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液体石油发光法氮试验器

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液体石油发光法氮试验器相关的论坛

  • ASTM D4629,GB/T 17674原油中氮含量的测定 舟进样化学发光法

    SH708化学发光定氮仪采用化学发光法测定总氮含量,提高了抗杂质干扰的能力,避免了电量法对滴定池的繁锁操作和因此带来的不稳定因素,使得仪器的灵敏度大为提高。系统关键部件采用进口器件,使得整机性能有了可靠的保证。适用于测定石腊油、柴油、汽油、润滑油、燃料油、液化气及天然气,以及其它油品、化工原料及成品的总氮含量,执行标准SH/T 0657液态石油烃中痕量氮测定法(氧化燃烧和化学发光法,ASTM D4629,GB/T 17674原油中氮含量的测定 舟进样化学发光法。[b]性能特点[/b] 1、采用气动撑支撑仪器上盖,翻开仪器上盖内部结构一目了然。2、低含量和小含量的锋形和重复性比较好。3、仪器能够连续24小时开机连续使用的准确的化学发光定氮仪。4、样品中的总氮含量是通过化学发光的方法被快速测量的。5、高精度的数据采集和计算机技术的应用为数据的采集、控制、处理提供了可靠的保证。[b]技术参数:[/b]基本参数:样品种类:液体、固体和气体测定方法:化学发光法样品进样量:固体样品:1-20mg 液体样品:5-20μL 气体样品:1-5mL测量范围:0.1 ~10000mg/L

  • 【讨论】美研制神奇荧光液体可让患者神经发光

    http://i1.sinaimg.cn/IT/2011/0210/U5385P2DT20110210073410.jpg这种荧光液体可以注射到患者体内,使患者体内的神经发光,从而让通常不可见的神经现形。http://i3.sinaimg.cn/IT/2011/0210/U5385P2DT20110210073430.jpg  这种液体是一种缩氨酸,可以帮助外科医生直接看清楚最敏感的神经,而不是像以前那样只能依赖于经验和电子监测设备。  北京时间2月10日消息,美国加利福尼亚大学圣地亚哥分校科学家近日研制出一种神奇的荧光液体,这种液体可以注射到患者体内,使患者体内的神经发光,从而让通常不可见的神经现形。  据介绍,这种液体是一种缩氨酸,可以帮助外科医生直接看清楚最敏感的神经,而不是像以前那样只能依赖于经验和电子监测设备。因此利用这种液体,可以在手术中避免因为意外伤害而导致神经疼痛或瘫痪等严重问题。  科学家们表示,目前关于这种荧光液体的实验都是成功的。建筑工人在开始挖掘地面之前,需要清晰地了解地面之下埋设的电缆。这种荧光液体在医学上的功能就类似于此,它是由美国加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院一个研究团队研制的。科学家们将荧光液体注射进老鼠的体内后发现,缩氨酸在神经和其他组织之间形成了一种鲜明的对比。在医疗操作中,这种液体可以让手术更加容易。  研究发现,用肉眼就可以识别出神经与其他组织之间的颜色差异,而且这种差异比利用其他方式产生的差异要大10倍。实验表明,这种液体的荧光效应通常在两个小时后开始消失,且至多持续8个小时,但对受测目标没有明显的副作用。此外,研究人员还惊讶地发现,这种缩氨酸还可以让受损的神经现形,只要那里还有血液流通。  加州大学药理学、化学和生物化学教授罗杰尔-泰恩是该项研究的论文联合作者之一。泰恩表示,“我采用的原理是,建筑工人在挖掘地面时,他们需要清晰地知道地面之下的电缆分布情况。同样地,在肿瘤手术中,医生需要一个‘活地图’来显示神经的具体位置。”  目前,外科医生通常依赖他们对人体结构的认识和肌动电流描记器等监测设备来确保手术不会伤害神经。他们需要利用电极发现运动神经。但是,对于一些更小、更敏感的神经,他们很难识别。论文联合作者之一、加州大学头部和颈椎外科学助理教授奎伊-努伊解释说,“外科手术中最优先的是要保护神经。比如,如果神经被肿瘤侵害,或者由于外伤或感染需要手术时,被侵害的神经也许看起来不像正常神经那样,或者它们已错位。这时就需要更清晰地定位这些神经。”  努伊表示,未来这种缩氨酸将在人体上进行测试,但前提是需要继续精炼。“当然,我们目前还没有在人类患者身上测试这种缩氨酸。但是,我们已经证明这种荧光探测器可以标注人体内的神经。”科学家们的研究成果发表于《自然生物技术》杂志上。

  • 化学发光定氮仪

    技术参数 1.测定范围:从0.1ppm到百分之几 2.用于测定原油、馏分油、石油气中的总氮含量 3.测定塑料、石化产品、食物以及水中的总氮含量 -------------------------------------------------------------------------------- 技术文章此仪器没有任何技术文章 -------------------------------------------------------------------------------- 主要特点1.符合ASTM D4629及SH/T0657方法的要求 2.仪器采用人机对话,提示操作步骤。 3.结果自动打印 -------------------------------------------------------------------------------- 仪器介绍仪器采用氧化裂解---化学发光的原理,可测定固体、液体和气体中的总氮含量,方法符合ASTM D4629及SH/T0657方法的要求。已成功的用于测定原油、馏分油、石油气、塑料、石油化工产品、食物以及水中的总氮含量,测定范围从0.1ppm到百分之几。仪器采用人机对话,提示操作步骤,结果自动打印。

  • 化学发光定氮仪

    技术参数 1.测定范围:从0.1ppm到百分之几 2.用于测定原油、馏分油、石油气中的总氮含量 3.测定塑料、石化产品、食物以及水中的总氮含量 -------------------------------------------------------------------------------- 技术文章此仪器没有任何技术文章 -------------------------------------------------------------------------------- 主要特点1.符合ASTM D4629及SH/T0657方法的要求 2.仪器采用人机对话,提示操作步骤。 3.结果自动打印 -------------------------------------------------------------------------------- 仪器介绍仪器采用氧化裂解---化学发光的原理,可测定固体、液体和气体中的总氮含量,方法符合ASTM D4629及SH/T0657方法的要求。已成功的用于测定原油、馏分油、石油气、塑料、石油化工产品、食物以及水中的总氮含量,测定范围从0.1ppm到百分之几。仪器采用人机对话,提示操作步骤,结果自动打印。

  • 【分享】REN-1000A型化学发光定氮仪的维护与管理

    REN-1000A型化学发光定氮仪器可测量固体、液体和气体中的总氮含量,符合ASTMD4629方法的要求,已成功的用于测定原油、馏份油、石油气、塑料、石油化工产品以及食物和水中的总氮含量。由于省去繁锁的电化学池子的操作和维修,简化操作,省去氢气,避免可能发生燃烧爆炸的危险而公认为是当前较灵敏、准确、快速、简便的方法。本文就如何维护与管理该仪器提出一些观点和看法。

