半制备梯度高效液相系统

http://www.instrument.com.cn/show/Breviary.asp?FileName=C117188%2Ejpg&iwidth=200&iHeight=200 北京创新通恒科技有限公司 的 LC3000半制备梯度高效液相系统(SPI001)已参加“国产好仪器”活动并通过初审。自上市以来，这款产品已经被多家单位采用，如果您使用过此仪器设备或者对其有所了解，欢迎一起聊聊它各方面的情况。您还可以通过投票抽奖、参与调研等方式参与活动，并获得手机电子充值卡。【点击参与活动】 仪器简介： 产品信息： 制备方法印证以及优化将分析液相色谱得到的制备色谱条件放大到半制备色谱系统，印证制备色谱条件，进一步优化推荐系统：LC3000半制备液相色谱系统 preparative method confirmation and optimizationthe system can use the preparative method which we can get from the analyti-cal HPLC system to confirm and optimize the preparative methodRecommendation : LC3000 semi-preparative HPLC system 订货信息： 序号 说明 1 P3000型高压输液泵，50ml不锈钢泵头2 2 UV3000型紫外/可见光检测器，半制备用流通池1 3 Rheodyne 7725i 手动进样阀/A1359 手动进样阀（定量环可定制）1 4 CXTH-3000 色谱工作软件1 5 色谱柱型号可定制（ID 10mm-30mm）1 6 半制备二元高压用启动工具包1 7 溶剂托盘1 8 半制备型动态混合器1 9 其他（推荐）* 备注： *在初次使用高效液相色谱仪的场合，还推荐购置溶剂过滤器、真空抽气泵、超声波、稳压电源等设备 Ordering Details: No. Description 1 P3000 HPLC pump，50ml pump head (stainless steel) 2 2 UV3000 UV-VIS Detector with semi-pieparative flow cell 1 3 Rheodyne 7725i manual injection valve /A1359 manual injection valve (sample loop can be customized)1 4 CXTH-3000 Chromatography Workstation 1 5 Column size can be customized(ID 10mm-30mm) 1 6 Gradient Starter- kit, semi-pieparative 1 7 Solvent tray 1 8 Dynamic mixing chamber,semi-p....【了解更多此仪器设备的信息】

