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高速细胞培养生化分析仪

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高速细胞培养生化分析仪相关的资讯

  • 免费试用,新鲜上市的贝克曼库尔特细胞培养生化分析仪 —让您的细胞培养生化分析更快速,更准确
    Vi-CELL MetaFLEX 高速细胞培养生化分析仪,对细胞培养基多种生化指标(pH, pO2,pCO2,葡萄糖,乳酸盐,电解质:K+, Na+, Ca2+, Cl-)进行快速准确分析,不论是对于大规模生产,还是小规模开发,都是细胞培养应用的理想之选。免费使用:http://i.bio360.net/EDM/BeckmanCoulter/20170122/index2.html更快的速度,9种参数测试仅需35秒更小的体积,所有参数测试仅需65μL内置的校准流程和独立的QC验证,确保测试结果的可靠每天超过23小时的运行时间,时刻准备着。下载产品资料:http://i.bio360.net/EDM/BeckmanCoulter/20170122/index1.html试用规则: 该活动主要面向需要细胞培养相关的质控、研发及生产单位或者个人,凡有意向者,可通过网络申请免费试用,申请通过后贝克曼将根据客户情况安排试用。 活动申请时间:即日起至2017年4月10日Demo地点:根据报名情况设置合适的试用点 活动流程: 老师填写申请表—我司人员联系老师确认试用条件(包括样品状态、时间、数目等)—确认核实后,统一协调安排现场试用的时间地点*注:DEMO机试用包括贝克曼技术人员讲解、样品测试等,具体该活动解释权归贝克曼库尔特(商贸)中国有限公司。
  • 最新抗体药物研发及细胞培养生化分析技术交流会 暨最新Vi-CELL MetaFLEX细胞培养生化分析仪产品发布会
    在细胞培养过程中,能够给细胞提供一个适合的生长环境无疑是至关重要的。从细胞能量的供应葡萄糖,到细胞呼吸所需的氧气,以及代谢产生的乳酸盐,还有培养基中钾钙钠氯等各种离子,这些参数都会显著的影响细胞的生长。但现在每种参数差异很大,测试的原理又不尽相同,如何能够快速、准确而又便捷地测试这些参数就是当前面临的一个挑战。同时随着生化分析技术的不断发展,测试仪器和芯片也在不断往微流控、智能化发展。值此2017 Biocon盛会之际,全球生命科学领域的著名厂商,贝克曼库尔特公司特地邀请相关领域知名专家和大家分享最新技术成果及应用经验,内容精彩,不容错过!会议期间,贝克曼库尔特公司还将介绍最新Vi-CELL MetaFLEX细胞培养生化分析仪,并有仪器演示活动,让您现场体验贝克曼库尔特最新技术所带来的不同凡响的实验感受。同时,我们还将为每位参会者准备一份精美纪念品。诚邀您莅临贝克曼库尔特公司专场技术交流卫星会,让我们共同探讨细胞培养及抗体研发和生产的技术发展。会议时间:2017年3月24日(周五) 上午 10:40 – 11:55会议地点:上海龙之梦大酒店 四楼 晶柳厅会议地址:上海市长宁区延安西路1116号(近番禺路)会议日程: 10:40-11:00 自身免疫系统疾病抗体药物研发 张成海 博士上海麦济生物技术有限公司 CEO Therapeutic mAbs for Autoimmune Diseases Dr. Chenghai Zhang, CEO, Shanghai Mabgeek Biotech Co., Ltd. 11:00-11:20 整合细胞系构建和工艺开发实现快速IND申报 肖志华 博士上海奥浦迈生物科技有限公司 总经理 Integrated Cell Line and Process Development Enables Speed to IND Dr. Zhihua Xiao, GM, Shanghai OPM Biosciences Co., Ltd. 11:20-11:40 细胞培养之生化分析技术的最新进展及应用 李雪冰 博士贝克曼库尔特公司 高级产品应用专家 The Latest Progress and Application of Bio-analysis During Cell Culture Dr. Xuebing Li, Senior Product Specialist, Beckman Coulter China 11:40-11:55 Vi-CELL MetaFLEX 细胞培养生化分析仪现场演示和体验 Vi-CELL MetaFLEX Analyzer Demonstration大会期间,贝克曼库尔特公司还设有展台,为您带来贝克曼库尔特在生物类似药研发和生产的最新技术和解决方案,更有丰富多彩的仪器展示和现场活动,让您惊喜连连,敬待光临!贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司 生命科学部总部地址:上海市长宁区福泉北路518号2座5楼产品咨询热线:400 821 8899售后服务热线:400 885 5355 / 800 820 5355Email:apls@beckman.com
  • 细胞培养新宠亮相2017 BioCon中国国际生物药论坛
    冬去春来,三月大地开启生机勃勃模式,各类学术研讨会也开始如火如荼地开展起来。在上周刚结束的2017 BioCon中国国际生物药论坛,小贝家的全新Vi-CELL MetaFLEX细胞培养生化分析仪亮相专场学术卫星会及展台,给与会者留下深刻印象!随着国家十三五规划的深入实施以及技术日趋成熟和市场的强劲需求,生物制药领域的抗体药物研发和生产迎来了千载难逢的好时光,发展势头迅猛。3月24日贝克曼库尔特公司在2017 BioCon中国国际生物药论坛大会期间,举办了抗体药物研发及细胞培养生化分析技术交流会暨全新Vi-CELL MetaFLEX细胞培养生化分析仪产品发布会,并特邀行业专家张成海博士和肖志华博士分享了他们最近的研发成果及经验心得。会上,上海麦济生物技术有限公司的CEO张成海博士首先介绍了在治疗自身免疫性疾病方面的抗体药物的现状和进展情况。随后,上海奥浦迈生物科技有限公司的总经理肖志华博士介绍并分享了细胞系构建和工艺开发的一些成果和经验。与会听众兴致勃勃,踊跃举手提问。两位专家向与会同行在抗体药物研发和细胞培养方面遇到的困惑一一做了解答。最后,贝克曼库尔特高级产品应用专家李雪冰博士向大家介绍了贝克曼库尔特全新推出的Vi-CELL MetaFLEX细胞培养生化分析,并且现场演示了这款机器的优越性能和简便操作。Vi-CELL MetaFLEX小巧靓丽的外形和简单直观的操作,让与会者眼前一亮,会后纷纷上台近距离观看和体验了解机器的性能,并向我们的产品专家询问更多的细节,气氛热烈!Vi-CELL MetaFLEX 细胞培养生化分析仪,专为细胞培养过程中多种生化指标的快速分析而设计,对细胞培养基多种生化指标进行快速准确分析,不论是对于大规模生产还是小规模开发,都是细胞培养应用的理想之选!贝克曼库尔特生命科学事业部贝克曼库尔特生命科学事业部一直致力于改善全世界人类的健康。在过去的一百年里,“贝克曼”、“库尔特”卓越品牌的各种仪器已被世界各地医务人员和科研工作者所普遍认可和接受。贝克曼库尔特生命科学事业部为广大科研、商业实验室的生命科学研究工作者们提供先进的仪器系统、试剂和优质的技术服务与支持,不断促进生物学科研的新技术发展。我们的技术支持和售后服务网络遍及全球,营销达至130多个国家。公司主要产品包括流式细胞仪、离心机、实验室自动化系统、细胞与颗粒计数器以及粒度分析仪等,其产品主要用于最前沿的重要研究领域,包括基因组学、蛋白质组学、细胞组学以及生物制药等。更多详情,欢迎您联系:--贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司 生命科学部总部地址:上海市长宁区福泉北路518号2座5楼产品咨询热线:400 821 8899售后服务热线:400 885 5355 / 800 820 5355联系邮箱:apls@beckman.com
  • 高效构建hiPSC系的全自动化神器,单细胞可视化分选培养系统,让单细胞培养不再复杂!
    人类诱导多能干细胞 (hiPSC) 是一类通过基因编辑技术(如 CRISPR-Cas9)对已经高度分化的人体细胞重新逆分化得到的多能性干细胞。hiPSC的出现为科学家构建复杂的疾病模型和推进药物发现提供了有利的工具。 然而,传统的hiPSC细胞系的构建与培养过程往往操作复杂且耗时耗力。特别是从异质编辑细胞池中构建的克隆hiPSC系的培养受到了传统细胞培养方法的桎梏,很难构建一个高效的hiPSC构建与培养工作流程。此外,现有的单细胞分离和培养方法通常对细胞的处理条件苛刻,操作步骤繁琐,不能充分保证单克隆性。 为应对hiPSC细胞系构建与培养过程中的诸多挑战,IotaSicences公司采用了以GRID技术为核心的高度自动化的单细胞可视化分选培养系统isoCell来构建 hiPSC系的分选与培养平台,并在不同培养基条件下对hiPSC进行了单细胞分选与培养研究。图1 单细胞可视化分选培养系统isoCell实物图 以isoCell为核心的hiPSC细胞分选与培养平台 isoCell是一款基于GRID技术的高度自动化细胞分选与培养平台。GRID是指在细胞培养基上采用FC40液体分隔出的网格小室,体积小,光学透明度高,可以容纳细胞在内生长,且各个小室之间物质不流通。isoCell系统配备了荧光和成像系统,用于在整个克隆工作流程中记录 GRID 小室的图像(见下图)。isoCell 可自动执行所有液体处理步骤,包括构建 GRID、将单细胞注射到GRID小室中以及交换培养基和收获单克隆集落。并且,isoCell可在整个工作流程中自动检测每一个 GRID 小室,并确保每一个单克隆hiPSC细胞系来源于单个细胞。 图2 GRID实物图 材料与方法 在分别铺了Laminin-521、Vitronectin-N和iMatrix 细胞培养基质的60毫米培养皿上制备的GRID网格以待使用。制备hiPSC的单细胞悬浮液,并使用 isoCell全自动地将细胞铺在GRID上(种植)。 使用isoCell自带的显微镜鉴定每个GRID室并标记每个包含单个细胞(第 0 天)的室,将该培养皿放入培养箱培养。在第3天,将标记的含有单个细胞的GRID小室加满600 nl培养基。从第5天开始,每天观察标记单细胞的GRID小室,并对选中的GRID小室补充培养基。最后,使用isoCell观察并标记构成了hiPSC单细胞群落的GRID小室,使用isoCell全自动收获标记的GRID小室中的hiPSC细胞(通常在 6-8 天之间)。 图3 以isoCell为核心的hiPSC细胞分选与培养平台工作流程图 高效的hiPSCS细胞分选与培养平台 按照上述的工作流程,利用三种不同的培养基质(包括 VTN-N、LMN-521 和 iMatrix)构建并培养了两个独立的hiPSC细胞系,并评估所得细胞的克隆效率。如图4所示,两个不同的hiPSC测试系在不同培养基质条件下,均在GRID室中显示出非常高的克隆效率,这表明采用GRID小室低容量培养方法和细胞的自动化温和处理可产生非常适合单细胞高效生长的培养环境。 图4 GRID中的单细胞 hiPSC 克隆效率(克隆效率表示培养第5天时单细胞长成细胞群落数占第0天单细胞数的百分比) 结论 以isoCell构建的hiPSC细胞分选与培养平台可以对hiPSC细胞进行全自动化且温和地单细胞分选与培养。通过isoCell特有的GRID小室网格技术与可视化分选相结合,可以确保每一个单克隆hiPSC细胞系均来自单个细胞,且isoCell的分选与培养条件温和,hiPSC单克隆细胞系成活率高。 单细胞可视化分选系统isoCell的优势:- 全自动化流程- 操作条件温和,对单细胞无损伤- 全培养、分析流程可追踪- 单细胞分离效率高达100%- 单克隆细胞系构建成活率高- 直接转移到PCR管或96孔板- 结构紧凑,体积小 单细胞可视化分选培养系统-isoCell已在Cell、Advanced Science、Small Methods、Nature Communications等知名期刊发表多篇文章,如下摘引了近年五篇具有代表性的文献和大家分享。 Soitu C, Stovall‐Kurtz N, Deroy C, et al. Jet‐Printing Microfluidic Devices on Demand[J]. Advanced Science, 2020, 7(23): 2001854.Gangoso E, Southgate B, Bradley L, et al. Glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion[J]. Cell, 2021, 184(9): 2454-2470. e26.Deroy C, Nebuloni F, Cook P R, et al. Microfluidics on Standard Petri Dishes for Bioscientists[J]. Small Methods, 2021, 5(11): 2100724.Deroy C, Wheeler J H R, Rumianek A N, et al. Reconfigurable microfluidic circuits for isolating and retrieving cells of interest[J]. ACS Applied Materials & Interfaces, 2022, 14(22): 25209-25219.Oliveira N M, Wheeler J H R, Deroy C, et al. Suicidal chemotaxis in bacteria[J]. Nature Communications, 2022, 13(1): 7608. 样机体验 为更好地服务中国科研工作者,Quantum Design 中国也建立了样机演示实验室,将为大家提供为专业的售前、销售、售后技术支持,欢迎各位老师垂询! 用户名单 用户评价 路易莎埃姆斯,研究科学家:The Native Antigen Company(LGC 临床诊断集团旗下公司) “使用 isoCell 进行单细胞克隆工作从一开始就简单可靠,并且已无缝地融入我们的流程中。 该程序对细胞很温和,我们看到非常好的存活率,可以筛选大量克隆。 我们收到的客户服务是优质的。”
  • 投资20亿美金 落地北卡州 富士胶片(FUJIFILM)公布北美最大细胞培养生物药CDMO工厂选址
    富士胶片(FUJIFILM)将投资20亿美元,在北卡罗来纳州HollySprings建立新的先进大型细胞培养生产设施,并创造725个就业机会。2021年3月19日,东京——富士胶片(总裁:SukenoKenji)宣布选择北卡罗莱纳州的HollySprings作为其在美国新的大规模细胞培养生产基地。先前宣布的投资超过20亿美元建立北美最大的端到端细胞培养生物制药CDMO工厂,到2028年底将在该地区创造725个高技能工作岗位。此外,富士胶片(FUJIFILM)的子公司DiosynthBiotechnologies将在美国、英国和丹麦拥有开发和生产设施。经过严格的评审程序,富士胶片选择了北卡罗莱纳州的HollySprings作为新工厂的所在地。北卡罗来纳州HollySprings因其强大的技术人才、本地资源、具有适当能力、清洁能源和可持续发展能力的合作伙伴而被选中。凭借在北卡罗来纳州Morrisville的现有设施,FUJIFILMDiosynthBiotechnologies致力于继续与多年来建立的州和地方官员进行强有力的合作。新工厂将提供大规模的原料药细胞培养生产,配备8个2万升生物反应器,并根据市场需求进一步扩大和增加24个2万升生物反应器。此外,该工厂还将提供商业规模的自动化灌装和组装、包装和标签服务。该设施预计将于2025年春季投入使用。该设施的设计和建造将以可持续发展为核心。其设计目标是100%利用清洁能源、实施尖端废物处理和回收,以及其他可持续发展目标。富士胶片总裁KenjiSukeno表示:“北卡罗来纳州的HollySprings非常适合我们,因为它是美国解决环境和社会问题最活跃的社区之一。富士胶片将通过与HollySprings社区合作,刺激当地经济,并根据我们的‘可持续价值计划2030’,加速‘通过商业活动解决社会问题’,为实现可持续发展社会做出贡献。新设施对于加速我们生物CDMO业务的增长具有重要的战略意义。”“我们对这一新设施将给我们的合作伙伴带来巨大价值充满热情,因为这将带来影响生命的疗法。建立北美最大的端到端细胞培养CDMO机构需要承诺和合作。我们很高兴得到了来自北卡罗莱纳州HollySprings的大力支持。作为北卡罗莱纳生物技术中心的一部分,这是在基础设施和人才方面的未来建设。”CDMO:合同开发和制造组织《2030年可持续价值计划》是公司的环境、社会和治理(ESG)计划,目标是在2031财年/第三季度实现。它从“通过业务流程考虑环境和社会影响”和“通过业务活动解决社会问题”的角度,定义了“环境”、“健康”、“日常生活”和“工作方式”四个关键领域。在“环境”方面,该计划设定了数字目标,包括“与2014财年/第三季度相比,整个产品生命周期的二氧化碳排放量减少45%。”关于富士胶片富士胶片是富士胶片控股公司的经营公司。日本东京富士胶片控股有限公司凭借其在不断追求创新的过程中积累的丰富知识和基础技术,为全球各行各业带来尖端的解决方案。其专有的核心技术为医疗保健、图形系统、高功能材料、光学设备、数字成像和文档产品等多个领域做出了贡献。这些产品和服务基于其广泛的化学、机械、光学、电子和成像技术组合。截至2020年3月31日的财年,该公司的全球营收为210亿美元。富士胶片致力于负责任的环境管理和良好的企业公民意识。更多信息,请访问:holdings.fujifilm.comFUJIFILMDiosynthBiotechnologies是生物制剂合同开发和制造组织(CDMO),位于英国Teesside、北卡罗来纳州RTP、德克萨斯州CollegeStation和丹麦Hillerød。FUJIFILMDiosynthBiotechnologies在重组蛋白、疫苗、单克隆抗体、大分子、病毒产品和多种微生物、哺乳动物和宿主/病毒系统中表达的医疗对策的开发和制造方面拥有超过30年的经验。该公司提供全面的服务清单,从使用其专有的pAVEway™ 微生物和Apollo™ X细胞系系统进行细胞系开发,到工艺开发、分析开发、临床和FDA批准的商业生产。FUJIFILMDiosynthBiotechnologies是富士胶片公司和三菱公司的合作伙伴。