自动微生物生化鉴定系统

全自动微生物生化鉴定系统什么品牌的性价比高。梅里埃的大约70w，心里承受能力是30w。求高人指点

[size=4] 传统的微生物分离、鉴定方法操作繁杂，周期长，准确性差，灵敏度低，对实验室技术人员的专业技术、操作技能、工作经验要求极高，快速和准确获得细菌的鉴定及药敏结果是非常必要的。近年来随着计算机的发展及广泛应用，微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。先后出现了许多全自动细菌鉴定与药敏系统，比如VITEK 系统、MicroScan WaikAway系统、MicroScan AS-4 微生物分析仪、PHOENIXTM系统等。这些技术的应用，为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序，大大提高了细菌鉴定的准确性,在很大程度上提高了工作效率，但同时也应注意一些问题，本文对几种常用的鉴定系统在临床微生物检验中的应用情况做一综述。[back=rgb(243, 40, 255)]1 全自动微生物鉴定系统的基本原理 [/back] 全自动微生物鉴定系统是基于生物信息编码（数码）鉴定细菌的新方法。数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。 鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础，而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。大多鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化，色原性或荧光原性底物的酶解，测定挥发或不挥发酸，或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。 药敏试验分析系统的基本原理是将抗生素微量稀释在条孔或条板中，加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育，通过测定细菌生长的浊度，或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解，观察细菌的生长情况。在含有抗生素的培养基中，浊度的增加提示细菌生长，根据判断标准解释敏感或耐药。[/size]

希望能够帮助初使用Biolog微生物自动鉴定仪的朋友们，同时望大家提宝贵意见，谢谢！[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=55127]Biolog微生物自动鉴定系统使用[/url]

准备开展微生物鉴定项目，目前有生化法、PCR法、MALDI TOF等等，请问：哪种方法做起来最方便，出结果更快，结果更准确，成本更低呢？

请问不同点在哪里？高通量实时荧光定量PCR系统：瑞士，Roche，型号是Ligtcler 480全自动荧光法微生物鉴定药敏分析系统：英国，SENSITITRE，型号是ARIS是不是前者可用于致病菌，微生物的定性定量检测，而后者只能是定性的筛选快速检测啊？并且想具体问下PCR如何用于致病菌、转基因食品的检测？大概原理，因为我本身不是读这个专业的，单位决定买这两台仪器，但是单位派我去开个什么购买仪器专家听证会之类的，所以想问问，因为资料上我看得不是很明白

各位老师，我想请问一下食品伙伴网的数据库中，有微生物鉴定系统，这个系统的相似性要达到多少才说明确定是某个菌种啊？还有相似性如何解释？

历史上对微生物尤其是细菌的鉴定，主要是根据其形态、染色和生化特征，进行手工分类鉴定。20世纪70年代以来，随着微生物学和光电、色谱等技术的发展和计算机的广泛应用，微生物鉴定的自动化逐步成为现实。目前常见的微生物鉴定原理有以下几种：　　1． 酸碱反应：细菌代谢碳水化合物，一般产生酸性物质；分解蛋白质或氨基酸，则产生碱性物质，根据不同细菌的理化性质不同，测定细菌的分解底物导致PH值变化而产生的不同颜色，来判断菌种。　　2． 酶谱分析：根据细菌生长产生酶的特性，在测定底物中加入基质。使其与细菌生长过程中的酶结合成荧光物质，可以在较短的时间判定菌种。　　3．高压液相色谱分析：用气相色谱检测细菌在液体培养基中的代谢产物（挥发和非挥发脂肪酸），结果与数据库数据比较后，得出鉴定结果。　　4．代谢指纹法：20世纪80年代初，美国BIOLOG公司开发了一种新的微生物鉴定方法-代谢指纹法，并将其应用于微生物的自动化检测。其原理是根据细菌对碳源（或氮源）利用的差异来区别和鉴定细菌，不同的细菌会利用不同碳源（或氮源）进入新陈代谢过程（称为呼吸），而对其他一些碳源（或氮源）则无法利用，将每种细菌能利用和不能利用的一系列碳源（或氮源）进行排列组合，就构成了该种细菌特定的代谢指纹，由于细菌在利用碳源进行呼吸时，会发生一系列的氧化-还原反应，产生电子，TTC（四唑紫，2，3，5-TriphenylTetrazoliumChloride）在呼收电子后，会由无色的氧化型转变为紫色的还原型，通过肉眼观察或计算机控制的读数仪，将反应结果同数据库中的指纹进行比对，从而得到细菌的鉴定结果。　　BIOLOG公司的基于代谢指纹法原理的细菌鉴定系统，在全球拥有二十多项专利，该系统在在96孔板条上实现95个反应，大大提高了鉴定的准确率，代谢指纹技术的运用，使该系统与传统的酸碱或细菌的生长反应相比。细菌鉴定的范围更为广泛。目前，BIOLOG的微生物鉴定系统不仅能够鉴定常见的肠杆菌、芽孢杆菌、棒状杆菌、嗜血杆菌、厌氧菌、酵母样真菌、丝状真菌等近2000种微生物，几乎覆盖了所有重要的人体、动植物微生物和大部分环境微生物。　　现在，美国半数以上的州立实验室和国家疾控中心（CDC）都在使用BIOLOG公司的产品，十几年来，BIOLOG公司在全球六十多个国家和地区共销售了1700多套微生物鉴定系统********************************************************************（该段有广告内容）。

一、微生物数码鉴定法 早在七十年代中期，一些国外公司就研究出借助生物信息编码鉴定细菌的新方法。这些技术的应用，为医学微生物检验工作 提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序，大大提高了细菌鉴定的准确性。目前，微生物编码鉴定技术已经得到普遍应用，并早已商品化和 形成独特的不同细菌鉴定系统数显生化培养箱。如API、Micro-ID、RapID、Enterotube和Minitek等系统。这种鉴定 系统是自动化鉴定系统的基础。 （ 一）数码鉴定法基本原理数码鉴定是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式，给每种细菌的反应模式赋予一组数码，建立数据库或编成检索 本。通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字（编码），查阅检索本或数据库，得到细菌名称。其基本原理是计算并 比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。随着电脑技术的进步，这一过程已变得非常容易。 1．数显生化培养箱 简要介绍计算步骤：（1）出现频率（概率）的计算：将记录成阳性或阴性结果转换成出现频率：①对阳性特征，则除以100即得。②对阴性特征，除以1 00的商被1减去即可。③说明：对“0”和“100”，因这2个数太超量，为了使结果不出现过小或过大，而用相似值0.01或0 .99值代替。（2）在每一个分类单位中，将所有测定项目的出现频率相乘，得出总出现频率。（3）在每个分类菌群中的所有菌的总出现频率相加，除以一个分类单位的总出现频率，乘100，即得鉴定%（%id）（4）在每个菌群中，再按%id值大小顺序重新排列。将未知菌单次总发生频率除以最典型反应模式单次总发生频率，得到模式频率T 值，代表个体与总体的近似值。T值越接近1，个体与总体越接近，鉴定价值越大。按%id大小排序，将相邻两项的%id之比为R， 代表着首选条目与次选条目的差距，差距越大，价值越大。如果%id≥80，参考T及R值可作出鉴定。 2．在编码检索本中检索数据谱得出的结果有以下几种形式（以API鉴定系统为例）。 （1）有此数码谱:①有一个或几个菌名条目及相应的鉴定值（%id和T值）。②对鉴定结果好坏的评价，最佳……等。 ③用小括号列出关键的生化结果及阳性百分率。④有时，鉴定结果不佳或有多条菌名条目,需进一步补充试验项目才能得出良好的鉴定结 果。⑤指出某些注意要点，需用“推测性鉴定”，并将此菌送至参考实验室；需用“血清学鉴定”，作进一步的证实等。 （2）无此数码谱：可能有以下原因：①此生化谱太不典型。②不能接受，鉴定值低（%id＜80.0）。③可疑。需进一步确认是否 纯培养，重新鉴定，可与供应商技术服务部联系。3. 结果解释（1）如果排序第一的细菌%id≥80.0，则可将未知菌鉴定在此条目中，并按%id值的大小对鉴定的可信度作出评价。%id≥ 99.9和T≥0.75为最佳的鉴定；%id 99.0~98.9之间，T≥0.5为很好的鉴定 数显恒温水浴锅 恒温培养摇床 omega试剂盒

