包埋机

常用包埋剂及配方目前在电镜技术上使用的包埋剂种类颇多，但普遍使用的是环氧树脂，在免疫和细胞化学技术中还会使用到丙烯酸树脂。 环氧树脂（epoxy resin） 环氧树脂是一类具有末端环氧基的甘油多聚酯。它的分子中有两种反应基团，即环氧基团（epoxide group）和氢氧基团（hydroxyl group）。其末端基团易与含有活性氢原子的化合物如胺类（如DMP-30，DMAE，乙二胺等，又称催化剂或加速剂）反应，使单体首尾相连接形成长链聚合物。此外，在单体中的氢氧基团能与有机酸酐（如MNA，DDSA，九烷基琥珀酸酐，NSA等，又称硬化剂或固化剂）结合，使单体分子形成横桥。所以，环氧树脂以单体渗入细胞组织，而这种单体在一定的温度条件下，在硬化剂和加速剂作用下，就形成一个非常耐溶剂和耐化学腐蚀的交链稳定的三维空间聚合体。为了改善聚合体（包埋块）的切割性能，还会在环氧树脂包埋配方中加入增塑剂，以调节包埋块的韧性。 环氧树脂包埋剂对细胞微细结构有较好的保存性能，聚合后体积缩小较少，而且在真空中能经受较长时间的轰击。但它的操作不太方便，反差较弱。 环氧树脂的型号较多，常用Epon812，Spurr树脂（ERL-4206）等，现介绍最常用的两种环氧树脂 Epon812包埋剂 Epon812是一种进口树脂，它是一种长链的脂肪族环氧化合物，是目前国际上普遍采用的一种优良包埋剂，粘度为150-210cP。该包埋剂的配制方法甚多，但一般都按1961年Luft提出的配方进行。其配方如下： A液：Epon812 62ml DDSA 100ml B液：Epon812 100ml MNA 89ml上述配方若改变A液和B液的比例则可调节聚合块硬度，A液多则软，B液多则硬。通常冬天使用$A:B=2:8$；夏天使用$A:B=1:9$，可视组织的硬度和气候不同选择其比例。配制时可先分别配制A液和B液，然后将A液和B液按一定比例混合后，再加入$1\%-2\%$的加速剂，边加边搅拌，使其充分混合。为了方便操作，也有人将Epon812，DDSA，MNA三种成分按一定比例直接混合使用。Epon812的聚合温度为：37℃过夜，60℃24-36小时。 根据南方地区的气候条件，可用下列配方：Epon812 51ml DDSA 12ml MNA 37ml DMP-30 1.8-2ml聚合条件&室温过夜，60℃8-12hDDSA是十二烷基琥珀酸酐（Dodecenylsuccinic anhydride）的简称。它是一种可得到软性包埋块的长链脂肪族分子。 MNA是甲基内次甲基二甲酸酐（Methyl Nadic anhydride）的简称，又称六甲酸酐，它有两个链环，能获得较硬的包埋块。 DMP-30是2，4，6-三（二甲基氨基甲基）苯酚（2，4，6-Tris（dimethylaminomethyl）phenol）的简称。它能加速固化过程。 Spurr树脂（ERL-4206包埋剂） 这是1969年由Spurr推荐使用的包埋剂，所以也称Spurr树脂。它含有两个环氧基，是一种低粘度的环氧树脂。由于具有粘度低的特点，所以近年来一些实验室已开始使用它。其配方可按下表中各种成分的比例，即可获得不同性能的包埋块。其配方如下： Spurr树脂包埋剂配方 成分（g）标准硬度 硬 软 快速聚合配方 缓慢聚合配方 VCD 10.0 10.0 10.0 10.0 10.0 DER-736 6.0 4.0 7.0 6.0 6.0 NSA 26.0 26.0 26.0 26.0 26.0 DMAE 0.4 0.4 0.4 1.0 0.2 聚合时间70℃（h） 8 8 8 3 16 混合时间（天） 3-4 3-4 3-4 2 7 VCD是二氧化乙烯环己烯（vinylcyclohexene dioxide）的简称。