免疫组化定量分析系统

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  • 多玛克科技（北京）有限公司
    多玛克公司介绍多玛克科技（北京）有限公司本着"探索生命色彩 构建多维视野"的公司愿景，以高端染色及分析为核心技术，面向科研及医疗诊断用户提供优质、精准的多重免疫荧光染色及原位表型分析服务。公司拥有独立的专业化实验室平台，具有样品存储、制样、切片、分子病理、免疫组化、数字成像及数据定量分析等实验条件，具备整套标准化实验室日常操作管理流程。多玛克公司采用奥地利TissueGnostics公司专业的TissueCytometry组织流式分析技术平台，不仅把分析结果准确性和数据丰度提升流式细胞术的水平，同时提供了比流式更加丰富的细胞形态、原位量化信息。为广大科研、医疗工作者实验提供更多的实验数据。
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  • 北京共赢联盟国际科技有限公司 金牌4年
    400-860-5168转4660
    北京共赢联盟国际科技有限公司（Beijing All-winning Alliance International Sci-tech Co.,Ltd）成立于2006年11月，具有外贸进出口资质，是一家专门从事实验室先进技术服务和进口设备仪器销售的专业化科技贸易企业。公司自成立以来，相继引进了世界先进的实验室技术和独特的品牌产品。在医学领域，拥有德国EXAKT硬组织切磨制片系统；德国BIODUR生物塑化聚合物；美国BIOQUANT骨生物学与生命科学研究系统；美国OSTEOMETRICS骨形态计量分析系统；日本JOKOH常光脱钙仪；奥地利TissueGnostics全景组织细胞定量分析系统等产品。广泛应用于生物材料研究、病理制样、口腔与种植体研究、骨与内植物研究以及矫形外科、骨肿瘤、结石、心血管支架、人体解剖生物塑化技术、动植物制样等硬组织研究和形态学分析，涵盖生物材料、组织工程学、病理学、解剖学、药学、生命科学、法学、古生物骨化石、动植物学等科研教学领域。在工业领域，拥有德国EXAKT带锯式点接触切磨系统和三辊分散研磨设备；德国AW金刚石多功能切磨机床；德国LUMiFrac粘结力/粘附力/粘结强度分析仪；美国EXTEC先进复合材料力学样件制备技术；纽迈树脂含量分析、复合材料界面特性分析、材料特性分析系统。广泛涉及先进材料研究及开发、质量控制与保证、中试生产和批量加工，应用于航天航空、风电、汽车、船舶、轨道交通、化工、颜料、电子、化妆品、齿科、胶黏剂、润滑脂、冶金矿产、电子仪器组件、复合材料密封件、机械加工等行业领域。公司在北京市经济技术开发区拥有500平米的实验技术服务与技术培训基地，专业从事医学动物实验的软组织及脱钙骨、不脱钙骨组织、含有植入物（金属、骨水泥、塑料、陶瓷、生物材料等）骨组织、血管支架组织、结石等组织病理学制片，特殊化学染色和免疫组化染色以及骨形态学计量分析等实验技术服务；生物材料与先进复合材料制样、分析测试等技术服务。提供技术开发、技术咨询、技术服务、技术培训。开展科研项目合作、病理教学资源合作、研究生课题实验合作。为植入型医疗器械、植入型生物材料的生物相容性研究，以及相关药理药效性分析提供组织学评价依据。还为先进复合材料的力学性能测试制备标准样件。适用于树脂基/碳基/陶瓷基/金属基等各种先进复合材料，以及玻纤、芳纶、铝质、蜂窝、热塑性材料或混合材料。切割试样用于材料拉升、剪切、压缩、弯曲、断裂等力学性能测试，试样切割质量符合国家标准和国际ISO、ASTM等测试标准。提供先进复合材料的粘结力/粘附力/粘结强度测试分析服务。在全国，公司产品已经拥有300多家用户。还为上百家院校、科研机构、医械研发生产企业、第三方医学技术服务机构等提供实验技术服务。公司拥有专业化的技术销售团队和专家型的技术服务团队，同时还与北京大学口腔医院中心实验室、上海市伤骨科研究所、昆明医科大学口腔医学研究所、中航复合材料有限责任公司预浸料事业部复材室、中国石油化工科学研究院润滑油脂研究室、中国石油大学（北京）地质系实验室等研究实验机构建立了合作与技术顾问关系。能够为客户提供相关的实验室整体解决方案，提供优质的售前咨询、技术讲座和售后服务，提供专业化的实验项目技术合作。公司始终坚守“顾客至上，合作共赢”的企业宗旨，本着“提供先进技术，提供一流产品、提供优质服务”的经营理念，真诚欢迎广大业内科研工作者、用户单位以及朋友们莅临公司考察、洽商、合作。
    主营产品： 切割机   研磨机   镶嵌机   粒子分散分析  
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  • 河南冠宇仪器有限公司
    河南冠宇仪器有限公司是自主研制光、机、电、软件、集研发、生产、销售、服务于一体的高新技术企业，企业拥有高科技人才队伍、科学的管理模式，完善的工艺设计、先进的加工设备，为公司的可持续发展提供了可靠的保障。我们以核心技术研究为己任，努力发展具有自主知识产权的分析测试仪器；追求在实用技术上的精益求精和精雕细刻，追求产品质量的可靠与稳定，用前沿的科研技术、卓越的产品品质、专诚的服务意识赢取客户的信赖,立志于为用户提供快速、准确而高效的分析测试仪器。自主知识产权产品：农药残留快速测试仪、真菌毒素定量分析仪、ATP荧光检测仪、ATP菌落总数检测仪、胶体金读数仪、荧光定量分析仪、荧光定量PCR检测仪、多功能食品安全检测仪、酶联免疫检测仪、药物残留及动物疫病检测仪、农产品质量安全检测仪、注水肉快速检测仪、食用油品质检测仪、环境监测设备、水质检测仪器等有毒有害物质残留检测设备。
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免疫组化定量分析系统相关的仪器