制备型高效液相色谱系统的应用领域制备型高效液相色谱系统主要应用在植化、合成、制药、生物及生化等领域的产品的提取及纯化工作中。在不同的工作领域中，组份的提取和纯化量的差异是很大的。在生物技术领域中，酶的分离是微克级；在植化和合成化学领域中，为了鉴别未知成份并进行结构测定，需要得到一至若干毫克的纯品；在药品和医药学测试中，需要克级的标准品和对照品；在当今的工业级提纯中，制药成份往往需要千克级的提取。制备型高效液相的应用领域可以归纳在下表中。 成份量:所在领域 微克: 生物技术领域的酶的分离、生物学和生化学测试 毫克: 结构描述和特征鉴定，包括：生产中的副产品、生物矩阵的新陈代谢产物、天然产物 克级: 对照品（分析标准）毒物学分析所需组份：高纯品中的主要成份、副产品的分离提取 千克级:工业规模生产，活性成份，药物 制备方法的发展和扩大规模的计算　　在分析液相中色谱柱的典型进样量是微克级，甚至更低。样品量和固定相之比有的甚至小于1:100000。进样体积一般来说都大大小于色谱柱体积（小于1:100）。 在这种条件下，会达到很好的分离效果，峰形尖锐并且很对称。而在制备液相中，最大的区别就是超量进样。其结果，超量进样的方法和分析方法的放大将在下章内介绍。 吸附变化线　　分析液相的目的是给一种组份定性、定量。重要的色谱参数有溶解度、峰宽和峰的对称性。如果进样量越来越多，峰高和峰面积会增加，但峰的对称性和容量因子保持不变。如下图。 　 在分析液相中，最佳的峰形应是一条高斯曲线。峰的标准背离 бV 描述了其对称性和与高斯曲线的相似性。容量因子是与一种不保留物质的保留时间t0相关的保留时间。　 如果将超过一定量的样品注射进色谱柱，吸附变化线就会成非线性。这意味着峰形会变的不再对称，表现为严重的拖尾和容量因子的缩小。如下图。在制备液相中，这种效果称作浓缩超量进样。在一些情况中，根据进样量的增加，容量因子也相应变大，并造成很强的前峰。既然吸附变化线取决于组份的多少，那么液相色谱柱的载样能力就必须根据不同的制备液相实验来决定。 色谱柱载样和超量载样　　大样品量的纯化有两种可行的方法：分析系统的放大或色谱柱超量载样。分析系统的放大意味着使用直径更大的制备柱、更高的流速和根据色谱柱的长度增加进样量并保持样品浓度不变。峰形仍会保持尖锐而对称。这种方法需要大型的色谱柱和大量的溶剂来分离较少的样品，因此这种方法是不经济的。 因此色谱柱超量载样，暨在相同的分析条件下超量进样通常是一种很好的选择。使用色谱柱超量载样的方法，在分析柱上甚至可以进行毫克级的分离。但更大 量的样品分离就需要整个系统的放大。色谱柱超量载样可以通过两钟方法进行— 浓缩法和体积超载法。　在浓缩法中，样品的浓度会提高，但进样体积保持不变。容量因子k’降低，同时峰形从高斯曲线变为矩形。如下图。浓缩法超量载样只有在样品组份在流动相中具有良好的溶解性的条件下才有可能采用。 　　如果样品组份的溶解性很差，浓缩法超量载样不能使用。同时更多的样品体积注射到色谱柱中，这种技术称作体积法超量载样。超过一定的进样体积，峰高不变，但峰变宽并且呈矩形。在制备液相中浓缩法超量载样比体积法超量载样更受欢迎，因为可被分离的样品量更高。既然组份的溶解性通常是一个限制因素，所以两钟超量载样技术通常被结合起来使用。两种技术的概览浓缩法超量载样 　 体积法超量载样 取决于组份在流动相中的溶解性 　 取决于进样体积 吸附变化线的制备部分 　 吸附变化线的分析部分 生产效率决定于选择性 　 生产效率决定于制备柱直径 受固定相粒度大小的影响不大 　 需要小颗粒填料 方法的放大　浓缩法超量载样和体积法超量载样都会导致组份溶解性的降低。既然组份的分离需要一定的溶解性，那么在放大分析方法的时候，优化溶解性、特别是选择性就是一项很重要的工作。 　　因为选择性和超量载样潜力是相互依靠的，选择性的提高会提高一次运行中所分离的样品量，因此从分析方法到制备方法的放大和方法的优化需要三个步骤。 1. 优化分析方法的选择性。2. 在分析柱上进行超量载样。3. 放大到制备柱 制备型高效液相色谱的目的　　判断制备型高效液相色谱使用的结果有三个重要参数：产品的纯度、产量和生产效率。三个参数之间是相对独立的，因此很难同时使用这三个参数来优化制备型高效液相色谱方法。见图形6。 色谱图1显示在制备型高效液相色谱的使用中有很高的生产效率，但是两种组份的分离效果却是很差的。这种方法很可能得到两种组份的高纯品，但是产量和收率却是很低的。　 在色谱图2中峰有很好的分离，因此这种方法可以得到两种组份的高纯品和高产量，但是生产效率却很低。　 色谱图3中的情况是三个参数综合后得到的最优化的结果。峰在基线上被完全分开，这使得产品纯度、产量和生产效率都达到最高。　 在实际应用中，每个参数的重要性都是不同的。如为了进行活性或药物测试，某种组份必须被完全单独提取，那么组份的纯度是最重要的参数，产量和生产效率是其次的。如果某种合成中间体必须被纯化，并且需要有足够的量为下一步合成作准备，那么纯度就不是最重要的了。而生产效率在这种情况下就是个首先需要解决的问题，因为其直接关系到完成整个合成工作的进程和速度。同时产量也是很重要的，因为高价值组份的损失需要控制在最少的范围内。

