高通量多孔板电穿孔系统

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1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用，并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单，在直流电场作用的瞬间，细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115μm ，这种通道能维持几毫秒到几秒，然后自行恢复。在此期间生物大分子如DNA 可通过这种微小的通道进入细胞。近年来活体电穿孔法用于转基因研究的报道不断增多，在基因治疗方面的优势也日趋显著，是一种很好的活体基因导入方法。活体电穿孔法可用于检测瞬时表达系统中载体的表达状况。大量的研究表明活体电穿孔法在基因治疗方面有非常好的应用前景。因此目前国内外对活体电穿孔法介导外源基因转移的研究越来越多。2、活体电穿孔的法的特点 活体电穿孔法基因导入和表达效率较高，它的特点主要在以下几个方面:首先，靶器官的选择面广，理论上任何组织和器官都可以作为活体电穿孔的靶器官。 在用于基因治疗方面，要考虑到靶器官组织生理特性。如果所选择的局部组织细胞不能把所转移基因的表达产物分泌到外周血液循环中，则在某种意义上说已失去了基因导入的价值，这在基因治疗中是关键性的问题。当使用组织特异性表达载体时，研究人员应根据所构建的表达载体来选择基因转移和表达的靶器官组织。例如鱼精蛋白21 启动子可指导外源基因在精母细胞中特异性表达，以小鼠的睾丸作为靶器官将含有鱼精蛋白21启动子的表达载体导入，获得外源基因的表达量远远高于该基因在肝脏和骨骼肌中的表达。其次，对导入的外源基因片段的大小没有限制，从几KB 或十几KB 的表达载体， 到100～200KB 的YAC、BAC基因组 ，都有成功导入并获得表达的报道。此外活体电穿孔法操作简单快速，电穿孔的时间只有几秒钟，而且DNA片段不需要特殊的纯化操作。但电穿孔法也存在一些的缺点:首先，外源基因表达持续的时间很短，虽然外源基因导入后最快可在215 小时有表达，但大多1～2 月后表达量降至很低。外源基因表达的时间主要由于所构建的表达载体和基因导入的靶细胞组织器官不同而存在巨大差异。由于应用不同的表达载体，Muramatsu 在小鼠肝脏进行电穿孔7天后则检测不到外源基因的表达，而Heller 21 天后还可以检测到外源基因的表达。如果选择代谢和酶活动旺盛的组织器官如肝脏，则表达持续时间会较短，表达时间在1 个月以内，但以骨骼肌为靶组织，表达可持续15个月。3、 活体电穿孔法与其他活体基因导入方法的比较 到目前为止，非病毒载体的活体基因导入方法有直接注射法、脂质体法、基因枪法、电穿孔法等。每一种方法都有其各自的特殊性，因此很难将这几种方法进行简单的比较。直接注射法：可将外源基因直接注射到靶位点或血管中，但此种方法不适合以肌肉作为靶器官，它的外源基因表达效率极低，仅为电穿孔法的百分之一。脂质体法：活体基因转移法中脂质体法更适宜较大面积组织的基因导入，但无法避免DNA浓度变低，在出血的情况下会使本来不高的DNA浓度更加降低，往往造成基因导入效率低。基因枪法：适合于DNA较易接触到的质地较坚韧的组织如皮肤，而视网膜、胚胎和禽类的胚盘等组织会由于机械刺激和出血造成器质性损伤或发育停滞，因而不能用基因枪法完成。DNA包裹的金属颗粒从基因枪发出到达组织表面大多只几百微米的距离，较深层的组织不易操作， 表达效率也较低。Muramatsu报道在材料一致的情况下，电穿孔法的基因导入和表达效率明显高于其它方法，而且电穿孔法适合多种组织的操作 。4 、活体电穿孔法施加条件的研究 波型的选择在电穿孔过程中方波较指数衰减波更能获得较高的基因表达。同时方波只要要求控制电压和时间，十分直观，而指数衰减波需要控制的电压、电容、电阻等参数，这样的条件摸索过程中，方波较指数衰减波更易得到高表达。