  • 红外微定量分析仪 400-886-5615
    - Bradford、BCA太过繁琐？ UV测蛋白结果不准确？- 全球第一台红外微定量分析仪Direct Detect - 2ul样本、1分钟检测、无需染色，准确读取蛋白定量结果Direct DetectTM全球第一台基于红外原理的生物分子微定量分析系统，只需要2ul样本及空白对照（Blank），就可以直接获取结果。无需样品处理，无需每次制作标准曲线，无需比色杯、没有废液。Direct DetectTM系统直接基于酰胺区在红外吸收光谱分析，无需考虑氨基酸的组成、染料性质、氧化还原电位这些因素，避免了比色法分析的缺陷，可以获得更加准确的结果。蛋白、脂肪、碳水化合物以及核酸都有可被区分的特定红外吸收光谱，所以您可以很轻松实现复杂混合物各种组分浓度的准确分析。浏览Direct Detect中文产品手册更多详情，请访问：
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    厂商： 默克化工技术（上海）有限公司
    品牌： 未知
    型号： Direct Detect
    价格： 面议
  • 欧波同矿物特征自动定量分析系统AMICS 400-860-2797
    AMICS矿物特征自动定量分析系统 全自动矿物特征分析系统选矿专家们自动获取工艺矿物学定量分析数据的得力工具 AMICS-Mining 由国际工艺矿物学家团队主持开发的第三代矿物参数自动定量分析系统。该系统与高分辨率扫描电子显微镜完美结合，广泛适用于矿业、煤炭、地质科研等领域，是科学家及工程技术人员对样品进行工艺矿物学定量分析的有力帮手。 作为一个为矿业、煤炭业、地质科研、生产打造的专用矿石特征的定量分析工具，AMICS-Mining自动矿石特征分析系统软件主要功能。 数据采集数据分析结果显示智能信息管理系统 AMICS-Mining可以快速而准确地对矿石样品进行分析，分析结果样品的矿物组成样品的矿物元素组成元素在矿物中的分配矿物颗粒尺寸分布 单体矿物颗粒尺寸分别矿物颗粒的比重及分布矿物相关关系矿物包裹关系矿物嵌步特征单体矿物解离度分布煤中灰分含量可定制分析 系统可生成的分析图表样品BES图样品矿物成分分布图 矿物成分图、表矿物元素图、表矿物成分图、表矿物元素在矿物中的分布表颗粒尺寸分布图、表单体矿物颗粒尺寸分布图、表颗粒比重分布图、表矿物连生关系图、表矿物解离度计算图、表矿物的生存关系计算图、表矿物理想回收率、品位估算图、表元素理想回收率、品位估算图、表 样品矿物成分分布图 矿物成分图、表 矿物连生关系图、表 AMICS-Minning的应用范围十分广阔●矿产评估，预测矿藏的价值通过对矿石中有价值的成分及赋生状态的分析，对矿石的磨矿粒度，可分选性及回收率的进行预测，对矿产评估，预测矿藏的价值。 ●选矿、选煤工艺设计通过对样品的参数分析，特别是矿物粒度尺寸分布、单体矿物颗粒尺寸分布、目标矿物的解离度的分析，为确定合理的磨矿粒度、有的放矢地进行选矿实验、选矿方案的制定提供牢靠的数据。 ●新选矿、选煤工艺研发通过对矿石的深度分析比如目标矿物元素在矿物中的分配，加深对矿物的认识。研究新的选矿工艺，提高选矿的经济效益。新选矿工艺的诞生往往可以改变一个矿山的命运，使一个难选的矿变成一个有价值的好矿。 ●选矿、选煤流程优化，提高回收率，降低能耗通过对现有选矿工艺不同位置的样品参数分析，发现磨矿及浮选改进的方向及潜力并及以改进，达到优化流程、提高回收率，降低能耗的目的。 ●选矿流程的监控通过不断对原矿、精矿、尾矿，及时地调整选矿参数，使选矿厂始终工作在最佳状态，提高生产效益。在发生选矿回收率下降的情况下，通过分析尾矿中目标矿物的赋生状态，可以确定回收率下降的原因，加以修正。 ●环保通过对岩石、土壤、河床泥、空气粉尘、烟道粉尘的成分与物相分析，为环保提供依据。 ●煤矿灰份矿物的含量及粒度分布测定，指导煤矿资源的评估和综合利用 ●为现代数字化矿山提供基础数据 AMICS-Mining自动矿石特征分析系统系统的特点●先进的全自动矿物识别技术系统采用了先进的第三代自动矿物识别技术。矿物识别无需人工干预、无需人工建立编辑矿物数据标准。大大降低了系统的复杂性，将操作人员从繁琐、复杂的矿物数据标准库建立维护工作解放出来，同时最大限度地减少人为因素造成的矿物识别错误，使矿物识别更为精准、更快速。 ●完整的矿物数据库矿物数据库矿物种类齐全，数据完整。 ●全新先进的图形处理技术在分析过程中，系统采用了全新先进的图形处理技术分离矿物颗粒，区分矿物边界。不仅处理速度、及处理能力（处理图形面积的大小及复杂性）几倍、几十倍于第二代自动矿物所采用的图形处理技术，且结果更为精准。 ●快速在线矿物分类矿物分类在测量过程中同时进行，用户可以随时监视测量过程。测量完成后立即就可以输出简单的测量结果，如矿物成分及颗粒数。 ●简便测量设定及结果输出合理的软件设计，使得测量设定及结果输出及为方便，大大缩短了系统使用培训所需要的时间。 ●全新现代化软件界面采用了最新的软件编制工具，软件界面符合当今的潮流，更为人们所熟悉，方便使用。 ●合理的文件管理系统合理的文件管理系统设计，达到了即能自动管理结果文件，又方便转移结果文件的目的。 ●系统有英、中两个版本 AMICS-Mining自动矿石特征分析系统技术指标最小可识别矿物：1微米样品测量时间（直径30厘米）：15分钟数据库：2000种以上基本矿物样品台样品数：高精度5轴电动9桩样品台 AMICS-Mining自动矿石特征分析系统的能谱仪技术指标硅漂移探头（BRUKER等）超快速脉冲处理电制冷（无需液氮）参照系统选择的能谱仪术指标 AMICS-Mining自动矿石特征分析系统的电镜技术指标参照系统选择的电镜技术指标 AMICS-Oil&Gas矿物特征自动定量分析系统作为一个为石油、天然气行业、地质科研、生产打造的专用岩芯、岩屑特征的定量分析工具，AMICS-Oil&Gas自动矿石特征分析系统软件主要功能。 