更多信息请访问:www.fujifilmdiosynth.com以下原文:FujifilmSelectsNorthCarolinaastheLocationtoBuildtheLargestCellCultureBiopharmaceuticalCDMOFacilityinNorthAmericaFujifilmtoinvest$2Billionandcreate725jobswithitsnewstate-of-the-artlarge-scalecellculturemanufacturingfacilityinHollySprings,NorthCarolinaTOKYO,March19,2021—FUJIFILMCorporation(President:KenjiSukeno)hasannouncedtheselectionofHollySprings,NorthCarolinaasthelocationforitsnewlarge-scalecellcultureproductionsiteintheUnitedStates.Thepreviouslyannouncedinvestmentofmorethan200Billionyen(2BillionUSD)toestablishthelargestend-to-endcellculturebiopharmaceuticalCDMO*facilityinNorthAmericawillcreate725highly-skilledjobsintheareabytheendof2028.FUJIFILMDiosynthBiotechnologies,asubsidiaryofFUJIFILMCorporation,withdevelopmentandmanufacturingfacilitiesacrosstheUnitedStates,UnitedKingdom,andDenmark,willoperatethenewfacility.Arigorousdata-drivenevaluationprocesswasfollowedtomaketheselectionofHollySprings,NorthCarolinaasthehomeforthenewfacility.HollySprings,NorthCarolinawasselectedforitsstrongpooloftechnicaltalent,localresourcesandpartnerswiththerightcompetencies,cleanenergyresources,andsustainabilityforfuturegrowth.WithanexistingfacilityinMorrisville,NorthCarolina,FUJIFILMDiosynthBiotechnologiesiscommittedtocontinueitsstrongcollaborationwithstateandlocalofficials,whichhasbeenbuiltovertheyears.Thenewfacilitywillofferlarge-scalecellculturemanufacturingofbulkdrugsubstanceproductionwith8x20,000Lbioreactorswiththepotentialtoexpandandaddafurther24x20,000Lbioreactorsbasedonmarketdemand.Inaddition,thefacilitywillalsoprovidecommercialscale,automatedfill-finishandassembly,packaging,andlabelingservices.Thefacilityisexpectedtobeoperationalbyspring2025.Thefacilitywillbedesignedandbuiltwithsustainabilityasitscore.Thefacilitydesigntargets100%cleanenergyutilization,implementationofcuttingedgewastedisposalandrecycling,amongothersustainabilitygoals.“HollySprings,NorthCarolinaisasuitablelocationforus,asitisoneofthemostactivecommunitiesintheUSinaddressingenvironmentalandsocialissues,”saidKenjiSukeno,presidentofFUJIFILMCorporation.“FujifilmwillcontributetorealizingasustainablesocietybycollaboratingwiththeHollySpringscommunityandstimulatingthelocaleconomy,andfurther,byaccelerating“resolvingsocialissuesthroughbusinessactivities”inalignmentwithourSustainableValuePlan2030**.ThenewsiteisstrategicallyimportanttoacceleratethegrowthofourBioCDMObusiness.”“Wearepassionateaboutthetremendousvaluethatthisnewfacilitywillbringtoourpartnersinproducinglife-impactingtherapies.Tobuildwhatwillbethelargestend-to-endcellcultureCDMOfacilityinNorthAmericarequirescommitmentandpartnership.WearedelightedtohavereceivedthestrongsupportfromthetownofHollySpringsandthestateofNorthCarolina.Thisisbuildingforthefuture,bothininfrastructureandintalent,aspartofthevibrantNorthCarolinabiotechhub,”saidMartinMeeson,chiefexecutiveofficerofFUJIFILMDiosynthBiotechnologies.CDMO:ContractDevelopmentandManufacturingOrganizationSustainableValuePlan2030:SustainableValuePlan2030isthecompany' sEnvironmental,Social,andGovernance(ESG)plan,targetingtobeachievedbyFY2031/Q3.Itdefinesfourkeyareas,namelythe“environment”,“health”,“dailylife”and“workstyle”,fromtheperspectivesof“consideringenvironmentalandsocialimpactsthroughbusinessprocesses”and“resolvingsocialissuesthroughbusinessactivities.”Fortheareaofthe“environment”,theplansetsnumericaltargetsincluding“a45%reductioninthevolumeofCO2emittedacrosstheentireproductlifecyclecomparedtoFY2014/Q3.”AboutFujifilmFUJIFILMCorporationisanoperatingcompanyofFUJIFILMHoldingsCorporation.FUJIFILMHoldingsCorporation,Tokyo,Japan,bringscuttingedgesolutionstoabroadrangeofglobalindustriesbyleveragingitsdepthofknowledgeandfundamentaltechnologiesdevelopedinitsrelentlesspursuitofinnovation.Itsproprietarycoretechnologiescontributetothevariousfieldsincludinghealthcare,graphicsystems,highlyfunctionalmaterials,opticaldevices,digitalimaginganddocumentproducts.Theseproductsandservicesarebasedonitsextensiveportfolioofchemical,mechanical,optical,electronicandimagingtechnologies.FortheyearendedMarch31,2020,thecompanyhadglobalrevenuesof$21billion,atanexchangerateof109yentothedollar.Fujifilmiscommittedtoresponsibleenvironmentalstewardshipandgoodcorporatecitizenship.Formoreinformation,pleasevisit:holdings.fujifilm.comFUJIFILMDiosynthBiotechnologiesisanindustry-leadingBiologicsContractDevelopmentandManufacturingOrganization(CDMO)withlocationsinTeesside,UK,RTP,NorthCarolina,CollegeStation,TexasandHillerød,Denmark.FUJIFILMDiosynthBiotechnologieshasoverthirtyyearsofexperienceinthedevelopmentandmanufacturingofrecombinantproteins,vaccines,monoclonalantibodies,amongotherlargemolecules,viralproductsandmedicalcountermeasuresexpressedinawidearrayofmicrobial,mammalian,andhost/virussystems.ThecompanyoffersacomprehensivelistofservicesfromcelllinedevelopmentusingitsproprietarypAVEway™ microbialandApollo™ Xcelllinesystemstoprocessdevelopment,analyticaldevelopment,clinicalandFDA-approvedcommercialmanufacturing.FUJIFILMDiosynthBiotechnologiesisapartnershipbetweenFUJIFILMCorporationandMitsubishiCorporation.Formoreinformation,goto:www.fujifilmdiosynth.com
  • 走访健顺生物上海研发中心:探秘细胞培养工作流程中的科学仪器
    p style="text-indent: 2em text-align: justify "细胞培养技术是细胞生物学研究方法中重要和常用技术,广泛应用于医学研究、试剂研发和生命科学等领域。作为细胞实验中的关键步骤,培养细胞的过程要求保证严苛的环境条件以及精细、稳定的操作。那么细胞培养的工作内容是怎样的呢?需要用到哪些必备的科学仪器来保证细胞培养的顺利进行呢?/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "近日,仪器信息网走访了中国知名培养基生产企业——甘肃健顺生物科技有限公司(以下简称“健顺生物”)的上海研发中心实验室,以探寻以上问题的答案。走访过程中健顺生物副总裁张业炘与研发中心实验室负责人明庆中就实验室的情况做了详细介绍。/pp style="text-align: center "img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/c30d1471-dd72-47b4-a378-88bab1a11bdf.jpg" title="11.jpg" alt="11.jpg"/br//pp style="text-align: center "span style="font-size: 14px "strong健顺生物副总裁张业炘(左)、健顺生物上海研发中心实验室负责人明庆中(右)/strong/span/ppspan style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网:请您介绍实验室日常的工作内容? 过程中会用到哪些仪器?/strong/span/pp style="text-align: justify "strong明庆中:/strong我们实验室主要承担快速细胞培养测试,用客户提供的细胞进行培养基测试,具体是用客户提供的目标细胞或基因指令进行构建细胞,用于相应的培养基优化以及工艺改进,直到做到50升的反应器规模。br//pp style="text-indent: 2em text-align: justify "实验室中工业优化用到的仪器有:培养箱、摇床、生物反应器、超净工作台等;测试用到的仪器设备有:生化分析仪、渗透压测试仪、质量分析检测相应的仪器等。/ppstrongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "仪器信息网:贵实验室采购仪器会考虑哪些方面?/span/strong/pp style="text-align: justify "strong明庆中:/strong由于培养细胞需要很精准的条件,对于温度、湿度、二氧化碳浓度都有很高的要求,实验中细微的偏差就会导致一系列产品出问题,因此精细、稳定、高性能是对仪器设备的最基本要求和标准。保证实验的精准性就离不开具有良好性能以及高稳定性的仪器,所以目前主要使用进口仪器,其优势在于准确度高、稳定耐用、性能优异,可将细胞实验的误差尽可能降到最小。但是,近年来随着一些国产仪器的技术和质量水平不断提高,我们实验室陆续引进了一些国产品牌仪器,比如上海智城的ZWYC-290A精密细胞智能培养摇床和ZSB-1200ⅡA2型智能型生物安全柜等。在这个用于细胞研究对实验设备性能近乎苛刻的实验室内,全是欧美一线进口产品,唯有智城的精密细胞智能培养摇床以及智能型生物安全柜是来自国产厂商的设备。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/8a6200bd-9c30-4efb-a9f9-a05bd72cc6db.jpg" title="ZWYC—290A精密细胞智能培养摇床.jpg" alt="ZWYC—290A精密细胞智能培养摇床.jpg"//pp style="text-align: center "span style="font-size: 14px "strong上海智城ZWYC-290A精密细胞智能培养摇床在建顺企业浦东基地的实验室内与国际一线品牌产品相邻为伴,“并肩作战”!/strong/span/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "实验室中常用的来自国产厂商智城的ZWYC-290A精密细胞智能培养摇床是在引进、消化、吸收国外一线同类旗舰产品的基础上,再创新,再提高而形成的技术成果。该产品拥有指纹(密码)识别电子门、手机天网和数据无线传输采集三大系统,具备恒温、振荡、恒湿,光照、COsub2/sub五大功能,另外,还含有自保温聚氨酯一体壳体、杀菌加湿器、紫外高效灭菌、导流冲洗通道、便捷可卸托盘和绿色粘板六大产品亮点。/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "产品广泛应用于微生物细胞发酵、动物细胞和植物细胞培养,在生物医药、食品开发、生物农业环境治理等领域进行微生物培育、菌种或细胞系筛选等有着很好的应用前景,也可应用于对温度、供氧、剪切等具有较高要求的细菌培养、动植物细胞培养、杂交和生物化学反应以及酶反应研究。/pp style="text-align: center"img src="https://img1.17img.cn/17img/images/201810/uepic/5c7d4492-7278-47a2-87a2-e8da19c99bc9.jpg" title="ZSB-1200A2型智能型生物安全柜.jpg" alt="ZSB-1200A2型智能型生物安全柜.jpg"//pp style="text-align: center "span style="font-size: 14px "strong建顺浦东基地的生物细胞实验室内的两台上海智城ZSB-1200ⅡA2型智能型生物安全柜/strong/span/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "生物细胞实验室中的两台ZSB-1200ⅡA2型生物安全柜具有独创的五大生物安全保护屏障:1.恒风速技术。具有自动跟踪调节功能,有效克服电源电压起伏和ULPA/HEPA阻力变化引起的负压波动,杜绝气体外泄;2.独立低风速报警技术。当主控电路故障导致恒风速功能以及低报警系统失灵时,自动启动独立的低风速声光报警;3.ULPA/HEPA失效预、报警技术。当ULPA/HEPA临近失效或已经失效时,自动启动声、光和中文可视方式的失效预警或失效报警;4.ULPA/HEPA破损报警技术。当ULPA/HEPA由于阻力增大和表面风压增大出现破损时,自动启动声、光和中文可视方式的破损报警;5.全程跟踪、多参数监控技术。实测风速、压差、风量、ULPA/HEPA运行状态以及运行时间参数的中文可视、声、光报警,可为操作人员提供全方位的设备运行状态的安全隐患警示。/pp style="text-indent: 2em text-align: justify "该设备广泛应用于生物制药、生物化学、医疗卫生、环境监测及电子仪器仪表等研究、应用领域。/pp style="text-align: justify "span style="color: rgb(0, 112, 192) "strong仪器信息网:那智城的仪器如摇床、培养箱、超净工作台等在试用期间表现如何?/strong/span/pp style="text-align: justify "strong明庆中:/strong 在为期一年的使用过程中,智城的摇床、培养箱、超净工作台等仪器符合细胞实验室的高标准,可用于日常的实验操作,并且ZWYC-290A精密细胞智能培养摇床在细胞实验室中与国际一线品牌的细胞摇床在一起同台竞技,承担着与进口仪器完全相同的工作任务。仪器在使用期间相对稳定,未出现任何问题;值得肯定的是,智城对用户的反馈可做到迅速处理,快速改进产品以满足用户的需求,从而保证用户的工作流程顺利进行。比如我们在超净工作台的日常维护中发现工作台脚架清洁难度大,而智城方面听取我们的反馈后,响应十分迅速,并对仪器进行了改进完善,使得我们在使用时更加便捷。智城在反馈用户这一方面做的很好,改进做的很及时。/p
  • 908Devices发布REBEL 全自动生化分析仪新品
    动物细胞培养技术是当前生物制药的基石,无论前期研发还是后期生产过程中都得到了广泛的应用。 培养基作为动物细胞培养技术的重要元素之一,提供必要的营养支持以外,还决定着整个动物细胞生理状态的外在条件。虽然培养基中近百种成分的作用逐步被明确,平台化的自主培养基和商业化的目录培养基也可初步满足需求,然而随着生产成本的压力及产品质量的挑战不断加剧,培养基的持续优化仍然是生物工艺的重要环节。生化分析仪最早应用于葡萄糖、乳酸、谷氨酰胺和谷氨酸盐等有限代谢物质的分析,这些分析对于细胞培养过程的监控具有一定作用,但对培养基优化的指导作用相对有限。 随着分析技术的发展,超高效液相色谱(UPLC)对氨基酸的分析,液相串联质谱(LC-MS)对维生素的分析, 电感耦合等离子体-质谱法(ICP-MS)对微量元素的分析,气相色谱(GC-MS)对脂类的分析,显著提升了对于培养基理性设计的指导作用。上述现有需要相对复杂的分析样品前处理流程,对于初学者仍然具有一定的挑战;同时这些技术相互隔离,大量不同类型设备的采购对于企业来说压力重重,如需要全面分析,大部分依靠外包分析,费用高灵活度差;更重要的是,每个方法的分析时间长,仅应用于工艺结束后的全面回溯分析,在工艺过程中的监控和优化用发挥仍然不够。 为了充分整合培养基特定代谢物的分析,美国先进仪器制造商 908Devices 公司于 2019 年 8 月上线的一款全新的自动化细胞培养液分析仪,仪器型号为 REBEL, 英文中有颠覆传统的寓意,旨在重新定义培养基的分析流程。REBEL 分析仪基于独创的微芯片毛细管电泳串联质谱联用技术,在无需复杂前处理的情况下(稀释和过滤即可),结合配套的 REBEL 试剂盒,可以在 7 分钟内一次性分析包含所有氨基酸在内的 33 种组分,成为当前细胞培养基开发技术的变革者。 如图所示为 REBEL 分析仪对来自 8 个不同供货商(纵坐标:A-H)、但是化学定义相同的 CHO 细胞培养基的成分分析(横坐标:培养基中的成分名称),颜色上的深浅表示浓度上的差异,白色显示没有或未检测到的成分。结果可以看出,即使是相同配方的培养基,其内部成分的差异也是十分显著的,REBEL 作为辅线 (at-line)分析仪,可以直接安装于细胞培养实验室,无需传统分析方法的专业技能,极为简单直接的工作流程,“提取样品-过滤/稀释-装载样品-自动化分析-读取结果“,即可轻松完成培养基中多中成分的分析。 REBEL 分析仪对培养基的开发优势可以总结如下:最便捷的分析无需样品前处理,样品体积最少仅需要 10 μL,整个分析过程仅 7 分钟最全面的分析一次性分析覆盖所有 20 种天然氨基酸、6 种维生素、5 种生物胺和 2 种多肽共 计 33 种物质最准确的分析与其他传统方法分析结果一致性强,变异度低,检出限低最高效的分析使用 96 微孔板或者 48 标准样品盘,无人值守全自动分析,测试卡自动校正维护方便,分析报告自动生成最安全的分析数据支持 21 CFR Part 11-compliance,可在 GMP/GLP 放行条件下使用 基于 REBEL 带来的突破性的技术,该仪器获得 2019 年全美分析科学家 《Analytical Scientist》创新大奖 ( 2019 Innovation Awards),该集团每年年终会评选出当年度最具创新和最有行业影响力的分析仪器榜单,2019年的获奖名单详情可以参考国内媒体的详细报道。https://www.instrument.com.cn/news/20191224/519461.shtml创新点:REBEL 是一款具有革命性技术的针对细胞培养基成分分析的全自动分析仪,致力于生物制药领域的过程分析和监测。1)相比于主流液相色谱分析方法,REBEL 提供了极为简化的分析流程和极为简便的样品制备方法,无需特殊的衍生化前处理,仅需要常规的稀释和过滤操作后,即可进样分析;2)分析速度快,单次分析在 7 分钟内即可完成;3)单次分析,可以完成包括20种氨基酸,6 种维生素,6 种生物胺在内的 33 种物质的含量监测;4)完成分析,直接生成测试报告,得到物质含量的浓度信息,无需任何数据处理步骤。REBEL 全自动生化分析仪