公司想买二台液相仪（分析制备），带梯度洗脱，国产的哪个比较好？主要用于天然药物的成份分析和分离小公司，老板还是想物美价廉，麻烦大家推荐下，谢谢了 ！！欢迎各大厂家能够提供详细资料跟价格顺便想问下北京创新通恒的怎么样？？？？191557743@qq.com

我想对胡萝卜素素类的物质进行高效液相半制备，请问条件该怎么选呀，该用什么杨的柱子？

分析型的hplc分析待纯化物质，A0.1%甲酸水，B甲醇。我先用甲醇从5%到95%跑30min，然后根据目标组分的出峰时间算出其对应的甲醇洗脱浓度。然后根据waters梯度转化器，将梯度方法换算转移到制备色谱上。按理说，在制备色谱上当甲醇浓度达到分析色谱上算得的那个浓度时该物质会被洗脱下来，但结果却是那个物质并不是在这个对应的甲醇浓度下洗脱下来，这是为什么呢。

今天做实验，梯度半制备液相，总是出现气泡，将柱子去掉也是一样的出，小气泡一段一段的，混合器后几乎看不到有气泡出来，接到3725i进样阀后就开始流出小气泡，更换进样阀后无改善，求高手指点，再有就是问下各位有没有关于半制备液相的鉴定规程，据我了解目前都是参照HPLC的

公司新买的制备液相，需要写一份简单的验证报告。网上找了好多资料都是关于分析液相的。制备液相的一点也没找到。我感觉自己能做的内容只有运行状况确认和流速检测。至于分析液相验证资料中，有的（如检测吸收或梯度比例等）是做不了，有的是没必要（最小检测浓度）。关于系统的整体验证（重复性试验）不知道制备液相的验证有没有必要做。请各位老师指教。最好是能给个模版，那就感激不尽了。

http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gifBioComp密度梯度制备与收集系统在生物大分子分离中的应用讲座时间：2014年08月20日 10:00 主讲人：孙福鼎 五洲东方分子生物学产品线应用工程师，负责分子成像设备以及密度梯度制备与收集产品的应用及技术支持，对密度梯度超速离心以及核糖体分离（Ribosome profiling）有着丰富的经验，目前主要致力于密度梯度超速离心在病毒分离、核糖体及叶绿体等亚细胞器分离以及其他生物学大分子分离的应用。http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif【简介】1、生物学大分子分离方法2、密度梯度方法介绍及应用案例 产品应用领域应用于线性密度梯度溶液的快速制备，便于后续超速离心分离生物学样品。 产品主要特点快速高效，最快1min 内制备完成6 个离心管样品的均一线性梯度制备。程序控制，不同梯度介质及梯度范围所需程序均已内置，自动运行。适用广泛，可用于多种介质的梯度制备，包括Sucrose、Glycerol、Optiprep、Nycodenz、Ficoll、Percoll、Nacl、CsCl 等梯度介质。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元手机充值卡一张哦~3、报名截止时间：2014年08月20日 9:304、报名参会：http://simg.instrument.com.cn/meeting/images/20100414/baoming.jpg

