白屈红菜碱

【作者】 曲彩红； 陶玲； 黄际薇； 郑琼良； 吴小林； 张振陆；【Author】 QU Cai-hong~1 ,TAO Ling ~1, HUANG Ji-wei ~1,ZHENG Qiong-liang ~1,WU Xiao-lin~1,ZHANG Zhen-lu~2 (1.Department of pharmacy,The Third Hospital of Zhongshan University,Guangdong Guangzhou 510630,China;2.Guangzhou Ertiangtang Pharmaceutical Co.,Ltd,Guangdong Guangzhou 510500,China)【机构】 中山大学附属第三医院； 广州二天堂制药有限公司 广东广州510630； 广东广州510630； 广东广州510500；【摘要】 目的:建立用高效液相色谱法(HPLC)测定白屈菜注射液中白屈菜碱的含量。方法:采用DiamonsilC18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈0.01mol·L-1磷酸二氢钾梯度洗脱,柱温:35℃;流速:1mL·min-1;检测波长290nm。结果:白屈菜碱的线性范围为:0.1068～1.068μg,r=0.9996(n=6),平均回收率为99.12%,RSD为1.09%。结论:该方法稳定、结果准确,可作为白屈菜注射液的质量控制方法。 更多还原【Abstract】 OBJECTIVE To establish a method for determining the content of chelidonine ofChelidonium majus injection by HPLC.METHODS Diamonsil C18 4.6 mm×250 mm,5 μm, column was used; acetonitrile-0.01 mol·L-1KH2PO4 as mobile phase; the temperature of column was 35 ℃;flow-rate was 1 mL·min-1; the detection wavelength was 290 nm.RESULTS The linear range of chelidonine was 0.106 8-1.06 8 μg（r=0.999 6,n=6）,the average recovery was 99.12%,RSD was 1.09%.CONC... 更多还原【关键词】 白屈菜注射液； 白屈菜碱； 高效液相色谱法； 【Key words】 Chelidonium majus injection； chelidonine； HPLC； http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/08/201208131426_383493_2352694_3.jpg

食品级白油点击打开链接可广泛作用于食品加工所使用的机器、机械上，如面包的烘培，鸡蛋的保鲜涂膜等等，作用在面包的烘培上时，主要的作用是作脱模剂，又称食品级脱模剂，使用最多的是用于流水线上，在此的主要作用是将产品与生产模具直接隔离并能达到在烘培后易于脱离的加工助剂，直接或间接接触到面包；可以说，食品级白油在面包的烘培加工方面是不可缺少的重要组成部分，缺少食品级白油的面包烘培流水线，工作进度将大大缩减，并且工作效益也会大大缩减，所以，在食品级白油的研究上，这一个行业也都一直在努力研究出更加优秀的食品级白油，使得整个食品加工行业的效益更好！http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/03/201703271115_01_3207872_3.jpg

我将柠檬黄 新红 和笕菜红 三个标样进去，流动相是甲醇-0.02mol/L乙酸铵(15:85),柠檬黄前面出来，后面2个保留时间一直，就叠加在一起了用二极管阵列查看吸收曲线，2者也一致，国标上好象能轻易分开，新红并且也在柠檬黄前面就出来了，请教大家如何分离这2个物质，还有大家做人工色素的流动相梯度是什么http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/01/201101251354_275835_1733487_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/01/201101251355_275836_1733487_3.jpg个看上面2个光谱图，似乎差不多，我原先以为我标样弄混了， 但是看了，一个是固体配的，一个是液体标样直接购买的，没有弄错。。。

[align=center][/align][size=29px]关于食品添加剂甜菜红的研究[/size][size=21px]陈双慧[/size][align=center][font='黑体'][size=20px]摘[/size][/font][font='黑体'][size=20px] [/size][/font][font='黑体'][size=20px]要[/size][/font][/align][align=center][/align][align=left][font='calibri'][size=13px]摘要：[/size][/font][font='calibri'][size=13px]甜菜红(beet root red)亦称甜菜根红，甜菜红色素是以食用红甜菜为原料，通过浸提、分离、浓缩、干燥而成的天然色素，主要成分为甜菜花青素和甜菜黄素。同时甜菜红也是重要的食品添加剂，在食品工业方面应用广泛。[/size][/font][/align][align=left][font='黑体'][size=16px]关键词[/size][/font][size=16px]：食品添加剂，甜菜红，色素提取[/size][/align][align=left][font='华文中宋'][size=18px]引言[/size][/font][/align][align=left] [font='宋体'][size=16px]本位红甜菜起源于欧美，以紫红色的根肉作蔬菜用，是欧洲和美洲一些国家重要的蔬菜之一，在欧美许多国家是传统的普通蔬菜，几乎每日必餐，波兰每年食用红甜菜5[/size][/font][font='宋体'][size=16px]0[/size][/font][font='宋体'][size=16px]多万吨。民间除食用外，还可以药用，几年前，世界卫生组织对人们日常饮食中涉及的各种食品进行了分析和研究，评选出得[/size][/font][font='宋体'][size=16px]13[/size][/font][font='宋体'][size=16px]种最佳蔬菜中就有红甜菜。红甜菜还被美国防癌协会列为30种有防癌作用的果蔬之一。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]由于人民生活水平的提高，人们不但对蔬菜的种类、品质、风味的要求提高，而且向营养型、保健型、药用型方向转变，营养丰富、有益健康、有预防和治某些疾病的蔬菜受到广大消费者的青睐。红甜菜的营养价值和药用价值满足了人们对这类蔬菜的需求。[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]本文主要从甜菜红的理化性质，生产方法，限量，检测，标准，以及目前的应用这几个方面出发，去详细介绍有关于甜菜红色素的内容。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=20px]1.[/size][/font][font='宋体'][size=20px]甜菜红的理化性质[/size][/font][font='宋体'][size=20px][[/size][/font][font='宋体'][size=20px]1][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]甜菜红色素是以食用红甜菜为原料，通过浸提、分离、浓缩、干燥而成的天然色素，主要成分为甜菜花青素，甜菜红为红紫至深紫色液体、粉末状，易溶于水、水溶液呈现红色至紫红色，色泽鲜艳。其色泽鲜艳，着色均匀，无异味，具有较好的着色功能。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]甜菜红色素广泛存在于藜科、苋科、仙人掌科、商陆科等多种植物中，其中藜科最为人们熟悉的是红甜菜。甜菜红色素就是从藜科植物红甜菜中提取的水溶性天然食用色素，属于吡啶类衍生物，基本发色团为1,7-二偶氮庚甲碱。是红甜菜中所有的有色化合物的总称，由红色的甜菜花青和黄色的甜菜黄素所组成。甜菜花青的主要成分为甜菜苷（Beranin），占红色素的75%～95%，其尚有异甜菜苷、前甜菜苷和异前甜菜苷。甜菜黄素包括甜菜黄素Ⅰ和甜菜黄素Ⅱ[/size][/font][font='宋体'][size=16px][[/size][/font][font='宋体'][size=16px]2][/size][/font][font='宋体'][size=16px]。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]甜菜红色素广泛应用于饮料、冰淇淋、部分酒类、糖果、糕点、肉制品等多种食品的着色。对食品的着色性好，且由于绝大多数食品的pH值都在3.0~7.0之间，而其颜色在此pH值区间不发生变化，故用甜菜红作为食品着色剂时，食品的色泽不会受pH值的影响。在生产低水分活性食品时，使用甜菜红可收到满意的染着和色泽持久的效果。与其他着色剂比较，在食品加工和储存过程中，甜菜红是比较稳定的。甜菜红能使食品着成杨梅或玫瑰的鲜红颜色。维生素C存在时略稳定，在多糖存在时可防止褪色，应用于不受热和光影响的冷果，特别是酸乳酪、乳饮料和草莓饮料,软冰及任何食品。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]在用甜菜红色素与壳寡糖清除香肠中亚硝酸盐的研究发现，壳聚糖有良好的水分保持能力，但清除烟硝酸盐的能力比较热。而甜菜红色素具有很好的清除亚硝酸盐的能力，因此在生产香肠过程中，减少壳聚糖一般的用量，用甜菜红色素来加以补充，即可作为香肠的着色剂，又可作为亚硝酸盐的清除剂。[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=16px]甜菜红又称甜菜紫宁，甜菜苷（用糊精稀释的红甜菜根的提取物）[/size][/font][font='calibri'][size=16px],[/size][/font][font='calibri'][size=16px]英文名称为[/size][/font][font='calibri'][size=16px]BETANIN[/size][/font][font='calibri'][size=16px]。其分子式为[/size][/font][font='calibri'][size=16px]C12H26N2O13[/size][/font][font='宋体'][size=16px]。分子量为[/size][/font][font='宋体'][size=16px]550.47[/size][/font][font='宋体'][size=16px]；C[/size][/font][font='宋体'][size=16px]AS[/size][/font][font='宋体'][size=16px]号为7[/size][/font][font='宋体'][size=16px]659-95-2 EINECS[/size][/font][font='宋体'][size=16px]号为2[/size][/font][font='宋体'][size=16px]31-628-5[/size][/font][font='宋体'][size=16px]，其分类类别可分至食品添加剂 着色剂 食用色素(着色剂) 食用色素与护色剂 食用色素类 中药对照品 Miscellaneous Natural Products等范围中去。