数据采集 数据分析 结果显示 智能信息管理系统 AMICS-Oil&Gas可以快速而准确地对岩芯、岩屑样品进行分析，分析结果样品矿物成分样品元素成分岩屑颗粒、单体矿物颗粒尺寸分布孔隙度及孔隙尺寸分布矿物相关关系孔隙与矿物相关关系可定制分析 系统可生成的分析图表样品BES图样品矿物成分分布图矿物成分图、表矿物元素图、表岩屑颗粒尺寸分布图、表矿物颗粒尺寸分布图、表岩屑颗粒比重分布图、表矿物连生关系表岩屑岩性分析图、表 样品矿物成分分布图 矿物成分图、表 矿物连生关系表 AMICS-Oil&Gas的应用范围十分广阔油田勘探、开发地质分析压裂点的选择（水平井）测井数据修正辅助录井为现代数字化油田提供基础数据特殊应用功能定制
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    厂商： 北京欧波同光学技术有限公司
    品牌： 欧波同/OPTON
    型号： AMICS
    价格： 700万 - 1,500万元
  • 多通道荧光定量分析仪Fascan 48E 400-696-6689
    产品概述多通道荧光定量分析仪Fascan 48E基于特殊连接酶和荧光捕获探针的微测序技术原理，即连接酶测序法，应用天隆特有的微测序反应试剂及Fascan 48E多通道荧光定量分析仪，采集血液、胃粘膜组织等样本后可快速获取个体化用药相关基因信息，用于指华法林、氯呲格雷、他汀类药物、硝酸甘油、降压药物、阿司匹林、精神类药物、叶酸等药物的个体化使用。仪器特点01控温精准温度准确性及检测重复性优，CV≤0.5%02荧光高效4种荧光通道，可检测多个靶标，并采用高亮免维护LED光源03软件智能实验程序模块化，一键运行实验，软件自动判读结果04检测快捷配合相应试剂，1小时左右即可完成检测，出具报告仪器型号Fascan 48E检测通量48适用耗材0.2ml薄壁透明单管、八连管适用染料/探针FAM/SYBR Green I，VIC/HEX/TET/JOE，ROX/Texas Red，Cy5等激发波长通道1：470nm 通道2：523nm 通道3：571nm 通道4：630nm检测波长通道1：525nm 通道2：564nm 通道3：612nm 通道4：670nm激发光源高亮免维护LED荧光检测器光电二极管温度准确性≤0.3℃ (40.0°C ~ 99.0°C) , ≤1°C (4.0°C ~ 39.9°C)检测重复性CV ≤ 0.5%线性相关性|r|≥ 0.990操作模式7.0寸全彩触摸屏操控或PC端软件控制数据存储仪器可存储 ≤ 1000个实验设置文件/实验数据文件尺寸400mm(L) x 260mm (W) x 260mm(H) 重量11kg
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    厂商： 西安天隆科技有限公司
    品牌： 天隆科技/TIANLONG
    型号： Fascan 48E
    价格： 20万元
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  • 开发自身免疫性疾病治疗用抗体药物的同步定量分析技术
    使用“nSMOL Antibody BA Kit”实现对血液中治疗药物的监测预处理试剂盒“nSMOLTM Antibody BA Kit”岛津制作所和京都大学的研究小组领先全球开发出自身免疫性疾病１）治疗用抗体药物的同步定量分析技术。检测环节使用了岛津制作所的超快速液相质谱联用仪“LCMS-8050/8060”和预处理试剂盒“nSMOLTM Antibody BA Kit”２)。6月12日，联合研究成果发表在免疫学领域学术刊物《Journal of Immunological Methods》的网络版上。３)该研究从2017年4月开始历时2年，开发了从人血清中同步定量分析多种治疗用抗体的技术。具体来说，是指在相同分析条件下，对治疗自身免疫性疾病所用的7种抗体药物品（英夫利昔单抗、阿达木单抗、尤特克单抗、依库珠单抗、戈利木单抗、依那西普、阿巴西普）进行同时测定的技术。定量分析技术的有效性依据美国食品药品监督管理局（FDA）的指导标准４)进行了验证。从2017年12月开始的大约1年内，使用京都大学医学部附属医院收集的备检样品，对备检样品中所含的多种抗体药物的浓度进行检测，确认了同步定量分析值与过去取得的定量分析值之间仅有5%误差，属于高度一致的结果。本研究是在取得京都大学大学院医学研究科?医学部及医学部附属医院 医学伦理委员会的批准后实施的（批准编号：R0357、R0012、R1632）。在自身免疫性疾病的治疗中，关键是抗体药物的正确使用，为此，须使“血药浓度监测”（Therapeutic Drug Monitoring，以下简称“TDM”）生效。近年来，有报告表明部分疾病所使用的药物的血药浓度与药效具有相关性。例如，在关节风湿病方面，美国风湿病学会（ACR)和欧洲风湿病学会(EULAR)致力于通过血药浓度监测制定药效标准值。由于自身免疫性疾病伴有多种病情，因而会在多个诊疗科使用分别针对各种病情的抗体药物。针对各种药物单独进行TDM，存在着成本高、患者负担重等课题。本研究成果通过实现了自身免疫性疾病的抗体药物同步TDM，解决了上述课题，并开创了对多种疾病进行一元化且交叉式检查、制定相应治疗方针的可能性。此外，在医药品开发一线，本研究成果还可应用于生物仿制药的治疗效果验证等。岛津制作所通过正确使用医药品，减轻患者及医疗工作者的负担，并为控制医疗费增加而做出贡献。