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自动酶联免疫荧光检测仪

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  • 10种免疫荧光检测方法

    [font='calibri'][size=13px]10种免疫荧光检测方法详解!从入门到专业![/size][/font]免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括,细胞固定和通透,封闭,孵育一抗,二抗等。除了这些基本步骤,接下来的实验方法希望可以帮到您。1. 细胞固定和通透为达到蕞佳的检测效果,细胞需要经过固定和通透。步骤很重要,细胞和抗原需要保证蕞佳的结构,并利于抗体与抗原结合。通常情况下,2. 抗体特异性免疫荧光需要用到特异性非常强的抗体,可以避免高背景和不理想的蛋白定位结果。在大多数情况下,纯化抗体的效果很好,但是正确的对照可以帮助精-准定位抗原。使用只有二抗染色的片子作为阴性对照,有利于减少降低背景干扰。3. 合适的抗体稀释比例通过优化抗体稀释比例来优化染色,通常情况下 1ug/ml 的纯化抗体或者 1:100-1:1000 的抗血清足够达到特异性染色的结果。但在能保证低背景染色的前提下,可以通过增加浓度来提高信号强度。如果是第1次使用该抗体或测定某抗原,强烈建议浓度梯度实验。4. 优化缓冲液和封闭剂尽管很多抗原在常见的 Buffer 如 PBS 中可以很好的被染色,但是对于某些目的抗原,更换一下含有不同离子的缓冲液,比如钙、镁、钾等,可以带来很大程度上的改善。Rockland 可提供优化过的 IHC 用封闭缓冲液,同样适用于荧光染色实验。5. 选择正确的二抗如果您需要做免疫实验,我们强烈建议您选择进行过预吸附的二抗进行单染实验;如果是双重甚至是多重染色,那么必须使用预吸附的二抗。同时,请优先选择来自同一物种的二抗。6. 使用合适的细胞密度选择合适的细胞数量进行染色,当细胞数量过多时,细胞结构不好,导致染色背景深,低细胞密度,会使细胞贴壁不佳,状态不好。7. 多重染色对同一样本进行两个不同抗原的检测时,可以用各自的抗体进行同时染色,但要求两个一抗的种属来源不同,标记物不同,而二抗的种属来源需保持一致。8. 降低背景高背景是免疫荧光常见的问题,解决此问题可以用二抗来源的正常血清代替 BSA 做封闭液,降低抗体浓度,增加洗涤次数,洗涤至少三次,每次五分钟,推荐洗涤液为 PBS+0.05%Tween。9. 封片作为免疫荧光的蕞后一步,可以提高折射率,保护样品。10. 数据分析观察整体样片时,选择具有代表性的细胞进行数据获取与分析。以上是10种检测方法,但是针对免疫荧光检测服务,推荐义翘神州,服务优势:①技术员长期从事抗体质量控制工作,经验丰富。②拥有包括Nikon A1激光共聚焦显微镜等重要仪器,可满足您对样片、活细胞等样本的静态和动态观察拍摄。③检测结果准确、重复性高,实验结果可直接用于论文发表。更多免疫荧光检测服务详情可以参看https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service

  • 免疫组化(IHC)与免疫荧光(IF)检测的区别及服务推荐

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光技术[/b][/url]([/font][font=Calibri]Immunofluorescence technique [/font][font=宋体])是在免疫学、生物化学和荧光成像系统基础上建立起来的检测技术。技术原理是根据抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异结合,以荧光标记抗体示踪组织或细胞内相应抗原。免疫荧光技术因特异性强、灵敏度高和操作简便的优势广泛应用于免疫学、微生物学、病理学、肿瘤学以及临床检验等生物学和医学。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫组化,是应用免疫学基本原理[/font][font=宋体]——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术[/font][font=Calibri](immunohistochemistry)[/font][font=宋体]或免疫细胞化学技术[/font][font=Calibri](immunocytochemistry)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]区别:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫组化和免疫荧光都经过免疫原,原理相似,只是显色剂不同,免疫荧光是免疫组化技术之一。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、免疫组化是应用免疫学的基本原理,即抗原和抗体特异性结合的原理,通过化学反应确定组织细胞中的抗原,使标记有抗体的显色试剂显色,并对其进行定位、定性和相对定量研究。在免疫组化过程中,常用的显示剂包括荧光素、酶、金属离子或同位素。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、免疫荧光是一种不会影响抗原和抗体活性的荧光色素,被标记在抗体或抗原上,然后与其对应的抗原或抗体结合,在荧光显微镜下呈现特异性的荧光反应。免疫荧光是免疫组化技术之一,具有特异性强、灵敏度高、速度快的特点。但相对结果判断的客观性不足,技术程序复杂。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫组化与免疫荧光的真正目的均为明确病理诊断,以便患者获得精准治疗。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州拥有专业的技术人员和共聚焦显微镜等仪器平台,为客户提供高质量的免疫荧光检测服务,包括对细胞爬片、石蜡切片、冷冻切片和组织芯片等进行免疫荧光单染、双染、及多重染色等。可以为客户提供免疫荧光([/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体])检测服务和石蜡切片免疫组化([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])检测服务,有需求的朋友可以来义翘官网进行查询,详情参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font]

