场流分离仪

“场流分离”（Field-Flow Fractionation）概念和场流分离技术是凯文.吉蒂斯教授（Prof. C. Giddings，两次获得诺贝尔奖提名）的发明，他也是“场流技术公司/POSTNOVA公司”的创始人之一，这家公司专注场流分离技术的研发和仪器设计生产，并且开发出世界上第一台商业化的场流分离仪，为全球的科学家们提供了非常独特的大分子物质分离技术和技术服务。

场流分离技术是分离技术的一种，它可以与液相色谱（LC）相比。就像液相主要用来分离小分子一样，场流分离主要用来分离大分子或粒子（可称为：粒子色谱）。场流分离技术是一个独特的分离技术，所有场流分离技术都使用相同的基本分离的原则，但采用不同的分离场。根据不同分离场，场流分离技术可分为流动场流分离，沉淀场流分离，热场流分离等。场流分离技术可以提供快捷，温和以及高分辨率的分离，它可以分离任何液体介质中的从1纳米至100微米的颗粒物。积利公司生产的是哪一类场流分离仪呢？

为了更好地向大家介绍我们的产品，我们的技术团队制做了一个简要介绍场流分离仪的原理的文件，请大家参考。简单地说，场流分离就是用一个没有固定相填料的、空心的分离通道盒，代替了HPLC/GPC/SEC的色谱柱，利用垂直于样品流动方向的分离力，对大尺寸/大分子量样品进行分离与分析，测试其尺寸分布与分子量分布。这种方法是有数学理论基础的，这个原理文件简要介绍了相关的数学模型。

首先，祝大家新春快乐、羊年吉祥如意！近期，国内不少大学都对场流分离仪表现出了浓厚兴趣，纷纷表达了采购意向。但是，不少大学的客户向我们询价之后，感觉价格昂贵、一时半会儿没有那么多资金采购，需要等待机会、获得国家资金支持或拨款，才能采购。这是可以理解的。德国postnova的场流仪，相比较液相色谱、凝胶渗透色谱仪器而言，确实贵一些。我想说的是，我觉得，对于大学来说，应该由学校的分析测试中心、至少也应该是某一学院的分析测试中心来采购场流分离仪才合适，至少第一套仪器应该是这样来采购。因为场流分离仪，特别是流动场场流分离仪AF4MT中温型，是一款通用型的分离与分析的仪器，可适用于：高分子材料（水相、有机相）、蛋白质和多糖等生物高分子材料、纳米材料（包含环境领域的天然产物样品），因此，只有大学或学院的分析测试中心，才能够更好地、充分的发挥一套场流分离仪的作用，为更多的老师和同学们提供测试服务，这方面的成功案例很多很多了。通过更换场流分离通道盒（水相：聚酯-透明有机玻璃材质、有机相：不优秀钢材质）、场流分离通道膜（叶城为：spacer）、过滤膜等来实现对各种样品的通用分析。其次，分析中心采购AF4/CF3/TF3这类大型仪器，还可以配合使用自动进样器、馏分收集器、激光粒度仪DLS/SLS或者激光散射检测器MALS/LALS、各种质谱仪器、光谱仪器、核磁NMR和电镜等等，从而实现深度分析、对未知样品的分析。仪器的使用效率更高一些。第三，分析中心采购仪器，就可以实现专人管理、专人操作，有利于保持仪器的最佳运行状态、降低故障率和消耗品的毁损与消耗，节约运行成本。特别是像分离通道内部的过滤膜这类消耗品，一套仪器是需要很多种不同的过滤膜的，以适应不同的样品。但是厂家提供的过滤膜，都是10片一包装的，不拆包也无法拆包卖啊，所以，集中使用就显得最经济实惠了。分析测试中心的人员，一般来说，对色谱类仪器还是比较熟悉的，也更容易较快掌握AF4这类比较复杂的仪器，也就可以更快发挥作用了。第四，分析仪器，特别是色谱类仪器，也像其他设备那样，不怕用、就怕不用。如果一个课题组买了仪器，课题结束了，仪器就不怎么用了，那么不仅是浪费了科研资源，而且仪器还面临着维护越来越困难、故障越来越多的问题，到最后，不到10年，仪器就报废了，真是莫大的损失啊！综上所述，我强烈建议，大学的客户们最好不要由课题组出资金采购，而是统一由学校的分析中心、学院的分析测试中心来组织招标采购，即可以集中资金干大事儿——采购一套配置比较高级的AF4/CF3/TF3仪器，配置上自动进样器、馏分收集器、激光散射检测器、甚至中空纤维流动场HF5等等，就可以为更多老师和同学的科研工作提供强有力支持了。有的学校，由课题组申请经费采购、再组织招标。由于经费有限，不得不跟厂家进行反复讨价还价。厂家或代理商为了维护自身利益，不得不酌减配置，弄到最后，往往成了一个“半拉子“工程：只买了AF4，而没有买DLS/MALS，这样做的结果，就使分析测试变得有些不方便了，因为许多样品无法找到标准样品来做标准曲线！如：环境类样品中的腐殖酸、凝胶微球、抗生素颗粒等等。而且，没有自动进样器和馏分收集器，也影响了分析效率、无法进一步做其它项目的分析测试。最后，希望对场流仪感兴趣的客户，一定要充分调研、甚至是做一下样品测试，再选择仪器厂家。目前，我们可以为有采购意向的客户提供德国原厂分析测试服务。对于一些不太适合邮寄到国外的样品，我们也可以在国内为用户做分析测试，客户可现场观看分析过程、现场亲眼目睹色谱图和数据结果。一旦有合适的测试结果报告，我们也会第一时间上传到这个网页上来，以供大家参考。

