一个朋友要买液相色谱仪,配置如下:1200四元梯度泵(带脱气机),英国PL-380蒸发光检测器(包含工作软件)、VWD1200紫外检测器、流通池、主动柱塞清洗附件、1100手动进样器、气体调节器、原装二维液相色谱操作软件、过滤白头、water 8*100mm硅胶色谱柱、柱温箱等,其他还有一些要的东西,总之买来了就可以马上开机使用。报价54万,现在想能否再便宜点买下,大家看看可能不?还有一周就要写合同了,最后报价与大家分享,看看各位有什么高招。把积分给予报价价最接近的用户现在这个仪器肯定是要买的,价钱方面谈的也很低了,听说企业的大老板还不满意,所以还在拉锯,我发上来是想让大家看看仪器的价格里面到底有多少水分,哪位对仪器的报价看得比较准,不花冤枉钱。现在已经签下了,具体价格我不方便在这里讲,我把积分给最接近的用户,大家心里就明白了价位,以后买仪器就心里有数了。
各位同仁,我现在想配液相色谱仪,做化验用,工作量大,包括自动进样,四元梯度洗脱,柱温箱,全波长扫描检测器,脱气系统,中文工作站。我要从三个厂家waters,agilent和岛津中选一个,想买一个比较新的型号,请大家帮忙,从价钱和性能上,比较一下,哪个厂家哪个型号的更号,最基本要求是结实,耐用。精度,重现性,稳定性等其他方面的性能还请各位帮忙评价,谢谢!
主题:液相色谱进阶讲座之梯度洗脱简介:通过实例详细介绍“梯度洗脱”的意义、应用领域、操作方法以及优化,相信能够使广大网友的液相色谱技术有一些崭新的提高讲座办法:在讲座时间内,由主讲人上传资料;讲座时间结束,网友可以参与讨论提问等;讲座内容长期保存,网友可在任何时间进行浏览或下载讲座时间:2010-7-8,14:30~16:00主讲人:Godblesschina欢迎各位朋友届时参与!
[b][color=#444444]单位想购买台液相色谱仪[/color][color=#444444]想问下[/color][color=#444444]液相梯度泵二元的好还是四元的好[/color][/b]
[align=center][size=29px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中的梯度淋洗[/size][/align][align=center][/align]1 等度淋洗与梯度淋洗进行高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]分析时,常用两种洗脱方式,即等度淋洗与梯度淋洗。其中等度淋洗在分析全过程中流动相的组成不变。而梯度淋洗中流动相组成随运行过程是变化的(例如氢氧根体系中氢氧化钾浓度由15mM增至50mM)。下图为几种不同的梯度形状。其中曲线梯度较为不常见。[img=,690,396]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270935486413_397_1809927_3.jpg!w690x396.jpg[/img]目前许多实验室对梯度淋洗有很大偏见。他们偏爱等度淋洗的原因有以下几点:①一些实验室尚不具备支持梯度淋洗的色谱仪(只有一个泵且没比例阀)。②梯度淋洗更复杂,似乎更难建立新方法。③某些HPLC检测器(如示差折光检测器)不能使用梯度淋洗。④每次运行梯度淋洗后需重新平衡色谱柱,耗时较长。⑤不同设备的分离结果可能不同,所以梯度淋洗法移植时会出现保留时间差异。⑥梯度淋洗中的基线噪声和基线漂移更大,更容易受到试剂纯度的影响。⑦某些色谱柱或流动相不适于梯度淋洗。实际上,梯度淋洗分离方法的建立和日常操作与等度淋洗相比并不太难。而且很多分离只适于使用梯度淋洗。2 梯度淋洗的优势用等度淋洗时,由于流动相全程保持不变,如果待分析物,的保留差异很大,则会出现弱保留组分扎堆洗脱且强保留组分很晚才洗脱,从而无法获得满意的分离。[font='times new roman']为了比较等度淋洗与梯度淋洗的不同,我们使用同一根色谱柱分离相同的样品,下图是等度淋洗与梯度淋洗的对比谱图,上半部分为等度[/font][font='times new roman']淋洗曲线,下半部分为梯度淋洗曲线。