分子结构如图1所示：[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]图[/size][/font][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107161932279666_4892_1608728_3.png[/img][font='宋体'][size=16px]1[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]甜菜红的分子结构示意图[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]对于其物理性质而言：甜菜红色素易溶于水和含水溶剂，为水溶性色素，难溶于醋酸、丙二醇，不溶于无水乙醇、甘油、丙酮、氯仿、油脂、乙醚等有机溶剂。甜菜红色素呈紫红色的液体、粉末或颗粒状固体，但其色调受PH值影响，当PH值在3.0-7.0时为红色，且较稳定；PH在4.0-5.0时最稳定；当PH＜4.0或PH＞Chemicalbook7.0，颜色由红色变成紫色；当PH＞10.0时，甜菜红色素中的甜菜色苷转化为甜菜黄质，溶液颜色迅速变黄，由此说明甜菜红色素在酸性和中性条件下较稳定。由于绝大多数食品的PH值都在3.0-7.0之间，而甜菜苷的颜色在此PH范围内不会发生变化，所以含有甜菜苷食品，其颜色一般不受PH值影响。下表列出了其他一些有关于甜菜红的物理性质（见图2）：[/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107161932279523_7824_1608728_3.png[/img][font='宋体'][size=16px]图2[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]其他有关甜菜红的物理性质[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]对于其化学性质而言：红色至紫红色膏状或粉末，无臭，水溶液呈红色至紫红色。可溶于水，不溶于乙醇。碱性溶液中变黄，Ph值3～7比较稳定；染着性好，但耐热性较差；光和氧会促进其降解。Ph值5.0时，半衰期为：1150min±100min(25℃)，14.5min±2min(100℃)；最大吸收波长为537~538nm。ADI不需特殊规定(FAO/WHO，1994)。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]（以上内容来源于Chemicalbook[/size][/font][font='宋体'][size=16px]查询得到）[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=20px]2.[/size][/font][font='宋体'][size=20px]甜菜红的生产方法[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]目前比较普及的工艺方法是应用含水有机溶剂或水提取[/size][/font][font='宋体'][size=16px][[/size][/font][font='宋体'][size=16px]3][/size][/font][font='宋体'][size=16px]，经硅藻土过滤纯化，进一步精制浓缩得到甜菜红色素。卢秉福、武成荣等研究对清洗后的红甜菜原料在90℃条件下热烫15min，切丝后加水在室温下萃取。该过程采用热烫工艺钝化甜菜中的多酚氧化酶及食用甜菜花青褪色酶，减少加工过程中的氧化，增加甜菜红色素的稳定性，同时在室温条件下浸提，克服了以往高温提取过程中甜菜红色素的损失。陈连文等人研究提出红甜菜在室温下用稀酸溶液作为提取剂或在60℃用水作为提取剂提取效果较好。另外有部分实验及生产中采用纯水配置的柠檬酸溶液对红甜菜浸提，同样能达到理想的浸提效果。王长泉等发现如果甜菜中含有叶绿素，可用含水的甲醇预提，能有效的纯化甜菜素，同时为增加色素的稳定性和防止多酚氧化酶对色素的氧化，可在提取液中添加适量的抗坏血酸。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]国外近年来甜菜红提取有了一些新的技术，利用低压直流电场和高压脉冲电场进行提取实验。Zvitov等人在场强为40V/cm的直流电场中进行甜菜红色素的提取；Mustafa Fincan等人用脉冲电场进行提取试验并建立提取的数学模型。以上两种提取方法在常温下进行，减少了高温工艺下的损失，但因脉冲提取对脉冲波及发生器的要求较高，设备投入及维护成本较高，限制了其在生产中的拓宽应用。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]除此之外的生产方法还有：[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]由食用红甜菜(Betavulgarisvar.rubra)的根茎(俗称紫菜头)，用水萃取，萃取前宜先用2%亚硫酸氢钠液在95～98℃热烫10～15min以灭酶，提取液经浓缩得深红色浆料或红色粉末。制造过程中应除去天然存在的盐类、糖类及蛋白质。可添加食品级酸(如柠檬酸、乳酸、L-抗坏血酸)作为pH调节剂和稳定剂及载体(如麦芽糊精)和粉状成品的填充剂等。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]鲜甜菜在80℃的水中加热10min，切成3~5mm丝状后在室温下的水中浸泡40min，袋滤并压榨后滤渣再浸提一次，第二次滤液作第一次浸提用。滤液减压浓缩至1/3体积(含干物质40%左右)，再喷雾(或真空)干燥得粉末产品，收率为60，含甜菜苷0.45%～0.8%。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]将红甜菜清洗去皮切块后与提取溶剂混合，用匀浆机匀浆进行提取，将提取液调节pH值后用大孔吸附树脂进行吸附，吸附后的大孔吸附树脂用去离子水冲洗至目测洗液无颜色，然后用乙醇溶液对大孔吸附树脂进行洗脱，洗脱液进行减压浓缩后得到浓缩液，将浓缩液进行干燥得到甜菜红素。本发明方法具有工艺流程简单，溶剂用量少，所用溶剂无毒或低毒、易于工业化生产等优点，[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=20px]3.[/size][/font][font='宋体'][size=20px]甜菜红色素的测定[/size][/font][font='宋体'][size=20px][[/size][/font][font='宋体'][size=20px]4][/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]高效液相色谱法操作条件温和，对复杂混合物全波或大部分可出峰。因此能分离测定复杂混合物，且可以采用的流动相种类多，极性调整范围宽，选择余地大，故可以较准确的进行定性、定量分析。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]利用反相高效液相色谱法，选择甲醇-[/size][/font][font='宋体'][size=16px]Ha[/size][/font][font='宋体'][size=16px]c为流动相，紫外检测波长为5[/size][/font][font='宋体'][size=16px]35[/size][/font][font='宋体'][size=16px]nm，流速为1[/size][/font][font='宋体'][size=16px].0[/size][/font][font='宋体'][size=16px]ml[/size][/font][font='宋体'][size=16px]/[/size][/font][font='宋体'][size=16px]min，测定食品中甜菜红色素的含量。结果表明：甜菜红对照品在0[/size][/font][font='宋体'][size=16px].06213~3.1064[/size][/font][font='宋体'][size=16px]mg/[/size][/font][font='宋体'][size=16px]ml[/size][/font][font='宋体'][size=16px]内线性关系良好，r[/size][/font][font='宋体'][size=16px]=0.9999[/size][/font][font='宋体'][size=16px]，方法检出限为8μg/ml。加样回收率为9[/size][/font][font='宋体'][size=16px]7.58-102[/size][/font][font='宋体'][size=16px].[/size][/font][font='宋体'][size=16px]10%[/size][/font][font='宋体'][size=16px]，R[/size][/font][font='宋体'][size=16px]SD[/size][/font][font='宋体'][size=16px]为2[/size][/font][font='宋体'][size=16px].26%[/size][/font][font='宋体'][size=16px]。稳定性良好。本方法操作简便、灵敏、可靠、适用于甜菜红色素的分析测定。[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=20px]4.[/size][/font][font='宋体'][size=20px]甜菜红的食品安全国家标准[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]在中华人民共和国国家标准中的食品安全国家标准对于甜菜红有如下要求（见图3，摘自食品安全国家标准）：[/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107161932281486_502_1608728_3.png[/img][font='宋体'][size=16px]图3[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]感官要求和理化指标[/size][/font][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107161932284080_2215_1608728_3.png[/img][font='宋体'][size=16px]国家安全标准对于其检验方法也有规定，鉴别检验方法如下（图4）：[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]图4[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][font='宋体'][size=16px]鉴别试验[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]除此之外还有其他的测定标准[/size][/font][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107161932285155_8286_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/07/202107161932285207_9947_1608728_3.png[/img][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][/align][align=left][font='宋体'][size=20px]5.