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霍夫曼相差倒置显微镜

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霍夫曼相差倒置显微镜相关的论坛

  • 【求助】相差显微镜和倒置显微镜的区别?

    我想购买一个显微镜用于观察活体细胞,查了相关的资料有用相差显微镜的,有用倒置显微镜的,不知道这两个有什么不同。目前用的比较多的是什么的,什么牌子的比较好,我需要能拍照的。价钱大概多少?谢谢!

  • 工业用倒置显微镜相对于正置显微镜的五大优势

    工业用倒置显微镜相对于正置显微镜的五大优势

    光学元件放置于在试样下方,您便可以利用倒置显微镜从下方观察试样。而利用正置显微镜,您则需要从上方观察。传统上来说,倒置显微镜一般用于生命科学研究,因为重力会使得试样沉到有水溶液的支架底部,从上方您观察不到太多内容。但是一段时间以来,倒置显微镜在工业中的应用中也变得日益流行。下面我们就来了解一下倒置显微镜在工业应用中拥有哪些优势。1) 倒置显微镜自由度大于正置显微镜正置显微镜的试样大小限制在平均高度80 mm和重量3 kg,该范围取决于所用的物镜。倒置显微镜没有这种限制。因为光学元件被放置在工作台下部,而试样则放置在倒置显微镜的物镜上方。这表明用户的工作距离更大,并可使用重达30 kg大而沉重的试样。因此,如果使用大而沉重或者尺寸和重量差别很大的试样,倒置显微镜能够提供您需要的自由度。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505041718_544720_3005844_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505041718_544723_3005844_3.jpg图1:左侧:倒置显微镜的光程。右侧:具有大试样的倒置显微镜。2) 倒置显微镜使您可以在较短时间内观察更多试样采用倒置显微镜,您只需将试样放置在工作台上,聚焦到表面一次并使其成像便可完成工作。试样在所有放大倍率下都能保持聚焦,并且更多相同种类的试样也同样可以聚焦。采用正置显微镜,工作流程包含多个需要操作员执行的不同任务:切换到较小放大倍率进行定位时,需要依次降低工作台、移出工作台、取出试样架、采用新试样架、将试样放置在试样架上、保护试样并使用压片装置平整试样表面。操作员需要执行所有以上步骤,而且所有这些不同的步骤每次都伴有执行失败的风险。对于未经培训的操作员,放置试样可能是一个艰巨任务;而采用倒置显微镜,将试样放置在工作台则轻而易举,所需执行的步骤也更少。另一点就是:所上述正置显微镜的所有步骤加起来需要花费更多时间,尤其是在您需要依次观察多个试样时。我们假设操作正置显微镜是有丰富经验的用户,即使每个步骤只需5秒钟,倒置显微镜用户也能击败其同事:以下是用户使用正置显微镜与用户使用倒置显微镜的示例,例如工业用徕卡DMi8。他们的任务是分析一份标准金相试样。行动正置显微镜总计 倒置显微镜总计降低工作台5秒 5–移出工作台5秒 10–取出试样架/采用新试样架 5秒 15 –将试样放置在试样架上和保护试样 5秒 20 –使用压片装置平整试样表面 5秒 25 –切换到较小放大倍率进行定位5秒 305秒5将试样放置在工作台、移回工作台并重新聚焦 10秒 40510表1:正置显微镜与倒置显微镜工作流程比较根据以上假设,比起在正置显微镜上分析试样,倒置显微镜切换试样的速度要快上4倍,因此利用倒置显微镜可以实现更高的生产效率。3) 采用倒置显微镜,不会导致物镜撞坏试样最好的操作员也可能遇到物镜撞坏试样的情况,这是使用正置显微镜时人人皆知的风险。发生这种情况时,您不仅需要投资购买新的物镜,还需要丢弃试样。在大多数情况下,没有多余的物镜可以立即使用,需要重新订购。这便导致了试样工作效率降低,并且如果没有第二个显微镜可用,那么在最坏情况下可能工作都要完全中断。倒置显微镜的设计非常有助于降低物镜撞坏试样的风险。首先,倒置显微镜的物镜位于工作台下方,因此可以获得更好的保护。其次,倒置显微镜仪器(例如工业用徕卡DMi8)具有上聚焦停止功能,该功能可通过定义管口上限来提供额外的安全性。因此,在保护投资的同时,您可以专注于自己的任务,而不用花时间担心可能损坏工具和试样。4) 倒置显微镜节省制备试样的时间和金钱因为照现在的情形采样并将其放置在工作台上,试样制备将受到限制。另外,只有试样的一侧需要处理。当试样不需要嵌入时,也就无需将更大的试样切成几个部分,这可以为您节省时间。采用倒置显微镜在显微镜上处理试样时,也无需使用压片装置平衡试样。您制备试样只需执行两个步骤,而不是七个。这可以节省您的时间和金钱。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505041718_544722_3005844_3.jpg图2:左侧:用于倒置显微镜的抛光表面试样。右侧:对于正置显微镜,试样必须放置在试样架上。5) 倒置显微镜的操作方向和普遍习惯一致如果用正置显微镜观察试样,您的大脑会遇到一个棘手的问题:由于仪器结构原因,向左移动工作台时,您通过目镜看到的试样图像是向右移动的。当然,反之亦然。如果用倒置显微镜观察试样(例如工业用徕卡DMi8),试样图像与工作台会朝着相同方向移动。这种运动方式符合我们对于运动的常规习惯。尤其对于未经培训的用户,从真正意义上减轻了工作,因为他们不必考虑试样移动的方向,只需要像未通过光学元件一样操作。利用倒置显微镜观察试样时您既不用过多思考,又节省了时间做事情时不用思考可以节省时间,由此可以加快了您的工作进程。

