液相色谱故障判断分析

液相色谱输液泵常见故障的判断和排除方法

变压器油的色谱分析与故障判断http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif变压器油的色谱分析与故障判断

[B][center]简述液相色谱单向阀故障判断和排除[/center][/B] 通常情况下，液相色谱高压输液泵的单向阀有输入单向阀和输出单向阀，单向阀的基本工作原理：液体只从阀的一端进去，另一端出来，即液体呈单向流动。 单向阀中最关键的部件是宝石球和宝石球座，宝石球是非常光滑的球体，球座为园矩形，它有光滑面和毛面之分，安装时，宝石球应放置在球座的光面上，可以达到非常好的密封效果。当柱塞杆抽动时，宝石球上浮，单向阀被打开，液体进入单向阀；当柱塞杆推动时，液体被排出单向阀，同时宝石球下浮回到球座，封堵被排出的液体，使液体不能回流。 单向阀故障通常有两种情况：1、单向阀被堵死，其外在表现为：液体出不来，无压力显示。 这种情况往往是宝石球和球座粘住了，流动相进不去，当然也出不来。一般也是用过缓冲液作流动相，由盐存在粘住的，或者流动相较脏、粘度高而引起的。2、单向阀被污染，其外在表现为：压力波动大。 这种情况通常都是球座上有细微的固体颗粒，固体颗粒有可能是盐析出，尤其是在使用缓冲液作流动相后，导致宝石球和球座密封性不好，流动相有回流现象。处理方法： 当确认是单向阀故障后，将单向阀小心拆卸下来，将入口单向阀和出口单向阀分别标注，然后置于预先加入纯净水的玻璃烧杯中，注意将宝石球向上放置，按以下顺序进行：纯净水超声清洗10分钟以上，纯净水最好事先加热至50℃左右，这样效果更好；换甲醇超声清洗15分钟。检查： 将单向阀按原样装上，注意不要将进口阀和出口阀装错，先用针将泵中空气抽出，按正常操作顺序开启泵，检查有无泄漏点，检查泵压是否正常。此时流动相一般为甲醇。如果还有压力不稳或测不到泵压，请重复以上处理操作。预防措施：1、流动相一定要先超声，再经0.45微米膜过滤。2、使用盐缓冲液作流动相后，先要用纯净水冲洗管路，将盐冲洗干净，才能在流动相中加入一定比例的甲醇或乙腈等有机溶剂，决不能直接使用有机溶剂冲洗。

[b][color=#f10b00]【咨询电话】010-51299927-101，13466308250，E-mail：training@instrument.com.cn[/color] [url=http://www.instrument.com.cn/training/training_info.asp?TRI_No=100430][color=#013add]在线报名[/color][/url][/b]　　液相色谱仪是目前应用最广的分析仪器之一,随着液相色谱分析技术的不断发展，新技术、新仪器层出不穷，应用领域也越来越广。为了使色谱工作者掌握更多、更新的色谱技术，提高色谱应用水平，中国仪器仪表学会分析仪器分会特举办液相色谱维修、维护、保养及常见故障分析培训班。欢迎大家前来参加。　　【[b]培训内容[/b]】　　[b]第一部分 液相色谱仪器简介及维护与故障排除概述[/b]　　1、液相色谱仪器简介　　2、液相色谱日常维护与故障排除的思路、仪器维护的基本规则　　3、液相色谱故障的确定、故障的预防　[b]　第二部分 从液相色谱各组成部分与部件产生各类故障判断和处理[/b]　　1、液相色谱输液系统基本原理、常见故障的判断与排除方法　　2、液相色谱流动相基础、梯度洗脱、流动相脱气、流动相贮存与过滤　　3、液相色谱手动、自动进样系统基本原理、常见故障的判断与排除方法　　4、液相色谱柱介绍、评价、保护及故障的判断与解决办法　　5、液相色谱检测器基本原理、常见故障的判断与解决方法　[b]　第三部分 色谱定量分析中常见问题及其解决方法[/b]　　1、峰形问题、坏柱　　2、样品超载、溶剂与样品不相配　　3、柱外效应与强保留基质、次级保留效应　　4、不合适的缓冲液、其它效应　　5、保留时间改变　　6、液相色谱方法的建立　　7、液相色谱仪检定规程(JJG 705-2002)　　[b]第四部分 实际操作及答疑[/b]　　1、现场结合展示仪器和仪器的关键部位(可拆装)　　2、基本实操和相关内容答疑　　【[b]培训时间[/b]】　　2010年07月12日—07月17日 西安　　2010年08月16日—08月21日 大连　　培训费1780元(包括授课费、讲义、文具、证书费等)，食宿统一安排，费用自理　　【[b]培训考核与发证[/b]】　　培训结束后由中国仪器仪表学会分析仪器分会颁发培训合格证书及中国仪器仪表学会会员证书　　[b][color=#f10b00]【咨询电话】：010-51299927-101,134663082650，E-mail：training@instrument.com.cn [/color][url=http://www.instrument.com.cn/training/training_info.asp?TRI_No=100430][color=#013add]在线报名[/color][/url][/b]