它的分子小，粘度低，聚合块硬度大。 DER-736是diglycidyl ether of a polypropylene glycol的简称。它属于脂肪族，分子小，有低粘度性质，可调节包埋块的硬度。 NSA是nonenylsuccinic anhydride的简称。它是一种特殊的硬化剂，应避免暴露在潮湿的大气中，以防环氧或酐链的水解作用。 DMAE是dimethylaminoethanol的简称。它是催化剂，增加催化剂的比例，可以缩短聚合的时间。 Spurr树脂最终硬度可用DER-736的量来调节。配制时，先把前三种成分混合后，最后才加入DMAE，但从开始到混合完成，达到淡黄色状态需3-7天。此包埋剂在$70\,^{\circ}\mathrm{C}$，一般8小时即可完全聚合，用陈旧的包埋剂时，则聚合时间会减少。因Spurr树脂嗜氧，聚合时不要加盖。包埋剂最好是用新鲜配制，但为了方便，可预先配制好保存在低温和防潮的环境中。Spurr树脂与Epon812树脂相比粘度低，操作方便，但毒性比Epon812树脂大，所以操作时要更加小心，此外，Spurr树脂各成分间的分子量大小差异较大，在组织中的渗透速度不一，容易个别成分造成渗透不均，而导致局部聚合不完全，染色效果不佳。 丙烯酸树脂（acrylic resin） 丙烯酸树脂无色透明的，由丙烯酸衍生物聚合而成。丙烯酸单体粘度低，可以在低温下渗透及聚合，因而能满足免疫和细胞化学技术低温操作的要求。其聚合方式有两种，热聚合和紫外线照射聚合。但它对脂类等成分的抽提比环氧树脂严重，为此它也需要在较低的温度下使用才可能减少抽提作用。此外，聚合前后丙烯酸树脂的体积变化较环氧树脂大（体积大约收缩$10-20\%$），并且它在电子束的照射下稳定性比环氧树脂低，放热的聚合过程可引起组织细胞结构的损伤，致敏性也比环氧树脂强，使用时要小心防护。一般来说，除了免疫和细胞化学技术外，超微结构的研究并不推荐使用它。在电镜中使用较多的丙烯酸树脂有伦敦白胶（LR White）和Lowicryl系 列的树脂。 伦敦白胶（LR White） 伦敦白胶含有7种不同的丙烯酸单体和2种增塑剂，引发剂是BPO（dibenzoyl peroxide），加速剂为N，N-dimethyl paratoluidine，但具体的配方和成分没有报道。它的粘度低，渗透能力强，可用于较大的组织块或致密的组织，由于它有一定的亲水性，方便水性染料进入，染色效果佳，使用非常方便，通常买回来的是已经混合好的试剂，它的有效期仅为12个月。伦敦白胶可以微溶于水，因而可以采用部分脱水方案，但不能使用丙酮作为脱水剂。氧气会抑制聚合反应的进行，因而聚合时要在模块中注满包埋剂并盖紧盖子。为了方便运输和储存，也有未加BPO的伦敦白胶（uncatalysed LR White）出售，这种试剂需要加入催化剂（9.9g催化剂/500gLR White）充分搅拌并室温放置24小时以上才能使用。Lowicryl系列包埋剂 Lowicryl系列包埋剂是专为低温包埋设计的包埋剂。它有两种类型：一种是极性树脂，K4M和K11M；另一种是非极性树脂，HM20和HM23。极性树脂亲水，使样品保存在一个水性的环境中从而较少蛋白质变性，且染色的效果较好。而非极性树脂的切割性能比较好。两种树脂通常都在隔绝氧气的情况下低温紫外线照射聚合。Lowicryl系列包埋剂全部以试剂盒的形式出售，有详细的说明书提供参考。