通[/font][font='times new roman']过对比我们可以发现,等度淋洗时[/font][font='times new roman']1~6[/font][font='times new roman']号峰分离度不太理想,[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰保留时间过长,而在梯度淋洗时,为了改善[/font][font='times new roman']1~6[/font][font='times new roman']号峰的分离,我们采用较低的淋洗液浓度,为了快速洗脱强保留的[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰,我们在[/font][font='times new roman']6[/font][font='times new roman']号峰后提高了淋洗液浓度,使得[/font][font='times new roman']13[/font][font='times new roman']号峰由原来的[/font][font='times new roman']80[/font][font='times new roman']分钟提前到[/font][font='times new roman']40[/font][font='times new roman']分钟。由此可见,梯度淋洗可有效改善弱保留组份分离度,快速洗脱强保留组份。此外,等度淋洗时,弱保留组份峰形比较窄而强保留组份峰形较宽,梯度淋洗时增强洗脱能力可以使强保留组份也获得尖锐的峰形。[/font][align=center][img=,690,390]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270936062924_2978_1809927_3.jpg!w690x390.jpg[/img][/align]3 使用梯度淋洗时的注意点3.1 基线漂移[align=left]在[font='times new roman']HPLC[/font]中,不同流动相(水、甲醇、乙腈)对于紫外吸收的程度不同,导致梯度淋洗时产生基线漂移,且不可避免。[/align][align=left]在碳酸盐体系[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中,抑制产物是碳酸,碳酸浓度不同其电导也不同。故梯度淋洗会产生基线漂移,且不可避免。[/align][align=left]对于氢氧根淋洗液和甲烷磺酸淋洗液,抑制产物是水,理论上在梯度淋洗时不会产生基线漂移;而实际上由于试剂纯度以及抑制不完全等原因,也是存在基线漂移的。[/align]3.2 流动相平衡每次梯度淋洗结束时,流动相的组成已经与分析开始时大不相同了。为了下一次的梯度淋洗,必须用初始浓度的流动相对色谱柱进行彻底平衡后,再进行梯度淋洗。色谱柱平衡时间不足时,色谱图早期被洗脱的峰的保留时间会发生改变,而后期被洗脱的峰通常不受影响。3.3 流动相浓度的滞后现象当确定了梯度淋洗程序后,开始梯度淋洗,但由于实现梯度淋洗的仪器设备结构或电子控制系统等多种原因,使得我们实际观测到底梯度淋洗向后平移了一段时间,此现象称为梯度系统的滞后时间。使用相同的梯度淋洗程序,对于同一个样品,在不同的色谱仪上进行梯度淋洗,由于仪器结构、电路控制以及管线长度的差异,表现出的滞后时间往往不同。4 梯度淋洗的类型传统上,梯度淋洗分为高压梯度(也叫内梯度)和低压梯度(也叫外梯度)。另外,在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]领域提出淋洗液发生器的概念后,使用淋洗液发生器时也可以进行梯度淋洗。4.1 高压梯度(内梯度)高压梯度又称内梯度,采用多个高压泵将不同的流动相增压后送入混合室混合后送入色谱柱。流动相中有几种变化组分就称为几元梯度。二元梯度淋洗需要两台高压输液泵;三元梯度淋洗需要三台高压输液泵;每台高压输液泵的输出量由程序控制,按照设定程序将不同量的溶剂送到混合室混合,产生任意形式的梯度淋洗曲线。高压梯度通常以二元高压梯度最为常见。下图为二元高压输液系统示意图。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270931283755_4332_1809927_3.jpeg[/img]泵A和泵B出来的流动相在混合器里面混合的时候,都是处于高压状态,这时候,流动相对气体溶解度较高,流动相中不容易析出气泡,从而避免导致[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]压力波动、流速不准、基线波动等种种问题。