红外微生物鉴定系统可能算是比较新的东西，有知道的版友说一说吗？

如题，我觉得从成本来看生化鉴定比较好

温度自动检定系统是集计算机技术、电子技术、自动测试技术于一体的自动化检定系统。该系统以计算机为主体，由六位半数字多用表、低热电势扫描开关、高稳定控温仪、通用打印机和专用软件组成。主要用于自动检定各种工作用热电偶、热电阻，整个检定过程除需要检定员将热电偶/热电阻捆扎、接线外，其余均在计算机控制下由系统自动完成。还可以半自动检定水银温度计、压力式温度计、双金属温度计等。因此，实现检测迅速、准确、避免人为误差，提高了测量的准确度，并减轻了检定人员的劳动强度。该系统可广泛用于计量、军工、电力、石油、冶金、化工等部门。

单位实验室有两台生物安全柜和一台全自动生化分析仪，已使用1年，最近省、市卫计委来检查是都提出要校准，可是实在是不知道哪里可以校准。请各位老师指点

做食品中微生物检测，想买一台生化鉴定仪，不知道大家用的是哪个品牌的，价格与实际使用效果如何？看网上有推荐梅里埃与BD公司的？有用过的吗？

19世纪末“正电荷粒子束在磁场中发生偏转”被发现后，1912年世界上第一台质谱仪在英国面世，从此一种通过测量离子电荷质量比，而进行样品成分和结构分析的方法在生物学及医学上大放异彩。质谱以其灵敏度高、特异性强、分析速度快、多指标同时检测等特点跻身高端定量检测分析仪器行列。　　分辨率、灵敏度、质量范围、质量测定准确性是衡量质谱的主要技术指标。分辨率R是指相邻两个峰被分离的程度，是质谱仪区别两个峰的能力指标。灵敏度的指标实际上是仪器综合性能的反映，因为它与样品、分辨率、扫描速度、进样方式以及电离方式密切相关。磁质谱仪器的质量范围与加速电压有关，在仪器最高加速电压下可测的最高值为范围指标，加速电压降低，范围加大，但灵敏度下降。　　质谱工作原理，是将样品分子经过离子化后，利用其不同质荷比（m/z）的离子在静电场或磁场中受到的作用力不同而改变运动方向，使其在空间上分离，最后通过收集和检测这些离子得到质谱图谱，实现成分和结构分析。　　[b]质谱仪虽种类繁多，　　但每种仪器结构可概括为以下6部分：[/b]　　1.进样口：直接进样或接其他仪器，用于样品的引入。　　2.真空系统：用于维持质量分析器至检测器部分的高真空状态，使离子能够在电磁场作用下自由飞翔，避免离子在运动途中发生碰撞，导致信号丢失或产生虚假信号。　　3.离子源：用于将样品离子化。　　4.质量分析器：用于将不同质荷比的离子分离开，让他们逐个进入检测器，或只筛选特定质荷比的离子进入检测器。　　5.检测器：通常是电子倍增管或其他，将离子的数量转化为电信号的大小。　　6.数据处理系统：处理检测器捕获到的电信号，获得质谱图，并进一步处理得到所需信息。　　质谱种类多，应用广。从用途（分析对象）可分为：无机质谱、有机质谱、同位素质谱及气体质谱等。从单机或组合可分为：单（一）质谱、串联质谱，单一质谱两个及以上的组合即为串联质谱。广泛应用于化合物结构的定性测定或混合物组成的定量测定。飞行时间质谱仪（MADLI-TOFMS）归类于有机质谱，可应用于临床微生物（包括细菌和真菌）的高通量快速鉴定、疾控中心的微生物传染病原的鉴定与监测、海关进出口商品的检验检疫、食品生产中的微生物检测和工业、农业和环境中的细菌监测等领域。　　目前，服务于临床诊疗的质谱检测项目已达400余项，主要涉及临床化学、临床免疫学以及临床微生物鉴定等领域，也被用于建立临床化学检测项目的参考测量程序和研制参考物质。欧美发达国家从1961开始将质谱技术用于新生儿筛查，目前实现使用串联质谱技术对多个代谢产物进行联合检测，可筛查新生儿遗传代谢病等30种新生儿遗传代谢疾病。国内质谱的临床检测主要用于新生儿遗传筛查、维生素D检测、微生物诊断、药品检测等检测领域。　　相比国外100多年的质谱发展历史，受限于国际离子源与质量分析器的核心专利知识产权保护，国产质谱设备发展备受制约，直到2000年后国内企业才逐步开始质谱技术的积累。从2006年第一台国产商业化质谱——四级杆[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用仪[/color][/url]问世，到17年7月国家质量监督检验检疫总局和中国国家标准化管理委员会发布，18年2月份开始实施的推荐性国标——质谱仪通用规范。短短十年时间，以安图生物为代表的6家国产IVD生产企业陆续推出MALDI-TOF 质谱仪，逐步打破以进口品牌垄断为主的中国质谱格局，努力弥补当前国产质谱仪占有率相对较低，2016年抽样调查中[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]国产化率均不到2%的差距，全力推进MALDI-TOF MS质谱在临床微生物检测领域的发展。[align=center][img=1.jpg]https://i4.antpedia.com/attachments/att/image/20200602/1591081536537269.jpg[/img][/align]　　众所周知，微生物诊断指的是通过病原学和药物敏感性分析为临床传染性疾病的预防、诊断、治疗与疗效观察提供依据。传统微生物快速诊断包括三种方法：　　1.样品的直接检测，例如[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测；　　2.菌体富集后检测；　　3.分离培养后检测。　　传统的生物化学、分子生物学和形态学等方法基于单菌落的生化特征需要菌种的筛选、培养、鉴定等过程，实验时间需要数天不等，耗时耗力，且实验操作较为繁琐，并不能满足临床对检测结果时效性的要求；分子生物学方法进行微生物鉴定大大地提高了灵敏度和时效性，但对工作人员技术要求高，检测成本高，仅针对某些特定细茵，难以满足临床常规要求。因而，样本流转（TAT）时间长仍然是当前制约临床微生物检验发展的主要因素之一。MALDI-TOF MS质谱仪可实现临床对部分微生物传统检测方法的技术替代，通过对未知化合物（菌）所得谱图的分析，进而解析出化合物结构。MALDI-TOF MS快速鉴定经固（液）体培养基短时培养的阳性血培养物中的病原菌，且一次实验可同时多个样本检测，准确率与检测通量均有大幅的提升，一定程度上节省了人力和财力，可适用于微生物室日常工作的血培养阳性标本快速鉴定的方法。从而助力临床微生物检验在感染性疾病诊断、临床用药指导、抗菌药物管理、院内感染控制等多方面均衡发展，将彻底改变微生物实验室的面貌。[align=center][img=1.jpg]https://i4.antpedia.com/attachments/att/image/20200602/1591081550562115.jpg[/img][/align][align=center][font=黑体, SimHei]图.全自动微生物质谱检测系统[/font][/align][align=center][font=黑体, SimHei]（Automated Mass Spectrometry Microbial Identification System）[/font][/align]　　飞行时间质谱仪的质量分析器是一个离子漂移管。由离子源产生的离子加速后进入无场漂移管，并以恒定速度飞向离子接收器。离子质量越大，到达接收器所用时间越长，离子质量越小，到达接收器所用时间越短，根据这一原理，可以把不同质量的离子按m/z值大小进行分离。质谱图，横轴表示单位电荷质量（m/z）；纵轴表示离子流强度，通常以相对强度（相对丰度）来表示。相对丰度以最强的离子流强度定义为100%，其他离子流以其百分比显示。　　进样系统、基质辅助激光解吸电离离子源、飞行时间质量分析器、传感器和电脑是临床微生物鉴定的 MALDI—TOFMS主要组成部分。MALDI—TOFMS鉴定微生物的标志物主要是特异性保守核糖体蛋白。MALDI—TOFMS基于微生物蛋白指纹图谱的特异性峰谱进行鉴定，只需将细菌涂布于靶板，加入基质溶液裂解，室温干燥后即上机检测，获取的质量图谱与数据库中的标准图谱进行自动对比分析，即可获得鉴定结果。鉴定结果全程自动判读、自动分析、自动报告、标本自动卸载，20分钟内可完成96个菌株的鉴定，且检测成本低，仪器使用耗材只需样品板和质谱专用基质，无须其他任何附加试剂，对工作人员的技术要求不高。　　有研究证实，在重症监护室（ICU）临床治疗中，抗生素如果晚一小时准确治疗，病人存活率下降8%。而运用质谱检测技术则可缩短至少1.5天的鉴定时间，为临床救治危急重症患者赢得更多时间。除单一质谱外，串联质谱在美国及欧盟国家商业化应用相对成熟的主要是药物浓度监测、小分子标志物检测、新生儿筛查和维生素检测等。国内除目前已实现商业化的微生物鉴定、新生儿筛查、维生素等临床检测领域外，应拓展质谱在血药浓度监测领域的绝对优势；紧抓质谱在小分子生物标志物在心脑血管和代谢病方面的发展趋势，质谱仪因能敏锐地分析其他设备仪器难以分析的肿瘤生长分泌的微量外泌体，在癌症的液体活检领域，质谱检测也有望跟基因检测分一杯羹。　　质谱作为一个能同时检测大量的化合物的分析器，有望开启IVD检测发展的新篇章。从1953年飞行时间质谱仪原型被设计出，到1955年世界上第一台飞行时间质谱仪诞生，再到国产飞行时间质谱迅猛发展，随着临床对个体化和精准化医疗需求的增加，基于质谱技术的基因组学、蛋白组学、代谢组学等很多研究成果正不断转化至临床实践，值得我们翘首以盼。　　中国质谱仪过去面临着4大挑战，技术发展水平的挑战、进口产品替代的挑战、知识产权保护的挑战以及做强、做大与做大、做强之间的挑战。未来希望国内的质谱仪企业抓住全球市场需求增长率超过10%，以及中国市场远超10%的需求增长，结合市场需求和实际情况，通过自身的努力，将更多精良的产品投入到市场中，从而推动中国质谱行业的快速发展。　　参考文献：　　[1]中国临床微生物质谱共识专家组.中国临床微生物质谱应用专家共识[J]. 中华医院感染学杂志，2016，26（10）　　[2]李永军,Sihe Wang.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]-质谱联用技术临床应用[M].上海科学技术出版社　　[3]中国质量检测设备摸底调研.分析测试百科网.中金公司研究部