http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif高效基因导入-电穿孔在生命科学研究中的应用 讲座时间：2014年7月8日 14：00 主讲人：张 旭 生物科学硕士，毕业于美国普度大学，拥有丰富分子生物仪器技术经验，现任美国哈佛仪器大中华区上海代表处渠道经理。http://img3.17img.cn/bbs/upfile/images/20100518/201005181701392921.gif【简介】 电穿孔技术是利用电场作用使细胞膜的脂双层膜结构进行重新排列，形成许多微小的孔径，从而是外源分子可以通过细胞膜进入细胞的一种重要分子生物学技术。如今被广泛应用于生物医药领域，实现基因和药物导入特定的细胞、siRNA基因沉默和基因疗法、细胞融合和单克隆抗体制备以及核转移和动物克隆。与其他化学和生物导入方式相比，电穿孔有着得天独厚的优势，对导入的外源分子大小没有限制、无细胞毒性、具有很高的实验可重复性并且操作简单快捷。配合专业设计的多样性电极，电穿孔技术的应用对象也拓展至体外悬浮细胞、活体动物、离体组织、子宫内胚胎、卵内胚胎和贴壁细胞，并且可以进行大规模96孔高通量应用，从而使得电穿孔技术的应用领域得到了无限扩展，新的应用技术不断涌现......本期摘要：电穿孔/电融合技术介绍电穿孔技术原理影响电穿孔效率的关键因素电融合技术特点介绍-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名参加。2、报名并参会用户有机会获得100元京东卡一张哦~3、报名截止时间：2014年7月8 日 13:30 4、报名参会：http://simg.instrument.com.cn/meeting/images/20100414/baoming.jpg

正在研究包括电穿孔/电融合有关技术方面的课题，这方面资料太少，回看高效基因导入-电穿孔在生命科学研究中的应用还这么不方便，本网站视乎互动方面不是很亲民的，也可能是个人活动太少无经验吧

欲购买电穿孔仪做酵母菌,上海有谁卖?国产不要,可联系ljhcyy@163.com

纳米隧道电穿孔仪重磅出击红方块科博会在中国科学仪器博览会（简称：红方块科博会）召开之际，美国俄亥俄州立大学科学家开发出一种名为“纳米隧道电穿孔”的新技术，或称为NEP，将同期在红方块科博会上展出。 在红方块科博会中获悉长期以来，在进行基因治疗时，人们对插入细胞的药剂数量无法控制，因为人体绝大部分细胞都太小，最小的针头也无能为力。而NEP让我们能研究药剂和其他生物分子是怎样影响了细胞的生物和基因路径的，现有其他技术都无法达到这么细微的水平。展会中该校化学与生物分子工程教授詹姆斯·李说。科学家们用这种方法，将定量的抗癌基因成功插入到白血病细胞中并杀死了它们。 在红方块科博会中了解到，研究人员用聚合物压制成一种电子设备样机，用DNA(脱氧核糖核酸)单链作为模板来构建纳米隧道。詹姆斯·李发明了一种使DNA链解旋的技术，并使其按照需要形成精确结构。他们给DNA链涂上一层金涂层并加以拉伸，使之连接两个容器，然后将DNA蚀去，在设备内部留下一条连通两个容器的尺寸精确的纳米隧道。 隧道中的电极将整个设备变成一个微电路，几百伏特的电脉冲从一个装药剂的容器经纳米隧道到达另一个装细胞的容器，在隧道出口处形成了强大的电场，与细胞自身的电荷相互作用，迫使细胞膜打开一个小孔，足够投放药物而不会杀死细胞。调整脉冲时间和隧道宽度，就能控制药物剂量。利用纳米隧道电穿孔仪给细胞注射基因治疗药剂时，不用针头，而是用电脉冲通过微小的纳米隧道，几毫秒内就能把精确剂量的治疗用生物分子“注射”到单个活细胞内。 在红方块科博会期间科学家们指出，希望NEP能最终用于早期癌症检测与治疗，比如在干细胞或免疫细胞中插入精确剂量的基因或蛋白质，引导它们分化改变，不必担心过量注射带来的安全问题，然后把这些细胞放回体内作为一种细胞基础疗法。并且希望这种方法能用于白血病、肺癌及其他肿瘤。