  • 【转帖】毛细管电泳电化学发光的心得体验

    [size=3]做电泳已有两年时间了,主要开展毛细管电泳电化学发光的应用研究,在此和大家一起分享下个人的小经验吧。[/size][size=3]毛细管电泳具有高分离效率、短的分析时间、少的样品和试剂消耗等诸多优点;电化学发光是由电化学反应引起的化学发光,其不需要外加激发光源,背景信号低和线性范围宽等优点,已成为一种常用的高灵敏度检测方法。毛细管电泳分离与电化学发光检测的结合联用充分展示了其高分离效率和高灵敏度的特点。但是,因为在毛细管窄内径下进行电驱动分离,这是一个大的挑战,虽然提高样品进样体积可以提高检测的灵敏度,但是简单的增加样品体积也可能导致分离度的下度。另一方面,电化学发光检测是由电化学引发的,这样毛细管电泳的高压电场对其也会造成一定的影响,而对于采用较大内径的毛细管影响尤为突出。以下通过毛细管电泳分离和电化学发光检测两方面来聊聊个人心得。[/size][b][size=3]一、毛细管电泳分离[/size][/b][size=3]为使多种混合样品试剂得到良好分离,需要考虑较多因素;如样品溶剂的选择、进样时间和进样电压、温度、电泳高压、电泳缓冲液类型、[/size][size=3]电泳缓冲液浓度及[/size][size=3]PH、是否需要添加剂以及添加剂的选择等等吧。以下从各个方面稍作介绍:[/size][size=3][b]样品溶剂的选择[/b];通过实验发现,不同样品溶剂对分离和灵敏检测都有一定的影响,水和电泳缓冲液作样品溶剂占多数,我们实验一般用水作溶剂,有时候也用有机溶剂。实验结果偏差较大。下面图[b]Ⅰ[/b]是我实验中考察样品溶剂对实验结果的影响,选择了A和B两种样品溶剂进行实验,发现B溶剂对分离效率和检测灵敏度都有明显改善作用。图Ⅱ是我的一个师兄以前做的实验关于样品溶剂的影响考察,他选择了5种样品溶剂,结果发E溶剂效果最佳。[/size][table=100%][tr][td][b][size=3]Ⅰ[/size][/b][/td][/tr][/table][table=100%][tr][td][b][size=3]Ⅱ[/size][/b][/td][/tr][/table][size=3]对原因的分析我们认为可能是由于背景电解质溶剂的粘度改变导致进样体积的改变,另外,分析物在不同样品溶剂中的溶解度不同应该也是一个因素吧。[/size][size=3][b]进样时间和进样电压;[/b]它们对样品的进样量有直接影响,上面我已经粗略聊过毛细管进样量的大小对分离效率的影响,进样量太大,峰可能脱尾加宽,这样分离效率不高应是必然了,进样量太少的话的检测灵敏度方面又会造成影响的。[/size][size=3][b]温度;[/b]这个因素我不加具体实验方面的讨论了,因为我们用的仪器根本就没有带温控装置;温度对毛细管电泳的影响也只是书上的理论知识,抱歉了!自己实验中根据气温变化一般开空调控制到室温啦,呵呵。[/size][size=3][b]电压高压;[/b]这一点我想做毛细管电压的同志基本都知道其影响了,也是实验中必要优化的条件之一吧。[/size][size=3][b]电压缓冲液类型;[/b]它的选择也确是一个因素,不管对分离还是检测。影响也比较明显。大家看一下我的这个关于缓冲液类型考察的图吧。[/size][b][size=3][/size][/b][size=3]四种不同种类的缓冲液,得到的分离效果图。很明显啊,D缓冲液为我所需![/size][size=3][b]电泳缓冲液浓度及PH;[/b]这个因素对分离和检测也是有影响的,一般对这个条件优化时,通过考察电泳缓冲液浓度对检测灵敏度的影响,而其PH不仅考察对检测灵敏度的影响,还有一个分离效率,即分离度。[/size][size=3][b]添加剂;[/b]添加剂包括的种类繁多,可根据不同需要选择不同的添加剂,比如做蛋白质分离检测时,可能需要找一些对防止蛋白质吸附效果较好的添加剂,文献报道比较多,我实验中曾经使用过聚乙烯吡咯烷酮(PVP),效果还不错,不过实验中得注意一个细节,每次实验结束后(欲关闭仪器停止实验一段时间的话),最好用水冲洗一下毛细管。要不然毛细管容易被堵死,因为PVP感觉粘粘的,时间长了好像会凝固。呵呵!另外,为了提高分离效率,也可选择一些像离子液体,表面活性剂等添加剂的,我一个师兄用过离子液体,效果不错。[/size][b][size=3]二、电化学发光检测[/size][/b][size=3]电化学发光与毛细管电泳目前一般采用柱后检测的,以Ru(bpy) [sub]3[/sub][sup]2+[/sup]的电化学发光行为为主,为提高检测灵敏度,需要考察电化学系统的工作电极类型及处理情况、工作电极与毛细管出口端的距离、检测恒电位、柱后液的PH及浓度等等因素。[/size][size=3][b]工作电极类型;[/b]Ru(bpy) [sub]3[/sub][sup]2+[/sup]的电化学发光通常采用铂电极和金电极作工作电极,我实验中采用铂电极;实验前,为得到良好效果,电极需要进行抛光处理并超声清洗表面。这方面如果是做电化学的同志应该都很清楚了。[/size][size=3][b]电极与毛细管出口端的距离;[/b]距离太近,在电极表面附近的柱后液被电泳缓冲液冲淡而影响灵敏度,距离太远的话,电泳分离的样品到达电极表面的发生电化学反应的程度可能不高,进而也影响灵敏度。[/size][size=3][b]检测电位;[/b]它对Ru(bpy) [sub]3[/sub][sup]2+[/sup]在电极表面的氧化速率有很大影响。[/size][size=3][b]柱后液PH及浓度;[/b]它们对电化学发光也有很大影响,选择合适的PH和浓度也有实验中需要考察的一个因素。[/size][size=3]以上是关于毛细管电泳分离电化学发光检测方面个人的一些粗浅认识,与大家分享,有不当之处请各位见谅,并提出宝贵意见。谢谢!(来源于[b][color=#3b85d6][font=Verdana]plf0717[/font][/color][/b])[/size]

  • 化学发光应用2

    3. 化学化光在生物领域的应用 化学发光在生物学领域也有着很多应用,主要简介如下: 3.1 Fe 2 + 离子催化的化学发光自由基启动的脂质过氧化 (L PO) 是一个链式反应过程。 在链式反应过程中, Fe 2 + 离子起着启动和催化的作用。 反应过程中产生脂自由基 (R - ) 、烷氧自由基 (RO - ) 、共轭二烯和脂过氧化自由基 (ROO - ) 等中间产物。 ROO - 自反应会产生激发的烷氧自由基 (RO 3 ) 和单线态氧 (O 2 ) ,其回到基态时产生发光。 另外,两个 O 2 分子相互作用也可产生发光。 因此,把 Fe 2 + 盐加入含有脂肪的系统中,如细胞膜、线粒体、微粒体、血浆、组织匀浆、尿液等,可产生化学发光。 化学发光的动力学曲线,可分为快速闪光期、潜伏期、缓慢发光期和稳定发光期。有报告提出,快速闪光期的发光强度与样品中过氧化氢含量有关,潜伏期的长短与样品中抗氧化剂含量有关,而缓慢发光期和稳定发光期的发光强度则反映了系统的过氧化水平,即系统产生活性氧的能力。 3.2 血浆和血清的化学发光 许多实验研究对加入 Fe 2 + 盐的不同疾病患者血浆和血清的化学发光进行的测量表明,与正常健康人相比,腹腔器官局部缺血、肢端闭合性局部缺血、血氧含量下降以及出血、手术性休克病人血浆和血清的发光强度降低。 与此相反,风湿性关节炎、阑尾炎、胆囊炎、胰腺炎等炎性疾病患者血浆和血清的发光强度升高。 降低和升高的幅度与疾病的严重程度有关。 有研究提出,利用此方法有可能对非典型的心肌梗塞和腹腔器官炎性疾病做出区别诊断。 3.3 血浆脂蛋白的化学发光 有研究提出,以分离的血浆脂蛋白悬液作为系统模型可以研究不同物质对系统过氧化的调节机制。在分离的血浆脂蛋白悬液中加入胆固醇,温育一定时间后在加入 Fe 2 + 盐,测量化学发光,发现胆固醇能使系统的发光强度降低。分析认为,这可能是由于类固醇的存在抑制了系统的过氧化。对实验性胆固醇过多血症家兔和动脉粥样硬化早期病人进行的测量发现,载脂蛋白 APO – B 。在 Fe 2 + 存在条件下的发光强度出现了增长。同样的现象在肝硬化和慢性肝炎患者身上也被发现。 3.4 尿液的化学发光 利用尿液的化学发光可以研究肾脏功能的变化。将 Fe 2 + 盐加入尿液中,测量其化学发光,发现肾功能不足者尿液的发光强度降低。与正常健康人相比,阑尾炎患者尿液的发光强度则有不同程度的提高。利用这一方法可以评估肾脏的排泄及收缩功能。 3.5 物质抗氧化活性的测定 利用发光测量技术可以评价某些生物组织和体液的抗氧化活性。以某一稳定的发光系统为模型,如脂肪体、线粒体、卵黄脂蛋白等,将待测的抗氧化物质加入该系统,然后加入 Fe 2 + 盐,测量其化学发光。 根据系统化学发光被抑制的程度可以评价物质的抗氧化活性。 利用这一方法进行的研究证明,不同疾病患者血浆和血清的抗氧化活性是不同的。 3.6 H 2 O 2 激发的化学发光 3.6.1 血浆和血清的化学发光 在血浆和血清中加入 H 2 O 2 溶液后能激发化学发光。有报告提出,发光强度与血浆中血红素的水平呈线性相关,相关系数为 + 0. 71 。在上述发光系统中,加入过氧化氢酶或松香油后,发光被抑制,加入叠氮化钠 (NaN 3 ) 后,发光几乎完全消失。 H 2 O 2 激发的血浆和血清的化学发光,其启动因素很可能是血红素过氧化物酶催化 H 2 O 2 分解引起的。血红素过氧化物对 H 2 O 2 的分解是以 H 2 O 2 氧化其底物为前提的。在这一反应过程中导致自由基及其中间产物生成,并与机体分子相互作用,产生 O2 等活性物质,产生发光。 NaN 3 和松香油是 O2 的抑制剂,所以在上述发光系统中加入松香油的 NaN 3 后,发光被抑制。血液中血红素过氧化物酶等以自由基方式分解 H 2 O 2 ,而过氧化氢酸则以非自由基方式分解 H 2 O 2 ,生物体内这两类反应体系协同作用,能很好的清除细胞内的 H 2 O 2 。病理条件下,这一反应体系的平衡被破坏, H 2 O 2 激发的化学发光强度将发生相应改变。因此,根据血浆和血清化学发光的变化,有可能对某些疾病进行区别诊断。 3.6.2 红细胞的化学发光 1981 年 Cepгиеко 等人在分离出的红细胞悬液中加入 H 2 O 2 溶液,对其化学发光进行测量。 发现,随着红细胞的老化和溶解,系统发光强度呈增长趋势。随后对实验性动脉粥样硬化家兔红细胞化学发光进行的测量发现,与正常对照组相比,发光强度出现了降低。这可能是由于细胞膜中胆固纯含量过高造成的。对恶性肿瘤患者的调查也发现发光强度的改变。红细胞的衰老与脂质过氧化有关。 H 2 O 2 能引发膜脂过氧化, H 2 O 2 和脂质过氧化产物都能引起血红蛋白释放 Fe 2 + , Fe 2 + 是诱发一系列自由基反应、起动脂质过氧化的催化剂。自由基的产生不仅促进了红细胞的衰老和溶解,而且引发的脂质过氧化还可以导致膜脂组分和结构的改变,直接影响红细胞的生理功能。