  • 岛津推出《细胞培养上清液及培养基组分分析应用文集》
    现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的;细胞工程中更是离不细胞培养,杂交瘤单克隆抗体,完全是通过细胞培养来实现的。正在倍受重视的基因治疗、细胞治疗也要经过细胞培养过程才能实现,发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。总之,细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了关键的核心作用。开发合适的培养基配方与优化细胞培养条件是保证产品质量、产量以及批次之间一致性的重要因素,尤其是抗体药物偶联物、双靶点/特异抗体类药物、抗体片段融合蛋白等相对分子量大、结构复杂的抗体类药物,对其重要性不言而喻。而对于生物类似药的研发与质量控制来说,尽可能通过优化工艺缩小差异,更有利于生物类似药与原研参比品的质量对比研究,提高生物类似药的质量研究结果与参比品之间的相似性,从而使各项质量属性达到预先设置的可接受范围。目前生物制品公司的生物过程工艺开发与优化偏重于监测常规的温度、搅拌、溶解气体、OD值等理化条件和少数培养基成分与代谢物等的变化,缺乏对于细胞培养上清液组分直接、全面且快速的客观动态数据分析,因此无法精准优化细胞培养工艺条件,甚至影响抗体类药物等的产品品质;而培养基生产商为了开发高效低成本培养基配方,并且要保证批次间一致性,则需要投入大量的人力物力,配备不同检测功能的仪器来实现培养基成分的全方位检测。 为满足快速全面分析细胞培养上清液组分和培养基组分,将基础碳源、氮源、核酸、维生素和其他主要代谢物同时检测分析的需求,我们开发出“细胞培养上清液方法包”。该技术平台采用超快速三重四极杆液质联用仪,仅需17分钟,即可同时监测95种细胞培养上清液营养成份和代谢物等的相对丰度变化 。无需用户自行开发方法,即装即用。所有目标化合物信息与实验方法全内置,且根据需要可增加,可拓展。为增进用户对“细胞培养上清液方法包”的深入了解和方便使用,岛津企业管理(中国)有限公司分析中心整理编写了本册《细胞培养上清液及培养基组分分析应用文集》。本册文集介绍了“细胞培养上清液方法包”在不同培养基组分分析以及细胞培养过程监控中的应用,共收录应用文章 10 篇,为相关领域的客户使用该系统提供参考。 关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。
  • 上海智城发布全新一代精密细胞培养智能摇床
    我国生命科学领域又喜获国产装备利器,由上海智城分析仪器制造有限公司最新成功研发的全新一代ZWYC-290A型精密细胞培养智能摇床开始接受预订,即将批量投放市场。这意味着我国生物细胞研究领域开始拥有自己的国产高端装备。 细胞生长对培养环境有着极高的要求,如温度、CO2浓度、剪切、培养基浓度等。尤其是动物细胞,生长周期较长,对培养条件运行的连续性、稳定性和可靠性提出了非常高的要求。通过在一个CO2培养箱内放置一台小型的振荡平台,凑合成一台简易的细胞培养装置,或者购买国外进口的精密细胞摇床来弥补国产实验装备不足的缺憾,这就是当前我国生物细胞研究领域装备落后的真实写照。在这样的实验条件下开展细胞研究,实验人员除了要克服操作不便和面对设备漏电的风险之外,还频生因设备问题引发生物细胞受到污染而最终导致实验失败的忧虑。广大细胞研究领域的实验人员渴望能有国产的精密细胞摇床早日问世。 ZWYC-290A型精密细胞培养智能摇床是上海智城公司推出的具有我国自主知识产权的细胞培养摇床新品。该产品凝聚了上海智城公司中国研发团队二十年恒温摇床的专业设计经验和现代生物技术的应用经验,携手海外专家技术攻关,在引进、消化、吸收国外一线同类旗舰产品的基础上,再创新,再提高而形成的技术成果。该产品拥有指纹(密码)识别电子门、手机天网和数据无线传输采集三大系统,具备恒温、振荡、恒湿,光照、CO2五大功能,另外,还含有自保温聚氨酯一体壳体、杀菌加湿器、紫外高效灭菌、导流冲洗通道、便捷可卸托盘和绿色粘板六大产品亮点。 ZWYC-290A精密细胞培养智能摇床是生物细胞培养在进入发酵培养前最完善的培养装置。产品广泛应用于微生物细胞发酵、动物细胞和植物细胞培养,在生物医药、食品开发、生物农业环境治理等领域进行微生物培育、菌种或细胞系筛选等有着很好的应用前景,也可应用于对温度、供氧、剪切等具有较高要求的细菌培养、动植物细胞培养、杂交和生物化学反应以及酶反应研究。 此产品将于10月10日在2016慕尼黑上海分析生化展(analytica China)展出,展位号:N3.3474,欢迎大家参观指导! 关于上海智城 创建于1998年的上海智城分析仪器制造有限公司(简称:上海智城)是生命科学领域专业从事分析仪器、实验室基础设备研发制造的知名制造商,公司连续十二年被评定为上海市高新技术企业。公司以力创中国实验室仪器设备领域主导品牌为目标,紧跟当今生命科学领域仪器设备最新的技术发展方向,矢之创新,潜心研发,以领先的专利技术、优越的性价比和可靠的售后服务在国内外用户中赢得良好声誉。上海智城在经过近二十年的发展,在国内形成了以上海智城技术为先导的恒温摇床产业格局,以“恒风速”核心技术为代表的我国智能安全型超净工作台产品的发展新方向。
  • 不同细胞培养工艺生物反应器产率和培养基成本比较
    p  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "简介/span/strong/pp  用于重组蛋白和单克隆抗体(mAb)生产的细胞培养工艺有不同的方式。补料分批(Feb-Batch)工艺由于操作简单,且较易规模放大,被临床和商业化生产广泛采用,目前的技术发展已可在18天内获得20-30x10^6cells/mL的细胞密度,同时获得 10g/L的滴度水平。/pp  灌流工艺以往更多用于生产不稳定的产品,如血液凝集因子和酶类产品,但也有用于生产 mAb产品,如Remicade(英利昔单抗)。在灌流培养中,通过培养基置换,降低产物在反应器内的滞留时间,而灌流速率取决于特异性的产物和/或工艺需求。/pp  近几年,在上游工艺中,基于灌流的工艺强化获得了极大的发展,驱动力主要来自于对降低成本和占地的需求,以及提高设备灵活性。随着细胞系、培养基和细胞截留设备的发展,现在的灌流工艺已可获得较高的细胞密度和产量,使其成为一个非常有吸引力的选择,包括mAb的生产。例如,在mAb生产中,结合2vvd的培养基置换速率,通常可达到50-60x10^6cells/mL的稳态细胞密度,以及高达4g/L/day的生物反应器产率。此外,浓缩补料分批(CFB)也可以通过培养基置换,维持高细胞密度,而将产物截留在生物反应器内。/pp  灌流和CFB的差异在于所用的中空纤维膜的孔径。对于抗体,使用Per.C6细胞系,可在12-13天内,达到21.4g/L的终产物滴度(峰细胞密度 150x10^6cells/mL),而使用CHO细胞系时,可在16天内达到25.3g/L的滴度,峰细胞密度 180x10^6cells/mL。随着生物反应器产率的提高,可使用占地更小、成本更低的一次性设备,来替代大规模的不锈钢设备(10,000-25,000L),通过增加设备轮转或连续工艺,生产等量的产物。/pp  尽管灌流工艺可使用基于过滤的细胞截留设备,如TFF和ATF,在生物反应器内获得并维持高细胞密度,但通常会要求使用较高的培养基置换速率,以将高密度细胞的活性维持在可接受的水平。与不同工艺相关的培养基成本是评估其生产等量产物时经济性的关键因素。而即使单位培养基成本适当,较高的培养基置换速率也会显著影响生产产品成本(CoG),亦即,上游操作成本与培养基成本紧密相关。/pp  生产单位产品的总生产CoG和上/下游成本的比重会随产物滴度和设备尺寸的变化而变化。在分析CoG的所有输入值中,一旦工艺确定,培养基用量及其成本是固定的,不管设备、设施等是否发生改变。细胞培养工程师的一个主要目标是降低培养基成本,同时获得高产量。本文使用相同的基础(basal)和补料(feed)培养基,稍作优化,开发了具有高生物反应器产率的不同细胞培养工艺(补料分批、灌流和CFB),并比较了不同操作模式的生物反应器产率及其相关的培养基成本。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "实验/span/strong/pp  实验使用生产单克隆抗体的重组CHO细胞系,不同工艺使用相同的3L生物反应器,培养基使用专利的基础(basal)和补液(feed)培养基,后者又分为两种补液-A和补液-B,均富含葡萄糖、氨基酸、维他命等。详细细胞系和种子扩增、生物反应器操作信息请参看原文。/pp  对于补料分批培养,反应器起始工作体积1.5L,接种密度为0.5或2x10^6cells/mL,后者通过3天的N-1灌流来达到目标密度。生物反应器补液以每日葡萄糖水平为基础进行。/pp  对于CFB工艺,使用50kD PS中空纤维过滤器的灌流设备,对于灌流,使用0.2μm PES中空纤维过滤器的灌流设备。接种密度1x10^6cells/mL,工作体积1.3L,一般第2天开始培养基置换,最大置换速率1vvd。灌流培养在第8天开始进行细胞废弃(cell bleeding),以维持所需细胞密度和活性。/pp style="text-align: center"img src="http://img1.17img.cn/17img/images/201711/insimg/b370cbae-a09d-4aad-901e-9998bacb5c16.jpg" title="1_副本.jpg"//pp style="text-align: center "  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "不同细胞培养模式图解(xu et al, 2017)/span/strong/pp  细胞培养每日取样分析,详细分析内容和方法,请参考原文。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "讨论/span/strong/pp  不同操作模式的细胞培养性能/pp  实验测试操作模式包括:补料分批、灌流和CFB,使用相同的3L生物反应器规格以及基础和补料培养基组合,以便比较细胞/生物反应器产率和培养基成本。/pp  补料分批模式 对于补料分批模式,接种密度为0.5或2x10^6cells/mL,后者通过N-1灌流,可使对数生长期降低2天,所以8天就可达到峰密度,而前者需要10天。两种条件达到的峰细胞密度范围均为20.2-26.2x10^6cells/mL。两种接种密度在第14天分别达到5.4± 0.1g/L和6.8± 0.2g/L的滴度。生物反应器单位体积产率(VPR)按最终生物反应器滴度除以培养周期计算。2x10^6cells/mL接种密度条件,相比0.5x10^6cells/mL,可获得更高的VPR(0.49± 0.01g/L/day vs. 0.39± 0.01g/L/day),主要是由于前者降低了起始生长阶段的时间,延长了生产期。/pp  灌流模式 在灌流培养中,使用了2种不同的培养基组成:1种只使用基础培养基,另一种为基础加补液-A。在培养过程中,通过合适的cell bleeding,维持较高的活性 85%。只使用基础培养基时,平均细胞密度为44± 4.1x10^6cells/mL,从第8天至32天的日产量为0.7± 0.04g/L/day。在基础+补液条件中,随细胞密度的增加,补液-A作为培养基置换的一部分,逐渐引入,而总培养基置换率保持为1vvd,平均细胞密度增加至73.9± 5.4x10^6cells/mL,日产量增加至2.29± 0.28g/L/day。细胞特异性产率从16.0± 1.2pg/cell/day增加至30.1± 2.3pg/cell/day,从而使反应器产量增加~230%。/pp  浓缩补料分批模式(CFB) 与灌流相似,评估了只使用基础培养基和使用基础+补液培养基的条件。与灌流工艺相比,CFB不需要进行cellbleeding,细胞质累积至更高的水平。当只使用基础培养基时,在第18天达到峰细胞密度72.0± 9.6x10^6cells/mL,上清液滴度为12.2± 0.6g/L。使用基础+6%补液-A+2%补液-B时,峰细胞密度为117.4x10^6cells/mL,第18天上清液滴度为21.4g/L,使用基础+8% 补液-A +8% Feed-B时,峰细胞密度为83.4x10^6cells/mL,第18天上清液滴度为36.7g/L。可见,增加补液-A和补液-B的量,可显著提高细胞特异性产率至45.1pg/cell/day。/pp  细胞特异性产率、生物反应器产率和产物质量/pp  当只使用基础培养基时,批次、灌流和CFB工艺可达到相似的qP,范围为14.7-17.1pg/cell/day。在此条件下,累积的细胞数量会直接影响产物滴度和单位体积产率。正如预期,批次培养的VPR显著较低,仅为0.08g/L/day,而灌流和CFB工艺由于可维持更高的细胞密度,可获得相当的VPR,0.68-0.70g/L/day。/pp  浓缩补液培养基通常用于补料分批工艺,以提高细胞生长和细胞特异性产率。在此研究中,补加补液培养基,可显著提高qP和VPR。对于补料分批培养,qP提高至29.4-32.0pg/cell/day,VPR达到0.39g/L/day(接种密度0.5x10^6cells/mL)或0.49g/L/day(接种密度2x10^6cells/mL)。N-1灌流获得的更高的接种密度可提高VPR,因为缩短了生长期的时间,延长了生产期,提高产量。但是,即使与只使用基础培养基的灌流和CFB相比,补料分批培养的VPR仍较低,因为细胞密度差别显著。/pp  相比补料分批工艺,只使用基础培养基以1vvd的速率进行培养基置换时,可轻松地将细胞密度提高2-3倍。而与只使用基础培养基的条件相比,在灌流培养中补充10%补液-A可使VPR提高~230%,qP提高~90%。相似的,在CFB工艺中,补充不同比例的补液-A和补液-B可将VPR提高至1.19-2.04g/L/day。/pp  最近有报道显示,长寿命的人浆细胞可在体外维持120pg/cell/day的IgG分泌率,对于基因工程哺乳动物细胞,最高生产速率估计为~100pg/cell/day。qP的提高将来自于细胞系和培养基的优化。所以,理论上,在灌流工艺中,如稳态细胞密度维持为100x10^6cells/mL时,每日产量可高达10g/L/day。/pp  实验同时评估了不同操作模式的产物质量特征,结果显示,CFB会形成更高水平的HMW和稍高的酸性异构体,主要是由于产物所暴露的细胞培养环境。在补料分批和浓缩补料分批中,产物滞留时间为整个培养周期。此外,在仅使用基础培养基的CFB工艺中,HMW最高,说明培养基组成可能在HMW形成中扮演了重要的角色。但是,产生的HMW仍低于5%,且大部分可在纯化步骤中去除。另一方面,即使是相同的高细胞密度环境和相似的培养基组成,灌流培养的酸性异构体和HMW更低,可能是由于产物在罐内更低的滞留时间。/pp  培养基成本分析/pp  由于细胞系或培养基组成的变化会显著影响产物滴度/产率,所以对不同操作模式的比较需使用相同的细胞系和培养基条件才有意义。本文使用从小规模生物反应器获得的细胞培养性能,来比较不同操作模式的培养基成本,并假定在规模放大时,不同工艺没有显著的产率下降。需要指出的是,实验中的灌流速率没有在对数生长期,以细胞特异性为基础,进行良好的优化。相反,在整个培养周期中,将灌流速率固定为1vvd。在不同的培养阶段,对细胞特异性灌流速率进行精细调节,应可进一步降低培养基用量和成本。/pp  当只使用基础培养基时,生产每克抗体的培养基成本在批量和灌流工艺中都很高。加入适量的补料培养基,可降低每克mAb的培养基成本,且即使补料培养基相对较贵,细胞密度和qP的增加相比培养基成本的增加更加显著。/pp  使用N-1灌流的补料分批的培养基成本比常规补料分批工艺低,N-1灌流需要3x基础培养基置换,但因接种密度的提高,继而获得的滴度的增加,抵消了培养基用量的增加。N-1灌流的补料分批和灌流的培养基成本相当,~$10/g mAb。这说明,虽然往常认为由于较高的灌流速率,灌流的培养基用量更高,继而培养基成本更高,但只需要生物反应器产率达到一定的阈值,从培养基成本上来看,还是相当有竞争力的。/pp  CFB工艺的培养基成本与其它操作模式的趋势不同。在只使用基础培养基的条件中,成本与批量和灌流工艺相当,但CFB培养基成本会随补料培养基的使用而增加,其相对较高的培养基成本( $17/g)可能是因为需要较长的细胞生长时间,在培养中,直到第10天,细胞密度达到峰水平,才开始出现显著的产物滴度增加。降低CFB培养基成本的一种方法是优化细胞寿命,延长批次时间,但更长的罐内滞留时间,可能会影响产物质量属性,或是进一步优化培养基,如替换昂贵的成分和优化其滴度。/pp  总生产COG/pp  除了培养基成本的不同,使用诸如灌流和CFB之类的工艺,结合一次性设备,在小规模上进行生物制品生产,可显著降低成本投入,从而获得更加灵活的生产策略,当产品需求增加时,可以快速地进行规模扩展(scale out),而不是规模放大(ScaleuP)。与传统不锈钢设备相关的固定成本,可以转变为“可变”的成本结构。基于此处的案例,灌流工艺的培养基成本实际上低于补料分批工艺。/pp  进行总成本分析时,如下游均以批量模式进行,且认为不同工艺的劳动力成本相当,则本文建模分析结果显示,N-1灌流的补料分批和灌流工艺的下游CoG/g相当,分别为$63/g和$59/g,而标准补料分批和CFB工艺的下游CoG/g稍高,分别为$71/g和$81/g。对于mAb和不稳定的产品,基于灌流的连续工艺都可以提供显著的经济优势。/pp  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "总结/span/strong/pp  在本研究中,比较了不同操作模式下,生物反应器的产率,包括补料分批、灌流和CFB工艺。对于研究的细胞系,qP高度取决于所用的培养基,不管采用哪种操作模式,这使得累积细胞密度成为决定产物滴度和生物反应器产率的主要因素。结果显示,补料分批培养生物反应器产率最低(0.39-0.49g/L/day),而基于灌流的培养方式,由于可维持更高的细胞密度,产率相对较高,灌流为2.29g/L/day,CFB为1.19-2.04g/L/day。灌流的一个显著优势是可以达到并维持极高的细胞密度,用于产物形成。/pp  灌流工艺一个经常观察到的缺点是培养基用量较高,因为需要进行连续的培养基置换,以维持所需的高活细胞密度。这里的研究显示,高产率灌流培养的培养基成本实际上低于补料分批工艺。CFB工艺的培养基成本最高,虽然在18天内达到了36.7g/L的极高滴度,为降低CFB工艺的培养基成本,建议可以精调培养基置换率,以在起始的生长阶段获得更好的培养基利用,或通过培养基优化,提高细胞特异性产率。/pp  i小编出于交流目的编译此文,由于水平有限,不当之处,敬请谅解,详细内容,请参看原文。/i/ppi  原文:S.Xu, J.Gavin, R. Jiang, et al., Bioreactor Productivity and Media Cost Comparison for Different Intensified Cell Culture Processes. Biotechnol. Prog., 2017, Vol. 00, No.00./i/ppbr//p
