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病毒免疫荧光分析仪

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  • 免疫荧光法和免疫印迹法区别

    [font=宋体]免疫荧光法和免疫印迹法是生物学领域中两种常用的实验技术,它们在原理、操作过程和应用方面有着显著的区别。本文将详细探讨这两种技术的区别,以便更好地理解它们的特点和应用价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]首先,我们来了解免疫荧光法。免疫荧光法是一种利用荧光物质标记的特异性抗体来检测细胞内或细胞表面抗原的技术。其基本原理是抗原抗体反应,通过荧光显微镜观察荧光标记的抗原,从而实现对抗原的定位和定量分析。免疫荧光法具有高灵敏度、高特异性和定位准确的特点,广泛应用于细胞生物学、微生物学、免疫学等领域。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]相比之下,免疫印迹法则是通过检测细胞或组织提取物中特定抗原的存在和分布,以了解其在生物学过程中的作用。这种方法通常涉及到蛋白质的提取、分离、转移和检测等步骤。免疫印迹法能够检测蛋白质的分子量、表达水平以及与其他分子的相互作用,为生物学研究提供了重要的信息。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在操作过程上,免疫荧光法主要涉及细胞的固定、通透、抗体孵育和荧光显微镜观察等步骤。而免疫印迹法则需要进行蛋白质的提取、电泳分离、膜转移、抗体孵育和显色等复杂操作。因此,从操作难度和复杂性来看,免疫印迹法相对更为繁琐。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]在结果解读和应用方面,免疫荧光法能够提供直观、定位准确的抗原分布信息,有助于研究细胞的结构和功能。而免疫印迹法则能够揭示蛋白质的表达水平、分子量和相互作用,为疾病诊断、药物研发和生物学机制研究提供有力支持。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]此外,免疫荧光法和免疫印迹法在应用领域上也有所不同。免疫荧光法广泛应用于细胞生物学、微生物学、免疫学等领域,特别是在病毒检测、细胞信号转导和细胞凋亡等研究中发挥着重要作用。而免疫印迹法则更多地应用于分子生物学、生物化学和病理学等领域,对于研究蛋白质的结构、功能和调控机制具有重要意义。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]免疫荧光法和免疫印迹法优缺点介绍:[/font][/b][font=宋体] [/font][table][tr][td][font=宋体]技术[/font][/td][td][font=宋体]优点[/font][/td][td][font=宋体]缺点[/font][/td][/tr][tr][td=1,4][align=center][font=宋体]免疫荧光法[/font][/align][/td][td][font=宋体]特异性强[/font][/td][td][font=宋体]非特异性染色问题尚未完全解决[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]敏感性高[/font][/td][td][font=宋体]操作程序较复杂[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]速度快[/font][/td][td][font=宋体]需要特殊的昂贵仪器(荧光显微镜)[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]早期诊断价值[/font][/td][td][font=宋体]染色标本不能长期保存[/font][/td][/tr][tr][td=1,3][align=center][font=宋体]免疫印迹法[/font][/align][/td][td][font=宋体]操作简便[/font][/td][td][font=宋体]对于低丰度的抗原可能不够敏感[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]所需实验材料相对简单[/font][/td][td][font=宋体]无法提供抗原在细胞或组织中的定位信息[/font][/td][/tr][tr][td][font=宋体]对某些特定抗原的检测具有较高的灵敏度[/font][/td][td][font=宋体]需要一定的实验技能和经验[/font][/td][/tr][/table][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述,免疫荧光法和免疫印迹法是两种具有不同特点和应用领域的实验技术。免疫荧光法注重抗原的定位和定量分析,操作简便直观;而免疫印迹法则关注蛋白质的表达和相互作用,操作相对复杂但能提供深入的信息。在实际应用中,我们需要根据研究目的和需求选择合适的技术手段,以获取准确、可靠的实验结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光([/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]IF[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b])检测服务[/b][/url],更多详情可以关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 10种免疫荧光检测方法

    [font='calibri'][size=13px]10种免疫荧光检测方法详解!从入门到专业![/size][/font]免疫荧光技术(Immunofluorescence technique )又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。免疫荧光步骤包括,细胞固定和通透,封闭,孵育一抗,二抗等。除了这些基本步骤,接下来的实验方法希望可以帮到您。1. 细胞固定和通透为达到蕞佳的检测效果,细胞需要经过固定和通透。步骤很重要,细胞和抗原需要保证蕞佳的结构,并利于抗体与抗原结合。通常情况下,2. 抗体特异性免疫荧光需要用到特异性非常强的抗体,可以避免高背景和不理想的蛋白定位结果。在大多数情况下,纯化抗体的效果很好,但是正确的对照可以帮助精-准定位抗原。使用只有二抗染色的片子作为阴性对照,有利于减少降低背景干扰。3. 合适的抗体稀释比例通过优化抗体稀释比例来优化染色,通常情况下 1ug/ml 的纯化抗体或者 1:100-1:1000 的抗血清足够达到特异性染色的结果。但在能保证低背景染色的前提下,可以通过增加浓度来提高信号强度。如果是第1次使用该抗体或测定某抗原,强烈建议浓度梯度实验。4. 优化缓冲液和封闭剂尽管很多抗原在常见的 Buffer 如 PBS 中可以很好的被染色,但是对于某些目的抗原,更换一下含有不同离子的缓冲液,比如钙、镁、钾等,可以带来很大程度上的改善。Rockland 可提供优化过的 IHC 用封闭缓冲液,同样适用于荧光染色实验。5. 选择正确的二抗如果您需要做免疫实验,我们强烈建议您选择进行过预吸附的二抗进行单染实验;如果是双重甚至是多重染色,那么必须使用预吸附的二抗。同时,请优先选择来自同一物种的二抗。6. 使用合适的细胞密度选择合适的细胞数量进行染色,当细胞数量过多时,细胞结构不好,导致染色背景深,低细胞密度,会使细胞贴壁不佳,状态不好。7. 多重染色对同一样本进行两个不同抗原的检测时,可以用各自的抗体进行同时染色,但要求两个一抗的种属来源不同,标记物不同,而二抗的种属来源需保持一致。8. 降低背景高背景是免疫荧光常见的问题,解决此问题可以用二抗来源的正常血清代替 BSA 做封闭液,降低抗体浓度,增加洗涤次数,洗涤至少三次,每次五分钟,推荐洗涤液为 PBS+0.05%Tween。9. 封片作为免疫荧光的蕞后一步,可以提高折射率,保护样品。10. 数据分析观察整体样片时,选择具有代表性的细胞进行数据获取与分析。以上是10种检测方法,但是针对免疫荧光检测服务,推荐义翘神州,服务优势:①技术员长期从事抗体质量控制工作,经验丰富。②拥有包括Nikon A1激光共聚焦显微镜等重要仪器,可满足您对样片、活细胞等样本的静态和动态观察拍摄。③检测结果准确、重复性高,实验结果可直接用于论文发表。更多免疫荧光检测服务详情可以参看https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service