4.2 低压梯度(外梯度)低压梯度又称外梯度,是在常压下将流动相的不同组分混合后再用高压输液泵送入色谱柱的方法,利用电磁比例阀控制不同溶剂的流量变化,使溶剂按不同比例被输送入到混合室中混合,然后用一台高压输液泵将混合好的流动相输送到色谱柱中。低压梯度通常以四元低压梯度最为常见。流动相对气体的溶解度较低,如果流动相中溶解的气体比较多的话,在混合时就可能有小气泡形成,导致压力波动等种种问题。气泡永远是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]的天敌。下图为四元低压输液系统示意图。[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270931284761_9930_1809927_3.jpeg[/img]低压梯度一定要配脱气机,先对流动相进行在线脱气,才能用电磁比例阀进行混合,要不然很容易产生气泡。而高压梯度一般情况下可以不用配在线脱气机就能在线混合,运行梯度方法。高压梯度的优势:优势1:混合精确性高从上面的介绍可以看到,两种梯度体系的混合方式完全不同。高压梯度相当直观,通过分别控制两个泵的流速,就能够准确控制两种流动相的比例。比如在1ml/min的流速下,要达到A:B两种流动相70:30的混合比例,那就设置A泵流速0.7ml/min,B泵流速0.3ml/min就可以了。当然这些都是系统和软件自动完成的。只要做到泵流速准确,比例就能准确。而低压梯度则通过电磁比例阀来控制混合比例,那比例阀又是如何工作的呢?一般来说,比例阀是通过控制入口通道分别打开时间的长短来控制混合比例的。举个例子可能更容易理解,仍然是A:B两种流动相70:30的混合比例。为了达到这个效果,B、C、D三个通道都关闭,A通道打开7ms,这时候进入系统的都是A;然后,A、C、D关闭,B通道打开3ms,这时候进入系统的都是B。这样就得到了70/30的流动相的比例。大家能感觉出来,进入系统的流动相其实是一段A、一段B这样的。如果两种流动相比例比较悬殊(比如某组分只占有1%),这种混合方式的误差相对比较大。优势2:延迟体积小使用高压梯度时,流动相混合后,经过混合器、压力传感器、阻尼器,放空阀,然后进入进样器。反观低压梯度,流动相混合后要经过整个泵头(包括主动入口阀、两个泵腔、出口阀、管路等等),才能到达进样器。一般来说,我们把流动相从混合开始,最后到达柱头这段体积叫延迟体积。流动相梯度的变化要到色谱柱头,才能够对分离产生影响,所以有一定的延迟。延迟体积越大,梯度的变化到达柱头的时间越长,导致分析时间越长。我们可以看到,高压梯度先天地决定了其延迟体积远小于低压梯度。这就决定了在色谱分析时间要求很短的梯度方法中,比如各种小粒径的色谱柱的快速分析方法,都采用高压梯度方法。不同品牌、类型的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]之间的延迟体积差异,是方法转移后出现结果跟以前不一样了的最大的原因之一。低压梯度的优势:高压梯度这么多优势,但在实际上,还是低压梯度用得更多一些。低压梯度的优势是:便宜。低压梯度只需要一个输液泵就能运行梯度条件,,高压梯度最低需要两个泵才能运行梯度。在运行方法条件不是很苛刻的时候,低压梯度能达到跟高压梯度一样的分析效果,而价格可能要便宜得多。而且只有一个泵,后期保养成本也低。因为便宜,所以市场保有量更大,很多标准方法都是在低压梯度下开发的。用高压梯度需要进行方法移植。如果用一些三元甚至更高元梯度的方法,四元低压梯度可以直接拿来用,高压梯度需要购置三个甚至四个泵,成本进一步提高。四元低压梯度可以在进样程序中直接设置走完序列后冲洗瓶子;而高压梯度要达成这样的方法,需要购置阀控或者更多的泵。4.3 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]淋洗液发生器产生的梯度淋洗[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]使用的流动相以酸碱盐的水溶液为主,传统的配制方法是称量试剂并溶解定容。淋洗液发生器通过电解在线产生高纯度淋洗液,并支持梯度程序,是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]发展中的重大跨越。