紫外吸收测定实验

实验思路，酶标仪可以高通量定量测定有紫外吸收的物质，所以我们合成的新材料如果有特定的紫外吸收，可以用酶标仪测定反应后的溶剂中剩余的材料，从而测定产物的接枝率。

很多实验室器皿都是玻璃的，耐腐蚀，常接触有机试剂，比如丙酮，甲醇，乙腈，乙醇，或者酸等等。液相色谱流动相的瓶子，配制流动相的容量瓶，在做实验时，都不会影响紫外测定结果。那么这些玻璃是比较特别的吗？比如，原料，工艺等等，还是普通实验用的玻璃就有这个性质，在接触有机溶剂，或者酸等等的时候，不会有紫外吸收？前段时间，工程师做了一个测试，用我们的玻璃管转移了甲醇，有一个杂质峰出现了，几次测定都得到一样的结果，因为不用玻璃管就没有杂质峰，当时工程师断定，是玻璃管有紫外吸收，可能有杂质，但是这段时间再做这个测试，却证明玻璃管没有问题，很困惑，对于紫外吸收不是很懂，请大家帮忙扫盲，谢谢

用紫外光度计时，吸收池大小影响测定吗？大家好！我在用紫外分光光度计测样品是，国标上会注明用1CM（或3CM,5CM)的吸收池测定,而我们买的仪器只是1CM的，这会不会影响测定呢？

当时在测定样品对蛋白吸附的紫外吸收时，没有测标准曲线，不知道这样有办法解释吗？吸光度值在1.5左右。马上交论文了。希望得到答案。

测定化合物的紫外吸收光谱时选择溶剂的原则是：（1） 样品在溶剂中溶解良好，能达到必要的浓度以得到吸光度适中的吸收曲线；（2） 溶剂不影响样品的吸收光谱，因此在测定的波长范围内溶剂应当是紫外透明的，即溶解本身没有吸收。透明范围的最短波长称为透明界限，测试时应根据溶剂的透明界限选择合适的溶剂；（3） 为了降低溶剂与溶质分子间的作用力，减少溶剂对吸收光谱的影响，应尽量采用低极性溶剂；（4） 溶剂挥发性小、不易燃、无毒性、价格便宜；（5） 所选用的溶剂应与待测组分不发生化学反应。

按照药典方法用紫外测定罂粟壳的最大吸收，为什么做不出数据呢？求助

紫外-可见吸收光谱分析 1 紫外-可见吸收光谱法概述 2 紫外-可见吸收光谱的理论基础 3 紫外-可见吸收光谱的定量基础——吸收定律 4 紫外-可见分光光度计 5 分光光度测定方法 6 紫外-可见分光光度法的应用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=41998]紫外-可见吸收光谱分析[/url]

紫外吸收光谱法测定APC片剂中乙酸水杨酸的含量的实验结果偏大的原因有哪些？

想看一个物质是否有紫外吸收，应该配多大的浓度，紫外吸收系数多大说明有紫外吸收

环境监测里面，很多金属离子的测定既可以用原子吸收分光光度计，也可以用紫外可见分光光度计，比如水和废水监测分析方法里面提到，镉的测定没有条件做原子吸收的可以用双硫腙分光光度法http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09511.gif，那么用这两种机器做的差别是什么？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif请做过的同学简单介绍一下。

[color=#444444]想做一个液相色谱，测定一下产品纯度。液相色谱用的是紫外检测器。我做的事形状如R1COOROOCR1的碳酸酯,是二元醇与一元酸反应生成二元酯，但是没有苯环，不知道这种酯有没有紫外吸收，可不可以用紫外检测器。求助各位大牛了，谢谢。[/color]