0.2MΩ·cm)的标准。三级纯水虽然已经去除了大部分杂质，但其中的离子等杂质浓度还较高，会影响生化分析仪的微量检测，因此必须将三级纯水进一步去离子以达到一级纯水(电阻率≥lOMΩ·cm)的标准才能用于生化检测。1.3.1方法：离子交换树脂法是纯水制备的常用方法，所用的部件就是离子交换纯化柱（罐），包括阴离子交换柱、阳离子交换柱和混合柱等，试剂为阴阳离子交换树脂。阴阳离子交换树脂一般是由苯乙烯聚合成后再通过二乙烯苯交联得到多孔网状骨架结构，然后在骨架上连接活性基团而形成的高分子聚合物。离子交换树脂所连接的活性基团可分为酸性基团和碱性基团两大类型。连接酸性基团的离子交换树脂称为阳离子交换树脂，连接碱性基团的树脂称为阴离子交换树脂。1.2.2原理：①阳离子交换柱原理即硬水软化原理：阳离子交换树脂中的酸性基团有磺酸基(-S03H)、羧基(一COOH)和苯酚基(-C6H40H)等酸性基团，其中的氢离子能与溶液中的金属离子或其他阳离子进行交换。②阴离子交换柱的原理：阴离子交换树脂中的碱性基团有季氨基、氨基(-NH2)和亚氨基(=NH)等。它们在水中能生成OH-离子，可与各种阴离子起交换作用。③混合柱：当两者串联使用或混合使用时，产物就只有水。1.2.3影响因素：①离子交换树脂的质量：离子交换树脂是有使用寿命限制的，当离子交换达到一定量时就达到饱和，需要进行再生处理，因此质量越好总量越大其使用期限越长。②阴阳离子交换树脂的连接方式：复床式：若干个阳离子交换柱和若干个阴离子交换柱串联而成，阳在前阴在后，其优点是再生方便，缺点是出水质量不高(单级复床式出水电阻率只有0.5 MΩ·cm，双级复床式出水电阻率为2 MΩ·cm)。混床式：将阳离子树脂和阴离子树脂以1:2容积比均匀混合装入同一个交换柱内而成，优点是出水纯度高（电阻率≥1OMΩ.cm），缺点是再生困难。联合式：将复床式和混床式串联起来即成，出水质量高（电阻率最高可达18. 3MΩ.cm，即超纯水），使用寿命长。③三级纯水的纯度：当三级纯水质量不合格，其中一些非离子杂质通过离子交换柱时就会影响离子交换柱的使用寿命并造成出水水质的降低。有些开放性的纯水系统将生成的三级纯水储存于水箱中以备其它用途使用时储存时间过长或其它原因导致的二次污染也会使水纯度下降2.1 不合格纯水中的杂质成分 纯水质量不合格也就意味着纯水系统水纯化的失败，可能出现在原水预处理过程、反渗透过程、离子交换过程和纯水储存中的任何一步。无论哪一步失败，其杂质来源无外乎自来水和纯水机水通道的污染物，主要有：①离子，常见的有H+，Na+，K+，NH4+，Mg2+，Ca2+，Fe3+，Cu2+，Mn2+，Zn2+，Al3+等阳离子和F-，CI-,N03-,HC03-,S042-,P043-,H2P04-,HSi03-等阴离子；②有机物质，如农药、烃类、醇类和酯类等；③颗粒物，如自来水管道中的铁锈和泥沙等；④微生物；⑤溶解气体(Nz，02，C12，H2S，CO，CO2，CH4等)。2.2不同杂质成分对生化分析仪及检测结果的影响2.2.1 离子含量高的影响：①最直接的影响就是对血清（浆）中同种离子测定结果的升高，如对Mg2+，Ca2+，Fe3+，Cu2+，Zn2+等的测定，同时也对这些项目的标定产生影响；②由于很多金属离子都是酶的辅酶因子，因此当金属离子含量高时往往影响酶活性的检测（如Mg2+是多种磷酸化激酶的激活剂，水中含量超标时会导致这些酶活性测定值的升高；而许多重金属离子则对酶有抑制作用，导致酶活性下降）；③很多阴离子也作为酶的辅因子存在，对酶活性测定产生影响（如CI-对α-淀粉酶就有激活作用）；④离子含量高的水更容易形成结晶和导致蛋白等有机物变性附着于管道系统，从而使得生化分析仪管道系统更易堵塞，最终造成测定失真或失败；同时，在使用其对反应杯进行清洗时也很难清洗干净，会加速反应杯的老化和损坏，使杯空白升高。2.2.2有机物质的影响：有机物质的影响主要在于对类似物质测定时导致类似物质测定结果的升高。同时，有机物含量升高也会加速管道系统和反应杯的清洗困难及老化。2.2.3颗粒物的影响：颗粒物一般很难通过纯水系统进入生化分析仪管道和反应系统，其来源一般都是储水箱发生二次污染，但是一旦进入除了会导致吸光度升高外，还很容易堵塞管道和损坏反应杯。2.2.4微生物的影响：微生物的去除主要依赖原水的预处理，有些纯水系统还在超纯水处加装紫外杀菌或者微滤、超滤等装置，进一步除去水中残余的细菌、微粒、热源等。但一旦预处理失败或纯水储存箱被二次污染，微生物及其产物就能进入生化分析仪管道系统和反应系统，可能出现的情况有两种：①微生物在管道及反应系统孳生，导致管道堵塞，同时令吸光度和杯空白升高；②微生物产生特定的酶对生化分析仪酶测定产生影响，具体产生什么影响取决于污染菌的类型。 2.2.5溶解气体：溶解气体增多产生的影响有：①对同种气体的测定的影响；②对水的pH值也产生影响，如C02，Cl2，H2S等溶解增多导致水pH值的下降，也对pH值依赖性较强的生化项目测定产生影响；③某些气体如C12增多，因其自身氧化性较强，会对与氧化还原反应相关的生化测定项目产生影响，如对基于340 nm处NADH和NADPH有吸收峰而建立的ALT，AST，BUN等的测定方法，会导致测定值的升高。 2.2.6其它杂质的影响：有些纯水系统也将最终生成的超纯水或一级纯水储存于水箱中，当水箱有生锈情况时导致铁测定不正常，通常会出现在压力水箱中；还有当机械装置密封不严造成的漏油时导致TG测定结果升高。这些情况虽然少见，但也最容易被忽视。 3讨论3.1 实验室常用的自动化纯水系统有两种：①大型蒸馏器系统，日出水量在100 L左右，原水利用率10%—15%，能耗大，自动化程度低，制备的蒸馏水纯度一般较低，适用范围较窄，现在基本已经被淘汰。②反渗透的中央纯水系统，由机械过滤、活性炭吸附、反渗透膜和离子交换树脂等组成，日产水量500 L左右，原水利用率30%—40%，自动化程度高，能耗低，主部件可反复使用，出水纯度高，目前使用广泛。另外，有些实验室因条件所限，直接购买商品化纯净水使用，但商品化纯净水多为饮用水，其标准与实验室用水标准有所不同，很容易对检测造成影响。3.2评价水质的常用指标①电阻率，是衡量实验室用水导电性能的指标，其随着水内无机离子的减少而增大，但由于水自身的解离作用，电阻率最大只能达到18.2MΩ.cm左右，是检测水中离子浓度的主要指标；②总有机碳，是指水中碳的浓度，反映水中有机化合物的含量；③颗粒，反映水中颗粒物的浓度；④热原，通常为革兰氏阴性细菌的细胞壁代谢产物。3.3