当液相色谱中的泵或者比例阀出现故障时，仪器或者谱图会出现哪些异常？如何判断这两个部件是否正常运转？

液相色谱怎么判断峰是哪个物质

[align=center]液相色谱日常维护与故障诊断[/align]食品中心 徐美玲一套完整的液相色谱系统包括在线真空脱气机、泵、自动进样器、柱温箱和检测器，下面将对各个模块的维护与故障排除进行详细说明。一、在线真空脱气机1、日常维护配有在线真空脱气机的系统需要注意流动相需要使用棕色玻璃瓶减缓藻类生长；经常过滤溶剂以免其中微粒永久性堵塞毛细管；避免使用可腐蚀钢铁的溶剂（如EDTA、低浓度无机酸、含过氧化物的色谱醇醚等）1.1检查溶剂过滤器拧开脱气机出口或比例阀入口管线，并使液面高于出口30cm，此时溶剂会因 为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出；查看过滤器是否变色；临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常。1.2清洁溶剂过滤器将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤器放在装有浓硝酸 （35％）的烧杯里浸一小时（如果硝酸无法浸入过滤器内部，可以先烘干再用硝酸浸泡）；用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗；将过滤器重新装好；建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。2、故障排除2.1如何简单判断脱气机脱气是否正常打开Purge阀，设定泵的流速2mL/min，提起当前所使用溶剂瓶内的溶剂 过滤头，使之脱离液面一小段时间，此时溶剂传送管内会产生一小段气 泡，放下过滤头，让此段气泡通过脱气机，如果脱气机正常，气泡应消失或缩小。2.2如何简单判断脱气机腔体或溶剂过滤头是否堵塞关闭泵，拧开脱气机出口或比例阀入口管线,此时溶剂会因为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。二、泵1、日常维护将装有溶剂瓶的溶剂箱放在泵上面(或较高处)。 当在四元泵上使用盐溶液或有机溶剂时，建议将盐溶液接在底部的梯度阀口上，将有机溶剂接在上面得梯度阀口上。有机相通道最好在盐溶液通道的上面。建议用水定期冲洗所有通道除去可能在阀口析出的盐结晶。操作泵之前，用至少两个体积（标准脱气机30mL，微脱气机10mL）冲洗真空脱气机 ,特别是当泵关闭了一段时间后（例如，过夜），以及在通道中使用挥发性混合溶剂时。防止溶剂过滤器堵塞及长菌 ，当过滤器表面有黑色或黄色污染层说明虑器发生了堵塞，请立即清洗或更换之。定期检查排液阀的虑芯。检查方法：拧开排液阀，以水作流动相，流速5mL/min，若压力大于10bar,则须立即更换。每当更换泵密封垫时排液阀虑芯也应更换。更换活塞密封垫时检查活塞杆上是否有划痕。有划痕的活塞将导致轻度渗漏，并降低密封垫的使用寿命。应尽早更换有划痕的活塞。使用缓冲溶液时，关泵前先用水冲洗系统。当需要长时间使用0.1摩尔或更高浓度得缓冲液时，最好选用密封垫清洗附件，以减少对密封垫及活塞杆的磨损。更换活塞密封垫后应按照密封垫安装步骤对其进行磨合，但磨合不适用于正相密封垫。2、故障排除2.1如何简单判断比例阀是否内漏设定泵使用一个单独通路（A），打开Purge阀，流速5mL/min，提起其他溶剂瓶内的溶剂过滤头直至离开液面，观察这些通路（B、C、D）内的溶剂是否随着流动，正常时均不应流动。2.2何时应该更换Purge阀内的过滤白头使用纯水作流动相，打开Purge阀，流速5mL/min，观察系统压力，如果超过10bar，应该更换。2.3泵压力不正常可能由那些原因引起气泡，主动阀故障，出口阀故障，密封垫或柱塞杆磨损，渗漏或堵塞，比例阀故障，传感器故障，使用比例阀混合时盐浓度太高。三、自动进样器1、日常维护检查进样手臂的绿色胶套时否损坏，如果是请更换之，否则会使样品放置位置不正确而导致如针，针座等损坏；用酒精棉签擦拭针座防止灰尘污染堵塞针与针座；样品尽量过滤，防止颗粒堵塞系统；更换转子密封圈；更换针及针座。2、故障排除2.1样品量太少（某些离心处理的样品），无法过滤，为了尽量避免堵塞，可以采取什么措施在自动进样器设置中，适当抬高进样针抽样时的位置。2.2怎样判断自动进样器的转子垫圈磨损将第四号管（排液的细塑料管）提起，一般情况下应没有液体滴出，如有则转子垫圈磨损。色谱现象：压力不稳，保留时间面积重性差，残留严重。2.3压力正常，重现性有时好有时不好原因可能是样品瓶里的样品量太满，正常应该为0.5到1.5mL。四、色谱柱及柱温箱1、日常维护连接的管路尽量短，防止热扩散及峰增宽；如果使用小体积分析柱以及流速小于0.2mL/min时建议使用左边的柱温箱(左边体积较少, 3ul)；除非特殊应用，建议将两边温度设置一样。并确保关好前盖；如果是冷凝水导致漏液，建议终止漏液传感器检测功能．过滤所有的溶剂和样品；使用保护柱；仪器在使用完毕，要冲洗整个系统，移走系统中缓冲液；在适当的溶剂中保存柱子；柱子在不使用时，两端密封保存；注意色谱柱的pH值使用范围；不要高压冲洗柱子不要高温下过长时间使用硅胶键合相。2、故障排除2.1如果加热块堵塞怎么办用管线连接泵与加热块出口，开泵进行反冲。2.2如果是冷凝水导致漏液怎么办终止漏液传感器检测功能。五、检测器1、检测器泄漏可能的原因：接头松动、毛细管破裂、流通池泄漏。建议采取的措施：保证所有接头紧固；更换破裂的毛细管；更换流通池元件。2、UV灯不能点亮可能的原因：UV灯电源没有接上、UV灯坏了、主板有故障、电源有毛病。建议采取的措施：确保UV灯电源连接牢固；更换UV灯；更换 DAD 主板；更换电源。3、光强测试失败可能的原因：在流通池内有吸收光辐射的溶剂或气泡、流通池污染、光学部件污染（消色差透镜，窗口）。建议采取的措施：确保流通池中用水做介质，没有气泡；进行流通池测试。如测试失败,更换流通池窗口；用乙醇和不起毛的布擦洗光学部件。4、流通池测试失败（比值低）可能的原因：在流通池内有吸收光辐射的溶剂或气泡、流通池污染建议采取的措施：确保流通池中用水做介质，没有气泡；更换流通池窗口。5、基线噪音大可能由那些原因引起泵压不稳，气泡，色谱柱污染，系统管路污染，流通池污染，灯强度不足，光学系统老化或污染。