  • 市值破百亿|细胞培养基第一股:奥浦迈首日涨60%
    2022年9月2日,奥浦迈正式在科创板挂牌上市,截至目前股价涨60%,市值达到104亿元人民币。中国细胞培养基市场仍以进口产品为主,赛默飞(Gibco品牌)、丹纳赫(HyClone品牌)和默克三大供应商占到三分之二的市场份额,国产化替代空间巨大。国产细胞培养基厂商中,甘肃健顺、奥浦迈占比较大,其他的供应商还有中山康天晟和、上海倍谙基、源培生物、沃美生物、迈邦生物、多宁生物等。抗体和蛋白药物的细胞培养基,进口产品一般在200-300元/升,国产产品一般在100元/升左右。细胞和基因治疗的培养基几乎完全依赖进口,售价一般在3000-4000元/升。根据咨询机构的数据,2020年中国抗体和蛋白药物细胞培养基市场规模为7.27亿元左右。考虑到中国生物医药从2015年的爆发开始,2019年开始才陆续进入商业化阶段,未来几年仍将高速增长的趋势。赛默飞、丹纳赫、默克占据国内培养基市场的三分之二,如果具体到抗体和蛋白药物领域,三家外企的份额更是达到了81.4%,国产化替代空间更加巨大。2019-2021年,奥浦迈的营业收入从2602万元迅速增加到1.28亿元。相比之下,纯化填料供应商纳微科技2021年的营业收入为4.46亿元。总结中国生物医药行业处于蓬勃发展的新时代,商业化也处在发端,未来几年国际化热潮也将来临。在这种背景下,供应链的国产化替代迎来重要的发展机会。除了细胞培养基、纯化填料,工艺设备端的细胞反应器、纯化设备是国产化替代的重要部分。除了试剂耗材和工艺设备外,分析仪器的差距更大,国产化替代面临更大的挑战
  • 动物细胞培养基如何选择?这里有答案
    1、细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。1.1 平衡盐溶液(balanced salt solution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank' s与Hank' s的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank' s常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5% CO2的培养条件。表1-1 几种常用的BSS配方(g/L)名称PBS(无Ca2+、Mg2+)PBS(含Ca2+、Mg2+)Earle’sHank’sD-Hank’sKrebs-RingerNaCl8.008.006.808.008.007.00KCl0.200.200.400.400.400.34CaCl2--0.200.14-MgCl2• 6H2O-0.10---MgSO4• 7H2O--0.20.2-Na2HPO41.151.15-0.0480.0480.10Na2HPO4• 2H2O--0.14--0.207KH2PO40.200.20-0.060.06NaHCO3--2.200.350.35-葡萄糖--1.001.00-1.80酚红--0.010.010.01-目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。此外,血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体、细菌毒素等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。目前,血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5~20 %,最常用是10 %。1.2 合成细胞培养基合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。最早开发的基础培养基(minimal essential medium, MEM),其本质为含有盐、氨基酸、维生素和其他必需营养物的pH缓冲的等渗混合物。在此基础上,DMEM、IMDM、HAM F12、PRMI1640等各种合成细胞培养基被不断开发出来。常用合成培养基的配方此处不详细介绍,其特性及应用的范围见下表:哺乳动物细胞培养基:培养基名称特性及应用范围199细胞培养基添加适量的血清后,可广泛用于多种细胞培养,并用于病毒学、疫苗生产等MEM细胞培养基MEM(Minimal Essential Medium)培养基有含Earle' s平衡盐的类型,也有含Hanks' 平衡盐的类型;有高压灭菌型的,也有过滤除菌型的;还有含非必需氨基酸的类型。是最基本、适用范围最广的细胞培养基。DMEM细胞培养基DMEM(Dulbecco’s modified Minimal Essential Medium)是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。IMDM细胞培养基IMDM(Iscove’s modified DMEM )是由Iscove在DMEM基础上改良,增加了几种氨基酸和胱氨酸量等。可用于杂交瘤细胞培养,以及无血清培养的基础细胞培养基。GMEM细胞培养基Glasgow’s MEM培养基是MEM的改进型,用于支持BHK-21细胞的生长。原配方以BME为基础, 加入10%磷酸胰蛋白(月示)肉汤,氨基酸和维生素浓度加倍。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计,含有BSS、21种氨基酸、维生素等,广泛适于多种正常细胞和肿瘤细胞的培养,也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素,可在血清含量低时用,适用于克隆化培养。F12适用于CHO细胞,也是无血清细胞培养基中常用的基础细胞培养基。DMEM/F12细胞培养基将DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后营养成份丰富,血清使用量也减少,常作为开发无血清细胞培养基时的基础细胞培养基。McCoy' s5AMcCoy' s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)原代细胞的生长,除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。William' s Medium E适用于大鼠肝上皮细胞的长期细胞培养。神经元基础培养基可为神经元生长提供基础营养物质。昆虫细胞培养基:培养基名称特性及应用范围Grace' s昆虫培养基Grace昆虫培养基(Grace' s Insect Medium)最初设计为支持澳大利亚白星橙天蚕蛾 (Antherea eucalypti) 细胞 的生长,是对Wyatt培养基的改良,以更接近 Antherea 血淋巴。Grace用这种培养基建立了第一个连续细胞系。适当补充添加剂后,该基本培养基已用于培养各种昆虫细胞,包括多种鳞翅类以及一些双翅类昆虫。Grace昆虫细胞培养基主要作为 培养基基础,用于培养Sf9 和Sf21细胞系,也用于其它鳞翅类昆虫细胞系的生长和维持。Grace' s培养基(Grace’s Insect Cell Culture Medium) 是无血清培养基,使用时需要补充血清,从而为细胞提供必要的营养因子。添加5 -20%胎牛血清后,Grace昆虫细胞培养基可以用于培养多种昆虫细胞。IPL-41 昆虫培养基 IPL-41昆虫培养基(IPL-41 Insect Medium)旨在用于大规模扩增草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞系,也常用于通过杆状病毒表达系统(BEVS)进行蛋白表达。 IPL-41培养基是对原始IPL配方的改良,由美国农业部昆虫病理实验室Weiss等人开发,用于大规模扩增草地贪夜蛾衍生细胞系。Weiss向基础培养基中加入了胎牛血清和TPB培养基(Tryptose Phosphate Broth),成功地实现了IPL-21 AE (III)细胞系的大规模连续培养。该培养基主要用于培养和维护鳞翅类衍生细胞系和扩增这些细胞系的病毒。IPL-41培养基基础也以用于无血清夜蛾细胞的杆状病毒重组蛋白表达。Shield' s & Sang Insect向Sheilds-Sang M3昆虫培养基中添加10%胎牛血清后广泛用于培养各种果蝇细胞系。Sheilds-Sang M3昆虫培养基(Sheilds and Sang M3 Insect medium) 基于D22培养基。该培养基支持黑腹果蝇衍生细胞的生长。Sheilds和Sang将原配方中的氯化物除去,用谷氨酸盐提供钠和钾离子,并用游离氨基酸替代乳白蛋白水解物。Bis-Tris作为缓冲剂放置pH变动。Schneider' s 果蝇培养基 很多昆虫组织培养基的配方是模拟特定昆虫体液的主要物理化学性质。针对相同物种的不同培养基成分的相似度可能比针对不同物种的培养基之间更低。有多种培养基用于果蝇细胞和组织的体外培养。应用最多的是Schneider 培养基、D-22 培养基。果蝇细胞用于研究各种生物化学过程,包括遗传学、内分泌学、生理学和细胞生物学等方面,以及重组蛋白的表达。加入5-20% 胎牛血清后Schneider培养基能够支持黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)原代细胞和建立的细胞系的快速生长。该培养基用于培养和维护果蝇胚胎衍生的细胞系以及其它双翅目昆虫细胞培养物细胞培养基常用几种重要的添加成分及使用过程中应注意的问题酚红在细胞培养基中用作pH值的指示剂。一般情况下,可以通过酚红的指示作用判断培养基的pH值,但低血清或是无血清细胞培养基中酚红的含量与普通细胞培养基中的酚红含量不同,不能通过肉眼观察或通过经验来判定pH值,建议使用pH计进行测定。酚红通常对含血清的细胞培养基生产的生物制品质量并不会产生明显影响,也可通过纯化技术去除,但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长。碳酸氢钠在细胞培养基中主要是作为缓冲系统,此外还具有调节渗透压的作用。通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量,是在科学的基础上根据实践经验所得。但是由于不同的细胞系(株)不同,同一株细胞适应环境也可能不同(细胞耐受性不同等),且存在的地域性水质差异等,在实际生产过程中也可稍作改动,但使用者需做相应的检测(理化及细胞生产试验等)。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH 7.2 ~7.4范围内具有较好的缓冲能力,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(0.34 g /L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。其安全浓度范围是10~25 mmol/L。丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是在没有葡萄糖的条件下,细胞也可以代谢丙酮酸钠。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4 ℃下放置1周可分解50 %,使用中最好单独配制,置-20 ℃冰箱中保存,使用前加入细胞培养液中。赖氨酸(L-lysine):分子量大于70,000的多聚赖氨酸可以用于促进细胞贴壁生长,也可以用于组织学(Histology)分析时的粘片剂。Poly-L-lysine和Poly-D-lysine都可以用于促进细胞的贴壁生长。Poly-L-lysine可以被某些细胞所消化并吸收,摄入过多的Poly-L-lysine会产生一定的细胞毒性。如果遇到Poly-L-lysine有细胞毒性的情况,可以考虑选用Poly-D-lysine,因为右旋的聚赖氨酸是不会被生物吸收利用的,所以毒性更低。远慕生物致力于生物技术和生命科学等行业领域,专注于植物生物学技术研究,以满足全球不断增长的食品,能源、医药日益增长的需求和发展。目前远慕生物制造和提供的产品主要有动物细胞培养产品(包括细胞培养基、FBS、缓冲溶液、抗菌剂和其他试剂)和植物生物学产品(包括植物组织培养基、凝胶系列产品、植物生长调节剂、抗生素&抗菌剂、生化试剂以及植物组培容器和耗材)。
  • 细胞培养体系与培养条件
    细胞培养也叫细胞克隆技术,在整个生物工程技术领域,细胞培养都是一个必不可少的过程。目前主要有两种基本的细胞培养体系,一种是细胞在人工基质上单层生长(贴壁培养),另一种是细胞在培养基中自由漂浮生长(悬浮培养)。贴壁培养和悬浮培养的细胞无论在细胞形态和培养条件上有诸多不同。第一来源和形态不同: 悬浮细胞的生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,细胞大体呈球形或椭球型(见下图)。这类细胞一般为淋巴细胞等血液系统来源的细胞。悬浮细胞 贴壁细胞生长必须有可以贴附的支持物表面,依靠自身分泌的或培养基中提供的黏附因子才能爱表面生长和繁殖。细胞在未贴附于底物之前一般似球体样,当与底物贴附后,细胞将逐渐延伸展形成一定的形态(见下图)。贴壁培养细胞主要包括正常细胞和肿瘤细胞,比如成纤维细胞,骨骼组织(骨及软骨),心肌与平滑肌、肝、肺、肾、乳腺皮肤神经胶质细胞,内分泌细胞,黑色素细胞及各种肿瘤细胞等。 上皮细胞型 成纤维细胞型 贴壁细胞与悬浮细胞在显微镜下的区别贴壁细胞分为两种,上皮细胞型和成纤维细胞型,在显微镜下观察时,贴壁细胞在瓶底伸展并延伸成梭型或不规则的三角形或扇形,而且晃动培养液时,细胞不动。悬浮细胞漂在培养液中,呈圆形,晃动培养液时细胞也随着漂动。 第二培养条件和方式不同: 贴壁细胞一般使用滚屏或T瓶进行培养。如果使用微载体,也可以用微载体培养瓶或生物反应器进行培养。 培养过程中的温度/湿度/CO2的环境条件控制,可由培养箱提供。 滚瓶机 微载体培养瓶 T瓶 悬浮细胞培养,可以使用小型细胞工厂、飞旋瓶、生物反应器进行培养。 细胞工厂和飞旋瓶培养中需要的温度/湿度/CO2的环境条件控制,可由培养箱提供。生物反应器自带条件控制功能。 小型细胞工厂Celline 飞旋瓶生物反应器 WIGGNS培养箱在设计之初就考虑了培养箱内部兼容用电设备。在具有传统培养箱的所有功能之外,WIGGENS CO2培养箱系列,采用了高效的循环系统保证了温度、CO2、湿度的均匀性。内置电源插孔设计,箱体内可以直接使用磁力搅拌器,摇床等用电设备。箱体右侧中部开孔,带硅胶塞,方便培养过程监控及对设备进行验证。箱体底部的导轨设计,可用于大型滚平机的推进和推出操作。加固隔板设计,实现了一机多能,灵活使用的特点。WIGGENS 二氧化碳培养箱
  • 细胞培养实验室设备配置及用途
    茂默科学以客户为本、合作共赢的理念,致力于帮忙客户提供整体实验方案。力求解决行业内客户对科学仪器选型难、维护难的处境。通过不断优化公司运作和提升服务质量,目前已赢得业内人士和广大客户广泛认可,拥有广泛而稳固的合作伙伴和客户群体。茂默科学现介绍细胞培养实验室设备配置及用途,想要了解更多仪器、实验室仪器选配、实验室整体打包方案制定,敬请咨询~1. 超净工作台实验室设备目前绝大部分细胞实验室使用超净工作台实现无菌操作,具有操作简单、安装方便、占用空间小且净化效果很好。安徽人和净化为您介绍两种主要超净工作台-侧流式(垂直式)和外流式(水平层流式)。工作原理一般是将室内空气经粗过滤器初滤,由离心风机压入静压箱,再经高效空气过滤器精滤,由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区,从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。(1) 侧流式工作台:空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧,也有从上向下或从下向上流向对侧,形成气流屏障保持工作区无菌,工作台结构为封闭式;(2) 外流式工作台:净化后的空气面向操作者流动,因而外方气流不致混入操作,工作台结构为开放式,但进行有害物质实验操作对操作者不利。 超净工作台应需要定期请有关部门检查洁净度,符合要求的超净工作台其洁净度应达到100级,用尘埃粒子计数仪检测粒径≤5μm的尘埃粒子数量不应超过3.5个/L;空气流量应控制在0.75-1.0m3/s;细菌菌落数平均1个,根据无菌状况必要时需要置换过滤器。 2. 显微镜倒置式显微镜是细胞培养实验室日常工作常规必备设备,主要用于日常了解细胞的生长情况并观察有无污染发生。如资金允许,建议选用配置有照相系统的高品质相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等,可随时拍摄并记录细胞生长情况。3. 培养箱体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,一般适生长温度为37℃,温差变化不应超过±0.5℃。温度升高2℃时,变不利于细胞生存,温度达到40℃以上细胞将很快死亡。因此,可精确控温的恒温培养箱、CO2培养箱是、佳选择。(1) 恒温培养箱:应选隔水式或晶体管式自控温培养箱,此类培养箱灵敏度高,温度控制较稳定。一般的恒温培养箱价格较便宜,其缺点是只宜于作密闭式培养。(2) CO2培养箱:目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2(常用浓度为5%),易于稳定培养液pH,适用于开放或半开放培养。使用培养瓶时,为使培养瓶内与外界保持通气状态,可将瓶盖略微旋松,为避免细胞被污染,使用这种培养方式时,培养箱内空气必须保持清洁,需定期用紫外线照射或酒精消毒,同时培养箱内应放置盛有无菌蒸馏水的水槽,防止培养液蒸发,保持箱内相对湿度。(3) 细胞培养耗材:培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶。4. 烘箱(干燥箱)用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。5. 水纯化装置细胞培养对水的质量要求较高,细胞培养、细胞培养相关液体的配制用水以及清洗细胞培养器皿用水都必须事先经过严格的纯化处理。目前有多种纯化方法相结合,可使普通水纯化为纯水和超纯水的纯水装置使用非常灵活方便,可挂壁式、台式、可配储水箱、也可直接用分液枪、还可根据各类实验用水要求选择配置杀菌功能,有效去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等,更有可有效去除掉热源、内毒素的超滤型纯水装置。6. 冰箱细胞培养实验室必备设备,应专用,不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质,且应保持清洁。一般包括普通冰箱、低温冰箱和超低温冰箱。普通冰箱:储存培养液、生理盐水、Hanks液试剂等培养用的物品,可短期保存组织样本。-20℃低温冰箱、超低温冰箱:用于储存需要冷冻以保持生物活性以及需长时期存放的制剂,如酶、血清等。7. 细胞冷冻储存器储存器常用的液氮容器,根据使用需要分为不同类型和规格。选择液氮容器时需要考虑三个因素:容积大小、取放使用方便、液氮挥发量。液氮容器的大小一般在25-500L,可以储存1ml的冻存管250-15000个左右。液氮温度、低温度可达-196℃,使用时应注意避免冻伤。由于液氮易挥发,需注意观察剩余液氮量,及时补充,避免液氮不足使细胞受损或死亡。目前有许多智能型细胞冷冻储存器可供选择,可配置有电子控制器的液氮储存器,实现冻存自动化;并可监测液氮水平和样品温度,确保样品温度始终处于设定温度点;可配置报警系统,设置液氮液面、温度、电池、电压、电源等失常情况下报警;同时具备热气体旁路系统,防止高于-130℃的暖空气进入液氮罐,从而更有效地保护样品,防止容器内升温。另外,可选择液氮供应罐通过连接管给储存罐补充液氮,保证样品安全。8. 离心机细胞培养时,通常使用离心机制备细胞悬液、调整细胞密度、洗涤和收集细胞。一般常规配置4000rpm台式离心机;若要做细胞沉降,需要使用80-100G离心力,因为离心力过大会损伤细胞。根据不同要求,有大容量、可调温度离心机、高速离心机和低温冷冻离心机等更多功能离心机可选择。9. 天平常用的有精密天平和分析天平。 分析天平的精确度一般为0.1mg、0.01mg和0.001mg。一般根据取样量量和精度要求选择合适的天平:取样量大于100mg宜选用精确度0.1mg的天平;取样量100-10mg,选用精确度0.01mg的天平;取样量10mg宜选用精确度0.001mg的天平。天平需要定期校准,可选择有自动校准功能的天平,方便维护。天平使用需要注意清洁,避免腐蚀性粉末、液体直接接触称量台。