穿孔萃取法是测定人造板材中游离甲醛含量的传统方法，在欧洲提出并为我国采用，其原理是用甲苯通过液—固萃取将试件中甲醛萃取出来，然后通过穿孔器进行甲醛与水的液—液萃取，使甲苯中的甲醛又溶于水，然后在水溶液中进行测定。穿孔萃取法操作简单，测定时间较短，适用于试件的快速测定。穿孔萃取法实际上时测定人造板中所含的全部可能释放出来的甲醛。本文对穿孔萃取法测定人造板中游离甲醛含量影响因素进行探讨，以供参考。　　1 实验　　1.1 材料与仪器　　材料：高密度纤维板，刨花板（江苏玉兰木业有限公司提供）。　　试剂：甲苯，碘化钾，重铬酸钾，硫代硫酸钠，乙酰丙酮，甲醛（35%-40%），乙酸铵（以上均为分析纯）。碘化汞，无水碳酸钠，H2SO4，HCI，NaOH，I2，可溶性淀粉。　　仪器：穿孔萃取仪（上海玻璃仪器厂），0.01g电子天平，0.0001g电子天平，UV1240紫外分光光度计等。　　1.2 测试原理　　GB/T 17657—1999《人造板及饰面人造板理化性能试验方法》。　　1.3 计算　　甲醛释放量按下式计算，精确至0.1mg。　　E=（As-Ab）×f×(100+H)×V /M0　　其中：E—每100g绝干试件释放的甲醛毫克数，mg/hg；　　As—萃取液吸光度；　　Ab—蒸馏水吸光度；　　f—标准曲线的斜率；　　V—容量瓶体积，2000mL；　　H—试件的含水率，%；　　M0—用于萃取试件的质量，g

穿孔法测试板材中甲醛方法中甲苯添加量为何要求为600mL，这个量是怎么来的，为什么不定500mL呢？正好一瓶倒进去多方便呀

谁做过人造板测试用的甲醛穿孔萃取仪的验收试验？乍么来验证这个仪器好不好用？

1、穿孔萃取仪，单独买架子大概要多少钱啊？2、装置的连接不是很会，有没有同行可以指导一下，最好有图片，3、实验需要在怎样的环境中进行啊？目前我们实验室条件比较差，没有恒温恒湿，可以做吗？4、萃取完的甲苯溶液大家都是怎么处理的呢？5、板材 是怎么锯成一小块块，使可以放进圆底烧瓶那样的小口的

穿孔萃取仪用于人造板甲醛含量测定,要求质量好一些的,现有的玻璃太容易碎.

使用穿孔萃取法测试人造板甲醛含量，出现了两个问题，实在纠结。1，甲苯蒸汽升上去的时候，只有很少部分进入冷凝管，直接就被冷却，沿着管壁直接被冷却留下来了。实际甲苯根本没有和水进行萃取，就直接又回到烧瓶去了，这结果完全不可信啊。 这难道是因为最近温度低的原因？2，根本没有出现虹吸，只是上层甲苯流了下去，管放得已经是竖直的了，就是慢慢流，加大回流速度也没有用。大家有没有碰到过这些情况，要怎么改进，请大家帮忙想想办法。

求穿孔萃取法测中密度纤维板，刨花板标准曲线，最近头疼，一直做不好，不知道有没有高人能分享一下自己的穿孔萃取法标准曲线？[em0801]