  • 免疫荧光法和免疫印迹法区别

    [font=宋体]免疫荧光法和免疫印迹法是生物学领域中两种常用的实验技术,它们在原理、操作过程和应用方面有着显著的区别。本文将详细探讨这两种技术的区别,以便更好地理解它们的特点和应用价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]首先,我们来了解免疫荧光法。免疫荧光法是一种利用荧光物质标记的特异性抗体来检测细胞内或细胞表面抗原的技术。其基本原理是抗原抗体反应,通过荧光显微镜观察荧光标记的抗原,从而实现对抗原的定位和定量分析。免疫荧光法具有高灵敏度、高特异性和定位准确的特点,广泛应用于细胞生物学、微生物学、免疫学等领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]相比之下,免疫印迹法则是通过检测细胞或组织提取物中特定抗原的存在和分布,以了解其在生物学过程中的作用。这种方法通常涉及到蛋白质的提取、分离、转移和检测等步骤。免疫印迹法能够检测蛋白质的分子量、表达水平以及与其他分子的相互作用,为生物学研究提供了重要的信息。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在操作过程上,免疫荧光法主要涉及细胞的固定、通透、抗体孵育和荧光显微镜观察等步骤。而免疫印迹法则需要进行蛋白质的提取、电泳分离、膜转移、抗体孵育和显色等复杂操作。因此,从操作难度和复杂性来看,免疫印迹法相对更为繁琐。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在结果解读和应用方面,免疫荧光法能够提供直观、定位准确的抗原分布信息,有助于研究细胞的结构和功能。而免疫印迹法则能够揭示蛋白质的表达水平、分子量和相互作用,为疾病诊断、药物研发和生物学机制研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]此外,免疫荧光法和免疫印迹法在应用领域上也有所不同。免疫荧光法广泛应用于细胞生物学、微生物学、免疫学等领域,特别是在病毒检测、细胞信号转导和细胞凋亡等研究中发挥着重要作用。而免疫印迹法则更多地应用于分子生物学、生物化学和病理学等领域,对于研究蛋白质的结构、功能和调控机制具有重要意义。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]免疫荧光法和免疫印迹法优缺点介绍:[/font][/b][font=宋体] [/font][table][tr][td][font=宋体]技术[/font][/td][td][font=宋体]优点[/font][/td][td][font=宋体]缺点[/font][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center][font=宋体]免疫荧光法[/font][/align][/td][td][font=宋体]特异性强[/font][/td][td][font=宋体]非特异性染色问题尚未完全解决[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]敏感性高[/font][/td][td][font=宋体]操作程序较复杂[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]速度快[/font][/td][td][font=宋体]需要特殊的昂贵仪器(荧光显微镜)[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]早期诊断价值[/font][/td][td][font=宋体]染色标本不能长期保存[/font][/td][/tr][tr][td=1,3][align=center][font=宋体]免疫印迹法[/font][/align][/td][td][font=宋体]操作简便[/font][/td][td][font=宋体]对于低丰度的抗原可能不够敏感[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]所需实验材料相对简单[/font][/td][td][font=宋体]无法提供抗原在细胞或组织中的定位信息[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]对某些特定抗原的检测具有较高的灵敏度[/font][/td][td][font=宋体]需要一定的实验技能和经验[/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述,免疫荧光法和免疫印迹法是两种具有不同特点和应用领域的实验技术。免疫荧光法注重抗原的定位和定量分析,操作简便直观;而免疫印迹法则关注蛋白质的表达和相互作用,操作相对复杂但能提供深入的信息。在实际应用中,我们需要根据研究目的和需求选择合适的技术手段,以获取准确、可靠的实验结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光([/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]IF[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b])检测服务[/b][/url],更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 如何使用酶联免疫分析仪检测生物实验