近期，我们在与客户交流中、以及与竞争对手交锋中，发现一个现象：有些用户受竞争对手的影响较深，说话中经常带出来一些让人蒙圈的词汇来，呵呵。例如：在北京某高校做交流的时候，客户跟我说：人家W 的场流仪，有两种流道呢。。。， 我都没听懂，就问他：此话怎讲？这个客户说：人家除了AF4，还有HF5呢。我这才明白，所谓流道，原来就是指AF4与HF5 啊。关于HF5这一“过气的网红”，我会专门写一个帖子，论一下其与AF4、EAF4的对比，此处不再赘述，就专门说一说这些专业术语吧。在POSTNOVA的原文资料中，AF4与HF5 是两种不同的场流分离FFF，所以，“流道”这个词，我都不知道从何而来啊，既不准确也不专业，还略微带有点儿不雅，呵呵。准确的称呼，应该是：两种场流分离技术，或者简称：两种场流、2 种 FFF 。此外，“预切膜”也是让人蒙圈的词儿，呵呵。这个词，来自英语：pre-cut membrane，其实应该翻译成：按照（分离通道的）尺寸大小裁剪好的（即：预先切好的）分离通道过滤膜，简称：过滤膜。预切膜这个名字，既有些太通俗了，又忽略了膜的真正的用途：分离通道下面起到过滤作用。而翻译成过滤膜，则不仅仅准确说明了用途，还说明了其具有的消耗品的特点。我介绍一下POSTNOVA这边对于场流仪、特别是AF4的专业术语的翻译吧：1 [b]Cartridge[/b] : 原意为：弹夹，此处翻译成：分离通道盒，最为准确，因为分离通道膜、过滤膜、陶瓷片等，都安装与其内部；2 [b]Spacer[/b]： 应该翻译为：分离通道膜，最为准确；其上开有长条状、两头呈三角形的空的部分，这一空的部分，就是：channel，即：分离通道；所以，翻译成分离通道膜，是最准确的；3 [b]Membrane[/b]：此处，就是指的分离通道下面的过滤膜，因此，准确翻译应该是：分离通道过滤膜，简称：过滤膜。在离心场CF3、热场TF3中，也有Cartridge 和 Spacer、Channel ，但是没有过滤膜membrane，因此，通常情况下，CF3 TF3的耗材要少得多，不需要频繁更换分离通道内的过滤膜耗材。衷心希望大家今后使用准确的专业术语来讨论场流仪技术，尽量不要再用什么“流道”啊、什么“预切膜”这类不专业、甚至冒傻气的词儿，过滤膜如果不预先按尺寸切好了，难道还要让客户自己像裁纸一样切吗？那也太傻了吧，呵呵。

给大家介绍场流分离仪——大分子分离分析的另一种方法[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121350]常温[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121351]中温非对称流动场场流分离仪 [/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121352]离心场[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121353]热场场流分离仪[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121354]重力分离场场流分离仪 [/url]

[color=#333333]场流分离是生物分析领域一项成熟的技术,将流体与外场联合作用于待分离物质,利用分析物某些理化参数上的差异进行分离。非对称流场流是其重要的分支之一,所施加的外力场为垂直方向的液流,分离过程于开放型的通道中在某种组成的载液迁移推动下进行,主要根据分析物与垂直施加的第二维液流之间的相互作用完成分离。非对称流场流在蛋白质、蛋白质复合物、衍生纳米级/微米级粒子、亚细胞单元和聚合物等分离中的应用日益广泛,主要归功于其直接应用于生物样品时可进行无损分离,因此生物分析物如蛋白质可以在生物友好型的环境中完成分离而不改变其构型,也无需使用降解载液。分离设备便于保持无菌状态,分析物可在生物友好的环境中维持其自然状态。该文简要描述了场流分离原理并罗列出其在生物分析领域一些卓越的发展和应用。 [/color]

我们把场流分离技术隆重介绍给大家！FFF技术也是大分子分离与分析的重要手段。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121343]中温非对称流动场场流分离仪[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121344]常温非对称流动场场流分离仪[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121345]新型热场场流分离仪[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121347]离心场场流分离仪[/url][img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=121348]重力分离场场流分离仪[/url]