免疫细胞对自身的正常细胞及组织也反应过度并对细胞发起攻击而导致的疾病。关节风湿病等结缔组织病等为典型代表。超快速液相质谱分析系统用预处理试剂盒。与“LCMS-8050/8060”配合使用，可简便、迅速、高精度且低成本地实现抗体药物的药物动态分析。nSMOL法对抗体分子的N末端Fab领域进行选择性地解离和回收，通过质谱分析对单克隆抗体药物进行定量分析的本公司独有技术（nano-surface and molecular-orientation limited proteolysis）Multiplexed monitoring of therapeutic antibodies for inflammatory diseases using Fab-selective proteolysis nSMOL coupled with LC-MS. Iwamoto N, Takanashi M, Yokoyama K, Yonezawa A, Denda M, Hashimoto M, Tanaka M, Ito H, Matsuura M, Yamamoto S, Honzawa Y, Matsubara K, and Shimada T*. J Immunol Methods. 2019. pii: S0022-1759(19)30141-3. doi: 10.1016/j.jim.2019.06.014.https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf“nSMOL Antibody BA Kit”未进行基于医药品医疗器械法的医疗器械审批/认证等。不可用于治疗诊断目的及其相关手续。图片：超快速液相质谱联用仪“LCMS-8050”
    时间： 2019-08-29
    作者： 岛津
  • 大化所高通量多重蛋白质组定量分析方法研究获进展
    近日，中科院大连化学物理研究所王方军博士、邹汉法研究员等人在高通量多重蛋白质组定量分析方法研究方面取得新进展，发展了一级质谱(MS1)谱图中六种不同蛋白质样品同时规模化定量分析的同位素标记方法，并将该方法应用于细胞蛋白质合成-降解周转更新分析，分析通量是常规同位素标记方法的三倍，研究成果发表在自然出版社新创立的综合性刊物《科学报告》(Scientific Reports, 2013, 3, 1827. doi: 10.1038/srep01827)上。　　基于一级质谱(MS1)的蛋白质组学定量分析由于定量精度高，是现今蛋白质组学定量分析中应用最为广泛的分析技术。由于同位素标记的限制，现有的方法最多可以在一次液相色谱-质谱联用分析中定量三种不同的蛋白质样品，极大限制了蛋白质组学定量分析的通量。王方军博士、邹汉法研究员等人将体内氨基酸同位素标记方法与体外二甲基化同位素标记方法进行有机组合，实现了六种不同蛋白质样品的差异标记并在单次实验中实现了相对定量分析。该六重同位素标记策略还可以应用于细胞中蛋白质的合成及降解速率的高通量分析，成功测定了HeLa细胞中1365个蛋白质的合成-降解周转更新时间。此外，该工作中使用的基于MS1六重蛋白质组学定量及蛋白质周转分析软件系统也由我所自主开发，是国际上首个可以同时定量六个不同蛋白质样品的软件系统。Quant-ArMone 六重蛋白质组学定量及蛋白质周转分析软件示意图HeLa细胞内蛋白质降解动态拟合曲线示例
    时间： 2013-06-05
    作者： rjzhou
  • 免疫组化（IHC）的 "疑难杂症" 再也不愁
    免疫组化简介免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应 和组织化学的呈色反应，对相应炕原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。免疫组化基本原理免疫组化技术是一种综合定性、定位和定量；形态、机能和代谢密切结合为一体的研究和检测技术。在原位检测出病原的同时，还能观察到组织病变与该病原的关系，确认受染细胞类型，从而有助于了解疾病的发病机理和病理过程。 免疫酶组化技术是通过共价键将酶连接在抗体上，制成酶标抗体，再借酶对底物的特异催化作用，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，于普通显微镜或电镜下进行细胞表面及细胞内各种抗原成分的定位，根据酶标记的部位可将其分为直接法（一步法）、间接法（二步法）、桥联法（多步法）等，用于标记的抗体可以是用免疫动物制备的多克隆抗体或特异性单克隆抗体，最好是特异性强的高效价的单克隆抗体。直接法是将酶直接标记在第一抗体上，间接法是将酶标记在第二抗体上，检测组织细胞内的特定抗原物质。目前通常选用免疫酶组化间接染色法。那么，显色常用的酶为辣根过氧化物酶（HRP），常用的显色底物为DAB（3,3’-二氨基联苯胺），偶尔用AEC（3-氨基-9-乙基咔唑）。碱性磷酸酶（AP或AKP）也是目前免疫诊断试剂最常用的标记酶之一，稳定性好、灵敏度高。表1. 免疫组化（IHC）显色系统的选择免疫组化注意事项1. 组织取材为避免蛋白丢失及组织受损引起的非特异试剂吸附，取材须快速（组织块也不宜太大）且要尽量避免人为损伤。2. 固定固定要及时、彻底，但也不能固定过久。实验证明甲醛固定时间越久的组织越容易出现自发荧光及非特异性染色。一般以 12~36 小时最好。3. 石蜡片与冰冻片的选择石蜡片制作对设备要求较冰冻片低，组织结构更好，保存条件简单时间也久。但对部分蛋白有较强烈的破坏作用，对蛋白保护较冰冻片差。冰冻片对蛋白的保护较石蜡片好，制作起来也较快。4. 灭活过氧化物酶（HRP）系统的一定要做内源性过氧化物酶的灭活，而对于碱性磷酸酶（AP）系统和免疫荧光这个步骤不需要做。