[/size][/font][font='宋体'][size=20px]甜菜红的应用研究[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]目前食用甜菜色素的运用十分普遍，尤其是国外对甜菜色素的提取和使用，中国对甜菜红素的研究目前还处于初级阶段。虽然民间很早就有用红甜菜汁食品着色的记录，但在食品染色市场甜菜色素的应用率仍然很低，合成色素占有绝对的优势地位，所以天然甜菜色素甚至全部天然色素的研究任重而道远。从 1938年从甜菜的根中制备出甜菜红甙开始，甜菜色素在欧美日已经完全商品化。1960年美国立法允许红甜菜汁或甜菜粉作为食品着色剂，FAO/WHO食品添加剂联合委员会规定甜菜红色素是由红甜菜所得的压榨液，浓缩物或是粉末，欧美和日本都已制定了甜菜红色素的检测标准.[/size][/font][/align][align=left][font='宋体'][size=16px]甜菜红色素是从食用蔬菜-红甜菜中提取的天然色素[/size][/font][font='宋体'][size=16px][[/size][/font][font='宋体'][size=16px]5][/size][/font][font='宋体'][size=16px]，所以无毒、无副作用，色泽鲜艳且含有人体建成、新陈代谢和生长发育所必须的营养成分，所以广泛应用于各种饮料、果味粉、果汁路、汽水、糖果、糕点、夹心、冰淇淋、罐头、浓缩果汁、雪糕、果冻、香肠食品的着色，及增加了食品的美好外观有提高了食品的营养价值。[/size][/font][/align][align=left][font='cambria'][size=16px]吕晓玲等人对甜菜红色素主要成分抗氧化能力进行了研究，并最终确定甜菜红色素的主要抗氧化部分为红色部分，及甜菜红苷。Tesoriere 等（2004， 2005）发现食用含有甜菜素的刺梨果实后, 可以明显降低过氧化胁迫造成的脂质损害, 提高人体的抗氧化水平；离体红血球在甜菜素溶液中培养一段时间也可以明显延迟由于氧化剂异丙基苯过氧化氢物（cumene hydroperoxide）造成的溶血作用。其次，甜菜红色素中含有甜菜碱，它对肝脏疾病（如慢性肝炎、肝硬化、中毒性肝炎、代谢性肝脏病及胆道疾病引起的肝功能障碍等）有一定的疗效。所以甜菜红色素不仅可以美化特殊人群药品的外观有利于服用；在药品的区分方面也可以用甜菜红色素代替人工合成色素来对药品进行很好的区分，而且在人体抗氧化方面和肝脏疾病的治疗方面也有不可磨灭的作用。另外，Kapadia等（1996）发现，甜菜根对老鼠的皮肤癌和肺癌具有显著的抑制作用。由于甜菜红色素具有以上作用，所以可以用于药品、保健品等的研制开发。[/size][/font][/align][align=left][size=16px]许多化妆品的生产需要添加色素，如唇膏、洗发水、染发剂等，由于国内化妆品生产过程中添加的色素大多是合成色素，所以一些皮肤比较敏感的人群在 使用的过程中会出现过敏症状，对于他们来说天然色素无疑是一个很好的选择；而甜菜红色素是天然色素，无毒无害，而且还具有医疗和保健功能，因此用于有色化妆品、抗衰老化妆品的生产，具有较大的开发潜力[/size][size=16px]。[/size][/align][align=left][font='宋体'][size=20px]6.[/size][/font][font='宋体'][size=20px]总结与展望[/size][/font][font='宋体'][size=16px] [/size][/font][/align][align=left][size=16px]从甜菜红色素在红甜菜中提取出来开始，甜菜色素研究已经进行了70多年，天然色素的使用率越来越高。科学界关注的焦点从提取到纯化，从植物精制到化学合成，从简单的萃取到色谱、高效液相色谱和质谱以及更加先进的仪器的使用，研究方法逐渐丰富而科学，研究范围越来越大，涉及的研究领域也渐渐趋于宽广。目前国内甜菜色素的研究和加工整体趋于落后，提取、纯化和稳定性方面的研究居多，深入研究偏少，分析方法趋同，研究范围狭窄。希望中国甜菜色素研究：（1）丰富研究方法，提高加工纯化效率；（2）扩大研究范围，从更大范围的植物中获得甜菜色素；（3）拓展研究领域，深入研究甜菜色素的利用价值；（4）天然甜菜色素在中国食品、医药乃至更加广阔的领域得到普遍的开发利用。[/size]参考文献[/align][align=left][font='calibri'][size=13px][1]于明,张谦,过利敏,王成.甜菜红素理化性质及其稳定性研究[J].新疆农业科学,2002(06):331-334.[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][[/size][/font][font='calibri'][size=13px]2[/size][/font][font='calibri'][size=13px]]高彦祥,刘璇.甜菜红色素研究进展[J].中国食品添加剂,2006(01):65-70.[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][[/size][/font][font='calibri'][size=13px]3[/size][/font][font='calibri'][size=13px]]王成. 甜菜红色素的提取工艺及其理化性质研究[D].南京工业大学,2003.[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][[/size][/font][font='calibri'][size=13px]4[/size][/font][font='calibri'][size=13px]]孙世萍,洪成林,代斌,张苗. 甜菜红色素测定方法的建立[A]. 中国化工学会、化学工程专业委员会、生物化工专业委员会.第一届全国化学工程与生物化工年会论文摘要集(下)[C].中国化工学会、化学工程专业委员会、生物化工专业委员会:中国化工学会,2004:1.[/size][/font][/align][align=left][font='calibri'][size=13px][[/size][/font][font='calibri'][size=13px]5[/size][/font][font='calibri'][size=13px]]高彦祥,刘璇.甜菜红色素研究进展[J].中国食品添加剂,2006(01):65-70.[/size][/font][/align]

[align=center][b][font=Arial][font=宋体]大豆蛋白豆皮中诱惑红的检测分析[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial][font=宋体]背景[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]诱惑红，食用合成红色色素，食品中加入诱惑红会使样品色泽更好，但当前食品中乱用色素的现象较为普遍，食品安全国家标准食品添加剂使用标准[/font]GB2760-2014[font=宋体]对食品中诱惑红的使用量进行了规定。[/font][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial][font=宋体]适用范围[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial] [/font][/b][font=Arial][font=宋体]参照[/font]GB5009.35-2016 [font=宋体]食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定方法，进行大豆蛋白豆皮中诱惑红的测定。[/font][/font][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial][font=宋体]实验步骤[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial]1. [/font][b][font=Arial][font=宋体]试剂与仪器[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]甲醇：色谱纯[/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]正己烷：色谱纯[/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]无水乙醇[/font]-[font=宋体]氨水[/font][font=Arial]-[/font][font=宋体]水溶液：[/font][font=Arial]7[/font][font=宋体]：[/font][font=Arial]2:1[/font][font=宋体]体积比[/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]诱惑红标准品[/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]离心机[/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]涡旋混合器[/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]（紫外检测器）[/font][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial]2.[font=宋体]样品制备[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial]2. 1[font=宋体]提取[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]取[/font]1.00[/font][font=宋体] [/font][font=Arial]g[font=宋体]样品，加入[/font][font=Arial]1[/font][/font][font=宋体][font=Arial]0 mL[/font][/font][font=Arial][font=宋体]正己烷于涡旋混合器混匀，离心，除去正己烷层，加入[/font]2[/font][font=宋体][font=Arial]5 mL[/font][/font][font=Arial][font=宋体]无水乙醇氨水水溶液（[/font]7+2+1[font=宋体]）超声提取[/font][font=Arial]20[/font][/font][font=宋体] [font=Arial]min[/font][/font][font=Arial][font=宋体]，离心，取上层液，于[/font]40[/font][font=宋体] [/font][font=Arial][font=Arial]℃[/font][font=宋体]旋转蒸发至[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5 mL[/font][/font][font=Arial][font=宋体]左右，调[/font]pH[font=宋体]至[/font][font=Arial]6[/font][font=宋体]，待净化。