  • 免疫组化(IHC)与免疫荧光(IF)检测的区别及服务推荐

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service][b]免疫荧光技术[/b][/url]([/font][font=Calibri]Immunofluorescence technique [/font][font=宋体])是在免疫学、生物化学和荧光成像系统基础上建立起来的检测技术。技术原理是根据抗体[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗原特异结合,以荧光标记抗体示踪组织或细胞内相应抗原。免疫荧光技术因特异性强、灵敏度高和操作简便的优势广泛应用于免疫学、微生物学、病理学、肿瘤学以及临床检验等生物学和医学。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫组化,是应用免疫学基本原理[/font][font=宋体]——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术[/font][font=Calibri](immunohistochemistry)[/font][font=宋体]或免疫细胞化学技术[/font][font=Calibri](immunocytochemistry)[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]区别:[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫组化和免疫荧光都经过免疫原,原理相似,只是显色剂不同,免疫荧光是免疫组化技术之一。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、免疫组化是应用免疫学的基本原理,即抗原和抗体特异性结合的原理,通过化学反应确定组织细胞中的抗原,使标记有抗体的显色试剂显色,并对其进行定位、定性和相对定量研究。在免疫组化过程中,常用的显示剂包括荧光素、酶、金属离子或同位素。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、免疫荧光是一种不会影响抗原和抗体活性的荧光色素,被标记在抗体或抗原上,然后与其对应的抗原或抗体结合,在荧光显微镜下呈现特异性的荧光反应。免疫荧光是免疫组化技术之一,具有特异性强、灵敏度高、速度快的特点。但相对结果判断的客观性不足,技术程序复杂。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]免疫组化与免疫荧光的真正目的均为明确病理诊断,以便患者获得精准治疗。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州拥有专业的技术人员和共聚焦显微镜等仪器平台,为客户提供高质量的免疫荧光检测服务,包括对细胞爬片、石蜡切片、冷冻切片和组织芯片等进行免疫荧光单染、双染、及多重染色等。可以为客户提供免疫荧光([/font][font=Calibri]IF[/font][font=宋体])检测服务和石蜡切片免疫组化([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])检测服务,有需求的朋友可以来义翘官网进行查询,详情参看[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunofluorescence-service[/font][/font]

  • 多重免疫荧光染色步骤和原理

    [font=宋体][font=宋体]多重荧光免疫组化技术[/font] [font=Calibri](Multiplex immunohistochemical[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]mIHC) [/font][font=宋体]也称作酪氨酸信号放大 [/font][font=Calibri](Tyramide dignal amplification[/font][font=宋体],[/font][font=Calibri]TSA) [/font][font=宋体]技术,是一类利用辣根过氧化酶 [/font][font=Calibri](Horseradish Peroxidase, HRP) [/font][font=宋体]对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]这一技术基于酪胺信号的放大效应,实现对单个细胞或组织样本上多个目标靶点的同时检测。这为全面研究细胞组成、细胞功能以及细胞间的相互作用提供了强大的工具。通过多重荧光免疫组化技术,科学家们可以更深入地了解细胞的奥秘,揭示生命现象的复杂性。[/font][b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]mIHC [/font][font=宋体]实验原理及流程[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]TSA [/font][font=宋体]技术采用 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]标记的二抗,[/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]催化加入体系的 [/font][font=Calibri]TSA [/font][font=宋体]衍生荧光染料,生成活化荧光底物,活化底物可与抗原上的酪氨酸共价结合,将信号共价结合到抗原上。之后用热修复洗去非共价结合的抗体,再换下一种一抗来第二轮孵育,换另一种荧光素底物,如此往复就可实现多重标记。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]原理:[/font][/b][font=宋体][font=宋体]带有染料标记的底物酪胺[/font] [font=Calibri](T) [/font][font=宋体]分子在过氧化氢氧化环境下,被抗体或探针固定的 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]转化为具有短暂活性的中间状态 [/font][font=Calibri](T*)[/font][font=宋体],然后被激活的中间态分子 [/font][font=Calibri](T*) [/font][font=宋体]迅速与相接蛋白分子的富含电子区域 [/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]酪氨酸残基[/font][font=Calibri]) [/font][font=宋体]进行稳定的共价结合,未被标记的酪胺分子将被洗脱,借此实现对抗原的特异性染色。由于相接的蛋白 [/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]包括 [/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体],抗体,目标抗原[/font][font=Calibri]) [/font][font=宋体]都含有大量的酪氨酸结合位点,所以目标抗原处会富集大量标记分子,使信号被有效放大 。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]多重免疫荧光染色的步骤包括样品制备、抗原诱导、抗原解露等。[/font][/b][font=宋体]具体如下:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]①样品制备:根据细胞或组织的不同,选择不同的处理方式。对于细胞样品,需要固定和渗透化处理以保持其形状和蛋白质结构。对于组织样品,需要切片并进行染色前的去脂处理。[/font][font=宋体]②抗原诱导:如果目标标记物是蛋白质,那么需要选择适当的抗体来识别目标蛋白质。抗体可以人工合成或从动物体内提取。[/font][font=宋体]③抗原解露:对于细胞样品,可以利用活液解离细胞,并将细胞固定在载玻片上。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]与 [/font][font=Calibri]mIHC[/font][font=宋体]区别与联系[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/stable-cell-line-development-service][b]免疫组化[/b][/url],是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原,对其进行定位、定性的研究。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]简单来说,[/font][font=Calibri]mIHC [/font][font=宋体]属于 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]的升级版本![/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]Tips[/font][font=宋体]:[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]相同点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]能够完整显现组织原位形态信息。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]不同点:[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1. [/font][font=宋体]常规免疫组化的分析属于定性分析,其判断大多依赖于经验,其分析结果会有差异。而多重荧光免疫组化属于定量分析,其利用软件可对组织中的细胞进行精准的结果分析。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2. [/font][font=宋体]常规免疫组化受传统染色成像的限制,靶标少于 [/font][font=Calibri]3 [/font][font=宋体]个,无法完整分析组分信息。而多重荧光免疫组化可实现多因子共定位,可以获取更多的生物信息,且样本需求量较少。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供的[/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b]TSA[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services][b]法多重荧光免疫组化服务[/b][/url],有一系列屏蔽自发荧光干扰的手段,配合激光共聚焦显微镜的拍摄条件,提供更优质的图像质量,收获更特异的染色结果。[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/fluorescent-multiplex-ihc-services[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=Calibri] [/font]

  • 【分享】荧光免疫分析仪对沙门氏菌的检测

    为探讨一起食物中毒的病原菌,按照GB/T4789-2003及WS/T9-1996中食源性致病菌的检验方法,应用mini-VIDAS全自动荧光免疫分析仪等对所采集的食物中毒标本进行检验。结果 25件标本中检出的5株菌均为都柏林沙门氏菌,说明本次食物中毒的病原菌为都柏林沙门氏菌。

  • HRP标记的二抗能做免疫荧光吗?