  • 凯氏定氮仪与化学发光定氮法的比较

    燃烧法定氮仪也叫化学发光定氮仪,它与凯式定氮仪的区别体现在原理,测定对象,标准,样品量,价格,运行费用,分析速度,自动化程度,工作环境等方面,具体介绍如下:一、原理不同:凯氏方法是绝对测量;燃烧法是相对测量凯氏定氮仪是应用凯氏定氮法的仪器设备,凯氏方法是利用浓硫酸消化、碱性环境蒸汽蒸馏、硼酸吸收、指示剂滴定终点颜色判定法,根据滴定体积来计算出氮含量。燃烧法:在高温情况下,使用充足的氧气将样品全部燃烧,生成氮的氧化物,再还原出氮元素,利用TCD 检测器测量其信号强度,与事先标定的曲线进行比对,计算出样品中的氮含量。凯氏方法是绝对测量,与标准样品无关,可以直接测量标准品的含量,并用来检验仪器的准确性;燃烧法是相对测量,必须依靠标准品,标准品的准确性定标直接影响测量结果,没有办法检验仪器的准确性。二、测量的对象不同:凯氏测量的是氨态氮;燃烧法测量的是总氮样品中的氮含量根据定义不同有:总氮、凯氏氮、铵态氮、硝态氮、亚硝态氮;也可以分为:有机氮和无机氮。燃烧法测量的是总氮的含量。凯氏方法可以分别测量出来上述各个氮含量。样品不经过消化直接蒸馏测量,就是无机氮中的铵态氮;在蒸馏过程中加入催化剂将硝态氮、亚硝态氮转换成铵态氮,其结果就是无机氮。样品经过消化蒸馏得到的是凯氏氮,在消化前加入催化剂将硝态氮、亚硝态氮转换成铵态氮,得到的是总氮。因而燃烧法测量的结果总是高于凯氏氮的结果;没有人为掺假的食品,二者测量结果是一样的。三、标准不同:凯氏方法是所有样品的国标;燃烧法是参考方法凯氏方法是食品、饲料、土壤、环境、种子等样品中氮或蛋白质含量测量的强制标准,测量结果具有互通性和可比性。由于燃烧法和凯氏法测量的氮含量对象不同,造成样品种类不同、成份不一样,结果偏差也不一样。燃烧法不适合化肥中的氮含量的国家标准。四、样品量不同:凯氏方法是常量分析;燃烧法是微量分析凯氏方法是常量和半微量;燃烧法是从微量扩展到半微。凯氏法固体到5g、液体到15ml;燃烧法最多到1g。凯氏法可以一直使用最大量分析,而燃烧法如一直使用最大量分析,则燃烧后的无机残渣堆积在仪器里面,要求频繁清理,同时也会缩短仪器的使用寿命。对于均匀性不好的固体样品,脂肪高的食品,只能通过大取样量来减少测量结果的偏差,燃烧法显得稍微。困难;如大豆、玉米。此外鲜肉类食品,由于蛋白、脂肪分布不均匀,也建议是大的取样量。

  • 化学发光法测定水中铬

    化学发光法测定水中铬一、实验目的1.掌握化学发光法进行定量分析的原理;2. 了解化学发光测定仪的使用方法。 二、实验原理根据化学发光强度或发光总量来确定物质组分含量的分析方法称为化学发光分析法。化学发光现象自十九世纪以来即为人们所知悉,但其作为一种分子发射的专门技术应用在分析化学上却是近期的事情。人们在自然界中可以观察到一种醒目的化学发光例子,即大气上空的“晚霞“,这是原子气体化学反应所造成;其它常见的化学发光现象则有萤火虫和其它昆虫的生物发光。在碱性水溶液中,游离铬离子可催化鲁米诺-过氧化氢体系的化学发光反应,产生λmax=425nm的化学发光。光强度与铬(Ⅲ)离子浓度在一定范围内呈线性关系。据光强的大小即可测出铬(Ⅲ)的浓度。铬(Ⅵ)对发光反应无催化活性,不干扰铬(Ⅲ)的测定。若测定铬的总量,须先用亚硫酸处理水样,使铬(Ⅵ)还原为铬(Ⅲ),再进行测定。三、仪器与试剂1.化学发光测定仪(FT-632型),容量瓶,刻度吸管,液体加样器等。铬标准溶液:100μg•mL-1, 0.2562g干燥的CrCl3•6H2O(A.R),溶于少量水中,转入500mL容量瓶定容,使用时逐级稀释到100μg•mL-1为操作液。3.鲁米诺溶液储备液:1×10-3mol/L。称取0.08856g鲁米诺,用1mol/LNaOH溶解,转入500mL容量瓶中,用去离子水定容,避光保存。分析液:2.5×10-4mol•L-1。量取125mL鲁米诺储备液,分别加入50mL 0.0100 mol/L 1.0×10-2mol•L-1 EDTA,4.2g NaHCO3,30gKBr及250mL二次水,用1mol•L-1NaOH调节pH为12,于500mL容量瓶中定容,避光保存,四小时后使用。4.过氧化氢溶液:6‰取0.5mL30%H2O2于250mL容量瓶中,用0.1mol•L-1NaOH溶液定容。四、实验步骤1.试液配制分别吸取100μg•mL-1的铬(Ⅲ)操作液0.0,0.2,0.4,0.6,1.0mL及1.0mL水样于50mL容量瓶中,分别加入5mL 2.5mol•L-1KBr溶液,5ml 1.0×10-2mol•L-1EDTA溶液,二次水定容。2.测定仪器通电后5分钟调增益至5.7,稳定半小时。测定时吸取0.2mL样品于小试管中,将试管 置入样品池,转至测量位置,记录仪于扫描档,立即注射0.2mL鲁米诺与过氧化氢的等体积混合液,记录发光信号,绘制工作曲线,算出水样中的铬含量。实验完毕后,将增益调至零,再关仪器开关并清洗试管和注射器。

  • 蒸发光检测器

    各位老师,蒸发光检测器里面的虹吸处液体直接被吹出去了,该怎么办呢前提查找原因有:雾化头已做清洁;仪器清洁;

  • 请问化学发光法的具体步骤方法。 (贤集网刊)

    简介:PIERCE的化学发光技术居于世界领先地位。由于采用了持有专利的Luminol/增强剂技术,因此灵敏度高、发光持续时间长。正是由于性能卓越,许多知名的化学发光试剂盒厂商都是采用PIERCE提供的底物系统作为生产原料。目前,PIERCE的化学发光技术已经广泛用于Western/Northern/Southern印迹、ELISA、EMSA等实验中,使用范围越来越广。SuperSignal® Western化学发光底物系统是PIERCE的旗舰产品。原理:在HRP催化作用下,过氧化物与Luminol/增强剂反应发强光,可见光信号可以用压片法检测。Western实验中,HRP标记在二抗上,与一抗-靶蛋白复合物结合,再用SuperSignal®底物进行发光检测。具有方便、灵敏、信号持久的特点。SuperSignal®系列化学发光底物的性能:West Pico化学发光底物 West Dura持久性化学发光底物 West Femto最高灵敏度化学发光底物 最低检测极限 10-12克 10-14克 10-15克 建议抗体稀释度 一抗:1/1000-1/5000 一抗:1/1000-1/50000 一抗:1/5000-1/100000 二抗:1/20000-1/100000 二抗:1/20000-1/250000 二抗:1/100000-1/500000 信号持续时间 6-8小时 24小时 8小时 工作溶液稳定性 室温24小时 室温24小时 室温8小时 贮藏液存放时间 室温1年 室温1年 室温6个月或4°C一年 推荐印迹膜 NC膜 NC或PVDF膜 NC或PVDF膜 特点/优点:1.强发光;相同条件下,SuperSignal® West Pico底物产生的光强度是ECL底物的2倍(如图示:SuperSignal® West Pico与ECLTM系统的发光强度的比较)。 uperSignal? West Pico底物,曝光1m ECLTM系统,曝光1m SuperSignal? West Pico底物,曝光5mECLTM系统,曝光1m 2.卓越的灵敏度,抗体稀释倍数高(如图示:SuperSignal® West Pico的检测灵敏度)用1/5000 的一抗和1/400000的二抗标记IL-2的杂交膜,用SuperSignal® West Pico底物可以检测低至61飞克的IL-23.稳定的信号持续,信号持续时间长(如图示:SuperSignal® West Pico与ECLTM系统发光动力学比较) 二抗标记的膜用两种底物系统孵育6h后相对发光强度比较具体资料可见:http://www.ebiotrade.com/custom/hyclone/SuperSignal.htm回复:参见下面的帖子!建议多在论坛里搜索!http://www.bbioo.com/bbs/thread/741011http://www.bbioo.com/bbs/thread/759135http://www.bbioo.com/bbs/thread/684487www.xianjichina.com