    如何使用酶联免疫分析仪检测生物实验

    [size=16px]  酶联免疫分析(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子(如蛋白质、抗体、激素等)在样本中的定量或定性测量的实验技术。以下是使用酶联免疫分析仪检测生物实验的一般步骤:  准备实验材料和试剂:  样本:可以是血清、尿液、细胞上清等。  标准品:已知浓度的目标分子,用于绘制标准曲线以计算未知样本中的浓度。  酶标抗体:用于与目标分子结合的抗体,被标记上酶以便后续检测。  捕获抗体:涂覆在微孔板上,用于捕获目标分子和酶标抗体复合物。  涂覆微孔板:  向微孔板中加入捕获抗体,使其在孔底吸附。  将孔板放置在冰箱或其他适当条件下孵育,让抗体吸附稳定。  加入样本和标准品:  加入待测样本和一系列已知浓度的标准品到不同的孔中。  标准品的浓度通常是一个浓度梯度,用于绘制标准曲线。  孵育和洗涤:  孵育样本和标准品,使目标分子与捕获抗体结合。  之后,使用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。  加入酶标抗体:  加入带有酶标记的抗体,它会与样本中的目标分子结合形成复合物。  孵育和洗涤:  孵育酶标抗体,使其与捕获的目标分子结合。  再次用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。  加入底物:  加入含有底物的溶液。底物被酶催化后会产生颜色或荧光,信号强度与目标分子的浓度成正比。  停止反应:  加入停止液终止底物的反应,防止颜色或荧光的继续产生。  测量信号:  使用酶联免疫分析仪读取每个孔的颜色或荧光信号强度。  将信号与标准曲线进行比较,计算样本中目标分子的浓度。  数据分析:  根据标准曲线和信号强度,计算样本中目标分子的浓度。  请注意,每个实验都需要根据具体的样本和目标分子进行优化和调整。操作过程中应严格遵循实验操作规程,以确保结果的准确性和可重复性。如果你是初次进行ELISA实验,建议在有经验的实验室或专业人士的指导下进行。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311608055074_5122_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 酶联免疫吸附试验标准操作规程(SOP)

    名称:酶联免疫吸附试验标准操作规程(SOP)关键词:ELISA 抗原 抗体目的:1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。2、研究抗酶抗体的合成。3、显现微量的免疫沉淀反应。4、定量检测体液中抗原或抗体成份。背景知识:ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。原理:ELISA是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。主体内容:【操作步骤】方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。  2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。  3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。  4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟。  5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。  6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测O•D值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔O•D值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。  方法二 用于检测未知抗体的间接法:      用包被缓冲液将已知抗原稀释至1~10μg/ml,      每孔加0.1ml,4℃过夜。次日洗涤3次。              ↓      加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔      中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)              ↓      于反应孔中,加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml,      37℃孵育30-60分钟,洗涤,最后一遍用DDW洗涤。[font='Helvetica Neue', Helvetica, Arial

  • 酶联免疫法(Elisa)检测系统有用的吗??

    采用酶联免疫法(Elisa)检测系统,需要配置仪器主要为酶标仪。该系统2小时左右出结果。可以检测氯霉素、链霉素、四环素、磺胺、硝基呋喃、庆大霉素、新霉素、沙星等。大家知道每个项目的具体检出限值吗?

  • HRP标记的二抗能做免疫荧光吗?

