融脂仪

许多在使用熔融指数仪的工程师们，你们是否都清楚测试材料在规定温度下砝码的配置情况？今天我把D1238中对于砝码在熔融指数仪中的配置标准与大家分享一下。

请高手指点，用DSC测熔融焓，如果用TA自带的软件去计算，数据的一致性还很好；但是，如果自己手算的话，一致性很不好，而且手算的话，数据会比软件算出来的数据偏低。怎么样保持数据的一致性？

我用乙酸乙脂做溶剂测甲胺磷但没看到有溶剂峰出峰，然后我又单独以乙酸乙脂做样品进样１微升，有一个很小的峰，还有一个基线下面，我用５微升进样结果差不多，请问是怎么回事？谢谢

如题：用于植物原生质体融合的电融合仪有哪些进口品牌，价位各是多少？另外，电融合仪怎么选型？

[font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333] 液体溶液配制可以说是实验室分析人员最基础的一门技术，也是每天工作中的必选项。液体溶液的配置包括溶质的计算、移液、定容等基础操作，还包括一些混合溶液的前后加入顺序及利用一些试剂自身的化学性质，掌握了溶液配制的技巧，可以大大缩短配置时间，提高实验效率。[/color][/size][/font][align=left] 我们都知道，溶液是由至少两种物质组成的均一、稳定的混合物，被分散的物质（溶质）以分子或更小的质点分散于另一物质（溶剂）中。溶液是混合物。种类分为：一般溶液和标准溶液。物质在常温时有固体、液体和气体三种状态。因此溶液也有三种状态，大气本身就是一种气体溶液，固体溶液混合物常称固溶体，如合金。一般溶液只是专指液体溶液。液体溶液包括两种，即能够导电的电解质溶液和不能导电的非电解质溶液。[/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left][color=#ff0000][b]一、一般液体溶液配制过程[/b][/color]（1）计算：计算配制所需固体溶质的质量或液体浓溶液的体积。（2）称量：用托盘天平称量固体质量或用量筒或移液管量取液体体积。（3）溶解：在烧杯中溶解或稀释溶质，恢复至室温（如不能完全溶解可适当加热）。检查容量瓶是否漏水。（4）转移：将烧杯内冷却后的溶液沿玻璃棒小心转入一定体积的容量瓶中（玻璃棒下端应靠在容量瓶刻度线以下）。（5）洗涤：用蒸馏水洗涤烧杯和玻璃棒2～3次，并将洗涤液转入容器中，振荡，使溶液混合均匀。（6）定容：向容量瓶中加水至刻度线以下1～2cm处时，改用胶头滴管加水，使溶液凹面恰好与刻度线相切。（7）摇匀：盖好瓶塞，用食指顶住瓶塞，另一只手的手指托住瓶底，反复上下颠倒，使溶液混合均匀。[/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left][color=#ff9900][b]溶液的配制影响因素见下表：[/b][/color][/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left][img]http://file1.foodmate.net/file/upload/201703/01/14-06-42-16-702662.png[/img][color=#ff9900][b]常用酸、碱试剂的密度和浓度表[/b][/color][/align][font=Microsoft YaHei][size=14px][color=#333333][/color][/size][/font][align=left][img=,550,261]http://file1.foodmate.net/file/upload/201703/01/14-06-46-39-702662.png[/img][/align]转自 食品伙伴网

求助，测环氧树脂在溶剂中占比需要什么仪器呢，环氧树脂在溶剂里占比1：1、1：2、1：4的时候，用什么仪器可以测出这个占比呢

高脂绒这个一般是什么意思，供应商送样测试纤维成分，说是高脂绒和兔绒混纺？

请问，1000克含有35%甲苯40%乙酸丁酯15%乙酸乙酯10%乙醇的有机溶剂可以溶解多少克硝酸纤维素酯？如果要减小以上溶液的表面张力在不改变溶液透明有光泽的前提下，应该加哪一种表面活性剂？

查看国标GBt603-2002里的配制方法：5%乙酸溶液配制方法是按照质量分数（g/g）计算的：量取48ml乙酸（冰醋酸），稀释至1000ml。但我现在只有市售36%乙酸试剂，瓶标签上显示含量是36%~37%（此浓度按照该试剂标准应是质量分数g/g），且没有密度值，要配制1000ml的5%乙酸溶液应该怎么计算？另外药典上对于溶液的百分比的描述是：除另有规定外，系指溶液100ml中含有溶质若干克。那此时不是和国标互相矛盾吗？