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[align=center][size=21px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url][/size][size=21px]新技术场流分离[/size][size=21px]技术[/size][/align][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]（[/size][size=16px]FFF[/size][size=16px]）[/size][size=16px]技术是[/size][size=16px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url][/size][size=16px]色谱发展的新技术，德国和美国在[/size][size=16px]这方面已做了好多年的研究，[/size][size=16px]现在已有新产品[/size][size=16px]上市，我[/size][size=16px]国现在[/size][size=16px]也已[/size][size=16px]开始[/size][size=16px]投入这方面的研究。[/size][size=16px] 场流分离技术[/size][size=16px]无需[/size][size=16px]色谱柱，分离是靠一种或几种场作用力[/size][size=16px]来实现[/size][size=16px]。典型的[/size][size=16px]几种场[/size][size=16px]有[/size][size=16px]流体场、[/size][size=16px]重力场、电场、磁场、热场、光场、离心力[/size][size=16px]场[/size][size=16px]、[/size][size=16px]压力场[/size][size=16px]等，[/size][size=16px]也有在某种场中叠加[/size][size=16px]半透膜、分散膜、其它流体[/size][size=16px]等[/size][size=16px]。[/size][size=16px]场流分离[/size][size=16px]技术[/size][size=16px]是一种有效分离大分子化合物、胶体[/size][size=16px]、[/size][size=16px]颗粒的[/size][size=16px]新兴[/size][size=16px]技术，[/size][size=16px]在[/size][size=16px]生物[/size][size=16px]、药物、[/size][size=16px]医学、材料、化工[/size][size=16px]等流域等有应用空间[/size][size=16px]。[/size][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]技术[/size][size=16px]主要用来分离大分子或粒子[/size][size=16px]物质[/size][size=16px]（目前技术是这样，以后随着技术的发展也可能会分离其它类型物质），[/size][size=16px]有[/size][size=16px]人[/size][size=16px]称[/size][size=16px]之[/size][size=16px]为[/size][size=16px]粒子色谱[/size][size=16px]。[/size][size=16px]场流分离[/size][size=16px]分析系统包括输液[/size][size=16px]系统（输液泵，[/size][size=16px]由于系统没有色谱柱，压力不高，输液泵一般需要[/size][size=16px]中压泵即可[/size][size=16px]）、进样[/size][size=16px]系统（进样器）[/size][size=16px]、场分离系统（场分离器）、[/size][size=16px]检测系统（检测器）[/size][size=16px]、数据采用与处理[/size][size=16px]系统[/size][size=16px]等，[/size][size=16px]和[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系[/size][size=16px]统类似度[/size][size=16px]很高，[/size][size=16px]有[/size][size=16px]人[/size][size=16px]称之为场流色谱[/size][size=16px]（以下我们[/size][size=16px]称场流[/size][size=16px]色谱）。[/size][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210191759544595_2705_2369266_3.jpeg[/img][/align][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]技术有的采用一种场，有的同时采用多种场叠加，场作用力有的是水平的，有[/size][size=16px]的是垂直的，有的是有角度直线型的，也有是弧线或特定曲线的等。由于样品本身特性[/size][size=16px]差异[/size][size=16px]，[/size][size=16px]流经[/size][size=16px]场[/size][size=16px]分离器所受到的作用力[/size][size=16px]不同[/size][size=16px]（不管采用的是[/size][size=16px]那种场[/size][size=16px]或那些叠加场）[/size][size=16px]，[/size][size=16px]在场分离器中流动的速度就不同，[/size][size=16px]从而达到分离目的。[/size][align=center][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/10/202210191759546728_6036_2369266_3.jpeg[/img][/align][size=16px] 场流分离[/size][size=16px]技术可以与色谱等其它分离技术联用，一般场分离在系统最后端（[/size][size=16px]目前场分离器[/size][size=16px]耐不了高压），比如分离系统[/size][size=16px]C18[/size][size=16px][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]柱[/size][size=16px]+[/size][size=16px]场分离器，分离效果更佳。[/size][size=16px] 场[/size][size=16px]流[/size][size=16px]分离[/size][size=16px]系统[/size][size=16px]能够[/size][size=16px]和[/size][size=16px]多种[/size][size=16px]检测器，[/size][size=16px]如[/size][size=16px]紫外[/size][size=16px]检测器[/size][size=16px]、[/size][size=16px]红外检测器、[/size][size=16px]荧光[/size][size=16px]检测器[/size][size=16px]、质谱[/size][size=16px]检测器[/size][size=16px]等[/size][size=16px]连接，[/size][size=16px]检测范围[/size][size=16px]较广[/size][size=16px]。[/size][size=16px] 场流色谱[/size][size=16px]的优点：选择性强；分离速度快[/size][size=16px]（一般一分钟或几分钟）[/size][size=16px]；[/size][size=16px]适用[/size][size=16px]范围[/size][size=16px]宽[/size][size=16px]（分子[/size][size=16px]粒径[/size][size=16px]在[/size][font='times new roman'][size=16px]1nm~100[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]μ[/size][/font][font='times new roman'][size=16px]m[/size][/font][size=16px]）[/size][size=16px]；前处理简单[/size][size=16px]（有些样品无需处理，可直接进样）[/size][size=16px]等。[/size][size=16px] 场流[/size][size=16px]分离[/size][size=16px]技术现在还是起步或发展阶段，[/size][size=16px]已[/size][size=16px]在蛋白质[/size][size=16px]、病毒、糖类物质[/size][size=16px]等[/size][size=16px]分离方面发挥[/size][size=16px]很大[/size][size=16px]作用[/size][size=16px]。随着技术的发展，科技的进步，自动化程度的进一步提高[/size][size=16px]，[/size][size=16px]该技术[/size][size=16px]还有[/size][size=16px]很大的提升与[/size][size=16px]完善[/size][size=16px]空间[/size][size=16px]，有望发展成[/size][size=16px]为[/size][size=16px]最具潜力的分离[/size][size=16px]应用[/size][size=16px]技术之一。[/size]