    [font=宋体][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service][b]免疫组织化学[/b][/url]([/font][font=Calibri]IHC[/font][font=宋体])是一种实验技术,通过使用一抗来检测组织切片中细胞内的蛋白质(抗原)。在间接检测法中,一抗常与辣根过氧化物酶([/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体])偶联的二抗结合。最后,利用如[/font][font=Calibri]DAB[/font][font=宋体]等底物来显现染色,以可视化抗原的存在。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]辣根过氧化物酶标记的二抗通常用于如免疫印迹、酶联免疫吸附试验以及免疫组织化学等应用。然而,对于免疫荧光而言,二抗需要带有在激发光下激发的荧光基团,常用的标记物为异硫氰酸荧光素[/font][font=Calibri](FITC)[/font][font=宋体]和罗明达[/font][font=Calibri]B200(RB200)[/font][font=宋体]标记的抗体。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]因此,[/font][font=Calibri]HRP[/font][font=宋体]标记的二抗不能直接用于免疫荧光。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]使用[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗时,优化 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]实验的简便技巧[/font][font=Calibri]:[/font][/font][/b][font=宋体][font=宋体]①选择合适的 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗[/font][/font][font=宋体][font=宋体]务必确保[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗与一抗的相容性。举个例子,如果一抗在兔体内制备,则应使用抗兔 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。如需了解更多技巧,请查看我们的二抗选择指南。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]②在 [/font][font=Calibri]IHC [/font][font=宋体]染色过程中,如何选择 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗的初始稀释度?[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗的最佳稀释度取决于一抗。我们建议在 [/font][font=Calibri]1/1,000 [/font][font=宋体]至 [/font][font=Calibri]1/100,000 [/font][font=宋体]这一范围内进行试滴定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]③对于 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]标记的二抗,建议使用哪种缓冲液?[/font][/font][font=宋体][font=宋体]可使用含[/font] [font=Calibri]TBS [/font][font=宋体]的 [/font][font=Calibri]1% BSA[/font][font=宋体]。[/font][font=Calibri]Abcam [/font][font=宋体]建议使用 [/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体],因为 [/font][font=Calibri]TBS [/font][font=宋体]的背景比 [/font][font=Calibri]PBS [/font][font=宋体]更干净。如果仍然遇到高背景染色,您可以增加 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]浓度或使用含 [/font][font=Calibri]5% [/font][font=宋体]牛奶的 [/font][font=Calibri]TBS[/font][font=宋体]。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]请注意,二抗可能与组织中的内源性免疫球蛋白发生交叉反应。用二抗种属的普通血清预处理组织,可最大限度地减少交叉反应。一抗孵育前,使用普通血清进行封闭还可避免[/font] [font=Calibri]Fc [/font][font=宋体]受体与一抗和二抗的结合。加入 [/font][font=Calibri]BSA [/font][font=宋体]能够减少疏水作用引起的非特异性结合。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]④是否需要预吸附二抗?[/font][font=宋体][font=宋体]预吸附二抗可减少非特异性背景,因为它们不太可能表现出种属交叉反应性,或与预吸附种属的内源性抗原反应。二抗应针对样本来源种属进行预吸附。例如,对人体组织或细胞进行染色时,建议使用预先吸附了抗人血清的[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑤什么是证明二抗特异性染色的良好对照?[/font][font=宋体][font=宋体]为了证明二抗与一抗发生特异性反应,我们建议进行对照试验,即添加不含一抗的[/font] [font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗。如果在对照样本中观察到染色,则结果表明 [/font][font=Calibri]HRP [/font][font=宋体]二抗与组织上的内源性免疫球蛋白发生非特异性反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]⑥孵育时间[/font][font=宋体][font=宋体]室温孵育[/font] [font=Calibri]1 [/font][font=宋体]小时即可。如果信号较弱,可于 [/font][font=Calibri]4[/font][font=宋体]°[/font][font=Calibri]C [/font][font=宋体]孵育过夜。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]更多详情可以查看优质[url=https://cn.sinobiological.com/category/secondary-antibodies-list][b]二抗[/b][/url]列表页:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/category/secondary-antibodies-list[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

  • 【分享】图像分析仪工作程序

    使用者对硬件不需操纵,它们可完成复杂的运行过程,完整的计算机软件可按实际需要使其执行功能。对操作者来说,图像分析仪的实际操作很少,几乎完全是通过一个称为光电鼠标(mouse)的附件来操纵的。计算机屏幕上显示出多项指令,可由光电鼠标来指明你所需要的程序,光电鼠标可控制计算机屏幕上的一个光标,移动光电鼠标也随着移动,将光标移到计算机屏幕上显示的某项功能的区域内,就表示选择了该项功能,可以开始工作,极简便。   图像分析仪主要包括输入(input)、中央信息处理机(central processor)和输出(output)三大部分。实际上,工作程序并不是一成不变的,后面的步骤的信息常会反馈到前面,于是又重复前面的程序,具体步骤如下:  1.标本成像 移动标本使需要观察的部位在电视摄像机上得到适当放大的图像,标本包括组织切片或电镜照片或照相底片等。  2.图像获取 用电视摄像机或其他方法将图像转变为电信号,在此过程中,摄像机的性能极重要,不能使用那些便宜的适用于监视的电视摄像机,一定要用使图像具有很好的清晰度的摄像机。  3.加强图像 加强电子图像(electronic image)使其更适合于分析。  4.检测检测(detection )是图像分析过程中设法从图像中确定并且分离出需要分析灰度相的步骤,“相(phase)”是图像中我们想要测量的部分的总称。检测是通过选择一定的阈值来完成的,如果所需相比背景暗,那么所有暗于下限的东西都被选,例如相的灰度是20~50,20是下限,50是上限,背景的灰度小于20,检定时暗于灰度20的东西都被选。如果所需相比背景亮,如免疫荧光细胞化学技术的标本,那么亮于上限的东西都被选。如果所需相比背景亮,如免疫荧光化学技术的标本,那么亮于上限的东西都被选,例如相的灰度是5~20,5是下限,20是上限,背景灰度大于20,所谓上限既指比灰度20浅的亦即灰度20以下的相被选,而背景是暗于上限的,不被选作测量。如果相暗于图像某些部分而又亮于图像的另一些部分,那就要在二限之间的部分选择灰度了。

  • 如何使用酶联免疫分析仪检测生物实验

    如何使用酶联免疫分析仪检测生物实验

    [size=16px]  酶联免疫分析(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子(如蛋白质、抗体、激素等)在样本中的定量或定性测量的实验技术。以下是使用酶联免疫分析仪检测生物实验的一般步骤:  准备实验材料和试剂:  样本:可以是血清、尿液、细胞上清等。  标准品:已知浓度的目标分子,用于绘制标准曲线以计算未知样本中的浓度。  酶标抗体:用于与目标分子结合的抗体,被标记上酶以便后续检测。  捕获抗体:涂覆在微孔板上,用于捕获目标分子和酶标抗体复合物。  涂覆微孔板:  向微孔板中加入捕获抗体,使其在孔底吸附。  将孔板放置在冰箱或其他适当条件下孵育,让抗体吸附稳定。  加入样本和标准品:  加入待测样本和一系列已知浓度的标准品到不同的孔中。  标准品的浓度通常是一个浓度梯度,用于绘制标准曲线。  孵育和洗涤:  孵育样本和标准品,使目标分子与捕获抗体结合。  之后,使用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。  加入酶标抗体:  加入带有酶标记的抗体,它会与样本中的目标分子结合形成复合物。  孵育和洗涤:  孵育酶标抗体,使其与捕获的目标分子结合。  再次用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。  加入底物:  加入含有底物的溶液。底物被酶催化后会产生颜色或荧光,信号强度与目标分子的浓度成正比。  停止反应:  加入停止液终止底物的反应,防止颜色或荧光的继续产生。  测量信号:  使用酶联免疫分析仪读取每个孔的颜色或荧光信号强度。  将信号与标准曲线进行比较,计算样本中目标分子的浓度。  数据分析:  根据标准曲线和信号强度,计算样本中目标分子的浓度。  请注意,每个实验都需要根据具体的样本和目标分子进行优化和调整。操作过程中应严格遵循实验操作规程,以确保结果的准确性和可重复性。如果你是初次进行ELISA实验,建议在有经验的实验室或专业人士的指导下进行。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311608055074_5122_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