  • 【求助】又要麻烦大家,关于倒置显微镜的问题

    技术科给我们采购了一台奥林巴斯的IX51倒置显微镜,10X的目镜,4、10、20、40的物镜,用于我们药检所生测室使用。主要就是控制菌镜检。可是我记得镜检是不是得用正置的显微镜啊?另外革兰染色要求一般在多少倍数下观察呢?药典的标准操作规范中要求显微镜是40X~1500X,是什么考虑呢?技术科主任说买倒置显微镜,一样用,另外在食品检测中也有用?不知道用在哪个地方?活细胞观察?可是GB4789中似乎没有哪个菌种的鉴定中用到活体观察啊?好像罐头的商业无菌中用到?这台IX51没有配备100倍物镜,工程师说这种倒置的显微镜如果用油镜的话,不太好操作,镜头油也不好清洗。可是已经买了,怎么办呢?我们所里倒是有另外一台正置显微镜,是莱卡 DM 1000的,倒是很满足我的想法,10X的目镜,4、10、20、40、100X的物镜。现在纠结中,不知道要哪一个?请大家帮忙!多谢。

  • 倒置显微镜还是正置显微镜

    我们现在要建个微生物实验室,以后的发展方向应该是真菌分离、鉴定培养,可能需要培养瓶培养。现在在纠结到底买倒置显微镜呢还是买正置显微镜。我是想买普通2w左右的倒置是很普通的了,但买1w多的正置是比较好的了,并且我估计以后多数时候是鉴定的时候用的比较多,而我们领导偏向于买倒置的,买个便宜点的。同志们给我个建议,买哪种比较好。

  • 分享给大家倒置显微镜原理与操作

    之前收藏的一个倒置显微镜原理与操作的文件,关于TE2000-U型倒置显微镜的基本组件、原理,掌握其基本操作。分享给大家,顺便测试下论坛的新版编辑器。希望对大家有所帮助。

  • 【求助】光学显微镜、解剖显微镜和倒置显微镜的区别?

    如题,光学显微镜、解剖显微镜和倒置显微镜的区别?土豆在填写药检仪器调查表的时候发现这几个名词,有点不太明白,一般常用的就是光学显微镜了,那解剖显微镜和倒置显微镜用在什么实验上的啊?有何不同之处,还望各位指教。

  • 【求助】倒置显微镜的技术参数

    本单位欲购买一台倒置显微镜(进口品牌),用于观察细胞等生物样品,并需要接数码相机;根据我这几天所查的资料,倒置显微镜应该是明视野透射式照明法的比较简单的显微镜,我理解没错吧?可是我不知道技术参数要求咋写,NA值最大为1.4,目前一般的显微镜能达到多少,NA值为多少就可满足日常检测的需要?还有其他关键参数的要求? 哪位高手给指点一下?我们的预算大约10万人民币,北京的先谢过 [em0713]

  • 快来讨论一下荧光倒置显微镜啊

    (1)荧光倒置显微镜对样品的前处理有什么要求吗?(2)是否可以用它观察食品,例如含脂肪较高的干酪中的脂肪分别情况?(3)脂肪用荧光染色剂染色后就可以在荧光倒置显微镜下观察到吗?(4)是否需要和做电镜一样复杂的前处理?问题很多,一时还真问不过来,高手们快来指点一下吧。 期待ing[em06] [em06] [em06] [em06] [em06] [em06]

  • 【求助】尼康 TE2000倒置显微镜无法与PC连接!

    [em0812],如题,尼康 TE2000倒置显微镜在使用中,通过USB与电脑连接后,打开电脑上尼康程序,显示"can not find camera",请教高手是何缘故?!ps:显微镜光路转换盘位置正确,显微镜工作正常,PC(dell D630)上驱动安装正确。

  • 【求助】倒置显微镜的镜头安装在普通显微镜上为什么不清晰呢?

    实验室有两个倒置显微镜镜头“CPC 25/0.40 160/1.5”和“CPC +xc 25/0.40 160/15” 。1、安装在老式显微镜上时视野很亮,但很不清晰。只有把聚光镜调得很低时(此时较暗)才能看清细节。请问是为什么呢?(会不会是老式显微镜在进光量大时镜筒内部反光?)2、还有+xc在这里是什么意思呢?3、“160/1.5”和“160/15”中的1.5和15是什么含义啊?