GPC与场流分离仪在用途上很相似，都可以用来分析聚合物、蛋白质、生物大分子材料的分子量分布。因此，在GPC上得到广泛应用的多检测器技术，在场流分离仪FFF上同样可以、并且也已经得到了广泛应用。但是，我看到不少客户，特别是年轻的朋友们，例如：在读的研究生、本科生等等，对多检测器技术不是很了解，于是，就把当年我们做美国viscotek公司的多检测器GPC的销售的时候，外商提供的一个培训文件，贴上来，供大家学习。近日，我看到，我们的帖子：“场流仪与多检测器GPC联用”，得到不少朋友的光顾，更是深感特别有必要好好地、严肃认真地、全面地宣传和普及正确的多检测器技术知识，而不是像有些厂家那样，只宣传对自己有利的内容。因此，viscotek公司的这个文件还是很有价值的。其中，第26页也介绍了分析样品分子量的其它方法，其中之一就是场流分离仪，以及膜渗透压、冰点下降等等方法，这些知识也是非常有帮助。客观公正地说，viscotek公司的产品，设计合理性、特别是检测器连接顺序这方面，是目前商品化的GPC产品中最好的，但是制造工艺显得稍微有些粗糙了。德国postnova公司自己不生产粘度检测器，因此，在多检测器技术上，目前只有21角度、9角度和7角度激光散射检测器，以及其它的浓度型检测器可供客户选择。由于只有激光散射MALS一个定性检测器，因此，MALS 与RI 或者 UV/DAD 检测器在连接顺序上就要简单一些了，不论谁在前谁在后，对分子量分布的影响都不是很明显。但是一旦连上粘度IV检测器，还是应该采取并联的方法的：从GPC柱子或者场流分离通道盒的后面分出两路，浓度型检测器一路，而MALS和IV在另一流路。这样就保证了定性的检测器——MALS和IV的较大的样品池死体积，不会影响到浓度型检测器准确测试样品的分子量分布/尺寸分布的数据！而美国viscotek公司的RI检测器，是可以承受反压/背压的，因此其RI检测器可以串联在MALS检测器之后、IV检测器之前的位置，这是其独有的技术，但仅限于M302型、M305型和M350型GPC上。多检测器技术中的计算方法，例如：马克—霍温克方程、斯托克梅尔—爱因斯坦公式等等，不论是GPC，还是FFF，都是一样的。相关内容，其实在“高分子物理”教材中也有介绍，只不过我们提供的这个讲义，讲得更实用一些。另外，高物教材中没有的ZIMMER-STOCKMAYE 公式，也是计算相对支化的重要公式！这个，在FFF中也适用。文件中有些内容，还是有一定难度的。如果大家有问题，欢迎交流、切磋啊。

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热烈祝贺“上海积利”加盟仪器论坛，热烈祝贺“场流分离仪”版面开通～如果您正在使用积利公司的产品，特别是场流分离仪的产品，欢迎您来版面与积利的版主专家在线交流！＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝关于上海积利科学仪器有限公司＝＝＝＝＝＝＝＝＝＝上海积利科学仪器有限公司，成立于2010年，主要从事聚合物、大分子材料分析测试仪器的销售、研发和生产。目前，公司代理销售德国Postnova分析仪器公司的四种型号的场流分离仪及配套的检测器、馏分收集器等仪器设备，并兼营21角激光散射检测器、多检测器GPC、自动相对粘度仪、GPC色谱柱和标准样品、场流FFF和GPC付费测试服务等。上海积利拥有国内知名的技术专家，负责场流/GPC/激光散射/粘度仪等产品的安装调试、客户培训、分析方法的开发、维修维护等。目前，上海积利已经为中国科学院、中国石化、国家质检总局中国计量科学院、国家海洋局等国家级科研单位提供了多套场流分离仪、激光散射检测器、馏分收集器等产品，获得了用户的一致好评。地址：http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102878/index.asp

