高效液相色谱仪及色谱柱测试 仪器信息网论坛不缺液相色谱方面的高手,不管是维修方面研发方面还是检测方面的。其中仪器及色谱柱检测,大家都有独到之处,科学之举。 在这我介绍种方法,可能也有很多同仁们用过。在这方法能同时检测液相色谱仪和色谱柱,但检测的只是众多检测项目中比较简单的几种。仪器主要检测检出限、线性、重复性等,色谱柱主要检测分离度、理论塔板数、重复性(和仪器检测相同)等。 下面我们就来具体介绍下。用苯、甲苯、萘测试下高效液相色谱仪及C18色谱柱。实验部分【仪器】高效液相色谱仪(紫外检测器+等度泵+柱温箱+自动进样器+在线脱气机等)超声波振动仪溶剂过滤器【试剂】甲醇:色谱纯超纯水苯、甲苯、萘标准品溶液【色谱条件】检测器:紫外检测器色谱柱:Promosil C18 ( 250 mm X 4.6mm,5μm )流动相:甲醇:水=80:20(V:V)检测波长:254nm流速:1.0mL/min柱温:30℃进样量:20ul【色谱图】 先来张浓度大的,苯、甲苯、萘含量均为1.0 × 10-4g/ml的色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509121050_565838_2536753_3.png 效果不错吧,各指标一看就应该能看个差不多吧。浓度大如果看不出好坏,那简单,咱们换个浓度小的,这样各种效果一目了然了。 下面这个是苯、甲苯、萘含量均为5.0 × 10-7g/ml的色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509121050_565839_2536753_3.png 再来张重复性(重叠模式)对比的色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509121050_565840_2536753_3.png 再来张上下交错模式重复性对比色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509121050_565841_2536753_3.png 再来张上下左右交错模式重复性对比色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509121051_565842_2536753_3.png 当然浓度大的,重复性色谱图看着效果更好,不信您就来看,这张就是苯、甲苯、萘含量均为1.0 × 10-4g/ml的重复性色谱图:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509121058_565843_2536753_3.png 这下看明白了吧,效果确实不错吧,各项指标都较理想吧。 下面再来张检出限的色谱图,这个各成分的浓度分别是5.0 × 10-8g/ml:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/09/201509121050_565837_2536753_3.png【结论】 经计算以上各成分的检出限(按2倍噪声计算)大约分别是7.0× 10-9g/ml、4.5× 10-9g/ml、2.5 × 10-9g/ml,线性系数均在0.9999以上,定性重复性均小于0.3%,定量重复性均小于0.5%,分离度也均大于5,色谱柱理论塔板数也均在1万以上,色谱峰较对称,峰形较好。 这就说明该色谱条件适合高效液相色谱仪及常规C18( 250 mm X 4.6mm,5μm )色谱柱测试,测试效果较好。另外可以确定该仪器和该色谱柱测试的这几项内容都没问题,指标都不错。 国标中单用萘标液测试仪器或色谱柱,这样一般也基本能测出仪器及色谱柱的基本性能指标,但却测不出液相重要指标分离度。以上这种方法在国标的基础上又增加了两种成分,分离度指标也可以一块测试。当然也可能有人还会选萘、蒽、茵、菲、芘、苯、甲苯、二甲苯等标准品测试以上项目,也可能会有不错的效果。 以上测试方法我们经常用,效果不错,大家如有这方面测试不防试试。
