液相色谱紫外吸收检测器

[b]高效液相色谱紫外检测器需要信噪比指标[/b][i]法洋，许旭，雷晓玲[/i]摘 要：紫外吸收光学检测器是高效液相色谱中最常用的检测器。厂家采用的性能指标包括检测器的噪音，基线漂移等。考虑到该仪器用于分析测试实验的需求，增加信噪比指标可以较全面的评价不同型号检测器的性能差异。关键词：紫外吸收光学检测器 高效液相色谱 信噪比1 引 言紫外检测器是高效液相色谱中最常用的检测器，目前市场上生产厂家及型号很多，厂家通常采用检测器的噪音，基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。考虑到样品的紫外吸收响应值主要与样品有关，与仪器的关系不大，一般认为这可以基本反映仪器在灵敏度方面的性能。本文在实验的基础上证明对同一样品各检测器的响应值实际上也存在不同程序的差异，说明仅使用噪音和基线漂移的指标不能准确显示仪器在灵敏度方面的性能差异，因此，提出用信噪比来评价仪器的灵敏度性能。2 灵敏度评价指标设置的目的和依据高效液相色谱及其紫外检测器主要用于化学样品的分析测试。其评价指标必然与其用途相关联。一个分析方法对检测器的要求主要在灵敏度、选择性、精确度和准确性方面。在色谱分析中灵敏度是非常重要的指标。对于灵敏度，在分析测试方法研究中主要使用信噪比、最低检测限，或最低定量限来评价。其中信噪比是评价的核心，因为最低检测限和最低定量限通常用信噪比在2~3和10的量来定义。但目前厂家通常采用检测器的噪音，基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。这实际上是基于样品的紫外吸收响应值主要与样品有关，与仪器关系不大的假设。根据朗伯比尔定律，对于同样长度的检测池，同样浓度的样品溶液应该具有相同的吸光度。这样，对同样浓度的样品溶液，检测器的响应值应该是相同的，所以上述噪音，基线漂移的参数应该可以用来评价检测器的灵敏度性能。

液相色谱紫外检测器与通用型检测器 液相色谱现在用的最多的是紫外检测器，约占总数的85%，然而液相色谱的通用型检测器却没有紫外检测器。液相的通用型检测器常见的有示差折光检测器，蒸发光散射检测器等，这些检测器在液相色谱的用量和使用范围都不是很广。 示差折光检测器稳定性较好，但使用条件如对温度、气泡、压力等要求较高，不能采用梯度洗脱方式，灵敏度相对不高，一般多用在没有紫外吸收的糖类物质的检测。蒸发光散射检测器灵敏度较高，可以采用梯度洗脱方式，但它需要纯度较高的气源，有污染气体排出，稳定性不够理想，问题较高，对气体压力、流量要求较高，一般多用于二十几种药物检测。 而紫外检测器虽然不是通用型检测器，但它能检测大多数的有机物，约80%以上。而且它的灵敏度较高，稳定性较好，能采用梯度洗脱方法，对实验条件及环境要求也不是很高，造价不高，维护、维修简单、方便，危险性较低等种种优势。所以成为液相色谱首选的检测器。 当然液相色谱用的荧光检测器也有很多优点，比如灵敏度极高，能到十的十二十三次方，可以检测具有荧光效应的有机物，属于选择性检测器，稳定性较好线性较宽较好、使用方便等。另外通用型检测器也还有很多种，也还有很多值得开发、改进的,发展空间很宽广、很有前途。 希望液相色谱明天会更好，通用型检测器更通用、更强大、完美！选择性检测器选择性更强、更专业！