[/font][/font][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial]2.2[font=宋体]净化[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]固相萃取小柱：[/font]SelectCore WAX 150[/font][font=宋体] [/font][font=Arial]mg/[/font][font=宋体][font=Arial]6 mL[/font][/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]上样：[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5 mL[/font][/font][font=Arial][font=宋体]甲醇，[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5 mL[/font][/font][font=Arial][font=宋体]水活化小柱，上样液，[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5 mL[/font][/font][font=Arial][font=宋体]水，[/font][/font][font=宋体][font=Arial]5 mL[/font][/font][font=Arial][font=宋体]甲醇淋洗，[/font]1[/font][font=宋体][font=Arial]0 mL[/font][/font][font=Arial]2%[font=宋体]氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，用[/font][font=Arial]1[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Arial]m[/font][font=宋体][font=Arial]L[/font][/font][font=Arial][font=宋体]水溶解，过[/font]0.22[/font][font=宋体] [/font][font=Arial]μ[/font][font=Arial]m[font=宋体]滤膜，上机检测[/font][/font][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial]3.[font=宋体][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]条件[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]色谱柱：[/font]ChromCore C18 5 μm, 4.6×250 mm[/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]流动相：甲醇：[/font]0.02[/font][font=宋体] [/font][font=Arial]mol/L[font=宋体]乙酸铵溶液梯度洗脱[/font][/font][/align][align=left][/align][table][tr][td][align=center][font=Arial][font=宋体]时间[/font][/font][font=宋体][font=Arial] [/font][font=Arial]min[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial][font=宋体]甲醇[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]0.02[/font][font=宋体][font=Arial] [/font][/font][font=Arial]mol/L[font=宋体]乙酸铵溶液[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Arial]0[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]5[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]95[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Arial]8[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]20[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]80[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Arial]17[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]60[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]40[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Arial]19[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]60[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]40[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Arial]20[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]5[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]95[/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Arial]26[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]5[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]95[/font][/align][/td][/tr][/table][align=left][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]检测波长：[/font]254[/font][font=宋体] [/font][font=Arial]nm[/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]流速：[/font]1.[/font][font=宋体][font=Arial]0 mL[/font][/font][font=Arial]/[/font][font=宋体] [font=Arial]min[/font][/font][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]柱温：[/font]30℃[/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]进样量：[/font]10[/font][font=Arial]μ[/font][font=宋体][font=Arial]L[/font][/font][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial][font=宋体]实验谱图及回收率数据[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][align=left][img=,553,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081620089951_3805_3237657_3.jpg!w690x246.jpg[/img][/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial] [font=宋体]标准品[/font]2[/font][font=宋体] [/font][font=Arial]mg/kg[/font][/align][align=left][/align][align=left][img=,553,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081620213963_977_3237657_3.jpg!w690x257.jpg[/img][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial] [/font][/b][font=Arial][font=宋体]样品[/font][/font][/align][align=left][/align][align=left][img=,553,]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/02/202302081620333198_4423_3237657_3.jpg!w690x257.jpg[/img][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial] [/font][/b][font=Arial] [font=宋体]样品加标[/font]2[/font][font=宋体] [/font][font=Arial]mg/kg[/font][/align][align=left][/align][b][/b][align=left][b][font=Arial] [/font][font=Arial] [/font][font=Arial] [font=宋体]加标回收率数据[/font][/font][/b][/align][align=left][/align][table][tr][td][align=center][font=Arial][font=宋体]保留时间[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial][font=宋体]化合物中文[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial][font=宋体]化合物英文[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial][font=宋体]加标量[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial][font=宋体]测定值[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial][font=宋体]回收率[/font][/font][/align][/td][/tr][tr][td][align=center][font=Arial]16.92[/font][font=宋体][font=Arial] [/font][font=Arial]min[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial][font=宋体]诱惑红[/font][/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]allura red[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]2[/font][font=宋体][font=Arial] [/font][/font][font=Arial]mg/kg[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]1.72[/font][font=宋体][font=Arial] [/font][/font][font=Arial]mg/kg[/font][/align][/td][td][align=center][font=Arial]86.0%[/font][/align][/td][/tr][/table][align=left][b][font=Arial][font=宋体]实验结果[/font][/font][/b][/align][font=Arial][/font][align=left][font=宋体]大豆蛋白豆皮中诱惑红，用氨化乙醇水溶液提取，固相萃取小柱净化，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]检测，其回收率[/font]80%[font=宋体]，简单快速，便于检测。[/font][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]公司名称：[/font][/font][font=Arial][font=宋体]山东时进检测服务有限公司[/font][/font][/align][font=Arial][/font][align=left][font=Arial][font=宋体]色谱柱信息：[/font][/font][font=Arial]ChromCore C18 5μm, 4.6×250mm[/font][/align][font=Arial][/font][align=left]SelectCore WAX 150mg/6mL[/align][align=left][/align][font=Arial][/font][align=left] [/align]