  • 【分享】水中发光细菌的微毒检测

    没人发帖我来活跃气氛:发光细菌的微毒检测生物发光是某些生物的一种生理现象,海洋生物中更为多见。自1672年R.Boyle观察到发光的菌体所发出的光易被化学物质抑制后,许多科学家相继对细菌的发光效应进行了大量的研究。本世纪70年代至80年代初,国外科学家首次从海鱼体表分离和筛选出对人体无害,对环境敏感的发光细菌,用于检测水体生物毒性,现已成为一种简单、快速的生物毒性检测手段。80年代初我国引进了这项技术,并先后分离出海水型和淡水型的发光细菌,用以检测环境污染物的急性生物毒性;近年来还分离出明亮发光杆菌暗变种检测环境污染物致突变性,扩大了检测范围。一、发光细菌检测的原理与操作(一)基本原理发光菌检测法是以一种非致病的明亮发光杆菌作指示生物,以其发光强度的变化为指标,测定环境中有害有毒物质的生物毒性的一种方法。细菌的发光过程是菌体内一种新陈代谢的生理过程,是光呼吸进程,是呼吸链上的一个侧支,即菌体是借助活体细胞内具有ATP、萤光素(FMN)和萤光素酶发光的。综合化学反应过程为: 该光波长在490nm左右。这种发光过程极易受到外界条件的影响。凡是干扰或损害细菌呼吸或生理过程的任何因素都能使细菌发光强度发生变化。当有毒有害物质与发光菌接触时,发光强度立即改变,并随着毒物浓度的增加而发光减弱。这种发光强度的变化,可用一种精密测光仪定量地测定。美国Microbics公司设计制造了一套微毒测定仪器。国内中国科学院南京土壤研究所,华东师范大学生物系也分别成功地研制了DXY-2型和SDJ-1型的生物发光光度计(生物毒性测试仪)。(二)典型操作1.典型操作方法 目前国内外细菌发光的测定常用的有二种方法。(1)新鲜发光细菌培养测定法 即将发光菌接种于液体培养基中,在适当条件下(20℃±0.5℃)振荡培养到对数生长期,配制为含3%NaCl盐度的适当浓度的菌悬液加入测试管中,再加入待测液,使之和菌种接触,作用5min~15min后,读出井记录对照管和样品管发光强度。此法操作较为简便。(2)冷冻干燥发光细菌制剂测定法,把培养到对数生长期的发光细菌,以冷冻干燥法制成冻干粉剂,使用时加入冷的2%NaCl溶液复苏,使其恢复到原来的生理状态和发光水平,然后用于测定。这是国家标准方法,其优点是可实行测定的质量控制。冻干粉可长期保藏方便使用,操作简便,节约时间。2.试剂与材料(1)测试菌种 明亮发光杆菌(Ptotobacterium phosphoreum)T3小种。①新鲜明亮发光杆菌悬浮液。②或明亮发光杆菌冻干粉(800万Cell/g)。(2)培养基①液体培养基 酵母膏5.0g,胰蛋白胨5.0g,NaCl30.0g,Na2HPO45.0g,KH2PO41.0g,甘油3.0g加蒸馏水至1000ml。pH7.0±0.5。②固体培养基 培养液(按上述配方)1000ml,琼脂169g,pH7.0±0.5。(3)稀释液 3%NaCl,2%NaCl。(4)参比毒物 0.02mg/L~0.24mg/L的HgC12系列标准溶液。(5)仪器与器材①DXY-2型生物发光光度计(中国科学院南京土壤研究所研制)及2ml或5ml比色管。②恒温振荡器,培养箱,手提式高压消毒锅。③10ul或20ul微量加液器,1ml注射器,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url],容量瓶,三角瓶。(6)检测样品 视实验目的而定。二、发光细菌法的应用根据发光细菌法的原理和方法,凡能干扰或破坏发光细菌呼吸、生长、新陈代谢等生理过程的环境因子,例如有毒有害的物质等都可以运用发光细菌法检测生物毒性。其主要应用包括:1.发光细菌对水、土、气中化合物的急性毒性评价及快速评价水源水和地面水的质量,渔业水体,农田灌溉水体等的检测。2.工业废水,废气和固体废弃物的急性毒性与评价,及污染源的毒性追踪与判断,河流流经地域的排污分担率的估算,污水合格排放的稀释率的推算与评定。3.土壤重金属急性毒性效应测定和评价,土壤金属毒性的协同或拮抗效应监测。4.化学品的毒性评价与安全性评定,化学危险品的风险评定,以及环境污染物的致突变性的评价。5.环境保护处理设施效果的监控。随着环境学科的发展,发光细菌法的应用范围和前景将愈来愈宽广。三、发光细菌法测定急性毒性的操作程序(一)发光细菌新鲜菌悬液的制备(第1法)1.斜面菌种培养 于测定前48h取保存菌种,于新鲜斜面上接出第一代斜面,20℃±0.5℃培养24h后立即转接第二代斜面,20℃±0.5℃培养24h,再接出第三代斜面20℃±0.5℃培养12h后备用。每次接种量不超过一接种耳。2.摇瓶菌液培养 取第三代斜面菌种近一环,接种于装有50ml培养液的250ml三角瓶内,20℃±0.5℃,184rpm/min下培养12h-14h备用。3.将培养液稀释至每毫升108个细胞~109个细胞,初始发光度不低于800mV,置水浴中备用。(二)菌液复苏(第2法)取冷藏的发光菌冻干粉,置冰浴中,加入0.5ml冷的2%NaCl溶液,充分摇匀,复苏2min,使其具有微微绿光,初始发光度不低于800mV。(三)样品采集与处理1.水样(1)从不同工业废水的各排放口,每4h采样一次,连续采集24h后,均匀混合后备用。(2)纳污水体 取其入口,中心,出口三个断面混合水样备用。(3)以同上方法采集清洁水,作空白对照。浊度大的污水,需静置后取上清液。一般样品不需加任何处理。水样按3%比例投加NaCl置冰箱备用。2.气体样品 以大气采样法取大气样品于气体吸收液中吸收5ml,按3%比例投加NaCl,置冰箱备用,同法收集清洁空气作为对照组。3.固体样品 取固体废弃物,按《工业固体废物有害特性试验与监测分析方法》制备浸出液,以取上清液,按3%比例投加NaCl,置冰箱备用。(四)试验浓度的选择在预备试验的浓度范围内,按等对数间距或百分浓度取3个~5个试验浓度,同时设空白对照和参比毒物系列浓度组。(五)发光细菌法生物毒性测定1.工业废水或有毒物质的生物毒性测定(1)发光菌悬液初始发光度测定取4.9ml3%NaCl溶液于比色管内,加新鲜发光菌悬液或冻干粉复苏菌悬液10ul,若测量发光度在800mv以上,允许置冰浴中备用。(2)取已处理待测废水样品,按等对数间距或百分浓度编号,并注明采集点。(3)按表依次加入稀释液,待测水样及参比毒物系列浓度溶液。(4)打开生物毒性测试仪电源,预热15min调零点,备用。(5)每管加入菌悬液0.01ml,准确作用5min或15min,依次测定其发光强度,记录毫伏数。每个浓度设三管重复。 2.工业废气(或有害气体)的生物毒性测定(1)气体直接通入法 用注射器直接注入气体于菌悬液中,经10min~20min测定发光菌光强度的变化。(2)气体吸收法 方法同工业废水测定法。(3)固体菌落法 挑选固态培养到对数生长期的发光菌单茵落,连同培养基切下,置比色管内,测定初始发光强度,然后用注射器将待测气体注入菌苔表面,经10min~20min后,测定发光度的变化。(六)实验结果处理与评价1.记录工业废水,废气的生物毒性实验数据及其计算。(1)相对发光率或相对抑光率计算公式: (2)EC50值 在半对数座标纸上,以横座标为对数浓度,以纵座标为相对抑或发光率,作图,求得EC50值。2.数据处理与评价(1)建立相对抑光率与参比毒物系列浓度的回归方程,求出样品的生物毒性相当于参比毒性的水平,以评价待测样品的生物毒性。(2)以EC50值评定样品的生物毒性水平 总之发光细菌法是检测环境生物毒性的一种好方法,它具有快速、简便、灵敏

  • 60万!武汉血液中心全自动化学发光免疫分析系统及新冠抗体化学发光试剂采购项目

    [quote]项目概况武汉血液中心全自动化学发光免疫分析系统及新冠抗体化学发光试剂采购项目 采购项目的潜在供应商应在武汉市江汉区新华路151号纽宾凯国际酒店23楼2308室现场领取/网上领取获取采购文件,并于2023年02月01日 09点30分(北京时间)前提交响应文件。[/quote][font=inherit]一、项目基本情况[/font]项目编号:WHCSIMC2023-9516003ZF(W)项目名称:武汉血液中心全自动化学发光免疫分析系统及新冠抗体化学发光试剂采购项目采购方式:竞争性磋商预算金额:60.0000000 万元(人民币)采购需求:[table][tr][td][align=center][font=inherit]序号[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]货物名称[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]数量[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]单位[/font][/align][/td][td][align=center][font=inherit]采购[/font][font=inherit]预算([/font][font=inherit]万元[/font][font=inherit])[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]全自动化学发光免疫分析系统[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][td][align=center]套[/align][/td][td][align=center]20[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]2[/align][/td][td][align=center]新型冠状病毒抗体试剂[/align][/td][td][align=center]60000[/align][/td][td][align=center]人份[/align][/td][td][align=center]40[/align][/td][/tr][tr][td=4,1][align=center]合计[/align][/td][td][align=center]60[/align][/td][/tr][/table]合同履行期限:交货期:设备交货期为合同签订后10天内;试剂按采购人要求分批次送货,接到订单后7个工作日内送货质保期:设备自验收合格之日起免费维修、保养、校验五年(含所有相关耗材、零配件及人工费用),每年一次以上免费的保养(含所有相关耗材、零配件及人工费用);试剂有效期≥12个月本项目( 不接受 )联合体投标。