1 引 言紫外检测器是高效液相色谱中最常用的检测器，目前市场上生产厂家及型号很多，厂家通常采用检测器的噪音，基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。考虑到样品的紫外吸收响应值主要与样品有关，与仪器的关系不大，一般认为这可以基本反映仪器在灵敏度方面的性能。本文在实验的基础上证明对同一样品各检测器的响应值实际上也存在不同程序的差异，说明仅使用噪音和基线漂移的指标不能准确显示仪器在灵敏度方面的性能差异，因此，提出用信噪比来评价仪器的灵敏度性能。2 灵敏度评价指标设置的目的和依据高效液相色谱及其紫外检测器主要用于化学样品的分析测试。其评价指标必然与其用途相关联。一个分析方法对检测器的要求主要在灵敏度、选择性、精确度和准确性方面。在色谱分析中灵敏度是非常重要的指标。对于灵敏度，在分析测试方法研究中主要使用信噪比、最低检测限，或最低定量限来评价。其中信噪比是评价的核心，因为最低检测限和最低定量限通常用信噪比在2~3和10的量来定义。但目前厂家通常采用检测器的噪音，基线漂移等技术参数作为产品的灵敏度性能评价指标。这实际上是基于样品的紫外吸收响应值主要与样品有关，与仪器关系不大的假设。根据朗伯比尔定律，对于同样长度的检测池，同样浓度的样品溶液应该具有相同的吸光度。这样，对同样浓度的样品溶液，检测器的响应值应该是相同的，所以上述噪音，基线漂移的参数应该可以用来评价检测器的灵敏度性能。但是，实验中发现，同一样品溶液在不同检测器中响应实际上存在明显差异，表1显示对于同一种样品溶液，不同厂家和型号检测器的响应值可能相差3倍以上。这时，由于色谱分析主要使用相对比较的间接测定方法，其使用实际上并没有受到多少影响。难以简单认定仪器存在问题。但因为信噪比发生了变化，上述噪音、基线漂移的参数就不能用来评价检测器的灵敏度性能了。此时，直接使用信噪比来评价检测器的灵敏度性能才是可靠和准确的方法。3 信噪比指标评价方法评价信噪比需要测定响应值，需要选定样品，推荐萘和L-苯丙氨酸等在254nm附近有吸收的样品，前者常用于色谱柱性能评价;后者无毒，且对仪器可能存在的偏振现象敏感。当然，即使使用不同的评价样品，只要固定浓度和溶剂，也可以用分光光度计来校正和比较。根据现有信噪比测定方法，在选定特定浓度的样品后，先在选定波长平衡检测器(此时检测器中的溶液为溶解评价样品的溶剂)，待基线稳定后，将配制好的样品溶液直接灌注到仪器的流路并充满其中，注意不要灌入气泡，信号稳定后再用溶剂将样品溶液冲出来。测定基线上下波动的幅度为噪音值(N)，测定基线中值与样品信号中值的差为信号值(S)。则信噪比为两者的比值(SN)。4 结 论使用信噪比(SN)指标评价检测器，可以更准确全面地评价各种检测器的灵敏度性能。评价时可以参考现有的信噪比测定方法，建议用254nm作为检测波长，选择简单易得的样品，浓度值的选定应使信噪比SN的值在10以内，以方便测量。配制特定浓度的评价溶液后，以灌注法测定此时相对溶剂的响应值S，测定和计算出信噪比SN的值，作为该检测器对特定评价样品溶液的信噪比评价指标的值。