制备型加压液相色谱，按照色谱柱和样品量的大小，分为：（1）低压液相色谱；（2）中压液相色谱；（3）高压液相色谱；（4）快速色谱。低压、中压与高压液相色谱的压力范围之间会存在一定交叠，没有统一、明确的标准。1快速色谱柱压通常为2bar（或30psi）左右，对于那些容易分离的简单混合物，由于快速色谱具有操作简便、经济等优点，常常是实验室的首选。但快速色谱不同于一般的层析分离，这种分离没有压力，而快速分离通常使用瓶装氮气加压，使流动相具有一定的流速，从而缩短了分离时间。Still等人率先于1978年详细研究了快速色谱，并于1981年获得了专利保护(美国专利4，293，422)。快速色谱使用的柱子一般是玻璃柱，柱直径为3～10cm．长度为7～15cm。快速色谱中使用最广泛的固定相为硅胶。采用的粒径通常为：25～40μm，40～63μm或63～200μm的球形固定相。其它如键合相、氧化铝、聚酰胺吸附剂也常用作快速色谱的固定相使用。2低压色谱（LPLC）柱压一般低于5bar（或75psi）。低压色谱一般是由蠕动泵、进样阀和检测器组成，可以连续化，实现自动的梯度淋洗和馏分收集等操作。色谱柱管一般是玻璃或聚合物材料的，长度一般为240-440mm，内径为10-40mm。对于大多数在紫外区有吸收的物质，光学检测器很常用。填料一般使用软质的葡聚糖、琼脂糖、纤维素、合成高聚物或离子交换剂，粒径一般为40-60μm。3中压液相色谱（MPLC）柱压在5-20bar（或75-300psi）之间，广泛用于实验室和工业规模的生物制品(如动物脏器提取液、浓缩液、体液、植物提取液、生物技术发酵液等--往往需要经过滤膜作初级净化)的处理，以提取或纯化所需的产品。中压液相制备色谱的主要部件为输液泵、进样阀、检测器、馏分收集器等，比如瑞士公司的早期的中压液相制备色谱，其输液泵最大流速可达156mL/min，并配有阻尼器，以保证液流的稳定；进样器配有0.5-50mL的不同体积的定量管；检测器有紫外和示差折光检测器，流通池体积比较大，允许大流量流动相通过而无需分流；馏分收集器有原盘式和排式两种，原盘式的接收管最多达80个，而后者则更多；色谱柱内径9-105mm，长度250-1760mm不等。对于一般中压制备色谱，当色谱柱直径较大时，柱头往往设计成锥形或有类似于伞状的液流导向结构，使得当大量样品进入到柱头上时，能迅速地分散到整个柱横截面上，及时被流动相冲走，避免了因样品的局部过浓而引起柱超负荷和谱带加宽。柱子填料则采用比较耐压的交联改性的多糖凝胶(如Sepharose CL，Superose等)，聚合物微球，复合材料介质或硬质SiO2基体的化学键合相等，粒径一般在25～40μm（最常用的填料尺寸是15-25μm，25-40μm或40-63μm），可采用湿法或干法装柱。4高压液相色谱(HPLC)是指柱压一般大于20bar（或300psi）的“高压(或高效)液相色谱”，通常指所用色谱柱的塔板数大于2000，一般是在2，000～20，000的范围之间。当需要从大量的物质中分离纯化不足1％的所需成分时，分离工作将会十分困难，往往在纯化的最后阶段需要使用10μm或更小颗粒的高效填料。为获得所需微量组分，可采用如下分离手段：制备型分离→半制备型分离→分析型分离→产物。为提高每次分离获得纯品的数量，制备型高压液相色谱分离通常在超载情况下运行。高压液相色谱，即目前常用的高效液相色谱。色谱柱内填装的是粒度范围较窄的微小颗粒固定相(3～30μm)，为使流动相流出，需采用较高的压力，同时系统的复杂性及成本亦增大，但分辨率可得到较大的提高。而填装较大颗粒的固定相时，如中压液相色谱系统，装柱较容易，柱的通透性较高(只需较低的泵压力)，可采用更大的色谱柱和更经济的仪器，由此分辨率也较低。5用分析型高压液相色谱进行制备型分离当所需纯化合物的量很少时(微克级至几毫克)，可用分析型色谱柱进行多次分离。效果和利用大直径色谱柱进行一次性分离相同。采用小直径色谱柱时，可利用已有的分析型仪器，而无需在色谱柱、填料及附件方面投入更大资金；另外，还可在很大程度上避免由于放大所产生的问题，使分离速度加快。小直径色谱柱的尺寸一般为250×4.6mm，通常装有反相填料，每次可进样5～100ug，通过多次进样分离，可获得足够的纯品。例如，Suzuki等(1994)报道从豆科植物羽扇豆(Lupinus Hirsutus)中分离一羽扇豆生物碱糖苷时，其最后的分离步骤采用LiChrosorb Si60，5μm，250×4.6mm色谱柱进行高压液相色谱分离，洗脱剂为含25％甲醇的yi醚溶液－5％氨水50:1。经常需用分析型色谱柱进行分离的一个领域是对肽类化合物的纯化。生物活性肽的含量通常很低，用分析型高压液相色谱作为最后的纯化手段时，不会使色谱柱超载。为了提高分离效率，可将分析型高压液相色谱柱连接起来使用。此时可采用颗粒度在20～30μm的填料，以保持适当的通透性，尤其是当使用含水溶剂时。当使用己烷等有机溶剂时，由于流动相的粘度较低，可使用颗粒度为10μm的填料。然而由于分析型色谱系统无法提供大规模制备型分离所需的流速，其应用受到一定限制。（来源：分析测试百科网）