  • 化学发光联用技术-流动注射化学发光

    FIA-CL检测系统 流动注射分析是Ruzicka和Hansen于1975年首先提出的一种创新技术,这种新技术的发展摆脱了溶液化学分析平衡理论的束缚,可在物理和化学不平衡状态下进行测定。它适应性广泛,分析效率高,试样和试剂消耗量少,检测精密度高,设备简单。该技术发展非常迅速,已被广泛应用于很多分析领域。流动注射分析技术能使样品和试剂以高度重现的方式混合,从混合到检测的时间间隔可以严格控制。同时,由于计算机控制和大规模集成电路的出现,FIA可以实现自动化分析。而一般的化学发光是快速反应,在溶液混合的瞬间就产生发光信号,并且在几秒内发光强度达到峰值。要达到精度较好的测量结果,就必须严格保持测量过程中的物理性质和化学性质能很好地重现。在这方面,流动注射为化学发光分析提供了一个很好的手段。在流动过程中,所有的试验参数如试剂体积、保留时间、温度、试剂的混合时间和方式等都能严格控制并重复操作。因此,这种方法克服了化学发光分析法重现性差、操作费时、不便于实现自动化等缺点。流动注射和化学发光分析的结合,使之成为一种快速、有效的痕量分析技术,被广泛应用于水质检测、土壤样品分析、农业和环境监测、科研与教学、发酵过程监测、药物研究、禁药检测、血液分析、食品和饮料、分光光度分析、火焰光度分析、质谱分析、原子光谱分析、荧光分析、生物化学分析等等。 流动注射化学发光系统一般包括两个部分。一部分是流动体系部分,它控制发光试剂的流速及其混合方式;另外一部分是化学发光检测部分,它将检测到的发光反应发出的光转变成电信号,并由记录仪记录下其发光响应值。常见的流动注射化学发光检测器的装置示意图如图1-1a所示: 图1-1 FIA-CL 联用装置示意图Fig. 1-1 Schematic diagram of FIA-CL detectionP:蠕动泵;V:进样阀;C:流动池;D:检测器;R:记录仪; W:废液 一般优化的流路有三通路、四通路和多通路等形式,各发光试剂以某一恒定流速经蠕动泵驱动,通过进样阀将待测组分与发光试剂混合, 在流动池里面发生化学发光反应, 流通池亦即反应池内的光信号由光电倍增管转换并放大,最后由记录仪记录。由于该检测法不需要光源,消除了光源不稳定的杂散光的干扰, 另外直接检测发光强度,因此灵敏度很高。流动池中的反应可以是不完全反应,只要其中的试剂分散和反应程度可以高度重现就符合试验要求。试样和试剂的分散是所有FIA方法的核心问题,通常用分散系数D来描述试样的分散状态。D定义为:决定分析读数的流体微元组分在扩散过程发生前(C0)与发生后(Cmax)的浓度比值,即D=C0/Cmax 。FIA体系中的分散过程是许多不同因素 (包括流速、管道长度、管径、试样体积与检测方式等)的复杂函数。主要影响有:①试样的进样体积越大,D越小;②反应器管长度越大,D越大;③管路集合形状越复杂,试样在其中流动方向改变越多,D越大;如:直管反应器的D最小,盘管与编织管反应器的D较大。④流速对D的影响与反应器的管径大小有关,关系较复杂。在此装置中,流动池的设计是个关键。由于直管反应器的分散系数较小,试剂分散度不够,所得的发光强度值较弱。因此,在实际中,一般采用如图1-1b所示的盘管式反应器。一般来说,反应器的体积应尽可能大,其发光截面尽可能大,且同光电倍增管尽可能靠近。根据实际分析情况,还可以将萃取渗析、交换柱及填充柱引入FIA系统,使FIA-CL应用更加广泛。

  • GB/T11132液体石油产品烃类测定仪适用范围

    [font=&]液体石油产品烃类测定仪适应标准:GB/T11132,A2090用于测定石油中的饱和烃、烯烃和芳烃的体积百分数。它应用了荧残炭光指示剂使液体石油产品中主要烃类在硅胶吸附柱上显示出来的原理,从而计算烃类的体积百分数。石油产品烃类测定仪采用了环保安全型的设计结构,是同行业中的新型结构,它避免了操作者和紫外灯的直接接触,保护了操作者的安全。同时采用了进口精密吸附柱,烃类界面的标定采用了可移动的定位指针。同时本机采用了两组振荡器,并且振荡器和测定仪为一体的设计方式,用户可以根据自己的需要调节各路的振荡频率,使其得到需要的振荡频率,使仪器的操作更加方便。 [/font][font=&]得利特(北京)科技有限公司专注于油品分析仪器的研发和销售活动,公司产品有:馏程测定仪、铜片腐蚀测定仪、辛烷值测定仪、冷滤点测定仪、饱和蒸气压测定仪、硫氮测定仪、实际胶质测定仪、石油烃类测定仪、冰点测定仪、石油产品热值测定仪、X荧光硫元素分析仪等多种燃料油分析仪器、绝缘油分析仪器、润滑油分析仪器 (润滑油过滤性测定仪),水质分析检测仪器、气体检测仪器,型号多,质量保证,可定制。他们家新品辛烷值十六烷值测定仪性能比较稳定且符合以上标准。[/font]

  • 安捷伦科技公司重新设计了硫和氮化学发光检测器

    2015 年 10 月 1 日,北京 — 安捷伦科技公司(纽约证交所:A)今日宣布推出其行业领先的硫和氮化学发光检测器的全新设计版本。 炼油厂、石油化工生产商以及食品和饮料公司均依赖于精确的硫和氮检测以满足污染和产品质量领域日趋严格的全球法规要求。 新型 Agilent 8355 硫化学发光检测器和 8255 氮化学发光检测器是能够全面集成气相色谱仪、检测器和软件的唯一一款解决方案,可实现快速可靠的低浓度分析。 安捷伦副总裁兼气相分离事业部总经理 Shanya Kane 表示:“随着硫和氮检测对于上游和下游活动的重要性日益凸显,我们深入研究了自己的金标产品并对其进行了重新设计,使其性能得到了显著提升。 我们的新型硫和氮检测器将能够满足当今时间紧迫且亟需获得准确结果的实验室的要求。” 重新设计的检测器具有出色的灵敏度与特异性,且由于采用减少了 50% 组件的简化燃烧头设计而更易于维护。 过去需要花费一小时的最常见维护程序如今仅需 10 分钟即可完成。 这款新型检测器可以与 Agilent 7890B 气相色谱仪完全集成。 它们还可作为独立单元提供,可与任意品牌气相色谱仪连接。 Agilent 8355 和 8255 标志着硫和氮化学发光检测技术的一次重大改进,使这项技术更加可靠且更易于使用。有人知道改进了哪么?性能变化如何?

  • 液体石油化工产品取样器简介

    液体取样器材质不锈钢304或316L,液体取样器是一种特别设计的取样器,适合液体样品的采集。特别适合液体中某个点液体样品的采集。底部采样器又称:底阀型采样器、底部取样器。底部采样器可分为不锈钢底部采样器、黄铜底部采样器,材质分别为不锈钢、黄铜。底部采样器符合GB/T6680、GB/T4756国家标准。底部采样器适用于采取油罐或槽车底部的样品。底部采样器规格:300ml、500ml、1000ml。全层取样器适用于采取石油及液体石油产品容器整个深度“圆柱形”样专用器具(对于采取容器顶部可用可卸采样器或加重采样器;对于采取容器上部、中部、下部可用任意采样器或加重采样器;对于采取容器底部样品可用底部采样器)。全层取样器结构精巧、使用灵活方便。全层取样器规格:1000ml。瓣阀采样器可采取容器顶部、上部、中部、下部(底部样品可用底部采样器采集)的样品。瓣阀采样器结构精巧、使用灵活方便、采样深度准确。瓣阀采样器广泛应用于石油、化工、教育、环保、卫生、科研等行业。瓣阀采样器规格:500ml、1000ml。腐蚀性液体采样器材质聚四氟乙烯,可采取任意深度的样品,腐蚀性液体采样器特有的结构可使任意深度样品采集更准确、放入样品更方便。腐蚀性液体采样器具有使用方便、采样准确、容易清洗、使用寿命长等特点。我公司针对采样时采样绳索容易被腐蚀的弱点,研制出柔软、容易打结点的聚四氟乙烯采样绳和不锈钢采样链。沥青采样器又称:沥青取样器 沥青采样器 不锈钢沥青采样器。沥青采样器符合GB/T11147-89《石油沥青取样法》国家标准。沥青采样器适用于液体沥青在生产、贮存或交货验收地点的取样。沥青采样器采用304不锈钢制造,并有液体沥青盛样器(用于盛装沥青)可供选择。 半自动取样机及取样器用于采取石油及液体石油产品定点样、组合样和每米间隔样的专用器具。半自动取样机及取样器适用在大、中、小型贮油罐、油槽车以及船舱内采取代表性试样。 槽车采样管适用于采集槽车中的样品。槽车采样管也适用于采集深度不大于3米固定式储罐中的样品。槽车采样管可采集容器整个深度的样品(也称全层样品、全液位样品)且不搅动样品(也可采用全层采样器采集,其他:对于采取容器顶部可用可卸采样器或加重采样器;对于采取容器上部、中部、下部可用可控采样器或加重采样器;对于采取容器底部样品可用底部采样器)。沾油采样筒又称:不沾油采样筒 采样筒 不沾油采样桶 不锈钢不沾油采样筒。不沾油采样筒适合于油品的采集,具有不沾油功能,方便人员清洗。不沾油采样筒采用宝钢钢板制造。不沾油采样筒具有不沾油、易清洗、不漏、使用方便、美观等优点。