  • 基于阻抗方法实时无标记细胞分析系统--肿瘤免疫治疗以及病毒学研究中的应用

    [font=&][size=16px][color=#343a40] 肿瘤免疫治疗是一种利用人体免疫系统来战胜肿瘤的治疗方案。成功与否的关键就在于免疫系统能否被激活到足够去特异性地杀死肿瘤的程度。在临床实验前,人们需要借助体外实验先行评估治疗方案的效力。 Axion BioSystems公司革命性地推出了使用生物电感应技术的Maestro Z/ZHT平台,完美具备评估体外效力的必要条件。它能在免除标记物影响的同时,在长达几天的时间中,以非侵入的方式对细胞的健康和活动开展监测,并自动且实时地获得多至384个样本的完整实验信息。其秘诀就是通过埋设在微孔板底部的高灵敏度电极来进行生物电阻抗的测试。这种技术能够追踪微小的细胞变化,从而能够揭示出远低于其它技术最低检出限的生物学信息。[/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]--利用Maestro Z/ZHT评估T细胞对胶质母细胞瘤的杀伤效力(car T治疗):[/b][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]人体免疫系统中的效应T细胞,对肿瘤细胞有着高特异性和与生俱来的细胞毒性,在未来的脑胶质瘤治疗中被人们寄予很高的期望。Maestro Z的阻抗测试有着高灵敏、无标记及无损的特点,能够实时监测肿瘤细胞的增殖和T细胞介导的细胞溶解等过程,在体外评估免疫治疗的效价方面有着突出的优势。美国乔治亚大学的科学家们借助Maestro Z平台,对不同条件活化后的T细胞,开展了恶性胶质母细胞瘤杀伤效力的对比评估。详情点击:[url=http://www.axionbio.cn/page_1.html]CAR-T治疗 (axionbio.cn)[/url][/b][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][/color][/size][/font][font=&][size=16px][color=#343a40][b]--利用Maestro Z 评估药物对COVID-19病毒感染力的中和作用:[/b][/color][/size][/font][color=#343a40][b][font=&][size=16px]病毒学研究的重点就在于开发抗病毒药物用于预防和治疗病毒感染。其中的挑战在于筛选到能够选择性抑制病原体复制并对宿主没有损害的化合物。病毒导致的细胞病变效应(CPEs)常常和靶细胞在形态、胞间贴合度、附着力及活力等方面的变化相关联。研究者可在体外联合使用宿主细胞、病原体和药物来模拟三者在体内的互作,借助 Maestro Z 定量CPE引起的阻抗变化。轻松实现在筛选药效的同时,完成安全性的初步评沽。[b]详情点击:[/b][url=http://www.axionbio.cn/page_4.html]page_4 - (axionbio.cn)[/url][/size][/font][/b][/color][font=&][color=#343a40][b][font=&][/font][/b][/color][/font]

  • 仪器介绍 I:ELECSYS 2010 电化学发光全自动免疫分析仪

    仪器介绍 I:ELECSYS 2010 电化学发光全自动免疫分析仪

    Elecsys 2010 电化学发光全自动免疫分析仪产于Roche公司(罗氏公司),Roche公司是世界上最大的检验产品提供商之一。 http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203300841_358158_1699466_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/03/201203300841_358157_1699466_3.jpgElecsys 2010全自动电化学发光免疫分析仪是应用先进的电化学发光(ECL)技术的全自动台式分析仪。电化学发光(ECL)技术己应用于甲状腺,激素,心肌损伤和肿瘤标志、传染病、贫血、骨代谢等广泛的测定项目。Elecsys 2010仪器全自动数据处理的特点是使用了二维条形码技术,避免了手工操作,保证数据输入的准确。 Elecsys 2010的临床应用: 广泛应用于甲状腺、激素、心肌损伤和肿瘤标志、传染病、贫血、骨代谢等的测定项目。目前我院已开展项目: 甲状腺功能:游离甲状腺素(F T4),游离三碘甲状腺原氨酸(FT3),促甲状腺素(TSH),抗甲状腺球蛋白抗体(Anti-TG),抗甲状腺过氧化物酶抗体(Anti-TPO) 性激素类:绒毛膜促性腺激素β亚单位(β-HCG),雌二醇(E2),促黄体生成激素(LH),促卵泡激素(FSH),泌乳素(PRL),孕酮(PROG),睾酮(TesTo) 肿瘤标记:甲胎蛋白(AFP),癌胚抗原(CEA),乳腺癌相关抗原(CA153),卵巢癌相关抗原(CA125),胰腺癌相关抗原(CA199) 肝炎病毒类: 乙肝表面抗原(HBsAg),乙肝表面抗体(Anti-HBs),乙肝核心抗体(Anti-HBc),乙肝e抗体(Anti-HBe),乙肝e抗原(HBeAg) 糖尿病检测:胰岛素(Ins),C-肽(CP) 化学发光免疫分析(Chemiluminescence Immunoassay,CLIA)是近十年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析。它具有高灵敏度、检测范围宽、分析方法简便快速、标记物稳定性好、无污染、结果稳定、误差小、安全性好等优点更免除了使用放射性物质。它是放射性免疫分析与普通酶免疫分析的取代者,是免疫分析重要的发展方向。化学发光免疫分析的优点: 1.灵敏度高:这是CLIA关键的优越性,其灵敏度可达1E-16mol/L(RIA为1E-12mol/L)。又如化学发光底物(如AMPPD)可检测出的碱性磷酸酶的浓度比显色底物要灵敏5E5倍。 2.宽的线性动力学范围:发光强度在4~6个量级之间与测定物质浓度间呈线性关系。这与显色的酶免疫分析吸光度(OD值)为2.0的范围相比,优势明显。虽然RIA也有较宽的线性动力学范围,但放射性限制了其应用。 3.光信号持续时间长:辉光型(glow type)的CLIA产生的光信号持续时间可达数小时甚至一天。简化了实验操作及测量。 4.分析方法简便快速:绝大多数分析测定均为仅需加入一种试剂(或复合试剂)的一步模式。 5.结果稳定、误差小:样品系直接自己发光,不需要任何光源照射,免除了各种可能因素(光源稳定性、光散射、光波选择器等)给分析带来的影响,使分析结果灵敏稳定可靠。 6.安全性好及使用期长:在上述优点前提下,更免除了使用放射性物质。到目前为止,还未发现CLIA的危害性。

  • 大家有知道化学发光免疫分析仪的么?