国产与进口液相色谱仪测试比对报告1.比对目的 选取2010年药典二部及美国药典中典型方法及食品添加剂国标方法对某国产品牌上海伍丰EX1600高效液相色谱仪及其他品牌(以waters仪器为主)液相色谱仪的各项性能进行比较,明确国产仪器优化与改进方向。2.比对依据与原理1. JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程2. EX1600高效液相色谱仪及其他品牌高效液相色谱仪使用说明书3. EX1600高效液相色谱仪系统适用性测试方案及综合改善测试方案4. GB/T 19681—2005食品中苏丹红染料的检测方法--高效液相色谱法5. VensuilAA氨基酸分析方法6. 2010年药典二部及美国药典中双氢青蒿素、可可碱与茶碱、维生素A及阿托伐他汀钙等相关物质的测定方法。7. 需比对的性能指标选取原理:与《JJG705-2002 液相色谱仪计量检定规程》要求直接相关;与仪器关键部件的技术指标直接相关;与仪器测定结果重复性,即仪器稳定性直接相关。8. 样品选取原理:测定结果直接反应仪器的稳定性;属于常用或者经典方法,单标、混标体系均有所涉及;等度和梯度方法均有所涉及(反映梯度误差指标);与检测器的基本波段(低、中、高波段)均相关的项目(反映全波段检测稳定性)。3.比对内容 高效液相色谱仪对样品的分离与测定结果好坏与仪器的稳定性及色谱柱的柱效相关,现使用同样的色谱柱进行EX1600高效液相色谱仪及其他品牌的色谱仪各项性能比对,就需要了解构成液相色谱的各个系统及整机的稳定性情况。就仪器各个系统的稳定性来讲,按照《液相色谱仪计量检定规程》测试方法,对流量准确度与重复性、噪声与漂移的测定结果能够从仪器方面直接反映输液系统及检测器的运行情况,明确指出这两个核心部件的优化与改进方向。而就整机稳定性来讲,还需要配合标准样品的测试,对其检出限、线性范围和梯度误差及定性定量重复性结果进行比较和评价,作为应用测试指标进一步反映仪器的稳定性好坏。将仪器性能指标与应用测试指标相结合,才能全面、客观地对仪器各项性能的稳定性进行评价与改进。现将主要测试内容列在下表:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100229_476241_2369266_3.png 根据以上所列比对项目的比对内容,选择苏丹红ⅠⅡⅢⅣ、双氢青蒿素、阿托伐他汀钙、可可碱与茶碱、维生素A、氨基酸作为衡量输液系统、检测器、整机及软件性能综合指标优劣的标准测试样品,其特有的测定条件及测定结果可以综合反映色谱仪的稳定性,现将其优势测定条件与测定结果反映的综合指标列在下表并具体阐述如下:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/11/201311100231_476242_2369266_3.png 据食品国家标准、药典二部及美国药典中的典型方法,我们选取了近年来与食品、药品质量可控性、有效性及安全性密切相关的六类标准样品,依据其测试结果来衡量高效液相色谱仪各项性能稳定性。 苏丹红作为化工试剂,被不法商家非法添加入调味品中,是近年来食品安全领域的热点问题。苏丹红ⅠⅡⅢⅣ易致癌,是我国明文禁止的非食品添加剂。在相关食品国家标准中对其含量有具体的限量值,鉴于其实际测定中响应值低,我们对苏丹红的检测结果可直接体现高效液相色谱仪的噪声、漂移、检出限及线性范围(下限)等指标优劣。同时,苏丹红ⅠⅡⅢⅣ作为四元混标体系,国标方法规定苏丹红Ⅰ检测波长为478nm,苏丹红ⅡⅢⅣ检测波长为520nm,在检测过程中须转换波长,测定结果能够直接反映高波段、波长转换时的噪声与检出限;分离条件为梯度洗脱,可反映输液系统的梯度误差及双泵在梯度洗脱的稳定性。 双氢青蒿素作为单标体系,色谱测定条件为检测波长210nm,测定结果可直接反映检测器在低波段的稳定性及单泵运行情况。 阿伐他汀钙液相色谱检测波长为244nm,位于检测器优势波段的相对低波长处,流动相中含有高比例、洗脱能力较强的试剂四氢呋喃,可直接反映检测器优势波段噪声及单泵稳定性。 氨基酸混标体系共包含17种氨基酸组分,为复杂难分离体系,检测波长为254nm,测定时为梯度洗脱,测定结果可直接体现检测器优势波中段噪声及梯度洗脱时双泵运行稳定性。 可可碱与茶碱的二元混标体系,测定时检测波长为272nm,位于检测器优势波段的相对高波长处,可进行等度分离,测定结果直接反映了检测器优势波段稳定性及双泵在等度洗脱时的稳定性。 维生素A的高效液相色谱测定体系为正相色谱,流动相为正己烷:异丙醇[font=Tim
各位大虾,网上都是乙酸乙酯的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]测试条件,不知道能不能用液相色谱测试乙酸乙酯,请教工业乙酸乙酯的液相色谱测试条件,多谢大家的热心帮助!!!