  • 重发化学发光与生物发光(转载)

    化学发光是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象,可以分为直接发光和间接发光。直接发光是最简单的化学发光反应,有两个关键步骤组成:即激发和辐射。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光体,此过程中由于C直接参与反应,故称直接化学发光。间接发光又称能量转移化学发光,它主要由三个步骤组成:首先反应物A和B反应生成激发态中间体C*(能量给予体);当C*分解时释放出能量转移给F(能量接受体),使F被激发而跃迁至激发态F*;最后,当F*跃迁回基态时,产生发光。 一个化学反应要产生化学发光现象, 必须满足以下条件: 第一是该反应必须提供足够的激发能, 并由某一步骤单独提供, 因为前一步反应释放的能量将因振动弛豫消失在溶液中而不能发光 第二是要有有利的反应过程, 使化学反应的能量至少能被一种物质所接受并生成激发态 第三是激发态分子必须具有一定的化学发光量子效率释放出光子, 或者能够转移它的能量给另一个分子使之进入激发态并释放出光子。 化学发光分析测定的物质可以分为三类:第一类物质是化学发光反应中的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或抑制剂;第三类物质是偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式用来测定其他物质,进一步扩大化学发光分析的应用范围。 化学发光反应的发光类型通常分为闪光型(flash type)和辉光型(glow type)两种。闪光型发光时间很短,只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型,发光时间从几分钟到几十分钟,或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量,必须配以全自动化的加样及测量仪器。辉光型样品的测量可以使用通用型仪器,也可以配有全自动化仪器。本产品针对辉光型化学发光反应进行检测。 生物发光(Bioluminescence)是化学发光中的一类,特指在生物体内通过化学反应产生的发光现象,主要由酶来催化产生的。如萤火虫产生的。现在我们实验中经常用到的荧光素酶报告基因系统,这些皆为生物发光。 生物发光和化学发光是自然界中一种普遍现象。至今人们已知能发光的生物,种类繁多,从低等的细菌到高等的发光鱼类,从植物幼苗、植物枝叶到人体表面经络穴位、脑、肝、血清等,其发光的主要物质几乎都是由莹光素酶、莹光素及其辅助回子所组成。随着对生物发光机制的深入研究,一些生物体的发光体系已经初步搞清并用这些体系去分析生物体和化学中的一写微量物质。生物发光分析法渐渐地被引入医学领域,诸如通过莹火虫莹光素酶发光体系测量细菌中的AT已用以确定尿路感染中的细菌数,以发光细菌的发光强度为指标去定量抗菌素的效价,标定环境的污染状况等。因此,对这一领域的研究有着重大的经济和社会效益。 工业方面:发酵工业中测量主物量,控制发酵条件;油脂、食品工业中测量油脂、食品的氧化变质程度;橡胶、塑料工业,测量产品的老化程度,检测掺入抗氧化原料的效果,医药工业,检测抗菌的效价。 农业方面:根据植物幼苗的发光强度,判断植物的抗寒性、抗热性。抗盐性及农作物营养发育生长状况等,为农业育种和栽培技术提供依据。 药学方面:测量吞噬细胞的吞噬作用相伴随的化学发光强度和使用发光免疫分析法,检查肌体的免疫功能,了解体内微量激素、微量元素、维生素及药物的含量。测量体液中的AT已判断肌体的能量代谢状况,尿路感染的程度,测量血清(血浆)的化学发光强度。间接地判断疾病的发生、发展和程度,鉴别诊断某些病思。测量自由基的反应,为抗衰老、抗肿瘤、抗辐射筛选有效的自由基药物。 环保方面:用细菌、动物、植物及化学发光体系的发光指标监测环境污染。由于发光测量具有灵敏度高、特异性强、稳定性好,反应速度快、使用方便等优点。发光分析技术的研究和应用必将在免疫学、微生物学、生物化学、临床检验、毒理学及医学、农业、工业。环保科学等领域得到广泛应用,为了促进发光分析技术的发展,我厂为社会提供高灵敏、高稳定度、线性范围宽、应用面广、有计算机控制及自动作图、自动数据处理、自动打印结果的8HO一C型全自动生物化学发光测量仪。为生物、化学发光及超微弱发光的检测提供了有效的手段,对发光分析技术的研究和应用,将作出一定的贡献。

  • 【转】化学发光实验[From PAC]

    【转】化学发光实验[From PAC]

    前言之前 由于中考的失利 迫使实验室得转入地下但这并不意味着结束 只要有希望 只要有信念 终究能够成功中考的失败并不能证明那就是我的水平 就好比这只是一次小小的失误那么 进入高中以后 无论进入哪个高中 我依然会继续努力 向更高的目标迈进 正文 化学发光(chemiluminescence)是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象。 最简单的化学发光反应,有两个关键步骤组成:即激发和辐射。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质,反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*,处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。 这里提到的C*是发光体,此过程中由于C直接参与反应,所以称之为“直接化学发光”。 我实验时采用的是3-氨基邻苯二甲酰肼(鲁米诺)作为发光剂。鲁米诺只有用氧化剂处理过才会发光。通常使用双氧水和一种氢氧化物碱的混合水溶液作为激发剂。在铁化合物催化下,双氧水分解为氧气和水,使鲁米诺的电子达到激发态,开始发光。鲁米诺的反应如下图所示: http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/05/201205061638_365204_2019107_3.jpg 其中呢,实验室中常以铁氰化钾作为催化剂铁的来源,而法医学上的催化剂则恰好是血红蛋白中的铁。我刚好家里没有铁氰化钾,也没有同学给我提供血液样本,于是乎就掏出了尘封多年的 亚硝基铁氰化钾 =。=... 好了 咱们先来配置鲁米诺试液,配方如下:

  • 【实验】有机实验之化学发光剂鲁米诺的合成

    化学发光剂鲁米诺的合成 目的原理 了解鲁米诺化学发光的原理。许多化学反应都是以发热的形式释放能量,也有一些化学反应主要是以光的形式释放能量,鲁米诺(Luminol)在碱性条件下与氧分子的作用就是一个典型的化学发光例子。一般认为,鲁米诺在碱性溶液中转化为二价负离子,后者与氧分子反应生成一种过氧化物,过氧化物不稳定而生分解,导致形成一种具有发光的电子激发中间体。现已证实,发光体是3-氨基邻苯二甲酸盐二价负离子的激发单线态。当激发单线态返回至基态,就会产生荧光。激发态中间体也可将能量传递至激发能量较低的受体分子,受激发的受体分子再通过发出荧光释放能量恢复至基态。不同受体分子的激发态能量的差异使得其发出的荧光各不相同,这些现象在本实验中都可观察得到。仪器药品 3-硝基邻苯二甲酸:13g(0.0062mol);10%水合肼:2.0ml(0.0063mol);二缩三乙二醇:4ml;10%氢氧化钠水溶液:6.5ml;二水合连二亚硫酸钠:4g(0.019mol);冰醋酸2.6ml;氢氧化钾15g;二甲亚砜25ml。过程步骤将1.3g3-硝基邻苯二甲酸和2ml10%的水合肼置入25ml吸滤管中,用酒精灯对吸滤管加热至固体溶解。然后加入4ml二缩三乙二醇,将吸滤管垂直固定在铁架台上,投入一粒沸石,插入温度计。将吸滤管的支口通过安全瓶与水泵相连接。打开水泵,用酒精灯对吸滤管直接加热,吸滤管内反应剧烈沸腾,蒸出的水蒸气由侧管抽出。大约5分钟后,温度快速升至200℃以上。继续加热,使反应温度维持在210~220℃约2分钟,打开安全瓶上活塞,使反应体系与大[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]通,停止加热和抽气。让反应物冷却至100℃,加入20ml热水(加热后再冷却,所获粗产物容易过滤),进一步冷却至室温,过滤,收集浅黄色晶休,即得5-硝基邻苯二甲酰肼中间体,中间体不需干燥即可用于下一步的反应。将5-硝基邻苯二甲酰肼中间体转入到试管中,加入6.5ml10%氢氧化钠的水溶液,用玻璃棒搅拌使固体溶解。加入4g二水合连二亚硫酸钠,然后加热至沸腾并不断搅拌,保持沸腾5min。稍冷却,加入2.6ml冰醋酸,继而在冷水浴中冷却至室温,有大量浅黄色晶体析出。过滤,水洗3次,再抽干,收集最终产物5-氨基-邻苯二甲酰肼(鲁米诺)。取少许样品经干燥后测定溶点。5-氨基邻苯二甲酰肼呈黄色晶体。mp.319~320℃。记录5-氨基邻苯二甲酰肼的红外光谱。在250ml锥形瓶中,依次加入15g氢氧化钾、25ml二甲亚砜和0.2g未经干燥的鲁米诺,盖上瓶塞。然后剧烈摇荡,使溶液与空气充分接触。此时,在暗处就能观察到从锥形瓶中发出的微弱蓝色荧光。继续摇荡并不时地打开瓶塞,让新鲜空气进入瓶内,瓶中的荧光会变得越来越亮。若将不同荧光染料(1~ml)分别溶于2~3ml水中,并加入到鲁米诺二甲亚砜溶液中,盖上瓶塞,用力摇动,在暗室里使可以观察到不同的荧光。部分结果如下无染料:蓝白色;曙红:橙红色;罗丹明B:绿色;荧光素:黄绿色。注意事项1.水合肼极毒并具有强腐蚀性,应避免与皮肤接触;2.停止加热前,一定要先打开安全瓶上的活塞,使反应体系与大[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]通,否则容易发生倒吸。分析思考 1.鲁米诺的化学发光原理是什么?2.本实验在做鲁米诺发光演示时,为什么要不时打开瓶塞并剧烈摇荡?