此处以[font='times new roman']KOH[/font]淋洗液发生器为例介绍淋洗液发生器的原理。淋洗液发生器通电时,阳极电解产生氢离子及氧气,氢离子和罐中的氢氧根离子反应生成水,导致罐中钾离子(阳离子)比氢氧根离子(阴离子)数量多。多出来的钾离子在电场及渗析作用的驱动下通过阳离子膜到达氢氧化钾发生室。阴极在氢氧化钾发生室的底部,电解产生氢氧根离子和氢气。[align=center][img=,591,290]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/09/202209270936253224_254_1809927_3.jpg!w591x290.jpg[/img][/align]随着超纯水不断流入氢氧化钾发生室,钾离子和氢氧根离子以及氢气随着水流入[font='times new roman']CR-ATC[/font][font='times new roman'](主要作用是去除杂质阴离子)[/font]和脱气盒,在脱气盒中氢气被去除。所产生的KOH溶液的浓度由施加电流与去离子水的流速决定。根据法拉第电解定律,在恒定流速下,施加电流和所产生的KOH浓度之间呈正比,可通过控制所加的电流得到准确浓度的KOH淋洗液,因此也可以实现梯度淋洗。操作鼠标即可设置淋洗液的浓度梯度,有效地简化了操作和缩短了运行时间,使其与等度淋洗一样方便,此项技术被称为“只加水”[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]技术。5 总结进行梯度淋洗可以达到以下目的:缩短分析周期;提高分离能力;峰型得到改善;增加灵敏度,但通常会引起基线漂移。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]中,使用淋洗液发生器产生的梯度淋洗精度通常高于高压及低压梯度,推荐使用。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]中,高压梯度及低压梯度各有优势,可根据实验室条件及预算进行选配。6 参考文献牟世芬,朱岩,刘克纳.《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]方法及应用》(第三版)化学工业出版社于世林.《图解高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]技术与应用》科学出版社R.施奈德,J.L.格莱吉克 著 王杰 赵岚峰 王树力 丁洁 译 《实用高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]法的建立》(第二版)科学出版社青岛睿谱分析仪器有限公司 《[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]实用手册》张新庆 “二元泵和四元泵哪个好”gz号
怎样提高液相色谱的分离度(梯度)
各位大侠:请教一个问题,液相色谱仪梯度有高压和低压的区分,我一直弄不明白这两种梯度方式那种更具优势,梯度混合效果更好,请给一个好的答案!!!!!!!!!!!!!中国心中国心中国心
能得出梯度曲线是否证明液相色谱仪能做梯度洗脱!!我很想知道!!请知道的朋友尽快和我联系!!谢谢!!
我们在使用液相色谱仪时,经常会遇到梯度条件。那么用二元高压梯度使用时,最高的比例是多少呢?(二元高压使用的是静态混合器,四元低压一般使用的是动态混合器)希望大家积极讨论!
液相色谱在梯度测定的设置中对于梯度变换率的控制如何进行探索,曲线的参考值是怎样的一个区别?
刚接触液相色谱,请教下等度与梯度是什么意思,两者在仪器配置上有什么区别,做梯度是不是一定要两个泵
液相色谱梯度方法开发的一些细节改进,仅供参考!!!
因资金有限,欲求购二手AGILENT1100二元梯度液相色谱和HP6890[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]各一台,大连地区最好,请有这方面信息的朋友不吝回复。
请教各位大峡梯度洗脱是怎么回事,最近想买一台液相色谱,实验室本来只有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url],所以对液相不太了解.如果想买一台液相色谱,能做梯度洗脱,对设备有什么要求,是不是一定需要两台泵.