自动生化分析仪的原理、构成及使用一、自动生化分析仪的功能及特点 自动生化分析仪是将生化分析中的取样、加试剂、混合、保温、比色、结果计算、书写报告等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成。它可进行定时法、连续监测法等各种反应类型的分析测定。除了一般的生化项目测定外，有的还可进行激素、免疫球蛋白、血药浓度等特殊化合物的测定以及酶免疫、荧光免疫等分析方法的应用。它具有快速、简便、灵敏、准确、标准化、微量等特点。 二、自动生化分析仪的分类 自动生化分析仪有多种分类方法，最常用的是按其反应装置的结构进行分类。按此法可将自动生化分析仪分为流动式和分立式两大类。所谓流动式自动生化分析仪是指测定项目相同的各待测样品与试剂混合后的化学反应在同一管道流动的过程中完成。这是第一代自动生化分析仪。过去说得多少通道的生化分析仪指的就是这一类。存在较严重的交叉污染，结果不太准确，现已淘汰。 分立式自动生化分析仪与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的，不易出现较差污染，结果可靠。 三、自动生化分析仪的构成 因为自动生化分析仪是模仿手工操作的过程，所以无论哪一类的自动生化分析仪，其结构组成均与手工操作的一些器械设备相似，一般可有以下几个部分组成： 1、样品器：放置待测样本、标准品、质控液、空白液和对照液等。 2、取样装置：包括稀释器、取样探针和输送样品和试剂的管道等。 3、反应池或反应管道：一般起比色皿（管）的作用。 4、保温器：为化学反应提供恒定的温度。 5、检测器：如比色计、分光光度计、荧光分光光度计、火焰光度计、电化学测定仪等。不同仪器配置不同。 6、微处理器：是分析仪的电脑部分，又叫程序控制器。控制仪器所有的动作和功能，使用者可通过键盘与仪器“对话”，同时电脑还能接受从各部件反馈来的信号，并作出相应的反应，对异常情况发出一定的指示信号。分析软件和分析结果一般贮存在磁盘中，可共查询。 7、打印机：可绘制反应动态曲线和打印检验报告单等。 8、功能监测器：显示屏就是其中一部分，可查看反应状态、人机“对话”的情况、当前仪器工作状态、分析结果等。 四、流动式自动生化分析仪 流动式自动生化分析仪又可分为空气分段系统和非分段系统。前者是流动式分析仪中最典型的一种。 （一）空气分段系统 这种分析仪的特点是通过比例定量泵挤压弹性样品管、空气管和试剂管（通称“泵管”），将样品依次连续地吸入并沿样品管输送，另一方面由空气管吸入的气泡将由同样原理吸入并在试剂管道中连续流动的试剂分成均匀的节段，样品流和试剂流在连续向前流动的过程中相遇、混合、透吸（必要时）、保温、反应及被测定。整个分析过程是液流在管道中连续流动的过程中完成的。 （二）非分段系统 非分段系统是靠试剂空白或缓冲液来间隔每个样品的反应液，这样，在管道中连续流动的液体不被分段。非分段系统可再分为流动注入系统和间隙系统。 1、流动注入系统：该系统的组成与空气分段系统相似，但某些结构和工作原理有所不同，空气分段系统是利用气泡分段来防止管道中各反应液在流动过程中的交叉污染，而流动注入系统则是通过将样品依次注入连续流动的试剂流管道中来达到防止交叉污染的目的的。 2、间隙系统：该系统的结构、组成和工作原理与流动注入系统相似，但其特点是每一次进样都必须在前一样品的分析过程结束后（包括管道的清洗）才能开始，而不能连续地依次进样，每次进样间有一时间间隙，故有人称为不连续流动式分析仪。 五、分立式自动生化分析仪 分立式为第二代自动生化分析仪，它与流动式的主要差别是每个待测样品与试剂混合间的化学反应都是分别在各自的反应皿中完成的。 称为第三代自动生化分析仪的离心式自动生化分析仪，也应属于分立式。因为在离心式分析仪中，每个待测样品都是在离心力作用下，在各自的反应槽内与试剂混合，并完成化学反应，继而被测定的。离心式分析仪属于“同步分析”，在离心力的作用下，各待测样品几乎同时与试剂混合、反应并被测定后打出报告；而其它分析仪是“顺序分析”，即各待测样品依次与试剂混合、反应先后被测定。 袋式自动生化分析仪也应属于分立式，它是用试剂袋代替反应管和比色皿，测定时每个待测样品在各自的试剂袋内进行反应并被检测。还有一种称为“干式自动生化分析仪”也属于分立式。它的主要特点是采用固相化学技术，即将试剂固相于胶片或滤纸小片等载体上。测定时使一定量的待测样品分布于一张试纸片上，一定时间后用反射光度计测定。 分立式自动生化分析仪，是目前各实验室普遍使用的自动生化分析仪，一般都可以任意选择测定项目，故称为任选式自动生化分析仪。下面将重点介绍任选式自动生化分析仪。 六、任选式自动生化分析仪的主要部件 （一）加样系统 1、样品转盘：可放置小型样品杯数十只。有的分析仪可直接用盛样本的试管，有的还附有条形码阅读装置，能识别样本试管上的条形码信息，不需给样本编号，也不必输入病人资料即可打印出该病人的化验报告。 2、试剂室（仓）：不同的分析仪试剂室可容纳的试剂盒数量不同，一般可容纳20多种试剂。有的试剂室带有冷藏装置，带有条形码识别装置的试剂室试剂可以任意放置试剂盒位置。 3、取样装置：有的分析仪取样本和取试剂公用同一采样针，由内部的分流阀控制取样本和取试剂；有的仪器有两套取样装置，分别取样本和取试剂。采样针前端有液面传感器防止空吸或采样针外壁液体挂淋，采样臂中有预温装置。如果采用多试剂分析方法，将占用试剂室中试剂盒位置，会减少测定项目。 （二）比色系统 1、光源：大多数分析仪使用卤素钨丝灯，工作波长325～800nm。有的分析仪使用氙灯，工作波长285～750nm。 2、比色杯：有分立式比色杯、分立式转盘式比色杯、离心式比色盘、流动池。干式生化仪不需要比色杯，袋式生化仪由试剂袋经挤压自动形成比色杯。比色杯光径6-7mm，少数为10mm。 比色杯中的反应液需要恒温，有37℃、30℃、25℃三档可选择，有的固定为37℃。多数用吹入恒温空气的方式，也有用恒温水浴或半导体温控装置的。为了保证比色杯中反应液有±0.1℃的精确度，分析仪的环境温度必需保持18～30℃，室温波动不宜超过2℃。 3、单色器：（1）干涉滤光片（2）光栅 4、检测器：（1）光电倍增管，已很少用。（2）列阵固态光敏二极管。（三）供排水系统 自动生化分析仪中有很多供水管道与电磁阀。只读存储器中软件参数控制电磁阀与输液泵供给各个部件的冲洗与吸液，最后排出机外。随机存储器内的分析参数控制电磁阀与注射器的步进电机，供应样本、试剂和稀释用水。有的生化仪还能自动冲洗比色杯供反复使用。（四）数据处理系统 每个项目的检测结果暂时储存在随机存储器中，待某个样本所需的项目全部检测完毕，由微机汇总打印出综合报告单。微机的存储器中可以存储相当数量的病人数据与逐日的室内质控数据，随时可以按指令调出，在荧光屏上显示或打印，也可存储在软盘中长期保存，随时调阅。 七、任选式自动生化分析仪的分析顺序 每份样品可以任选试剂室内预置试剂盒的一项或全部项目的检测。微机按输入的指令，安排项目检测次序，一般先做孵育时间长的终点法，后做监测时间短的速率法，以便恒速打印综合报告单。当指定样本进入待测位置时，微机指令试剂盒进入试剂取样位置，按所测项目的参数由加样系统定量取样，同时比色杯按微机的指令到达指定位置加样。生化仪的分析速度与仪器加样周期的时间有关。加样周期的时间越短分析仪的速度越快。双试剂法占用两个加样周期，分析速度减半。 八、任选式自动生化分析仪的主要分析参数 1、试验代号 14、连续监测时间 2、试验名称 15、标准液数量 3、试验方法 16、标准液浓度 4、试验类型 17、重复校标次数 5、温度 18、计算因子（F值）6、波长：可选择主波长和次波长。 19、计量单位 7、反应类型 20、小数点位数8、终点法零点读数 21、底物耗尽 9、样本量与稀释水量 22、线性度 10、试剂量与稀释水量 23、试剂吸光度上限与下限 11、样本空白 24、线性范围 12、孵育时间 25、参考范围 13、延迟时间 26、等等等等