  • 【分享】显微镜的新光源---阴极发光

    阴极发光仪可用于石英、方解石、白云石以及钻石等固体样品结构和组成的确定,同时,不会对样品造成任何破坏。阴极发光仪具有换样快速方便,设计简单紧凑,以及易于和岩相学专用显微镜联机的优点。此外,样品室对样品大小的要求范围宽,而且对于适合低温产生阴极光的样品控温能力强。从80年代开始,阴极发光技术不仅应用在传统的地球科学和行星学领域,而且开创了玻璃、陶瓷、半导体和合成材料等行业的研究和应用;此外,阴极发光技术在法医学、考古学、材料科学领域等新的方向具有发展前途,阴极发光仪与EDS检测器的联机可获得相关样品的X射线光谱特征描述和元素分析。阴极发光仪在岩石学领域的应用价值已经得到普遍认可,如组份的分区,二次结晶、脱液、共生、断裂填合、辐射环、化石和有机残留物中的骨骼结构、胶结过程的描述、自生长石和自生石英的鉴定、砂岩和页岩的胶结、矿物在分离过程中的辨认等。目前,CAMBRIDGE IMAGE TECHNOLOGY LTD(CITL)的100多台产品已经广泛的分布在30多个国家的大学实验室里,在Elf、Gulf、Shell等15个著名石油天然气公司以及英国、美国、法国、西班牙、荷兰、阿根廷等国家的研究机构和国家历史博物馆也得到应用。阴极发光仪也应用于宝石特性的识别(天然石或人造石),人造宝石完美程度鉴定。南非、泰国、荷兰及英国的珠宝鉴定机构及珠宝商使用了该类产品。CL8200 MK5型阴极发光仪是MK4型的升级产品,主要在电子微控制和仪表数字显示方面进行了改进。显示面板新增了控制信息,并且可以根据房间的照明条件进行自动亮度补偿。产品开发还考虑到更换样品时切断束流电压并保证真空泵同时运行,节省了换样时间。另外,还设计了与计算机连接的扩展卡,便于将来仪器的软件升级。在绝大多数应用领域,阴极发光仪只需要少量样品,无需对样品进行涂层等前处理,而且测定过程不会对样品造成任何破坏。阴极发光仪可以根据工作目的安装在各种显微镜上,如偏光显微镜、实体显微镜、金相显微镜等。[em17]

  • 石油产品试样和液体石油产品试样分类

    石油产品试样的分类  按石油产品性状的不同,可将石油产品试样分为如下四类。  1.液体石油产品试样  如煤油、汽油、柴油、原油等。  2.膏状石油产品试样  如润滑脂、凡士林等。  3.固体石油产品试样  (1)可熔性石油产品如蜡、沥青等。  (2)不熔性石油产品如石油焦、硫黄块等。  (3)粉末状石油产品如焦粉、硫黄粉等。  4.气体石油产品试样  如液化石油气、天然气等。液体石油产品试样的分类  石油产品分析中zui常见的是液体油品,GB/T4756-1998《石油液体手工取样法》按取样位置和方法将石油产品试样分类如下。  1.点样  点样是指从油罐内规定位置或在泵送操作期间按规定时间从管线中采取的试样。点样仅代表石油产品局部或某段时间的性质。按取样位置可将点样划分如下:  (1)撇取样(表面样):从油罐内顶液面处采取的试样。  (2)顶部样:在油品顶液面下150mm处采取的试样。  (3)上部样:在油品顶液面下深度1/6处采取的试样  (4)中部样:在油品顶液面下深度1/2处采取的试样。  (5)下部样:在油品顶液面下深度5/6处采取的试样。  (6)底部样:从油罐或容器底表面(底板)上,或者从管线zui低点处油品中采取的试样。  (7)出口液面样:从油罐内抽出油品的zui低液面处取得的试样。  此外,属干点样的还有排放样(从油罐排放活栓或排放阀门采取的试样)、罐侧样(从罐侧取样管线采取的点样。  2.代表性试样  代表性试样是指试样的物理、化学特性与取样总体的平均特性相同的试样。通常用按规定从同一容器各部位或几个容器中所采取的混合试样来代表该批石油产品的质量,测定油品的平均性质,油品试样一般指代表性试样。  (1)组合样按规定比例合并若干个点样,用以代表整个油品性质的试样,常见组合样是由按下述任何一种情况合并试样而得到的。  ①按等比例合并上部样、中部样和下部样。  ②按等比例合并上部样、中部样和出口液面样。  ③对于非均匀油品,应在多于3个液面上采取一系列点样,按其所代表油品数量比例掺合而成;从几个油碟或油船的几个油舱中采取单个试样,按每个试样所代表油品数量比例掺合而成。  ④在规定间隔从管线流体中采取的一系列等体积的点样混合(时间比例样)。  除非有特殊规定或者是经过利害关系的团体同意,才能制备用于试验的组合样,否则就应对单个的点样进行试验,然后由单个试验结果和每个样品所代表的数量按比例计算整体的试验值。  (2)全层样:取样器在一个方向上通过整体液面,使其充满约3/4(zui大85%)液体时所取得的试样。  (3)例行样:将取样器从油品顶部降落到底部,然后再以相同速度提升到油品的顶部,提出液面时取样器应充满约3/4时的试样。

  • 【原创大赛】蒸发光检测器的期间核查

    【原创大赛】蒸发光检测器的期间核查

    蒸发光检测器的期间核查核查原因:因为最近用蒸发光检测器检测的实验结果不理想。仪器:Agilent 1100液相色谱仪配蒸发光检测器(型号:SEDEX LT-ELSD 60)核查方法依据:JJG-702-2014液相色谱条件:色谱柱:XB-C18柱 (4.6mm×250mm 5um);柱温:35摄氏度;流动相:甲醇,流速:1.0ml/min;进样量:20uL蒸发光检测器参数:漂移管温度:35摄氏度;雾化气体流速(氮气):3.0L/min;灵敏度:选高位档核查所用的标液:甲醇中的胆固醇:200ug/mL及5ug/mL。实验结果:进20uL5ug/mL的胆固醇标准溶液依上述条件注入液相色谱图中,结果如下图:[img=,690,343]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708191026_01_2166779_3.png[/img]原以为12.395min出的峰为胆固醇的峰(峰面积:351.88mAU*S),可是再进了200ug/mL的胆固醇标液(20uL),结果如下图:[img=,690,323]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708191032_01_2166779_3.png[/img]此时出了二个峰,哪个是胆固醇的色谱峰呢?由于12.639min出的峰的峰面积为352.36mAU*S),与进5ug/mL的胆固醇标液出的峰面积差不多,与浓度并没有呈现出线性的关系啊,所以12.639min出的峰应该就是杂质峰了,那就是前面那个小峰才是胆固醇的色谱峰了,再进一针200ug/mL的胆固醇标液试下,结果如下:[img=,690,330]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708191036_01_2166779_3.png[/img]此时再13.735min左右还是出了一个很大的色谱峰,其峰面积为:340.76mAU*S 其结果与上一次差不多,之所以进了5ug/mL的胆固醇标液只出一个峰,那是因为我们的蒸发光检测器的灵敏度达不到要求,检测不到了啊。由于该蒸发光检测器(型号: SEDEX LT-ELSD 60)的购进日期为2003年;也使用了十五年多了,应该可以考虑更换一台新的蒸发光检测器了,没有维修的必要了吧,因为这个检测器的使用范围还是很广的。

  • 【转帖】化学发光浅谈(二)

