液相色谱化发光检测器

安捷伦[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]1260 蒸发光散射检测器，流动相：乙腈-水（32：68），雾化器和漂移管温度应该设置多少？第一次使用蒸发光检测器，我们实验室里也没有人使用过，请问下各位老师应该怎么调试？

菊粉在食品工业中作为糖或脂肪替代品、质地改良剂和乳化剂。文献报道了采用蒸发光散射检测 (HPLC-ELSD) 方法进行菊粉定量的高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]方法的开发和验证，该方法以水为流动相，等度洗脱，优化检测器参数（蒸发器温度 80 °C，雾化器温度 80 °C，气体流速 1.3 L/min，检测器增益 1)。该方法在检测和定量限、日内和日间精密度和准确度以及回收率方面进行了验证。所提出的方法首次使用阳离子交换 (Ag +) 柱进行菊粉测定，避免了水解步骤，比较新颖。详见[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=16px][color=#333333]https://doi.org/10.1007/s12161-021-02140-y[/color][/size][/font]

求助一下，液相色谱蒸发光检测器校准的时候，用5微克的跑检出限出峰时间大概在3分钟，峰高912mAU，峰面积9093mAU.S，但是走200微克做定性定量的时候峰高只有20mAU，峰面积588mAU.S，出峰时间在21分钟，大神们知道是什么原因吗？用的同种条件，进样量都是10微升。（第一张图5微克，第二张图200微克，第三张图条件）[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111011608524556_8958_5346682_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111011608525796_7032_5346682_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/11/202111011608526619_6593_5346682_3.png[/img]

液相色谱常用的几种检测器 液相色谱法在检测中现在是如火如荼，用量之大，涉及的行业之多，影响力之广等都是非常惹人关注的。液相色谱的配置都是大同小可的，主要是在检测器上有些区别。 一般来说，液相色谱检测的样品种类很多，能涉及到成千上万的有机物。检测的样品不一样，所选的检测器可能就不一样，这是由不同检测器的特点决定的。 液相色谱常用的检测器主要有紫外-可见光检测器，一般人都叫紫外检测器；光电二极管阵列检测器，一般被叫做二极管检测器，或DAD检测器或PAD、PDAD检测器等；荧光检测器；示差折光检测器，一般被称作示差检测器；蒸发光散射检测器，常被叫做蒸发光检测器；电喷雾检测器。 紫外检测器在液相色谱中的应用超过了80%，用量很大，这是和紫外检测器的优良特性分不开的。紫外检测器对温度、流速、风度、湿度、振动等的变化相对不敏感；灵敏度高，一般能达到10-9g/ml（萘甲醇溶液）；能采用洗脱方式检测；重复性好，一般都能可知道1%以内。 DAD检测器实际也是紫外检测器的一种，现在用量不大是因为它的关键技术还没被广泛掌握，制造成本较高，检出限偏低于紫外检测器；它优点是可以全波长检测，可以实现三维谱图分析。 荧光检测器是除紫外检测器外用的最多的检测器，尤其是在农药残留、兽药残留、毒素、氨基酸等。它的优点是检出限极地，最低可以达到10-12g/ml；可以采用梯度洗脱方式检测；重复性也很好；抗温度、流速等因素变化的影响相对不明显。 示差折光检测器是一种通用型检测器，检测糖类效果很好，是糖类检测的首选检测器。它的优点是检测重复性很好；缺点是灵敏度不够高一般只有10-6g/ml，对温度变化极敏感，对流速变化也比较敏感，不能采用梯度洗脱方式检测，检测池耐压低等。 蒸发光散射检测器也是一种通用型检测器。它的优点是灵敏度较高，可采用梯度洗脱方式检测；缺点是重复性不好，一般5%左右，需要有一个清洁、稳定的气源，雾化室易污染，需要有排废气的装置。 电喷雾检测器现在还不太成熟，在这就先不做介绍了。 另外还有想激光检测器、电化学检测器、电导检测器、等其它分析仪器的检测器也陆陆续续的应用到了液相色谱仪上，但就从现在来说这些技术一是还不够成熟，二是用量也还不大。 现在国产液相的检测器主要紫外检测器，其它的检测器技术掌握的还很少，哪些检测器的工作基本都还没做，还有待尽快掌握和提高。