穿孔法测试甲醛是测试的甲醛总量？没做过穿孔法，哪位大侠了解？干燥器法是测试释放量

各位高手，请问有谁知道建筑材料人造板穿孔萃取法中的 穿孔萃取仪 的用法， 最好附上照片。 标准是GB/T 17657-1999。 谢谢各位

简单介绍一下关于药物高通量筛选技术的知识一.概念高通量筛选(High throughput screening，HTS)技术是指以分子水平和细胞水平的实验方法为基础，以微板形式作为实验工具载体，以自动化操作系统执行试验过程，以灵敏快速的检测仪器采集实验结果数据，以计算机对实验数据进行分析处理，同一时间对数以千万样品检测，并以相应的数据库支持整个体系运转的技术体系。二. 高通量筛选技术体系的组成1. 化合物样品库化合物样品主要有人工合成和从天然产物中分离纯化两个来源。其中,人工合成又可分为常规化学合成和组合化学合成两种方法。2.自动化的操作系统自动化操作系统利用计算机通过操作软件控制整个实验过程。操作软件采用实物图像代表实验用具，简洁明了的图示代表机器的动作。自动化操作系统的工作能力取决于系统的组分，根据需要可配置加样、冲洗、温解、离心等设备以进行相应的工作。3.高灵敏度的检测系统检测系统一般采用液闪计数器、化学发光检测计数器、宽谱带分光光度仪、荧光光度仪等。4.数据库管理系统数据库管理系统承担4个方面的功能: 样品库的管理功能;生物活性信息的管理功能; 对高通量药物筛选的服务功能; 药物设计与药物发现功能。三. 高通量筛选模型常用的筛选模型都在分子水平和细胞水平，观察的是药物与分子靶点的相互作用，能够直接认识药物的基本作用机制。1. 分子水平的药物筛选模型:受体筛选模型;酶筛选模型;离子通道筛选模型1.1受体筛选模型:指受体与放射性配体结合模型。以受体为作用靶的筛选方法,包括检测功能反应、第二信使生成和标记配体与受体相互作用等不同类型。1.2酶筛选模型:观察药物对酶活性的影响。根据酶的特点,酶的反应底物,产物都可以作为检测指标,并由此确定反应速度。典型的酶筛选包括1) 适当缓冲液中孵化;(2)控制反应速度,如:温度,缓冲液的pH值和酶的浓度等;(3)单时间点数器, 需测量产物的增加和底物的减少。1.3离子通道筛选模型: (1)贝类动物毒素的高通量筛选,其作用靶为Na+通道上的蛤蚌毒素结合位点，用放射性配体进行竞争性结合试验考察受试样品。(2)用酵母双杂交的方法高通量筛选干扰N型钙通道β3亚单位与α1β亚单位相互作用的小分子，寻找新型钙通道拮抗剂。2.细胞水平药物筛选模型观察被筛样品对细胞的作用,但不能反映药物作用的具体途径和靶标,仅反映药物对细胞生长等过程的综合作用。包括: 内皮细胞激活; 细胞凋亡; 抗肿瘤活性; 转录调控检测; 信号转导通路; 细菌蛋白分泌; 细菌生长。四.问题及展望高通量筛选技术与传统的药物筛选方法相比有以下几个优点:反应体积小；自动化；灵敏快速检测；高度特异性。但是，高通量筛选作为药物筛选的一种方法,并不是一种万能的手段，特别是在中药研究方面，其局限性也是十分明显的。首先，高通量筛选所采用的主要是分子、细胞水平的体外实验模型，因此任何模型都不可能充分反映药物的全面药理作用；其次，用于高通量筛选的模型是有限的和不断发展的，要建立反映机体全部生理机能或药物对整个机体作用的理想模型，也是不现实的。但我们应该相信，随着对高通量筛选研究的不断深入，随着对筛选模型的评价标准、新的药物作用靶点的发现以及筛选模型的新颖性和实用性的统一，高通量筛选技术必将在未来的药物研究中发挥越来越重要的作用。