  • 【求助】Olympus荧光倒置显微镜不能与电脑联机

    各位网友:我们实验室有一台Olympus DP2-BSW荧光倒置显微镜,用了不到一年。由于上段时间装修,仪器搬动过。装修完搬回来,装好后就不能与电脑联机了,电脑上的画面一片黑,不能显示显微镜上观察到的图片了。单用显微镜的话能正常使用。由于工程师很忙,可能要等挺长时间才能过来修,所以请求各位网友帮忙。

  • 【分享】正立式显微镜和倒置式显微镜的区别

    [align=left]正立式显微镜:光路设计简单,光损少,样品高度有要求,方便多视场观察,镜头不易落灰易维护,适用于研究单位。[/align][align=left]倒置式显微镜:光路长,光损较大,光路设计较复杂,对样品高低无要求,检测方便快速,不适合多视场分析,同等配置下倒置显微镜的价格要高于正立式显微镜。[/align]

  • 【求助】购买倒置荧光显微镜

    想买一台荧光倒置显微镜,价格在20-25万之间,不知道哪种牌子和型号合适,请大牛推荐,不胜感激!另外,各品牌的荧光倒置显微镜报价在哪里可以查到?在公司网站上找不到。多谢!

  • 光学显微镜基础知识100条 读完你就成显微镜专家了

    1显微镜的光学原理图 ................................................................................................................... 12显微镜观察方式一 明视野观察(Bright field, BF) .............................................................. 13显微镜观察方式二 暗视野观察(Dark field) ....................................................................... 14显微镜观察方式三 相差镜检法(Phase contrast, PH) ...................................................... 25显微镜观察方式四 微分干涉镜检术(DIC) ......................................................................... 36显微镜观察方式五 偏光显微镜(Polarizing Microscopy, POL) ....................................... 47显微镜观察方式六 霍夫曼调制相衬(HMC) ....................................................................... 58显微镜观察方式七 荧光显微镜(Fluorescence Microscopy, FL) .................................... 69显微镜观察方式八 塑料DIC(Plas DIC) ............................................................................ 710物镜 ............................................................................................................................................ 711消色差物镜(Achromatic) ...................................................................................................... 812复消色差物镜(Apochromatic) ............................................................................................. 813平场消色差物镜(Plana chromatic) ..................................................................................... 814平场复消色差物镜(PF, Planapochromatic) ....................................................................... 815半复消色差物镜(Semi Apochromatic) ............................................................................... 816放大率(Magnification) .......................................................................................................... 817视场数 ........................................................................................................................................ 918物镜参数:数值孔径 ................................................................................................................. 919物镜参数:焦深 ....................................................................................................................... 1020物镜参数:齐焦距离 ............................................................................................................... 1021物镜参数:工作距离 ............................................................................................................... 1122物镜参数:分辨率 ................................................................................................................... 1123覆盖差 ...................................................................................................................................... 1124齐焦合轴 ..................................................................................................................................

  • 倒置荧光显微镜特点

    [b][url=http://www.f-lab.cn/fluorescence-microscopes/ae31e-100w.html]倒置荧光显微镜AE31E-100W[/url][/b][color=#000000]是motic[/color][color=#000000]麦克奥迪AE31倒置显微镜系列的倒置生物显微镜产品,广泛[/color][color=#000000]应用于生物学、组织学、微生物学,免疫学和医学等领域,并且具有竞争力的倒置荧光显微镜价格。[/color][color=#000000]倒置荧光显微镜[/color]AE31E-100W[color=#000000]采用[/color][color=#000000]Motic无限远色差校正CCIS光学系统,具有超长工作距离和[/color][color=#000000]光学性能,提供了高亮度高清晰度和高对比度的荧光成像。[/color][b][color=#000000]倒置荧光显微镜[/color]AE31E-100W特点[/b][color=#000000]三目显微镜宽场高视点目镜,10X/22mm,瞳距可调,橡胶眼罩CCIS消色差物镜PL4X CCIS消色差相位物镜PL,PH10x, PH20xELWD N.A.0.30聚光器汞灯照明系统12V/100W45mm蓝光和绿色干涉滤波片供电100-240VAC [img=倒置荧光显微镜]http://www.f-lab.cn/Upload/AE31E-100W.jpg[/img][/color]倒置荧光显微镜:[url]http://www.f-lab.cn/fluorescence-microscopes/ae31e-100w.html[/url]