蒸发光散射检测器（Evaporative Light-scattering Detector，简称ELSD），也是液相色谱（HPLC）中的通用型检测器。它基于连续测定样品流路中的溶质颗粒在光束中散射光的特性来测定样品含量的。这种检测器对所有挥发性低于流动相的溶质都有响应，特别适用于检测不含发色团的化合物，如碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生化的脂肪酸和氨基酸等。 01.工作原理 雾化：液体流动相在载气压力的作用下在雾化室内转变成细小的液滴； 蒸发：载气把液滴从雾化室运送到漂移管进行蒸发。在漂移管中，溶剂被除去，留下微粒或纯溶质的小滴。 检测：光源采用激光，溶质颗粒从漂移管出来后进入光检测池，并穿过激光光束。被溶质颗粒散射的光通过光电倍增管进行收集。 https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/10/202410181427390961_7768_3203140_3.png!w582x553.jpg 02.检测器的局限性灵敏度限制：尽管ELSD对许多化合物具有高灵敏度，但对于一些极性较低或分子量较小的化合物，其灵敏度可能不如其他检测器，如紫外检测器（UV）或质谱检测器（MS）。 样品的挥发性限制：ELSD主要适用于检测挥发性低于流动相的样品。对于挥发性较高的样品，可能需要额外的设备或技术来降低挥发性，以确保其在ELSD中的检测。 样品处理要求：某些样品可能需要特定的前处理步骤，如衍生化或溶解度调整，以确保它们在ELSD中的适当检测。 流动相的要求：ELSD对流动相的挥发性有一定的要求，因为流动相需要在漂移管中蒸发。不适当的流动相选择可能会影响溶剂的蒸发效率和检测器的响应。 基线噪声：在某些操作条件下（如梯度中水相比例过高而蒸发温度较小），ELSD可能会显示出较高的基线噪声，这可能会影响检测的准确性和重复性。 03.使用中的问题 问题一：如何平衡ELSD检测器呢？ 答：首先，确保检测器内部清洁，避免残留物影响分析结果。其次，选择适合的流动相并确保其纯度，同时设置适当的漂移管和雾化器温度以蒸发溶剂而不破坏样品。接着，调整气体流速以优化雾化和溶剂蒸发过程。在预热检测器后，运行空白流动相直到基线稳定（如奥泰的ELSD3300，建议基线波动小于1mv以内在运行空白），这一步骤对于识别系统杂质和不稳定条件至关重要。在整个平衡过程中，密切监测基线的稳定性，必要时调整光束强度和光电倍增管增益等参数。使用系统适用性样品可以帮助测试和验证检测器的响应和重现性。 [size=16px]问题二：如果ELSD检测器的基线噪音一直波动很大呢？ 答：首先不接入流动相，只用纯氮气充入检测器中，看其基线波动情况，如果基线平稳，则再接入流动相进检测器中；如果接入流动相后，基线波动一直无法平稳，则我们可以短期的升高温度和加大气体流速，确保溶剂可以被有效蒸发，且能冲掉可能存在的杂质。待基线平稳后，再调回检测方法的参数即可。如果该操作仍不能解决问题，建议拆下雾化器和漂移管进行清洗维护。 问题三：如何对ELSD检测器进行简单的保养呢？ 答：1.使用适当的流动相：使用高纯度的流动相，避免使用可能引起污染或腐蚀的溶剂。 2.检查气体流速：定期对仪器进行自检，检查并调整载气和雾化气体的流速，确保它们在最佳工作状态。 3.检查和更换过滤器：检查并更换流动相和气体管路中的过滤器，以防止颗粒和杂质进入检测器。 4.定期清洁：定期清洁检测器的雾化器、漂移管和光散射池，以去除可能积累的污染物。可以使用适当的溶剂和清洁剂，但要确保在清洁后彻底干燥。（根据样品性质和使用频率，如果样品纯且使用频率不高，可一年一次。） 5.避免长时间不使用：如果检测器长时间不使用，应定期启动并运行，以防止部件老化或腐蚀。 6.避免过载使用：避免在超出检测器设计范围的条件下使用，如使用过高的温度或不适当的溶剂。

液相色谱紫外检测器与通用型检测器 液相色谱现在用的最多的是紫外检测器，约占总数的85%，然而液相色谱的通用型检测器却没有紫外检测器。液相的通用型检测器常见的有示差折光检测器，蒸发光散射检测器等，这些检测器在液相色谱的用量和使用范围都不是很广。 示差折光检测器稳定性较好，但使用条件如对温度、气泡、压力等要求较高，不能采用梯度洗脱方式，灵敏度相对不高，一般多用在没有紫外吸收的糖类物质的检测。蒸发光散射检测器灵敏度较高，可以采用梯度洗脱方式，但它需要纯度较高的气源，有污染气体排出，稳定性不够理想，问题较高，对气体压力、流量要求较高，一般多用于二十几种药物检测。 而紫外检测器虽然不是通用型检测器，但它能检测大多数的有机物，约80%以上。而且它的灵敏度较高，稳定性较好，能采用梯度洗脱方法，对实验条件及环境要求也不是很高，造价不高，维护、维修简单、方便，危险性较低等种种优势。所以成为液相色谱首选的检测器。 当然液相色谱用的荧光检测器也有很多优点，比如灵敏度极高，能到十的十二十三次方，可以检测具有荧光效应的有机物，属于选择性检测器，稳定性较好线性较宽较好、使用方便等。另外通用型检测器也还有很多种，也还有很多值得开发、改进的,发展空间很宽广、很有前途。 希望液相色谱明天会更好，通用型检测器更通用、更强大、完美！选择性检测器选择性更强、更专业！