食品中苏丹红染料检测的固相萃取方法一、实验目的本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。 二、实验目标物 苏丹红Ⅰ(CAS:842-07-9),苏丹红Ⅱ（CAS:3118-97-6）,苏丹红Ⅲ（CAS:85-86-9），苏丹红Ⅳ（CAS:85-83-6）三、应用范围本方法适用于食品中苏丹红染料的HPLC检测及确证。 四、参考标准 推荐性国家标准《GB/T 19681-2005 食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法》五、实验材料 ALN固相萃取柱3mL/500mg。六、实验方法 1、样品提取 称取均质试样2.0ｇ试样（精确至0.001ｇ）于50mL离心管中，加入20ｍＬ正己烷，超声5min，过滤，用10mL正己烷洗涤残渣数次，至洗出液无色，合并正己烷液，用旋转蒸发仪浓缩至5mL以下。 2、SPE柱活化 向氧化铝柱小柱中加入6.0ｍＬ正己烷活化。 3、上样和洗脱在柱中保持正己烷液面为2mm左右时上样，立即倒入上述待净化溶液，用正己烷少量多次淋洗浓缩瓶，一并注入层析柱，待样液完全流出后，视样品中含油杂质的多少用10-30ml正己烷洗柱，直至流出液无色，弃去全部正己烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60ml洗脱，并收集洗脱液。 4、重新溶解 50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用丙酮转移并定容至5ml，经0.45um有机滤膜过滤后上液相色谱仪测定。 5、HPLC条件色谱柱：XR-ODS Ⅱ C18（2.0mm ×75mm×2.2μm）流动相：A；B：丙酮=80:20] 梯度洗脱表1 梯度洗脱条件[table=395][tr][td] 时间/min [/td][td] B/% [/td][td] A/% [/td][/tr][tr][td] 0.00 [/td][td] 25 [/td][td] 75 [/td][/tr][tr][td] 1.50 [/td][td] 25 [/td][td] 75 [/td][/tr][tr][td] 4.00 [/td][td] 100 [/td][td] 0 [/td][/tr][tr][td] 8.00 [/td][td] 100 [/td][td] 0 [/td][/tr][tr][td] 8.01 [/td][td] 25 [/td][td] 75 [/td][/tr][tr][td] 13.00 [/td][td] Stop [/td][td] [/td][/tr][/table] 流速：1mL/min柱温：30℃进样体积:10μl七、实验结果1、10ppb甜橙基质中苏丹红染料的添加回收结果 加标回收率均大于80%，RSD值小于5，符合标准要求。表2 10ppb甜橙基质中苏丹红染料的添加回收结果[table][tr][td] 名称 [/td][td] 1（%） [/td][td] 2（%） [/td][td] 3（%） [/td][td] 平均回收率（%） [/td][td] RSD（%） [/td][/tr][tr][td] 苏丹红Ⅰ [/td][td] 90.24 [/td][td] 95.67 [/td][td] 94.35 [/td][td] 93.42 [/td][td] 3.03 [/td][/tr][tr][td] 苏丹红Ⅱ [/td][td] 92.56 [/td][td] 95.98 [/td][td] 99.13 [/td][td] 95.89 [/td][td] 3.43 [/td][/tr][tr][td] 苏丹红Ⅲ [/td][td] 95.49 [/td][td] 99.84 [/td][td] 90.19 [/td][td] 95.17 [/td][td] 5.08 [/td][/tr][tr][td] 苏丹红Ⅳ [/td][td] 90.59 [/td][td] 95.16 [/td][td] 101.23 [/td][td] 95.66 [/td][td] 5.58 [/td][/tr][/table]2、 空白样品添加苏丹红染料残留物色谱图[img=,611,356]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508141704_560823_3310_3.jpg[/img]

近期，我们从奶茶店抽的香芋奶茶里面检出苋菜红0.001g/kg，从2760看，苋菜红在饮料里面有限量的只有果蔬汁类饮料、碳酸饮料、风味饮料（限果味饮料）、固体饮料等几样，而香芋奶茶我认为不属于这几类，应该不得使用才对，但是我同事觉得香芋奶茶里的香芋会不会和果蔬搭边，或者跟固体饮料搭边，所以想问问各位老师，香芋奶茶到底能不能添加苋菜红呢？[img=,690,191]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/12/202112021107460698_3790_3071080_3.png!w690x191.jpg[/img]

苏丹红测试小插曲：都是标准惹得祸毛毛儿序 源于目前的热点话题---食品安全，实验室拟开展食品中苏丹红Ⅰ—Ⅳ的检测工作，标样的请购已经是半年前的事情，因为计划不如变化快，诸多临时情况需要及时处理，因此开展此项目已经是标样到货的半年后。 拟开始项目工作前，首先着手试剂、标样的准备工作，一切就绪后，就开始具体实验部分。正文1、首先是标准溶液的配制 参照国标GB/T 19681-2005食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法中标准溶液的配置方法进行配置：分别称取苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ各10mg，用乙醚溶解后再用正己烷定容至250ml。根据此标准介绍的方法，我们首先配制各种物质的单独贮备液，然后再根据实际需要各吸取适量标准贮备液或混合，用正己烷定容，配制成相应的标准供试液和标准混合液，摇匀，待测。2、上机测试：色谱条件色谱柱：Ultimate XB-C18，4.6mm*250mm，5μm，月旭材料科技（上海）提供，或性能相当者；流量： 1.0ml/min； 柱温： 30℃；检测仪器：高效液相色谱仪，江苏天瑞仪器股份有限公司； 检测波长： 500nm；进样量：10ul；流动相A： 0.1%甲酸的水溶液:乙腈=85：15；流动相B： 0.1%甲酸的乙腈溶液：丙酮=80：20；梯度模式如表1所示：表1.梯度模式时间/min010253235 流动相A比例/%25250025流动相B比例/%757510010075首先进行单峰定性，以图说明：图1为苏丹红Ⅰ在此色谱条件下的色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112150948_338272_1639959_3.jpg图1：苏丹红Ⅰ标准色谱图图2为苏丹红Ⅱ在此色谱条件下的色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112150949_338276_1639959_3.jpg图2：苏丹红Ⅱ标准色谱图图3为苏丹红Ⅲ在此色谱条件下的色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112150950_338277_1639959_3.jpg图3：苏丹红Ⅲ标准色谱图图4为苏丹红Ⅳ在此色谱条件下的色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/12/201112150950_338278_1639959_3.jpg图4：苏丹红Ⅳ标准色谱图通过对各个物质的单标溶液进行定性的时候，问题出来了，苏丹红Ⅲ在此色谱条件下出现了两个大峰，这种情况我还是第一次碰到，然后我们查到当时购买的标样证书，此标样是上海百灵威提供的美国Accustandard，Inc.公司产品，Catalog No:DYE-022N，CAS#:85-86-9，Lot：15547，purity%：100（GC/MS），当时看到这个标准品证书的时候，我们并没有首先怀疑是标样的问题，但是我们试着改变了好几种色谱条件，溶解溶剂，始终是同样的现象：苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ都是出一个单峰，而

[align=center]蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、[/align][align=center]敌敌畏残留的快速检测[/align][align=center]1　范围[/align]本方法规定了蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速检测方法。本方法适用于油菜、菠菜、芹菜、韭菜等蔬菜中敌百虫、丙溴磷、灭多威、克百威、敌敌畏残留的快速测定。[align=center]酶抑制（率）法（分光光度法）[/align]2　原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物（乙酰胆碱）水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率。3　试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。3.1　试剂3.1.1　丙酮（CH[sub]3[/sub]COCH[sub]3[/sub]）。3.1.2　磷酸氢二钾（K[sub]2[/sub]HPO[sub]4[/sub]）。3.1.3　磷酸二氢钾（KH[sub]2[/sub]PO[sub]4[/sub]）。3.1.4　5,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（C[sub]14[/sub]H[sub]8[/sub]N[sub]2[/sub]O[sub]8[/sub]S[sub]2[/sub]）。3.1.5　碳酸氢钠（NaHCO[sub]3[/sub]）。3.1.6　碘化乙酰硫代胆碱（ C[sub]7[/sub]H[sub]16[/sub]INOS）。3.1.7　pH8.0缓冲溶液：分别称取11.9 g无水磷酸氢二钾及3.2 g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL水中，混匀。3.1.8　显色剂：分别取160 mg 5,5-二硫代双（2-硝基苯甲酸）（DTNB）和15.6 mg碳酸氢钠，用20 mL缓冲溶液溶解，4 ℃冰箱中保存。