[align=left][b]北京北研溶出稀释平台、[color=#333333]RYX-12自动取样溶出仪、溶媒分配加样仪、[/color][color=#333333]溶出度自动取样收集系统[/color][color=#333333]、全自动取样溶出仪、[/color][color=#333333]药物溶出液体取样仪[/color][/b][/align][color=#333333]一、 用途：[/color][color=#333333] [/color][color=#333333][/color][color=#333333]仿制药一致性评价、固体制剂新药研发。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]二、技术参数。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]溶出自动取样收集系统由两台仪器组成；分别为ZRD-14溶出试验仪、RYX-12取样收集系统组成，一次可进行12杯的溶出试验，可准确、自动地完成药物的溶出和取样。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333][/color][color=#333333]1、 技术要求 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1. 仪器工作环境： [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.1 电源电压要求：220V，50Hz [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.2 温度：5-40 º C [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.3 工作适度：相对湿度20-80%[/color][color=#333333][/color][color=#333333]2、 仪器性能指标：[/color][color=#333333][/color][color=#333333]1、 药物溶出仪 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.1：溶出仪杯位：14 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.2：溶出仪杆位：12 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.3：溶出转速： 5～300转/分±1转 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.4：溶出温度：[/color][color=#333333]常温[/color][color=#333333]～50℃±0.3℃ [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.5：连续工作时间：1--59999分钟 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.6：溶出仪机头电动升降。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.7: 具有取样针头自动升降及投药装置。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.8：仪器自动定桨杆及转蓝的高度高位；（无需人工每个定高操作；免去人工误差）； [/color][color=#333333][/color][color=#333333]1.9：采用8英寸彩色液晶触摸屏显示；全自动溶出系统工作站采用一体化设计，可实现溶出仪与自动取样器同步设置并工作，无需二次取样系统参数设置； [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.0 全中文触控图标菜单提示，仪器系统操作更简便。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.1: 溶出仪水箱为一体成形；保证水箱温度分布更均匀。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.2: 具备同一水浴同一温度条件下等量补液； [/color][color=#333333][/color][color=#333333][/color][color=#333333]2、 自动取样收集器 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.1： 取样通道：12 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.2： 最多取样次数：12（可扩充为24次取样） [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.3: 最长设置取样间隔时间点：59999分钟 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.4： 最小取样间隔：1分钟；其余4分钟（视取样量与是否补液而定） [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.5： 连续工作时间：59999分钟 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.6： 取样过滤周期：＜30秒(完全符合中国药典取药过滤要求) [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.7： 取样量（或补液量）：1ml～20ml可设置 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.8： 取样精度：±2% (当取样量为5ml时各通道平均值) [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.9： 过滤孔径：过滤为孔径0.45μm注射式聚乙烯过滤头 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.10: 取样点位置：在桨叶或转篮顶端至液面的中点，距溶出杯内壁10mm处 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.11: 取样系统采用进口精密玻璃注射器作为取样动力。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.12: 采用24通道高精度316L不锈钢阀体。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.13: 高化学稳定性的聚四氟乙烯管道具有优异的抗吸附性能。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.14: 实验前过滤器浸润技术，减少吸附。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.15: 取样前的回液循环技术及取样后管路排空技术避免了交叉污染。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.16: 预留2个补液杯；具有同等温度条件等量补液功能。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.17: 具有12通道各自独立的管道系统。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.18: 1 2位试管架，最多可放置144个试管。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.19: 采用彩色液晶触摸屏控制系统，全中文触控图标菜单提示，仪器系统操作更简便。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.20: 清洗过程中可更换清洗溶液，使管路清洗更彻底。 [/color][color=#333333][/color][color=#333333]2.21: 全自动溶出仪完全符合中国药典对药物溶出与取样的要求。[/color]

请问美国CSI公司熔融指数仪中国地区联系方式010-68946260袁吉志

当乙醇做溶剂的时候它的%是不是也是指100ml乙醇溶入的溶质质量?药典的解释是:乙醇的百分比,系指在20℃时容量的比例.到底是什么意思?[em55]

请教大家一个问题，乙酸乙酯在哪种对蛋白活性影响不大的溶液中溶解度大，非常感谢！[em17]