高效液相色谱柱的故障分析，与大家分享！

[color=#444444]液相色谱，在寻找物质检测的合适方法时碰到一个问题，如何判断液相色谱峰的好坏，是峰越尖锐越好，峰宽越小越好吗？还是在一定范围内具有这个规律，超出某一限度之后就不遵循？求各位大神指点[/color]

最近有客户向我们咨询，液相色谱出现连着双峰，是一个还是2个，如何判断？以下解答分享给各位版友，希望对大家有帮助http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif问：液相色谱出现连着双峰，是一个还是2个，如何判断？答：连着的双峰可能是两种情况导致的： 1、难以分离的两种物质；2、一种物质，由于拖尾严重以至于出现肩峰； 判断方法：用多组分标液进行测试，如果每个主峰后均有一个小峰，则很有可能是肩峰；或者用厂家指定的测试液测试柱性能，如果测试物分叉，则可判断分析时连着的双峰是一种物质分叉所致。

高效液相色谱仪有哪些故障经常发生1、液相色谱仪压力过低，造成这种结果的就只能是因为系统泄漏的问题，首先寻找各个接口处，特别是色谱柱两端的接口，把泄漏的地方旋紧即可，如果泵里进了空气也会造成压力不稳的状况发生，这时我们要打开Purge阀，用3~5ml/min的流速冲洗，如果不行，则要用专用针筒在排空阀处借住外力将气泡吸出。2、液相色谱仪柱压问题，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关，柱压平稳缓慢的变化是允许的。3、液相色谱仪压力过高，造成这种结果的原因是流路中有堵塞的原因。高效气相色谱仪是目前应用最多的色谱分析方法的仪器，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待侧物所含有的物质。虽然高效液相色谱仪作为一种高精密仪器，但是日常使用也会经常出现各种故障问题感到很困扰，根据我多年的经验为您总结出以上几点，希望对大家有所帮助。文章有www.jpyiqi.com 编写。

如何判断液相色谱柱失效我做完实验，指标成分的柱效可达1万多，再次用连对照品的峰都变的又宽又拖尾，这是不是柱子坏了？我该真么办？谢谢。

使用高效液相色谱怎样根据保留时间大致判断物质？？麻烦大家给予详细的说明

做液相的，都知道做实验时有机溶液带来的危害。不知道有没有一种简单、快速的方法，判断液相色谱室里的有机溶液溶度较高了，已经能对人体造成一定伤害？

[font=&][size=24px][color=#666666] 高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]属于精密仪器,在使用时精密仪器常常会出现相应的故障问题,这对它精密度的影响是相对较大的.如果发生类似的情况,首先需要对产生的故障问题进行充分的分析,然后提出有效的解决方案并进行反复测试,以便在之后的应用中更好地解决类似的问题,这样才能对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]的使用提供保障.文章对高效[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]经常发生的故障进行了相应的分析和研究,并提出相对有效的处理方案与应对措施.[/color][/size][/font]

液相色谱最大的故障是漏液问题 液相色谱现在在分析实验室应用的很多，对样品分析分析做出了巨大的贡献。当然由于这种仪器的固有特性（高压或超高压），在实验过程中也可能会出现很多故障问题，给实验带来很多麻烦，给操作者带来很多烦恼。 液相色谱在使用中可能会出现很多问题，其中最常见的故障那肯定是漏液问题了。由于系统长期处于高压状态，那很多部件漏液就在所难免了。再就是液相泵是在线输液，在高压状态下动态工作也是漏液的有一大因素。另外液相可能会用到酸碱盐溶液，这些溶液可能会对系统造成污染或堵塞等，这就使得系统的压力更高，造成漏液。 液相色谱溶液漏的地方有泵头处（密封圈或柱塞杆损伤所致），单向阀处，阻尼器处，混合器处，进样阀处，放空阀处，色谱柱处，检测池处，接头处等等。 漏液是液相常见的问题，不够是进口仪器还是国产仪器，只要是液相仪器就都可能会漏液，只是漏液的程度和频率问题。这个问题我们只能是竭力控制或减少缺很难彻底解决，尤其是寿命较长的老仪器，那就更难避免了。 其实漏液、漏气问题在其它分析类产品中也可能会出现，只是可能没有液相这么严重。 液相色谱漏液问题解决办法一般都是换件，比如密封圈、密封垫、柱塞杆，刃环、滤片、接头等。另外清洗、疏通管路、液路也是常见的解决办法。

这是4月份发生的事了，处理完毕是5月底。这台在线色谱，西门子的MAXIUM 2型，具备FID检测器2个，TCD检测器一个，全自动，工作站为内置的信号数据处理单元。故障发生于下午，在DCS处理界面得到故障信号与报警，现场发现时，虽做了多项检查，发现还是无法处理，现场判断原因为2个，L-FID和数据处理板故障，联系厂家，厂家根据故障信息，判断为信号处理板DPM故障，因处理板上有许多附加信息板，是哪部分故障，厂家或许知道，也或许拿不准，建议我们做个自我测试，因为厂家来人费用较大，而且故障原因也不好判断，最重要的是需要时间，厂家的某些专家建议自己先试试。根据此建议，我对数据板做了一些测试，最终判断证实了厂家的判断，据此判断，厂家建议更换左侧数据板。我做了个紧急采购计划，1个月后，板子到货，因工作原因，推后了半个月，装上了此板，热机3天后，仪器正常，此事就此做结。特借气版，做个简单介绍。其实，此事最困难的是故障判断上，用户因缺乏经验和备件，很难在许多判断原因上做测试，做此分享，或许能让部分版 友少些烦恼。因水平极为有限，在此就一下简单的分享吧，菜鸟故事，大家莫笑。在此也向厂家的专家致谢，感谢您热心的解答和帮助！说实话，咱这不是对仪器的维修，只是简单的更换部件，在这一点，我想大家都会比我做得好。说原创可能有点过分，这只能说明这篇小东西是我写的，真正的技术原创，那是厂家的专利。前文已经说过，更换是比较简单的，判断准确和及时快速是很重要的！光判断不证实也是不行的！因图片较多，而速度较慢，我还是采用一图一贴的方式上传，这样，个别的图片需要做注解也方便些。