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service][b]免疫组织化学[/b][/url]([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])是一种实验技术,通过使用一抗来检测组织切片中细胞内的蛋白质(抗原)。在间接检测法中,一抗常与辣根过氧化物酶([/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体])偶联的二抗结合。最后,利用如[/font][font=Calibri]DAB[/font][font=宋体]等底物来显现染色,以可视化抗原的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]辣根过氧化物酶标记的二抗通常用于如免疫印迹、酶联免疫吸附试验以及免疫组织化学等应用。然而,对于免疫荧光而言,二抗需要带有在激发光下激发的荧光基团,常用的标记物为异硫氰酸荧光素[/font][font=Calibri](FITC)[/font][font=宋体]和罗明达[/font][font=Calibri]B200(RB200)[/font][font=宋体]标记的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]因此,[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]标记的二抗不能直接用于免疫荧光。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]使用[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗时,优化 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]实验的简便技巧[/font][font=Calibri]:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]①选择合适的 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗[/font][/font][font=宋体][font=宋体]务必确保[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗与一抗的相容性。举个例子,如果一抗在兔体内制备,则应使用抗兔 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。如需了解更多技巧,请查看我们的二抗选择指南。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②在 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]染色过程中,如何选择 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗的初始稀释度?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗的最佳稀释度取决于一抗。我们建议在 [/font][font=Calibri]1/1,000 [/font][font=宋体]至 [/font][font=Calibri]1/100,000 [/font][font=宋体]这一范围内进行试滴定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③对于 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]标记的二抗,建议使用哪种缓冲液?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]可使用含[/font] [font=Calibri]TBS [/font][font=宋体]的 [/font][font=Calibri]1% BSA[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]Abcam [/font][font=宋体]建议使用 [/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体],因为 [/font][font=Calibri]TBS [/font][font=宋体]的背景比 [/font][font=Calibri]PBS [/font][font=宋体]更干净。如果仍然遇到高背景染色,您可以增加 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]浓度或使用含 [/font][font=Calibri]5% [/font][font=宋体]牛奶的 [/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]请注意,二抗可能与组织中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应。用二抗种属的普通血清预处理组织,可最大限度地减少交叉反应。一抗孵育前,使用普通血清进行封闭还可避免[/font] [font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]受体与一抗和二抗的结合。加入 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]能够减少疏水作用引起的非特异性结合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④是否需要预吸附二抗?[/font][font=宋体][font=宋体]预吸附二抗可减少非特异性背景,因为它们不太可能表现出种属交叉反应性,或与预吸附种属的内源性抗原反应。二抗应针对样本来源种属进行预吸附。例如,对人体组织或细胞进行染色时,建议使用预先吸附了抗人血清的[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤什么是证明二抗特异性染色的良好对照?[/font][font=宋体][font=宋体]为了证明二抗与一抗发生特异性反应,我们建议进行对照试验,即添加不含一抗的[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。如果在对照样本中观察到染色,则结果表明 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗与组织上的内源性免疫球蛋白发生非特异性反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥孵育时间[/font][font=宋体][font=宋体]室温孵育[/font] [font=Calibri]1 [/font][font=宋体]小时即可。如果信号较弱,可于 [/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]孵育过夜。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看优质[url=https://cn.sinobiological.com/category/secondary-antibodies-list][b]二抗[/b][/url]列表页:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/secondary-antibodies-list[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • 免疫学检测优缺点有哪些?免疫学检测方法分享

    [font='calibri'][size=13px]免疫学检测优缺点有哪些?免疫学检测方法分享[/size][/font]免疫学检测优缺点介绍:免疫学检测具有快速、简便、高灵敏度和特异性等优点,因此在医学诊断和治疗中广泛应用。但是,免疫学检测也存在一些缺点,例如价格较高,对于某些特定的毒素可能无法检测,并且检测过程中可能会受到多种因素的干扰,例如操作不规范、实验条件不严格等。总之,免疫学检测具有很多优点,但也存在一些缺点,需要在实验设计、操作规范和质量控制等方面加强管理,以提高检测的准确性和可靠性。免疫学检测方法包括以下几种:①抗原抗体反应的相关检测,主要是免疫组化、免疫荧光、血凝抑制、放射免疫等。其中,免疫组化是应用标记的特异性抗体,在组织细胞原位,通过抗原抗体反应和酶底物的显色反应,对细胞中的抗原进行定位、定性的检测方法,是比较常用的一种方法。②免疫细胞的检测,主要包括细胞毒试验、FCM流式细胞术等。其中,细胞毒试验常用于肿瘤的免疫移植、排斥反应和病毒感染等方面的研究。③酶联免疫吸附试验(ELISA),是目前应用最广泛的免疫检测方法。该方法是将二抗标记上酶,抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来,根据酶作用底物后的显色颜色变化来判断试验结果,其敏感度可达ng水平。④免疫金胶体技术、胶体金技术等,是将二抗标记上胶体金颗粒,利用抗原抗体间的特异性反应,最终将胶体金标记的二抗吸附于渗滤膜上,此方法简单、快速、广泛应用于临床筛查。义翘神州建立了全面的免疫学检测平台,义翘神州免疫学检测服务优势:? 拥有成熟的免疫检测体系;? 大量优质的蛋白和抗体产品支撑;? 先进的实验仪器,经验丰富的技术员;? 优良的实验环境,完善的实验平台,为您提供最优质的服务。同时包括ELISA、Western Blot、IHC、IF、Flow Cytometry、IP/Co-IP、Biacore、Octet等检测技术。更多免疫学检测服务尽在https://cn.sinobiological.com/services/immunoassay-service