跟大家分享一本书《高效液相色谱方法及应用》第二版，感兴趣的版友可以下载附件查阅，也欢迎补充。全书的目录如下：作 者： 于世林出 版 社： 化学工业出版社 本社特价书所属丛书： 色谱技术丛书 册 数： 条 形 码： 9787502569068 ; 978-7-5025-6906-8I S B N ： 7502569065 出版时间： 2005-6-1开 本： 小16开 页 数： 333定 价： 39 元第一章 绪论第一节 高效液相色谱法的特点一、与经典液相(柱)色谱法比较二、与气相色谱法比较三、高效液相色谱法的优点四、高效液相色谱方法发展简介第二节 高效液相色谱法的分类一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性一、应用范围二、方法的局限性参考文献第二章 高效液相色谱仪简介第一节 流动相及储液罐一、储液罐二、流动相脱气第二节 高压输液泵及梯度洗脱装置一、高压输液泵二、输液系统的辅助设备三、梯度洗脱装置第三节 进样装置一、停流进样装置二、六通阀进样装置三、自动进样器第四节 色谱柱一、柱材料及规格二、柱填料三、保护柱四、柱连接方式五、柱温控制第五节 检测器一、检测器的分类和响应特性二、紫外吸收检测器三、折光指数检测器四、电导检测器五、荧光检测器六、蒸发光散射检测器第六节 色谱数据处理装置一、微处理机二、色谱工作站参考文献第三章 液固色谱法和液液色谱法第一节 分离原理一、吸附系数二、分配系数第二节 固定相一、液固色谱固定相二、液液色谱固定相第三节 流动相一、表征溶剂特性的重要参数二、液固和液液色谱的流动相第四节 二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律一、溶质保留值的基本方程式二、液固色谱的保留值方程式三、液液色谱的保留值方程式参考文献第四章 键合相色谱法第一节 分离原理一、正相键合相色谱法的分离原理二、反相键合相色谱法的分离原理第二节 固定相一、键合固定相的制备及分类二、键合固定相的性质三、使用键合固定相应注意的问题第三节 流动相一、溶剂的选择性分组二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则三、改善色谱分离选择性的方法四、多元混合溶剂的多重选择性五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律六、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的保留值方程式第四节 新型高效液相色谱的固定相和流动相一、新型高效化学键合固定相二、化学键合固定相分类方法简介三、整体色谱柱四、超热水流动相第五节 离子对色谱法一、分离原理二、固定相、流动相和对（反）离子三、影响离子对色谱分离选择性的因素参考文献第五章 梯度洗脱第一节 基本原理一、等度洗脱二、梯度洗脱第二节 影响梯度洗脱的各种因素一、梯度洗脱时间(tG)对分离的影响二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响三、梯度陡度对保留值的影响四、柱温变化对保留值的影响五、梯度洗脱程序曲线形状的影响六、影响梯度洗脱的其他变量第三节 优化梯度洗脱的方法一、建立梯度洗脱方法的一般步骤二、梯度洗脱中的实验条件第四节 