多地开始实施闯红灯自动记录系统地方计量检定规程 还有不到一个月的时间，新修订的《机动车驾驶证申领和使用规定》就要开始实施，其中“驾驶机动车违反道路交通信号灯通行一次记6分”的规定被社会广为关注。而今年第10期《中国计量》杂志正好刊登了一篇由郑州市质检中心电子警察检测室主任安志军撰写的《检定规程解读》，也同样引起计量检定人员关于闯红灯自动记录系统是否需要进行计量检定话题的关注与讨论。 “规程已从去年12月开始实施，解读是为了帮助计量检定人员更好地理解规程和更准确地进行检定。”作为河南省地方计量检定规程《闯红灯自动记录系统》的主要起草人之一，安志军一直坚持认为，规范闯红灯自动记录系统等交通技术监控系统的管理，并对此进行计量监督管理是非常必要的。“现在安装的闯红灯自动记录系统多是具有精确测量违法位置、违法时间、速度、车辆识别等功能的综合系统。系统所测量显示的违法时间、违法位置、速度等数据，需要经过计量检定，才能保证其准确性。”作为专门负责“电子警察”检测工作的安志军，这些年一直在为规程的起草、制定、发布和实施忙碌着。 在河南省2011年9月7日发布、同年12月1日起实施的《闯红灯自动记录系统》（JJG-豫158－2011）地方计量检定规程中，规定“闯红灯自动记录系统，是安装于道路交通路口，自动记录机动车闯红灯行为的监控系统，主要由闯红灯检测单元、图像采集单元和计算机管理单元组成。”规程还从闯红灯捕获率、记录有效率、计时误差、车辆号牌识别、测速误差、接地电阻6个方面提出了计量性能要求，并分别对检定方法、检定设备等作出了规定。规程明确提出，该规程适用于闯红灯自动记录系统的首次检定、后续检定和使用中的检查，检定周期一般不超过一年。随着我国机动车数量的不断增加，交通技术监控系统的应用，一方面能够缓解日益繁忙的道路交通管理与警力严重不足之间的矛盾，另一方面在一定程度上消除了道路交通管理在时间和空间上的“盲点”。例如，安装于道路交通路口的闯红灯自动记录系统就能24小时对机动车驾驶员违反道路交通信号灯通行的违法行为进行监控、记录，并上传数据。 据了解，公安部已于2009年和2010年分别发布了公共安全行业标准《闯红灯自动记录系统通用技术条件》和《闯红灯自动记录系统验收技术规范》。“这两项行业标准对系统的通用技术条件及验收标准进行了规范。但是，系统长时间不停地工作，性能应当具有稳定性、可靠性。定期对系统的计量性能进行检定，能保证其量值的准确可靠，为道路交通安全管理和执法提供可靠的保证。我们出台的地方计量检定规程就是为了保障全省闯红灯自动记录系统数据的准确可靠，建立起长效的计量监管机制。”安志军说。 河南的地方计量检定规程是在借鉴湖南、安徽、甘肃等地的地方计量规程基础上制定的。作为我国第一批制定发布闯红灯自动记录系统地方计量检定规程的省份，湖南省质监局早在2008年就发布了《机动车闯红灯自动记录系统》和《道路交通违法行为电子监测系统》两个地方标准，和与之配套的《闯红灯自动记录系统检定规程》和《道路交通违法行为监测系统检定规程》两项地方计量检定规程。据该省业内一位不愿透露姓名的人士介绍，现在，长沙市已基本按年检的方式实现了对全市闯红灯自动记录系统的计量检定，对未经检定或检定不合格的技术监控设备，实施限期整改或停用等处理措施，对检定合格的在用技术监控设备的安装、检定、使用和修理等进行全面建档。甘肃的地方计量检定规程也是在2008年开始实施的。据甘肃省计量院机动车检测线项目组负责人高得成介绍，全省闯红灯自动记录系统目前的受检率为30%左右。“在所有的计量性能中，时间频率的计量是最为重要的。”高得成告诉记者，闯红灯自动记录系统的计时误差包括两项内容：时刻误差和日差。他解释：“如果当前时刻误差超过最大允许误差，就会出现同一辆机动车按从A路口到B路口的顺序行驶时，在B路口被监控记录的时刻却早于在A路口被监控记录的时刻。系统的时刻计量不准就会影响到执法的公正性和严肃性；如果日差超过最大允许误差，就会出现当前仍是绿灯持续亮的时间，但闯红灯自动记录系统由于计时误差，认为此时已是红灯亮的时间，从而将此时通过路口的机动车误认为闯红灯。[