想用场流分离方法做蛋白的聚体情况研究，请介绍可以做的地方？

近一段时间以来，我们在实际销售、推广场流分离技术的过程中，发现不少客户只是认识到自己有分离-分析方面的需求，而多检测器GPC/FFF技术可以满足其需求，但是却不知道在多检测器GPC/FFF分析中，计算部分是有理论依据的，而且，这部分内容包括：1）在“[b]仪器分析[/b]”教材中的“液相色谱仪”部分里的“[b]外标曲线法[/b]”；2）“[b]高分子物理[/b]”教材中的“[b]激光散射[/b]”、“[b]特性粘度[/b]”两部分的内容里有计算方法。在这方面，一些从事生物医学与生物大分子领域研究、食品科学研究、环境领域研究的用户，最明显表现出来对这部分知识的缺乏，因此才会在科研实践中出现一些明显的、低级的错误。举个例子说吧，有的客户，用场流分离仪分析纳米颗粒的尺寸与尺寸分布，由于种种原因，没有配置激光散射、特别是动态激光散射粒度仪，与FFF实现在线联用，因此就选择使用外表曲线法进行计算，算出尺寸分布及重均、数均尺寸，这本身是对的，问题是，在使用外标曲线法计算尺寸和分子量的分布时，是必须考虑流速因素的！因为标准样品的曲线，往往是在1ml/min的流速下做出来的，但是，有不少样品，其分析方法中，tip泵的流速是大于或者小于1ml/min的流速的！此时，就不适合用标准曲线来计算尺寸或分子量的峰值数据、尺寸/分子量的分布数据了！又比如，当使用DLS作为检测器，实测样品组分的尺寸及尺寸分布时，尺寸分布、分子量分布，英文叫：polydisperity，简称：Pd，这一数据，熟悉GPC的人都知道，是用重均分子量，除以数均分子量得到的，肯定是大于1的，即使是使用DLS动态光散射检测器，也是一样的道理和数据处理方法。可是有的用户单位，在计算中，却出现了Pd小于1的不合理数据！通常，分子量分布Pd在1与1.05之间的，称为：单分布；Pd在1.05~1.5之间的，称为窄分布；Pd在1.5~2之间的，称为中等分布；Pd在2以上的，称为宽分布。而且，一般来说，超高分子量样品，无论是聚合物还是生物大分子材料，只要分子量到达百万、千万级别的，基本都是宽分布的，极少有超高分子量样品是中等分布、窄分布的，而单分布的则几乎不可能出现。对于纳米、微米材料的尺寸分布，也是同样的。衷心希望广大用户朋友在采购场流仪之前、用FFF分析样品之前，最好能学习一下上述的相关[b]仪器分析[/b]、[b]高分子物理[/b]的知识，不要犯一些低级的错误，给科研工作造成了不利影响。同时，也避免了不良厂家的销售人员的瞎忽悠、欺骗性宣传内容的得逞。第三个常见的问题是，不少用户认为，自己买了动态、静态激光散射、粘度检测器等定性的检测器之后，就不需要做标定了。这个也是值得商榷的，诚然，由于这些定性检测器的使用，使得外标曲线法及标准曲线，不再需要了，但是，对于多检测器GPC/FFF而言，仍然需要标定仪器常数啊！这部分内容就比较复杂了，既有分离部分（GPC柱子、FFF分离通道）的仪器常数，也有检测器的仪器常数；既有定性检测器，如上所述的那几类，的仪器常数，又有定量检测器的仪器常数。在仪器更换流动相的时候、系统使用时间较长了的时候，都需要标定仪器常数的！那种认为无需标定仪器常数的论调，毫无疑问是错误的。我们在本版开篇的时候，就说过，我们办这个论坛的目的之一，就是要做分析仪器行业的良心，为广大客户提供良心品质的仪器硬件、售后服务技术。仪器标定，就是其中最重要一环，没有“之一”，呵呵。这是做出来好的、重复性高的数据的关键所在！！而对商家的技术服务工程师而言，标定仪器，才是最硬性的技术水平的指标呢。因为这个过程，涉及到几乎全部的技术知识，包括：GPC或者FFF的分离原理和分离范围、激光散射和粘度的原理与实际应用、各个定性检测器的硬件使用与维修技术、基础的HPLC/GPC硬件设备的技术知识等等，是综合检验一名技术服务工程师是否称职的一项考核，也是活学活用激光散射理论知识、粘度与流体力学体积等方面知识的时刻啊！呵呵。目前，我们公司在新仪器安装调试的时候，都会给客户提供不同程度的培训，而且通常是逐次提供循序渐进式的培训，让客户操作人员，经过一段时间的学习与实践，逐步掌握FFF/MALS/DLS/IV等设备的使用、维护、检验与标定技术。对于像仪器常数标定这样的复杂的售后服务技术，我们通常是为客户培训一下如何认识到需要标定了、该标定了，然后由我们的工程师来实际操作，随着时间的的推移，再逐渐由客户自己操作这类比较复杂的技术活儿。当然，在质保期之后，是需要客户付费的，呵呵，这也是没办法的事儿啊，请大家理解。

近日，德国postnova分析仪器公司最新推出了EAF4仪器，即：电场流与非对称流动场组合的场流分离仪，既可以是一套新仪器，也可以在现有的AF2000AT/MT型仪器基础之上，升级PN2410电场流模块，同时还需要升级软件、新的电场流+非对称流动场的分离通道。电场流的应用，主要是在生物大分子领域的蛋白质类样品、聚电解质型的聚合物、聚合物纳米-微米颗粒等等。很快，我们这边还会有进一步的资料，我会第一时间发布出来，供大家参考。