3.1.9　底物：取125 mg碘化乙酰硫代胆碱，加15 mL蒸馏水溶解，摇匀后置于4 ℃冰箱中保存备用。保存期不超过两周。3.1.10　乙酰胆碱酯酶：4 ℃冰箱中保存备用。3.2　参考物质3种有机磷和2种氨基甲酸酯类农药参考物质的中文名称、英文名称、CAS登录号、分子式、相对分子质量见表1，纯度均≥98%。[align=center]表1 有机磷和氨基甲酸酯类参考物质中文名称、英文名称、[/align][align=center]CAS登录号、分子式、相对分子质量[/align] [table][tr][td] [align=center]序号[/align] [/td][td] [align=center]中文名称[/align] [/td][td] [align=center]英文名称[/align] [/td][td] [align=center]CAS登录号[/align] [/td][td] [align=center]分子式[/align] [/td][td] [align=center]相对分子质量[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]1[/align] [/td][td] [align=center]克百威[/align] [/td][td] [align=center]Carbofuran[/align] [/td][td] [align=center]1563-66-2[/align] [/td][td] [align=center]C[sub]12[/sub]H[sub]15[/sub]NO[sub]3[/sub][/align] [/td][td] [align=center]221.25[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]2[/align] [/td][td] [align=center]灭多威[/align] [/td][td] [align=center]Methomyl[/align] [/td][td] [align=center]59669-26-0[/align] [/td][td] [align=center]C[sub]5[/sub]H[sub]10[/sub]N[sub]2[/sub]O[sub]2[/sub]S[/align] [/td][td] [align=center]162.23[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]3[/align] [/td][td] [align=center]丙溴磷[/align] [/td][td] [align=center]profenofos[/align] [/td][td] [align=center] 41198-08-7[/align] [/td][td] [align=center]C[sub]11[/sub]H[sub]15[/sub]BrClO[sub]3[/sub]PS[/align] [/td][td] [align=center]373.63[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]4[/align] [/td][td] [align=center]敌敌畏[/align] [/td][td] [align=center]Dichlorvos[/align] [/td][td] [align=center]62-73-7[/align] [/td][td] [align=center] C[sub]4[/sub]H[sub]7[/sub]Cl[sub]2[/sub]O[sub]4[/sub]P [/align] [/td][td] [align=center]220.98[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]5[/align] [/td][td] [align=center]敌百虫[/align] [/td][td] [align=center]Dipterex[/align] [/td][td] [align=center]52-68-6 [/align] [/td][td] [align=center]C[sub]4[/sub]H[sub]8[/sub]Cl[sub]3[/sub]O[sub]4[/sub]P[/align] [/td][td] [align=center]257.44[/align] [/td][/tr][/table]3.3　标准溶液的配制3.3.1　克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准储备液（1000 μg/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。3.3.2　丙溴磷标准储备液（100 μg/mL）：冷藏、避光、干燥条件下保存。3.3.3　克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫标准中间液A（100 μg/mL）：精密移取上述标准储备液（1000 μg/mL）（3.3.1）各1mL，分别置于10mL容量瓶中，用丙酮（3.1.1）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为100μg/mL的标准液A。3.3.4　克百威、灭多威、敌敌畏、敌百虫、丙溴磷标准中间液B（1 μg/mL）：精密移取标准中间液A（100 μg/mL）（3.3.3）及丙溴磷标准储备液（100μg/mL）（3.3.2）各1 mL，分别置于100 mL容量瓶中，用缓冲溶液（3.1.7）稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1μg/mL的标准中间液B。4　仪器和设备4.1　恒温水浴锅。4.2　天平：感量为0.1g。4.3　分光光度计或相应商品化测定仪。4.4　环境条件：温度15℃～35 ℃，湿度≤80%。5　分析步骤5.1　试样的提取5.1.1　整株提取法选取韭菜、芹菜有代表性的样品，擦去表面泥土，称取试样3 g（精确至0.1g）置于表面皿中，加入10 mL缓冲液（3.1.7），残缺面不得接触缓冲液，轻轻振摇50 次，静置2 min以上，取上清液备用。5.1.2　整体测定法选取油菜、菠菜有代表性的样品，擦去表面泥土，剪成1 cm左右见方碎片，称取3 g（精确至0.1 g）放入离心管中，加入10 mL缓冲溶液（3.1.7），振摇50 次，静置2min以上，倒出提取液，静置3 min～5 min，待用。5.2　测定步骤5.2.1　对照液的测定先于反应管中加入3 mL缓冲溶液（3.1.7），再加入适量酶液、0.1 mL显色剂，摇匀后于37 ℃水浴锅中放置15 min。加入0.1 mL底物摇匀，立即测定吸光度，3min后再测定一次，记录反应3min的吸光度值的变化∆ A[sub]0[/sub]。5.2.2　样品液的测定先于反应管中加入3 mL提取液，其他操作与对照液操作（5.2.1）相同，记录反应3 min的吸光度值的变化∆ A[sub]t[/sub]。5.3　质控试验每次测定应同时进行空白试验和加标质控试验。5.3.1　空白试验称取空白试样，按照5.1和5.2步骤与样品同法操作。5.3.2　加标质控试验5.3.2.1　韭菜、芹菜加标实验取空白试样，擦去表面泥土，称取5份试样各3g（精确至0.1 g）置于表面皿中，分别加入检出限水平的有机磷和氨基甲酸酯类标准中间液B（1μg/mL）（3.3.4），加入10mL缓冲液（3.1.7），残缺面不得接触缓冲液，轻轻振摇50 次，静置2min以上，取上清液备用。其余操作按照5.2步骤同法操作。5.3.2.2　油菜、菠菜加标实验取空白试样，擦去表面泥土，剪成1 cm左右见方碎片，称取5 份试样各3 g（精确至0.1g）放入小离心管中，分别加入检出限水平的有机磷和氨基甲酸酯类标准中间液 B（1μg/mL）（3.3.4），加入10mL缓冲溶液（3.1.7），振摇50 次，静置2min以上，倒出提取液，静置3 min～5 min，待用。其余操作按照5.2步骤同法操作。6　结果的表述6.1　结果计算抑制率（%）=[（∆ A[sub]0[/sub]-∆ A[sub]t[/sub]）/∆ A[sub]0[/sub]]×100式中：∆ A[sub]0[/sub][sub]───[/sub]对照溶液反应3 min吸光度的变化值；∆ A[sub]t[/sub][sub]───[/sub]样品溶液反应3 min吸光度的变化值；6.2　结果判定结果以酶被抑制的程度（抑制率）表示。当抑制率≥50%时，表示蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留高于检测限，判定为阳性，阳性结果的样品需要重复检验2 次以上。6.3　质控试验要求空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应均为阳性。7　结论当检测结果为阳性时，应采用其他分析方法进行确证，进一步确定农药品种和含量。8　性能指标8.1　检测限：敌百虫0.1mg/kg，丙溴磷0.5 mg/kg，灭多威0.2 mg/kg，克百威0.02 mg/kg，敌敌畏0.2 mg/kg。8.2　灵敏度：灵敏度应≥95%8.3　特异性：特异性应≥85%。8.4　假阴性率：假阴性率应≤5%。8.5　假阳性率：假阳性率应≤15%。注：1.性能指标计算方法见附录A。 2.吸光度变化∆ A[sub]0[/sub]值应控制在0.2～0.3之间。具体的酶量，应根据产品说明书上标识的使用量，测定∆ A[sub]0[/sub]值。根据测定值，增加或减少酶量，使∆ A[sub]0[/sub]值控制在0.2～0.3之间。[align=center]检测卡法[/align]9　原理样品中的有机磷和氨基甲酸酯类农药残留经缓冲液提取，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶（白色药片）有抑制作用，抑制胆碱酯酶催化靛酚乙酸酯（红色药片）水解为乙酸与靛酚（蓝色），从而导致速测卡颜色深浅的变化。通过空白颜色比较，对样品中有机磷和氨基甲酸酯类农药进行定性判定。10　试剂和材料除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的二级水。10.1　试剂10.1.1　丙酮（CH[sub]3[/sub]COCH[sub]3[/sub]）。10.1.2　磷酸氢二钾（K[sub]2[/sub]HPO[sub]4[/sub]）。10.1.3　磷酸二氢钾（KH[sub]2[/sub]PO[sub]4[/sub]）。10.1.4　pH8.0缓冲溶液：分别称取11.9 g无水磷酸氢二钾及3.2 g磷酸二氢钾，溶解于1000 mL水中，混匀。10.2　参考物质同3.2。10.3　标准溶液的配制同3.3。10.4　固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片（检测卡）。11　仪器和设备11.1　恒温水浴锅。11.2　天平：感量为0.1 g。11.3　环境条件：温度15℃～35 ℃，湿度≤80%。12　分析步骤12.1　试样的提取12.1.1　整株提取法选取韭菜、芹菜有代表性的样品，擦去表面泥土，称取试样3 g（精确至0.1g）置于表面皿中，加入10mL缓冲液（10.1.4），残缺面不得接触缓冲液，轻轻振摇50 次，静置2min以上。12.1.2　整体测定法选取油菜、菠菜有代表性的样品，擦去表面泥土，剪成1 cm左右见方碎片，称取3 g（精确至0.1 g）放入小离心管中，加入10 mL缓冲溶液（10.1.4），振摇50 次，静置2min以上。12.2　测定步骤吸取2 滴左右待测液于白色药片反应区域，在37 ℃恒温装置中放置15 min进行预反应，预反应后的药片表面必须保持湿润。将速测卡对折，手捏3 min或置于37 ℃恒温装置3min，保证红色药片反应区域与白色药片反应区域完全叠合发生反应。