请问 包埋做什么用？。如果看断面的扫描，用包埋剂来封吗？

向大家请教几个问题，本人刚接触超薄切片，要把一种常温下是脆性固体的材料包埋做超薄切片，现在关于包埋剂的选择有些困难，因为做包埋块有几个问题：1）材料本身很脆，常温下是块状固体，直接切肯定会碎掉，必须要包埋，但是担心粉末状态下与树脂包埋剂混合会混合得不均匀；2）如果液相状态下混合，材料本身需要加热到290~300℃才会液化，这么高温的液体与包埋剂混合，不知道哪种包埋剂会承受；3）也在网上查了一些，像M-Bond 610胶，G1胶貌似都可以，但是关于这两种包埋剂的一些性能和具体适用介绍很少或是不太详细，我本人刚接触这些东西，实在是菜鸟，想请教一下这方面比较熟悉的朋友们，大家能不能给我指点一下，先谢谢了！

微胶囊包埋技术是近些年发展起来的一项新技术，广泛用于纺织、香料、化妆品、印染、食品等工业部门。其原理就是将固体、液体或气体物料包埋在以微米计的微型胶囊中，在一定的条件下控制被包埋的物料预期释放出来。通过这种包埋和释放过程，一方面可以在未释放前保护物料，还可以通过释放方式、时间、速度和量的控制使物料发挥充分功能。 由于微胶囊化技术的独特性能优势，目前已广泛运用于各行各业，食品领域，其常用于包埋食品工业中的活性成分，能有效稳定包合物物化性质，减少氧化、钝化光敏性及热敏性，降低挥发性。化工领域，微胶囊化技术可用于降低客体分子的刺激性、减缓其释放速率，如降低洗衣粉的刺激性，延长空气清新剂香味持续时间等，与我们的生活息息相关。[b][color=red]为大家带来以下详细的微胶囊包埋技术的行业应用文章。敬请关注：[/color][/b]（一）微胶囊包埋技术及其在食品中的应用（二）微胶囊包埋技术在保健品中的应用（三）微胶囊包埋技术在食品包装中的应用（四）微胶囊包埋技术在益生菌中的应用（五）微胶囊包埋技术在油脂中的应用（六）微胶囊包埋机在调味品中的应用（七）微胶囊包埋技术在产品研发及生产中的应用（八）微胶囊包埋技术在食品中的应用（九）微胶囊包埋技术在药品生产过程中的应用 ……

想把试剂包埋在一种外壳当中，使用其反应时缓慢释放出来，请问有没有什么好的包埋剂？？？

大家新年快乐!有个问题想问问。用SPURR树脂包埋植物材料的时候,发现包埋块靠下一小薄层有些脆,但上层就很好.是吸水的原因么?包埋过程中需要除湿机除湿吗?需要带口罩防水气吗?

在定量过程中，常常遇到大峰包住小峰的情况，即包埋峰，那么如何使用GC-MS来定量包埋峰呢？欢迎大家给点建议

请问用于做植物材料透射电镜的树脂包埋块所用的硅胶包埋板哪里有卖？

请教各位高手，怎么去除包埋过程中的气泡问题？我用的是618环氧树脂，固化剂是乙二胺！说明书上说加《8％的固化剂，但是固化后有很多气泡，不知为何！请各位大侠指点一二，小弟不胜感激！！

双歧菌种被淀粉包埋，将菌种按照4789.34溶解后，用显微镜查看样液中有成团的现象，就是淀粉粘连在一起导致菌种没有完全分散，怎样破解淀粉包埋的这种情况呢。之前使用α-淀粉酶将样液进行酶解1h，效果不是很显著

