低氧高氧手套式操作台

当地时间10月7日，瑞典卡罗琳医学院宣布，授予威廉凯林(William G. Kaelin Jr)、彼得拉特克利夫(Sir Peter J. Ratcliffe)及格雷格塞门扎(Gregg L. Semenza)诺贝尔生理学或医学奖，以表彰他们在“发现细胞如何感知和适应氧气供应”领域的卓越贡献。我们都知道，这次诺奖的核心发现就是围绕HIF-1（低氧诱导因子）这条信号通路，小编在这里不再赘述这条通路伟大而精妙的丰富内核，而要强调的是，人类的多种疾病都和常氧/低氧的调节有关，比如恶性肿瘤，肾性贫血，损伤修复，循环障碍疾病等，这次的三位诺奖得主已经为我们发现并阐明了生物体启动氧感知的重要钥匙，而仍然有太多未知的关键节点等待同道中人去探索发现。常用的方法包括体外化学模拟和体外物理模拟，说白了就是给细胞加工具药物（例如CoCl2）或者是低氧环境培养。对于有些细胞模型或研究方向来说，低氧环境培养是必不可少的，然而往往很多实验室的低氧培养设备和其他检测设备是分家的，或者甚至缺少低氧培养的相关设备，给许多实验设计造成了不大不小的困扰。点点点点一下嘛解决方案靠谱的隆重介绍所以Cytation & Lionheart氧浓度可调节活细胞检测系统上图便是能够便捷控制CO2和O2的气体控制装置，在面板上可以方便设定CO2和O2的浓度范围，比如上图，O2的浓度已经从常规的20%降低到5%。是不是惊讶于她的轻盈体型？咱们就是这么节约空间资源有木有！当然，作为控制器，是需要和咱们的核心检测设备Cytation或Lionheart搭载使用的，这样就能够完美实现低氧环境控制和灵活多样的活细胞检测同步进行（传送门）。新鲜小案例：研究一下3D细胞球的缺氧变化此前我们已经介绍过非常多的3D细胞的应用案例，由于3D细胞能够更好地模拟体内细胞的微环境，因此针对3D细胞培养的缺氧水平下的研究需求也是非常多的。11个小时内，人源肝细胞球内的低氧水平逐渐增加（Cyto-ID Hypoxia 染料用于标记细胞内缺氧水平，红色荧光信号增加，表示细胞低氧状态加剧） 请向后滑动_____通过Gen5软件的细胞圈选识别，可以对Cyto-ID标记的细胞缺氧信号定量分析。_____这个图展示了不同的分析方式下的信号倍比变化，数据说明一切，咱们还是需要选择对合适的分析方法__________使用低亲和力球形96板 ，能够快速的构建3D细胞模型（相关案例传送门），接入CO2和N2后，通过气体控制装置设定CO2条件5%，氧气条件8%，放入细胞培养板，即可在长时间内实时监测细胞球的形态或其他需要检测的指标。来自霍普金斯医学院的案例Dr. Gilkes团队的主要研究方向是低氧和乳腺癌的相关研究，2019年他们的一篇文章中通过3D组织细胞培养，阐述了低氧可激活RhoB的表达与活性，并且RhoB在乳腺癌的转移过程中发挥了复杂而关键的作用。首先，Dr. Gilkes团队在分子水平，研究了多种乳腺癌细胞系在低氧（1%）培养条件下的HIF-1和RohB的mRNA水平及蛋白水平的表达变化，在发现显著差异后，当然是要研究一下这个关键的RohB在活细胞水平，特别是3D细胞培养模型中， 如何影响肿瘤细胞的表型变化，于是，Cytation和Lionheart就发挥了重，要，作，用啦。比如，使用LionheartFX连续16小时检测基质胶3D结构中的MDA‐MB‐231亚克隆细胞的迁移运动情况，评价不同RohB的表达量对细胞迁移的影响。16个小时，每隔2分钟拍照一次，然后软件合成视频，可以看出细胞的迁移运动情况，这个gif图是未处理的亚细胞克隆迁移情况。（请向后滑动）__________另外，作者团队构建了3D细胞球的低氧培养模型，用于更深入的研究RohB对肿瘤细胞的迁移及侵袭能力的影响。这里恰好又使用了Cytation5的1%低氧及常氧培养系统，使用了针对3D细胞成像的Z-Stack模式。3D细胞球在基质胶内的侵袭情况及定量统计。（请向后滑动）_______________在整体动物水平，Dr. Gilkes团队通过构建不同RohB表达量的患瘤小鼠模型，通过不同组织的HK2基因表达评估及免疫组化、HE染色等病理学评估，研究了RohB对于肿瘤病灶的生长和迁移的影响。其中大量的免疫组化及HE染色成像均由LionheartFX完成。有趣的是，研究结果发现RhoB对于肿瘤的生长和转移并非单一单向的作用，而是较为复杂的双向作用。肝脏组织切片免疫组化对RhoB的表达定量检测，以及HE染色观察肿瘤转移病灶。（请向后滑动）_____小鼠淋巴结组织切片的波性蛋白免疫组化，波形蛋白是肿瘤进展过程中的重要指标_______________到这里，我们可以看到，搭载了低氧活细胞培养的Cytation&LionheartFX细胞成像系统，可以从分子、3D细胞到整体动物水平帮助研究者获得多种多样的实验结果，其操作便捷性及提供数据的广泛性均极为出色。说到这，小编都有点嫉妒Dr. Gilkes团队的学生了，毕竟曾经的小编想做活细胞实验都是奢望呀，更何况是低氧模型的细胞追踪啦~其实，低氧和氧感知研究还涉及到更多的实验类型，比如氧耗速率检测、氧应激检测、血管生成检测、信号通路研究相关检测、药物筛选方案等等，基于Cytation和Lionheart的图像采集、分析系统在这些领域都积累了丰富的应用，如果有感兴趣的童鞋可以随时和我们联系，或者持续关注我们的后续更新~