总觉得这一块被忽略了,所以赶紧弄上来,唤起大家的回忆.原来感觉四谱分析（红外、紫外、质谱和核磁）在有机分析中一直占据着主导地位，但现在感觉紫外光谱一直被人们所忽视，一直没想明白怎么回事。前一段时间参加仪器展览的时候，听一老师讲多极质谱，原来可以代替四谱分析来解决问题。突然明白怎么回事，也感觉自己已经赶不上时代了，知识的更新速度远比俺学习的速度快的多。感慨之余，和大家一起来学习分享紫外光谱吸收带的一些问题。紫外及可见光谱包括有几个谱带系，不同的谱带系相当于不同电子能级的跃迁。俺以前结构化学没有学好，现在很后悔啊！！！1、远紫外（真空紫外）吸收带这一块用的比较少，应该是非常少，一般紫外分光光度计的波长都是从200纳米开始的，因为远紫外（真空紫外）吸收带被空气强烈吸收，顾名思义，也叫真空紫外。主要是烷烃化合物的吸收带，如C-C、C-H基团中，为δ→δ*跃迁，最大吸收波长小于200纳米，范围在10-200纳米。2、尾端吸收带饱和卤代烃、胺类或含杂原子的单键化合物的吸收带，由于这类化合物含有一个或几个孤对电子，因此产生n→δ*跃迁，其范围从远紫外区末端到近紫外区，在200纳米附近。所以，一般在紫外区扫描或全波长扫描的时候，建议从210纳米开始，因为很多物质都存在末端吸收，多扫了没有多大意义，从节省时间和氘灯的角度考虑，建议从210纳米开始扫描。3、R带这个吸收属于弱吸收带，但是溶剂效应比较明显，所以俺在此友情提醒，在选择溶剂的时候一定要注意哦。R带是共轭分子的含杂原子基团的吸收带，如C=O，N=O，N=N等基团，有n→π*跃迁产生，为弱吸收带，摩尔吸光系数K一般小于100L.mol-1.cm-1；随着溶剂极性的增加，R带会发生蓝移，附近如有强吸收带，R带有时会红移，有时可能观察不到。4、K带这个用的比较多，也是有机物定性定量的基础，其最大吸收往往是由K带决定的，一般来说，如果某物质存在共轭双键，从理论上来将都可以用紫外去定性定量的，所以俺建议大家，要特别注意K带呀。共轭体系的π→π*跃迁所产生的吸收带，如共轭烯烃，烯酮等。K带的吸收强度很高，一般K大于10000L.mol-1.cm-1。5、B带理论支持：芳香和杂环化合物π→π*的特征吸收带。苯的B吸收带在230-270纳米之间，并出现包含有多重峰或精细结构的宽吸收带（这也是为什么有馒头峰的原因）。但取代芳香烃的B带精细结构会消失，极性溶剂也会使精细结构消失。6、E带含有苯环的物质一般在B带有和E带吸收，但是俺做过试验，感觉B带的吸收远远K带强烈，就以山梨酸和苯甲酸为例，相同浓度的山梨酸的吸收特别强烈，最大吸收很明显，可是苯甲酸的却象馒头峰，最大吸收特不明显，只有通过求导才能找出最大吸收来，比较郁闷。这也可以从吸光系数看出来，B带的吸光系数为250-300 L.mol-1.cm-1，感觉不是很灵敏。E带吸收系数大，但由于E和B的作用，往往峰形不太好，不利于分析。也属于芳香结构的特征吸收，由处于环状共轭的三个乙烯键的苯型体系中的π→π*跃迁所产生。E带又分为E1和E2带。E带属于强吸收带，K大于10000 L.mol-1.cm-1分光一般定量方法分光一般定量方法俺总结的一般定量方法有以下几个（不完整的请大家补充啊，当然有错误有意见大家也可以提出啊，哈哈），绝对法，标准对照法，吸收系数法，标准曲线法，解联立方程法等。1 绝对法以朗伯-比尔定律A=εbc为基础，且某一物质在一定波长下ε是一个常数，比色皿发光程也是已知的。因此，可用紫外-分光光度计在最大吸收波长处，测定样品溶液的吸光度A值，然后 由公式c=A/εb求得该样品溶液的含量或浓度2 标准对照法在相同条件下，在选定的波长处，分别测定标准溶液（浓度为C标）和样品溶液的吸光度值A标和A样然后按下面公式求得样品溶液的浓度或含量C样=（A样/A标）*C标3比吸收系数法不是很常用，就不说说，下面说说大家最常用的方法-标准曲线法4标准曲线法4.1 首先用基准物质配置一定浓度的标准储备溶液，然后再由储备溶液配置一系列标准溶液。俺个人经验：配置的过程中最好买国家标准物质，如果条件所限，那也没有办法；其次的最好能一次到位，别稀释次数太多，稀释次数多带来的误差和不确定度比较大；就是稀释也别超过1：20的稀释比例。4.2 在一定波长，最好是最大吸收波长下，测定每个标准溶液的吸光度，以吸光度为纵坐标，标准溶液对于的浓度为横坐标，绘制标准曲线。俺个人经验：如果有未知最大吸收波长的组分，最好先做个光谱扫描；如果没有条件，可以查相关资料；如果没办法，那请联系俺，如有标准品，可以帮大家做一个。（哈哈，别让我们领导看见，以为我看私活呢，嘿嘿）还有，如果仪器不能绘制标准曲线，自己用EXCEL做也可以，如果仪器做了，自己又用EXCEL做了一个，会发现斜率和截距可能不太一样，因为两种方法涉及的算法不太一样。例如UVPROBE就采用双精度浮点数，给各位说句实话，其实我也不知道双精度浮点数具体什么意思，露怯了！！！4.3最后样品溶液按照标准曲线绘制程序测定的吸光度值，在标准曲线上查出样品溶液对应的含量或浓度。