【产品ID号】46245 【产品编号】SB05-095-2008【CAS.编号】57-62-5【中文名称】金霉素【英文名称】Chlorotetracycline【产品规格】100ug/mL,1mL其他名称:标准物质用途: 用于质量控制和评价、测试仪器的校准、分析方法的验证、农副产品及环境中农药残留物检验时的定性定量参比,适用于气相色谱、液相色谱、薄层色谱及气质联用仪等仪器。保存条件: 将装有农药标准样品安瓿瓶的纸盒放入干燥器,黑暗条件下保存在0-4℃冰箱中,农药标准样品是有毒物质,注意贮存,并注意防火。分析方法:液相色谱法规格:1mL产品名称 介质 金霉素100乙醇ug/mL
高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]测试条件是跟据所选用的色谱柱来确定是吗?与型号有较大的关系吗?
我公司所在地为上海,现需要找一家提供液相色谱对外服务的公司,我们可提供色谱条件。对检测结果只要准确的含量即可。样品测试相对简单,希望能得到比较优惠的报价。如果有意向请联系 77910917@sina.com 13817037917 孙先生
JJG705-90《实验室液相色谱仪计量检定规程》和JB 5226-91《液相色谱仪测试用标准色谱柱》,还有就是液相色谱的运用范围和有关分析实例,谢谢咯![em0805] [em0805]
赛默飞U3000[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]如何测试氘灯能力测试?各位大神望多多指教。
[color=#444444]对焦油进行液相色谱进行检测,图片是测试结果[/color][color=#444444]液相色谱:焦油溶剂采用异丙醇;色谱柱ods C18(250*4.6微米,5微米),流动相采用乙腈+水;总流速:1ml/min;柱温40摄氏度。梯度洗脱程序:60%乙腈开始,30min;后以2.5%/min的速度,增加至100%,直至全部出峰。波长:210nm[/color][color=#444444]问:如何调整测试条件,溶剂,波长等[/color][img=,absmiddle]http://muchongimg.xmcimg.com/data/emuch_bbs_images/smilies/rolleyes.gif[/img][color=#444444],才能得到比较好的测试结果?[/color][color=#444444][img=,690,387]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/05/201905201424067555_6494_1676638_3.jpg!w690x387.jpg[/img][/color]
如题,液相色谱仪,流动相,水%,另外一个乙腈%.柱温30.测试一个样品要46min才走完,如何改进。
本人对液相色谱测试不十分了解,但有一次送样给公证行做液相色谱测试检定原料成份. 客户提供原料的化学名称为{ 环己烷1,2-二羧酸二异壬酯 },但经测试后公证行结果却为 {二(2-乙基己基) 壬二酸酯.}未知这样的测试结果是否准确? 或是有什么原因,请多多指教.
液相色谱测试 样品分离相关问题?求助—phenomenex luna氨基柱分离碱基不知各位大虾们有没有做过分解后的DNA的液相色谱的分离?求教适合这种柱子的A,T,C,G四种碱基标准品的溶解方法及标准曲线的制作。
我想用液相色谱做环己烷里面的环己酮和环己醇含量的定量分析,可是我对液相色谱知道的确实太少了,请大家提供我一些建议,用什么色谱柱,流动相以及检测方法,先谢了其实用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]可以很容易的实现,可是我们老板非要我用液相色谱来测,说可以用示差折光法检测。理由是我们实验室自己有液相色谱(waters2695)
本人对液相色谱测试不十分了解,但有一次送样给公证行做液相色谱测试检定原料成份. 客户提供原料的化学名称为{ 环己烷1,2-二羧酸二异壬酯 },但经测试后公证行结果却为 {二(2-乙基己基) 壬二酸酯.}未知这样的测试结果是否准确? 或是有什么原因,请多多指教.