用环氧树脂包埋PAN基碳纤维原丝和碳纤维时，如何配比树脂比例，已经包埋条件？

包埋盒五大使用方法1.取材时将组织块放于写有该组织编号的一次性包埋盒中,上盖(不锈钢)脱水盒盖,放入脱水篮中进入脱水机或手工脱水。 2.将包埋底模存于烤箱的下层(或单独的一层)。 3.包埋时将脱好的组织连同脱水篮也放在内有包埋盒底模的同一烤箱内。打开脱水盒盖,将脱水盒盖放在一边,根据组织块大小选取包埋底模,用镊子在酒精灯上加热,夹取组织块放于底模内,上覆装组织脱水的写有该组织块编号的一次性包埋盒,倾倒石蜡少许,以不溢出为宜,少置片刻。 4.把冰箱冷冻室内的冰盒取出,将包埋好的蜡块,放于冰盒冷冻片刻约5min10min,冬季时间短,夏季时间长些,将蜡块从底模中取出,收集其余蜡块,将包埋盒两边的多余蜡除去,即可切片。 5.包埋盒底模及脱水盒盖分类整理好重新放入烤箱备用,本科把脱水盒盖装在脱水篮中,在下一次用之前用热水将蜡冲去即可再用。 通过这种方法不仅利于蜡块的保存,也节约了石蜡。

谁有生物包埋剂 Spurr树脂使用说明书？希望共享一份，谢谢

大家好！请问北京哪里可以做树脂包埋切片？我有两个薄膜样品，想做一下实验。多谢！

我是新手请问包埋用什么类型的树脂？（最好是没气泡，可以打磨）谢谢

这类的包埋剂有专门销售的吗？还是需要自己配制的？

要观察纤维束的截面,用树脂包埋,然后切片,请问上海哪儿有条件可以做?

大家好，我们实验室需要对固体催化剂（主要成分是氧化铝）、分子筛进行超薄切片，请对这种金属氧化物材料选用哪种包埋剂、环氧树脂为好呢!还没有用过，请各位朋友给予指点，最好能给出厂家、牌号等信息，谢谢！！

环氧树脂包埋测试样品对电镜有污染吗？有的话具体有哪些，帮忙解答一下谢谢！

求助，想观察纤维的横截面，谁知道纤维的包埋怎么做???谢谢！！

请教含氧化铁的高分子材料用什么树脂包埋？如果高分子材料中含银，又该采用何种方法包埋？

有些郁闷阿，最近的一个样品竟然测出了Cl。基本信息是这样的 ：粘土，十六烷基三甲基干法改性 包埋制样后上机测试 PS：我想了解一下包埋制样的具体过程，是不是有什么新东西填进去阿？盼望回复，谢谢各位！

【序号】： 1002-0306(2004)05-0099-02【作者】： 庄桂东, 朱玉强, 何熹, 马文全, 迟玉森, 【题名】：微胶囊包埋技术在速溶苹果粉的研制中的应用 【期刊】： 食品工业科技【年、卷、期】：2004年 第05期【全文链接】：无急需该资料，因为是新手没有钱，否则就悬赏了。多谢大侠们了！

各位老师，你们好。我用高能球磨法制备了TiAlNb粉末，粒度在10微以下，现在拍一下透射电镜，然后测试方说要包埋切一下才行，我想请教一下金刚石刀能不能切啊，因为他们没有做过这种粉末，他们也不知道，各位老师请解答一下，谢谢了感谢各位老师

要在学校分校区新建一个电镜室，所以要买很多的耗材和工具，但是本人新手绝大多数的东西都不知道从哪里买请大家帮帮我，帮我提供一下下面这些试剂或者工具的生产厂家以及在广州地区的代理（附上我查到的信息）：锇酸（EMS SIGMA）戊二醛(EMS SIGMA)多聚甲醛(EMS SIGMA)环氧丙烷(EMS SIGMA) 用量很大最好能找到国产的分析纯以上的厂家包埋剂（epon 812）（EMS SIGMA）包埋板火棉胶膜染色用的夹板(英文:Hiraoka staining kit)醋酸双氧铀(EMS SIGMA)柠檬酸铅(EMS SIGMA)磷钨酸(EMS SIGMA)电镜用的尖头镊子（EMS）铜网架（英文：Grid storage box）顺便说下，我们的电镜室主要是以超薄切片和负染为主要方式观察生物样品的。所装的电镜为日本电子1400 配CCD（牌子忘了，因为还没安装）谢谢！