[color=red]5%[/color][color=red]三氯化钾溶液：称取固体三氯化铁[/color][color=red]5g[/color][color=red]溶于水中稀释至[/color][color=red]100mL[/color]上面的配置方法是我在一套检验方法中看到的配置浓度为5%溶液的配置方法那么我在配置12%氢氧化钠溶液时可以用12g氢氧化钠溶于水后稀释到100mL么？我计算过按照理论上来说应该是13.6g才对就算取整数位也要13g-14g。我的问题是上面红色的字体的做法对么？如果不对为什么有好多文献上记载的配置方法都在用它啊？我是一个新毕业的学生，现从事食品化验。请有经验的GG JJ SS AY 帮我解答下。在这里先谢谢了!!~

我做的实验需要用到棕榈酸甘一酯，用正己烷去溶解但是几乎不溶解，有的文献说用用氯仿去溶，但是氯仿太毒了，有什么好的办法解决，请各位老师帮忙一下。

一、三氯化铁标准溶液 45mg/mL 1配制:称取三氯化铁(FeCl3•6H2O)55g,加适量稀盐酸溶液(盐酸:水＝1:40) 使之溶解,再以此稀盐酸定容至 1000mL,摇匀过滤。 2标定:精密吸取 10mL上述溶液于 250mL碘量瓶中,加水 20mL摇匀。加碘化钾 4g,浓盐酸5mL,密塞,在暗处静置15min。加水50mL,用 0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液滴定,至近 终点时,加淀粉指示液（1%） 2mL,继续滴定至蓝色消失。即为终点。 每毫升0.1mol/L硫代硫酸钠标准溶液相当于 27.03mg的三氯化铁(Fecl3•6H2O)。二、高锰酸钾标准溶液的配制和标定（依据国标GB/T5009.1-2003）C（1/5KMnO4）=0.1 mol/L1.配制：称取3.3 g高锰酸钾，加1000 ml水。煮沸15 min。加塞静置2d以上，用垂融漏斗过滤，置于具玻璃塞的棕色瓶中密塞保存。2.标定： 准确称取0.2g在110。C干燥至恒重的基准草酸钠，加入250ml新煮沸过的冷水、10ml硫酸，搅拌使之溶解。迅速加入约25ml高锰酸钾溶液，待褪色后，加热至65。C，继续用高锰酸钾溶液滴定至溶液呈微红色，并保持0.5min不褪色。在滴定终了时，溶液温度应不低于55℃。同时做空白试验。3.计算：高锰酸钾标准溶液浓度按下式计算： MC（1/5KMnO4）= -------------------（V1—V0）×0.0670式中：C（1/5KMnO4）——高锰酸钾标准溶液的物质的浓度，mol/L；M——草酸钠的质量，g；V1——高锰酸钾标准溶液的用量，ml；V0——空白试验高锰酸钾标准溶液的用量，ml；0.0670——草酸钠的摩尔质量， kg/mol三、氯化钠标准溶液的配制和标定（依据国标GB/T601-2002） C（ NaCI）=0.1 mol/L1.配制：称取5.9 g氯化钠，溶于1000 ml水中，摇匀。2.标定：按GB/T 9725-1988量取35.00-40.00 ml配制好的氯化钠溶液，加40ml水、10ml淀粉溶液（10 g /L），以216型银电极作指示电极，217型双盐桥饱和甘汞电极作参比电极，用硝酸银标准溶液滴定，并按GB/T 9725-1988中6.2.2条的规定计算V0。3.计算：氯化钠标准溶液浓度按下式计算： V0c1C（NaCI）= -------V式中：C（NaCI）——氯化钠标准溶液的物质的浓度，mol/L；V0——硝酸银标准滴定溶液的用量，ml；C1——硝酸银标准滴定溶液的浓度的准确数值，mol/L；V——氯化钠溶液的体积的准确数值，ml。

请问你们做的胶黏剂溶于乙酸乙酯吗？我做胶黏剂中的苯含量，标准上是用用乙酸乙酯溶解，可我做的样品不溶于乙酸乙酯？不知道怎么回事···请各位帮忙想想怎么回事，难道主含量不溶，只要苯溶就能测？不懂，请高手帮忙解答下，O(∩_∩)O谢谢

我们想做一条新的XRF曲线，需要制定标样。如果用熔融法做出来的话，加助熔剂后X射线的强度不是因为稀释降低了吗？（熔剂：样品=10：1）这样的话制出的曲线好像偏差太大。具体要怎么办呢？