氘灯发出几乎连续的光谱，它主要依靠等离子体放电（是指始终让氘灯处于一个稳定的氘元素（D2或者重氢）电弧状态下产生紫外波长范围（190-400 nm）直到可见光谱范围（400-800 nm）因此，氘灯是高精度吸收测量的理想光源，比如紫外线可见光谱分光计和高压液体色谱分析仪（HPLC）。 氘灯的技术性能指标通常包括氘灯能量、噪音、漂移这三个重要的指标，对于咱们这样的分析用户来说，在工作站上最直观的判断都集中在氘灯能量上了，下面结合等能量和氘灯寿命简单总结一下氘灯的一些特性和日常注意事项。氘灯的使用寿命是有一定时间的，就是指其在提供足够光强的状态下的所使用的小时数。氘灯为易耗件，氘灯的寿命通常以下述两种情况下任一种现象出现时所定义。它的辐射强度跌落到初始值的50%时；氘灯使用是一个很缓慢的减弱过程，可以用以下的指数函数来表示：It = Io x e-ct 式中：It 表示在t时刻的光强值；Io 表示初始光强；C表示一个常数； t表示时间。 氘灯的光强减少的3个因素： 1.此氘灯的内部金属部件以及涂料的蒸发（同时可能导致灯的能否点亮）；2.此氘灯的灯丝涂料的材料与石英套发生反应（主要是阻碍穿透）； 3.日晒光照会导致石英套吸收200—250nm波长的光。帖子汇总：更换氘灯原创：1、1260换灯记2、【原创】记一次难忘的岛津换灯！3、【分享】关于Agilent 1200LC换灯（图解）4、【第二届网络原创作品大赛】Agilent1100 FLD氙闪灯更换和VWD的氚灯5、【原创】液相色谱更换氘灯记6、【原创】第一次更换日立L-2400紫外检测器氘灯的经历7、闪烁聪明智慧，Waters 486氘灯计时器解析氘灯相关帖子：【讨论液相潜力】仪器篇之检测器灯检测器的灯何时关？WATERS荧光检测器里面的灯寿命有多长?【求助】关于灯测试的问题?液相不开灯，噪声为什么那么大？安捷伦1100DAD检测器灯点不亮。。已用5000+小时，是否已到寿命？紫外灯与氘灯，你知道多少？更换的新氘灯能量低？氘灯何时更换安捷伦DAD检测器新氘灯能量测试未通过说说你经历过的氘灯无法点亮原因

在看液相色谱容易出问题的部件------紫外检测器故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPL EN和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。有几个问题：甲醇和水在250nm波长处有吸收么？SMPL EN和 REF EN 指的是什么？

突然断电，高效液相色谱的紫外检测器会出现什么故障，如何解决。（比如：电压为零，基线永远是直线）

小弟对高效液相不太了解，由于要定量，扫了样品的紫外吸收，发现并没有紫外吸收，看文献上此样品定量用的是高效液相，检测器用的紫外检测器，不明白了，难道紫外可见吸收光谱扫的没有紫外吸收的样品在高效液相的紫外检测器上能检测到？望高手指点。

你用过紫外检测器的液相色谱吗？使用的方法是什么？用于分析什么样品？[em0815]

使用过紫外检测器的液相色谱吗?来探讨一下吧!

液相色谱紫外检测器的使用方法大家来探讨一下吧!

[color=#444444]标准上分析方法选定的高效液相色谱的检测器是示差检测器，由于高效液相色谱都不是示差检测器，基本都是紫外检测器，我可以用紫外检测器代替示差检测器吗？请各位前辈能够给点建议？[/color]

请问液相色谱紫外检测器灵敏度要怎么计算呢，比如我进1×10-4的萘甲醇

除了紫外检测器，液相色谱还有其他通用性的检测吗？

我们公司买了一套上海天普分析仪器有限公司的LC2900型高效液相色谱仪一直以来都使用正常，前天按照原来的步骤打开仪器的时候，发现UV2930紫外分光检测器显示屏显示成这样了 前两部正常 到 Please Wait 后出现 WL CALIB ERROR R:02019 S:02019 请问这是什么原因各位大虾们帮帮忙，帮我解决一下。

[color=#333333]液相色谱的紫外检测器可以检测哪些农药[/color]