5. 抗原修复不同的样本、不同的蛋白其最佳的抗原修复方式会有所区别，热修复（酸性修复液（柠檬酸盐修复液）、碱性修复液（EDTA 修复液）及酶修复（蛋白酶）都可做尝试。对于陈旧的样本要增加修复强度，比如延长修复时间。6. 封闭常用的封闭液有 5% BSA 和血清。BSA 是通用型的封闭液。血清应选择与二抗同源的血清。7. 抗体孵育一抗一定要与实验及样本匹配的，孵育条件以 4 ℃ 过夜最佳。二抗应匹配一抗，37 ℃ 孵育半小时即可。8. 显色DAB 显色建议在镜下控制反应时间，在阳性及背景之间选择平衡点。免疫组化常见问题分析1.脱片产生的原因有哪些 1、烤片时间不够，或温度不够，可以延长烤片时间和提高烤片温度； 2、多聚赖氨酸玻片质量的问题。 3、组织切的不好，切片机的问题例如比较老的旧的机器切的厚或者不均匀，或者切片者手法不好等。 4、修复的问题：抗原修复的时候高压时间过长了，或者放进100度的修复液时手法不好，咚的一声就丢进去了，这样超容易脱片。此外，用EDTA修复比柠檬酸容易脱片，但是你要用到EDTA的时候也没办法，只有从另外的问题上着手。 5、操作的时候甩的太猛了，有脱片嫌疑的片子最好不甩或轻轻甩，用卫生纸从边缘上慢慢吸水。 6.组织的问题，我用的组织癌症的很多，越是癌症组织有坏死之类越容易脱。2.边缘效应1、组织边缘与玻片粘贴不牢，边缘组织松脱漂浮在液体中，每次清洗不易将组织下面试剂洗尽所致. 解决办法：制备优质的胶片（APES或多聚赖氨酸），切出尽量薄的组织切片，不厚于4微米，组织的前期处理应规范，尽量避免选用坏死较多的组织；2、切片上滴加的试剂未充分覆盖组织，边缘的试剂容易首先变干，浓度较中心组织高而致染色深。解决办法：试剂要充分覆盖组织，应超出组织边缘2mm。用组化笔画圈时，为了避免油剂的影响，画圈应距组织边缘3-4mm。3.切片染色后背景太深，如何区分特异性sing与非特异性着色全片着色是指整个切片全都染上了颜色，着色的强度可深可浅，总之，分不清那些组织是阳性那些组织是阴性。出现这种现象的原因有：（1）抗体浓度过高：一抗浓度过高是常见的原因之一。解决办法是，每次使用新抗体前应当对其工作浓度进行测试，使每一抗体个体化，找到适合自己实验室的理想工作浓度，既使是即用型的抗体也应如此，不能只简单的按说明书进行染色。（2）抗体孵育时间过长或温度较高：解决办法是，严格执行操作规程，最好随身佩带报时表或报时钟，及时提醒，避免因遗忘而造成时间延长。现在流行的二步法（Polymer）敏感性很高，要求一抗孵育的时间不是传统的1小时，而是30分钟，因此，要根据染色结果进行调整。（3）DAB变质和显色时间太长：DAB最好现用现配，如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长，因为在没有酶的情况下，过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力，未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控，达到理想的染色程度时立即终止反应。不过当染色片太多时或用染色机时，这样做似乎不现实，但至少应对一些新的或少用的抗体显色时进行监控，避免显色时间过长。（4）组织变干：修复液溢出后未及时补充液体、染色切片太多、动作太慢、忘记滴液、滴液流失等都是造成组织变干的原因。解决的办法是操作要认真仔细，采用DAKO笔或PAP Pen在组织周围画圈，可以有效的避免液体流失，也能提高操作速度。（5）切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长（大于24小时）：原因上不清楚，但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复，第二天加抗体进行免疫组化染色，如果将装有切片和修复液的容器放在4º C冰箱过夜，对结果无明显影响，如果放在室温，特别是炎热的夏天，会出现背景着色，因此，不可存放时间太长。（6）一抗变质、质量差的多克隆抗体：注意抗体的有效期，过期的抗体要麽不显色要麽背景着色。用新买的抗体时最好设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。4.免疫组化染色呈阴性结果1、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误；2、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是最佳的时间和次数。若不行，还可高压修复；3、组织切片本身这种抗原含量低；4、血清封闭时间过长；5、DAB孵育时间过短；6、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应；7、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。5.背景1、考虑一抗浓度高；2、然后调整DAB孵育时间；3、也要考虑血清封闭时间是否过短；4、适当增加抗体孵育后的浸洗次数和延长浸洗时间等。
    时间： 2024-01-26
    作者： 泽叶生物
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  • 免疫组化的概念和常用方法介绍