近年来，科研高校实验室在生物医药、新能源和新材料等领域不断取得进展。在这些领域中，很多化学反应对实验过程中的水分和氧含量要求十分严格，比如 Buchwald-Hartwig 偶联反应；也有一些化合物和试剂对空气中的水分和氧气极为敏感。科研工作者为了能够高效的开展研究，必须借助特殊的设备和技术来进行无水无氧操作。如果操作不当，即便反应路径和条件设计得当，也可能无法得到期望的产物。因此，无水无氧技术在科学研究中占据了重要位置，已经得到了广泛应用。目前，无水无氧操作主要有以下三种方法：高真空线操作（Vacuum-line）：适用于对无水无氧条件要求不是很高的体系，通过直接用惰性气体置换反应体系中的空气，这种方法简单实用，适用于多种常规反应，是最常见的保护方式。Schlenk 线操作：在需要进行无水无氧的回流、蒸馏和过滤等操作时，使用 Schlenk 线技术较为便捷。手套箱操作（Glove-box）：对于需要称量、物料转移、稀释和过滤等更为复杂的操作体系，通常在充满惰性气体的手套箱中进行。手套箱已在科研实验室中被应用在有机合成、OLED 封装、锂电池制作与研究、对水氧敏感的试剂的存储与分装以及生物领域如厌氧菌培养、细胞低氧培养等方面[1] 。XmartChem智能合成工作站（手套箱工站）晶泰科技将自动化技术与手套箱有机结合，研发的机器人工作站系列——XmartChem 智能合成工作站（手套箱工站），自动完成合成实验中投料、反应、产物稀释、过滤全过程，实现无水无氧操作体系下化学合成实验操作流程自动化，专门为化学人员研发的软件系统 ，直观易用。突破高通量合成筛选的瓶颈，降低操作门槛，提高实验的效率和安全性，增加科学研究产出。● 产品特点&bull 无水无氧操作体系：具备高效的气体净化系统，O2 & H2O 1ppm；&bull 高通量全自动：自动化完成合成实验中投料、反应、产物稀释、过滤全过程，突破高通量合成筛选的瓶颈，降低操作门槛，提质增效；&bull 人机协作 ：系统高效稳定，7×24 小时不间断安全运行；&bull 信息溯源：支持条码扫码，样品信息可溯源；&bull 可视化软件系统：触屏式操作界面，轻松访问资源、方法、任务及数据等功能信息；资源配置界面与设备内部布局完全一致，操作方式直观，充分降低学习成本，易于使用；&bull 简化工作流程：可直接创建或调用模板实验设计流程方法，轻松设定参数，节约时间；支持批量实验参数导入，简化操作；&bull 用户权限设定：软件系统支持划分用户权限，维护实验方法、数据安全；&bull 完整数据记录：实时自动采集反应条件、实验控制以及数据，确保完整实验流程可追溯；&bull 数字化平台：支持接入 LIMS 系统，并兼容晶泰数字化软件（ELN、数字孪生仿真系统等）；&bull 立体仓储物料架：多层自动化控制，适用于多种物料存放；&bull 人工操作位设计：惰性气体手套箱一机多用，用于敏感试剂的人工备料和存储；自动物料架，实验过程中按需补料；&bull 开放集成：支持多种第三方设备如 LC-MS 等集成到工作站，实现产物的快速鉴定；● 工作流程参考文献[1]郑杰，张福平，李玉佳. 无水无氧手套箱在实验室安全运行与管理中的探索与实践[J]. 大学化学，2023，38（10）：300-305.

春节长假即将来临，放假前手套箱应该怎么处理，已经是一个老生常谈的问题了，今天小编还是要再次叮嘱几句~手套箱的处理分为以下两种情况：01如果手套箱内需要一直保持惰性气氛状态（水1ppm，氧1ppm），手套箱应保持开机循环状态。并注意以下几点：更换一瓶满的工作气，防止放假期间工作气用完不能及时更换。检查气路密封性，手套有无破损，舱门是否关好。检查真空泵油是否干净，若不干净应提前更换泵油；并检查油量是否充足，如不充足则需要补油。02如果需要关闭手套箱，请按照以下步骤操作：敏感材料建议用真空包装袋或玻璃容器等密封，然后将敏感材料放入大过渡舱或小过渡舱内（打开过渡舱内舱门前，须抽充过渡舱三次），如果这些材料可以抽真空，请将过渡舱抽至真空状态，如果这些材料不可以抽真空，请关闭好过渡舱的内外舱门，并在外舱门上贴封条。功能界面：关闭循环，如果配有冰箱，需关闭冰箱。参数界面：将手套箱的工作压力范围调整为5mbar到10mbar，静置15分钟。功能界面：关闭所有的功能。触摸屏操作系统可按“功能键”调出功能界面。西门子OP7、OP15、OP17按键操作系统可通过塑料按键控制相应的功能。早期西门子或触摸面板控制系统（通常是1980-1995）的系统，可通过控制界面上的按钮控制相应的功能。关闭总电源，关闭箱体内不需要供电的插线板电源。关闭气瓶减压阀。