[size=3][font=黑体][b]据悉,相关部门将要建立质谱仪器[/b][/font][font='Times New Roman'][b] 性能测试方法标准,坛子里的朋友不妨讨论一下,[/b][font=楷体_GB2312]液相色谱-质谱联用仪[/font][b]、需要测试那些性能指标,各个性能指标用什么方法测定?希望大家踊跃发言![size=5][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质联用[/color][/url]的讨论帖子请点击[/size][url]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100623/2628791/[/url][url=http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100623/2628791/]点击打开链接[/url][/b][/font][/size]
请教,液相色谱测试时浓度大了是不是不准了?浓度为100mg/L,因为我几次测试同样的浓度,感觉变化挺大的
液相色谱与分光光度计测试的数据有没有可比性,液相色谱仪每天测样时都需要重新进标吗?
高效液相色谱仪的正确使用与维护姜维林 李蕾 姜胤 摘要 在使用高效液相色谱仪的过程中,难免会碰到各种各样的问题,本文从进样阀、色谱柱以及流动相等几个方面介绍了色谱仪的正确使用、常见故障的成因及排除方法。 关键词 高效液相色谱仪 故障排除 正确使用 高效液相色谱仪(HPLC)是分析实验室常用的测试仪器之一,其应用越来越广泛。此种仪器在使用过程中,难免会出现各种各样的问题,并将直接影响到所测数据的准确性和仪器的正常工作。操作者如果能了解故障的成因,即可清楚预防和排除这些故障的方法,就可正确地使用仪器并最大限度地发挥仪器的性能。因此,从以下几个方面说明在使用高效液相色谱仪中需注意的几个问题。1. 使用试管的问题 (1) 试管的洁净问题。高效液相色谱分析法是一个很灵敏的分析方法,如果因使用不洁净的试管,便会影响试验结果的准确性。例如,在用甲醇作溶剂来溶解样品时,所用的小试管是用橡胶塞来做盖子的,因此,在每次进样时,都有一个保留时间固定的干扰峰存在,后经证实,此干扰峰是由甲醇浸泡橡胶塞而溶下的组分所产生,换用玻璃试管后,干扰峰消除。 (2) 塑料试管的溶解问题。近年来,一次性塑料试管给试验人员带来了极大的方便,但是,在使用过程中一定要注意有机溶剂对试管的溶解现象,在利用此种试管提取样品时,有些有机溶剂(如氯仿等)对管壁有溶解现象,这些被溶解下来的物质有时也能在检测器上产生信号,从而干扰样品的测定。这时,可用相同的实验条件先行试验一下,看看不含被抽提物时,提取液在检测器上能否产生干扰信号,如确有干扰信号存在,就只能换用耐有机溶剂的玻璃试管了。 (3) 被测样品在试管壁上的吸附问题。这个问题也应引起注意,否则也会影响测试结果的准确性,在治疗药物监测(Therapeutic Drug Monitoring,TDM)中,有些被测药物如阿米替林,丙咪嗪等易吸附在玻璃试管的管壁上,因此,操作中宜采用聚丙烯管,为防止提取中吸附现象的发生,可采用0.5%的已二胺已烷液做为提取剂,可有效地防止吸附。2. 操作进样阀的问题 目前,在分析型高效液相色谱仪中常用的进样阀是7125型进样阀,其内部的六通阀结构使进样操作非常方便,但是,如果使用不当,也会带来问题。例如,在高效液相色谱法的试验过程中,有时会有异常色谱峰的出现以及重现性不好的问题,这主要是由于操作方法不当所引起,要想解决此类问题,需从以下几个方面入手。 (1) 进样量的控制。用进样阀来进样时,阀内的样品环是定量的,(一般分析型进样阀的样品环体积为20ul),由于进样时,注射到进样阀内的样品溶液在样品环的管路中有径向的速度梯度(即管轴处比管壁处的液流速度快)。因此,要想使样品环中充满样品溶液,从而使用进样阀来准确地定量,则必须使进样量大于样品环体积的2倍。如果用注射器来控制进样量,则最大只能注射样品环体积1/2的量,这样才能防止部分样品由溢流管溢出从而导致定量分析的误差。 (2) 进样阀的清洁问题。如果样品环中有上次进样时样品的残留,必然会污染下次注射进的样品,为防止这种现象的发生,应按下列步骤操作:a.进样阀有2个位置,INJECT和LOAD。首先在LOAD位置时,以注射器将流动相注入进样阀内清洗几次,每次用量大约40ul;b.然后将进样阀板手扳至INJECT位置时,再以流动相清洗几次,每次用量还是40ul;c.最后,再将样品注射到进样阀里。 按照上述的步骤操作,可以避免由进样阀引起的污染,从而使干扰峰消除并提高分析结果的准确性。 (3) 进样阀溢流管的堵塞。有时,进样阀的溢流管会发生堵塞现象,向进样阀内注射样品时,注射针推不动。此故障是由于溢流管的堵塞所致。堵塞的原因多半是由于溶解样品的流动相用的是盐溶液,而其中的盐在溢流管的排空端口处结晶所致。此时,可用小烧杯盛少量蒸馏水对溢流管口稍加浸泡,端口处盐的结晶就能被溶解掉,故障排除。如能在每次进样完成之后,用蒸馏水反复冲洗至溢流管中的盐分全部冲出,则可避免此故障的发生。
如何测试液相色谱柱的柱效
最近要购买一台液相色谱仪,请问一下用哪些品牌的哪款产品能快速方便的测试。
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]可以测试甲醇和甲醛吗
[color=#444444]液相色谱测油漆BPA的时候,样品怎么处理比较好?之前测试原漆并无测出BPA,但喷在杯体表面时,BPA含量严重超标,是不是样品处理有问题?我用的是外标,大神们,求帮助啊[/color]
液相色谱测试中的怎样做加标验证法
最近因为测试新柱的柱效引发了柱效测试的思考,与售后工程师进行了相应的交流,结合一些资料和自己的感悟写下此篇文章,希望能给大家在实际工作提供一些有益的东西。 1941年,马丁与詹姆斯提出了塔板理论。 1950年,诺贝尔化学奖颁发给他们两位以表彰他们在气液分离过程理论方面的突出贡献。当然,我们现在也知道塔板理论也是适用于液液分离机理阐述的。 自从有了塔板理论,以理论塔板数为代表的色谱柱柱效评估就引起了人们的关注。我们知道在色谱柱柱长一定的情况下,色谱柱的理论塔板数与理论塔板高度成反比。组分在一个塔板高度内完成一个分配平衡过程(或者吸附平衡),这种平衡是动态的,但是不断的平衡过程导致组分之间差异得到体现,最终引起了不同性质组分之间的分离。 必须指出的是,虽然组分间存在差异,但是差异需要多次的平衡才能最终达到我们想要的分离效果,平衡的次数的多少就由理论塔板数来体现。 1956年,荷兰人范得梅特对塔板理论做出了修正,提出了速率理论。速率理论的公式如下: [img=,414,97]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/12/201712112037_01_3332275_3.jpg!w414x97.jpg[/img] 其中,A项为涡流扩散项,B项为纵向分子扩散项,C项为传质阻力项。它们每一项都会对色谱柱的理论塔板高度,乃至进一步对色谱柱的理论塔板数产生影响。