    [font=新宋体][size=2]化学发光反应所以能用于分析测定,是因为化学发光强度(ICL)与化学反应速度(dc/dt)相关联,而一切影响反应速度的因素都可以作为建立测定方法的依据。 化学发光反应一般可表示为:A+B → C*, C* → C+hv 化学发光的反应既包括一个发光过程也包括了一个化学发光反应的过程,因此该发光反应的化学发光强度取决于化学反应的速率dc/dt和反应的化学发光量子效率( ΦCL ) ICL= ΦCLdc/dt.b6u4X!d(P5@-_ 式中ΦCL可表示为:ΦCL=ΦrΦf; Φr:生成激发态产物的量子产率,也就是每一个参加反应的分子产生的激发态; Φf :激发态产物分子的发光量子产率,也就是每一个激发态产生的光子数,对于一定的化学发光反应, 为一定值。 由于化学发光测定易受化学反应条件,如pH值、离子强度、溶液组成、温度等的影响,影响反应速率或任意一个量子效率的因素都会改变发光强度。因此,在一定的化学反应条件下,通过测定化学发光强度就可以测定反应体系中某种物质的浓度。 化学发光分析测定的物质对象可分为三类:第一类物质是化学发光反应中的的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催化剂,增敏剂或抑制剂 第三类是偶合反应中反应物,催化剂,增敏剂等。这里所说的偶合反应其实就相当于前面提到的间接化学发光反应,它将一个化学发光反应与另一个或一系列反应进行偶合,只要这一个或一系列反应中的任何一种反应物或产物或催化剂(包括酶)能参与化学发光反应,就可以根据所产生的化学发光信号强度获得该反应中某一组分的量。通过标记方式利用这三类物质还可以来测定人们感兴区的其他物质。进一步扩大了化学发光分析的应用范围 化学发光分析最初是以分立式进样化学发光仪作为研究手段,由于化学发光现象一般比较短暂且随时间变化较大,使用间歇式手工操作是较难取得良好的重现性,因此人们将流动注射技术引入到化学发光分析中。流动注射技术是hansen于1975年建立的,把一定体积的试样注入到流动试剂(载流)中,可以保证混合过程与反应时间的高度重现性,特别是在非平衡状态下高效率的完成试样的在线处理与测定。 在化学发光分析中,化学反应器可以正面放置在接近光检测器的部位,因此检测器的仪接受较大分量的发射光子,从而提高了灵敏度,其灵敏度可达10-21mol,甚至可检测至单分子水平。化学发光分析的检测线并不受仪器的检测极限的限制,多数是受试剂的杂质污染以及由于浓度极低而带来的其他一些问题的限制。另外,由于化学激发作用具有电子激发态的均一性特点,通常其现行范围所展示的浓度区间较宽,可高达3~6个数量级。 对于化学发光分析来说,由于激发能来源于化学反应,无须专门的激发光源以及相应的单色器和聚焦透镜等,所以仪器设备简单、廉价、易微型化。分析化学,论由于化学发光现象一般比较短暂,因此化学发光分析所要求的时间也较短,但其最大的缺点是选择性差。因为化学发光分析的测定大多是在相同条件下,沿用同一个化学发光反应进行的,因而选择性较差。如典型的鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,就能被10多种无机离子和30多种有机物催化或者增敏,且均在pH8~11的碱性条件下完成。近年来,化学发光检测与色谱以及毛细管电泳等分离技术的联用,在很大程度上解决了化学发光分析选择性差的问题,扩大了化学发光分析的应用范围。 为了提高化学发光分析法的选择性,将高灵敏度的化学发光检测技术与高效能、高分辨力的高效液相色谱或毛细管电泳以适当的方式相结合,集合2种技术的优势,为人们展示了一个分离效能高、检测先低、分析速度快的方法。%I/_8e* 液相色谱化学发光检测仪主要包括分离柱、泵系统、混合器和化学发光检测器。柱后的反应和化学发光检测是这一联用方法成功的关键。需要注意的是,化学发光的最佳条件往往并不是分离的最佳条件,比如色谱分离金属离子对常用酸性的流动相,而金属离子与鲁米诺的化学发光反应多在pH10时才有最强的发光强度,因此实际分析中要综合考虑各个方面的因素,选择合适的条件,使其既有利于分离又能保证灵敏、稳定的检测。|分析化学|化学分析|仪器分析|分析测试|色 发光在生物学领域也有着很多应用,主要简介如下: 1 血浆和血清的化学发光 亚铁离子催化的化学发光自由基启动的脂质过氧化 (L PO) 是一个链式反应过程。反应过程中产生脂自由基 (R - ) 、烷氧自由基 (RO - ) 、共轭二烯和脂过氧化自由基 (ROO - ) 等中间产物。 ROO - 自反应会产生激发的烷氧自由基 (RO 3 ) 和单线态氧 (O 2 ) ,其回到基态时产生发光。因此,把 Fe 2 + 盐加入含有脂肪的系统中,如细胞膜、线粒体、微粒体、血浆、组织匀浆、尿液等,可产生化学发光。许多实验研究对加入 Fe 2 + 盐的不同疾病患者血浆和血清的化学发光进行的测量表明,与正常健康人相比,腹腔器官局部缺血、肢端闭合性局部缺血、血氧含量下降以及出血、手术性休克病人血浆和血清的发光强度降低。 与此相反,风湿性关节炎、阑尾炎、胆囊炎、胰腺炎等炎性疾病患者血浆和血清的发光强度升高。 降低和升高的幅度与疾病的严重程度有关。 可以看出,利用此方法有可能对非典型的心肌梗塞和腹腔器官炎性疾病做出区别诊断。 2血浆脂蛋白的化学发光 有研究提出,以分离的血浆脂蛋白悬液作为系统模型可以研究不同物质对系统过氧化的调节机制。在分离的血浆脂蛋白悬液中加入胆固醇,温育一定时间后在加入 Fe 2 + 盐,测量化学发光,发现胆固醇能使系统的发光强度降低。分析认为,这可能是由于类固醇的存在抑制了系统的过氧化。对实验性胆固醇过多血症家兔和动脉粥样硬化早期病人进行的测量发现,载脂蛋白 APO – B 。在 Fe 2 + 存在条件下的发光强度出现了增长。同样的现象在肝硬化和慢性肝炎患者身上也被发现。 3尿液的化学发光 利用尿液的化学发光可以研究肾脏功能的变化。将 Fe 2 + 盐加入尿液中,测量其化学发光,发现肾功能不足者尿液的发光强度降低。与正常健康人相比,阑尾炎患者尿液的发光强度则有不同程度的提高。利用这一方法可以评估肾脏的排泄及收缩功能。 4物质抗氧化活性的测定 利用发光测量技术可以评价某些生物组织和体液的抗氧化活性。以某一稳定的发光系统为模型,如脂肪体、线粒体、卵黄脂蛋白等,将待测的抗氧化物质加入该系统,然后加入 Fe 2 + 盐,测量其化学发光。 根据系统化学发光被抑制的程度可以评价物质的抗氧化活性。 利用这一方法进行的研究证明,不同疾病患者血浆和血清的抗氧化活性是不同的。 化学发光研究的热点方向 直接化学发光反应是当前化学发光分析研究的一个重要方向,人们通常通过大量试验筛选氧化反应及反应介质来证明某种有机药物、农药是否具有化学发光特性。 以化学发光试剂标记核酸,运用化学发光分析进行核酸分子杂交分析是化学发光分析的前沿,其发展将为基因工程、基因诊断和治疗提供有效的检测手段。分析通常进行化学发光分析都是在现有化学发光试剂的基础上开展研究,而新型化学发光试剂的开发性研究较少,此领域还有研究空间。 金属配合物,特别是钌等过渡金属配合物在化学发光分析中的作用正逐渐受到人们的重视。比如钌(Ⅱ)-联吡啶常用作电致化学发光试剂[/size][/font]

  • 化学发光免疫分析

    化学发光免疫分析放射免疫分析法有很高的灵敏度,但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来,许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中,在化学发光反应及抗原-抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法,由于这种方法具有灵敏度高,特异性强,精密度好,线性范围宽,仪器设备简单,试剂价格低廉,方法稳定、快速等优点,已成为一种重要的非同位素标记免疫分析方法,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测。  化学发光免疫分析包括三大类型:即标记化学发光物质的化学发光免疫分析;标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析和标记酶的化学发光酶联免疫分析。下面以偶合放大化学发光酶联免疫分析法检测人血清中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)为例。  (一) 原理  尽管辣根过氧化物酶(HRP)可以催化Luminol-H2O2反应体系产生化学发光,但由于该体系的检测灵敏度不够高,不能满足酶联免疫测定的要求。因此,为了提高体系的检测灵敏度,可将HRP催化H2O2氧化曙红(Eosin)的反应与该反应产物增强HRP催化luminol-H2O2的化学发光反应相偶合,建立偶合放大化学发光酶联免疫分析法。这里,酶的活性是基于下列发光反应进行检测的:  HRP         luminol+H2O2───→产物+hν                 产 物                  ↑       Eosin+H2O2 ──────┘               HRP 二) 操作步骤  1. 包被抗体 在每个小试管中加入聚苯乙烯珠各一枚,再加入300μl用0.05M,PH9.6 碳酸盐缓冲液稀释的抗HBsAg抗体,同时设空白对照,置4℃过夜。  2. 洗涤 用抽滤针头吸干管内液体,加入Tris-HCl-Tween20洗涤3次,每次加2ml,放置3~5min,用抽滤针头吸干管内液体。  3. 加待检血清和阳性标准品 用PBS-Tween20缓冲液不同倍数稀释HBsAg阳性标准品或待检血清,每管加入300μl。同时设阴性对照;空白对照管只加抗体稀释液。置37℃孵育2h。  4. 洗涤 同2。  5. 加酶标抗体  用含小牛血清的PBS-Tween20缓冲液稀释HRP标记的抗HBsAg抗体,每管加入300μl,空白对照管只加用于稀释酶标抗体的稀释液。置37℃孵育2h。  6. 洗涤 同2。  7. 化学发光测定 给每管加入300μl底物溶液,置37℃保温20min。犎;后将小试放入LKB-1250 lumimeter中,并置于测量位置,加入300μl 5.0×10-4M luminol。记录仪记录化学发光强度。  8. 同时用ELISA方法进行对照,结果测量采用DG3022型酶联免疫检测仪。  结果判定(1) 定性 按下列公式判别阴、阳性:          L样品-L空白     ┌≥2.1 为阳性   S/N = ──────── = 商│       L阴性对照-L空白    └<2.1 为阴性   (2) 定量 以不同稀释度的HBsAg阳性标准品的化学发光强度为纵坐标,不同稀释倍数为横坐标,作出剂量反应曲线(标准曲线),犜r待测样品中HBsAg的含量就可由测量的化学发光强度换算得到。

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