  • Eppendorf:大力拓展细胞培养领域 重点培育中国市场——访Eppendorf公司高层
    ——访Eppendorf AG全球企业传媒副总裁Joern Peplow先生、Eppendorf China大中华区市场总监马青女士  移液器、离心机等通用仪器几乎是各个实验室的必备仪器。在众多实验室仪器生产商中,德国艾本德股份公司(以下简称“Eppendorf”)无疑是其中的佼佼者。其产品向来以高质量著称,在中国及全球拥有广泛用户与良好口碑。  2010年9月14日,恰逢2010年慕尼黑上海分析生化展召开之际,仪器信息网编辑(以下简称“Instrument”)就该公司的发展情况采访了Eppendorf AG全球企业传媒副总裁Joern Peplow先生,艾本德中国有限公司(以下简称“Eppendorf China”)大中华区市场总监马青女士全程陪同,并一同接受了采访。德国艾本德股份公司企业传媒副总裁Joern Peplow先生坐拥两大品牌,未来将大力拓展新购业务  Instrument:Joern Peplow先生,您好!请您谈谈Eppendorf的概况及其发展历程?  Joern Peplow先生:Eppendorf创立于1945年,是全球领先的实验室设备及耗材制造商,公司总部设在德国汉堡,生产工厂设在欧洲和美国,在全球25个国家都建立了子公司与办事处,共有2500余名员工。  Eppendorf成立之初,主要生产医疗生化仪器,为医学、临床检验、法医等行业提供一些实验室分析仪器与耗材。到上个世纪六、七十年代,各个国家缩减了在医疗领域的财政,公司考虑到未来的整体发展方向,开始往生命科学领域拓展。目前,Eppendorf已是世界知名的生命科学仪器生产企业,也是德国最大的生物仪器供应商。  2007年,Eppendorf收购了美国著名的细胞培养技术公司——NBS(New Brunswick Scientific),使其旗下拥有了Eppendorf和NBS两个品牌的产品。  Eppendorf品牌涵盖实验室常规仪器,包括移液器、离心机、混匀仪、eppendorf离心管和移液吸头等耗材;以及分子生物学产品,如高通量筛选自动化装置、PCR仪器及耗材等。  NBS品牌提供细胞培养摇床、超低温冰箱、CO2培养箱、生物反应器、发酵罐等细胞培养相关的产品线。这些产品广泛应用于生命科学、医药筛选、临床检验、疫苗生产等制药工业领域。Eppendorf Xplorer电动移液器  Instrument:移液器是Eppendorf的主打产品,请介绍下其竞争优势体现在哪里?  Joern Peplow先生:Eppendorf研发、生产移液器已有50余年的历史。Eppendorf移液器除了重量轻、移液准确、性能稳定、经久耐用外,其整体设计还符合人体工程学(PhysioCare)理念,非常人性化。用户使用Eppendorf移液器时会感到舒适、便捷,可有效减少疲劳,即便长期使用也不会造成肌肉损伤。同时,移液器界面设计得非常直观易懂,我们有信心让用户在五分钟之内就知道如何使用Eppendorf移液器。  Eppendorf移液器在用户中建立了良好的口碑与声誉,目前Eppendorf移液器在中国市场的占有率超过30%,位居第一,尤其在高端移液器市场,这种优势更为明显。  作为移液器市场的主导者,Eppendorf从未停止前进的脚步。近年来,Eppendorf不断研发并推出移液器新产品。2007年,Eppendorf推出了epMotion自动移液工作站,实现了以机器代替手工移液的过程。2010年推出全新的Xplorer电动移液器在移液精准性、可重复性上有了显著的提高,并且该移液器是Eppendorf所有产品中第一个采用了中文界面的产品,其操作界面对中国用户而言更直观、友好。Eppendorf小型高速离心机5424、5424R  Instrument:能否谈谈Eppendorf的离心机、PCR等产品线的发展情况?  Joern Peplow先生:Eppendorf离心机为小型台式离心机,性能稳定,使用维护相对容易简单,且体积小,便于安放。若配备不同的转子、吊篮与适配器,同一台离心机可实现多种功能,大大提高了机器的使用性能。Eppendorf离心机定位于高端市场,在为用户提供高端产品的同时,我们也提供高端的服务。因为离心机的使用寿命很长,一般超过十年,这样离心机的维护、维修等相关服务对用户而言是很重要的,因此公司对售后服务非常重视。  Eppendorf一直在PCR产品领域寻求突破。虽然Eppendorf不是世界上最先开发PCR的公司,但却是世界上第一家拥有梯度PCR专利的公司。Eppendorf的PCR产品逐渐多样化,从普通PCR仪延伸到定量PCR仪,从梯度PCR仪发展到快速PCR仪。目前,Eppendorf已成为是世界上少数几个能够生产快速PCR仪的公司之一。  与市面上的普通产品不同,Eppendorf非常关注用户体验,对客户使用习惯这类细小的环节都予以重视。同类产品的操作界面是几乎相同的,例如所有型号的离心机的操作界面都是类似的,这对于用户而言是非常便捷的。  Instrument:Eppendorf收购NBS公司的初衷是什么?以及,未来贵公司将如何发展细胞培养、发酵等产品线?  Joern Peplow先生:Eppendorf之所以收购该公司,是因为NBS公司与Eppendorf在经营理念、对产品质量的要求等方面有许多共同点,同时两者在产品线、客户群、销售渠道等方面存在互补,且NBS公司的细胞培养摇床、低温冰箱、培养箱、发酵罐等产品在欧美市场知名度较高。此项收购举措使Eppendorf拓展了细胞培养领域的产品线,全面提升公司的全球竞争力。  Eppendorf在选择收购公司时非常慎重,过去几年的业绩证明这次收购是非常成功的。未来我们将大力发展细胞培养相关技术,将其作为重点领域来拓展,将围绕细胞培养技术添加更多产品线。NBS Innova 44 R恒温摇床  Instrument:贵公司产品的市场优势是如何保持的?  Joern Peplow先生:这是多方面因素共同作用的:  (1)不断研发新产品。Eppendorf每年都会投入一定的资金研发新产品,2009年的研发投入约为2200万欧元(约为2亿人民币)。通过不断地推出在技术、性能上有所突破的新产品来满足用户更多、更高的需求。  (2)精湛的德国制造工艺。目前,除了NBS产品在美国、英国生产外,Eppendorf 90%的产品都在德国制造,从而保证了产品质量与售后服务。  (3)完善的销售、服务系统。如果有两个销售,那么就必须配备一个售后工程师。Eppendorf不仅要销售仪器,还要保证仪器在用户手中能够正确地使用。除销售外,我们另设有客户技术支持工程师,出售的所有产品的配置都由他们最后把关,以确保仪器及相关配件对用户而言是适合的。  Instrument:贵公司一般通过哪些方式进行宣传?宣传效果如何?  Joern Peplow先生:Eppendorf会参加、赞助许多大型展会与学术会议。参加展会对企业品牌有很好的宣传效果 而参加学术会议则可以近距离地接触用户,对产品销售起到很好的促进效果。两者相比,我们更重视学术会议,仅在欧洲,Eppendorf每年资助的学术会议就达60-80场。  马青女士:除参加展会和学术会议外,Eppendorf China会经常深入各大高校,举办一些产品应用相关的巡展。因为Eppendorf的产品是实验室比较基础的仪器,所以我们倾向于采用这种现场交流的方式,让顾客能“触摸”到产品,在实际操作过程中感受到我们产品的与众不同。在2004至2005两年间,Eppendorf China几乎跑遍了中国所有省份,举办了许多场研讨会。通过这种方式,用户能更好地了解我们产品的性能与应用。  此外,Eppendorf China还举办各种用户喜闻乐见的活动,吸引用户参与,间接地宣传我们品牌和产品。譬如2010年德国总部举办的“Eppendorf南非世界杯”全球在线竞猜活动,由于前期推广得力,中国客户积极参与,其中一位成为全球三个特等奖之一,取得了较好的宣传效果。  2010年上半年Eppendorf在中国推出了“珍寻之约”,寻找六七十年代生产的Eppendorf红色和黑色移液器活动,得到了国内客户的积极响应。多位中国客户纷纷主动拿出珍藏几十年的黑色款Eppendorf移液器,这表示了他们对Eppendorf品牌一直以来的信任和忠诚。我们在2010年慕尼黑分析仪器展上展示Eppendorf移液器的发展历程,并和大家分享此次活动背后的温情故事。中国客户珍藏的六七十年代Eppendorf生产的黑色移液器  Instrument:近年来,网络媒体异军崛起,越来越多的仪器公司开始重视网络宣传,您们是如何看待这种趋势的?  Joern Peplow先生:传统展会参展费用较高,且宣传的时间、范围有限,而网络宣传则避免了这些情况,其所需费用较低,可以长时间展示,且面向全球所有用户。但是,网络上的信息太多,用户很容易被海量的信息所混淆。  Eppendorf的用户多为科学家与研究者,他们倾向于通过同行介绍、参加展会与学术会议、仪器公司销售人员介绍等途径获得仪器方面的信息,而网络是他们较少选择的方式。所以,我们更重视与用户现场的沟通。  我们已经意识到互联网络对信息世界带来的巨大推动作用,我们也已经关注到这个发展趋势对我们业务带来的全新挑战。为中国的客户提供一个互动且友好的网络平台也是我们这几年工作的重点,借鉴Eppendorf国外现有的业务模式,我相信不久的将来我们会摸索并推出适合中国客户特点的网络宣传和业务平台。艾本德中国有限公司大中华区市场总监 马青女士“中国有望赶超德国,成为Eppendorf全球第二大市场”  Instrument:马青女士,您好!Eppendorf China成立至今已7年,目前发展状况如何?  马青女士:Eppendorf China成立于2003年,已在上海、北京、广州、香港四地建立了分公司,启动了直销经营模式,在中国除内蒙古、新疆、西藏之外的省份都建立了销售网络。  Eppendorf China销售业绩逐年增加,是Eppendorf 25家子公司中发展最快的公司。目前,Eppendorf亚洲市场的销售额占全球总销售额的28%,而中国正是亚洲最大的市场,其销售额仅次于美国、德国,位居全球第三。预计未来两年内,中国有望赶超德国,成为Eppendorf全球第二大市场。  Eppendorf China是在总部的大力支持下发展起来。2010年,Eppendorf首次推出了中文操作界面的移液器,这对中国用户而言是非常利好的举措。由此足见Eppendorf对中国市场的重视。  Instrument:Eppendorf China是较早在中国建立“直销经营模式”的外资企业之一,贵公司是如何构建“直销经营网络”的?该经营模式具有哪些特色?  马青女士:Eppendorf不同区域的子公司有不同的运作、销售模式。Eppendorf China在中国建立了几乎遍布全国的直销网络,遵循“Direct Sales,Direct Marketing,Direct Service”理念,直销可以让我们非常快速地了解顾客需要,快速地为其提供解决方案。为让该直销网络完善且富有效率,公司采取了多项措施来支持该系统。  首先,Eppendorf China在中国建有三个超大型仓储基地,储备的品种几乎覆盖公司所有的产品种类,同时,使得我们能够做到新产品的上市几乎与德国总部同步。  其次,Eppendorf China在国内建立了自己的物流网络,通过SAP系统进行货物信息的处理和跟踪,保证及时将产品送达用户手中。  再者,公司在上海建立了全国销售培训中心,定期对销售人员进行严格的培训,做到根据客户的需求推荐适合的产品。此外,400技术咨询和维修服务两条热线的开通,能及时处理顾客的产品咨询、服务投诉、技术咨询等问题。  在仪器直销的模式下,我们也相应地建立了易耗产品的分销渠道,并建立起一套有序有效的分销模式,真正实现了合作伙伴间的双赢。2010年Eppendorf授权经销商年会是在德国汉堡举行的,参会经销商参观了移液器、耗材的自动化生产流水线,对整个eppendorf质量标准体系有了深刻的理解。  我们相信通过德国总部持续的大力投资、中国团队的积极推广以及与合作伙伴的紧密合作这一系列的相互配合,Eppendorf在中国有着美好的前景和未来。采访现场  后记  分析Eppendorf在中国拥有良好口碑的原因,笔者认为可以用四个字来概括——“亲力亲为”,自主生产,这成就了Eppendorf经得起考验的产品质量;而“Direct Sales,Direct Marketing,Direct Service”,也是Eppendorf China取得骄人成绩的关键。  欧洲著名管理大师赫尔曼﹒西蒙在其著作《隐形冠军》中盛赞Eppendorf,称其为“市场的精神领袖”。作为一家历史悠久的成功企业,Eppendorf确实有许多地方值得我们去思考与借鉴。  采访编辑:杨丹丹  艾本德中国有限公司  http://www.eppendorf.cn/  http://www.instrument.com.cn/netshow/SH100679/
  • 3D细胞培养分析技术微孔板制备的新视角
    阿斯利康中国创新研究中心(ICC)的科学家们开发了一项新技术,利用Tecan 全自动液体处理工作站Freedom EVO进行细胞培养微孔板自动化温控制备,进而完成药物候选化合物筛选。该研究团队在BD Matrigel&trade 加样前使用琼脂预涂微孔板,从而顺利地在96孔微孔板上实现3D细胞培养分析。 中国创新研究中心(ICC)是阿斯利康在中国上海张江高科技园区投建的研发基地。该中心于2007年正式投入使用,专注于调查研究影响亚洲人口健康的各类疾病,其中包括:胃癌、肝癌以及肺癌。该中心采用国际一流的先进技术解析这些癌症的遗传机理,并在临床上识别及确证相关的生物标记物和药物靶标。 由Yi Gu博士带领的细胞科学研究部门正在对这些疾病开展一项药物研究项目,希望通过筛选多种化合物来确定候选药物。3D细胞检测分析是该项目组基于采用BD Matrigel (BD Biosciences)作为细胞培养底物进行的二次药筛技术其中的一种。Matrigel是从EHS (Engelbreth-Holm-Swarm)小鼠肉瘤的可溶性基底膜抽提得到的细胞外蛋白凝胶复合物,能够诱导克隆细胞在标准细胞培养基表面通过不同方式生长(图1)。这些非均相构成诱发了克隆体的形成,非常适用于研究肿瘤细胞之间的粘附、生长、迁移及转移。由于克隆细胞很好地模仿了人体组织的生长与成型过程,因此研究人员能够在药筛最初期识别正确的化合物。 手工制板存在着明显的两个缺陷:容易出错且耗费时间,而通过使用全自动液体处理工作站Freedom EVO来提高检测通量并改善结果的一致性,无疑是最好的解决方案。这一自动化平台早已成熟应用于化合物梯度稀释和其他大量细胞检测实验中,可以在保持原有应用的基础上快速且低成本地修改应用程序。 ICC资深自动化科学家William Shi解释说:&ldquo 历来此类3D细胞检测都是在6孔板上进行的,由于样本需求量大且Matrigel底物处理比较复杂,因此手工制板十分困难。并且,这种6孔板型无法与大量试剂需求和大批量化合物筛选工作相匹配,因此我们开始着手不断寻找高性价比的方法。另一点很重要的是,Matrigel的异质组分具有较大表面张力且在微孔内分布不均,其低剂量加样非常困难,因此分析6孔板上的实验结果已经极其困难,更别提在96孔板内检测分析了。为了解决这一问题,我们先在微孔板上预涂一层薄薄的琼脂,然后再进行Matrigel加样。这种方法虽然解决了Matrigel的表面张力问题,却带来了如何平衡在50℃以下琼脂凝固与4℃以上Matrigel过度粘稠这两种物质的复杂加样问题。&rdquo 后来我们选用了全自动化液体处理工作站Freedom EVO,其中选配了多个温控载架,使得盛装琼脂和Matrigel的液槽一直保持适宜的温度,非常便于加样。整个加样过程都是由自动化系统的液体处理机械臂(LiHa)上的单通道完成,通过多次洗液注液循环实现预热或预冷,避免加样针堵塞。加样初期通过机械臂的多次注液将预热琼脂(55℃左右)加入提前预热的96孔板内,这样可以将琼脂冷却的可能性降到最低点,从而减少琼脂的用量,降低实验成本。随后,微孔板在载板架上经室温冷却15-20分钟,使得琼脂在加入Matrigel前得以凝固。 采用这种解决方案后,能在短短90分钟内完成6块微孔板的加样制备,而传统手工处理一天仅能完成3-4块微孔板的加样,两者形成鲜明对比。制备好的微孔板质量在使用自动化加样技术后也有了很大提升,避免了人工制板常出现的批对批、板对板、甚至孔对孔的误差问题。William总结道:&ldquo 这种高度一致性对药物筛选来说至关重要,高质量的实验结果数据有助于我们加快药物研发进程,Freedom EVO自动化平台独具的灵活性使得这一切能够轻松实现!&rdquo 更多关于Tecan Freedom EVO液体处理工作站的信息请访问以下网站或询问当地Tecan员工/经销商:www.tecan.com/freedomevo 更多关于阿斯利康中国创新研究中心的信息,请访问以下网站:en.astrazeneca.com.cn BD和Matrigel是美国BD公司(Becton, Dickinson and Company)的注册商标。Corining是美国康宁公司(Corining)的注册商标。关于帝肯: 瑞士帝肯www.tecan.com是全球领先的生命科学与生物制药、法医和临床诊断领域自动化及解决方案供应商。公司成立于1980年,总部设在瑞士Mä nnedorf,分别在瑞士、北美和奥地利设有自己的研发和生产基地,目前公司主要经营的产品有三大类:全自动化液体处理平台( Liquid Handling&Robotics )、多功能酶标仪(Multimode Reader)和OEM组件;销售服务网络遍布世界52个国家,客户覆盖制药企业、生物技术公司、科研院所、法医、医院、血站系统和疾病控制中心(CDC)等。其液体处理技术已拥有行业经验30年,在全球处于领先地位,备受世界领先生命科学实验室的青睐。 帝肯(上海)贸易有限公司是瑞士帝肯集团公司亚太区总部,2008年4月成立于上海浦东。帝肯(上海)目前拥有一支专业的售前和售后服务团队,在科研、医院、血站和CDC领域构建了良好的经销网络,并以&ldquo 力求比客户期望做得更好&rdquo 的服务理念,给广大终端用户提供专业的服务。 欲知更多详情,请联系帝肯上海市场部:Libby ZhuTel: 021 2206 3206 / 010 8511 7823Fax: 021 2206 5260 / 010 8511 8461helpdesk-cn@tecan.com www.tecan.com
  • Petaka细胞培养---细胞培养技术革新
    公司近日获得Celartia公司的Petaka细胞培养板的中国区代理权! Petaka细胞培养板对于国内的用户来讲,或许是一个比较陌生的产品。单是却已经风靡欧美等国,受到各国科学家的一致追捧!甚至有专家预言,它的出现,将改变大家的细胞培养观念! Petaka细胞培养板为什么会如此之大的影响力呢?首先,基本性能优于传统的细胞培养;其次,高仿真的体外模拟环境;最后,多功能用途,一板多用; 更多的信息请查看http://premedlab.com/productshow.aspx?id=92&proid=300或者查询www.celartia.com。 更多的操作显示,请观看v.youku.com/v_show/id_XNDQ5ODkyNjky.htmlPetaka细胞培养板-操作演示 简而言之, Petaka细胞培养系将改变研究人员传统的培养观念!为细胞培养提供更加真实的体外模拟环境,为获得更加精确的数据提供有理的保证。
  • 生物制药中的细胞培养,影响产品质量关键的因素什么?