  • 【转帖】酶联免疫吸附试验及其应用

    近二十几年来,免疫学分析方法发展很快,特别是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光(IFA)和60年代的放射免疫(RIA)分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的高效生物催化作用,一个酶分子在数分钟内可以催化几十几百个底物分子发生反应,产生了放大作用,使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来,这种技术被称为酶联免疫吸附试验法(Enzyme—Linked Immunosorbent Assay,ELISA),本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相继分别报道后,现已引起广泛重视。 ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面: 1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。 2、研究抗酶抗体的合成。 3、显现微量的免疫沉淀反应。 4、定量检测体液中抗原或抗体成份。 二、方法的基本原理和种类 ELISA的基本原理有三条: (1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性; (2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性; (3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。 由于ELISA法一方面是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上,因而,具有特异性。而另一方面又由于酶标记抗原或抗体是酶分子与抗原或抗体分子的结合物,它可以催化底物分子发生反应,产生放大作用,正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一种既敏感又特异的方法。

  • 黄曲霉毒素B1用酶联免疫法检测的干扰因素很多

    从蒙牛黄曲霉毒素M1超标后,社会更加关注黄曲霉毒素的问题。现在黄曲霉毒素的检测方法有很多,其中酶联免疫法是最经济快速的。然而在用试剂盒检测黄曲霉毒素B1时,却会遇到检测结果与液质检测结果偏离较大的情况。是黄曲霉毒素B1的酶联免疫法检测 的干扰因素很多吗?在饲料粮食等中有哪些东西能干扰检测?又如何去除这些干扰?

  • 免疫学检测形成的原因有哪些?免疫学检测包括哪些?

    [font='calibri'][size=13px]免疫学检测形成的原因有哪些?免疫学[/size][/font][font='calibri'][size=13px]检测包括哪些?[/size][/font]免疫学检测形成的原因:免疫学检测是基于免疫系统对外来物质或抗原的反应而产生的,可分为体液免疫学检测和细胞免疫学检测两大类。体液免疫学检测是通过血液、唾液、乳汁等体液样本中的免疫球蛋白、补体、免疫复合物等成分的含量及其分布来反映机体的免疫状态。当机体受到病原体或某些生物物质的刺激时,免疫系统会产生相应的抗体和细胞因子等免疫反应,这些免疫反应产物可通过体液免疫学检测方法进行检测。细胞免疫学检测是通过检测机体内的免疫细胞和免疫分子的含量及其分布来反映机体的免疫状态。当机体受到病原体或某些生物物质的刺激时,免疫系统会产生相应的抗原提呈细胞,并引导记忆细胞和效应细胞的产生,这些记忆细胞和效应细胞可以在特定情况下识别和消灭病原体或肿瘤细胞,这些细胞和效应细胞本身也可以被检测出来。总之,免疫学检测的目的是通过检测机体的免疫反应,了解机体的免疫状态,为疾病的诊断、治疗和预防提供重要的依据。免疫学检测包括哪些?免疫学检测是指通过各种方法检测机体对病原体或某些生物物质的免疫反应程度,以及机体内的免疫细胞、免疫分子和免疫活性物质的含量及其分布等情况的一种医学技术。免疫学检测广泛应用于各种疾病的诊断、治疗和预防,包括感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤免疫学诊断等。以下是一些常见的免疫学检测项目:体液免疫学检测:主要包括免疫球蛋白的测定,如IgA、IgM、IgE等;补体检测,如总补体溶血活性、补体C1、C2等;免疫复合物检测,如抗体-抗原复合物、补体-抗体复合物等;细胞免疫学检测:主要包括T细胞亚群分析、B淋巴细胞分化抗原检测、自然杀伤细胞抗体检测、T细胞活化抗体检测等;抗体检测:如抗药抗体、中和抗体等;细胞因子检测:如白细胞介素-2、-4、-6等;自身抗体检测:如抗核抗体、抗胰岛素抗体等;感染免疫检测:如病毒特异性抗体、细菌特异性抗体等。总之,免疫学检测是一种非常重要的医学技术,可以帮助医生判断机体的免疫状态,为疾病的诊断和治疗提供重要的依据。免疫学检测是根据抗原、抗体反应的原理,利用已知的抗原检测未知的抗体或利用已知的抗体检测未知的抗原,可定性、定位和定量的检测。依托自主研发生产的优质抗体、蛋白试剂、先进的实验仪器以及经验丰富的技术人员,义翘神州建立了全面的免疫学检测平台,包括ELISA、Western Blot、IHC、IF、Flow Cytometry、IP/Co-IP、Biacore、Octet等检测技术。义翘神州免疫学检测服务包含:①WB/Sally Sue高通量检测服务②[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service]流式细胞检测服务[/url]③免疫组化检测服务④多重免疫荧光和免疫组化服务⑤免疫荧光检测服务⑥HE染色及特殊染色服务⑦ELISA/ELISpot检测服务⑧IP/Co-IP检测服务⑨TMA芯片定制服务更多详情可以查看:https://cn.sinobiological.com/services/immunoassay-service