19世纪末“正电荷粒子束在磁场中发生偏转”被发现后，1912年世界上第一台质谱仪在英国面世，从此一种通过测量离子电荷质量比，而进行样品成分和结构分析的方法在生物学及医学上大放异彩。质谱以其灵敏度高、特异性强、分析速度快、多指标同时检测等特点跻身高端定量检测分析仪器行列。　　分辨率、灵敏度、质量范围、质量测定准确性是衡量质谱的主要技术指标。分辨率R是指相邻两个峰被分离的程度，是质谱仪区别两个峰的能力指标。灵敏度的指标实际上是仪器综合性能的反映，因为它与样品、分辨率、扫描速度、进样方式以及电离方式密切相关。磁质谱仪器的质量范围与加速电压有关，在仪器最高加速电压下可测的最高值为范围指标，加速电压降低，范围加大，但灵敏度下降。　　质谱工作原理，是将样品分子经过离子化后，利用其不同质荷比（m/z）的离子在静电场或磁场中受到的作用力不同而改变运动方向，使其在空间上分离，最后通过收集和检测这些离子得到质谱图谱，实现成分和结构分析。　　质谱仪虽种类繁多，　　但每种仪器结构可概括为以下6部分：　　1.进样口：直接进样或接其他仪器，用于样品的引入。　　2.真空系统：用于维持质量分析器至检测器部分的高真空状态，使离子能够在电磁场作用下自由飞翔，避免离子在运动途中发生碰撞，导致信号丢失或产生虚假信号。　　3.离子源：用于将样品离子化。　　4.质量分析器：用于将不同质荷比的离子分离开，让他们逐个进入检测器，或只筛选特定质荷比的离子进入检测器。　　5.检测器：通常是电子倍增管或其他，将离子的数量转化为电信号的大小。　　6.数据处理系统：处理检测器捕获到的电信号，获得质谱图，并进一步处理得到所需信息。　　质谱种类多，应用广。从用途（分析对象）可分为：无机质谱、有机质谱、同位素质谱及气体质谱等。从单机或组合可分为：单（一）质谱、串联质谱，单一质谱两个及以上的组合即为串联质谱。广泛应用于化合物结构的定性测定或混合物组成的定量测定。飞行时间质谱仪（MADLI-TOFMS）归类于有机质谱，可应用于临床微生物（包括细菌和真菌）的高通量快速鉴定、疾控中心的微生物传染病原的鉴定与监测、海关进出口商品的检验检疫、食品生产中的微生物检测和工业、农业和环境中的细菌监测等领域。　　目前，服务于临床诊疗的质谱检测项目已达400余项，主要涉及临床化学、临床免疫学以及临床微生物鉴定等领域，也被用于建立临床化学检测项目的参考测量程序和研制参考物质。欧美发达国家从1961开始将质谱技术用于新生儿筛查，目前实现使用串联质谱技术对多个代谢产物进行联合检测，可筛查新生儿遗传代谢病等30种新生儿遗传代谢疾病。国内质谱的临床检测主要用于新生儿遗传筛查、维生素D检测、微生物诊断、药品检测等检测领域。　　相比国外100多年的质谱发展历史，受限于国际离子源与质量分析器的核心专利知识产权保护，国产质谱设备发展备受制约，直到2000年后国内企业才逐步开始质谱技术的积累。从2006年第一台国产商业化质谱——四级杆[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用仪[/color][/url]问世，到17年7月国家质量监督检验检疫总局和中国国家标准化管理委员会发布，18年2月份开始实施的推荐性国标——质谱仪通用规范。短短十年时间，以安图生物为代表的6家国产IVD生产企业陆续推出MALDI-TOF 质谱仪，逐步打破以进口品牌垄断为主的中国质谱格局，努力弥补当前国产质谱仪占有率相对较低，2016年抽样调查中[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]GC-MS[/color][/url]国产化率均不到2%的差距，全力推进MALDI-TOF MS质谱在临床微生物检测领域的发展。　　众所周知，微生物诊断指的是通过病原学和药物敏感性分析为临床传染性疾病的预防、诊断、治疗与疗效观察提供依据。传统微生物快速诊断包括三种方法：　　1.样品的直接检测，例如[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]检测；　　2.菌体富集后检测；　　3.分离培养后检测。　　传统的生物化学、分子生物学和形态学等方法基于单菌落的生化特征需要菌种的筛选、培养、鉴定等过程，实验时间需要数天不等，耗时耗力，且实验操作较为繁琐，并不能满足临床对检测结果时效性的要求；分子生物学方法进行微生物鉴定大大地提高了灵敏度和时效性，但对工作人员技术要求高，检测成本高，仅针对某些特定细茵，难以满足临床常规要求。因而，样本流转（TAT）时间长仍然是当前制约临床微生物检验发展的主要因素之一。MALDI-TOF MS质谱仪可实现临床对部分微生物传统检测方法的技术替代，通过对未知化合物（菌）所得谱图的分析，进而解析出化合物结构。MALDI-TOF MS快速鉴定经固（液）体培养基短时培养的阳性血培养物中的病原菌，且一次实验可同时多个样本检测，准确率与检测通量均有大幅的提升，一定程度上节省了人力和财力，可适用于微生物室日常工作的血培养阳性标本快速鉴定的方法。从而助力临床微生物检验在感染性疾病诊断、临床用药指导、抗菌药物管理、院内感染控制等多方面均衡发展，将彻底改变微生物实验室的面貌。　　飞行时间质谱仪的质量分析器是一个离子漂移管。由离子源产生的离子加速后进入无场漂移管，并以恒定速度飞向离子接收器。离子质量越大，到达接收器所用时间越长，离子质量越小，到达接收器所用时间越短，根据这一原理，可以把不同质量的离子按m/z值大小进行分离。质谱图，横轴表示单位电荷质量（m/z）；纵轴表示离子流强度，通常以相对强度（相对丰度）来表示。相对丰度以最强的离子流强度定义为100%，其他离子流以其百分比显示。　　进样系统、基质辅助激光解吸电离离子源、飞行时间质量分析器、传感器和电脑是临床微生物鉴定的 MALDI—TOFMS主要组成部分。MALDI—TOFMS鉴定微生物的标志物主要是特异性保守核糖体蛋白。MALDI—TOFMS基于微生物蛋白指纹图谱的特异性峰谱进行鉴定，只需将细菌涂布于靶板，加入基质溶液裂解，室温干燥后即上机检测，获取的质量图谱与数据库中的标准图谱进行自动对比分析，即可获得鉴定结果。鉴定结果全程自动判读、自动分析、自动报告、标本自动卸载，20分钟内可完成96个菌株的鉴定，且检测成本低，仪器使用耗材只需样品板和质谱专用基质，无须其他任何附加试剂，对工作人员的技术要求不高。　　有研究证实，在重症监护室（ICU）临床治疗中，抗生素如果晚一小时准确治疗，病人存活率下降8%。而运用质谱检测技术则可缩短至少1.5天的鉴定时间，为临床救治危急重症患者赢得更多时间。除单一质谱外，串联质谱在美国及欧盟国家商业化应用相对成熟的主要是药物浓度监测、小分子标志物检测、新生儿筛查和维生素检测等。国内除目前已实现商业化的微生物鉴定、新生儿筛查、维生素等临床检测领域外，应拓展质谱在血药浓度监测领域的绝对优势；紧抓质谱在小分子生物标志物在心脑血管和代谢病方面的发展趋势，质谱仪因能敏锐地分析其他设备仪器难以分析的肿瘤生长分泌的微量外泌体，在癌症的液体活检领域，质谱检测也有望跟基因检测分一杯羹。　　质谱作为一个能同时检测大量的化合物的分析器，有望开启IVD检测发展的新篇章。从1953年飞行时间质谱仪原型被设计出，到1955年世界上第一台飞行时间质谱仪诞生，再到国产飞行时间质谱迅猛发展，随着临床对个体化和精准化医疗需求的增加，基于质谱技术的基因组学、蛋白组学、代谢组学等很多研究成果正不断转化至临床实践，值得我们翘首以盼。　　中国质谱仪过去面临着4大挑战，技术发展水平的挑战、进口产品替代的挑战、知识产权保护的挑战以及做强、做大与做大、做强之间的挑战。未来希望国内的质谱仪企业抓住全球市场需求增长率超过10%，以及中国市场远超10%的需求增长，结合市场需求和实际情况，通过自身的努力，将更多精良的产品投入到市场中，从而推动中国质谱行业的快速发展

[size=4] 我们对现今应用较为普遍的VITEK-AMS鉴定系统中报告“不能鉴定细菌”(UIO)菌株作了进一步分析，探讨其发生原因、处理方法，以期建立一套切实可行的仪器与手工方法相结合的细菌鉴定方法。[/size][size=4]　　[b]一、材料与方法[/b][/size][size=4]　　1. 仪器与试剂：VITEK-AMS 60型全自动细菌鉴定仪及其配套GNI、GPI、YBC试验卡（生物梅里埃公司产品)。[/size][size=4]　　2. 试验菌株：1 025株本院1999.10.21-2000.3.3临床标本分离的菌株进行了Vitek- AMS鉴定，其中应用GNI 卡631例、GPI卡334例、YBC卡60例。[/size][size=4]　　3.VITEK-AMS鉴定法：根据细菌表型特征，选择相应GNI+、GPI、YBC卡，严格按仪器操作说明进行，孵育后当检验地带网仪器报告结果为UIO时，挑取生长对照孔(GPI卡第1孔、GNI+卡第3孔、YBC卡第24孔)悬液于非选择性培养基上重新分离，观察是否纯培养，若是，分别按同法及以下两法鉴定。否则， 经纯培养后重新上机鉴定。[/size][size=4]　　4. 双歧检索鉴定法：根据Vitek全自动微生物分析系统技术资料提供的双歧检索表，依生化结果检索至属或种。[/size][size=4]　　5. 常规鉴定法：按照全国临床检验操作规程［1］进行，并经API系统(生物梅里埃公司) 复核鉴定至种。部分菌株鉴定依据文献［2］进行。 [/size][size=4]　　[b]二、结果[/b][/size][size=4]　　1. UIO发生机率：总共1025株细菌鉴定中，共出现UIO 44株，占4.3%。其中GPI卡334株，出现UIO16株，占4.8%；GNI+卡631株，出现UIO 24株，占3.8%；YBC卡60株，出现UIO4株，占6.7%。[/size][size=4]　　2.UIO发生原因：在44株出现UIO中，9株（0.9%)为待检细菌不纯，3株(0.3%)为浊度不合要求，2株(0.2%)为接种物孵育时间过长（超过48h），2株(0.2%)为超出试验卡鉴定范围（均为臭鼻克雷伯菌），1株(0.1%)为菌悬液不乳化（粘液型绿脓假单胞），其他如冲液时气泡过多，或其他原因不确定者27株（2.6%）。[/size][size=4]　　3.处理：（1）9株不纯菌株，经纯培养后，重新上机，均能成功鉴定。（2）35株纯培养但报告UIO菌株中，18株(1.8%)可通过双歧检索法获得结果，并与常规分类法结果完 全一致。3株（0.3%）浊度不合要求者经调整浊度后重新上机获得结果。 2株(0.2%)接种物超过48h菌株，经重新孵育后得以鉴定。1株(0.1%)为悬液不乳化菌株经|检验地带网|配制3个麦氏单位菌悬液，然后低速离心1～2 min(1 000r/min)，取上清液比浊并调节到所需的浓度后，得以鉴定。(3)余下11株(1.1%)菌中，仅2株(1株为大肠埃希菌，另1株为臭鼻克雷伯菌)不能从双歧检索表中查出结果，其他9株(主要为洋葱假单胞菌、琼氏不动杆菌、木糖产碱氧化杆菌等)，虽能从双歧检索表获得结果，但与常规鉴定法结果不相符合，或出现矛盾的生化结果，需增加试验项目，按常规鉴定方法及 API系统报告结果。[/size][size=4]　　[b]三、讨论[/b][/size][size=4]　　实验表明95.7%的临床分离菌株可通过VITEK-AMS正确鉴定，仅4.3%菌株无法一次性成功鉴定。细菌不纯是产生这部分菌株的主要原因（占近1/5），其他如待检菌菌龄、菌液浓度也是关系鉴定成败的关键。由于仪器本身原因（如对于罕见生物型、新种或不典型菌株无法鉴定）也不可忽视。正确处理这部分菌株，有重要的临床意义。实际应用自动化仪器时，必须挑取纯培养菌落，可提高鉴定率，对确认为纯培养而无法鉴定者，可通过传统分类法，参照双歧检索表能成功鉴定将近一半菌株，因此合理应用双歧检索表不失为一种较好的辅助方法。但仍有占总数1.1%菌株需用常规方法或其他方法如API系统重新鉴定。[/size][size=4]　　参考文献[/size][size=4]　　1，叶应妩，王毓三，主编. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京： 东南大学出版社,1997.5.[/size][size=4]　　2，Patrick R. Manual of clinical Microbiology (7th Edition). Washington DC: American Society for Microbiology, 1999.316-647. [/size]