请问熔点仪、显微熔点仪、药物熔点仪，有何区别？一直搞不清楚。多谢先

水中多环芳烃的测定相关文献中，前处理后的样品一般用二氯甲烷或丙酮，乙腈来定容，可标准曲线有的用异辛烷有的用丙酮。问题1 难道样品和标样不需要用同样的溶剂定容吗？这样做对最后定量及回收率的计算都会有影响吧？问题2 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]连用，用乙腈作为标样的溶剂可以吗？问题3 检测过程中，发现不同的溶剂对分离度有影响，原因是什么呢？溶剂已经很早就溶出了啊([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]，程序升温)看到"我在故我思" 说讨论区里面有关于样品和标样溶剂的相关置顶的帖子(08年左右)，可是找不到，有知道的麻烦了。。。[em09506]

植物细胞原生质体制制备与融合2006-11-20 17:14植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示，逐渐将眼光转向细胞融合，试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。１９３７年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。１９６Ｏ年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶，成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体，开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备（１）取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强，再生与分生比例较高。常用的外植体包括：种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗２～３次，然后浸人 ７０％酒精消毒后，再放进 ３％次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次，并用无菌滤纸吸干。（２）酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液：反应液应是一种ＰＨ值在５·５～５·８的缓冲液，内合纤维素酶０．３%～３．０%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等，②酶解：除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃～30℃,2～4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标，说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应，避免脆弱的原生质体受到更多的损害。（３） 分离 在反应液中除了大量的原生质体外，尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取２００～４００目的不锈钢网或尼龙布ｊ叭ｉ过滤除渣，也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。（４） 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂，应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤２～４次。 （5） 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁，此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中，则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察，残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测，基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外，尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合（1）化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器，试剂易于得到，因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇（ＰＥＧ）纳合成钙高ｐＨ诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法（在无菌条件下进行）：按比例混合双亲原生质体-----滴加 ＰＥＧ溶液，摇匀，静置----滴加高钙高ｐＨ值溶液，摇匀，静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。（２）物理法诱导融合 １９７９年Ｓｅｎｄａ等发明了微电极法诱导细胞融合。１９８１年Ｚｉ。。ｍａｎｎ等提出了改进的平行电极法，现简介如下：将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后，插入微电极，接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲，则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂，作用条件比较温和，而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当，亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因，要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近，有人提出以Ｘ射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤，融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移；致死量处理后合ｕ可能产生没再仅体万染色体ｗ划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法，大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型．2） 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体，发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3） 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成，可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种，某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4） 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或ＤＮＡ片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞，一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养（液体或固体），再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞：若一方细胞大，另一方细胞小，则大。小细胞融合的就是杂合细胞；若～方细胞基本无色，另一方为绿色，则自绿色结合的细胞是杂合细胞；如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征，则可作为识别杂合的标志；发现ｈ述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出，移置再牛培养基培养。（2）以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信，但实验者有时会受到仪器的限制，工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补：不同基山叨的白化突变株出aBｘAh，可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补：甲细胞株缺外源激素Ａ不能生长，乙细胞株需要提供外源激素Ｂ才能生长，则甲株与乙株融合，杂合细胞在不含激素Ａ、Ｂ的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选：假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性（如抗卡那霉素），则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选：根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点，用它处理受体原生质体，只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复，等等。 （３）采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株，可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ，见８．２．２．２）和随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析，以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。（４）根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