  • 多重免疫荧光染色步骤和原理

    [font=宋体][font=宋体]多重荧光免疫组化技术[/font] [font=Calibri](Multiplex immunohistochemical[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]mIHC) [/font][font=宋体]也称作酪氨酸信号放大 [/font][font=Calibri](Tyramide dignal amplification[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]TSA) [/font][font=宋体]技术,是一类利用辣根过氧化酶 [/font][font=Calibri](Horseradish Peroxidase, HRP) [/font][font=宋体]对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]这一技术基于酪胺信号的放大效应,实现对单个细胞或组织样本上多个目标靶点的同时检测。这为全面研究细胞组成、细胞功能以及细胞间的相互作用提供了强大的工具。通过多重荧光免疫组化技术,科学家们可以更深入地了解细胞的奥秘,揭示生命现象的复杂性。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]mIHC [/font][font=宋体]实验原理及流程[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]TSA [/font][font=宋体]技术采用 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]标记的二抗,[/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]催化加入体系的 [/font][font=Calibri]TSA [/font][font=宋体]衍生荧光染料,生成活化荧光底物,活化底物可与抗原上的酪氨酸共价结合,将信号共价结合到抗原上。之后用热修复洗去非共价结合的抗体,再换下一种一抗来第二轮孵育,换另一种荧光素底物,如此往复就可实现多重标记。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]原理:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]带有染料标记的底物酪胺[/font] [font=Calibri](T) [/font][font=宋体]分子在过氧化氢氧化环境下,被抗体或探针固定的 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]转化为具有短暂活性的中间状态 [/font][font=Calibri](T*)[/font][font=宋体],然后被激活的中间态分子 [/font][font=Calibri](T*) [/font][font=宋体]迅速与相接蛋白分子的富含电子区域 [/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]酪氨酸残基[/font][font=Calibri]) [/font][font=宋体]进行稳定的共价结合,未被标记的酪胺分子将被洗脱,借此实现对抗原的特异性染色。由于相接的蛋白 [/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]包括 [/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体],抗体,目标抗原[/font][font=Calibri]) [/font][font=宋体]都含有大量的酪氨酸结合位点,所以目标抗原处会富集大量标记分子,使信号被有效放大 。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]多重免疫荧光染色的步骤包括样品制备、抗原诱导、抗原解露等。[/font][/b][font=宋体]具体如下:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①样品制备:根据细胞或组织的不同,选择不同的处理方式。对于细胞样品,需要固定和渗透化处理以保持其形状和蛋白质结构。对于组织样品,需要切片并进行染色前的去脂处理。[/font][font=宋体]②抗原诱导:如果目标标记物是蛋白质,那么需要选择适当的抗体来识别目标蛋白质。抗体可以人工合成或从动物体内提取。[/font][font=宋体]③抗原解露:对于细胞样品,可以利用活液解离细胞,并将细胞固定在载玻片上。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]与 [/font][font=Calibri]mIHC[/font][font=宋体]区别与联系[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]免疫组化[/b][/url],是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对其进行定位、定性的研究。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]简单来说,[/font][font=Calibri]mIHC [/font][font=宋体]属于 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]的升级版本![/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Tips[/font][font=宋体]:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]相同点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]能够完整显现组织原位形态信息。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不同点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]常规免疫组化的分析属于定性分析,其判断大多依赖于经验,其分析结果会有差异。而多重荧光免疫组化属于定量分析,其利用软件可对组织中的细胞进行精准的结果分析。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]常规免疫组化受传统染色成像的限制,靶标少于 [/font][font=Calibri]3 [/font][font=宋体]个,无法完整分析组分信息。而多重荧光免疫组化可实现多因子共定位,可以获取更多的生物信息,且样本需求量较少。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供的[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b]TSA[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b]法多重荧光免疫组化服务[/b][/url],有一系列屏蔽自发荧光干扰的手段,配合激光共聚焦显微镜的拍摄条件,提供更优质的图像质量,收获更特异的染色结果。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