在这里,我们重点关注一下A项,即涡流扩散项,也可以表述为多路径效应。A项的产生源于填充色谱柱内的填料粒径大小及其分布所引起相同组分不同分子在色谱柱内产生了不同的分离路径导致的平衡延缓。A项的存在是导致填充柱与毛细管柱柱效差别的主要原因之一。对于填充柱来说,如何改善A项呢?粒径越小,分布越均匀的色谱柱,其A项的值也越小。在其它条件相同的前提下,对应的色谱柱理论塔板高度越低,理论塔板数越高。所以我们可以看到的是,这些年随着工艺水平的提升,色谱柱的粒径已经能够做到越来越小,粒径普遍在2μm以下的超高效液相色谱UPLC(Ultra Performance Liquid Chromatography)已经越来越多的取代了粒径普遍在5μm左右的高效液相色谱HPLC(High Performance Liquid Chromatography)系统进入各类大型的制药食品类企业及它们的上游包装厂家或者第三方检测实验室中。 我们必须意识到的是,随着色谱柱填料的粒径越来越小,在更短的色谱柱上就可以达到以前较长的色谱柱才能达到的色谱柱柱效,但是伴随而生是柱外效应的影响变得愈发重要。各类管路接头、色谱柱阀切换部件、扩充定量环等等的使用虽然方便了实验的运行,使得液相操作人员的操作更加简单,但是一定程度上影响到我们测试的色谱柱柱效。 色谱柱厂家测试色谱柱柱效往往在十分理想的情况下,各种柱外可能的展宽因素都降到了最低,而对于一个特定的检测室特定的液相仪器而言,是无法达到此种理想情况,因此即使是新柱,可能首次测试的色谱柱柱效也较出厂报告的中色谱柱柱效报告相差较大。以W家2.5μm粒径的实心核颗粒柱为例,利用二氢苊丙酮溶液进行色谱柱柱效测试,即使完全按照色谱柱出厂测试条件进行柱效测试,一般能有出厂报告柱效的70%就是比较好的情况了,而我们实验室的Arc仪器上面实测新柱只有出厂报告的55%。这一方面是由于我们的仪器上加装了许多的部件,色谱柱阀、扩充定量环以及因此增加的接口,这些是否都有意无意的增加了柱外展宽可能的诱因,导致实测的色谱柱柱效偏低;另一方面,实验室的除色谱柱外仪器的当时状态是否也有一些诱导实测柱效较低的因素存在呢,这都是我们可以深刻考虑的。 当然,最终要说的是,即使我们的实测柱效较出厂报告相差较多,如果可以分离我们想要分离的组分,并且对称性优良,仍旧不失为一个好的色谱柱。我们需要记录第一次测试的柱效报告上面的参数,这里面包含理论塔板数、保留时间、拖尾因子等,然后留待以后出现分离问题时利用相同浓度的色谱柱测试标准液进行柱效测试并与首次测试的值相对比。 一切都是为了实验,从实验出发,回到实验中去。 作者写本文是为了更好的理解色谱柱的柱效以及更好的指导工作,写作过程受认知的限制可能存在一些纰漏或者错误,望大家能够批评指正。
[color=#444444]最近在探索全氟磷酸的检测,用的是C18柱,文献里看到都是用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]检测的,现在想直接用液相色谱紫外检测器或电导检测器测试,流动相也试验了几种,可是出来的峰都很奇怪,没有线性,希望做过的伙伴们帮帮忙啊[/color]
由于 不同色谱柱的出厂报告 检测条件 各不相同,如何 统一 测试[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱的柱效? 可否 100%甲醇,1ml/min, 254nm, 0.1mg/ml 萘/甲醇 ,20μl, 理论塔板数 不得低于1万 就说明 柱子是好的?