请教：液相色谱检测器问题？ 使用液相色谱紫外检测器时，为什么选择最大吸收波长？

液相色谱上安装有时差检测器和紫外检测器，为什么要做示差检测器和紫外检测器的时间间隔？为什么时间间隔越小越好？

紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器（UV），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。其检测灵敏度在mg/L至mg/L范围。可见光检测器 visible light detector 可见光检测器 visible light detector 又称分光光度检测器，是基于溶质分子吸收可见光的原理设计的检测器。能够直接采用可见光检测的溶质不是很多，而且多数灵敏度也不高，但采用具有高摩尔吸光系数的有机试剂（配位体和螯合剂）作为衍生化试剂进行柱前或柱后衍生操作的衍生化光度检测法是相当有用的，特别是在金属离子配合物液相色谱中的应用是相当成功的。蒸发光散射检测器克服常见的HPLC检测难题 虽然阵法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年，但是对于许多色谱工作者来说，它仍是一个新产品。第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的，并在八十年代初转化为商品，八十年代以激光为光源的第二代ELSD面世。此后，通过不断设计提高了ELSD的操作性能。现在ELSD越来越多的作为通用型检测器]用于高效液相色谱，超临界色谱（SFC）和逆流色谱中。ELSD最大的优越性在于能检测不含发色团的化合物，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物，并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物 。ELSD的通用检测方法消除了常见于传统HPLC检测方法中的难点，不同于紫外和荧光检测器，ELSD的响应不依赖与样品的光学特性，任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不受其官能团的影响。ELSD的响应值与样品的质量成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。示差检测器（RI）也可以说是一种通用型检测器，打它灵敏度低，并与梯度脱洗不相容。质谱是另一种通用型检测器，但它的昂贵操作费用和复杂性限制了它的应用。ELSD的独特检测方法，对于它的多种用途和高性能至为关键。ELSD检测只要分为三个步骤：（1）用惰性气体雾化脱洗液（2）流动相在加热管（漂移管）中蒸发（3）样品颗粒散射光后得到检测。

我最近对一种物质进行检测，发现用紫外光谱仪和液相色谱的紫外检测器扫描出来的最大吸收波长不一致，相差2～3nm，这样的话哪个数据更准确些呢？而且峰形也有点不同，紫外检测器扫描的是单峰，而紫外光谱仪扫描出来的是有重叠的双峰。

HP 1050 液相色谱仪，紫外检测器 filter error怎么解决？

液相色谱中可以用二级证列管检测器代替紫外检测器吗

液相色谱的PDA检测器与紫外检测器有什么区别与联系？

请教大家：1、想买一液相色谱，配二极管阵列检测器，还需要配紫外检测器吗？2、原有一台安捷伦1100带紫外检测器，想再增加一个蒸发光检测器，请大家推荐哪家大好，同时又能兼容（主要使两个检测器要能简便的互换使用，不要拆卸太麻烦）。3、蒸发光检测器需要用到气源，需要单独的实验室吗？需要气体间吗？谢谢大家。

对紫外吸收很弱的物质，做液相时选择什么检测器啊啊？

前几天，有个销售朋友提了一个问题，让我很无语，但是仔细想想，可能也有其道理，所以觉得想和大家聊聊。问题是这样的：朋友：液相色谱的宣传资料上有的家写的200-400nm，有的加写的190-400nm，还有的写190-360nm；写200nm的，是不是技术有问题，做不到190nm，仪器不如190nm的？我：。。。。。。不说，是因为觉得这个问题很无语，太低级。但是想想，可能是不是很多人都这么认为呢？个人理解如下：1、从硬件角度考虑a、氘灯其实液相的紫外检测器，主要是氘灯或者氘灯+钨灯构成；氘灯本身的能量，或者说光强，是有一定范围的，主要的光强度，集中在200-360nm这个范围，低于或者高于这个范围，不是说不能检测，而是能量/光强度弱了，检测效果不好。b、信号接收 氘灯穿过样品，出来的光会进过信号接收的装置或者说硬件，转变成数据；而这个信号接收，大部分也有个范围，不过大多数厂家都是可以做大的，对于波长范围影响不大；关键的问题是如果是二极管阵列的，大多要考虑氘灯在点亮过程中产生的臭氧，对二极管上镀膜的伤害，也可以说是氧化。时间长了，容易造成氧化，而影响光信号的接受强度。但是该问题主要是使用后期，不影响前期。2、软件 其实软件构不成影响，做软件的采集，是可以随便设置的，嘻嘻~~~~3、使用 从使用的角度而言，200nm以下很多溶剂是无法使用的，会有吸收，造成漂移，从而影响检测。大家可以查下溶剂的吸收波长就知道了，像低波长下，甲醇都是不可用的，水里面也是很多酸、碱、盐都是不能加的~乙腈供应厂家足够好的话，可以用；很多小厂家的乙腈，低波长下也有吸收物质，没法用~所以如果是该物质确实是200nm以下吸收波长的，作分析，考虑换个检测器吧，比如蒸发光检测器（ELSD）、示差检测器（RI）等总结：也就是说，无论厂家写的190-400nm、还是200-400nm、或者是190-360nm，本质上没啥区别~今天要下班回家赶公交，明天再接着聊钨灯方面的。。。。。————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————————嘻嘻，最近比较懒也比较忙，所以迟了很久才和大家说钨灯，没让大家等的不耐烦吧？？咱们来说说钨灯吧，也就是200-800nm。上面说了，很多厂家其实氘灯+钨灯，波长范围也标示的不一样的，好些是到800nm，有些是到700nm，都不一样。有什么区别呢，下面我们来看看~其实这就是一个光谱范围的问题，检测器本身没有区别的：在760~800之间，因为多级滤光片的问题，性能不是很好，加上下面要说的二级衍射，所以从本质上而言，无论厂家写的700nm、760nm还是800nm，都没有太大关系的；从应用角度而言，700nm以上也基本不用，就像紫外200nm以下不用是一个意思。另外从使用的角度上讲，一般液相都是单波长，所以没有这个问题，制备液相而言，有双波长或者更多，不知道大家有没有注意，所谓的双波长，也是有范围的：这么说吧，比如厂家说的双波长，告诉你200-800nm双波长，是这个意思：200-400范围内可以设置任意两个波长，400-800nm范围内可以设置任意两个波长，但是不能是200-400nm设置一个波长，400-800nm设置另一个波长，为什么呢？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/emyc1010.gif原因1：因为200~800nm的时候用的是氘+钨灯，氘灯在656.1nm的时候有特征波长，能量比较高，要是不经过处理的话，加上钨灯的能量，检测器能量马上就饱和了。所以要么用紫外用氘灯，可见用钨灯，不能同时用。原因2：用光栅分光的时候，800nm的时候有400nm的二级衍射，以此类推，600nm的时候有300nm的二级衍射