    从19年底疫情开始到现在,如果有一个行业实现乘风波浪,那一定就是医药行业。从疫情初期的医疗防护用品的紧俏,到中期疫苗的研发与全民接种,直到现在的常态化核酸检测,无一不是在推动医药行业的发展。其中生物药凭借其药理活性高、特异性强、治疗效果好、毒副作用较小的特点,已在全球医药市场大放异彩。在生物药制备中离不开细胞培养,培养基将为细胞生长提供所需最基本物质,并且其物质组成会影响产品的产量和结构,所以对培养基的筛选尤为重要。如何高效分析细胞培养基质细胞培养基质中一般都含有氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、多肽、蛋白质和其他类化合物。细胞生长过程中会消耗营养物质,同时释放目标生物药物和废弃产物。氨基酸作为蛋白质的基础,同时也是许多代谢途径的中间介质。是培养基中的必须成分,为细胞增殖和生存提供原料,其浓度可影响细胞密度。监测和调整氨基酸的组成对于优化生产过程,保证终产物的高质量和高产量是十分必要的。 我们提供一种高效、快速的HPLC-柱后衍生法,利用阳离子交换色谱结合茚三酮柱后衍生法可检测对包括细胞培养基质在内许多复杂基质中的氨基酸进行分析。HPLC-柱后衍生法 图1:流程图 ● 快速:ONYX PCX 搭载可程序升温柱温箱,可实现30min快速检测几十种氨基酸;● 重复性高:柱后衍生方法具有很好的灵敏性、重复性和稳定性;● 操作简便:直接与HPLC连用,基质中的大部分化学物质不会干扰分析,分析前只需柠檬酸盐缓冲溶液稀释样品并过滤;● 提供应用方案。 图2:细胞培养基样品色谱图 该方法已经成为并且将一直是实验室测试生物样品、蛋白质和多肽以及食品分析的重要方法。关于Pickering Laboratories美国Pickering Laboratories公司是全球*专业提供人工测试体液和柱后衍生化学试剂、色谱柱、分析方法等柱后衍生分析整体解决方案的机构,其不断创新及良好的信誉被众多的美国政府机构如EPA、ATF、FDA、AOAC和世界*的厂商所认可。
  • 岛津“细胞培养上清液方法包”介绍
    “细胞培养上清液方法包”采用超快速三重四极杆液质联用仪(LCMS-8040/8045/8050/8060),仅需 17分钟(包含分析时间和平衡时间),使用最优化的MRM参数,可同时监测分析95种化合物(不仅可分析培养基的基础成分也可分析细胞的代谢产物,包括氨基酸类、核苷酸类、维生素类、糖类以及其他类化合物等)的相对丰度变化。该方法包既可分析高浓度组分(例如葡萄糖和谷氨酰胺),也可分析低浓度组分(例如维生素等)。该方法包无需标准品,只需一个内标即可检测细胞培养过程中各组分随时间的变化曲线和培养基批次间的一致性。如用户需要对培养基或者细胞培养上清液中组分进行绝对定量,则需要另行准备对应的标准品,从而通过内标法对组分进行绝对定量。 “细胞培养上清液方法包”前处理操作简单方便,流程如下图所示: “细胞培养上清液方法包”中95个化合物(糖类、氨基酸类、维生素类、核苷酸类以及其他的抗生素、有机酸、生长因子等)列表详见表1。该方法包所检测化合物可增加扩展,也可根据用户需求选择性除去不关注化合物。 表 1. “细胞培养上清液方法包”中96种化合物列表(包含一个内标)关于岛津 岛津企业管理(中国)有限公司是(株)岛津制作所于1999年100%出资,在中国设立的现地法人公司,在中国全境拥有13个分公司,事业规模不断扩大。其下设有北京、上海、广州、沈阳、成都分析中心,并拥有覆盖全国30个省的销售代理商网络以及60多个技术服务站,已构筑起为广大用户提供良好服务的完整体系。本公司以“为了人类和地球的健康”为经营理念,始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,为中国社会的进步贡献力量。
  • 新品来袭!“高温干温+空气过滤”为细胞培养护航
    【仪器信息网讯】二氧化碳培养箱是通过模拟形成生物体内的生长环境,对细胞/组织进行体外培养的一种装置。为保证研究工作的顺利展开,二氧化碳培养箱需做到温度、二氧化碳浓度和湿度的稳定控制,同时保证培养样本不受微生物污染。由于用户所在的实验室环境和操作人员无意识的不规范操作,培养箱会经常出现污染,这是诸多实验室管理人员“头痛”之事,为此HealForce将重磅推出HF180二氧化碳培养箱为细胞培养保驾护航。“护航”措施一:180℃高温干热灭菌高温干热快速灭菌,灭菌时间<2小时(整个灭菌周期12小时)“护航”措施二:箱体内HEPA空气过滤器配备HEPA过滤器,可提供洁净的箱体内培养环境,针对≥0.3um直径的颗粒物和微生物的拦截率≥99.95%,适合非洁净实验室环境和经常开关门的用户。“护航”措施三:EBM风机强制对流循环风道强制对流,立体循环风道,双门检测开关,提供箱内均匀的温度、CO2浓度和湿度环境。“护航”措施四:底盘水库加湿设计(非增湿盘设计)底盘水库设计,加湿速度快,箱内湿度高,开门30秒后湿度恢复速度比传统增湿盘设计快,具有快排水设计,只需要插上软管,无需额外操作即可将水库中水排干。“护航”措施五:数据追溯和远程管理主机自带数据存储功能,配备USB、RS232接口等输出功能,可直接接入Biolab实验室物联网云平台系统,实现设备的远程监测、远程设备管理、异常信息查询和远程报警、数据存储和日志记录等功能,使用无忧。“护航”其他特点:8英寸触摸屏操作:触屏便捷操作,实时动态参数监控,具有数据记录、趋势图形显示,数据可直接U盘导出。TCD CO2传感器:TCD传感器测量精度高,寿命长,具有自动校准功能,传感器可耐受180℃高温,灭菌过程中无需取出。力康简介Heal Force是一家集研发、制造、销售、服务为一体,专注于为您提供完善的医疗及实验室解决方案,集团总部位于中国香港,力新仪器(上海)有限公司是集团下属销售运营中心。经过三十年的持续创新和高速发展,集团逐步实现了从贸易起步,向多元化发展的质的跨越。集团包括医疗和实验室等专业领域,持续衍生出各类成熟的产品线。自有品牌“Heal Force”在业内享盛誉,现有OR手术室系列、ICU重症麻醉系列、Maternal&Infant 围产产品系列、Rehabilitation康复医疗系列、Laboratory生命科学仪器系列、Healthcare家用健康产品多条产品线。Heal Force旗下拥有多家专业设备研发生产工厂,员工千余人,融研发、制造、销售、服务为一体,产品遍布全球百多个国家及地区。
  • 细胞培养的步骤和注意事项
    1、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。BIOCEN系列离心机WA系列恒温水浴 2、细胞传代当细胞密度达到80%~90%(过早产量不足,过晚细胞状态不佳,1:2至1:10以上的比率传代培养,一般1:3至1:5细胞一代,即从细胞接种到分离再培养的一段时间,非细胞有丝分裂次数)时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以盖住细胞最好,最佳消化温度是37℃。显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度)进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,吸取10微升进行计数,然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。WCI系列二氧化碳培养箱二氧化碳培养箱专用摇床超高产率微型细胞工厂高密度培养专用摇瓶 3、细胞冻存当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入lml冻存液(90%胎牛血清,10%DMSO。 一般来讲血清含量可以在10%-90%之间调整,冻存液中加入血清一方面可以为细胞提供营养,另一方面可以在细胞冻存过程中提供非渗透性保护物质,如蔗糖,白蛋白等从而更好地保护细胞),放入冻存管内(管内有异丙醇,以保证温度降低的速度),立即放入4℃冰箱中冻存30min,然后放入-20℃冰箱中冻存30min,再置于-80℃冰箱内过夜。第二天放入液氮中,可以保存至少两年,如不放人液氮,可以保存三个月。 细胞冻存和复苏的原则是:慢冻速融,这样更加有利于保持细胞的活力。冻存细胞不加任何保护剂,会导致细胞内冰晶的产生,从而使细胞产生内源性的机械损伤,引起细胞内环境渗透压,PH,电解质等的改变,进而促使细胞死亡。WIGGENS液氮罐系列冻存管冻存支架4、注意事项(1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热;(2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手;(3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且减少污染;(4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小;(5)严格的无菌操作;(6)贴壁细胞消化适度:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化;(7)传代细胞所有的操作尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作,每种细胞使用一套器材。避免交叉感染;(8)传代细胞瓶口每次打开或者关闭都需要在酒精灯上消毒。悬浮细胞培养瓶贴壁细胞微载体培养瓶贴壁细胞滚瓶培养
  • 哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件
    哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各个过程进行简述:原代培养:从动物机体取出组织后切碎,经过各种酶(常用胰蛋白酶),螯合剂(常用EDTA)结合机械方法(吸液管反复吸吹)处理,分散成单细胞,置于合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。一般把从动物有机体内取出细胞开始培养,到繁殖十代以内的细胞培养称为原代细胞培养。经过原代细胞培养,细胞分裂繁殖,培养物逐渐增多长满培养空间,继而相互之间接触,发生接触抑制现象,生长速度逐渐减慢甚至停止。需要重新接种到新的培养瓶内进行传(继)代培养。传(继)代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传(继)代培养。细胞系:初代培养物开始第一次传代培养后的细胞,即称之为细胞系。如果细胞系的生存期有限,则称为有限细胞系。已获得无限繁殖能力,能持续生存的细胞系称为连续细胞系或无限细胞系。细胞株:从一个经过生物学鉴定的细胞系,用单细胞分离培养或通过筛选的方法,由单细胞增值形成的细胞群,称为细胞株。再由原细胞株进一步分离培养出与原珠形状不同的细胞群,成为亚株。哺乳动物细胞培养条件不同哺乳动物细胞在各个阶段的培养,都需要有基础的培养条件,归纳如下:1、无菌无毒的环境:对培养液和所有培养用具无菌处理;培养液中添加抗生素防止培养过程中污染;定期更换培养液以清除代谢产物,防止对培养细胞造成危害。2、营养:液体合成培养基包含糖、氨基酸、促生长因子、水、无机盐、微量元素等;通常还需加入血浆、血清等天然成分3、适宜的温度和pH:人和哺乳动物细胞最适宜温度大多为36±0.5℃。适宜的酸碱度为pH 7.2-7.4。4、气体环境:气体环境一般为“95% 空气+5% CO2”混合气体。氧气是细胞代谢必须气体,CO2维持培养液pH。德国WIGGENS CO2培养箱,为细胞生长提供最佳环境,为您的细胞培养保驾护航。
  • YSI 生化分析仪售后服务培训顺利结束
    2019年5月,Xylem和其中国合作伙伴北京桑翌实验仪器研究所,一起举行了为期三天的YSI生化分析仪售后服务培训。本次培训由来自美国YSI总部技术负责人Mr.Pauls和YSI产品线亚太区技术总监Mr. Rigor一起负责,来自桑翌办事处的20余位工程师参加本次培训。两位专家从YSI生化分析仪的产品原理、维护步骤、到常见故障诊断方法,都一一做了详细介绍,指导工程师进行了大量的真机维护操作,在这个过程中毫不保留地分享了自己的实践经验和操作技巧。两位技术专家卓越的技术水平和严谨的工作态度,让每一位参加培训的工程师都获益匪浅,相信今后能为YSI生化分析仪中国的客户提供更加专业完善的服务。1948年,美国Yellow Springs成立了YellowSprings Instrument Company,这就是YSI Inc.的前身。从成立之日起,YSI就致力于液体温度、血液溶解氧测试,并于1972年率先推出了全球第一套固定化酶极谱法传感器,开始谱写自己在生化分析领域的绚丽篇章。通过多年的努力,YSI因其高灵敏度的探头,固定化酶技术和快速可靠的检测结果而享誉全球,在全球知名的食品和制药企业、研究机构、医院、医疗机构、运动训练研究都可以看到YSI的身影。1965年,Infors AG推出了第一套振荡培养摇床和生物反应器。半个世纪以来INFORS AG秉承了这座城市创新文化的基因和人文精神,孜孜不倦专注于生物培养技术的研究与探索,不断推出富有最新科学理念和技术的新产品。2008年,Infors AG和北京桑翌实验仪器研究所共同投资成立了Infors中国,以Infors生物培养产品为核心,致力向中国客户提供全套的生物培养解决方案。INFORS生物反应器与YSI生化分析仪的联合使用,能更好地监控整个生物培养的过程参数,优化培养过程,为中国客户提供更完善的解决方案。另外:从现在起购买YSI生化分析仪,到货时可免费获得工程师现场对设备进行PM的机会。
  • [加大投资]FUJIFILM Irvine Scientific在欧新建细胞培养基生产基地
    富士胶片(FUJIFILM)旗下成员、全球领先的细胞培养基产品和服务供应商FUJIFILMIrvineScientific今日宣布计划在荷兰蒂尔堡(Tilburg)开始建设公司全球第三个细胞培养基生产工厂,以满足持续增加的市场需求,并实现FUJIFILMIrvineScientific"加快在生物药及细胞基因治疗市场投资和发展"的承诺。FUJIFILMIrvineScientific正在新建设的细胞培养基工厂作为公司目前美国和日本细胞培养基工厂的拓展和补充,将成为富士胶片(FUJIFILM)集团欧洲制造中心的一部分,该工厂主要生产cGMP级别的无动物源的干粉细胞培养基、液体培养基和生物工艺下游处理试剂(如缓冲液)等高质量的细胞培养基产品,从而为FUJIFILMIrvineScientific新增加每年32万kg干粉培养基、47万L液体培养基的生产能力。新工厂的建设工作已经开始,预计将在2021年下半年投入使用。"全球生物制药市场高速增长,细胞疗法等正在快速进入临床试验和商业化阶段。公司目前的干粉培养基产量已经大于100万公斤/年,但我们必须提前布局,加大投资,以应对全球客户持续增长的对细胞培养基的需求,并满足欧洲生物制药和细胞治疗客户对本地化培养基生产和支持的期望",FUJIFILMIrvineScientific首席执行官山口先生在一份新闻声明中说到,"建设第三个世界级一流的cGMP细胞培养基生产工厂对FUJIFILMIrvineScientific意义重大,这将使我们得以更好更全面地服务欧洲客户,为本地生物药和细胞治疗企业提供更加快速、可靠的产品供应。"FUJIFILMIrvineScientific是全球领先的专注于细胞培养产品创新研发和生产的高科技公司,在工业细胞培养(CHO/HEK293细胞无血清培养基)、辅助生殖、细胞治疗(干细胞/T细胞/NK细胞无血清培养基和无血清、无DMSO冻存液)和细胞遗传学等领域,持续为全世界的科研、工业客户及临床医生提供高质量、可靠的产品和灵活、定制化的优异服务。公司始终遵从国际ISO和FDA的严格监管,并在美国加州和日本东京同时拥有国际一流的cGMP干粉培养基生产设施。FUJIFILMIrvineScientific公司长期以来坚持咨询式服务的理念,凭借在全球细胞培养产品开发、服务领域及法规监管、注册合规方面的超过45年的经验和专长,得到了全世界客户的认可,并成为在培养基开发和服务领域全球战略性的领导者。相关阅读IrvineScientific推出最新一代CHO细胞浓缩补料以支持高效生物制药工业生产《工业无血清培养基开发策略和新一代解决方案》无动物源、化学成分明确的T细胞培养基的开发无血清悬浮培养HEK293提高病毒载体产量的研究[数据]无DMSO、化学成分明确的无血清细胞冻存液的开发
  • 保卫细胞宝宝离不开细胞培养的四大护法
    隔壁的直男师兄今年喜得千金,最近总在实验室诡异地傻笑,问他为何,说是时常想起女儿的可爱模样。 这种感情,没养育过孩子的人恐怕理解不了。但生物汪在实验室养育细胞,也一样寄托感情,生怕细胞被养坏了。一个闪失,就前功尽弃。实验结果不可靠,没有一致性和稳定性,还重复不出来,再浓密的头发也经不住这样的考验。所以,有一个稳定、一致的培养环境,那就很重要了。 培养细胞不可能24小时值守,快快请出四大护法相助! 1. 大护法:二甲基亚砜(DMSO) 成功冻存和复苏细胞是细胞培养研究的常规操作。细胞低温储藏时,防止冰晶形成是维持细胞活力的关键。大护法DMSO作为冷冻保护玻璃化剂,可以让细胞免受冰晶导致的机械损伤。大护法法力无边,能够用于原代、继代培养和重组的异倍体和杂交瘤细胞系、胚胎干细胞 (ESC) 以及造血干细胞的冻存。 下面为大家解密DMSO这个既熟悉又陌生的细胞培养大护法~~l DMSO的摩尔浓度是多少?DMSO的摩尔浓度为14.1 M,依据是密度1.1 g/mL和分子量78.13 g/ml。l DMSO的来源?过去,DMSO是从树皮中分离出来的。现在,它是一种商业合成的溶剂。l 细胞冻存培养基中应使用什么浓度的DMSO?DMSO通常以1-10%的浓度使用,具体取决于细胞系。 l DMSO应该是液体,为什么我收到后却是固体?DMSO的熔点为16-19℃,室温过低就凝固。这并不妨碍使用,可以缓慢加热令其重新液化,不会有任何影响。l 哪种类型的过滤器可用于无菌过滤DMSO?DMSO可以用带0.2 μm PTFE膜的过滤器进行无菌过滤。 每个伺候细胞宝宝的“宝爸宝妈”对棕瓶子白盖子的DMSO应该都不陌生。没错!正是Sigma-Aldrich品牌热卖的这款DMSO(货号:D2650):明星产品,质量过硬,口碑积累,适用性广,久经验证。 2. 二护法:血清 血清里的生长因子能促进细胞的繁殖,附着因子可促进细胞的贴壁,此外矿物质、脂类及激素对细胞也大有裨益。常用的血清有胎牛血清和小牛血清,公认澳洲来源的血清品质更优、更安全。 赶快来了解一下保护细胞宝宝的二护法吧~~l 如何解冻血清?血清应在2-8°C过夜解冻以避免降解,或者在室温条件下,定期轻轻摇动使组分重悬。解冻的血清在加入细胞培养基前应该混合均匀。反复冻存会严重影响血清品质,建议将解冻的血清分装成单次使用量,并冻存于-20°C。如果储存于2-8°C的环境中,应该在2-4周内尽快使用。温度超过37°C时血清会降解,功能遭到破坏。l 如果血清收到时存在部分解冻,还能继续使用吗?血清是干冰包装运输,到达时应该是冷冻状态。运输超期,会部分解冻,但依然可以继续使用。l 培养基中加入血清和所有补充物后可以储存多久?如果正确无菌操作,添加血清的培养基可以在2-8°C最长储存6周。不论储存时间长短,一旦培养基变浑浊,应该使用适当的方法丢弃。l 为什么血清会出现浑浊或絮状物质?原因很多,主要有二:1. 反复的冻融会使血清脂蛋白发生变性造成浑浊,所以,一定要分装哦~~2. 血清加工中遗留的纤维蛋白原在解冻时会转化成纤维蛋白,过量的纤维蛋白就呈现为絮状物。不要着急,可以离心移除;不推荐过滤哦,因为容易堵。l 什么是γ辐照的血清?γ辐照的血清通过暴露于放射性60Co产生的25-40 kGy剂量的γ射线来灭活病毒和其他外来微生物(比如支原体)。γ辐照处理不影响血清的理化性质或细胞培养性能。l 为什么有些血清是热灭活的?如何热灭活?哺乳动物血清中天然存在的补体蛋白参与细胞溶解事件、收缩平滑肌、从肥大细胞和血小板中释放组胺和激活淋巴细胞和髓细胞。热灭活破坏了血清中补体的活性,因此免疫学应用,培养胚胎干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时推荐使用。热灭活方法是在56°C水浴中处理30分钟,并每隔大约10分钟旋转一次瓶子。为了保持精确,可使用一个类似大小的瓶子作为对照,对照瓶内放入同等体积的水,并放置一个温度计,在温度到达56°C时开始计时30分钟。热灭活过程必须小心控制,避免血清中支持细胞和组织繁殖的关键蛋白组分发生降解。l 胎牛血清的颜色和之前使用的批次不同,会影响血清使用效果吗?血清的颜色取决于血红蛋白浓度,颜色差异不影响血清性能。 说了这么多,从哪里请到这尊神呢?当然首选默克啦~~澳洲来源的牛血清,满足培养细胞的不同需要!货号产品描述F8318-500ML胎牛血清,澳大利亚来源,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,500mLF8687-500ML胎牛血清,澳大利亚来源,γ辐照,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,500mLB7446-1000ML小牛血清,澳大利亚来源,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,1000mLB7447-1000ML小牛血清,澳大利亚来源,γ辐照,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,1000mL 3. 三护法:胰蛋白酶 在细胞培养中,从组织上解离或从贴壁基质上分离细胞的步骤很关键,一般使用胰蛋白酶。胰蛋白酶作用于赖氨酸或精氨酸的C末端,在37°C时具有最佳的效率,因此使用期前要预热。当然,高浓度的胰蛋白酶长期孵育会去除细胞表面蛋白而损伤细胞,甚至杀死细胞。看来,这个护法的脾气可不好哦~~ 根据应用和细胞类型的不同,胰蛋白酶的组分和浓度也不同。比如,粘附分子在钙离子存在时决定细胞-细胞和细胞-基质的相互作用,为了削弱折衷联系,通常使用含EDTA的胰蛋白酶螯合二价阳离子(Ca, Mg)(点击这里,了解更多:T4049)。 胰蛋白酶的主要来源是猪的胰脏,产品是冻干粉或溶液。为了避免动物或微生物物质,现在也有技术可以在玉米中重组表达牛胰蛋白酶,厉害吧?(点击这里,了解更多:T3449)。 胰蛋白酶的使用浓度也很有讲究。对于强贴壁细胞系,常使用0.25%-2.5%的胰蛋白酶。如果实验需要细胞表面蛋白完整,则应降低使用浓度(0.05%胰蛋白酶)。 4. 四护法:抗生素 细菌宝宝的生存环境这么好,肯定有坏蛋觊觎,这就需要请出四护法——抗生素。 常见的生物污染由细菌、真菌和支原体造成,部分由病毒、化学物和细胞交叉污染造成。抗生素可以控制细胞培养中的生物污染。灵活使用抗生素是控制污染的方法,但千万不要偷懒,还是要注意无菌操作哦~~ 青霉素对大多数革兰氏阳性菌和少数革兰氏阴性菌有效,链霉素对革兰氏阴性菌和少数革兰氏阳性菌有效,联合使用青霉素和链霉素(简称双抗),就能有效控制细胞培养中大多数细菌的污染啦~~ 默克旗下有相当靠谱的抗生素。Sigma-Aldrich品牌热卖的青链霉素溶液(货号为V900929)不仅性能稳定,超高性价比;而且还是即用型经典配方(10KU青霉素和10mg链霉素/mL),直接以1:100比例添加到培养基中就全搞定! 怎么样?这四大护法,是不是各个身手不凡呀!有了他们,细胞宝宝就可以健康无忧啦~~ 友情提醒,11月起我们会推出四大护法优惠组合套装,敬请留意~也欢迎大家在留言区分享自己培养细胞的心得体会~~我们会精选出五个有趣有料的留言,送上默克超可爱的萌娃家族盲盒一个,共有5位幸运儿,快来留言参与吧! 留言截止时间:2020年10月30日12:00