每次测定需有一个缓冲溶液的空白对照。12.3　质控试验每次测定应同时进行空白试验和加标质控试验。12.3.1　空白试验称取空白试样，按照 12.1 和 12.2 步骤与样品同法操作。12.3.2　加标质控试验12.3.2.1　韭菜、芹菜取空白试样，擦去表面泥土，称取5份试样各3g （精确至0.1g）置于表面皿中，分别加入检出限水平的有机磷和氨基甲酸酯类标准中间液B（1μg/mL）（3.3.4），按照12.1和12.2步骤与样品同法操作。12.3.2.2　油菜、菠菜选取空白试样，擦去表面泥土，剪成1 cm左右见方碎片，称取5份试样各3 g（精确至0.1g）放入小离心管中，分别加入检出限水平的有机磷和氨基甲酸酯类标准中间液 B（1μg/mL）（3.3.4），按照12.1和12.2步骤与样品同法操作。13　结果判定白色药片区域不变色或略有浅蓝色为阳性结果；白色药片区域变为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。通过对比空白和样品白色药片区域的颜色变化进行结果判定。目视判定示意图见图1。[img=,524,323]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/04/201904161528477750_5223_2166779_3.png!w524x323.jpg[/img]13.1　无效白色药片区域干燥，表明取样量偏少，检测结果无效。13.2　阴性样品白色药片区域颜色比空白对照卡颜色颜色相当或为天蓝色，表明样品中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留低于方法检测限，判定为阴性。13.3　阳性样品白色药片区域不变色或略有浅蓝色，表明样品中有机磷和氨基甲酸酯类农残高于检测限，判定为阳性。1.1　质控试验要求空白试验测定结果应为阴性，加标质控试验测定结果应均为阳性。2　结论当检测结果为阳性时，应采用其他分析方法进行确证，进一步确定农药品种和含量。3　性能指标3.1　检测限：敌百虫0.1mg/kg，丙溴磷0.5 mg/kg，灭多威0.2 mg/kg，克百威0.02 mg/kg，敌敌畏0.2 mg/kg。3.2　灵敏度：灵敏度应≥95%3.3　特异性：特异性应≥85%。3.4　假阴性率：假阴性率应≤5%。3.5　假阳性率：假阳性率应≤15%。注：性能指标计算方法见附录A。4　其他葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，采取整株蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。本方法所述试剂、试剂盒信息及操作步骤是为给方法使用者提供方便，在使用本方法时不做限定。方法使用者在使用替代试剂、试剂盒或操作步骤前，须对其进行考察，应满足本方法规定的各项性能指标。本方法参比标准为 NY/T 761—2008 《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》。

[b]使用声力研究蛋白去折叠[/b]单分子力谱(SMFS)技术是研究蛋白结构与蛋白去折叠中的生物力学性质的有力工具。SMFS能够为研究和药物开发提供有价值的信息。SMFS有助于揭示人类疾病病理的分子机制，而机制往往被认为与错误折叠的蛋白的形成和积聚有关，如阿茲海默症和帕金森氏症。然而现有的SMFS仪器缺少同时并行研究多个蛋白去折叠的功能，使得研究过程耗时很长。使用声波来对数以百计的生物分子施力并操控是非常理想的高通量研究方法。此案例中，声力谱学(AFS)是最新的用于研究蛋白去折叠的单分子操控方法。[img=,500,145]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021031435408_23_981_3.png!w690x201.jpg[/img]1 AFS检测蛋白去折叠的图解。蛋白一端栓住玻璃表面，另一端拴住聚苯乙烯微球。[img=,400,238]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021032257008_8827_981_3.png!w421x251.jpg[/img]2 对视野范围内被蛋白分子拴在玻璃表面的4.5 μm聚苯乙烯微球同时成像。物镜放大倍数为20x。AFS设备使用压电元件共振激发平面声阱穿过微流控芯片。共振波对与周围介质密度不同的微球施力，每个生物分子被单独地由微球拉伸(图1)。仪器可以实时并行操控视野范围内数以百计的微球，获得大量的数据以研究每个生物分子的随机与异质行为(图2)。在Yan Jie(NUS)的实验室的这项试点研究中，我们首次展示了AFS如何对蛋白施力并操控。实验对踝蛋白施力引发(去)折叠同时以高精确度记录蛋白的拉伸。踝蛋白属于机械敏感性大分子，在调控蛋白粘附于胞外基质中起作用。踝蛋白是细胞代谢过程和信号通路中的关键，并能够在力的作用下改变构象，在单分子生物物理学中备受关注。[img=,500,156]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/08/201808021033524578_3892_981_3.png!w679x212.jpg[/img]3 使用AFS得到的单个踝蛋白分子的去折叠曲线，力变化速率为1 pN/s。轨迹在500 Hz下获得(彩色点)，并平衡至50 Hz(黑色线)。3a 单个踝蛋白多次拉伸的力-距离曲线。3b 单个拉伸循环的力-距离曲线。3c 图3b中分子的时间-距离曲线。在这项研究中，连接了DNA的踝蛋白拴在聚苯乙烯微球和玻璃表面。启动声波后形成平面声阱，连接了踝蛋白的微球受到朝向声阱的力。实验中通过调节声波的振幅来改变力的大小。逐渐增加力的大小使得蛋白的结构域按顺序去折叠。实验循环进行拉伸与收缩的过程(力变化速率为1 pN/s)并同时以nm级的分辨率检测每个蛋白的拉伸长度(图3)。通过力-距离曲线(图3a)可以观察到单个踝蛋白的去折叠循环。将单个蛋白的去折叠轨迹叠加即可检测到单个结构域去折叠的发生，研究人员可以得到蛋白结构和蛋白去折叠自由能图谱信息。AFS仪器产生的超声并不会损害生物分子的结构完整性，因此蛋白可以连续去折叠和再折叠长达数小时，并能够得到单个蛋白多次去折叠和再折叠的曲线。相比于其他SMFS方法经过多次拉伸和收缩之后对蛋白造成光学损伤或力学损伤使得实验被迫终止，AFS能够获得更多的信息。图3b: 单个力-距离曲线中截取一小段，表示一个拉伸过程。将力从15 pN增加至19 pN，可以观察到4个去折叠过程，与蛋白的4个结构域相符合，拉伸长度为30 nm至100 nm。AFS的高分辨率检测功能可以很清晰地区分去折叠过程。AFS在x,y方向精度为2 nm，在z方向精度为4 nm(频率为25 Hz)，可以大幅提高(去)折叠研究的精密程度。图3c: 图3b中分子的18秒范围内的时间-距离曲线。AFS可以检测短至毫秒级至长达10小时以上的事件，用于研究蛋白的热力学和动力学。通过检测踝蛋白的去折叠步骤并记录连续的高分辨率的去折叠轨迹，可以得出AFS如何用于研究蛋白去折叠。研究蛋白(去)折叠的详细机制能够在生物物理和生物医药领域产生突破性发现。今后的蛋白折叠以及蛋白相互作用的研究中，AFS的多分子并行操控功能将发挥重要作用，用户可以同时并行检测大量的蛋白分子。用户可以获得大量的实验数据，在不影响分辨率的同时对蛋白的机械性质数据作出分析。

药材黄柏中多种成分检测 黄柏是一种中药材，属于芸香科植物黄皮树的干燥树皮。味极苦，略咸。具有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮、滋阴降火等药物疗效。是治疗湿热泻痢、带下阴痒、涩痛火旺、脚气痿躄、劳热躁汗、阴虚遗精、疮疡肿毒、湿疹湿疮等病症良药。 黄柏中含有丰富的药物成分，其中以盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱为主。这两种成分也是药典中明确要求检测的项目。同一药材中的这两种成分药典检测方法还不一样，下面我们就来看看。 高效液相色谱法检测药材黄柏中盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱含量。实验部分【原理】 精密称取适量黄柏样品经流动相溶解，超声提取后注入高效液相色谱系统，C18色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法（保留时间定性，峰面积定量）计算，得出所测成分含量。【仪器及试剂】 仪器：高效液相色谱仪（紫外检测器+等度泵+柱温箱+自动进样器+在线脱气机等），超声波清洗仪，溶剂过滤器，电子天平（0.0001），药典筛（三号筛、四号筛）等。 试剂：乙腈（色谱纯），磷酸（分析纯），十二烷基磺酸钠（优级纯），超纯水等。 这两种成分的结构及特性及药材中的含量等差异可能有些大，药典中的方法是分开检测的，下面我们先来检测黄柏中盐酸小檗碱。【样品制备】 对照品溶液制备：精密称取盐酸小檗碱对照品2.5mg于25ml容量瓶中，加流动相溶解、定容，制成0.1mg/ml盐酸小檗碱对照品溶液，备用。 供试品溶液制备：取黄柏药材适量，充分粉碎后过药典筛三号筛，精密称取过筛后粉末0.1g置于100ml容量瓶中，加流动相80ml，超声处理40分钟，放冷，用流动相稀释至刻度，摇匀，0.45um有机相微膜滤过，待测。【色谱条件】检测器：紫外检测器检测波长：265nm色谱柱：Promosil C18 ( 250 mm X 4.6mm，5μm )流动相：乙腈：0.1％磷酸溶液(每100ml磷酸溶液中加十二烷基磺酸钠0.2g)=50：50（V：V）流速：1.0ml/min柱温：30℃进样量：5μl【色谱图】对照品溶液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508312252_563822_2536753_3.png供试品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508312252_563823_2536753_3.png 下面我们再来检测黄柏中盐酸黄柏碱。 原理、仪器及试剂和上面一样，在此略过。【样品制备】 对照品溶液制备：精密称取盐酸黄柏碱对照品2.5mg于25ml容量瓶中，加流动相溶解、定容，制成0.1mg/ml盐酸黄柏碱对照品溶液，备用。 供试品溶液制备：取黄柏药材适量，充分粉碎后过药典筛四号筛，精密称取过筛后粉末0.5g置于具塞锥形瓶中，加流动相25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再次称定重量，用流动相补足减少的重量，摇匀，0.45um有机相微膜滤过，待测。【色谱条件】检测器：紫外检测器检测波长：284nm色谱柱：Promosil C18 ( 250 mm X 4.6mm，5μm )流动相：乙腈：0.1％磷酸溶液(每100ml磷酸溶液中加十二烷基磺酸钠0.2g)=36：64（V：V）流速：1.0ml/min柱温：30℃进样量：5μl【色谱图】对照品溶液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508312253_563824_2536753_3.png供试品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508312253_563825_2536753_3.png 药典这个方法有些麻烦，对于成分不是特别复杂的药材大可不必这样，两个方法合并成一个方法完全可以搞定。下面我们就来看看。 原理、仪器及试剂和上面一样，在此略过。【样品制备】 对照品溶液制备：精密称取盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱对照品各2.5mg于25ml容量瓶中，加流动相溶解、定容，制成0.1mg/ml盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱混合对照品溶液，备用。 