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用：紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

流动相的紫外吸收与待分离物质的紫外吸收有重叠，可以吗有解决的方法吗，请指教试验是要求这么做的谢谢

溶液的紫外吸收边怎么从紫外吸收光谱图上得出来

溶液的紫外吸收边怎么从紫外吸收光谱图上得出来

如题，想问一下，有什么物质是在紫外区吸收的（特别是靠近我们的测定波长243nm），而且配制成溶液后能够稳定存放的，最好是能够溶于水的，因为我们的样品是在水溶液中测定的找这个东西的目的是想检验一下我们的紫外分光是否稳定，因为最近的样品测定数据偏差有点大。不是标准物质也没有关系，只要能够稳定存在就行，希望大家踊跃发言，能够提供各种各样的验证方法都行，如其他物理方法像滤光片等也行谢谢各位先！！！[em0905][em0905][em0905]

各位大神，我在做实验室发现类似一下结构，点板有吸收，但是过液相无紫外吸收，个人认为可是东西是挂柱子上洗脱不下来，请问应该用什么样的流动相以及酸碱性呢，我目前用过TFA和氨水，和碳酸氢铵。均无吸收，流速1.6ml/min。求各位大神指教

请教各位，我们产品标准里面有测定透光率和紫外吸收这两项，不知道目的是什么？我正在制订新标准，不知道要不要加这两项，如果加的话限值应该怎么定？原来是透光率不小于99.0%，紫外吸收是在280nm及260nm处的吸光度不大于1.0.请各位指点

我分析了以下几点： 1 三聚氰胺有紫外吸收，但是吸收不是很强如果这样的话检出限将很高2 最大吸收在240以下，属于末端吸收，干扰比较大，容易出现假阳性的样品3 最难的问题在于前处理，我已经设计了2套方案，现在正在试验呢 希望和大家一起探讨！！！

我有一样品，在365nm波长下连续照射的情况下，会不断产生一种新的物质，这种新物质可以在400nm和600nm左右有吸收，因此，可以在照射后每隔50秒扫描一次，这样在400nm和600nm左右处会有吸收峰，而且，随着照射的时间增长，峰会越来越高，即峰按50s、100s、150s、200s的顺序增大。可以在普通的紫外可见扫描仪中做这个实验吗？我今天试了，没试处来，用的紫外比较老，岛津UV-1601，里面有指定波长，而且有重复扫描选项，可是指定波长365nm，每隔50s扫一次，每次得到的图都一样（当然可能是溶液没配好）。现在的问题是用紫外扫描仪可以做这种固定波长，并连续照射，然后每隔一定时间扫描一次样品，得到吸收谱图吗？是不是高档的紫外扫描仪才能做？或者我的照射实验应该单独在外面做（紫外仪中的强度不够，不足以激发产生新物质），然后每隔50s取一次样品，测它的吸收光谱？只是这样做时间上不好把握，误差很大。请大家指教，如何做好这样的实验？