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=115288]LC—5000型液相色谱泵阀电路故障分析[/url]通过对美国瓦里安(Varian)公司生产的LC-5000型液相色谱仪泵阀控制信号故障分析,分别介绍各相关电路的组成及工作原理,并提供详细的检测与维修方法，很值得参考的

这条规则往往被人忽视。应该在每次维护和故障排除后都做记录。例如，对系统的某一特定故障因为没作记录就不可能系统地分析问题，费时又费力。从长远观点看，系统发生的特定故障对今后的操作也有极其重要的意义。每台仪器都应备有维修记录本，内容包括日期、故障部位、现象、产生的原因、解决的办法和结果等。还有一点要注意，试过的或换下的部件都要贴上标志。做好维修保养记录有如下好处：（1） 让所有的操作人员都知道发生了什么故障，操作过程中以引起注意；（2） 帮助操作人员描述故障现象；（3） 当再次发生故障时可根据资料尽快解决问题7 预测规则：有维修实践和保养习惯的人员应能够预测系统的故障，平时在保养方面多投入些时间，系统会以减少故障作为报答，同时也消除了连锁性的损坏。例如，因平时不注意保养，泵的密封圈坏了，造成流动相渗漏，会腐蚀泵和其它部件。善于保养能节约时间和金钱而不是仪器控制了操作人员。例如，每天开始工作或结束工作时发现灯寿命引起基线漂移就把灯换下来。如果等到灯坏了，就需要停机，造成的损失可能比一个灯的费用还要高。8 缓冲液规则：这条规则提醒你停机时一定要洗净系统中的缓冲物。系统中缓冲物的残余会造成腐蚀、磨损和阻塞。另外，生理缓冲液极易受到细菌和霉菌的影响。理想的冲洗液是不含缓冲物的相同组成的流动相。不要让纯水贮藏于系统中，以防生长细菌。可在水中加入10%的有机溶剂或0.02%～0.05%的叠淡化钠。在实验室中应按如下程序冲洗；用纯水冲洗30～60min（1mL/min）再用甲醇冲洗30min后关机。千万不能一开机就用有机溶剂冲洗，否则无机盐就会沉淀在系统中，造成不良后果。故障的确定对液相色谱系统的故障作逻辑推理是快速纠正系统故障的关键。某些一目了然的故障，如接头漏了，紧一紧螺丝就可以了，有些故障一时难以判断，如拖尾峰的问题，可能一时早不准原因。遵循有规则的模式解决问题，十分重要，而不是漫无目标地逐一检查每一个部件。1 粗看一遍：首先，故障发生后要对系统做一次快速的检查。沿着流动相存贮器经系统到放空，整个流路看一遍就能发现问题所在：泵的入口处有无气泡、接头是否渗漏、压力是否正常、还有没有其它反常现象？其次，确认所设定的条件是否合适：检查流动相、流速、压力、色谱柱类型、检测器，调整这方面对方法的适应性。进行这两步检查仅需一两分钟时间，却能够做到事半功倍。2 系统的变化：例如，开机后进行过维修，更换过零部件，加入了新流动相，分析过特殊样品，改变过方法，甚至停过电等。如有其它操作人员在实验室中询问一下仪器是否有过什么变化，最后认真归纳系统发生的每一个变化，就能解决许多问题。3 对照参比条件：系统如果出了问题在色谱图上都会有反应，再做一次试验参考色谱图。如果参考色谱图没有问题，可以考虑是否样品出了问题；如果参考色谱图有问题，那么系统就有了问题。也有些问题不能在色谱图中反映出来，如压力变化，这时应弄清流动相及其流速是否有误，不必再做试验参考色谱图。4 逐步分析并解决问题：如果上述尝试都无效，可将系统一次做一种变化，并同时进行记录。变化无效的一般无问题，有效的应做上记号，然后根据实际情况，调换部分或整个部件。

