样装置。检测器有紫外/可见分光检测器、激光诱导荧光检测器和电化学检测器，前者最为常用。进样方法有电动法(电迁移)、压力法(正压力、负压力)和虹吸法。成套仪器还配有自动冲洗、自动进样、温度控制、数据采集和处理等部件。由于毛细管电泳有很多分离模式，所以不同仪器差异会很大。有些是普遍适用型，有些则具有专一性，只适用于某种模式或者某种物质的分离分析。普遍适用型的如Agilent 7100，Beckman PA800 plus，专一性的如毛细管电泳液相色谱一体机，这个就只能做电色谱（CEC），类似于HPLC，通常需要有填充物质，但又比HPLC多了个高压系统。再比如iCE280分析仪，其实是一台成像毛细管等电聚焦电泳仪，只能用于蛋白质的分离分析，分离模式固定为毛细管等电聚焦电泳（cIEF）。〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓分割线〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓〓请您来解析：1、空气制冷和冷凝液制冷，哪个效果更好？冷凝方式，液体冷凝会比较稳定，液冷效果好。只是这样一来还要另外买冷凝液，增加分析成本。2、注意过样品盘的温控范围吗？你的仪器范围多大？什么范围内才比较好？控温范围直接决定了仪器的适用范围，控温的准确度又决定了重现性的好坏，所以，这个参数至关重要。安捷伦的样品温度最低高达10度，如果做生物样品的话就被动了。beckman最低4度，比较有优势。我见过最低温度的是Lumex的毛细管电泳仪，低到-10度。控温的最高值也值得关注，如果毛细管堵住了的话，常温经常冲洗不了，这是提高温度往往会有惊喜（越高越好）。3、毛细管出口端的长度什么情况下会对分离分析产生重要影响？如何评价毛细管的质量好坏？出口端长度是指的是窗口到出口端的距离吗？会影响场强和进样量。在出口端进样模式下，出口端的长度有重要意义，因为较长的有效距离能够提供更好的分离度。4、影响仪器分离度的因素有哪些？仪器的哪些参数会影响分离度？电压、温度、管长、管内径、溶液等；仪器的温度、电压等会影响。5、目前市场上已有一些用途比较专一的毛细管电泳仪，比如毛细管电泳液相色谱一体机和毛细管等电聚焦电泳仪等。普通毛细管电泳仪如Agilent 7100和Beckman PA800 plus等也能完成以上这两种特制仪器的工作吗？可以的，还可以和质谱联用。6、谈谈你的CE仪在使用过程中容易出现的问题和解决办法。常见的是管子容易断或者污染什么的，解决办法就是“换”和“洗”。SDS-MEKC很容易有气泡，解决办法就是超声。如果毛细管里面有气泡，引起断流，断流后如果不及时发现，积聚的热量就有可能烧坏毛细管。欢迎大家参与讨论，补充自己想交流的参数，说说自己的认识或者提出自己的疑问！！！http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif

我现在用大孔径毛细管柱，做大孔树脂残留物中苯系物的测定，因为几个物质较难分离，载气流速已经调到了4ml/min,柱压21KPa,我想问一下,再这样的条件下,柱子是否会被损坏?望尽快得到回复.谢谢!

毛细管电泳（capillary electrophoresis, CE）：以高压电场为驱动力，以电解质为电泳介质，以毛细管为分离通道，样品组分依据淌度和分配行为的差异而实现分离的色谱方法。它有多种分离模式，可以采用液相色谱中的各种检测方法。CE既可以分离带电荷的溶质，也可以通过毛细管胶束电动色谱等分离模式分析中性溶质，CE的高分离效率、高检测灵敏度，样品用量极少等特点使它在生物医药样品的分析中显示出突出的优越性。 毛细管电色谱（capillary electrochromatography, CEC）：毛细管电色谱结合了毛细管电泳的高柱效和高效液相色谱的高选择性，已成为近年来色谱领域研究的热点之一。是以电渗流（或电渗流结合高压输液泵）为流动相驱动力的微柱色谱法。CEC是液相色谱与毛细管电泳相结合的产物，它的分离机理包含有电泳迁移和色谱固定相的保留机理，一般而言，溶质与固定相间的相互作用对分离起主导作用。所用色谱柱为填充了HPLC填料的填充型毛细管柱和管内壁涂渍了固定相功能分子的开管毛细管柱。CEC还处在发展阶段，主要应用在药物、手性化合物和多环芳烃的分离分析。另外CEC与质谱联用既可解决LC/MS的分离效率不高的问题，又可克服CE/MS中质量流量太小的缺陷。

顶空毛细管柱分析苯系物，器皿如何清洗？请各位大侠指点