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单向二次展开薄层色谱法单向二次展开薄层色谱法检识挥发油中各成分时,为什么第一次展开所用的展开剂极性最好大于第二次展开所用的展开剂的极性?单向二次展开薄层色谱法有什么优点?
薄层色谱分析法,是利用各成分对同一吸附剂(如硅胶)吸附能力不同,使得流动相(溶剂)流过吸附剂过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分互相分离。在化工领域中,有一种层析分离技术非常出名,就是薄层色谱法,也叫薄层层析,这是一种快速分离化学物质的最有效层析方法,它的工作原理就是利用吸附各成分,使其达到互相分离的目的。针对此种技术,今天就来给大家介绍一下薄层色谱法的5个步骤、r[sub]f[/sub]值、用途及注意事项。 [b]薄层色谱法的5个步骤 步骤一:薄层板制备 [/b] 除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为0.2~0.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,然后在110℃烘30分钟,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。手工制板一般分不含粘合剂的软板和含粘合剂的硬板两种。 [b]步骤二:薄层板的活化[/b] 硅胶板于105-110℃烘30分钟,氧化铝板于150-160℃烘4小时,可得活性的薄层板。 [b]步骤三:点样 [/b] 点样方式:分为手动点样和自动点样。手动点样主要器具为微量毛细管、微量注射器等。自动点样采用半自动点样仪或全自动点样仪,按预设程序自动点样。手动点样灵活方便,常用于各种TCL鉴别中,器具以微量毛细管最常用。仪器的自动点样准确性好,常用于薄层扫描法的含量测定。 点样方法:分为接触式点样和喷雾点样。喷雾点样为仪器控制,在此不展开描述。接触式手工点样时,应注意小心用点样器垂直接触薄层板表面以防止损伤板面。若薄层吸附剂表面被损坏或点成洼孔,则展开后斑点成不规则形状。靠近溶剂前沿的化合物形成三角形,靠近原点的化合物形成新月形,影响测定结果。原点损失带来误差,也将使展开后的定量和判断不准确。 [b]步骤四:展开[/b] 展开剂的配制:配制展开剂时,应严格控制其比例准确度,如遇到比例很小的溶剂时,应尽量满足其精确度要求,而不是为图方便省事直接用滴管加入。展开剂配好后如果浑浊不清,不能立即使用。应转移入分液漏斗中,待其静置分层澄清后再取其上层(或下层)液进行展开。 [b]步骤五:显色[/b] 薄层板显色方法有哪些?主要有三种方法,分别是蒸汽显色法、物理显色法和试剂显色法。 薄层色谱法的r[sub]f[/sub]值:r[sub]f[/sub]值指的是溶质移动的距离/溶液移动的距离。表示物质移动的相对距离。 各种物质的R[sub]f[/sub]随要分离化合物的结构,滤纸或薄层板的种类、溶剂、温度等不同而不同,但在条件固定的情况下,R[sub]f[/sub]对每一种化合物来说是一个特定数值。 薄层色谱法的用途有哪些?主要有以下三大用途: [b]用途一:快速分离两种物质; 用途二:鉴定少量有机物的组成; 用途三:跟踪反应进程。[/b]
1、最基本的装备层析缸、色谱板、薄层储板箱,点样毛细管。有了这些您就可以进行薄层色谱工作了,这些东西已经被集成在TK-I型薄层实验启动包里,当然还要买些薄层色谱书籍;2、薄层板观察检视薄层板观察检视是薄层工作者的基本工作,这时TU-II型暗箱式紫外观察仪就必不可少了;照相留底,那麽GoodSee-II型暗箱式薄层摄影仪能为您完成这些工作;中药指纹图谱GoodLook-1000型全自动薄层成像系统是您的最优选择;3、质检定量,请选购一台KH-2100型双波长薄层色谱扫描仪;4、新方法的科研开发,请选用KH-3000型全波长薄层色谱扫描仪;5、点样不准确是造成薄层定量失误的主要原因,如有薄层色谱扫描仪,请务必选用SP-II型电动薄层点样器,将极大提高您定量的精确性与重复性;6、喷雾液滴过大造成样点扩散,也造成薄层定量失误,请务必选用TS-I型超细电动薄层喷雾器,提高您定量的精确性与重复性;7、硫酸-醇显色剂,请使用TH-I数控薄层显色加热器,防止使用封闭式烘箱造成内壁腐蚀与产生大量烟雾,控温准确,加热均匀;8、确定定量的准确程度,请选用具有高度重复性的德国MERCK标准测试板;9、预制板太贵,请选用TD-II全自动铺板机,铺出来的预制板板又快又好。