植物细胞原生质体制制备与融合1、原生质体常现的杂交育种由于物种间难以逾越的天然屏障而举步维艰。科学家们受细胞全能性理论及组织培养成功的启示，逐渐将眼光转向细胞融合，试图用这种崭 图3-2新的手段冲破自然界的禁钢。１９３７年michel率先实施植物细胞融合的试验。如何去除坚韧的细胞'接成了牛物学工作者必须解决的首要难题。１９６Ｏ年该领域终于出现了重大突破。由英国诺丁汉大学Cocking教授领导的小组率先利用真菌纤维素酶，成功地制备出了大量具有高度活性可再生的番茄幼根细胞原生质体，开辟了原生质体融合研究的新阶段。植物细胞原生质体是指那些已去除全部细胞壁的细胞。2、原生质体制备（１）取材与除菌 为了让制得的原生质体一般都生活力较强，再生与分生比例较高。常用的外植体包括：种子根。子叶、下胚轴、胚细胞、花粉母细胞、悬浮培养细胞和嫩叶。对外植体的除菌要因材而异。悬浮培养细胞一般无需除菌。对较脏的外植体往往要先用肥皂水清洗再以清水洗２～３次，然后浸人 ７０％酒精消毒后，再放进 ３％次氯酸钠处理。最后用无菌水漂洗数次，并用无菌滤纸吸干。（２）酶解 现以叶片为例说明如何制备植物原生质体。①配制酶解反应液：反应液应是一种ＰＨ值在５·５～５·８的缓冲液，内合纤维素酶０．３%～３．０%以及渗透压稳定剂、细胞膜保护剂和表面活性剂等，②酶解：除菌后的叶片 撕去下表皮 切块放人反应液 不时轻摇 (条件25℃～30℃,2～4h)反应液转绿。反应液转绿是酶解成功的一项重要指标，说明已有不少原生质体游离在反应液中。经镜检确认后应及时终止反应，避免脆弱的原生质体受到更多的损害。（３） 分离 在反应液中除了大量的原生质体外，尚有一些残留的组织块和破碎的细胞。为了取得高纯度的原生质体就必需进行原生质体的分离。可选取２００～４００目的不锈钢网或尼龙布ｊ叭ｉ过滤除渣，也可采用低速离心法或比重漂浮法直接获取原生质体。（４） 洗涤刚分离得到的原生质体往往还含有酶及其他不利于原生质体培养。再生的试剂，应以新的渗透压稳定剂或原生质体培养液离心洗涤２～４次。 （5） 鉴定 只有经过鉴定确认已获得原生质体后才能进行下阶段的细胞融合工作。由于已去除全部或大部分细胞壁，此时植物细胞呈圆形。如果把它放人低渗溶液中，则很容易胀破。也。'厂月荧光增白剂染色后置紫外显微镜下观察，残留的细胞壁呈现明显荧光。通过以上观测，基本上可判别是否原生质体及其百分中 此外，尚可借助台盼蓝活细胞染色、胞质环流观察以及测定人、作用、呼吸作用等参数定量检测原生质体的活力。4、 原生质体的融合（1）化学法诱导融合 化学法诱导融合无需贵重仪器，试剂易于得到，因此一直是细胞融合的主要方法。尤其是聚乙二醇（ＰＥＧ）纳合成钙高ｐＨ诱导融合法已成为化学法诱导细胞融合的主流。以下简介此方法（在无菌条件下进行）：按比例混合双亲原生质体-----滴加 ＰＥＧ溶液，摇匀，静置----滴加高钙高ｐＨ值溶液，摇匀，静置-----滴加原生质体培养液洗涤数次-----离心获得原生质体细胞团一筛选、再生杂合细胞。（２）物理法诱导融合 １９７９年Ｓｅｎｄａ等发明了微电极法诱导细胞融合。１９８１年Ｚｉ。。ｍａｎｎ等提出了改进的平行电极法，现简介如下：将双亲本原生质体以适当的溶液悬浮混合后，插入微电极，接通一定的交变电场。原生质体极化后顺着电场排列成紧密接触的珍珠串状。此时瞬间施以适当强度的电脉冲，则使原生质体质膜被击穿而发生融合。电激融合不使用有毒害作用的试剂，作用条件比较温和，而且基本上是同步发生融合。只要条件摸索适当，亦可获得较高的融合率。上述操作实际上是供体与受体原生质体对等融合的方法。由于双方各具几万对基因，要筛选得到符合需要且能稳定传代的杂合细胞是相当困难的。最近，有人提出以Ｘ射线、伽玛射线。纺锤体毒素或染色体浓缩剂等对供体原生质体进行前处理。轻剂量处理可造成染色体不同程度的丢失、失活、断裂和损伤，融合后实现仅有少数染色体甚至是DNA片段的转移；致死量处理后合ｕ可能产生没再仅体万染色体ｗ划她旋余种。利用这种价值不对称融合方法，大大提高了融合体的生存率和可利用率。经过上述融合处理后再生的细胞株将可能出现以下几种类型．2） 亲本双方的细胞核和细胞质能融洽地合为一体，发育成为完全的杂合植株。这种例子不多。3） 融合细胞由一方细胞核与另一方细胞质构成，可能发育为核质异源的植株。亲缘关系越远的物种，某个亲本的染色体被丢失的现象就越严重。 4） 融合细胞由双方胞质及一方核或再附加少量他方染色体或ＤＮＡ片段构成。④原生质体融合后两个细胞核尚未融合时就过早地被新出现的细胞壁分开。以后它们各自分生长成嵌合植株。5、 杂合体的鉴别与筛选双亲本原生质体经融合处理后产生的杂合细胞，一般要经含有渗透压稳定剂的原生质体培养基培养（液体或固体），再生出细胞壁后转移到合适的培养基中。待长出愈伤组织后按常规方法诱导其长芽、生根、成苗。在此过程中可对是否杂合细胞或植株进行鉴别与筛选。 (1) 杂合细胞的显微镜鉴别 根据以下特征可以在显微镜下直接识别杂合细胞：若一方细胞大，另一方细胞小，则大。小细胞融合的就是杂合细胞；若～方细胞基本无色，另一方为绿色，则自绿色结合的细胞是杂合细胞；如果双方原生质体在特殊显微镜下或双方经不同染料着色后可见不同的特征，则可作为识别杂合的标志；发现ｈ述杂合细胞后可借助显微操作仪在显微镜下直接取出，移置再牛培养基培养。（2）以互补法筛选杂合细胞 显微鉴别法虽然比较可信，但实验者有时会受到仪器的限制，工作进度慢且未知其能否存活与个长 遗传互补法则可弥补以上不足。 遗传互补法的前提是获得各种遗传突变细胞株系。白化互补：不同基山叨的白化突变株出aBｘAh，可互补为绿色细胞株AaBb。生长互补：甲细胞株缺外源激素Ａ不能生长，乙细胞株需要提供外源激素Ｂ才能生长，则甲株与乙株融合，杂合细胞在不含激素Ａ、Ｂ的选择培养基上可能生长。抗性互补筛选：假如某个细胞株具某种抗性(抗青霉素)另一个细胞株具另一种抗性（如抗卡那霉素），则它们的杂合株将可在含上述两种抗生素的培养基上再生与分裂。这种筛选方式即所谓的抗性互补筛选。代谢互补筛选：根据碘代乙酚胺能抑制细胞代谢的特点，用它处理受体原生质体，只有融合后的供体细胞质才能使细胞活性得到恢复，等等。 （３）采用细胞与分子生物学的方法鉴别杂合体 经细胞融合后长出的愈伤组织或植株，可进行染色体核型分析、染色体显带分析、同功酶分析以及更为精细的核酸分子杂交、限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ，见８．２．２．２）和随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析，以确定其是否结合了双亲本的遗传素质。（４）根据融合处理后再生长出的植株的形态特征进行鉴别质。