介绍场流分离技术，我们在外商提供的与竞争对手的技术对比文件的基础上，将其翻译成中文，并在此上传以供大家了解、学习。让大家认识到什么是真正的非对称流动场场流分离仪AF4。在附件的文件中，几个关键地方请大家注意：1 样品聚集：这是场流分离仪与HPLC/GPC的明显不同之处，而样品聚集技术的好坏，几乎就关系着非对称流动场场流分离仪的使用效果的好坏！竞争对手采用手动调节样品聚集，是非常落后的，也是非常困难的，因为绝大多数用户都不熟悉场流分离技术，更谈不上有什么使用经验了，也没有时间和精力去通过长时间的使用来总结出经验，而往往是通过使用这台仪器来尽快地做出科研成果来。这就要求实现自动化！postnova公司的非对称流动场场流分离仪采用了最先进的自动样品聚集技术，无需操作人员手动调节！2 化学兼容性：postnova产品采用了完全适应多种溶剂体系的仪器，包括：交叉流泵、溶剂输送泵、样品聚集泵、自动进样器、馏分收集器、智能分流泵等等全部硬件设备，都是分成几种溶剂体系的，以适应不同的应用，保证化学兼容性不会影响分析效果和仪器寿命。而竞争对手则完全没有这方面的设计和技术，其交叉流调节器，也不是完全采用了PEEK管路以适应水相应用，因此其中的金属部件在盐水溶液浸泡下会发生腐蚀！而有机相的应用，就更无法真正实现了——采用塑料材质的部分管路，会与有机溶剂发生溶胀，段时间使用也会产生表面张力的不良影响。

高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱顾铭* 欧阳藩 苏志国（中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京，100080）摘要 用国产高速逆流色谱（HSCCC）分离纯化中草药——丹参，选用正己烷-乙醇-水体系，固定相保留率达到78.8%。采用分步洗脱，3个产地丹参各分离得到12个洗脱组分，经高效液相色谱仪和紫外光谱仪检测证明3张HSCCC洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分。HSCCC洗脱图谱不包含非共有峰，并且对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差RSD3%，符合国家标准关于制订指纹图谱方法学考察资料的技术参数。因此，HSCCC作为制订指纹图谱的方法之一具有可行性。关键词 高速逆流色谱（HSCCC），中药指纹图谱，丹参中图分类号 R917仪器TBE-300半制备型高速逆流色谱仪（深圳同田生化技术有限公司，中国）。聚四氟乙烯管缠绕在3个水平轴上形成螺旋管（管直径2.6mm，分离体积300mL），进样圈20mL。高速逆流色谱配备了柱塞式泵（S系列，北京圣益通技术开发有限责任公司，中国），紫外检测仪（8823A，北京新技术应用研究所，中国），记录仪（3057型，四川记录仪器厂，中国）。

高速逆流色谱法分离纯化丹参并尝试制订中药指纹图谱顾铭* 欧阳藩 苏志国（中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室，北京，100080）摘要 用国产高速逆流色谱（HSCCC）分离纯化中草药——丹参，选用正己烷-乙醇-水体系，固定相保留率达到78.8%。采用分步洗脱，3个产地丹参各分离得到12个洗脱组分，经高效液相色谱仪和紫外光谱仪检测证明3张HSCCC洗脱图谱中对应洗脱峰为同一组分。HSCCC洗脱图谱不包含非共有峰，并且对应洗脱峰保留时间的相对标准偏差RSD3%，符合国家标准关于制订指纹图谱方法学考察资料的技术参数。因此，HSCCC作为制订指纹图谱的方法之一具有可行性。关键词 高速逆流色谱（HSCCC），中药指纹图谱，丹参中图分类号 R917仪器TBE-300半制备型高速逆流色谱仪（深圳同田生化技术有限公司，中国）。聚四氟乙烯管缠绕在3个水平轴上形成螺旋管（管直径2.6mm，分离体积300mL），进样圈20mL。高速逆流色谱配备了柱塞式泵（S系列，北京圣益通技术开发有限责任公司，中国），紫外检测仪（8823A，北京新技术应用研究所，中国），记录仪（3057型，四川记录仪器厂，中国）。*通讯作者。Tel: 86-10-82627061；Fax: 86-10-62558174；E-mail: rainbow_gm@sina.com

postnova仪器公司在其网站上设置了一个最新场流仪FFF文献摘要的检索网页，请参看这个链接：http://www.postnova.com/scientific-papers.html。这些论文摘要，涉及到聚合物、生物大分子材料和纳米材料（包括环境领域）等各个方面的应用的最新进展，内容非常丰富，而且经常更新。有兴趣的朋友可以浏览一下。最近这几篇文献，涉及纳米材料、环境与饮用水、生物大分子材料、天然高分子材料等等。