贡献给大家，希望得到大家的鼓励！[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=19641]液相色谱柱故障诊断与维护[/url]

近几年来，我国工业产品研制的需要我国从国外引进了大批综合试验系统，为我国工业产品的研制和定型发挥了重要作用。但由于三综合试验箱（三综合试验箱是指能同时施加温度、湿度应力的试验箱，它与振动台相结合可以组成综合试验系统。）本身的复杂性，使得三综合试验箱在运行中出现了许多问题，而且出现了问题不能及时解决，大大延长了试验周期，影响了产品的研制工作。而产生这些现象的原因是对三综合试验箱的工作原理不了解。介绍如何对三综合试验箱的故障进行分析和判断。　　试验箱箱体采取拼块式结构，三综合试验箱由制冷系统，加热系统，控制系统，湿度系统，空气循环系统，和传感器系统等组成。由于三综合试验箱是一个既有电气又有制冷机械等多个系统组成的设备，因此，一旦设备出现问题，一定要全面地对整个设备进行检查和综合分析。一般来说，分析判断的过程可以先"外"后"里"。即首先排除外部因素，如冷却水、供电等，在完全排除外部因素后，根据故障现象，对设备进行先系统分解后系统综合的分析判断，可以采用倒推的方法查找故障原因：首先按照电气接线图查找是否电气系统的问题，最后查找是否制冷高天试验设备有限公司三综合试验箱，快温变试验箱，线性恒温恒湿试验箱，冷热冲击试验箱的质询www.whgt17.com