  • 光学显微镜的分类

    以下内容摘自中国分析仪器网,供有兴趣的版友参考。一、显微镜的分类 (一)、按使用目镜的数目可分为单目、双目和三目显微镜。 单目价格比较便宜,可以作为初学爱好者的选择,双目稍贵点,观察的时候两眼可以同时观察,观察得舒适些,三目又多了一目,它的作用主要是连接数码相机或电脑用,比较适合长时间工作的人员选用。 (二)、根据其用途以及应用范围分为生物显微镜、金相显微镜、体视显微镜等。 1、生物显微镜是最常见的一种显微镜,在很多实验室中都可以见到,主要是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。 2、体视显微镜又称为实体显微镜、立体显微镜,是一种具有正像立体感的目视仪器,广泛的应用于生物学、医学、农林等。它具有两个完整的光路,所以观察时物体呈现立体感。主要用途有:①作为动物学、植物学、昆虫学、组织学、考古学等的研究和解剖工具。②做纺织工业中原料及棉毛织物的检验。③在电子工业,做晶体等装配工具。④对各种材料气孔形状腐蚀情况等表面现象的检查。⑤对文书纸币的真假判断。⑥透镜、棱镜或其它透明物质的表面质量,以及精密刻度的质量检查等。 3、金相显微镜主要是用来鉴定和分析金属内部结构组织,是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察,故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光,而后者以透射光照明。不仅可以鉴别和分析各种金属、合金材料、非金属物质的组织结构及集成电路、微颗粒、线材、纤维、表面喷涂等的一些表面状况,金相显微镜还可以广泛地应用于电子、化工和仪器仪表行业观察不透明的物质和透明的物质。如金属、陶瓷、集成电路、电子芯片、印刷电路板、液晶板、薄膜、粉末、碳粉、线材、纤维、镀涂层以及其它非金属材在金相显微镜中照明光束从物镜方向射到被观察物体表面,被物面反射后再返回物镜成像。所以用金相显微镜来检验分析金属内部的组织结构在工业生产中是十分重要的。体视显微镜在工业生产中也可以用到,但是它只是用来观察金属表面划伤、划痕等,放大倍数一般在10X-50X之间,金相的放大倍数一般在40X-400X,有些可以达到800X。 (三)、按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜等。 1、偏光显微是鉴定物质细微结构光学性质的一种显微镜。凡具有双折射性的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。主要用于研究透明与不透明各向异性材料。一般具有双折射的物质都可以用这种显微镜进行观察。双折射性是晶体的基本特征。因此,偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域,如在植物学方面,如鉴别纤维、染色体、纺锤丝、淀粉粒、细胞壁以及细胞质与组织中是否含有晶体等。在植物病理上,病菌的入侵,常引起组织内化学性质的改变,可以偏光显微术进行鉴别。在人体及动物学方面,常利用偏光显微术来鉴别骨骷、牙齿、胆固醇、神经纤维、肿瘤细胞、横纹肌和毛发等。 2、相衬显微镜又称为相差显微镜,最大的特点就是可以观察未经染色的标本和活细胞。这些样品在一般的显微镜下是观察不到的,而相差显微镜则利用物体不同结构成分之间的折射率和厚度的差别,把通过物体不同部分的光程差变为振幅差,经过带有环状光阑的聚光镜和带有相位片的相差物镜来实现观测,简单的说它利用的是样品密度差别产生的反差来进行观察的,所以即使样品不染色也可以进行,这大大便利了活体细胞的观察,因此相衬镜检法广泛应用于倒置显微镜中。有相板的物镜称”相衬物镜”,外壳上常有”Ph”字样。相衬法是一种光学信息处理方法,而且是最早的信息处理的成果之一,因此在光学的发展史上具有重要意义。 3、微分干涉对比镜检术出现于60年代,它不仅能观察无色透明的物体,而且图像呈现出浮雕壮的立体感,并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点,观察效果更为逼真。 (四)、按光源类型可分为普通光、荧光和激光显微镜等。 1、普通光显微镜采用的就是普通光源,是最常用的。 2、荧光显微镜是以紫外线为光源,通常是照射被检物体(落射式),使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。 3、激光共聚焦扫描显微镜,采用激光做为扫描光源,逐点、逐行、逐面快速扫描成像。因为激光束的波长较短,光束很细,所以共焦激光扫描显微镜有较高的分辨力,大约是普通光学显微镜的3倍。 (五).按显微镜物镜的位置分正置和倒置显微镜 1、倒置显微镜是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微观察。由于上述样品特点的限制,被检物体均放置在培养皿(或培养瓶)中,这样就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。因此,物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,故称为”倒置显微镜”。倒置显微镜多用于无色透明的活体观察。如果用户有特殊需要,也可以选配其它附件,用来完成微分干涉、荧光及简易偏光等观察。倒置显微镜由于制作更加严密,价格也是比较贵的。目见倒置显微镜广泛应用于patch-clamp(膜片钳),transgeneICSI等领域。 (六).数码显微镜 1、数码显微镜又叫视频显微镜,它是将显微镜看到的实物图像通过数模转换,使其成像在计算机上。数码显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、普通的电视机完美地结合在一起而开发研制成功的一项高科技产品。从而,我们可以对微观领域的研究从传统的普通的双眼观察到通过显示器上再现,从而提高了工作效率。数码显微镜在观察物体时能产生正立的三维空间影像。立体感强,成像清晰和宽阔,又具有长工作距离,并是适用范围非常广泛的常规显微镜。它操作方便、直观、检定效率高,适用于电子工业生产线的检验、印刷线路板的检定、印刷电路组件中出现的焊接缺陷(印刷错位、塌边等)的检定、单板PC的检定、真空荧光显示屏VFD的检定等等,它将实物的图像放大后显示在计算机的屏幕上,可以将图片保存,放大,打印。