液相色谱使用的最多的是紫外检测器，也有各种不同的检测器，如二极管阵列检测器，蒸发光散射检测器，荧光检测器，示差检测器等，这些检测器各有什么不同点，大家一起来分享一下平时用的是哪种检测器，并根据所知道的介绍一下其它各种检测器的特点

液相色谱的检测器有紫外吸收检测器，二极管阵列检测器，荧光检测器，示差折光检测器，电化学检测器，化学发光检测器，ms检测器。若不考虑各种检测器的价格因素。对于需要分析的物质如何选择适用的检测器？

紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 紫外吸收检测器 ultraviolet absorption detector 简称紫外检测器（UV），是基于溶质分子吸收紫外光的原理设计的检测器。因为大部分常见有机物质和部分无机物质都具有紫外吸收性质，所以该检测器是液相色谱中应用最广泛的检测器，几乎所有液相色谱仪都配置了这种检测器。它不仅有较好的选择性和较高的灵敏度，而且对环境温度、流动相组成变化和流速波动不太敏感，因此既可用于等度洗脱，也可用于梯度洗脱。其检测灵敏度在mg/L至mg/L范围。可见光检测器 visible light detector 可见光检测器 visible light detector 又称分光光度检测器，是基于溶质分子吸收可见光的原理设计的检测器。能够直接采用可见光检测的溶质不是很多，而且多数灵敏度也不高，但采用具有高摩尔吸光系数的有机试剂（配位体和螯合剂）作为衍生化试剂进行柱前或柱后衍生操作的衍生化光度检测法是相当有用的，特别是在金属离子配合物液相色谱中的应用是相当成功的。蒸发光散射检测器克服常见的HPLC检测难题 虽然阵法光散射检测器(Evaportive light Scattering,ELSD)已经开发生产15年，但是对于许多色谱工作者来说，它仍是一个新产品。第一台ELSD是由澳大利亚的Union Carbide研究实验室的科学家研制开发的，并在八十年代初转化为商品，八十年代以激光为光源的第二代ELSD面世。此后，通过不断设计提高了ELSD的操作性能。现在ELSD越来越多的作为通用型检测器]用于高效液相色谱，超临界色谱（SFC）和逆流色谱中。ELSD最大的优越性在于能检测不含发色团的化合物，如：碳水化合物、脂类、聚合物、未衍生脂肪酸和氨基酸、表面活性剂、药物，并在没有标准品和化合物结构参数未知的情况下检测未知化合物 。ELSD的通用检测方法消除了常见于传统HPLC检测方法中的难点，不同于紫外和荧光检测器，ELSD的响应不依赖与样品的光学特性，任何挥发性低于流动相的样品均能被检测，不受其官能团的影响。ELSD的响应值与样品的质量成正比，因而能用于测定样品的纯度或者检测未知物。示差检测器（RI）也可以说是一种通用型检测器，打它灵敏度低，并与梯度脱洗不相容。质谱是另一种通用型检测器，但它的昂贵操作费用和复杂性限制了它的应用。ELSD的独特检测方法，对于它的多种用途和高性能至为关键。ELSD检测只要分为三个步骤：（1）用惰性气体雾化脱洗液（2）流动相在加热管（漂移管）中蒸发（3）样品颗粒散射光后得到检测。

液相色谱仪的紫外检测器（UV100)的显示屏只出现数字1，有可能是何种原因造成的？灯源发光正常，流动相（0.05的磷酸二氢钾-甲醇-异丙醇-醋酸）经测定吸光值为0.77。 请尽快赐教，多谢。

请教大家：1、想买一液相色谱，配二极管阵列检测器，还需要配紫外检测器吗？2、原有一台安捷伦1100带紫外检测器，想再增加一个蒸发光检测器，请大家推荐哪家大好，同时又能兼容（主要使两个检测器要能简便的互换使用，不要拆卸太麻烦）。3、蒸发光检测器需要用到气源，需要单独的实验室吗？需要气体间吗？谢谢大家。