我们有个4000w的空调，安在净化系统的前面，作为整个微生物实验室用可以吗？洁净室（有回风）、阳性室（直排，不回风）、缓冲室（有回风）有分别的过滤终端99.99%，而鉴定室（不回风）和前处理（不回风）没有过滤终端。可行吗？

、主题内容与适用范围： 本规程规定了VITEK全自动微生物分析系统的操作规程、安全要求和注意事项。本规程适用于VITEK全自动微生物分析系统。2、引用文件：《VITEK全自动微生物分析系统操作手册》3、操作规程：3.1开机：3.1.1先开电源、滤波器，然后开UPS、打印机、终端、读数器，最后开电脑。3.1.2等待屏幕出现　　biomerieux　　Login　　Password3.1.3在Login处键入SUPV按enter（回车键），在password处键入SUPV按enter（屏不显示）。3.1.4出现BioLIAISON主菜单（在主菜单的VITEK下点击），出现VITEK Status状态框，点击Reader， 出现Status和Print，点击Status。3.1.5 在读数状态窗口击process on钮。开始执行任务。3.2测试标本3.2.1标本的稀释：选取经纯培养18～24小时后，大小为3mm左右的待测菌落2～3个，置于装有1.8ml0.45%生理盐水的试管中进行稀释，用标准比浊计测菌液浓度（如浊度高加生理盐水，浊度低加菌落）。最后的菌液浓度必须达到测试卡所要求相应标准度。将试管放到样品架上。3.2.2卡片标记： 3.2.2.1从冰箱中取出测试卡，放置2～3分钟，使温度与室温相同。 3.2.2.2用vitek记号笔在“日”形图上写上编号，并在外实验结果标记处标记上外部测试实验结果（如氧化酶、触酶或凝固酶标记）。3.2.3卡片充样： 3.2.3.1将一弯曲的输样管装在测试卡上。 3.2.3.2将测试卡放在充样架上，输样管浸入装有待测菌液的标准管中。 3.2.3.3按充样器电源ON开关，约十秒钟后，READY灯亮，提示充样器为进入真空状态作好准备。 3.2.3.4将充样架插在充样板上，放入真空舱，关门。 3.2.3.5按FILL触点开关，约十秒钟后，READY灯灭，充样开始。 3.2.3.6充样完成后（约3分钟），READY灯再次亮。 3.2.3.7取出充样板，按充样电源OFF触点开关。3.2.4封卡： 3.2.4.1将封口塞的小圆头塞进孔中，旋转塞子的手柄端，使柄与头断开，小头留在孔中封住口。 3.2.4.2检查测试卡的各小室是否有气泡排除。3.2.5放卡入读数/恒温箱： 3.2.5.1检查一下阅读状态窗口，在确保读数器未进行卡片读数的情况下，打开读数/恒温箱的门，将测试卡按正确方向插入托架上的空位上，由高往下放（即最好按顺序依次排放），检查是否放正确。（必须确保测试卡位置正确，否则会损坏读数器）。 3.2.5.2关上读数/恒温箱的门。 3.2.5.3当在读数/恒温箱内放入任何新的测试卡后，都应等读数器读卡两次后，确保仪器工作正常。（如仪器进行测试工作期间，要不定时对仪器的状态进行检查。）。 3.2.5.4等待最后的测试结果。3.3关机程序：3.3.1先在读数器状态窗口击process off钮，待系统接受，退至主菜单。3.3.2击主菜单bioLIASON中system，再击system mainferace。3.3.3击Stop the system。3.3.4设置0-1’时间，通常设为“0”，点击“Execute”执行键（左下方的键），主机是否关闭可按键的“Num Luck”键，如此键无反应（看绿灯是否闪亮），无反应说明已关。3.3.5待屏幕消失5～10分钟后关机。3.3.6关机次序：先关电脑，再其他附件。3.4比浊计的用法：3.4.1用结晶紫调零，用水或盐水调100%的透光度。把装有结晶紫的试管插到样品孔中，把开关键打到ON键，旋转左键调透光度为0。把装有水或盐水的试管插到样品孔中，把开关键打到ON键，旋转右键调透光度为100%。3.4.2把悬浊液管插到样品孔中，测量它的透光度，假如透光度的读数超出所建议的范围，用加入菌液或盐水的方法，调节悬浊液，使它达到所需透光度范围。3.4.3每调十个样品必须重新调校。3.5CC2电脑故障：3.5.1故障现象：如果电脑的正常运作中断，在显示器上用户界面会发现以下故障：键盘无反应、鼠标无反应、主机故障。3.5.2解决方法：大部分故障都可用重新启动计算机的方法解决。如果确定电脑正常功能停止，执行再启动程序。如果系统不只是一个监测器，可以用快速检测来判断电脑是否处于故障状态。用其他系统的监测器检测是否有上述故障之一，假如其他监测器是有反应的，则主机是正常的，有可能是下列情况之一：　　（1）如果至少一个监测器有反应，联系厂家或经销商。　　（2）如果只有一个监测器或所有监测器都无反应，执行再起动程序。3.5.3电脑再起动程序： 3.5.3.1移动鼠标判断有无反应。 3.5.3.1.1如有反应，则见3.5.3.2。 3.5.3.1.2如无反应，则关闭电源，等至少15秒后，再开电源，再接5.3.5。 3.5.3.2进入系统维护窗口，点击Stop the System。 3.5.3.3Shut down窗口中有三步。 3.5.3.3.1Shut down INTERCTVELY？选择“NO”。 3.5.3.3.2RESTART the system after shutdown?选择“yes”。 3.5.3.3.3TIME the system goes down.选择“1”离开，选择“0”立即shut down。 3.5.3.4点击Execute键，电脑执行Shut down程序，当再启动开始时，在显示器上会出现一系列代码，这是正常的。当出现 biomerieux Login password再启动就完成了。　　第五步——第七步见开机部分。 3.5.3.8检查读数器的Directory窗口，如读数器不运行，选择要打印的初始或已完成的结果，点击print键开始打印。 3.5.3.9完成打印报告后，在reader status窗口中点击process on键。4、安全要求：4.1注意设备的表面和污染了的实验用品都是潜在的生物危险性物品。4.2如发现问题应及时通知保管人，不得随意拆动，不得带电维修保养。5、注意事项：5.1标记卡时要小心，否则会引起操作过程和结果的错误。5.2如果做过氧化酶和触酶实验，把实验结果标记在卡上，注意两者结果一致、标记方法一致。5.3所有卡在填充后须在15～20分钟内放入读数器。5.4注意一定要用比色计来测悬浊液，测十个样品后重新调核刻度。5.5使用Process On之前应等所有结果出来，否则会抹去卡上的所有结果。5.6预防稀释液的污染，不推荐使用混合盐水。5.7开机后如对话框10分钟内不出现，就按关掉计算机前部的AC POWER开关，让计算机关机15秒钟之后再重开。5.8senion上的滤网需两个人才能取出，一个人将孵育器倾斜，另一个人把它取出。电脑屏幕右上方的print和右下方的clock不能点击。5.9使用孵育器时先开主机电源（AC POWER）开关，再开电池开关，关机时刚相反。更换电池不必等到卡都做完，可在任何时候更换。