液相色谱仪是属于易学难用的仪器，特别讲究“正确使用”和经验。液相工作者接触最多的是流动相，也就是流动相，是造成液相色谱各种问题的最主要源头。液相色谱仪最常见的故障一是堵，二是漏。 下面就这两点分别展开讨论。（注：流动相以甲醇为例，色谱柱以C18为例）。“堵”的表现现象就是柱压异常升高，直接原因就是流路不畅。堵塞的主要位置就是在色谱柱的前端，最主要原因就是流动相里有杂质，杂质的主要来源就是细菌。 “堵”的原因之一：配制流动相时细菌污染。 首先我们要认识到，一般的国产甲醇其实不需要额外过滤处理，直接使用没有问题。即使是有些固态微粒杂质，也能在液相流路系统最前端的过滤头上排除，真正容易引起问题的，是水中的细菌。新制备的纯水在室内放置几天就会长菌，而这些细菌虽然肉眼不可见，却足以堵塞柱填料颗粒的空隙，造成柱子很快报废。这就是在配制流动相时造成的细菌污染的原因，解决它的方法很简单，就是确保水的可靠性。这里有两种方式推荐：（1）最理想的方式当然是购买实验室专用纯水机，既方便又可靠，质量也放心。唯一的缺点就是价格不菲。（2） 成箱购买市售品牌纯净水，如500ml 一支的怡宝或娃哈哈，这些水的质量足以应付液相色谱的要求。先随机抽取一支做一下细菌平板实验，待菌落数合格方可使用。这样每次只要单独开一支即可，也很方便。每次成本2 元左右。流动相的过滤其实也没那么必要？这里特别指出一个细节：在绝大多数书本上，凡谈到配制流动相都会谈到最后有一个过滤的步骤。但是从我们长期使用的实际效果来说，只要能保证水的质量，这一步完全可以也应当去除。原因有以下三点：（1）流动相过滤在理论上有好处，但是实际操作时由于不可能做到专瓶专用，反而容易造成的交叉污染，对于配比复杂的流动相影响更大。（2）流动相过滤在经济成本上不划算。买一套过滤装置要6000多元，且过滤器公认是比较容易损坏的设备。最主要是过滤片的成本太高，一片就要几十元。按一般液相柱的正常使用寿命计算，过滤片的成本会远远高于色谱柱的成本。（3）流动相过滤对于工作效率成本不划算。使用溶剂过滤器有一个预清洗、装备、使用、用后清洗，晾干的过程，至少也有一个小时的时间。这个成本也不能忽视。（4）在实际工作未发现流动相不过滤会对柱寿命有任何影响。我们起码有6 年时间没有做过流动相过滤的工作，但是和国内同行相比较，在同等使用强度下我们的柱寿命是比较长的。“堵”的原因之二：使用流动相时的细菌污染。指的是：流动相刚开始没有长菌，在使用时却产生了细菌污染。这主要是在使用多元液相色谱仪时的一种不良使用习惯造成的。举最简单的例子：50％的甲醇水流动相，有两种使用方式。一种方式是在上机前就配好混合在一起，另一种方式是在流路A放纯甲醇，流路B放纯水。从单纯实验效果来说，后一种有明显的优点：首先是简单，不需要实验者另个计算配比混合，其次就是比例准确，能得到保留时间重复性极好的实验效果。但是，它有一个致命的缺陷，就是纯水在流动相瓶中几天时间就会长细菌（很多情况下不仅仅用纯水作流动相，而是用缓冲盐溶液，本身就是优质肥料，细菌长得更迅速），一旦有细菌柱子就坏得很快。所以这种方式要求操作人员每次实验都要用新制备的纯水，更要求在每次实验后把水相换掉，换成甲醇冲洗干净，这一点在实际工作中很多人意识不强，就是意识到了但多次使用中总有一两次会遗漏，但是往往这一两次就足以产生致命的影响。因为液相色谱柱的堵塞是不可逆的。所以，宁可牺牲小小的保留时间的重复性，也不要用纯水溶液作为流动相的一组。从实际实验效果来说，我建议用10％的甲醇水代替纯水溶液（以前我做过不同比例甲醇水的细菌总数实验，在5％就基本可以抑菌，在10％及以上就可以完全杀菌了），这样可以有效排除长细菌的隐患，既可作流动相，也可冲柱。就算是在配制流动相时会计算得麻烦一些，但是一次麻烦，终身受益。 "堵”的原因之三：不适当操作常见问题的有以下几种：（1）在更换零件时选择的型号有误，接口不是很匹配，在拧紧的时候产生变形而使得管路堵塞。（2）样品处理液净化得不干净，长期会在六通阀和柱之间形成阻塞不畅。（3）在使用手动六通阀时，有些人可能由于手劲小的原因，转动的不到位，于是造成流路形成了死堵，压力快速升高超过警戒值。（4）在使用金属管路作出废液管时，应当注意最好废液瓶中先放一些水，并把废液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且实验使用较高浓度的缓冲盐溶液，在停机时可能在出口端结晶成块并造成堵塞。这种情况不常见，但却的确发生过。“堵”的原因讲了不少，现介绍查堵的方法在发生“堵”的现象后，就需要找出原因，主要是什么位置发生了“堵”。注意，绝大多数情况下，整个系统只会有一个地方发生堵塞。查堵的方法是从尾向前逆向分段拆开，仔细观察压力数值，如果某一个部件（柱子除外）装上和拆下时的压力差别很大，可发展变化判断。至于柱的堵塞，可以通过换同样规格的柱的压力是否一致来判断。下面再谈一下“漏”的问题。“漏”则分两种：漏液和漏气。一． 漏液液相色谱仪从流动相瓶到废液瓶之间的流路是一个全封闭体系，内部压力很高，但外部却能保证一滴不漏。如果某个部件发生了漏液，那就是故障所在。漏液的原因分两种：（1） 接触硬件不当。在更换零件如流路管或换柱时，换的接头接口不匹配，造成漏液。要注意不同公司的柱子接头很多是不同的，甚至同一家公司在不同时期生产的液相柱接头也有很大区别。当然选用PEEK接头是一个较好的解决方法，不仅通用性好，而且靠手拧就能保证不漏液。即使是接口本身是匹配的，但是如果操作不当也会漏液，一种不当就是力度把握不好，拧得太紧或太松；另一种不当就是致命的错误：滑丝，这是往往是动手能力不太强，螺丝钉很少拧的工作者犯的错误，滑丝的后果不仅是漏液那么简单，常造成重要部件的报废。解决这个问题只能靠恶补基本功来实验，那就是拧螺丝。（2） 使用仪器不当如果是输送泵漏液，最常见的原因就是在活塞位置缓冲盐析出造成。析出的原因有两个，一是使用缓冲盐溶液时突然加入了纯甲醇而析出，这种错误很容易避免，这是尽量不要用纯的甲醇和纯水。只要互相有10％的比例就不会出现这个问题。另一原因是在用缓冲盐溶液（不论甲醇含量有多少）作流动相时，实验结束后没有换甲醇水冲洗，使得微渗的流动相干燥形成晶体造成。不过，输送泵漏液并不是非得马上修不可，冲洗干净并在以后的使用中多加小心一般都可以正常使用。检测器漏液是个很麻烦的事，一般都是吸收池的问题，更换的费用相当高。但是并不是说一定要马上更换，还可以从实际实验效果看能否凑合使用。二． 漏气漏液是从内部向外漏，而漏气则是外部的气体进入液相色谱仪的流路内部形成了气泡。下面按流路的方向逐个部件分析产生气泡的原因和相应解决方法。（1） 过滤头抽液时，在流路管中有不规则但持续的小气泡产生，这时考虑的是流动相有没有脱气（需要特别提醒即使是有了真空脱气机也是要先超声脱气的，起码可以减少脱气机的工作压力并提高工作效率），如果已经脱了气，则要注意过滤头的污染也会造成这种现象。处理方法比较简单，拧下过滤头在稀硝酸中浸泡，超声半小时，洗净后装回去即可。（2） 透明流路管指的是在过滤头和输送泵之间的那一段管路。这一个部分往往不是有点气泡，而经常是整个管中全是空气而操作人员却浑然不知，以致输送泵工作了半天才发现流动相瓶里的液体一点也没少。这也是我们常说的液相色谱仪至少一周要开机一次的原因（我们做液相一定要有“微渗”的概念）。如果长时间不用，这一段管路的液体会彻底干掉，而充满空气的管路和充满液体的管路不仔细看是分辨不出的。这种情况对于输送泵很危险，因为泵从设计来说是输送液体而不是气体，内部的液体对于活塞来说起到了机油的作用，如果活塞杆上还残存了一些缓冲盐，则极易拉伤，造成不可逆