  • 保卫细胞宝宝离不开细胞培养的四大护法
    隔壁的直男师兄今年喜得千金,最近总在实验室诡异地傻笑,问他为何,说是时常想起女儿的可爱模样。 这种感情,没养育过孩子的人恐怕理解不了。但生物汪在实验室养育细胞,也一样寄托感情,生怕细胞被养坏了。一个闪失,就前功尽弃。实验结果不可靠,没有一致性和稳定性,还重复不出来,再浓密的头发也经不住这样的考验。所以,有一个稳定、一致的培养环境,那就很重要了。 培养细胞不可能24小时值守,快快请出四大护法相助! 1. 大护法:二甲基亚砜(DMSO) 成功冻存和复苏细胞是细胞培养研究的常规操作。细胞低温储藏时,防止冰晶形成是维持细胞活力的关键。大护法DMSO作为冷冻保护玻璃化剂,可以让细胞免受冰晶导致的机械损伤。大护法法力无边,能够用于原代、继代培养和重组的异倍体和杂交瘤细胞系、胚胎干细胞 (ESC) 以及造血干细胞的冻存。 下面为大家解密DMSO这个既熟悉又陌生的细胞培养大护法~~l DMSO的摩尔浓度是多少?DMSO的摩尔浓度为14.1 M,依据是密度1.1 g/mL和分子量78.13 g/ml。l DMSO的来源?过去,DMSO是从树皮中分离出来的。现在,它是一种商业合成的溶剂。l 细胞冻存培养基中应使用什么浓度的DMSO?DMSO通常以1-10%的浓度使用,具体取决于细胞系。 l DMSO应该是液体,为什么我收到后却是固体?DMSO的熔点为16-19℃,室温过低就凝固。这并不妨碍使用,可以缓慢加热令其重新液化,不会有任何影响。l 哪种类型的过滤器可用于无菌过滤DMSO?DMSO可以用带0.2 μm PTFE膜的过滤器进行无菌过滤。 每个伺候细胞宝宝的“宝爸宝妈”对棕瓶子白盖子的DMSO应该都不陌生。没错!正是Sigma-Aldrich品牌热卖的这款DMSO(货号:D2650):明星产品,质量过硬,口碑积累,适用性广,久经验证。 2. 二护法:血清 血清里的生长因子能促进细胞的繁殖,附着因子可促进细胞的贴壁,此外矿物质、脂类及激素对细胞也大有裨益。常用的血清有胎牛血清和小牛血清,公认澳洲来源的血清品质更优、更安全。 赶快来了解一下保护细胞宝宝的二护法吧~~l 如何解冻血清?血清应在2-8°C过夜解冻以避免降解,或者在室温条件下,定期轻轻摇动使组分重悬。解冻的血清在加入细胞培养基前应该混合均匀。反复冻存会严重影响血清品质,建议将解冻的血清分装成单次使用量,并冻存于-20°C。如果储存于2-8°C的环境中,应该在2-4周内尽快使用。温度超过37°C时血清会降解,功能遭到破坏。l 如果血清收到时存在部分解冻,还能继续使用吗?血清是干冰包装运输,到达时应该是冷冻状态。运输超期,会部分解冻,但依然可以继续使用。l 培养基中加入血清和所有补充物后可以储存多久?如果正确无菌操作,添加血清的培养基可以在2-8°C最长储存6周。不论储存时间长短,一旦培养基变浑浊,应该使用适当的方法丢弃。l 为什么血清会出现浑浊或絮状物质?原因很多,主要有二:1. 反复的冻融会使血清脂蛋白发生变性造成浑浊,所以,一定要分装哦~~2. 血清加工中遗留的纤维蛋白原在解冻时会转化成纤维蛋白,过量的纤维蛋白就呈现为絮状物。不要着急,可以离心移除;不推荐过滤哦,因为容易堵。l 什么是γ辐照的血清?γ辐照的血清通过暴露于放射性60Co产生的25-40 kGy剂量的γ射线来灭活病毒和其他外来微生物(比如支原体)。γ辐照处理不影响血清的理化性质或细胞培养性能。l 为什么有些血清是热灭活的?如何热灭活?哺乳动物血清中天然存在的补体蛋白参与细胞溶解事件、收缩平滑肌、从肥大细胞和血小板中释放组胺和激活淋巴细胞和髓细胞。热灭活破坏了血清中补体的活性,因此免疫学应用,培养胚胎干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时推荐使用。热灭活方法是在56°C水浴中处理30分钟,并每隔大约10分钟旋转一次瓶子。为了保持精确,可使用一个类似大小的瓶子作为对照,对照瓶内放入同等体积的水,并放置一个温度计,在温度到达56°C时开始计时30分钟。热灭活过程必须小心控制,避免血清中支持细胞和组织繁殖的关键蛋白组分发生降解。l 胎牛血清的颜色和之前使用的批次不同,会影响血清使用效果吗?血清的颜色取决于血红蛋白浓度,颜色差异不影响血清性能。 说了这么多,从哪里请到这尊神呢?当然可以选择默克啦~~澳洲来源的牛血清,满足培养细胞的不同需要!货号产品描述F8318-500ML胎牛血清,澳大利亚来源,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,500mLF8687-500ML胎牛血清,澳大利亚来源,γ辐照,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,500mLB7446-1000ML小牛血清,澳大利亚来源,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,1000mLB7447-1000ML小牛血清,澳大利亚来源,γ辐照,无菌,适合细胞培养,适合杂交瘤细胞,1000mL 3. 三护法:胰蛋白酶 在细胞培养中,从组织上解离或从贴壁基质上分离细胞的步骤很关键,一般使用胰蛋白酶。胰蛋白酶作用于赖氨酸或精氨酸的C末端,在37°C时具有最佳的效率,因此使用期前要预热。当然,高浓度的胰蛋白酶长期孵育会去除细胞表面蛋白而损伤细胞,甚至杀死细胞。看来,这个护法的脾气可不好哦~~ 根据应用和细胞类型的不同,胰蛋白酶的组分和浓度也不同。比如,粘附分子在钙离子存在时决定细胞-细胞和细胞-基质的相互作用,为了削弱折衷联系,通常使用含EDTA的胰蛋白酶螯合二价阳离子(Ca, Mg)(点击这里,了解更多:T4049)。 胰蛋白酶的主要来源是猪的胰脏,产品是冻干粉或溶液。为了避免动物或微生物物质,现在也有技术可以在玉米中重组表达牛胰蛋白酶,厉害吧?(点击这里,了解更多:T3449)。 胰蛋白酶的使用浓度也很有讲究。对于强贴壁细胞系,常使用0.25%-2.5%的胰蛋白酶。如果实验需要细胞表面蛋白完整,则应降低使用浓度(0.05%胰蛋白酶)。 4. 四护法:抗生素 细菌宝宝的生存环境这么好,肯定有坏蛋觊觎,这就需要请出四护法——抗生素。 常见的生物污染由细菌、真菌和支原体造成,部分由病毒、化学物和细胞交叉污染造成。抗生素可以控制细胞培养中的生物污染。灵活使用抗生素是控制污染的方法,但千万不要偷懒,还是要注意无菌操作哦~~ 青霉素对大多数革兰氏阳性菌和少数革兰氏阴性菌有效,链霉素对革兰氏阴性菌和少数革兰氏阳性菌有效,联合使用青霉素和链霉素(简称双抗),就能有效控制细胞培养中大多数细菌的污染啦~~ 默克旗下有相当靠谱的抗生素。Sigma-Aldrich品牌热卖的青链霉素溶液(货号为V900929)不仅性能稳定,超高性价比;而且还是即用型经典配方(10KU青霉素和10mg链霉素/mL),直接以1:100比例添加到培养基中就全搞定! 怎么样?这四大护法,是不是各个身手不凡呀!有了他们,细胞宝宝就可以健康无忧啦~~ 友情提醒,11月起我们会推出四大护法优惠组合套装,敬请留意~也欢迎大家在留言区分享自己培养细胞的心得体会~~我们会精选出五个有趣有料的留言,送上默克超可爱的萌娃家族盲盒一个,共有5位幸运儿,快来留言参与吧! 留言截止时间:2020年10月30日12:00
  • 细胞培养好,实验 so easy
    一提到细胞培养,这是多少实验者的噩梦,简直… … 说多了都是泪。小编经过软磨硬泡终于从师兄师姐那里讨到了细胞培养秘籍,今天就大方一回,分享给大家。★ 血清与培养基的选择一般实验血清的添加比例为10%,也可根据细胞状态和生长速率适当增加或减少添加比例。对于培养基,建议选择商品化的,比较成熟,稳定性也较好。★ 培养瓶的选择目前商品化的细胞培养瓶主要为瓶盖是否带气孔两种。其中不带透气孔细胞培养瓶拧紧后需适当回旋瓶盖,保证CO2能顺利进入细胞培养瓶。细胞培养过程中,对于适应能力强的肿瘤细胞,可在传代3-4次后更换新的细胞培养瓶。对于非肿瘤细胞系如293T等细胞,建议每次传代更换新的细胞培养瓶来保证细胞状态。★ 细胞传代传代时通常使用胰酶消化法。该方法又分为干消化法和湿消化法。▶ 湿消化法:待细胞变圆,成流沙状脱落时即可加入新鲜培养基终止消化,1000rpm离心5min,弃去上清,用新鲜培养基重悬传代。▶ 干消化法:胰酶浸润后弃去胰酶,待细胞变圆后加入新鲜培养基吹下后再进行细胞传代。不同细胞的细胞间连接强度不一样,消化时间不同;不同细胞的贴壁能力不同,消化时间不同;消化时应观察细胞形态,避免因过度消化影响细胞活性。★ 细胞冻存与复苏当细胞生长状况较好或者代数较早时,需及时大量的冻存。细胞冻存密度通常为1-3×106个/ml。通常4℃放置0.5h,-20℃放置2h,-80℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。细胞复苏38℃水浴不时摇动,在1分钟内使其完全融化,1000rpm离心5min,弃去上清,用新鲜培养基重悬移入培养瓶中。★ 污染防控细胞培养最基本的是做好污染防控,包括微生物污染的防控和细胞系间交叉污染的防控。实验中需保持良好的操作习惯,所用材料的位置摆放要顺手,污染源和已灭菌物品要分开放置。实验室也需定期清洁与消毒。ECHO强大的活细胞成像工作站INCUBATOR+REVOLUTION智能电动化显微镜
  • 无血清细胞培养技术培训通知(附日程)
    p  生物医药产业是高新科技产业,随着生物医药产业的快速发展,我国生物制药产业也进入了快速上升期,而单克隆抗体药物在整个产业中无疑是最为重要的组成部分。目前生物制药产业发展面临人才短缺的挑战,而我国高等专业教育尚不能满足生物制药产业发展的需求,大部分生物医药相关专业毕业生缺乏该产业急需知识和技能而面临就业难。在职职工专业教育是生物医药产业正常运营的基础保障,更是各国药政机构监管的重点。随着新技术新方法和药政监管新政策持续涌现,生物医药技术专业教育和继续教育尤其重要。中国蛋白药物质量联盟将针对我国生物医药产业发展现状和国际产业技术的发展进步,特别是各国药政监管要求,推出生物制药产业技术系列职业培训。本期设为无血清细胞培养技术培训。/pp  无血清细胞培养技术培训/pp  自上世纪八十年代初期Jennie Mather博士主编出版第一部无血清细胞培养技术专著及在美国长岛冷泉港实验室举办第一届无血清细胞培养技术实验培训课程以来,无血清细胞培养技术迅速被生物医学研究机构及生物技术企业所使用,在基础研究及工业生产中起着极其重要的作用。/pp  此培训旨在帮助大家了解无血清细胞培养的基本技术、思考如何选择和利用无血清细胞培养来满足基础研究及工业生产的需求,使无血清细胞培养技术在各领域得到更多更好的利用。/pp  strong一、主办单位/strong/pp  中国蛋白药物质量联盟/pp  strong二、培训时间/strong/pp  时间:2017年06月07日 PM 1:00-5:00/pp  地点:上海远洋宾馆,虹口区东大名路1171号(近霍山路)多功能厅/pp  strong三、培训目标人群/strong/pp  本次培训旨为生物医药产业的技术研发负责人、细胞培养业务骨干温故知新 为职场新人、在校大学生以及对细胞培养感兴趣的相关人员夯实基础。/pp  strong四、培训内容/strong/pp  此培训班将首先由Mather博士介绍无血清细胞培养技术的发展历史,包括其在Sato博士实验室建立原代细胞无血清培养技术以及在基因泰克(Genentech)公司建立蛋白药生产CHO细胞无血清培养方法等历史回顾,其后由李荣皓博士介绍原代细胞、蛋白药表达细胞、疫苗生产细胞及细胞治疗所使用的细胞等多种不同类型细胞细胞的无血清细胞培养方法,和大家一起分析和讨论技术细节。最后中国蛋白药物质量联盟将颁发培训证书/pp  strong五、主讲嘉宾简介/strong/pp  Jennie Mather博士(美国),珠海恺瑞生物科技有限公司共创人,是哺乳动物无血清细胞培养技术的创始人之一,1970至1978年在美国圣地亚哥加州大学(UCSD)Gordon Sato博士的实验室从事博士及博士后研究工作期间与实验室同事共同创建了无血清细胞培养技术。Mather博士在国际上首次使用F12/DMEM无血清细胞培养液从事无血清细胞培养,其后为Genentech公司创建了CHO细胞高密度无血清细胞培养方法,用来生产抗体及蛋白药物,先后为Herceptin等8个临床使用的蛋白药的工业化生产做出了重大贡献。Mather博士多年来一直活跃在无血清细胞培养技术领域,发表了多篇具有开创意义的无血清细胞培养技术的文章并组织撰写了世界上第一本无血清细胞培养技术专著,为无血清细胞培养技术的推广和和应用做出了杰出的贡献。Mather博士曾应邀于1981年在世界著名的美国长岛冷泉港实验室举办上国际上首次全面的无血清细胞培养技术讲习班,将无血清细胞培养技术迅速推广到国际生物医学研究及生物工程技术领域。Jennie与中国学术界的关系源远流长,在上世纪80年代初期通过其实验室访问学者中科院动物所庄临之教授将无血清细胞培养技术介绍到国内,并亲自于上世纪90年代至2000年代先后在北京举办了三届无血清细胞培养技术讲习班。/pp  李荣皓博士,上世纪80年代师从于中国无血清细胞培养技术鼻祖庄临之研究员,其间利用无血清细胞培养技术建立了国际首例人胎盘滋养层细胞株以及国际首个无血清细胞培养麝香蛋白表达细胞株。1992年李博士加入美国Genentech公司Jennie Mather博士研究组,先后从事过细胞培养工艺开发以及蛋白新药研发工作。1996年李博士加入 Signal Pharmaceutical, Inc. (现Celgene公司),成为该公司资深新药研发科学家,利用其无血清细胞培养技术为公司建立了数个高难度原代细胞药物筛选实验模型。数年之后李博士应Mather博士邀请,加盟Mather博士创建的Raven Biotechnologies公司,全面负责公司新药研发包括从早期的实验研究到临床试验抗体药生产的各个重要技术环节,并发明了国际首个细胞蛋白标记物高通量筛选(cell array)技术专利,为公司研发项目的顺利进行做出了杰出的贡献。/pp  2006年李博士与另外两位旅美中国科学家在北京共同创办了Autekbio公司,成为中国第一家从事抗体药生产的服务公司。李博士作为公司的技术主管,负责为公司客户开发抗体生产细胞株,并为客户设计国产化的高密度无血清细胞培养基,使得抗体生产成本大为降低。2010年李博士应邀加入恒瑞,在短暂担任公司首任抗体部技术负责人职务之后离职回美,随后与Jennie Mather博士及武军先生共同创建了珠海恺瑞生物科技有限公司。/pp  strong六、会议议程/strong/ptable border="0" cellspacing="0" cellpadding="0" width="606"tbodytr style=" height:35px" class="firstRow"td width="95" style="border-width: 1px border-style: solid border-color: windowtext padding: 0px 7px " height="35"p style="text-align:center"strongspan style="font-size:19px font-family:宋体"时间/span/strong/p/tdtd width="224" style="border-top: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: none padding: 0px 7px " height="35"p style="text-align:center"strongspan style="font-size:19px font-family:宋体"报告题目/span/strong/p/tdtd width="88" style="border-top: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: none padding: 0px 7px " height="35"p style="text-align:center"strongspan style="font-size:19px font-family:宋体"报告人/span/strong/p/tdtd width="198" style="border-top: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: none padding: 0px 7px " height="35"p style="text-align:center"strongspan style="font-size:19px font-family:宋体"单位/span/strong/p/td/trtr style=" height:28px"td width="95" style="border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: 1px solid windowtext border-top: none padding: 0px 7px " height="28"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family: Symbol"13:20-13:30/span/strong/p/tdtd width="224" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="28"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"欢迎致辞/span/p/tdtd width="88" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="28"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family:宋体"史晋海博士/span/strong/p/tdtd width="198" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="28"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"中国蛋白药物质量联盟秘书长/span/p/td/trtr style=" height:37px"td width="95" style="border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: 1px solid windowtext border-top: none padding: 0px 7px " height="37"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family: Symbol"13:30-14:15/span/strong/p/tdtd width="224" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px 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style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"原代细胞的无血清细胞培养方法/span/p/tdtd width="88" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family:宋体"李荣皓博士/span/strong/p/tdtd width="198" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"国际著名细胞培养专家,/span/pp style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"珠海恺瑞生物科技有限公司/span/p/td/trtr style=" height:24px"td width="95" style="border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: 1px solid windowtext border-top: none padding: 0px 7px " height="24"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family: Symbol"15:00-15:30/span/strong/p/tdtd width="511" colspan="3" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="24"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family:楷体"茶歇/交流/span/strong/p/td/trtr style=" height:44px"td width="95" style="border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: 1px solid windowtext border-top: none padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family: Symbol"15:30-16:15/span/strong/p/tdtd width="224" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"蛋白药表达细胞和疫苗生产细胞的无血清细胞培养方法 /span/p/tdtd width="88" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family:宋体"李荣皓博士/span/strong/p/tdtd width="198" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"国际著名细胞培养专家,/span/pp style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"珠海恺瑞生物科技有限公司/span/p/td/trtr style=" height:44px"td width="95" style="border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: 1px solid windowtext border-top: none padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family: Symbol"16:15-17:00/span/strong/p/tdtd width="224" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"细胞治疗所使用的细胞的无血清细胞培养方法/span/p/tdtd width="88" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family:宋体"李荣皓博士/span/strong/p/tdtd width="198" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"国际著名细胞培养专家,/span/pp style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"珠海恺瑞生物科技有限公司/span/p/td/trtr style=" height:44px"td width="95" style="border-right: 1px solid windowtext border-bottom: 1px solid windowtext border-left: 1px solid windowtext border-top: none padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family: Symbol"17:00-17:30/span/strong/p/tdtd width="224" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-indent: 77px"span style=" font-family:宋体"问答讨论/span/p/tdtd width="88" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"strongspan style=" font-family:宋体"李荣皓博士/span/strong/p/tdtd width="198" style="border-top: none border-left: none border-bottom: 1px solid windowtext border-right: 1px solid windowtext padding: 0px 7px " height="44"p style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"国际著名细胞培养专家,/span/pp style="text-align:center"span style=" font-family:宋体"珠海恺瑞生物科技有限公司/span/p/td/tr/tbody/tablep  strong七、注册事宜/strong/pp  培训说明:本次培训免费,证书费(自愿)500元/人,差旅食宿自理。/pp  获取更多资讯,敬请联系中国蛋白药物质量联盟秘书处:/pp  联系人:蔡老师/pp  电 话:+86-22-65378072/pp  手 机:+86-18702257197/pp  邮 箱:cailijuan1986@126.com/pp style="text-align: right "  中国蛋白药物质量联盟/pp style="text-align: right "  2017年05月13日/pp style="text-align: center "  strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "生物制药产业技术系列职业培训——无血清细胞培养技术培训/span/strong/pp style="text-align: center "strongspan style="color: rgb(0, 112, 192) "  参会报名表/span/strong/pp/ptable border="1" cellspacing="0" cellpadding="0"tbodytr style=" height:38px" class="firstRow"td style="border-width: 1px border-style: solid border-color: rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="38"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"单位名称/span/strong/p/tdtd colspan="2" style="border-top: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="38"br//tdtd style="border-top: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="38"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"联 系 人/span/strong/p/tdtd style="border-top: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="38"br//td/trtr style=" height:36px"td style="border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-left: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-top: none rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"单位地址/span/strong/p/tdtd colspan="2" style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"br//tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"联系电话/span/strong/p/tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"br//td/trtr style=" height:76px"td style="border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-left: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-top: none rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="76"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style=" font-family:宋体"行业类别/span/strong/p/tdtd colspan="2" style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="76"p style="line-height: 29px"span style=" font-family:宋体"联盟单位□ 非联盟单位□ /span/pp style="line-height: 29px"span style=" font-family:宋体"学生□ 赞助单位□/span/p/tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="76"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"电子邮件/span/strong/p/tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="76"br//td/trtr style=" height:36px"td style="border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-left: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-top: none rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"学员姓名/span/strong/p/tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"部 门/span/strong/p/tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"职 务/span/strong/p/tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"手 机/span/strong/p/tdtd style="border-top: none rgb(0, 0, 0) border-left: none rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"p style="text-align:center line-height:29px"strongspan style="font-size:16px font-family: 宋体"电子邮件/span/strong/p/td/trtr style=" height:36px"td style="border-right: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-bottom: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-left: 1px solid rgb(0, 0, 0) border-top: none rgb(0, 0, 0) padding: 0px 7px " height="36"br//tdtd style="border-top: none 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  • 技术分享 | 洞悉真正的3D细胞培养-Molecular Devices
    洞悉真正的3D细胞培养开发更复杂、生物学相关和预测基于细胞的化合物筛选方法是药物发现的主要挑战。三维(3D)分析模型的集成正越来越广泛地应用于驱动转化生物学。具体来说,3D培养提供了紧密概括人体组织各方面的优势,包括结构、细胞组织、细胞-细胞和细胞-基质相互作用,以及更多生理相关的扩散特性。 三维(3D)细胞培养作为一种更好地模拟体内生理的系统,已经有了显著的发展。今天3D细胞培养正在兴起,不仅作为早期药物发现的新工具,而且作为治疗疾病的潜在疗法。共聚焦成像和三维分析可以定量表征复杂的表型效应。我们展示了如何成功地将三维模型用于毒性评估、疾病建模和化合物筛选。ImageXpress Micro共聚焦高内涵成像分析系统和 MetaXpress软件中的3D分析工具满足了这些挑战,能够在单一界面内对3D细胞模型进行高内涵检测,减少开发时间。这本电子书突出了三维细胞培养成像和分析的优势,包括一些三维细胞模型的应用程序,以及优化您的三维分析工作流程的技巧和方法。下载全文请联系美谷分子仪器
  • 阿拉丁细胞培养总动员,一起快乐实验吧
    阿拉丁细胞培养总动员,一起快乐实验吧 Aladdin&i-Quip的优势细胞培养细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术。细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中最核心、最基础的 技术。 细胞培养泛指所有体外培养,其含义是指从动物活体体内取出组织,于模拟体内生理环境特定的体内条件下,进行孵育培养,使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域,成为最重要的基础科学之一。 阿拉丁为您提供全面的细胞培养技术,现货充足的各种培养所需试剂。芯硅谷作为阿拉丁的耗材品牌,为细胞培养实验准备了各系耗材,包括:细胞培养板,深孔板,各容积培养皿、培养管等。阿拉丁-芯硅谷是您细胞培养实验的首选。 产品列表&mdash &mdash 细胞培养专用试剂货号品名规格CAS号包装A103539抗坏血酸 用于细胞培养50-81-7500gA103540抗坏血酸 用于植物细胞培养50-81-7100g,500gP110425L-苯丙氨酸 非动物源,EP, JP, USP ;用于细胞培养,98.5 to 10163-91-225g,100g,500gT108222L-苏氨酸JP, USP ;用于细胞培养,99.0-101.0%72-19-525g,100gI115775L-异亮氨酸EP, JP, USP73-32-525g,100g,500gE103809乙醇胺 99%,细胞培养专用141-43-5100ml,500mlT100896噻唑蓝(MTT) 98%298-93-11g,5g,25g,250mgC114435矮壮素 植物细胞培养级,&ge 99%(HPLC)999-81-55g,25gG115554D-半乳糖胺盐酸盐 for cell culture,99%1772-03-81g,5g,250mgC111538氯化钠 用于细胞和昆虫细胞培养,&ge 99.5% (T)7647-14-52.5kg,1kg,500gP100088亚碲酸钾 99.5%7790-58-125g,100gC139524干酪素 suitable for insect cell culture9000-71-9500gC110500干酪素 technical grade9000-71-92.5kg,500g,500mlH104201肝素钠 185 USP units/mg9041-08-11g,5gH123383肝素钠 &ge 180 USP units/mg9041-08-1100KU,250KU,500KU,1000KUB111605硼酸 用于细胞培养和植物细胞培养, &ge 99.5%10043-35-3500gM112543氯化锰,四水 昆虫细胞培养级,&ge 99%13446-34-9100gS104205水合胆酸钠 98%206986-87-05g,25g,100gS104206水合胆酸钠 for cell culture,&ge 99.0%206986-87-025g,100g产品列表&mdash &mdash 细胞培养专用耗材货号包装品名详细参数B1559-03100EA三角形细胞涂布棒三角推边宽度:30mm 全长:208mm 颜色:蓝色 材料:PP 是否消毒:是 包装类型:热封袋B1559-05100EA三角形细胞涂布棒三角推边宽度:60mm 全长:235mm 颜色:蓝色 材料:PP 是否消毒:是 包装类型:热封袋C1623-0250EA6孔细胞培养板孔数:6 孔径:35mm 生长面积:9.61cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-0450EA24孔细胞培养板孔数:24 孔径:16mm 生长面积:1.91cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-0650EA96孔细胞培养板孔数:96 孔径:7mm 生长面积:0.35cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-1250EA6孔细胞培养板,TC处理孔数:6 孔径:35mm 生长面积:9.61cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1650EA12孔细胞培养板,TC处理孔数:12 孔径:22mm 生长面积:3.87cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1750EA12孔细胞培养板孔数:12 孔径:22mm 生长面积:3.87cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:否 是否灭菌:是C1623-1850EA24孔细胞培养板,TC处理孔数:24 孔径:16mm 生长面积:1.91cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C1623-1950EA96孔细胞培养板,TC处理孔数:96 孔径:7mm 生长面积:0.35cm 类型:平底,加盖 是否TC处理:是 是否灭菌:是C4219-0120EA细胞刮刀手柄长度:250mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C4219-0220EA细胞刮刀手柄长度:250mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C4219-0320EA细胞刮刀手柄长度:400mm 刀片长度:18mm 是否灭菌:是C4219-0420EA细胞刮刀手柄长度:400mm 刀片长度:30mm 是否灭菌:是C6057-0150EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:蓝色 尺寸:40&mu m 是否灭菌:是C6057-0250EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:白色 尺寸:70&mu m 是否灭菌:是C6057-0350EA细胞筛材质:尼龙网 颜色:黄色 尺寸:100&mu m 是否灭菌:是D3815-0110EA384孔深孔板,方形孔类型:普通型 材质:聚丙烯 容积:120&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否D3815-0310EA384孔深孔板,方形孔类型:低吸附型 材质:聚丙烯 容积:120&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否D3815-0510EA384孔深孔板,方形孔类型:普通型 材质:聚丙烯 容积:190&mu l 颜色:透明 底部形状:V型 是否灭菌:否L1557-01100EAL型涂布棒长度:156× 38mm 颜色:蓝色 材质:ABS 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋M4939-011EA覆四氟涂层微量取样匙类型:海曼型 长度:150mmP4184-0160EA60mm细胞培养皿尺寸:60× 15mm 生长面积:26.17cm2 TC处理:否 灭菌:伽马 描述:普通型适合悬浮培养P4184-0260EA60mm细胞培养皿,TC处理尺寸:60× 15mm 生长面积:26.17cm2 TC处理:是 灭菌:伽马 描述:标准型适合贴壁培养P4184-0360EA100mm细胞培养皿尺寸:100× 20mm 生长面积:55.65cm2 TC处理:否 灭菌:伽马 描述:普通型适合悬浮培养P4184-0460EA100mm细胞培养皿,TC处理尺寸:100× 20mm 生长面积:55.65cm2 TC处理:是 灭菌:伽马 描述:标准型适合贴壁培养P4940-011EA外覆PTFE涂层取样匙,双平头类别:双平头,圆形平头和锥形平头 长度:200mm 刀片尺寸(最宽的部位):约44× 6mmP4941-011EA外覆PTFE涂层取样匙,平头和勺头类别:平头和勺头 长度:225mm 直径:4.7mmR1596-04500EAPP培养管,无边外径× 高:12× 75mm 容量:5ml 材质:PP 类型:无刻度 是否消毒:否 包装类型:热封袋R1596-05500EAPS培养管,无边外径× 高:13× 75mm 容量:5ml 材质:PS 类型:无刻度 是否消毒:否 包装类型:热封袋R1596-11250EAPS培养管,无边外径× 高:16× 100mm 容量:8ml 材质:PS 类型:无刻度 是否消毒:否 包装:热封袋T1558-01500EAT型细胞涂布棒,已灭菌长度:140mm 颜色:蓝色 材料:ABS 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋D1554-011000EA普通型接种环类型:1&mu L环形 材料:软性PP 全长:200mm 环直径:30mm 颜色:蓝色 是否消毒:是 包装类型:纸塑袋更多产品请访问阿拉丁官网www.aladdin-e.com
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