各位同仁好，请问谁有《[b]ISO 2591-1-1988 筛分试验第1部分:用于金属丝编织网及金属穿孔板的筛分试验方法》[/b]的标准文件吗？可否共享一份呢？谢谢了~

有谁知道用GB/T 17657-1999 中穿孔萃取法测试人造板材中的甲醛释放量中的含水率如何测试？试件含水率的尺寸是多少？谢谢

请问各位达人啊,做木甲醛的穿孔萃取的时候如何才能控制回流速度达到标准的速度,我做的时候前辈说要在具体的那个位置,但是我觉得不太准确,不晓得大家有什么好的点子给小的支招啊.谢谢大家了啊

今天买了一只活鸭子，宰杀后在清洗时发现鸭肫上竟然有三个穿孔，肫壁还有多处异常突起，是否给鸭子喂了什么致突变的饲料导致的？感觉很可怕，只好把鸭肫扔了。http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09501.gif

高通量微波消解仪是具备化学反应过程控制的微波加速反应系统,控制, 显示和操作系统一体化集成, 具有可靠的整机防腐设计, 节省空间, 同时仪器一机多能, 可用于分析化学的样品消解, 萃取, 蛋白水解, 浓缩, 干燥,实验化学的有机/无机合成, 以及化学工艺模拟数据条件中试等各种微波化学应用。高通量微波消解仪功能特点：仪器采用微波非脉冲连续自动变频控制，延长了仪器的使用寿命和电磁波的均匀性，腔体采用66L大容积316L不锈钢腔体材料特制而成，自锁式缓冲防爆炉门，当反应异常时，缓冲结构确保操作人员人身安全和炉门结构完整无损，炉门和腔体结合紧密，微波泄漏符合国家标准。仪器采用温、压双控系统对消解实验的压力和温度进行控制，实时显示。360°往返连续旋转，微波均匀，保证各个样品微波环境相同，提高实验结果的一致性。当罐内的压力超过设定的保护值时，微波会自动停止加热。安全防爆膜具有双保险功能，当罐内的压力超过防爆膜所能承受的压力时，防爆膜先行破裂，气体泻出，防止罐体受损和对人体的伤害。技能要求质检员熟悉仪器的各部件功能及检测原理质检员了解仪器的环境要求并实时维护要求环境技术负责人熟练掌握易损部件的维护和维修工作

何处购买质量很好的穿孔萃取仪等玻璃器皿？我们在做GB17657-1999标准的甲醛测试，我们现用的萃取仪萃取效果不佳，玻璃质量比较薄，密封性不好。 同时希望购买到天玻或者北玻的玻璃器皿。

多孔玻板吸收瓶原文出处：环境空气 氮氧化物(一氧化氮和二氧化氮)的测定 盐酸萘乙二胺分光光度法 HJ 479-20095 仪器和设备 5.4吸收瓶：10ml多孔玻板吸收瓶多孔玻板吸收管原文出处：环境空气和废气氯化氢的测定　离子色谱法（暂行） HJ 549-20095 仪器和设备5.1 多孔玻板吸收管：10ml上述两标准中所指10ml多孔玻板吸收瓶和10ml多孔玻板吸收管是不是同一物体啊？答案依据在哪里找？

为什么环境空气和废气的氯气项目的采样要用到两个多孔玻板串联采样？是因为一个吸收液无法满足测量需要的量吗？

液相色谱的宣传动不动就说高通量进样器，好像气相色谱没有这样宣传，不知道有没有？

发现现在很多仪器设备都用“高通量”这个词汇，比如：高效液相色谱仪高通量自动进样器高通量密闭微波消解系统高通量组织冷冻研磨仪 高通量平行色谱分离系统何谓“高通量”，你真正了解这个仪器行业词汇吗？

多孔玻板吸收管怎么加入吸收液

求助“提高铜管挤压穿孔针使用寿命的研究进展”2007年 第36卷 第06期