我是使用液相色谱的菜鸟,现在遇到了一点点问题,请各位前辈解答。两个样品用高效液相色谱测定,一个的条件是:甲醇:ph3缓冲液=75:25,在10分钟左右出峰,流速1ml/min;另一个的条件是:甲醇:ph3缓冲液=5:95,在6分钟左右出峰,流速0.5ml/min,如果我想同时测定,可以用梯度洗脱吗?如果可以的话,流动相比例过程中的变化改怎么设置,请各位大神赐教,谢谢。
我是使用液相色谱的菜鸟,现在遇到了一点点问题,请各位前辈解答。两个样品用高效液相色谱测定,一个的条件是:甲醇:ph3缓冲液=75:25,在10分钟左右出峰,流速1ml/min;另一个的条件是:甲醇:ph3缓冲液=5:95,在6分钟左右出峰,流速0.5ml/min,如果我想同时测定,可以用梯度洗脱吗?如果可以的话,流动相比例过程中的变化改怎么设置,请各位大神赐教,谢谢。
请教各路大神,高效液相色谱梯度优化有什么技巧吗?
没用过液相色谱,也没培训过,自己在摸索。梯度洗脱怎么设置?如图,在41分钟时候溶剂从A65%B35%逐步达到A 100% B0%?还是在41分钟时候才转换成a100% b0%[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/04/202104131001220789_9197_4020217_3.png[/img]
验证液相色谱仪器梯度,AC泵水,BD泵0.4ACE+水,结果走出图谱整体型对(如图),但是不直,跟标准图谱有一定的差距,请教大神这是为什么啊?[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/05/202105192136203450_935_5186246_3.jpg[/img]
液相色谱梯度流动相调PH值是两个泵都调还是调一个就可以了,例:甲醇:水 20:80 ph值是3.0,是甲醇和水里面ph都用调3.0吗?
本人现在在做液相色谱的计量检定相关实验,按照国标,已经完成一部分了,可是现在碰到一些问题,希望做过这方面的有经验的人士给予提点和帮助,先谢谢各位了!首先是关于梯度误差,按照国标要求,已经执行了梯度程序,也得到了比较好的梯度图,可是至于数据,不知道该怎么处理,Lm说是各段输出信号值平均值的平均值,按照国标中的公式算,不对啊,梯度误差都在百分之几十???希望做过这方面的给予提点。下图附件就是梯度图。然后就是关于波长示值误差和线性范围这两块,不知道怎么做,如果按照国标那么做,根本就做不出来啊················差点忘了说,我所检定的液相是岛津LC20的。。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/09/201109161352_317068_2271280_3.jpg
高效液相色谱梯度洗脱时应该注意的问题?
安捷伦1260液相色谱从哪设梯度洗脱
依利特P200II高效液相色谱仪可以做梯度洗脱吗?
大家好!我想请教一下关于JJG705-2002液相色谱鉴定规程梯度误差中,‘Lm-各段输出信号平均值的平均值’指的是什么,不是太明白,谢谢啦!
对于二元,四元的概念,其实很多朋友都容易和泵的数量混淆。还有系统中低压和高压的具体所指概念也同样有此类问题。元,指的是流动相的管路 二元, 一般常规是配2个泵,在泵后混合,也就 混合器里是高压状态,这种梯度混合系统就是 二元高压梯度混合系统。 四元,一般只用一个泵来提供压力,混合器在泵前面,混合器里是低压状态(相对二元那种的高压,而不是和生活中那种所谓的 大气压对比,这里很容易混淆) 这种就是所说的 四元低压梯度混合系统。那么还要特别说一下以上的全称:二元高压梯度混合系统高压液相色谱仪 四元低压梯度混合系统高压液相色谱仪对,后面都是高压液相色谱仪, 这就是为什么会容易被人故意混淆概念。这里要说明一点:四元高压梯度混合系统高压液相色谱仪 这种是可以做的,但管路和柱子的压力几乎难以工作,何况常规液相流动相也就常规3种混合。举个浅显的例子:你会在家用汽车上装个喷气式发动机吗?!如果有人对 Q_Rrad 3600Q 这个系统有比较清楚的了解,请告知一下,诚心求教。
有什么办法能让单泵液相色谱进行梯度洗脱?大家讨论下[em52] 我想到一个办法,不知道行不行但是现在还没想好[em53]
[img=,624,780]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/09/201909091631034572_2547_3434948_3.png!w624x780.jpg[/img]有没有大神能够帮我解答一下,为什么文中叙述在18min结束梯度是最佳(18min结束的话,按照2%/min,梯度浓度应该是50%-86%),最后梯度浓度却是80%?(80%的浓度对应应该是15min的梯度时长),而且图b中15min峰都没出完,18min才出完的,这样不应该是梯度过早结束?(我这个是 《使用高效液相色谱法的建立 纠错版 第八章》),而且图d中70min根本没有出完峰,文中为什么说d运行需要70min?