各位老师，同学： 我球磨得到粉末（粉末粒度是微米级的，内部晶粒是纳米的），现想制备粉末的TEM试样，不知如何进行？ 1，国外一般用FIB，但是国内这个设备不常见，而且制样价格昂贵，所以我不打算用。 2，我搜索过这个主题的帖子，有推荐“乙醇超声分散10分钟，然后滴在碳膜或者微栅上的Cu网上”，个人觉得这个针对的是纳米级粉末吧，希望各位老师，同学了解的在此澄清一下。 3，环氧树脂包埋法。我之前有用这个方法做过一次，最后得到的TEM试样，在电镜下没有看见粉末的内部晶粒。所以希望用此法做过TEM试样的老师，同学能够指教。（1）选用哪种环氧树脂 （2）环氧树脂和固化剂的配比是多少（3）粉末如何均匀的与树脂，固化剂混合（4）固化的时间，温度如何（5）如何切片，选用哪种切片机（可以切金属颗粒的，之前又询问过做生物组织切片的老师，他们所用的切片机，遇到金属颗粒容易打刀）（6）此法想要制备成功TEM试样，除此之外，还有需要注意的？ 4，复合电镀包埋。个人感觉此法和树脂包埋的精髓一样，都是将微米级粉末“嵌入”到一个基底中，基底再做常规的TEM试样制备。关于这个一点，我想问一下，这种方法制备的，与树脂包埋相比，哪个制备TEM试样更容易成功？ 欢迎各位老师，同学解答，指教。

[em0808]我要做的是小鼠的卵细胞的电镜，但是我所能获得的卵细胞的数量有限的，不知道有什么技巧可以保证细胞能包埋进去，听说有人做了好几次就没有作出来呀 急哦 谢谢大家了

大家好： 我想利用免疫电镜检测热应激前后小鼠囊胚中热休克蛋白70的定位情况，有两种方案：1.包埋前免疫电镜：胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后，然后清洗，渗透，封闭，分别与一抗和二抗反应，然后再用锇酸固定，脱水，812包埋。2.包埋后的免疫电镜：胚胎经多聚甲醛-戊二醛混合液固定后，脱水，体温包埋剂渗透，包埋，聚合，超薄切片，最后进行免疫染色。 第一种方案：不知道热休克蛋白70的抗原性保存如何？另外，不知道免疫标记效果如何就进行包埋，是不是有点盲目？ 第二种方案 超微结构和抗原性都保存较好，试验重复性好。但是包埋剂比较贵，而且本试验室没有聚合用的低温冰箱和紫外灯。 请各位大虾帮帮我！

我买了中镜科仪的pon812 环氧树脂 ，按其推荐的配方：夏季 MMA 23.5 EPOK 45.6 DDSA 30.9 DMP-30 1.5 冬季 MMA 28.2 EPOK 47.1 DDSA 24.7 DMP-30 1.5冬季和夏季 各配制 100ml混匀后，发现颜色，是暗红色，而非淡黄色。这是我9月30日配制。我一口气配制的冬季和夏季的包埋液。在常温下，用盖子把瓶口拧住。今天（10月5），我回来，浸透包埋的时候，发现配制的冬季和夏季的包埋液，都凝固了。这是什么原因？难道，请教：第一， 配制的颜色，是否正确第二， 冬季和夏季的包埋液，都凝固了，是怎么回事？？难道不能用盖子把瓶口拧住，一定用 封口膜吗？能否推荐一下，你们用的配方，或这个方面的心得。大家如何 配制和保存包埋液的。