大家好！如题，南京大学环境学院的几位老师，认知能力、接受新事物的能力都比较好，调研充分，不偏听偏信，近日采购了我们的EAF2000MT型电流动场，并配上了21角度激光散射检测器、马尔文的台式机的激光粒度仪（通过PN9020接口板与EAF4实现在线直接联用），以及三个浓度型检测器：RI、UV和FL，同时还配置了postnova的自动进样器（带10毫升大体积进样附件包）和馏分收集器（配用分析型组件），总的配置超过了中山大学分析测试中心，成为了我们在国内配置最齐全的流动场场流仪。中山大学去年买仪器的时候，电场流EF3还未推出，所以没有带上，其余的都有，配置也很强。二维场流仪EAF4，通过在一个分离通道盒内同时施加非对称流动场AF4和电场EF3，从而实现了二位场流分离，因此，对于蛋白质、病毒、抗体等生物类样品，以及腐殖酸、聚电解质类聚合物、聚合物制的纳米材料，都具有更好的、更加强大的分离分析能力。当竞争对手及其用户，还在自鸣得意地显摆“双流道”（就好像HF5是什么高深莫测的技术似的）的时候，我们已经真正开启了二维场流的时代了。今后，还会有客户陆续采购二维场流的。

要用四阀六柱GC分析炼厂气组分，说明上写着用的一根20%的癸二腈填涂在Chromorsob PAW上用于分离CO2，C2-C6烃，想知道癸二腈填充柱的主要应用范围是什么？相当于现在的什么类型的毛细管柱呢，有做炼厂气分析的专家给予解答。谢了

自场流分离仪诞生之时，聚合物、生物大分子材料等溶解型的样品就是场流仪的重要应用领域，并且与凝胶渗透色谱仪产生了一定的竞争关系。国外一些用户先后开发了场流仪FFF与凝胶渗透色谱仪GPC并联和串联使用的方法，取得了不错的效果。非对称流动场AF4、离心场CF3和热场TF3，均可与GPC并联使用，从而对同一样品分别进行FFF与GPC对比分析。通过增加两个或三个多通阀，实现并联流路。FFF与GPC串联，是更加独特的分析方法。例如：GPC与离心场CF3串联，配合激光散射检测器、粘度检测器，可以用GPC先分析样品是否含有支化样品，再将分离后的样品继续进入离心场，对含有支化样品的组分段，进行继续分离，可实现将流体力学体积相同的直链和支化的样品分离开来，并进一步检测绝对分子量、特性粘度等深度结构信息。随着GPC逐渐向多检测器型方向发展，场流仪也随之逐渐与激光散射检测器、四毛细管粘度检测器结合而成为多检测器型场流仪。postnova公司在2012年的德国慕尼黑生化分析仪器展览会上推出了全新的21角度激光散射检测器PN3621，该检测器拥有7度、12度和20度三个小角度，采用了立体取光等众多最先进技术，是目前市场上唯一的拥有7度小角的多角激光散射检测器！了解激光散射检测原理的人都知道，散射取光角度越小，则对大、超大分子量的样品，具有极佳的灵敏度和响应。而场流分离仪恰恰是在超大分子量样品测试方面具有更好的分离分析能力。因此，7度小角与多角外推共同组成了几近完美的在线激光散射检测器，成为了场流仪的“最佳搭档”。需要指出的是，由于一般的示差折光检测器RI样品池不能承受反压/背压，因此，如果在多检测器GPC/多检测器FFF仪器上简单地采用串联方式连接三、四个检测器，那么此时RI检测器需要放在最后的位置上以避免反压，这样就产生了一个问题：多个检测器的样品池的总的死体积已经接近了进样量——分析型仪器多数采用200微升的最大进样量，从而造成了在GPC柱子上/场流分离通道上已经被分离的样品组分，在检测器样品池内再次发生混合，延迟了流出并进入下一个样品池的时间，造成了RI检测器的分子量分布数据变宽，也就是说，分子量分布数据失真。在此情况下，正确方法是：1 采用能承受反压的RI检测器，这个有难度，于是一般采用第二种方法；2 采用多检测器并联技术：激光散射、粘度等定性的检测器单独走一路流路，而示差RI则走另一路流路。并且，从GPC柱子/FFF分离通道流出后的样品，被平均分成两路，平均分配是通过三通阀和相同长度的两根流路管来实现的——即：两路流路的长度相同，则压降相同，于是就被平均分配成两路了。再分别标定各个检测器以准确计算各个数据即可。目前市场上的多检测器GPC中，只有马尔文 VISCOTEK 公司的M270系列多检测器GPC采用了正确的并联方式、M302/305系列GPC采用了可承受反压的RI 检测器，从而实现三检测器按照：激光散射LS-示差RI-粘度IV 的顺序布置。这样做，就不会因为多检测器联用而影响分子量分布数据的真实性。postnova的场流仪在结合多检测器技术的时候，也可以采用并联技术以保证分子量分布数据的准确性，并且为客户提供最佳的技术服务。希望广大用户不要被一些厂家的片面宣传所迷惑，不论是GPC还是场流仪，还是要找一些专业书籍以深入学习相关分析知识，如：高分子物理教材、仪器分析教材等等。我们也会充分利用仪器信息网及论坛这个平台，为大家深入、详细地介绍FFF/GPC及多检测器技术的，也请大家畅所欲言，我们一定有问必答。