    一、定义 用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。二、原理 根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。三、分类 1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。四、目前几种常用免疫组化方法简单介绍 1）免疫荧光方法 是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用较广。2）免疫酶标方法 免疫酶标方法是继免疫荧光后，于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前最常用的技术。 本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准确，对比度好，染色标本可长期保存，适合于光、电镜研究等。 免疫酶标方法的发展非常迅速，已经衍生出了多种标记方法，且随着方法的不断改进和创新，其特异性和灵敏度都在不断提高，使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法检测系统等。3）免疫胶体金技术 免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒，且胶体金的电子密度高，所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色，因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。五、被检测的物质 组织或细胞中凡是能作为抗原或半抗原，如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激 素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。六、特点 1）特异性强。免疫学的基本原理决定抗原与抗体之间的结合具有高度特异性，因此，免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示，如角蛋白（keratin）显示上皮成分，LCA显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时，才会出现交叉反应。2）敏感性高。在应用免疫组化的起始阶段，由于技术上的限制，只有直接法、间接法等敏感性不高的技术，那时的抗体只能稀释几倍、几十倍；现在由于ABC法或SP三步法的出现，使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合，这样高敏感性的抗体抗原反应，使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。3）定位准确、形态与功能相结合。该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学领域开展深入研究是十分有意义的。七、从蛋白水平检测角度，免疫组化技术与Western blotting、ELISA的异同 1）Western blotting：蛋白质免疫印迹，也是利用抗体抗原反应原理，结合化学发光等技术来检查组织或细胞样品内蛋白含量的检测方法。与免疫组化技术相比，定量可能更加准确；当然Western blotting也可定性和定位（通过提取膜蛋白或核蛋白、胞浆蛋白分别检测其中抗原含量，进而间接反映它们的定位），但敏感性远远低于免疫组化技术。2）ELISA：酶联免疫吸附试验，也是利用抗体-抗原-抗原结合反应原理来检查体液或组织匀浆中蛋白含量的检测。与免疫组化技术相比，定量最准确，是分泌性蛋白检测首选方法之一。

  • 免疫组化和免疫分型有何区别

    [font=宋体]在生物学和医学领域，免疫组化和免疫分型是两种常用的实验技术，它们各自具有独特的应用和优势。虽然这两种技术都涉及到免疫学的原理和方法，但它们在实验目的、操作过程、结果解读等方面存在显著的差异。本文将对免疫组化和免疫分型进行详细的比较和讨论，以揭示它们之间的区别。[/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]定义区别：[/font][/b][font=宋体][font=宋体]免疫组化（[/font][font=Calibri]Immunohistochemistry[/font][font=宋体]）是一种利用免疫学原理，通过特异性抗体与细胞或组织中的抗原进行反应，进而通过染色或标记等方法来定位和检测抗原的技术。其主要应用于组织切片或细胞涂片的染色，以观察和研究抗原在细胞或组织中的分布、定位及表达情况。免疫组化技术可以帮助我们了解细胞或组织的类型、功能状态以及病理变化，对于疾病的诊断、预后评估以及药物研发等方面具有重要意义。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫分型（[/font][font=Calibri]Immunophenotyping[/font][font=宋体]）是一种通过检测细胞表面或细胞内的特定抗原，来识别和分析细胞类型的技术。该技术主要应用于对免疫细胞（如淋巴细胞、巨噬细胞等）进行分型，以了解其在免疫系统中的功能和作用。免疫分型技术可以帮助我们深入了解免疫系统的结构和功能，揭示免疫细胞在疾病发生和发展过程中的作用，为疾病的诊断和治疗提供新的思路和方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]实验目的区别：[/font][/b][font=宋体]免疫组化主要关注抗原在细胞或组织中的定位和表达情况，而免疫分型则侧重于对免疫细胞进行分型和功能分析。从操作过程来看，免疫组化通常需要对组织或细胞进行切片、固定、染色等步骤，而免疫分型则可能涉及到细胞的分离、培养、流式细胞术等操作。