    化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。简介化学发光免疫分析仪包含两个部分, 即免疫反应系统和化学发光分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出光子(hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在抗原(化学发光免疫分析) 或抗体(免疫化学发光分析) 上, 或酶作用于发光底物。   化学发光免疫分析仪器中核心探测器件为光电倍增管(PMT),由单光子检测并传输至放大器,并加高压电流放大,放大器将模拟电流转化为数字电流,数字电流将发光信号由R232数据线传输给电脑并加以计算,得出临床结果。 分类化学发光标记免疫分析法  化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有吖啶酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光标记物 , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光, 强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光(见图1)。吖啶酯作为标记物用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂; 检测小分子抗原采用竞争法 ,大分子抗原则采用夹心法 , 非特异性结合少, 本底低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从而增加灵敏度。 发光酶免疫分析法  从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是酶反应的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应复合物上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为辣根过氧化物酶(HRP) 和碱性磷酸酶(AL P) ,它们有各自的发光底物。 发光试剂  HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。   早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。 增强发光酶  增强发光酶免疫分析(enhanced luminescence enzyme immunoassay, ELEIA )在发光系统中加入增强发光剂, 如对2碘苯酚等, 以增强发光信号,并在较长时间内保持稳定, 便于重复测量, 从而提高分析灵敏度和准确性。在全自动分析仪上, 还可通过计算机严密控制, 进行自动操作, 如加试剂,混合, 温育, 洗涤, 加发光试剂, 发光计数, 数据处理, 绘制标准曲线, 直至完成病人血清样品的分析并打印出结果。Am erliteTM发光增强酶免分析系统用荧光素、噻唑等增强剂, 其发光时间可持续长达20m in, 试剂盒有甲状腺功能检测的   促甲状腺素、三碘甲腺原氨酸、甲状腺素、甲状腺素结合球蛋白、游离甲状腺素, 与性激素有关的有促黄体激素、促卵泡激素、人绒毛膜促性腺激素、甲胎蛋白、雌二醇、睾酮, 以及其他方面的如癌胚抗原、铁蛋白、地高辛等。   ALP标记的CLEIA所用底物为环1, 22二氧乙烷衍生物, 这是一类很有前途的发光底物 ,用于化学发光酶免分析底物而设计的分子结构中包含起稳定作用的基团——金刚烷基, 其分子中发光基团为芳香基团和酶作用的基团,在酶及起动发光试剂作用下引起化学发光。最常使用的底物是AM PPD , 中文名为: 32(2’2螺金刚烷) 242甲氧基242(3’2 磷酰氧基) 2苯基21, 22环二氧乙烷)。在碱性磷酸酶(AL P) 作用下,磷酸酯基发生水解而脱去一个磷酸基, 得到一个中等稳定的中间体AM PD (半寿期为2~ 30m in) ,此中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子, 当其回到基态时产生470nm 的光,可持续几十分钟。AM PPD 为磷酸酯酶的直接化学发光底物,可用来检测碱性磷酸酯酶或酶和抗体、核酸探针及其它配基的结合物。可检测到碱性磷酸酯酶的浓度为10- 15mol/L 。

  • 549万!河南省红十字血液中心乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光法)采购项目

    [table][tr][td]项目概况河南省红十字血液中心乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测试剂盒([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法)采购项目招标项目的潜在投标人应在登录“河南省公共资源交易中心 (http://www.hnggzy.net/) ”,凭 CA 数字证书获取招标文件,并于2023年09月06日09时00分(北京时间)前递交投标文件。[/td][/tr][tr][td]一、项目基本情况[/td][/tr][tr][td]1、项目编号:豫财招标采购-2023-783[/td][/tr][tr][td]2、项目名称:河南省红十字血液中心乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测试剂盒([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法)采购项目[/td][/tr][tr][td]3、采购方式:公开招标[/td][/tr][tr][td]4、预算金额:5,492,500.00元[/td][/tr][tr][td]最高限价:5492500元[/td][/tr][tr][td=2,1][table][tr][td]序号[/td][td]包号[/td][td]包名称[/td][td]包预算(元)[/td][td]包最高限价(元)[/td][/tr][tr][td]1[/td][td]豫政采(2)20231230-1[/td][td]河南省红十字血液中心乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测试剂盒([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法)采购项目[/td][td]5492500[/td][td]5492500[/td][/tr][/table][/td][/tr][tr][td]5、采购需求(包括但不限于标的的名称、数量、简要技术需求或服务要求等)[/td][/tr][tr][td]5.1 采购货物名称及数量:乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测试剂盒([url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url]-荧光法) 650盒(384人份/盒)。5.2 标包划分:1 个标包5.3 采购货物技术性能指标:具体参数详见招标文件第五章“采购需求”5.4 采购范围:试剂的供货、运输、保险、装卸、验收交付、培训、技术支持、质保及相关伴随服务等5.5 资金来源:财政资金,已落实5.6 交货期:合同签订后7日内按要求分批次交货5.7 交货地点:采购人指定地点[/td][/tr][tr][td]6、合同履行期限:按合同执行[/td][/tr][tr][td]7、本项目是否接受联合体投标:否[/td][/tr][tr][td]8、是否接受进口产品:否[/td][/tr][tr][td]9、是否专门面向中小企业:否[/td][/tr][tr][td]二、申请人资格要求:[/td][/tr][tr][td]1、满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定;[/td][/tr][tr][td]2、落实政府采购政策满足的资格要求:[/td][/tr][tr][td]节约能源、保护环境、扶持不发达地区和少数民族地区、促进中小微企业、监狱企业及残疾人福利性单位发展等政府采购政策。[/td][/tr][tr][td]3、本项目的特定资格要求[/td][/tr][tr][td]3.1根据《财政部关于在政府采购活动中查询及使用信用记录有关问题的通知》(财库〔2016〕125 号)和《河南省财政厅关于转发财政部关于在政府采购活动中 查询及使用信用记录有关问题的通知》(财库〔2016〕15 号)被列入中国政府采购网( www.ccgp.gov.cn)“政府采购严重违法失信行为记录名单”的(指政府采购行政处罚有效期内);被列入“中国执行信息公开网”(http://zxgk.court.gov.cn/shixin)失信被执行人的;被列入“信用中国”网站(www.creditchina.gov.cn)“重大税收违法失信主体”的投标人将被拒绝参加投标。注:(采购人、代理机构在开标后对所有投标供应商信用记录进行查询,并将查询结果网页打印存档,投标供应商不良信用记录以代理机构开标后查询结果为准。 )3.2单位负责人为同一人或者存在直接控股、管理关系的不同供应商,不得参加同一合同项下的投标。[/td][/tr][tr][td]三、获取招标文件[/td][/tr][tr][td]1.时间:2023年08月16日 至 2023年08月22日,每天上午00:00至12:00,下午12:00至23:59(北京时间,法定节假日除外。)[/td][/tr][tr][td]2.地点:登录“河南省公共资源交易中心 (http://www.hnggzy.net/) ”,凭 CA 数字证书[/td][/tr][tr][td]3.方式:《河南省公共资源交易中心-市场主体系统》中下载投标项目所含全部资料[/td][/tr][tr][td]4.售价:0元[/td][/tr][tr][td]四、投标截止时间及地点[/td][/tr][tr][td]1.时间:2023年09月06日09时00分(北京时间)[/td][/tr][tr][td]2.地点:河南省公共资源交易中心远程开标室(一)-2[/td][/tr][tr][td]五、开标时间及地点[/td][/tr][tr][td]1.时间:2023年09月06日09时00分(北京时间)[/td][/tr][tr][td]2.地点:河南省公共资源交易中心远程开标室(一)-2(郑州市经二路12号(经二路与纬四路向南50米路西))[/td][/tr][tr][td]六、发布公告的媒介及招标公告期限[/td][/tr][tr][td]本次招标公告在《河南省政府采购网》、《河南省公共资源交易中心网》上发布, 招标公告期限为五个工作日。[/td][/tr][tr][td]七、其他补充事宜[/td][/tr][tr][td]1、本项目采用“远程不见面”开标方式,供应商无需到河南省公共资源交易中心现场参加开标会议及递交纸质标书,无需到达现场提交原件资料。2、不见面服务的具体事宜请查阅河南省公共资源交易中心网站“办事指南”专区的《新交易平台使用手册(培训资料)》中《河南省公共资源“智慧交易”平台-不见面开标大厅投标人操作手册》。3、逾期上传/送达的或者未上传/未送达指定地点的响应文件,采购人不予受理[/td][/tr][tr][td]八、凡对本次招标提出询问,请按照以下方式联系[/td][/tr][tr][td]1. 采购人信息[/td][/tr][tr][td]名称:河南省红十字血液中心[/td][/tr][tr][td]地址:郑州市金水区同乐路9号[/td][/tr][tr][td]联系人:司丽萍[/td][/tr][tr][td]联系方式:0371-63831305[/td][/tr][tr][td]2.采购代理机构信息(如有)[/td][/tr][tr][td]名称:中韵天隆工程集团有限公司[/td][/tr][tr][td]地址:郑州市金水区青年路145号升龙环球大厦C座26楼2608室[/td][/tr][tr][td]联系人:王京拴 王自红[/td][/tr][tr][td]联系方式:0371-88881296[/td][/tr][tr][td]3.项目联系方式[/td][/tr][tr][td]项目联系人:王京拴 王自红[/td][/tr][tr][td]联系方式:0371-88881296[/td][/tr][/table]