高效液相色谱仪中的检测器是三大关键部件（高压输液泵、色谱柱、检测器）之一，主要用于监测经色谱柱分离后的组分浓度的变化，并由记录仪绘出谱图来进行定性、定量分析。常用的检测器有紫外吸收检测器（UVD）、折光指数检测器（RID）、电导检测器（ECD）和荧光检测器。检测器的分类按检测的对象分类（1）整体性质检测器检测从色谱柱中流出的流动相总体物理性质的变化情况。如折光指数检测器(RID)和电导检测器(CD)，它们分别测定柱后流出液总体的折射率和电导率。此类检测器测定灵敏度低，必须用双流路进行补偿测量 易受温度和流量波动的影响，造成较大的漂移和噪声 不适合于痕量分析和梯度洗脱。（2） 溶质性质检测器此类检测器只检测柱后流出液中溶质的某物理或化学性质的变化。例如，紫外吸收检测器(UVD)和荧光检测器(FD)，它们分别测量溶质对紫外光的吸收和溶质在紫外光照射下发射的荧光强度。此类检测器灵敏度高，可单流路或双流路补偿测量，对流动相流量和温度变化不敏感。但不能使用对紫外线有吸收的流动相。它们可用于痕量分析和梯度洗脱。按适用性分类（1） 择性检测器它对不同组成的物质响应差别极大，因此只能选择性地检测某些物质，如紫外吸收检测器、荧光检测器和电导检测器。（2） 通用型检测器它对大多数物质的响应相差不大， 几乎适用于所有物质。折光指数检测器属于通用型检测器，但它的灵敏度低，受温度影响波动大，使用时有一定局限性。上面提到的UVD，RID，FD，ECD 4种检测器皆属于非破坏性检测器，样品流出检测器后可进行馏分收集，并可与其它检测器串联使用。对荧光检测器因测定中加入荧光试剂，其对样品会产生玷污，当串联使用时应将它放在最后检测。

液相色谱的检测器有紫外吸收检测器，二极管阵列检测器，荧光检测器，示差折光检测器，电化学检测器，化学发光检测器，ms检测器。若不考虑各种检测器的价格因素。对于需要分析的物质如何选择适用的检测器？

高效液相色谱紫外-可见光检测器参数设置对分析结果的影响