梯度洗脱的图示方法一、二元溶剂梯度洗脱二、三元溶剂梯度洗脱三、四元溶剂梯度洗脱四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱参考文献第六章 体积排阻色谱法第一节 分离原理一、分布系数二、体积排阻色谱法的特点第二节 固定相一、固定相的分类二、凝胶固定相的特性参数三、凝胶色谱柱的制备及谱图特点第三节 流动相一、凝胶渗透色谱的流动相二、凝胶过滤色谱的流动相第四节 凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布一、聚合物分子量、分子量分布及测定的意义二、凝胶渗透色谱图的解析及数据处理参考文献第七章 高效液相色谱法的基本理论第一节 表征液相色谱柱填充性能的重要参数一、总孔率二、柱压力降三、柱渗透率第二节 高效液相色谱的速率理论一、影响色谱峰形扩展的各种因素二、范第姆特方程式的表达及图示第三节 诺克斯方程式一、描述色谱柱性能的折合参数二、诺克斯方程式第四节 色谱柱操作参数的优化一、三个柱操作参数的表达式二、HPLC中实用柱操作参数的优化三、柱操作参数优化的图示表达方法第五节 “无限直径”效应和柱外效应一、“无限直径”效应二、柱外效应第六节 超高效液相色谱一、超高效液相色谱的理论基础二、实现超高效液相色谱的必要条件三、超高效液相色谱的应用参考文献第八章 高效液相色谱分离条件的优化第一节 高效液相色谱中色谱参数的相关性一、色谱参数的分类二、色谱参数的相关性第二节 色谱分离条件优化标准的选择一、难分离物质对的峰对分离优化标准二、整体色谱图的优化标准第三节 色谱响应函数和色谱优化函数一、Morgan和Deming提出的色谱响应函数二、Watson和Carr提出的色谱响应函数三、Glajch和Kirkland提出的色谱优化函数四、Berridge提出的色谱响应函数第四节 色谱分离条件的优化方法一、单纯形法二、窗图法三、混合液设计实验法四、重叠分离度图法五、等强度洗脱和梯度洗脱的优化图示法第五节 优化HPLC分离的计算机辅助方法一、实验设计系统二、人工智能系统第六节 高效液相色谱专家系统简介一、专家系统的组成二、专家系统的使用方法参考文献第九章 微柱液相色谱法第一节 方法简介一、微型柱的分类二、微柱液相色谱法的优点和缺点第二节 基本理论一、柱外效应二、管壁效应三、稀释效应四、分离阻抗第三节 仪器装置一、输液泵系统二、进样系统三、柱系统四、检测器系统五、连接管和接头第四节 微柱的制备一、评价微柱性能的重要参数二、影响微柱分离效率的相关参数三、微柱的制备方法第五节 微柱液相色谱的新技术一、纳米液相色谱技术二、超高压液相色谱技术参考文献第十章 二维高效液相色谱法第一节 描述分离体系效能的参数一、峰容量二、信息量第二节 二维高效液相色谱的技术功能一、切割功能二、反冲洗脱功能三、痕量组分的富集功能第三节 二维高效液相色谱的流路系统一、多通路切换阀二、二维高效液相色谱的流路系统第四节 二维高效液相色谱在蛋白质组学研究中的应用参考文献第十一章 建立高效液相色谱分析方法的一般步骤和实验技术第一节 样品的性质及柱分离模式的选择一、样品的溶解度二、样品的分子量范围三、样品的分子结构和分析特性第二节 分离操作条件的选择一、容量因子和死时间的测量二、色谱柱操作参数的选择三、样品组分保留值和容量因子的选择四、相邻组分的选择性系数和分离度的选择第三节 高效液相色谱法的实验技术一、溶剂的纯化技术二、色谱柱的装填技术三、色谱柱的平衡、保护与清洗、再生技术四、梯度洗脱技术五、色谱柱前和柱后的衍生化技术六、样品的预处理技术参考文献符号表