  • 免疫学检测形成的原因有哪些?免疫学检测包括哪些?

    [font='calibri'][size=13px]免疫学检测形成的原因有哪些?免疫学[/size][/font][font='calibri'][size=13px]检测包括哪些?[/size][/font]免疫学检测形成的原因:免疫学检测是基于免疫系统对外来物质或抗原的反应而产生的,可分为体液免疫学检测和细胞免疫学检测两大类。体液免疫学检测是通过血液、唾液、乳汁等体液样本中的免疫球蛋白、补体、免疫复合物等成分的含量及其分布来反映机体的免疫状态。当机体受到病原体或某些生物物质的刺激时,免疫系统会产生相应的抗体和细胞因子等免疫反应,这些免疫反应产物可通过体液免疫学检测方法进行检测。细胞免疫学检测是通过检测机体内的免疫细胞和免疫分子的含量及其分布来反映机体的免疫状态。当机体受到病原体或某些生物物质的刺激时,免疫系统会产生相应的抗原提呈细胞,并引导记忆细胞和效应细胞的产生,这些记忆细胞和效应细胞可以在特定情况下识别和消灭病原体或肿瘤细胞,这些细胞和效应细胞本身也可以被检测出来。总之,免疫学检测的目的是通过检测机体的免疫反应,了解机体的免疫状态,为疾病的诊断、治疗和预防提供重要的依据。免疫学检测包括哪些?免疫学检测是指通过各种方法检测机体对病原体或某些生物物质的免疫反应程度,以及机体内的免疫细胞、免疫分子和免疫活性物质的含量及其分布等情况的一种医学技术。免疫学检测广泛应用于各种疾病的诊断、治疗和预防,包括感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤免疫学诊断等。以下是一些常见的免疫学检测项目:体液免疫学检测:主要包括免疫球蛋白的测定,如IgA、IgM、IgE等;补体检测,如总补体溶血活性、补体C1、C2等;免疫复合物检测,如抗体-抗原复合物、补体-抗体复合物等;细胞免疫学检测:主要包括T细胞亚群分析、B淋巴细胞分化抗原检测、自然杀伤细胞抗体检测、T细胞活化抗体检测等;抗体检测:如抗药抗体、中和抗体等;细胞因子检测:如白细胞介素-2、-4、-6等;自身抗体检测:如抗核抗体、抗胰岛素抗体等;感染免疫检测:如病毒特异性抗体、细菌特异性抗体等。总之,免疫学检测是一种非常重要的医学技术,可以帮助医生判断机体的免疫状态,为疾病的诊断和治疗提供重要的依据。免疫学检测是根据抗原、抗体反应的原理,利用已知的抗原检测未知的抗体或利用已知的抗体检测未知的抗原,可定性、定位和定量的检测。依托自主研发生产的优质抗体、蛋白试剂、先进的实验仪器以及经验丰富的技术人员,义翘神州建立了全面的免疫学检测平台,包括ELISA、Western Blot、IHC、IF、Flow Cytometry、IP/Co-IP、Biacore、Octet等检测技术。义翘神州免疫学检测服务包含:①WB/Sally Sue高通量检测服务②[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service]流式细胞检测服务[/url]③免疫组化检测服务④多重免疫荧光和免疫组化服务⑤免疫荧光检测服务⑥HE染色及特殊染色服务⑦ELISA/ELISpot检测服务⑧IP/Co-IP检测服务⑨TMA芯片定制服务更多详情可以查看:https://cn.sinobiological.com/services/immunoassay-service

  • 【原创】一键解决autorun病毒并免疫

    电脑中autuorun病毒时,双击硬盘盘符无法打开,会运行病毒程序,u盘多发生,或用杀毒软件杀掉病毒后,还会残留autorun文件,打开电脑里的盘符只能用右键-打开,而不能双击,很烦。搜过论坛上的帖子,发现要么是只杀毒不免疫,要么是只免疫没说杀毒,要么是用注册表很麻烦,要么说了原理没提供直接的工具。所以我来总结一下。del /f /a:h c:\autorun.infdel /f /a:h d:\autorun.infdel /f /a:h e:\autorun.infdel /f /a:h f:\autorun.infdel /f /a:h g:\autorun.infdel /f /a:h h:\autorun.infmd c:\autorun.infattrib c:\autorun.inf +r +hmd d:\autorun.infattrib d:\autorun.inf +r +hmd e:\autorun.infattrib e:\autorun.inf +r +hmd f:\autorun.infattrib f:\autorun.inf +r +hmd g:\autorun.infattrib g:\autorun.inf +r +hmd h:\autorun.infattrib h:\autorun.inf +r +h把上述代码复制到记事本里另存为cleanautorun.bat,或者直接下载我上传的文件,解压后运行,没有任何提示,运行后就ok了。设置了足够的盘符了,如果有更多盘符的朋友需要的话可以自己添加,把代码复制然后改盘符就行了。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=65584]一键解决autorun病毒并免疫[/url]

  • 全自动化学发光免疫分析仪的原理以及临床应用

    全自动化学发光免疫分析仪的原理以及了临床应用。全自动化学发光免疫分析仪采用光电比色原理来测量体液中某种特定化学成分的仪器。是用于检测肿瘤标志物、贫血、甲状腺、孕筛查等项目,是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术,目前应用的自动化分析仪是分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、保温、比色、结果计算、书写报告和清理等步骤的部分或全部由模仿手工操作的仪器来完成,大大提高了工作效率及准确性。

  • 化学发光免疫分析仪与酶标仪的区别

    虽然酶标仪价格低廉、仪器简单、方便操作,但在越来越多的项目检测中,化学发光免疫分析仪逐渐取代酶标仪的使用。 化学发光的优点到底在哪里呢?从原理上说,酶标仪是通过对酶标板中液体的吸光值检测,获得一个OD值后进行定性或半定量的分析,达到检测的目的。化学发光免疫分析仪是化学发光反应(酶促发光或直接发光)产生的光信号通过光电倍增管进行信号转换后等到相应的信号值,用RLU(相对光单位)表示,以达到定量或定性的检测目的,其更加灵敏,线性范围更宽,而且可以做定量检测,可进行全自动操作,而酶标仪无论检测还是线性范围都不如发光仪,且只能做定性检测,但是目前国内酶标仪较为成熟,化学发光尚处于成长期。