请问大家气相仪测微生物的生理生化特性怎么个操作法啊？谢谢！

1主题内容和适用范围1．1主题内容本标准规定了测定水和污水中生化需氧量（BOD）的微生物传感器快速测定法。本标准规定的生物化学需氧量是指水和污水中溶解性可生化降解有机物在微生物作用下所消耗溶解氧的量。1．2适用范围本标准适用于地表水、生活污水和不含对微生物有明显毒害作用的工业废水中BOD的测定。的测定。 1．3干扰及消除水中以下物质对本方法测定不产生明显干扰的最大允许量为：Co2+5mg/l；Mn2+5mg/l；Zn2+4mg/l；Fe2+5mg/l；Cu2+2mg/l；Hg2+2mg/l ；Pb2+5mg/l；Cd2+5mg/l；Cr6+0.5mg/l；CN-0.05mg/l；悬浮物250mg/l。对含有游离氯或结合氯的样品可加入1.575g/l的亚硫酸钠溶液使样品中游离氯或结合氯失效，应避免添加过量，对微生物膜内菌种有毒害作用的高浓度杀菌剂、农药类的污水不适用本测定方法。 2术语2．1生化需氧量在一定条件下，微生物分解存在于水中的某些可被氧化物质，特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。2．2微生物菌膜将丝孢酵母菌在保持其生理机能的状态下封入膜中，称之为微生物菌膜或固定化微生物膜。2．3微生物传感器微生物传感器是由氧电极和固定化微生物膜组成。可检测微生物在降解有机物时引起的氧浓度的变化。2．4流通式水样或清洗液在蠕动泵的作用下连续不断的将样品或清洗液在单位时间内按一定量比送入测量池中。2．5间断式（加入式）将缓冲溶液加入到测量池中，使微生物传感器（微生物菌膜）与缓冲溶液保持接触状态，然后加入定量的被测水样，测得被测水样的BOD值。2．6恒温控制装置微生物电极的反应性能依赖于一定的温度条件，因此要求在试验过程中要有一稳定的温场，该装置在仪器中称之为恒温控制装置。2．7清洗液（缓冲溶液）清洗液是由磷酸二氢钾和磷酸氢二钠配置而成。其主要作用是作为缓冲液调节样品的PH值，清洗和维持微生物传感器使其正常工作，并具有沉降重金属离子的作用。 3原理测定水中BOD的微生物传感器是由氧电极和微生物菌膜构成，其原理是当含有饱和溶解氧的样品进入流通池中于微生物传感器接触，样品中溶解性可生化降解的有机物受到微生物菌膜中菌种的作用，而消耗一定的氧，使扩散的氧电极表面上氧的质量减少。当样品中可生化降解的有机物向菌膜扩散速度（质量）达到恒定时，此时扩散到氧电极表面上氧的质量也达到恒定，因此产生一个恒定电流。由于恒定电流的差值与氧的减少量存在定量关系，据此可换算出样品中生化需氧量。 4试剂分析纯试剂和蒸馏水，蒸馏水使用前应煮沸2-5min左右，放置室

一、适用范围适用于食物中毒样品中致病菌的快速筛查，常规样品中卫生指标菌与致病菌的日常监测以及检测样品的采集。 二、工作意义食品在生产、加工、储存、运输和销售等各个环节都有可能受到有害微生物的污染，从而引起食品腐败变质和食源性食物中毒的发生，而且一些危险的致病菌不断涌现出来。据世界卫生组织估计，在全世界每年数以亿计的食源性疾病患者中，70％是由于食用了各种致病性微生物污染的食品和饮水造成的。中国社科院发布的首部食品安全绿皮书《中国食品安全报告（2007）》指出，当前我国食品安全的形式依然严峻，其中微生物污染和化学性食物中毒是影响我国食品安全的最主要因素。微生物污染包括细菌性污染、病毒和真菌及其毒素的污染。2000年至2002年，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对全国部分省市的生肉、熟肉、乳和乳制品、水产品、蔬菜中的致病菌污染状况的监测结果表明，微生物性食物中毒仍居首位，占39.62％；化学性食物中毒占38.56％；动植物性和原因不明的食物中毒均占10％左右。为了减少和防止由微生物污染事件的发生，对食品采用有效的检验方法进行检测和监督是非常必要的。利用传统的检测方法，主要包括形态检查和生化方法，其准确性和灵敏性均较高，但涉及的实验较多、操作繁琐、需要时间较长、准备和收尾工作繁重。有条件的实验室采用了PCR仪、全自动细菌鉴定仪、全自动荧光酶标免疫测试系统等先进设备进行检验，具有快速、灵敏、准确的优点，但这些先进设备价值昂贵，基层检测监管单位和食品生产企业一般难以配备。1955年德国学者F.J.Forg 发明了一种简单快速的大肠菌群快速检测法—纸片法，使原来的检测周期由72小时缩短到15小时，材料成本降低了四分之三，同时大大简化了操作程序。从此，这种集化学、高分子学和微生物学于一体的检测方法开始发展起来，近十几年来发展更为快速。纸片法或测试片法是基于微生物具有复杂多样的酶系统，通过加入特异性酶的底物，在酶的作用下游离出发色基团，直接观察菌落颜色即可对菌类做出鉴定。从而使传统方法需要几步不同反应、几天甚至更长时间才能完成的检测过程简化为一步完成，检测时间缩短到24小时以内，不但能够大大提高检测工作的效率，还可减少大量人工成本。目前国外已有一些知名品牌，国内一些企业出品的此类产品其质量也是越来越好，为此项工作的开展与普及奠定了基础。另外，在国标检测方法基础上研发出的大肠菌检测试剂盒以及致病菌增菌检测试剂盒，采用包被技术将干燥培养基包被在试剂盒中，随时取用，也大大简化了实验前的准备工作。而且，大肠菌检测试剂盒秉承了国标方法中大肠菌阳性结果时的产酸产气的观察理念，保证了检测结果的准确性。至于致病菌增菌检测试剂盒，除日常卫生指标的控制外，更加有利于食物中毒因子的筛选和卫生保障应急处理时使用。

真菌鉴定手册：http://www.namipan.com/d/%e7%9c%9f%e8%8f%8c%e9%89%b4%e5%ae%9a%e6%89%8b%e5%86%8c.pdf/0dfe2b7aaa3d606bf1e8e1d3e65ab53557231cbac1d56f02伯氏细菌鉴定手册：http://www.namipan.com/d/%e4%bc%af%e6%9d%b0%e7%bb%86%e8%8f%8c%e9%89%b4%e5%ae%9a%e6%89%8b%e5%86%8c.pdf/72bb13dae06abbfe9ef1bdb4a026ec5345f7ef517fa15305细菌鉴定中常用的生理生化反应：http://www.namipan.com/d/20041211_%e7%bb%86%e8%8f%8c%e9%89%b4%e5%ae%9a%e4%b8%ad%e5%b8%b8%e7%94%a8%e7%9a%84%e7%94%9f%e7%90%86%e7%94%9f%e5%8c%96%e5%8f%8d%e5%ba%94.ppt/9c7f08dd1ffc814f26a0c2dc41fab0cfb21307f400e20400微生物菌种资源收集、整理、保存：http://www.namipan.com/d/%e5%be%ae%e7%94%9f%e7%89%a9%e8%8f%8c%e7%a7%8d%e8%b5%84%e6%ba%90%e6%94%b6%e9%9b%86%e3%80%81%e6%95%b4%e7%90%86%e3%80%81%e4%bf%9d%e5%ad%98.pdf/424adbf871aea32211d4f72f5410c1f09b9389fb4f520a00微生物产酶菌株的筛选：http://www.namipan.com/d/%e5%be%ae%e7%94%9f%e7%89%a9%e4%ba%a7%e9%85%b6%e8%8f%8c%e6%a0%aa%e7%9a%84%e7%ad%9b%e9%80%89.pdf/787a92fed50b2da00e23b0f0cc18a3c988d22983f35c0a00

由于本人需从事关于微生物检测与鉴定方面的工作，急需关于这方面的资料，包括微生物检测方法，微生物的鉴定方法等相关的资料，望各位老兄出手相助，本人感激不尽[em17] 油箱：xbdm715@163.com

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BOD五日生化培养和微生物电极法仪器怎么选择，国产的选择哪个厂家的测定法数据比较可靠稳定

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本文结合ISP半自动生化分析仪的基本原理，介绍对该仪器在使用中出现故障的诊断与维修