目前在做建立高效液相色谱-蒸发光检测器检测的一种方法，发现文献上的峰重现不出来，自己设置了方法，峰出的有点晚和拖尾，流动相是纯甲醇，柱温40，飘逸管温度72，有什么方法能改善吗

高效液相色谱蒸发光散射检测器，关机时关了检测器，但是没有关氮气气瓶，这样会对检测器产生不良影响么？

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]蒸发光散射检测器的响应与样品的质量成正比，对几乎所有的样品给出接近一致的响应因子，因此可以通过与没有标准品和未知化合物结构参数的情况下检测未知化合物，并可通过与内标物比较定量测定未知物的含量。它与示差检测器、紫外检测器相比，消除了溶剂的干扰和因温度变化引起的基线漂移，特别适用于梯度洗脱。此外，它还具有雾化器与漂移管易于清洗，流动池死体积不影响灵敏度，喷雾气体消耗量少等优点，蒸发光散射检测器将会得到越来越广泛的应用。

高效液相色谱常用的检测器有紫外检测器、示差折光检测器和荧光检测器三种。不知道大家在平时的使用中对这三种检测器的性能、适用范围是如何看的，发表一下意见，取长补短，共同学习。

[size=4][b]1、糖类物质是烟草中的一类重要化合物。烟草中的水溶性糖，尤其是还原糖，与烟草的香味、吃味及焦油生成量密切相关。不同类型、不同产地、不同部位的烟草，其水溶性糖的含量大小不同，导致了烟草品质间的差异性。随着市场对卷烟产品质量要求的不断提高，建立烟草中各种单糖和低聚糖的测定方法，对烟草生产、改善卷烟配方和吸烟与健康的研究具有实际意义。目前，烟草中总糖和还原糖的测定方法主要有费林试剂法、近红外分光光度法、连续流动分析法、毛细管电泳法、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法和高效液相色谱法。高效液相色谱-示差折光检测法（RID）是一种快速、直接的糖分析方法，但RID基于色谱流出物光折射率的变化来连续检测样品浓度，要求恒温、恒流速，对工作环境要求较苛刻，无法进行梯度洗脱，且检测灵敏度不高。蒸发光散射检测器（ELSD）是一种质量检测器，基于不挥发的样品颗粒对光的散射程度与其质量成正比而进行检测，对没有紫外吸收、荧光或电活性的物质以及产生末端紫外吸收的物质均能产生响应。ELSD稳定性好，灵敏度高，适宜于烟草中包括低含量的鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖等在内的糖类物质分析。本文采用Waters高效糖分析柱、乙腈-水作流动相、蒸发光散射检测器，实现了烟草中8种水溶性单糖和二糖的同时测定。方法准确、简便、快速，具有较强的实用性。[/b][/size][size=4][b]2、 高效液相色谱—蒸发光散射检测器分析糖类化合物　[/b]　[/size][size=3][b][size=4]摘　　要:介绍一种新型高效液相色谱检测器－蒸发光散射检测器，以及其于糖类等无荧光吸收，紫外吸收，或仅有末端紫外吸收化合物分析时的优点。并应用ＥＬＳＤ检测器，对７种糖类化合物进行高效液相色谱测定，获得了良好的结果。[/size][/b][/size][b][size=4]3、HPLC—ELSD法检测红豆杉细胞悬浮培养液中糖组分[/size][/b][size=3][b][size=3][b][size=4]摘　　要:建立了红豆杉细胞悬浮培养液中蔗糖、葡萄糖、果糖的HPLC的检测方法。样品经提取后，在Sugar PAK1型糖柱上以水为流动相，以Sedex55蒸发光散射检测器进行检测。蔗糖、葡萄糖、果糖的线性范围为10μg/ml-3000μg/ml。回收率分别为95．8％、94．4％、94．2％。[/size][/b][/size][size=4]讨论：[/size][size=4]1、你应用ＥＬＳＤ检测过糖类物质吗，检测的是什么样品，效果如何？[/size][size=4]2、你认为ＥＬＳＤ与ＲＩＤ比较在检测糖类上有什么优势，前者可能代替后者吗？[/size]3、药典中除了庆大霉素，还有药品检测用到了蒸发光散射检测器？相关链接：1、[size=2]蒸发光散射检测器在药物分析的应用 [/size][size=4][url]http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100430/2529733/[/url]　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　[/size][/b][/size]