高效液相色谱制备标准品的储备液的问题做高效液相色谱需要制备标准品的储备液，由于所需量很少，微克级别的，怕称量不精确，所以想把倍数扩大，多称量一些，多配一些储备液留着以后慢慢用。但又担心不能长时间保存。所以想请教一下，储备液一般可以保存多久？在什么条件下保存？十分感谢！

我有一个有机混合的液体，想用高效液相制备色谱分离出来，想问一下天津那所高校或者研究所有高效液相制备色谱，谢谢！

各位达人，做制备色谱时，如果分析色谱由梯度流动相，那制备色谱怎么解决梯度流动相这个问题呢，我们的制备色谱仪是国产的，梯度流动相很难操作，大家有什么好的主意，谢谢

最近实验室打算购置一台HPLC，请大家推荐一款好用的制备或者半制备液相系统，能附上价格更好，谢谢各位！

各位版友，本人使用了一台waters 2796 半制备液相， 仪器目前没有任何故障，但是在设定好的收集文件运行时， 收集器不流液滴，不收集，这是什么原因呢？仪器没有报错，程序也是一直使用的，当开始运行sequence时候收集器会在色谱进样前一直滴液，当梯度开始后收集器移动到制定的收集瓶口等待收集，但是到了收集时间的时候就没有液滴留下，之后收集器会到下一个瓶口，知道程序结束。整个过程没有报错，但是一滴液体都没有收，样品都被色谱吃掉了。。呜呜呜快来帮我 谢谢

我是使用液相色谱的菜鸟，现在遇到了一点点问题，请各位前辈解答。两个样品用高效液相色谱测定，一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=75：25，在10分钟左右出峰，流速1ml/min；另一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=5:95，在6分钟左右出峰，流速0.5ml/min，如果我想同时测定，可以用梯度洗脱吗？如果可以的话，流动相比例过程中的变化改怎么设置，请各位大神赐教，谢谢。

怎样配制一台性能较好的半制备高效液相色谱仪！

我是使用液相色谱的菜鸟，现在遇到了一点点问题，请各位前辈解答。两个样品用高效液相色谱测定，一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=75：25，在10分钟左右出峰，流速1ml/min；另一个的条件是：甲醇：ph3缓冲液=5:95，在6分钟左右出峰，流速0.5ml/min，如果我想同时测定，可以用梯度洗脱吗？如果可以的话，流动相比例过程中的变化改怎么设置，请各位大神赐教，谢谢。