从结果解读来看，免疫组化的结果主要表现为抗原在细胞或组织中的分布和表达模式，而免疫分型的结果则提供了关于免疫细胞类型、比例和功能状态的信息。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]应用领域区别：[/font][/b][font=宋体]免疫组化在病理学、肿瘤学、神经科学等领域有广泛应用，可以帮助医生进行疾病的诊断和预后评估。而免疫分型则更多地应用于免疫学、血液学、感染病学等领域，有助于深入了解免疫系统的功能和疾病发生机制。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体]综上所述，免疫组化和免疫分型是两种具有不同特点和应用领域的实验技术。虽然它们都涉及到免疫学的原理和方法，但在实验目的、操作过程、结果解读以及应用领域等方面存在显著的差异。因此，在实际应用中，我们需要根据研究目的和需求选择合适的技术手段，以获取准确、可靠的实验结果。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service][b]流式细胞检测技术服务[/b][/url]，详情关注：[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

  • 免疫组化是什么技术？免疫组化方法及优点

    [font=Calibri][font=宋体]免疫组化技术，运用免疫学的基本原理[/font][font=Calibri]——[/font][font=宋体]抗原抗体反应，即抗原与抗体之间的特异性结合。通过化学反应，使标记在抗体上的显色剂（如荧光素、酶、金属离子、同位素）显现颜色，从而确定组织细胞内的抗原（多肽和蛋白质）。该技术不仅对这些抗原进行定位，还能进行定性和相对定量的研究。这种技术被称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术[/font][/font][font=宋体][font=Calibri](immunocytochemistry)[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]。[/font][/font][font=Calibri][font=宋体]免疫组化，简而言之，是免疫学、组织学和化学的完美结合。它利用免疫学方法对组织进行标记，再通过化学方法进行染色，从而标记出组织中的特定蛋白或一组蛋白。这项技术目前在临床病理诊断中得到了广泛应用，并衍生出了多种技术变种，如免疫细胞化学、免疫组织荧光等，为生物医学研究提供了强大的工具。[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]一、免疫组化技术的基本原理[/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体]应用免疫学及组织化学原理，对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物，制备特异性抗体，再用这种抗体（第一抗体）作为抗原去免疫动物制备第二抗体，并用某种酶（常用辣根过氧化物酶）或生物素等处理后再与前述抗原成分结合，将抗原放大，由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的，因此，还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来（常用显色剂[/font][font=Calibri]DAB[/font][font=宋体]显示为棕黄色颗粒）。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]通过抗原抗体反应及呈色反应，显示细胞或组织中的化学成分，在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质，如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]二、免疫组织化学染色方法[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）；与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、按结合方式可分为抗原—抗体结合，如过氧化物酶[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]抗过氧化物酶（[/font][font=Calibri]PAP[/font][font=宋体]）法和亲和连接，如卵白素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]生物素[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]过氧化物酶复合物（[/font][font=Calibri]ABC[/font][font=宋体]）法、链霉菌抗生物素蛋白[/font][font=Calibri]-[/font][font=宋体]过氧化物酶连结（[/font][font=Calibri]SP[/font][font=宋体]）法等，其中[/font][font=Calibri]SP[/font][font=宋体]法是最常用的方法。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]三、几种常用免疫组织化学方法的原理[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、免疫荧光方法[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用比较广。