我们在使用高效液相色谱仪做分析时通常会接触到多元泵。所谓几元,指的是能同时控制流路的多少。多元泵又分为高压混合与低压混合。高压混合又叫泵后混合,多元高压泵由多个泵构成,有几元则有几个泵,例如LabAlliance的PC2001型二元高压梯度泵、Series 4000系列的四元高压梯度泵等。低压混合又称泵前混合,其实就是一个泵,几元就是安装几路电磁阀,例如Agilent 1200型四元低压梯度泵等。为方便理解,附图如下(以四元泵为例):http://img1.17img.cn/17img/images/201408/uepic/4a1125ae-ea25-4775-80f1-326341dd8e9e.jpg!t600x500.jpg如图所示,四元高压梯度:配置有四个可独立工作的泵+在线混合器。工作方式为四个泵并联,可同时有四个流动相,按照预先设定的配比进入,分别送液到泵后的混合室内,在高压下进行混合,混合配比更准确,不易产生气泡,不用为了转换流动相而反复清洗,不仅节省溶剂,也提高了工作效率。无需增加真空脱气机,降低了混合死体积(泵前混合时、混合管、泵头等体积,脱气机内死体积)。同时,可以做梯度洗脱:当待测样品成分复杂,用一个固定的流动相配比无法将样品中成分完全分开时,就需要用到梯度洗脱,在同一个分析过程中由仪器自动改变流动相配比,将样品中前期无法分离的物质进行洗脱,在同一谱图中得到分开的峰的效果。有助于提高分析准确性,避免了遗漏重要物质或对其进行错误定性定量。http://img1.17img.cn/17img/images/201408/uepic/75fdfc3c-6ecd-4e5b-bbd1-b2c676c90a64.jpg!t600x500.jpg然而,四元低压梯度:配置比较繁琐:由单泵+低压混合比例阀(电磁阀)+在线脱气机+混合器构成,它的工作方式也与高压梯度泵有很大区别:最多可同时有四个流动相进入流路,按照预先设定的配比进行混合,是依靠电磁阀的切换使泵分段输送不同流动相,由于在常压下混合,气泡很容易从溶剂中析出,较易产生气泡,因此必须配备在线脱气机,可消除气泡影响。可以做梯度洗脱,在仪器上进行设定之后,在同一样品分析工程中,相隔一段时间后,按照用户的设定自行改变流动相配比,将样品中组分分离开来。目前HPLC仪器制造厂家大都推出四元低压梯度(带在线脱气)系统,而在数年前大都是二元高压梯度,以往四元低压系统通常是进口仪器的专属产品,国内大多采取高压混合的方式,并没有涉及到低压系统的应用开发,在国内有些招标项目中也有明确提出选用四元低压的案例,广大客户可能会误以为四元低压是进口仪器的先进技术,实则不然,四元低压实际上是对二元高压的补充,也就是说当比例发生改变的流动相数量较多,二元高压不能满足分析的时候,四元低压弥补了这一不足。但如果比例发生改变的流动相数量在2个以内,包括2个,应该来说二元高压梯度系统在作高精度分析时优势明显。从目前的售价看,四元低压的泵比二元高压的并低不了太多,但他们节约的成本是不少的。四元低压梯度系统采用单泵加梯度比例阀来实现,因为比例阀是在泵前的,并且各流路的溶剂在比例阀里就混合在一起了,所以是泵前、低压混合。一般地,对于常规分析来说,四元低压梯度也可以满足需要;如果分析样品成份复杂、对重现性要求较高,或者需要在低流量下进行梯度分析,还是选择高压梯度好一些。