戴安UltiMate3000钛系统高效液相色谱的设计和诞生是为了消除和解决由铁及其它过渡金属离子对分离柱、样品和溶剂所造成的污染而引起的各种问题，尤其是在分离过程中能保持蛋白质的完整性和其在翻译修饰后的稳定性，UltiMate3000能与戴安的领先产品ProSwift、ProPac和DNAPac离子分离柱配合使用，钛系统高效液相色谱的流路是由钛金属、陶瓷和高性能的聚合物所构成的，因此即使在高盐、强酸、强碱的恶劣条件下，系统也能可靠和长时间地工作，并延长系统的使用寿命。戴安UltiMate3000钛系统高效液相色谱是一套完全生物兼容的系统，为以蛋白质、多肽、抗体和核（苷）酸为基础的药品研发提供了一套完整的分析工具。高性能生物分析系统戴安UltiMate3000钛系统高压液相色谱系统拥有钛质泵头以及PEEK流路（见图1），能耐高盐、强酸以及强碱。这种特性使系统在蛋白质、单克隆抗体（MAbs）（见图2）、多肽、核酸、氨基酸以及其它生物分子的分析上拥有杰出的表现。惰性流路使系统在苛刻的环境下仍然能够长时间工作，延长系统的使用寿命，并且惰性流路能保证分离过程中保持蛋白质的完整性和翻译后的稳定性，分析结果的重复性好.[IMG]http://www.dionex.com.cn/images/Ti-1.jpg[/IMG]钛金属泵、陶瓷和高性能的聚合物流路泵单梯度和双梯度泵的选择，使戴安UltiMate3000钛系统高效液相色谱在应用和通量两方面都更具弹性。泵的流速范围也适合从微量、普通到半制备的应用。标准配置的主动型后密封圈清洗系统也极大地减少了活塞和密封圈的磨损。此外，它的排气装置也是非金属材质。柱温箱在柱温箱内不仅可以根据不同的应用需要而配置不同数量和种类的切换阀，如自动多步骤和多维液相分离流程，而且还拥有对分离柱的自动鉴别功能，能自动提供分离柱的使用情况和信息，从而符合药物和食品管理机构的要求。UV-Vis 和二极管阵列检测器都是高灵敏度、低噪声、低漂移，检测范围达190–900 nm和高频率采样的检测器，因此也适用于超高速液相。同时也可以选配各种生物兼容型的流通池来配合从微量、普通到半制备的应用。自动进样器和馏份收集器自动进样器配有双针头设计。进样针头为PEEK材料，确保管路没有铁及其它过渡金属离子的污染，实现完全的生物兼容。戴安独有的馏份收集器附件为它的自动进样器添加了带有温控的馏份收集和自动再进样功能，这样就能够实现先进的自动多步骤和多维液相分离流程，这些方法能够大大增强对样品的分析能力，同时也避免了大量的人力和由此而造成的结果误差。使用者可以根据时间、峰值、外部信号或手动触发等模式对留份进行收集。软件基于数据合成的二维图像有助于使用者对分析结果有直观的理解。变色龙数据处理软件变色龙数据处理软件能够在线控制UltiMate3000钛系统高效液相色谱的各个模块。易用的向导和数据挖掘工具使得应用方法的编写和开发、快速的数据和结果处理变得十分的简便。自动的系统监测和诊断功能以及在线的故障排除指南也有效地缩短了停机时间。

半制备型高效液相色谱选择检测器的原则是什么?

求助：高效液相如何进行梯度洗脱？

如题，本人想对一组降解产物进行各个提取制备请问北京哪个单位或高校有制备型的高效液相呢？联系方式？感谢！

高效液相梯度洗脱如何选择？

我们实验室有台“waters半制备高效液相”，有两个分析进样环：1个是制备的，另外一个是分析用的，分析用的那个按理说是可以进行测定的，但是那个进样池是100ul的，而普通的分析用的高效的进样池是20ul的，因此存在分析上的不精确和误差，请问大家用过这样的情况没有？是不是可以找工程师通过更换进样池啊？有没有waters的技术人员在本论坛可以解释一下哈。

姜黄素高效液相色谱分离，等度洗脱，第一个峰很好，第二，三峰有点重叠，峰形也有点不对称，可用吗?梯度洗脱时，梯度之间需要设置平衡时间吗，0～5min,乙腈：水（50：50）；5～10min,(60:40)；11～20min,(70:30)……,在5min,10min,20min时要设置平衡时间吗?谢谢。姜黄素高效液相色谱分离，等度洗脱，第一个峰很好，第二，三峰有点重叠，峰形也有点不对称，可用吗?梯度洗脱时，梯度之间需要设置平衡时间吗，0～5min,乙腈：水（50：50）；5～10min,(60:40)；11～20min,(70:30)……,在5min,10min,20min时要设置平衡时间吗?谢谢。

本人所在的实验室想购买一台半制备型的高效液相色谱，主要用来分离酶和多糖，请问要注意哪些技术参数才能满足我的要求？谢谢