  • 显微镜的分类

    光学显微镜有多种分类方法:按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜;按图像是否有立体感可分为立体视觉和非立体视觉显微镜;按观察对像可分为生物和金相显微镜等;按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜等;按光源类型可分为普通光、荧光、紫外光、红外光和激光显微镜等;按接收器类型可分为目视、数码(摄像)显微镜等。常用的显微镜有双目体视显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜等。1.双目体视显微镜双目体视显微镜又称"实体显微镜"或"解剖镜",是一种具有正象立体感地目视仪器。在生物、医学领域广泛用于切片操作和显微外科手术;在工业中用于微小零件和集成电路的观测、装配、检查等工作。它利用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束不是平行,而是具有一定的夹角--体视角(一般为12度--15度),为左右两眼提供一个具有立体感的图像。它实质上是两个单镜筒显微镜并列放置,两个镜筒的光轴构成相当于人们用双目观察一个物体时所形成的视角,以此形成三维空间的立体视觉图像。目前体视镜的光学结构是:由一个共用的初级物镜,对物体成象后的两光束被两组中间物镜----变焦镜分开,并成一体视角再经各自的目镜成象,它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得的,因此又称为"连续变倍体视显微镜"(Zoom-stereomicroscope)。随着应用的要求,目前体视镜可选配丰富的选购附件,如荧光,照相,摄象,冷光源等等。2.金相显微镜金相显微镜是专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察,故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光,而后者以透射光照明。在金相显微镜中照明光束从物镜方向射到被观察物体表面,被物面反射后再返回物镜成像。这种反射照明方式也广泛用于集成电路硅片的检测工作。3.偏光显微镜(Polarizingmicroscope)偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。将普通光改变为偏振光进行镜检的方法,以鉴别某一物质是单折射(各向同行)或双折射性(各向异性)。双折射性是晶体的基本特性。因此,偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域,在生物学和植物学也有应用。4.荧光显微镜荧光显微镜是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。荧光显微镜广泛应用于生物,医学等领域。荧光显微镜一般分为透射和落射式两种类型。透射式:激发光来自被检物体的下方,聚光镜为暗视野聚光镜,使激发光不进入物镜,而使荧光进入物镜。它在低倍情况下明亮,而高倍则暗,在油浸和调中时,较难操作,尤以低倍的照明范围难于确定,但能得到很暗的视野背景。透射式不使用于非透明的被检物体。落射式:透射式目前几乎被淘汰,新型的荧光显微镜多为落射式,光源来自被检物体的上方,在光路中具有分光镜,所以对透明和不透明的被检物体都适用。由于物镜起了聚光镜的作用,不仅便于操作,而且从低倍到高倍,可以实现整个视场的均匀照明。目前许多新兴生物研究领域应用到荧光显微镜,如基因原位杂交(FISH)等等。5.相衬显微镜(Phasecontrastmicroscope)在光学显微镜的发展过程中,相衬镜检术的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时很难观察到标本。 相衬显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现象,将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差,即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。这大大便利了活体细胞的观察,因此相衬镜检法广泛应用于倒置显微镜中。6.微分干涉对比显微镜(DifferentialinterferencecontrastDIC)微分干涉对比镜检术出现于60年代,它不仅能观察无色透明的物体,而且图象呈现出浮雕壮的立体感,并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点,观察效果更为逼真。微分干涉对比镜检术是利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束。分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等,光束分别在距离很近的两点上通过被检物体,在相位上略有差别。由于两光束的裂距极小,而不出现重影现象,使图象呈现出立体的三维感觉。7.倒置显微镜(Invertedmicroscope)倒置显微镜是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微观察。由于上述样品特点的限制,被检物体均放置在培养皿(或培养瓶)中,这样就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。因此,物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,故称为"倒置显微镜"。由于工作距离的限制,倒置显微镜物镜的最大放大率为60X。一般研究用倒置显微镜都配置有4X、10X、20X、及40X相差物镜,因为倒置显微镜多用于无色透明的活体观察。如果用户有特殊需要,也可以选配其它附件,用来完成微分干涉、荧光及简易偏光等观察。目见倒置显微镜广泛应用于patch-clamp,transgeneICSI等领域。8.数码显微镜数码显微镜是以摄像头(即电视摄像靶或电荷耦合器)作为接收元件的显微镜。在显微镜的实像面处装入摄像头取代人眼作为接收器,通过这种光电器件把光学图像转换成电信号的图像,然后对之进行尺寸检测、颗粒计数等工作。这类显微镜可以与计算机联用,这便于实现检测和信息处理的自动化,多应用于需要进行大量繁琐检测工作的场合。目前出现一种便携式数码显微镜照相机,简称数微相机。它将显微镜和数码相机相结合,以同时达到显微镜观察(Micro preview)和显微摄影(Micro photography)的要求。最高物镜显微倍率可达150X,机身小巧,便于携带,自备光源,可运用于多种场合。可直接与计算机、打印机(不需要电脑)、电视(不需要电脑)联用。