请问如何配制一种指定pH值的溶液。是先定容再调pH（这样体积就改变了）；还是先调pH再定容呢（这样最终pH又会低于指定值了）？ 请大家给点建议

买来的标准溶液需要把他们稀释用来做标准曲线， 一般要加酸，目的是防止电离，稳定溶液。那问题是：第一步稀释得到的储备液，如用1%的硝酸稀释和定容的。意思就是，这个一般10ppm溶液中不加去离子水，完全用硝酸定容的，对么？ 最后一步稀释得到的标准溶液，是取以上完全用硝酸定容的储备液，加水稀释来的，还要再滴加硝酸对么？？ 谢谢哪位全面的解释一下！！！

第一次发悬赏贴，请各位多包涵。这本书《Claisse熔融制样手册 中文版》看到之前有人发过了，可好像不能下载了，只好求助已经有的大虾了~~~希望有好心人能帮忙，不胜感激~~~http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif

附件中为一作者采用熔融制样法测定铌铁合金中元素，大家有采用这种制样方法的吗？其效率如果，精度如何，对坩埚的腐蚀程度有如何？希望大家能积极讨论[~197382~]

大家好，今天听同事说他们之前配制乙腈-水溶液时，需要超声来加速混匀，不然混不匀，很明显的现象是混合之后，溶液都不是冷的，这就是没混匀，因为乙腈溶于水是吸热的。想请问下大家，你们平时都是怎么配乙腈-水溶液的？乙腈和水很好溶啊，搅拌不行吗？还是说如果乙腈比例高，水相比例低，互溶会困难一点？

小弟我的样品用乙酸乙酯溶解，定容。想进100甲醇的流动相，不知可否。乙酸乙酯是否对C18有损害？溶剂峰会很大吗？