当然,现在美国SSI(LabAlliance)公司推出的四元高压梯度泵,在保证高精度分析的同时,也解决了流动相数量受限制问题。液相色谱从性能上比较,四元高压肯定优于四元低压。四元高压的混合比例是通过改变泵的流速来获得的,通常泵的流速都是很准的,所以混合的精度也是很高的。四元低压梯度的混合比例是通过控制不同流路的电磁阀的开闭时间长短来控制的,理论上混合的比例也是准确的,但是实际上电磁阀的开闭会有一个延迟,无论它动作多么快,总还是需要一点时间的。比如A路和B路各50%混合,在单位时间内,A路和B路的电磁阀各开通50%的时间,这时问题不大,电磁阀的延迟影响可以通过调整补偿系数来尽量弥补。但是如果极端一点的情况,[
之前的求助液相色谱检测5种增塑剂用甲醇配的标准溶液出现与dehp重叠的干扰峰怎么解决?重叠峰的问题我找到原因了,应该是之前梯度条件t=0 水:甲醇=30:70t=5 水:甲醇=0:100t=10 水:甲醇=0:100t=15 水:甲醇=30:70太高的问题,这回用0 水:甲醇 15:855 水:甲醇 5:9510 水:甲醇 0:10015 水:甲醇 5:95,20 水:甲醇 15:85 波长225,要是波长275峰就会比225的要低 做校正曲线时就不会出现有重叠峰的错误警告了,但是这个梯度在检测2,5,10.20,50,微克每毫升时峰型还理想,0.5和1就基本没型了,从2到50这五个点做的校正曲线相关系数都在0.99858到0.99976之间,还有我用甲醇配的标准溶液,进样时没有用一次性针头和滤膜过滤,要是过滤的话就会在DEHP的位置出现一个很高很高的峰,就连只进甲醇或者丙酮溶剂都会出现,不知道是不是一次性针头和滤膜中有DEHP?难道就这样过滤下就能污染了吗?要是不过滤又怕损坏柱子,还有这个梯度应该怎么计算啊?也不能就随便尝试没个依据的,看那些理论的线性梯度、凹形梯度、凸形梯度和阶梯形梯度也不知道是怎么算的,有没有简单点的算法啊,或者根据我这次的条件怎样来继续优化,我做的5种增塑剂的保留时间:2.215, 2.791. 4.463. 9.421. 10.024,怎样才能让后两个也早点出峰,不要让他们距离这么远啊,改成下面条件时0 水:甲醇 15:854水:甲醇 5:958水:甲醇 0:10010水:甲醇5:95,15 水:甲醇15:85 保留时间为2.218, 2.783, 4,376, 8.625, 9.164要是把时间在改短些最后一个峰结束后基线会有很大波动,要是运行序列的话,是不是必须要把结束时的梯度设的和初始的一样才能不会影响下一个测试啊?不知道大家都是怎么做梯度优化的?我看了一些论文:如:反相高效液相色谱中复杂体系二元多台阶梯度分离条件快速优化方法 单亦初 赵瑞环 张维冰 梁 振 张玉奎 “提出了一种反相高效液相色谱中二元多台阶梯度分离条件快速优化方法。通过数次线性梯度初始实验,求得溶质的保留方程。在此基础上,利用重叠分离区域图(OSRM) 方法,快速求得复杂样品的最佳多台阶梯度分离条件。该方法只需要几个小时就可以完成对复杂样品分离条件的优化,并通过对中药川芎提取物的分离加以验证,获得了较好的预测精度和分离效果”那些基本原理公式太复杂了,而且他那些梯度具体是怎么计算预测的也没写,希望大家帮帮忙谢谢了