  • 真菌毒素检测仪介绍

    真菌毒素检测仪介绍

    [size=16px]  真菌毒素检测仪介绍  真菌毒素检测仪是一种快速检测分析设备,主要用于粮油系统、粮站、粮油监控中心、粮油饲料生产加工、食品加工贸易、畜禽养殖户自检、工业和商业质量监督部门等场所,用于检测粮食、饲料等样品中多种真菌毒素的含量,如黄曲霉毒素、呕吐毒素等。  该仪器采用一体化设计,集成了现代光电测量技术和数据处理技术,具有快速、准确、操作简便等特点。它通过检测样品中真菌毒素与特异性抗体结合后产生的荧光信号强度,计算出真菌毒素的含量。  真菌毒素检测仪具有以下特点:  稳定性高:采用进口荧光微球,颗粒均一,从源头保证产品稳定性好,批次内、批次间重现性好。试剂条可常温运存,无需冷藏。检测后,试剂条烘干后可保存一年,实现结果的可追溯性。  快速准确定量:集胶体金快速、酶联免疫定量、色谱准确检测的特点于一身,实现快速准确定量检测。  内置定量标准曲线:仪器内置标准曲线,无需使用标准品,检测时无需做标准曲线,既节省了成本,也避免了操作人员与呕吐毒素的接触,保护操作人员的安全。  自动化程度高:仪器内置操作系统,无需外接电脑,操作简便。  检测项目多:可检测黄曲霉毒素、呕吐毒素等多种真菌毒素。  总之,真菌毒素检测仪是一种高效、准确的检测设备,对于保障食品安全和人身健康具有重要意义。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/11/202311301801350787_8748_6098850_3.jpg!w690x690.jpg[/img][/size]

  • ELISA与ELISpot检测有什么区别?酶联免疫吸附测定服务优势

    [align=left][font='calibri'][size=13px][color=#232323]ELISA[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]与[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]ELISpot[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]检测有什么区别?[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]酶联免疫吸附测定[/color][/size][/font][font='calibri'][size=13px][color=#232323]服务优势[/color][/size][/font][/align][font='宋体'][size=16px]酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)是指将可溶性的抗原或抗体结合到聚苯乙烯等固相载体上,利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]酶联免疫斑点技术 (enzym[/size][/font][font='宋体'][size=16px]e-linked immunospot assay, ELISpot) 是细胞免疫学研究中最敏感的检测方法之一,能够区分活化的T细胞亚群,可以在单细胞水平对抗体分泌细胞及细胞因子分泌细胞进行检测。在疫苗研究中,ELISpot是一种标准工具,用于通过测量激发强大T细胞反应的能力 (通常是干扰素-γ的分泌) 来确定疫苗的有效性。为满足客户的检测需求,义翘神州可提供ELISA检测服务和ELISpot检测服务。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]酶联免疫吸附测定(ELISA)检测服务[/size][/font][font='宋体'][size=16px]优势:拥有庞大的产品库:6,000多种优质ELISA应用抗体,500多种ELISA试剂盒。技术人员长期从事于抗体质控工作,经验丰富,实验结果可靠。价格优惠[/size][/font][font='宋体'][size=16px]周期:3-5个工作日[/size][/font][font='宋体'][size=16px]服务类型:双抗夹心法ELISA检测、间接法ELISA检测、竞争法ELISA检测[/size][/font][font='宋体'][size=16px]ELISpot检测服务[/size][/font][font='宋体'][size=16px]优势:[/size][/font][font='宋体'][size=16px]高灵敏度:百万分之一阳性细胞检测率。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]高通量检测 (一块 ELISpot 板可作 96 test):每天可检测数百个样品。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]直观、可信度高。[/size][/font][font='宋体'][size=16px]周期:[/size][/font][font='宋体'][size=16px]2-3个工作日[/size][/font][font='宋体'][size=16px]交付内容[/size][/font][font='宋体'][size=16px]提供斑点图像、阴阳性检测结果、对比免疫反应强弱及细胞因子分泌量比较等多项结果分析数据[/size][/font][font='宋体'][size=16px]这两项服务义翘神州均可提供![/size][/font]