  • 国际主流化学发光免疫分析仪的原理技术及特点

    化学发光放大技术同样利用抗原一抗体反应原理,将酶或其他非放射性标记物标记于抗原或抗体,然后与已知抗原或抗体反应,标记的酶使反应底物进行发光,经光电倍增管测量后可得到被测样本的每秒钟发光计数CPS,再根据内置的标准曲线将CPS转换为样本的浓度值"由于这项技术的应用,使抗原一抗体的反应时间缩短,特异性程度和灵敏度得到提高,同时辅以单克隆技术的应用,使整个反应的全自动化实现成为可能,并一改过去依赖于手工加样,再交由仪器测量的半自动化技术的局面,也是近十年来免疫检验技术的一个飞跃。 化学发光免疫分析系统由以下子系统构成:反应杯传送系统,测试包被珠装载系统,样本装载系统,条码读取系统,试剂装载系统,加样系统,温育系统,离心清洗系统,发光计数测量系统,计算机控制系统组成。1.微粒子捕捉酶免疫分析技术(MEIA) 下面以双抗体夹心法为例介绍微粒子捕捉酶免疫分析技术:已包被了抗体的塑料微珠试剂中,加入待测标本后,经温育,再加入碱性磷酸酶标记的抗体!形成抗体一抗原一酶标记抗体复合物"然后将其转移到玻璃纤维柱上,用缓冲液洗涤,没有结合的抗原!酶标抗体被洗掉,结合抗原抗体的塑料微珠则被保留在纤维柱滤膜的上方"这时再加入底物,4一甲基伞型酣磷酸盐,酶标抗体上的碱性磷酸酶将4一甲基型酣磷酸盐分解,脱磷酸后形成甲基伞型酣,在365nm激发光的照射下,发出448nm的荧光,经过荧光读数仪的记录、放大,计算出所测物质的含量"。2.荧光偏振免疫分析技术(FPIA) 这是一种均相荧光免疫分析法,主要用于测定小分子量物质,如药物浓度测定"原理是:标记在小分子抗原上的荧光素经485nm的激发偏振光照射后,吸收光能,越入激发状态,激发状态的荧光素不稳定,很快以发出光子的形式释放能量而还原"发射出的光子经过偏振仪形成525~55Onm的偏振光,这一偏振光的强度与荧光素受激发时分子转动的速度呈反比,游离的荧光素标记抗原,分子小,转动速度快,激发后发射的光子散向四面八方,因此通向偏振仪的光信号很弱,而与抗体大分子结合的荧光素标记抗原,因分子大,分子的转动慢,激发后产生的荧光比较集中,因此偏振光信号比未结合时强得多",在测定过程中待测抗原小分子!荧光标记抗原小分子和特异性抗体大分子同时加入到一反应杯中,经过温育,待测抗原和荧光标记抗原竞争性地与抗体结合,待测抗原越少,与抗体竞争结合的量越少,而荧光标记抗原与抗体结合量就越多,当激发光照射时,荧光偏振的程度与荧光标记物分子转动的速度成反比,而荧光标记的小分子抗原与大分子抗体结合后,其分子的转动速度减慢,因此荧光偏振信号强"结果是待测抗原的浓度低,可以通过计算获得其含量。3.利用化学发光技术和磁性微粒子分离技术相结合此方法以叮咤酶为发光的标记物,固相载体为极细小的磁性颗粒"其测定原理与放射免疫和酶联免疫中的双抗体夹心法和竞争结合法相似。4.采用酶联免疫技术!生物素亲和素技术和增强化学发光技术此方法是用辣根过氧化物酶(日RP)标记抗原或抗体!以子弹头型塑料小孔管为固相载体,鲁米诺为化学发光剂,并加入化学发光增强剂,可使化学发光强度增强,时间延长而且稳定。 在链霉亲和素包被的子弹头型塑料小孔管中,加入生物素标记的特异性抗体和待测标本,经过37e温育,链霉亲和素与生物素结合,特异性抗体与标本中的抗原结合,形成链霉亲和素一生物素一抗体一抗原复合物,经过洗涤,将多余的标本和生物素标记抗体除去,加入辣根过氧化物酶标记抗体,经37e温育,形成链霉亲和素一生物素一抗体一抗原一酶标抗体复合物,并固定在小孔管壁上,加入氧化剂日202,增强化学发光剂和鲁米诺,这时结合在固相载体上的辣根过氧化物酶在强氧化剂的作用下将增强化学发光剂亚铁原吟琳激活,接着它催化并激活鲁米诺发光,这种化学发光强渡比单独鲁米诺发光强,持续时间长,而且稳定,易于测定。鲁米诺发光强度经光量子记录系统记录,经计算从标准曲线上得出待测抗原含量。

  • 【讨论】波长色散X荧光分析仪与能量色散X荧光分析仪

    随着欧盟ROHS指令实施日期的日益临近,国内越来越多的相关企业在积极的思考和寻找应对的方案;X荧光分析技术(XRF)作为一种方便有效的快速分析手段,正迅速被业内人士所了解和应用。目前在中国市场上,应用于ROSH指令的X荧光分析仪均为能量色散类型;一般情况下,波长色散类型的X荧光分析仪器的准确度比能量色散类型的仪器要高很多;但应用于ROHS指令的场合时,波长色散和能量色散则各有优缺点,测量对象各有侧重;以下将从几个方面对两种类型的仪器进行比较和说明: 波长色散 能量色散 (Si-Pin)型 (SDD)型测量精度 20~50ppm 200~300ppm 100~200ppm测量时间 1~2分钟 4~6分钟 3~5分钟被测样品要求 规则形状需要制样 可以不规则形状 可以不规则形状 最佳应用范围 原料半成品成品电子元器件原料半成品成品电子元器件能量分辨率高,约15eV较低,约160eV较低,约160eV荧光强度高低较高技术复杂程度复杂简单较复杂使用寿命>10年>5年>5年仪器价格46万(国产)25万左右(国产)60万左右(进口)50万(国产)1、测量精度:尽管目前各家能量色散仪器(均为Si-Pin类型)生产商和销售商都给出了很高的技术指标,但在实际应用中(特别在被测样品不进行处理的情况下),真正可以期待的准确度都在200~300ppm之间(测量塑料中有害元素时,准确度会好一些;对不规则样品,则精度会更差);同时,对于同类型的仪器,进口仪器的指标和国产仪器之间并没有本质差别(基本配置),但进口仪器的价格却昂贵很多。波长色散X荧光分析仪的测量准确度比能量色散类型高一个数量级,基本在20~50ppm左右。2、测量时间:由于波长色散配备较大功率的X光管,荧光强度高;因此,波长色散仪器占用较短的测量时间,便能达到较高的测量精度。3、被测量样品的要求:由于技术特点的差异,波长色散X荧光分析仪需要对被测量样品进行简单的处理;对固体样品的一般处理方法是将被测量样品表面打磨光滑,对粉末和其他样品可以采用磨细后进行粉末压片法处理,相应的设备市场上很容易找到。能量色散型仪器最大的优势在于:可以对样品不作处理直接进行测量,对样品也没有任何损坏,直接用于生产的过程控制中;但需要强调指出的是:从荧光理论上讲,被测量样品的预先处理是必须的,对于能量色散仪器来说,我们可以采取一些技术手段进行校正来满足实际生产控制的需要,但即使采用了技术校正的手段,对不规则样品的直接测量也是以牺牲测量准确度作为代价的。4、最佳应用范围:由于波长色散和能量色散类型X荧光分析仪各自的技术特点,两种类型仪器所侧重的应用方案也不尽相同;波长色散X荧光分析仪具有较高的测量精度,但同时需要对被测量样品进行简单处理,更适用于进厂原材料、半成品、成品的精确检测和质量控制;能量色散X荧光分析仪虽然测量精度稍差,但具有快速、直接测量各种形状样品的优点,因此可直接在生产线上用于各种部件、电子元器件的检测。5、能量分辨率:能量分辨率是X荧光分析仪器的主要指标,分辨率数值越小,分辨率越高,仪器性能越好。6、荧光强度:对于X荧光分析仪器来说,各元素含量与该元素的荧光强度成正比关系;荧光强度越高,则统计误差越小,测量的准确度越高,仪器性能越好。7、使用寿命:波长色散类型仪器的使用寿命一般为10年以上;能量色散类型仪器的使用寿命一般也大于5年,影响能量色散型仪器寿命的主要因素是探测器部分的老化导致其性能指标变差。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=48263]波长色散X荧光分析仪与能量色散X荧光分析仪[/url]