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、免疫酶标方法[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫酶标方法是继免疫荧光后，于[/font][font=Calibri]60[/font][font=宋体]年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是目前最常用的技术。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体]本方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准确，对比度好，染色标本可长期保存，适合于光、电镜研究等。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫酶标方法的发展非常迅速，已经衍生出了多种标记方法，且随着方法的不断改进和创新，其特异性和灵敏度都在不断提高，使用也越来越方便。目前在病理诊断中广为使用的当属[/font][font=Calibri]PAP[/font][font=宋体]法、[/font][font=Calibri]ABC[/font][font=宋体]法、[/font][font=Calibri]SP[/font][font=宋体]法等。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、免疫胶体金技术[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子[/font][font=Calibri]([/font][font=宋体]如葡萄球菌[/font][font=Calibri]A[/font][font=宋体]蛋白[/font][font=Calibri])[/font][font=宋体]等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒，且胶体金的电子密度高，所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色，因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][b]四、免疫组化技术的优点[/b][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]1[/font][font=宋体]、特异性强 免疫学的基本原理决定了抗原与抗体之间的结合具有高度特异性，因此，免疫组化从理论上讲也是组织细胞中抗原的特定显示，如角蛋白（[/font][font=Calibri]keratin[/font][font=宋体]）显示上皮成分，[/font][font=Calibri]LCA[/font][font=宋体]显示淋巴细胞成分。只有当组织细胞中存在交叉抗原时才会出现交叉反应。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2[/font][font=宋体]、敏感性高 在应用免疫组化的起始阶段，由于技术上的限制，只有直接法、间接法等敏感性不高的技术，那时的抗体只能稀释几倍、几十倍；现在由于[/font][font=Calibri]ABC[/font][font=宋体]法或[/font][font=Calibri]SP[/font][font=宋体]法的出现，使抗体稀释上千倍、上万倍甚至上亿倍仍可在组织细胞中与抗原结合，这样高敏感性的抗体抗原反应，使免疫组化方法越来越方便地应用于常规病理诊断工作。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3[/font][font=宋体]、定位准确、形态与功能相结合 该技术通过抗原抗体反应及呈色反应，可在组织和细胞中进行抗原的准确定位，因而可同时对不同抗原在同一组织或细胞中进行定位观察，这样就可以进行形态与功能相结合的研究，对病理学研究的深入是十分有意义的。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=Calibri][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service][b]石蜡切片免疫组化（[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service][b]IHC[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service][b]）检测服务[/b][/url]，更多详情可以关注：[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/immunohistochemistry-service[/font][/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州：蛋白与抗体的专业引领者，欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=Calibri] [/font]

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