  • 光学显微镜物镜基础知识

    物镜((objective)对于传统显微镜来说应算最贵重的部件。一只高性能物镜的价格占这类显微镜本身的1/3-1/2。因为显微镜的最基本性能—成像和分辨本领决定于物镜。为了消除成像过程中的球面差和色差、物镜的透镜组由单透镜发展为许多层次的复合透镜组.由3-4透镜已增加到7-9片透镜或透镜复合体。物镜的镜体上都刻有物镜的性能,物镜的镜口率、放大倍数以及特殊物镜的标记字样。 消色差物镜的外壳上刻有英文,德文,法文Achromat字样或俄文AXP字样。这种物镜能够消除光谱中的红光和青光所造成的色差而不能消除其他色光形成的色差。 复消色差物镜是性能最好,价格最贵的物镜.其外壳上刻有英、德、法文Apochromat 字样或俄文字样。其透镜质料好,透镜组层次最多,组合得精确能够消除红光、黄光、蓝光造成的色差。这种物镜配用补偿目镜时能够发挥光学显微镜的最高性能。 荧石物镜外壳刻有英、德、法文Fluormat(或Flur)字样.这是能透过紫外光的专用于荧光显微镜的物镜。如果当普通物镜使用,则分辨率太低. 平像场系列物镜刻有Planochromat字样。Opton公司出售的有平像场荧石消色差物镜(Plan-Neofluor),平像场复消色差物镜(Plan-Achromat),平像场荧石消色差偏光物镜(Plan-Neofluor pol)等。 相差显微镜必须配备相差物镜.这种物镜刻有英、德、法文Pha或俄文0字样。单色物镜(monochromat)是全部透镜用融熔水晶制成的贵重物镜。这种物镜是透过紫外线的专用于紫外光干涉显微镜或用于紫外光显微分光光度计上。如果这种物镜不能到手时,可用复消色差物镜代替。 带有可变光栏的物镜的镜体上装有螺纹转动圈。转动圈的标号可移动在0.5-1.0之间.这种物镜是适用于暗视野显微镜.倒置显微镜的物镜是长焦距物镜。其他种类的物镜焦距短要求盖玻片的厚度不能过大(ti I 7pm)。倒置显微镜的物镜可以观察培养瓶壁上的贴壁生长细胞。