一、样品制备　　紫外-可见吸收光谱法测定通常是在溶液中进行，固体样品需转变成溶液，无机样品用合适的酸溶解或用碱熔融，有机样品用有机溶剂溶解或抽提。有时需先经湿法或干法将样品消化，然后再转化成适合于光度测定的溶液。　　对光度分析溶剂的要求是良好的溶解能力，在测定波段没有明显的吸收，被测组成在溶剂中具有良好的吸收峰形，挥发性小、不易燃、无毒性、价格便宜等。　　二、测定条件的选择　　为了使测定获得比较满意的结果，必须注意选择合适的测定条件。　　（1）波长　　一般根据待测组分的吸收光谱，选择最大吸收波长A。作为测定波长，这样灵敏度最高，同时吸光度随波长的变化最小，可以得到较好的测定精度。但在实际工作中，并不一定选择A…，例如待测组分的A…受到共存杂质干扰，或待测组分的浓度太高等，可以选用其他吸收峰进行测定。　　（2）狭缝宽度　　狭缝将直接影响测定的灵敏度和工作曲线的线性范围。狭缝宽度太大，会使灵敏度下降，工作曲线的线性范围变窄；狭缝宽度太小，入射光强度太弱，也不利于测定。一般在不减少吸光度时最大狭缝宽度，就是应该选取的合适的狭缝窝度。　　（3）吸光度范围　　吸光度与测定相对误差的关系曲线，吸光度在0．2～0．8之间时，吸光度测定误差最小。因此，应把待测组分浓度的吸光度控制在0．2～0．8之间。　　三、反应条件的选择　　测定无机金属离子时，通常都加入显色剂，生成显色物质，然后进行分光光度测定。显色反应一般应满足生成物的有色化合物有较大的摩尔吸收系数，有较高的选择性，有色化合物组成应恒定，稳定性好及生成物与显色剂的A…的差值一般应大于60nm。实际工作中同时满足上述条件的显色反应不多，因此必须重视反应条件的选择。

同样的缓冲液，同样的对照品，昨天进的时候紫外吸收还是显著的，今天就变成了一条直线，为什么呢？苦恼！用的Tris-磷酸二氢钾缓冲液，不加乙腈还有紫外吸收，加了10%乙腈后就没了，问题是昨天这么做的时候还是有的啊？！

我用的一个原料，是一种多元醇，由于制备过程，此原料中可能含有一定量的醚（两分子多元醇脱水得的）,可以通过重结晶除去杂质或加强酸使其醚键断裂。我去做了紫外吸收，原料最大吸收在196nm,原料重结晶后的紫外吸收在190nm，那些加酸的紫外吸收波长更短。 我比较迷惑，一是醚的紫外吸收比醇要蓝移吗？二是这能说明杂质除去了吗？ 急切希望大家的帮助。 谢谢 [~157497~]

医用透明质酸钠凝胶用质量浓度为9g/L氯化钠溶液作10倍稀释，按照按照《中华人民共和国药典》(2005年版)二部附录ⅣA的方法测定，测紫外吸收时医用透明质酸钠溶液浓度约为原浓度的十分之一，结果需换算成原标定浓度的吸收值，在波长280nm和260nm处的吸光度应不大于1.0。请教大家，这个该如何换算？

紫外可见吸收光谱法 利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。 该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。 其测定波长范围为200-1000nm。 原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。 某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。 分子光谱特点： 分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。 紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。 应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。 紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析

大侠们磷酸三丁酯有紫外吸收吗，如果有最大紫外吸收波长是多少啊