液相色谱仪的故障排除 封跃鹏 邱赫男(国家环保总局标准样品研究所，北京，100029)来源：« 分析仪器 » 1日常维护1．1 泵 泵是液相色谱仪的心脏，须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵，其基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能，应该保持泵系统的清洁。具体做法如下：（1）要选择优质的容剂和试剂，在进入仪器前用0。45um膜过滤，并进行脱气处理。（2）泵开始使用时，一定要用合适的流动相彻底清洗干净。（3）定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，并经常清洗进液处的微孔滤头。（4）改变流动相时，应避免沉淀产生，以防止泵堵塞。1．2 色谱柱 色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱应具有很高的塔板数，且仪器基线平稳。色谱柱比较娇气，在平时的工作中须注意以下事项：（1）色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈震荡；安装时，一定要保证阀件或管路的清洁。（2）流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相。（3）在满足灵敏度的情况下，尽可能使用小进样量。如果样品比较“脏”，要进行净化或提纯处理。（4）分析结束语后，要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。（5）如色谱柱长期不用，应该用适当的有机溶剂保存并封闭或定期给柱子补充合适的流动相。1．3 检测器对于紫外检测器，在分析柱平衡的差不多时，开启检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。1．4 进样器分析结束后，应反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染或堵塞。2 常见故障的分析与排除既使日常精心维护的液相色谱仪，随着使用时间的增加或使用者经验不足也会出现一些问题或故障。现将液相色谱仪容易出现的故障及解决办法介绍如下：2．1 保留时间变化保留时间的变化有三中情况：波动、缩短、延长。保留时间出现波动时，应检查柱温是否处于恒温状态，如果设置为室温，气温的变化会引起保留时间的波动，应该设置为恒定温度；等度和梯度间还没有充分达到平衡状态时，应该用十倍以上柱体积的流动相去平衡色谱柱；缓冲液浓度太低时，应换用＞25mmol/L的缓冲液；色谱柱被污染或已经接近柱寿命时，应更换保护柱或换新色谱柱。 保留时间缩短时，流速增加，应检查流速的设定；柱温高时，应检查柱的设置；进样量太大时，减少样品用量或降低样品浓度；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；流动相的PH值应保持3~7.5范围内，否则会引起柱键合相的流失。 保留时间延长时，流速减小，应检查流速的设定和管路是否有泄露；柱温低时，检查柱温的设置；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；检查流动相的pH值是否3~7.5范围内，否则会引起柱键合相的流失。