  • 【资料】相差显微镜原理、显微镜安装调试与使用

    【资料】相差显微镜原理、显微镜安装调试与使用

    相差显微镜  •1940年荷兰学者F.Zernik巧妙地应用光的衍射和干涉原理提高标本细节的折光率的差异,创造了相差显微镜(phase contrast microscope)。从此非常简便而有效地观察体外培养细胞的生长过程,记录细胞分裂周期中的染色体的移动。近年来细胞学家和生物学家所拍摄的生活细胞生长、分裂过程的非常出色的记录影片,都是利用相差显微镜的优秀性能完成的。因此相差显微镜、倒置相差显微镜已成为细胞学、细菌学、寄生虫学、免疫学和海洋生物学的实验室必备仪器。  •相差显微镜是用于观察组织培养中活细胞形态结构的。活细胞无色透明,一般显微镜下不易分辨细胞轮廓及其结构。  •相差显微镜的特点是将活细胞不同厚度及细胞内各种结构对光产生的不同折射作用,转换为光密度差异(明暗差),使镜下结构反差明显,影像清楚。  相差显微镜的优点http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161815_278026_2961690_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161816_278027_2961690_3.jpg  相差显微镜成像光路http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161817_278028_2961690_3.jpg  相差显微镜的部件  •相差显微镜的关键性部件为位相板(phase plate)、环状光阑(anular diaphragm)和中心调节望远目镜(centring telescope)。  环状光阑  •环状光阑是在玻璃片上喷涂金属薄膜借以挡光,只留下环形透光窄缝的光阑。它能使来自反光镜的直射光只能从环状部分通过,形成一个空心圆筒状的光柱,经聚光器并照射到标本以后,就产生两部分光,一部分是直射光,另一部分是经过标本后产生的衍射光,这两部分光经物镜内相板的作用而改变了光的相位和振幅。  •在相差聚光器下面装有一个转盘,盘上镶有宽狭不同的环状光阑,在不同光阑边上刻有10×、 20×,40×等字样,这表示当用不同放大倍数的物镜时,必须配合相应的环状光阑。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102161819_278029_2961690_3.jpg  相板  •相板安装在物镜的后焦平面上,带有相板的物镜称为相差物镜(蔡司厂用红色“PH”表示)。  •相板上有一灰色的环状圈,称为共轭面。面上涂有吸光物质,直射光从这部分通过,并吸收了约80%的直射光,以降低它的透光度。在共轭面的内,外侧部分称为补偿面,面上涂有减速速物质,使衍射光的相们发生改变,因此这两者相结合就能分别改变直射光和衍射光的振幅和相位。  相板分类  •A型位相板 凡是共轭面即环形相板上涂有吸收层的相板均为A型。A型相板又分为二型:  •(1)A十型位相板:这是在共扼面上既涂吸收层又涂有电解质的相板。这种相板能吸收其共轭面的60一90%直射光,而透过其20一40%。市场出售的位相板型号分类时,都以数字表示其透射率和推迟位相的数据(图10-12,表10—1)。  •(2)A一型位相板是共扼面上涂有吸收层。同时在补偿面上涂有电解质。  •B型位相板凡是在补偿面上涂有吸收层而在共轭面上有电解质的位相板,均属此类。  •(1)B十型位相板是在补偿面上涂有吸收层共轭面上有电解质的相板。  •(2)B一型位相板是在补偿面上涂有吸收层加电解质的相板。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281441_279896_2961690_3.jpg  对焦望远目镜  对焦望远目镜(centring telescope)又叫合轴望远镜或校正望远目镜。这是一种场透镜和接目透镜之间的距离可变的目镜。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281443_279897_2961690_3.jpg  相差显微镜的成像原理  •从波动光学的角度可把物体细节即生物标本的细节,看成是成像光束的障碍物。它可以改变相干光束的振幅、位相和光强分布。  •从变换光学的频谱转换角度,可把物体细节看成是不同空间信息的集合物。它可改变光信息的空间频谱。  •在显微镜下标本细节的光密物质、光疏物质和无结构的介质的折射率不同,因此相干光束通过光密物质(t)时,必然产生衍射,使光程延长,推迟位相(图10—21P)。这时衍射光(P)和直射光(S)之间的位相出现d/λ差异。但是标本的吸收程度近似,所以振幅未变即光强末变。这种直射光和衍射光到达像平面重叠成像时,其合成波的振幅与通过无结构介质的直射光的振幅几乎近似,即其光强相似。这就是未染标本在普通显微镜下反差很小的基本原因(图10—22)。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281447_279898_2961690_3.jpg  暗相差  •在被检物的折射率大于介质的情况下,透过共轭面的直射光被吸收80%后亮度变暗,衍射光在通过被检物后其相位己推迟1/4波长,再在位相板的补偿面的电解质又推迟了1/4波长。由于这两束光的相位不同(差1/2波长),其合成波的振幅为两者之差,所以光线就更加暗。  •与此同时,通过无结构介质的衍射光的光程只被补偿面的电介质推迟l/4波长。这就造成通过光密物质的光强远比通过无结构介质(背景)的光强减衰得多。相差显微镜下标本细节的反差加大丁。光密结构比背景暗得多了。这种反差叫暗反差也叫正反差。  明相差  •如果相板的共轭面上涂的是减速物质,推迟直射光1/4波长,而补偿面涂的是吸光物质,结果就是直射光与衍射光的相位相同(衍射光通过物体时相位推迟了1/4波长),其合成波的振幅为两者之和,结果物体是明亮的而背景是暗的,这称为明相差或负相差。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281450_279899_2961690_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2011/02/201102281450_279900_2961690_3.jpg  相差显微镜实验方法和步骤  •安放相差装置取下原有聚光器和物镜,分别安上相差聚光器和相差物镜,并将转盘转到“0”标记的位置。用10×相差物镜调光。  •调节光源。  •合轴调节取下原有目镜,换上合轴调整望远镜。上下移动望远镜筒,至能看清物镜中的相板环为止。  •放回目镜取下合轴调整望远镜,放回目镜即可进行观察。更换不同放大倍数的相差物镜时,每次都要按上述方法重新调节。