德国当地时间10月16日（周一），postnova分析仪器公司在其官网上正式发布了二维场流仪EAF4，链接：[url]http://www.postnova.com/overview_759.html[/url]其原理图如下：[img]http://s2.postnova.com/tl_files/postnova/content/products/images/FFF%20Systems/EAF2000/EAF2000_Principle.PNG[/img]我也上传了英文产品资料介绍，参看附件。EAF4的商品化，不仅巩固了postnova在场流分离技术领域的领先地位，也开启了二维场流的时代。其实，早在两个月前，我们就已经有 EAF4 的配置方案和报价了。现在，完整的产品资料也有了。凡是已经购买了我们 postnova 公司的AF2000AT/MT的用户，均可以方便地升级为EAF4。

[em01] 书 名 高速逆流色谱分离技术及应用 定 价 48元 作 者 曹学丽 开 本 16开 出 版 社 化工出版社 总 页 数 I S B N 7-5025-6518-3 加入日期 2005-4-28 高速逆流色谱(HSCCC)技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术，已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域。本书详细介绍了HSCCC的理论、技术与应用，全书共分15章，第1～4章着重阐述逆流色谱(CCC)基础知识以及HSCCC分离机理、工作方法及溶剂选择策略；第5～8章主要介绍近年来HSCCC发展过程中形成的新技术、新方法，包括分析型高速逆流色谱、双向逆流色谱、pH区带精制逆流色谱、正交轴逆流色谱；第9～15章对逆流色谱技术(主要是HSCCC技术)在各个领域的应用研究成果进行了报道，包括HSCCC在天然植物有效成分、海洋生物活性成分、抗生素的分离中的应用，双水相逆流色谱、离心沉淀色谱在蛋白质等分离中的应用，逆流色谱在手性分离和天然药物工业中的应用。 可供天然产物、中药、药品、食品、化妆品及生物工程等领域的研发人员、技术(分析、分离等)人员使用，也可供高等院校相关专业师生参考。" "第1章逆流色谱基础 11逆流色谱的概念 12逆流色谱的发展 121逆流分溶法 122液滴逆流色谱 123离心分配色谱和螺旋管式逆流色谱 124高速逆流色谱和正交轴逆流色谱 125pH区带精制逆流色谱 126离心沉淀色谱 127螺线形圆盘柱式高速逆流色谱 128逆流色谱的发展趋势 13现代逆流色谱仪器体系 131流体静力学平衡体系 132流体动力学平衡体系 133两种体系的逆流色谱仪的比较 14逆流色谱的基本色谱理论 141溶质的保留 142保留因子和选择性 143分离度 15逆流色谱和液相色谱的比较 151理论塔板数的工作范围 152逆流色谱的制备性分离 153逆流色谱和液相色谱的互补性 参考文献 第2章高速逆流色谱分离机理 21重力场中旋转螺旋管内流体动力分布 22不用旋转密封接头的流通式离心分离仪 23同步行星式运动旋转螺旋管内流体动力分布 24高速逆流色谱的单向流体动力平衡机理 25高速逆流色谱仪器系统 26相分布图 27影响相分布的物理参数 271β值的影响 272溶剂体系的物理特性和分层时间 273温度对分层时间的影响 参考文献 第3章高速逆流色谱工作方法 31溶剂体系的准备 311溶剂体系的选择原则 312几种常用的溶剂体系选择方法 313溶剂体系的平衡 314温度的影响 32柱系统的准备 33样品溶液的准备和进样 34洗脱方式 341梯度洗脱 342双向洗脱 343清空柱子 35检测 351紫外可见光检测器 352蒸发光散射检测器 353傅里叶红外光谱检测器 354薄层色谱检测器 36高速逆流色谱的优点 参考文献 第4章溶剂体系的选择策略 41溶剂体系的物理参数 411Hildebrand溶解度参数 412Snyder吸附溶剂强度参数 413Rohrschneider和Snyder极性参数 414Reichardt极性指数 415HSCCC中应采用的极性指数 42三元溶剂体系 421三元相图 422三元相图的类型 423三元溶剂体系的选择策略 43多元溶剂体系 431Ito方法 432Oka方法 433HBAW方法 434ARIZONA方法 435扩展的“ARIZONA”方法 436乙基乙二醇二甲基醚体系 437丙酮溶剂系列 438Abbott方法 44一种实用性的溶剂选择思路 参考文献

Postnova公司的非对称流动场场流分离仪上配用的分离通道过滤膜，简称：通道膜，主要分为：水相 和 有机相 两大系列。水相，又进一步分为适用于纳米材料、聚合物、蛋白质等三个应用方向的。参看附件的英文文件。此外，分离通道本身也可以分为：有机相、水相 两大类。水相的AF4仪器，也可以用轻质有机相溶剂和有机相的分离通道，但是重质溶剂则不适用于水相的AF4仪器，如：DMF、DMAC、DMSO、甲酸、六氟异丙醇、三氯苯、十氢萘、二甲苯等等。

若在一个 1m 长的色谱柱上测得两组分的分离度为 0.68，若要使它们完全分离，则柱长 (m) 至少应为？　　要有解题过程！

R1/R2=（L1/L2）的平方根。式中：R1 为已知柱长为 L1时某物质对的分离度， L2为将同一物质对分离到需要达到分离度为R2 时所需要的柱长。由于在公式编辑器里编辑的公式无法复制过来，所以请看附件。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=28159]关系公式[/url]