供试品溶液制备：取黄柏药材适量，充分粉碎后过药典筛三号筛，精密称取过筛后粉末0.5g置于100ml容量瓶中，加流动相至刻度，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再次称定重量，用流动相补足减少的重量，摇匀，0.45um有机相微膜滤过，待测。【色谱条件】检测器：紫外检测器检测波长：序号时间（min）波长（nm）10285217285317.1265430265色谱柱：Promosil C18 ( 250 mm X 4.6mm，5μm )流动相：乙腈：0.1％磷酸溶液(每100ml磷酸溶液中加十二烷基磺酸钠0.2g)=40：60（V：V）流速：1.0ml/min柱温：30℃进样量：5μl【色谱图】对照品溶液色谱图： http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508312253_563826_2536753_3.png供试品溶液色谱图：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/08/201508312253_563827_2536753_3.png 这样一个方法很方便的就把两种成分检测了出来，效果还不错。但由于这两种成分在该条件下的响应值和在样品中的含量有很大的差异，这样就导致一个色谱峰很大另一个偏小，对检测结果和色谱效果都有一定影响。 这样检测时我们就得考虑样品中多种成分在同一条件下的响应值及各自的含量，这两个因素如果差异不大，用同一种检测方法检测完全没问题。但如果差异较大，实验对结果准确度要求又不太高，这种方法就非常有优势，检测方便、快速。但如果对结果的准确度要求很高，这种方法最好别用，以防得不偿失。 同一样品检测方法很多，各有优势，实验时我们一定得立足现状，充分考虑样品及实验具体情况，满足实验要求是第一位的，切不可盲目的追求快而丢了准，或是盲目的追求准而浪费了时间、经费和精力等。 实验要求第一位，切记！ 以上是个人点小小的心得，仅供参考。

虹彩检测快讯（HCT News Releases）是深圳市虹彩检测技术有限公司（HCT）内部刊物，每月一期，以检测相关的技术贸易壁垒为主要内容。本刊由本人主编，在论坛发行希望大家互相学习，以求不断改进。由于忙与准备实验室认可和计量认证工作，虹彩检测快讯2209年04月刊（总第6期）一直拖到最近才完成。本人一直对封面的设计不够满意，希望大家能多提意见和建议！希望能有更多的原创[em09511][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=151667]虹彩检测快讯第6期[/url]================================================================================[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=140202]虹彩检测快讯（第1期）[/url][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903232246_140201_1632583_3.jpg[/img][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=140203]虹彩检测快讯（第2期）[/url][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903232248_140204_1632583_3.jpg[/img][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=140205]虹彩检测快讯（第3期）[/url][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903232250_140206_1632583_3.jpg[/img][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=140207]虹彩检测快讯（第4期）[/url][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/03/200903232253_140208_1632583_3.jpg[/img][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=143445]虹彩检测快讯（第5期）[/url][img]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2009/04/200904101721_143446_1632583_3.jpg[/img]

荭草药材的质量研究 王爱民，王永林‘，刘丽娜，李勇军(贵阳医学院药学院，贵州 贵阳550004) 目的：建立荭草药材的定性、定量检测方法。方法：采用TLC鉴定荭草药材中荭草素、异荭草素、原儿茶酸和没食子酸，HPLC测定荭草中荭草素、异荭草素的质量分数。结果：采用Diamonsil C18色谱柱，以乙腈-0．1％磷酸溶液(18：82)为流动相，可使异荭草素、荭草素达到基线分离，异荭草素进样量在0．075—0．90腭、荭草素在0．041～0．49耀呈良好的线性关系，异荭草素和荭草素的平均回收率分别为98．8％，99．5％，RSD分别为2．1％，1．7％(11,=9)。结论：本方法可以作为荭草药材的定性、定量检测方法。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/07/201207241909_379470_2355529_3.jpg

1.前言： 辣椒红素是从成熟红辣椒果实中提取的四萜类天然色素，属类胡萝卜素。辣椒红素色泽鲜艳，色价高，着色力强，保色效果好，安全性高，在食品工业应用广泛，可用于水产品、肉类、糕点、色拉、罐头、饮料等各类食品的着色。作为一种天然色素，[url=http://baike.baidu.com/item/%E8%81%94%E5%90%88%E5%9B%BD%E7%B2%AE%E5%86%9C%E7%BB%84%E7%BB%87][color=windowtext]联合国粮农组织[/color][/url]（FAO）和[url=http://baike.baidu.com/item/%E4%B8%96%E7%95%8C%E5%8D%AB%E7%94%9F%E7%BB%84%E7%BB%87][color=windowtext]世界卫生组织[/color][/url]（WHO）将辣椒红素列为A类色素，在使用中不加以限量。我国食品卫生法规定辣椒红素可应用于多种食品、医药以及化妆品中。目前测定辣椒红素的方法有薄层色谱法、比色法，也有采用HPLC测定的报道，但仅限于检测辣椒中的辣椒红素，未见有香肠中辣椒红素的检测方法，因此，目前急需一种高效、准确的方法来进行香肠中辣椒红素的检测。2.分析步骤2.1储备液的配制 准确称量10.00mg辣椒红素，溶解到丙酮中，定容到10mL，作为1000μg/mL的储备液（实际浓度应乘以辣椒红素的纯度），置于-18℃冷藏保存；2.2标准中间液的配制 准确量取2mL辣椒红素，溶解到正己烷中，定容到10mL，作为200μg/mL的中间液，置于4℃冷藏保存；2.3标准工作曲线的配制 用标准中间液配制成1、2、5、10、20、50、100μg/mL的标液作为工作曲线用的标准溶液。2.4样品处理 精确称取2.00样品于50mL离心管中，15mL的丙酮超声提取30min，离心，上清液转移至100ml梨形瓶中。残渣用15ml丙酮重复提取一次，离心，上清液合并到梨形瓶中。37℃旋干（若最后有水残留，加异丙醇旋干）。用2mL正己烷复溶，过膜，上机。2.5 HPLC测定2.5.1仪器条件(Agilent 1260 )2.5.2色谱参数：色谱柱：Agilent ZORBAX RX—SIL，5μm，4.6mm *250mm柱温：30℃流速：0.8mL/min进样量：20μL流动相：正己烷：乙醇=90:10（V/V）3.结果与分析3.1保留时间： 20mg/L与50mg/L辣椒红素通过RX—SIL色谱柱分离，确定保留时间，如下图:[align=center][img=,490,154]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708071527_01_3081717_3.png[/img][/align][align=left]3.2检出限 在基质中添加相当于样品含有1.0mg/L的标准品，经前处理上机检测，计算其信噪比（S/N）＞10，如图：[/align][align=center][img=,490,264]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708071529_01_3081717_3.png[/img][/align][align=left]3.34.4 线性关系 精密吸取辣椒红素标准品，用正己烷溶稀释成系列浓度为1，2，5，10，20，50，100，200mg/L标准溶液，分别进样测定，以峰面积响应为纵坐标，辣椒红素浓度为横坐标，得到辣椒红素的回归方程为Y=8.05659X-0.09749，相关系数：0.9998，线性关系良好。[/align][align=center][img=,490,392]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708071530_01_3081717_3.png[/img][/align][align=left]4.5 空白样品添加回收：[/align][align=center] [table=352][tr][td=4,1]回收率[/td][/tr][tr][td=1,2]名称[/td][td=1,2]添加浓度[/td][td=2,1]回收率%[/td][/tr][tr][td] 火腿肠[/td][td]香肠[/td][/tr][tr][td=1,6]辣椒红素[/td][td]spike-1mg/kg-1[/td][td]88.71[/td][td]91.27[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-2[/td][td]82.63[/td][td]85.42[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-3[/td][td]84.25[/td][td]86.33[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-4[/td][td]95.62[/td][td]95.1[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-5[/td][td]91.59[/td][td]89.74[/td][/tr][tr][td]spike-1mg/kg-6[/td][td]88.48[/td][td]84.55[/td][/tr][tr][td=2,1]RSD%[/td][td]5.36[/td][td]4.57[/td][/tr][tr][td=1,2]辣椒红素[/td][td]spike-20mg/kg[/td][td]93.24[/td][td]96.68[/td][/tr][tr][td]spike-100mg/kg[/td][td]98.44[/td][td]98.69[/td][/tr][/table][/align][align=left]添加回收选取市场上香肠及火腿肠做质控实验，回收均在80%-100%之间，方法稳定性良好。[/align][align=left]5.0 结语[/align][align=left] 初步用正相色谱做脂溶性物质，对此类型化合物较理想，后续继续尝试中。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif[/img][/align]