现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成,与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。 液相色谱仪使用时要非常的注意,使用卡套柱时,两端的卡套应时刻连接在柱芯上。不管您是平衡色谱柱或是清洗,任何时候都不能将卡套取下来,否则会造成填料的流失。 反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。一定要确保所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。 硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。
我做的是吸附实验,用液相色谱测试一系列物质吸附前后的浓度,计算动力学,准二级方程中的k2有的为负数,从而导致初始吸附速率计算结果为负数,这个属于正常吗,我分析的时候是看负数还是他的绝对值呢?谢谢大家
[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]可以测试甲醇和甲醛吗
[font=&][color=#666666] 对于初学者来说,分析液相色谱仪方法可能会让人不知所措。此类方法通常包含与实验中每个步骤相关的信息和说明。熟悉实验室中液相色谱仪方法的格式很重要,这样您就可以轻松找到整个过程的方法。[/color][/font][font=&][color=#666666]对液相色谱仪器进行设置[/color][/font][font=&][color=#666666] 准备好一台[url=https://www.risun-tec.com]液相色谱仪器[/url]、色谱柱和化学品,下一步就是开始设置您的仪器进行测试。检查液相色谱仪器的校准状态非常重要。所选仪器必须成功通过所有校准测试;这通常由仪器上的贴纸或标签指示,说明上次和下一次校准的结果和日期。进行校准测试以确保仪器的每个部分都在适当的范围内工作。例如,必须检查泵的流量以匹配数字输入;对检测器、进样器和色谱柱加热器进行了类似的测试。目的是确保实验室中的所有仪器都能正常工作并且在预定的误差范围内。[/color][/font][font=&][color=#666666] 选择仪器后你必须对其进行清洁并准备色谱柱。清洁步骤对于去除之前工作中的任何残留物很重要;因此可以获得稳定的基线和准确的结果。许多方法规定了在测试之前清洗系统的特殊顺序。通常,清洁程序包括先用流水去除任何缓冲液残留物,然后再用纯甲醇或异丙醇/甲醇混合物。最后,将 50% 的有机溶液冲洗通过系统。最终冲洗液的组成很大程度上取决于所使用的色谱类型:反相或正相。还根据色谱柱的类型和要使用的流动相的组成对色谱柱进行冲洗。查阅色谱柱的宣传单以确定适合您的色谱柱的最佳冲洗和储存解决方案。[/color][/font][font=&][color=#666666]用于液相色谱仪测试的溶液的制备[/color][/font][font=&][color=#666666] 首先要制备的溶液通常是流动相。有时,当使用梯度系统时,您需要为您的分析方法制备多个流动相。使用液相色谱仪级水和溶剂来制备流动相非常关键。准备好流动相后,就可以开始用相应的溶液冲洗系统并开始平衡色谱柱了。大多数 HPLC 系统本质上是四元系统,即可以从四个不同的入口管线泵送。如果要使用多条管线(即该方法涉及梯度),那么通过每条管线冲洗的最终溶液应该是与流动相兼容的溶剂。[/color][/font][font=&][color=#666666] 例如,如果流动相的缓冲液含量高,则入口管线必须用至少 50% 的冲洗水溶液冲洗,以防止流动相中的盐析出并堵塞入口管线。所有冲洗液和流动相都应通过微过滤器(0.45 μm 或 0.2 μm)过滤以去除细菌和有机碎片。[/color][/font][font=&][color=#666666] 冲洗系统并开始平衡色谱柱后(在某些情况下可能需要 3 小时或更长时间,具体取决于色谱柱类型和流动相组成),您应该开始处理样品和参考溶液。在许多情况下,您在制备这些溶液时需要采取特殊的预防措施,例如减少暴露在光线或湿气中的时间,以防止分析物降解并产生错误结果。这些特殊的注意事项通常会在分析方法中提及。参考溶液和样品溶液也应通过称为注射器过滤器的特殊过滤器进行过滤(因为它们安装在注射器上)。但是,所用过滤器的类型和材料应与分析物和溶剂兼容,以避免吸附或污染。[/color][/font][font=&][color=#666666]处理色谱图并计算出结果[/color][/font][font=&][color=#666666] 一旦您确定您的系统工作正常,请恢复进样顺序以进样样品溶液。完成序列后,您可以使用特定软件对采集的色谱图进行处理,从而得出有意义的结果。一些软件程序允许您“整合”所有峰,无论它们有多小。计算每个峰下的面积,并使用生成的数字来确定测试结果。液相色谱仪实验后有两种主要的计算方式:首先,通过使用测定来确定一种或多种活性成分的含量,例如计算片剂中扑热息痛的含量。或者,您可能希望确定色谱图,即确定杂质的类型及其相对比例。在您输入分子量和稀释因子后,当前的软件可以进行计算并生成最终报告。[/color][/font]