  • 【资料】光学显微镜的分类

    光学显微镜有多种分类方法:按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜;按图像是否有立体感可分为立体视觉和非立体视觉显微镜;按观察对像可分为生物和金相显微镜等;按光学原理可分为偏光、相衬和微差干涉对比显微镜等;按光源类型可分为普通光、荧光、紫外光、红外光和激光显微镜等;按接收器类型可分为目视、数码(摄像)显微镜等。常用的显微镜有双目体视显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、荧光显微镜等。1.[b]双目体视显微镜[/b]双目体视显微镜又称"实体显微镜"或"解剖镜",是一种具有正象立体感地目视仪器。在生物、医学领域广泛用于切片操作和显微外科手术;在工业中用于微小零件和集成电路的观测、装配、检查等工作。它利用双通道光路,双目镜筒中的左右两光束不是平行,而是具有一定的夹角--体视角(一般为12度--15度),为左右两眼提供一个具有立体感的图像。它实质上是两个单镜筒显微镜并列放置,两个镜筒的光轴构成相当于人们用双目观察一个物体时所形成的视角,以此形成三维空间的立体视觉图像。目前体视镜的光学结构是:由一个共用的初级物镜,对物体成象后的两光束被两组中间物镜----变焦镜分开,并成一体视角再经各自的目镜成象,它的倍率变化是由改变中间镜组之间的距离而获得的,因此又称为"连续变倍体视显微镜"(Zoom-stereomicroscope)。随着应用的要求,目前体视镜可选配丰富的选购附件,如荧光,照相,摄象,冷光源等等。2.[b]金相显微镜[/b]金相显微镜是专门用于观察金属和矿物等不透明物体金相组织的显微镜。这些不透明物体无法在普通的透射光显微镜中观察,故金相和普通显微镜的主要差别在于前者以反射光,而后者以透射光照明。在金相显微镜中照明光束从物镜方向射到被观察物体表面,被物面反射后再返回物镜成像。这种反射照明方式也广泛用于集成电路硅片的检测工作。3.[b]偏光显微镜[/b](Polarizingmicroscope)偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。将普通光改变为偏振光进行镜检的方法,以鉴别某一物质是单折射(各向同行)或双折射性(各向异性)。双折射性是晶体的基本特性。因此,偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域,在生物学和植物学也有应用。4.[b]荧光显微镜[/b]荧光显微镜是用短波长的光线照射用荧光素染色过的被检物体,使之受激发后而产生长波长的荧光,然后观察。荧光显微镜广泛应用于生物,医学等领域。荧光显微镜一般分为透射和落射式两种类型。透射式:激发光来自被检物体的下方,聚光镜为暗视野聚光镜,使激发光不进入物镜,而使荧光进入物镜。它在低倍情况下明亮,而高倍则暗,在油浸和调中时,较难操作,尤以低倍的照明范围难于确定,但能得到很暗的视野背景。透射式不使用于非透明的被检物体。落射式:透射式目前几乎被淘汰,新型的荧光显微镜多为落射式,光源来自被检物体的上方,在光路中具有分光镜,所以对透明和不透明的被检物体都适用。由于物镜起了聚光镜的作用,不仅便于操作,而且从低倍到高倍,可以实现整个视场的均匀照明。目前许多新兴生物研究领域应用到荧光显微镜,如基因原位杂交(FISH)等等。5.[b]相衬显微镜[/b](Phasecontrastmicroscope)在光学显微镜的发展过程中,相衬镜检术的发明成功,是近代显微镜技术中的重要成就。我们知道,人眼只能区分光波的波长(颜色)和振幅(亮度),对于无色通明的生物标本,当光线通过时,波长和振幅变化不大,在明场观察时很难观察到标本。 相衬显微镜利用被检物体的光程之差进行镜检,也就是有效地利用光的干涉现象,将人眼不可分辨的相位差变为可分辨的振幅差,即使是无色透明的物质也可成为清晰可见。这大大便利了活体细胞的观察,因此相衬镜检法广泛应用于倒置显微镜中。6.[b]微分干涉对比显微镜[/b](DifferentialinterferencecontrastDIC)微分干涉对比镜检术出现于60年代,它不仅能观察无色透明的物体,而且图象呈现出浮雕壮的立体感,并具有相衬镜检术所不能达到的某些优点,观察效果更为逼真。微分干涉对比镜检术是利用特制的渥拉斯顿棱镜来分解光束。分裂出来的光束的振动方向相互垂直且强度相等,光束分别在距离很近的两点上通过被检物体,在相位上略有差别。由于两光束的裂距极小,而不出现重影现象,使图象呈现出立体的三维感觉。7.[b]倒置显微镜[/b](Invertedmicroscope)倒置显微镜是为了适应生物学、医学等领域中的组织培养、细胞离体培养、浮游生物、环境保护、食品检验等显微观察。由于上述样品特点的限制,被检物体均放置在培养皿(或培养瓶)中,这样就要求倒置显微镜的物镜和聚光镜的工作距离很长,能直接对培养皿中的被检物体进行显微观察和研究。因此,物镜、聚光镜和光源的位置都颠倒过来,故称为"倒置显微镜"。由于工作距离的限制,倒置显微镜物镜的最大放大率为60X。一般研究用倒置显微镜都配置有4X、10X、20X、及40X相差物镜,因为倒置显微镜多用于无色透明的活体观察。如果用户有特殊需要,也可以选配其它附件,用来完成微分干涉、荧光及简易偏光等观察。目见倒置显微镜广泛应用于patch-clamp,transgeneICSI等领域。8.[b]数码显微镜[/b]数码显微镜是以摄像头(即电视摄像靶或电荷耦合器)作为接收元件的显微镜。在显微镜的实像面处装入摄像头取代人眼作为接收器,通过这种光电器件把光学图像转换成电信号的图像,然后对之进行尺寸检测、颗粒计数等工作。这类显微镜可以与计算机联用,这便于实现检测和信息处理的自动化,多应用于需要进行大量繁琐检测工作的场合。目前出现一种便携式数码显微镜照相机,简称数微相机。它将显微镜和数码相机相结合,以同时达到显微镜观察(Micro preview)和显微摄影(Micro photography)的要求。最高物镜显微倍率可达150X,机身小巧,便于携带,自备光源,可运用于多种场合。可直接与计算机、打印机(不需要电脑)、电视(不需要电脑)联用。

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