  • 【求助】双流相酶联免疫检测读数仪和酶标仪有什么区别

    请问双流相酶联免疫检测读数仪和酶标仪有什么区别?就是GB5413.37-2010上第4法的仪器,和普通的酶标仪有什么区别?急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。急需。。。。谢谢。。

  • 如何使用酶联免疫分析仪检测环境污染

    如何使用酶联免疫分析仪检测环境污染

    [size=16px]  酶联免疫分析仪(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子,如蛋白质、抗体、激素等的方法。在环境污染领域,ELISA可以用于检测特定污染物或污染指标,例如有毒物质、重金属、细菌等。以下是使用ELISA检测环境污染的一般步骤:  准备样本和试剂: 收集环境样本,如土壤、水、空气等,然后准备ELISA所需的试剂,包括酶标记抗体、底物、洗涤缓冲液等。  涂覆固相载体: 将检测目标的抗原或抗体涂覆在固相载体(如微孔板)的表面上。这可以通过将样本或试剂溶液加入微孔板孔中,然后让其在一定条件下(通常在4°C下过夜)发生吸附。  样本处理: 将收集到的环境样本处理成适合ELISA检测的形式。这可能包括提取样本中的目标分子,去除干扰物质等。  添加样本: 将处理后的样本加入涂有抗原或抗体的微孔板中,使样本中的目标分子与固相载体表面的抗体结合。  洗涤: 为了去除非特异性结合物质,需要多次用洗涤缓冲液清洗微孔板,以确保只有特异性的结合物质保留在固相载体上。  加入酶标记抗体: 加入酶标记的二抗,这些抗体能够与目标分子结合。酶标记抗体与固相载体上的抗体形成“夹心”结构,将目标分子夹在中间。  洗涤: 同样,用洗涤缓冲液清洗以去除非特异性结合物质。  添加底物: 加入底物,使其与酶标记结合,产生可量化的信号。底物的酶反应会生成染色物质,其颜色的强度与目标分子的浓度成正比。  停止反应: 当染色反应达到适当的程度后,添加停止剂停止酶反应,防止颜色继续增加。  测量: 使用ELISA阅读器测量微孔板中每个孔的吸光度或荧光强度。根据标准曲线或内部对照,可以确定样本中目标分子的浓度。  数据分析: 根据测量的信号强度,结合标准曲线或内部对照,计算出样本中目标分子的浓度。  需要注意的是,ELISA的操作步骤可能因具体的污染物种类和ELISA试剂盒的种类而有所不同。在进行ELISA实验之前,建议详细阅读所使用试剂盒的说明书,并在实验过程中严格遵循操作步骤和安全注意事项。同时,确保实验过程中的样本处理、实验环境和仪器都保持干净,以防止误差和干扰。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311601298825_1296_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 酶联免疫吸附法检测黄曲霉毒素b1的原理

    B 1 的酶联免疫吸附测定原理:利用固定相酶联免疫吸附原理,将 AFB 1 特异性抗体包被于聚苯乙烯量反应板的孔穴中,再加入样品提取液(未知抗原)及酶标 AFB 1 抗原(已知抗原),使两者与抗体之间进行免疫竞争反应,然后加酶底物显色,颜色的深浅取决于抗体和酶标 AFB 1 抗原结合的量 , 即样品中 AFB 1 多,则被抗体结合酶标 AFB 1 抗原少,颜色浅,反之则深,用目测法或仪器法与 AFB 1 标样比较判断样品中AFB 1 的含量。最低检测浓度为0 。 01ug/kg 。

  • 【分享】沙丁胺醇酶联免疫检测试剂盒

    食品安全检测试剂盒。现已有氯霉素、克伦特罗(瘦肉精)、磺胺嘧啶、沙丁胺醇、链霉素等快速检测试剂盒。沙丁胺醇酶联免疫检测试剂盒检测灵敏度达0.1ng/ml。ruojun 楼主,这里是技术交流,不能做广告,你可以选择技术特点,检测过程,问题等进行。

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