  • 免疫组化的概念和常用方法介绍

    一、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。二、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理,组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合,再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应,前者再用标记辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AKP)等的抗生物素(如链霉亲和素等)结合,最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分,在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。三、分类 1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。3)按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法;亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法等,其中SP法是比较常用的方法;聚合物链接,如即用型二步法,此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。四、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1)免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便,所以在临床病理诊断、检验中应用较广。2)免疫酶标方法 免疫酶标方法是继免疫荧光后,于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前最常用的技术。 本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是:定位准确,对比度好,染色标本可长期保存,适合于光、电镜研究等。 免疫酶标方法的发展非常迅速,已经衍生出了多种标记方法,且随着方法的不断改进和创新,其特异性和灵敏度都在不断提高,使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法检测系统等。3)免疫胶体金技术 免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒,且胶体金的电子密度高,所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色,因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。五、被检测的物质 组织或细胞中凡是能作为抗原或半抗原,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激 素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。六、特点 1)特异性强。免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性,因此,免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示,如角蛋白(keratin)显示上皮成分,LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时,才会出现交叉反应。2)敏感性高。在应用免疫组化的起始阶段,由于技术上的限制,只有直接法、间接法等敏感性不高的技术,那时的抗体只能稀释几倍、几十倍;现在由于ABC法或SP三步法的出现,使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合,这样高敏感性的抗体抗原反应,使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。3)定位准确、形态与功能相结合。该技术通过抗原抗体反应及呈色反应,可在组织和细胞中进行抗原的准确定位,因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察,这样就可以进行形态与功能相结合的研究,对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。七、从蛋白水平检测角度,免疫组化技术与Western blotting、ELISA的异同 1)Western blotting:蛋白质免疫印迹,也是利用抗体抗原反应原理,结合化学发光等技术来检查组织或细胞样品内蛋白含量的检测方法。与免疫组化技术相比,定量可能更加准确;当然Western blotting也可定性和定位(通过提取膜蛋白或核蛋白、胞浆蛋白分别检测其中抗原含量,进而间接反映它们的定位),但敏感性远远低于免疫组化技术。2)ELISA:酶联免疫吸附试验,也是利用抗体-抗原-抗原结合反应原理来检查体液或组织匀浆中蛋白含量的检测。与免疫组化技术相比,定量最准确,是分泌性蛋白检测首选方法之一。

  • 网络讲堂会议火热报名中---聚焦代谢,安捷伦Seahorse在抗病毒免疫研究中的应用

    病毒与宿主免疫系统的关系就像罪犯与警察。病毒必须寄生在宿主细胞中,宿主细胞为了应对病毒的感染,会激活免疫系统来杀伤病毒。病毒为了自己的存活,进化了多种逃逸免疫系统的机制。近年来,免疫细胞代谢的调控成为研究热点,安捷伦Seahorse技术能够实时检测代谢状态,在免疫学研究的各个方面都有着广泛的应用。本次讲座将为大家介绍Seahorse在抗病毒免疫研究中的应用。[size=18px][b]讲师介绍:[/b][/size][b]范家栋[/b]:武汉大学生命科学学院博士,纽约大学、美国国立健康研究所博士后。博士阶段师从吴旻教授,研究方向为表观遗传学与细胞信号转导通路。博士后阶段研究膀胱癌、乳腺癌的分子机制。现任职于安捷伦科技(中国)有限公司,担任Seahorse细胞能量代谢分析系统的技术支持。[size=18px][b]会议时间:[/b][/size]2月26日 10:00[b][size=18px]报名地址[/size][/b]:[url]https://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_10399.html[/url]

  • 【资料】化学发光免疫分析

    [size=4]化学发光免疫分析  [/size][url=http://baike.baidu.com/view/1401709.htm][size=4]化学发光免疫分析[/size][/url][size=4](chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起来的一项最新免疫测定技术。[/size]

  • 如何使用酶联免疫分析仪检测环境污染

    如何使用酶联免疫分析仪检测环境污染

    [size=16px]  酶联免疫分析仪(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用于检测生物分子,如蛋白质、抗体、激素等的方法。在环境污染领域,ELISA可以用于检测特定污染物或污染指标,例如有毒物质、重金属、细菌等。以下是使用ELISA检测环境污染的一般步骤:  准备样本和试剂: 收集环境样本,如土壤、水、空气等,然后准备ELISA所需的试剂,包括酶标记抗体、底物、洗涤缓冲液等。  涂覆固相载体: 将检测目标的抗原或抗体涂覆在固相载体(如微孔板)的表面上。这可以通过将样本或试剂溶液加入微孔板孔中,然后让其在一定条件下(通常在4°C下过夜)发生吸附。  样本处理: 将收集到的环境样本处理成适合ELISA检测的形式。这可能包括提取样本中的目标分子,去除干扰物质等。  添加样本: 将处理后的样本加入涂有抗原或抗体的微孔板中,使样本中的目标分子与固相载体表面的抗体结合。  洗涤: 为了去除非特异性结合物质,需要多次用洗涤缓冲液清洗微孔板,以确保只有特异性的结合物质保留在固相载体上。  加入酶标记抗体: 加入酶标记的二抗,这些抗体能够与目标分子结合。酶标记抗体与固相载体上的抗体形成“夹心”结构,将目标分子夹在中间。  洗涤: 同样,用洗涤缓冲液清洗以去除非特异性结合物质。  添加底物: 加入底物,使其与酶标记结合,产生可量化的信号。底物的酶反应会生成染色物质,其颜色的强度与目标分子的浓度成正比。  停止反应: 当染色反应达到适当的程度后,添加停止剂停止酶反应,防止颜色继续增加。  测量: 使用ELISA阅读器测量微孔板中每个孔的吸光度或荧光强度。根据标准曲线或内部对照,可以确定样本中目标分子的浓度。  数据分析: 根据测量的信号强度,结合标准曲线或内部对照,计算出样本中目标分子的浓度。  需要注意的是,ELISA的操作步骤可能因具体的污染物种类和ELISA试剂盒的种类而有所不同。在进行ELISA实验之前,建议详细阅读所使用试剂盒的说明书,并在实验过程中严格遵循操作步骤和安全注意事项。同时,确保实验过程中的样本处理、实验环境和仪器都保持干净,以防止误差和干扰。[img=,690,690]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2023/08/202308311601298825_1296_6098850_3.png!w690x690.jpg[/img][/size]

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