2010年版药典山梨醇增订了【检查】 有关物质，用高效液相色谱法测定，用磺化交联的苯乙烯二乙烯基苯共聚物为填充剂（强阳离子钙型交换柱，0.3m×7.8mm，8μm）；以水为流动相；流速0.5 ml/min，柱温72-85℃，示差折光检测器。 想请教各位老师，示差折光检测器和蒸发光散射检测器都是通用检测器，这里能不能用蒸发光散射检测器？这两种检测器各有什么优点？

[color=#444444]同一台液相色谱仪由紫外改成蒸发光检测器测含量时，按方法停止采集时显示仍有部分数据传送，只能放弃采集，是哪里的参数设置有问题还是什么原因？求救各位[/color]

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=19572]液相色谱－蒸发光散射检测联用技术[/url]

需要增配一台蒸发光散射检测器，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]用的是赛默飞U3000和Vanquish core。请教一下大家有什么好用又可以适配到赛默飞[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]的蒸发光散射检测器，求推荐。

各位高手，我一般接触到的示差折光检测器都是和HPLC联用的。现在我想请问有没有和普通液相色谱联用的示差折光检测器，还是所有的示差折光仪都是可以通用的？我们用的是GE公司AKTA的液相系统，有没有相匹配的示差折光仪呢？请各位高手不吝赐教！

我部门准备购买一台液相和和一台蒸发光检测器,请大家根据自己的使用经验及了解情况推荐下,购买什么品牌、什么型号的液相和蒸发光检测器好啊!

蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector）设计用于高效液相色谱系统，分析任何挥发性低于流动相的化合物。ELSD ELSD的应用范围包括：碳水化合物，药物，脂类，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化剂，营养滋补品，及组合分子库等。蒸发光散射检测器消除了常见于其他HPLC检测器的问题。示差检测受溶剂前沿峰的干扰使得分析复杂化，并且由于对温度极其敏感使得基线很不稳定，与梯度洗脱不相容。另外，示差检测器的响应不如ELSD灵敏。而低波长紫外检测器在急变梯度条件下受基线漂移的困扰，并要求被分析化合物带有发色团。ELSD则不受这些限制。不同于这些检测器，ELSD能在多溶剂梯度的情况下获得稳定的基线，使得分辨率更好、分离速度更快。另外，因为ELSD的响应不依赖于样品的光学特性，所以ELSD检测时样品不要求带有发色团或荧光基团。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=68191]HPLC蒸发光散射检测器原理[/url]

用液相色谱检测生物柴油，检测器只能用蒸发光散射检测器吗？

[size=4]荧光检测器究竟难在那里，为什么国产的液相色谱都没有荧光检测器？[/size]

如题。大家实验室有没有配备ELSD蒸发光散射检测器的，是作为液相色谱的一个部件来管理？还是单独作为一个仪器来管理，也就是单独给个仪器编号来管理呢？

高效液相色谱仪中的检测器是三大关键部件（高压输液泵、色谱柱、检测器）之一，主要用于监测经色谱柱分离后的组分浓度的变化，并由记录仪绘出谱图来进行定性、定量分析。常用的检测器有紫外吸收检测器（UVD）、折光指数检测器（RID）、电导检测器（ECD）和荧光检测器。检测器的分类按检测的对象分类（1）整体性质检测器检测从色谱柱中流出的流动相总体物理性质的变化情况。如折光指数检测器(RID)和电导检测器(CD)，它们分别测定柱后流出液总体的折射率和电导率。此类检测器测定灵敏度低，必须用双流路进行补偿测量 易受温度和流量波动的影响，造成较大的漂移和噪声 不适合于痕量分析和梯度洗脱。（2） 溶质性质检测器此类检测器只检测柱后流出液中溶质的某物理或化学性质的变化。例如，紫外吸收检测器(UVD)和荧光检测器(FD)，它们分别测量溶质对紫外光的吸收和溶质在紫外光照射下发射的荧光强度。此类检测器灵敏度高，可单流路或双流路补偿测量，对流动相流量和温度变化不敏感。但不能使用对紫外线有吸收的流动相。它们可用于痕量分析和梯度洗脱。按适用性分类（1） 择性检测器它对不同组成的物质响应差别极大，因此只能选择性地检测某些物质，如紫外吸收检测器、荧光检测器和电导检测器。（2） 通用型检测器它对大多数物质的响应相差不大， 几乎适用于所有物质。折光指数检测器属于通用型检测器，但它的灵敏度低，受温度影响波动大，使用时有一定局限性。上面提到的UVD，RID，FD，ECD 4种检测器皆属于非破坏性检测器，样品流出检测器后可进行馏分收集，并可与其它检测器串联使用。对荧光检测器因测定中加入荧光试剂，其对样品会产生玷污，当串联使用时应将它放在最后检测。