超高压液相色谱柱

超高压液相色谱中使用亚2μm填料,以其高效、快速的特点已成为液相色谱发展的新方向之一。该文在回顾压力对液相色谱行为影响研究的基础上,对超高压液相色谱仪器的进展及相关问题加以系统综述,引文36篇。【作者单位】：南京理工大学工业化学研究所 南京理工大学工业化学研究所 南京理工大学工业化学研究所 大连依利特分析仪器有限公司 中国科学院大连化学物理研究所 江苏南京210094 大连依利特分析仪器有限公司 辽宁大连116023 江苏南京210094 大连依利特分析仪器有限公司 辽宁大连116023 江苏南京210094 辽宁大连116023 中国科学院大连化学物理研究所 辽宁大连116023 辽宁大连116023 华东理工大学 上海200237【关键词】：超高压液相色谱仪 亚2μm填料 柱效 综述【基金】：国家自然科学基金面上基金资助项目(No.20675083)【分类号】：O657.72【DOI】：CNKI:SUN:SPZZ.0.2008-01-020【正文快照】：　　在进行色谱方法建立时,人们力求在尽可能短的分析时间内获得尽可能多的样品信息。因此,高效、快速的色谱分离方法始终是分析学家追求的目标。在液相色谱方法中,采用小粒径的填料通常可以得到更高的柱效及更快的分离速度。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=107372]超高压液相色谱仪的研究进展及超高压引起的相关问题[/url]

1200 安捷伦超高压液相色谱系统好用不？

[color=#444444]今天拆开一根报废的安捷伦超高压液相色谱柱1.8um的，准备倒出就填料，重新填充手性填料。可是我发现这款超高压色谱柱的筛板卡在柱管里，填料用液相高压泵300bar也冲不开，不知道怎么弄出来，如果有高手曾经拆过这种柱子请赐教拆柱方法。不胜感谢。[/color]

[b]请问如何利用超高压液相色谱逐步确定植物组织中花色苷种类?[/b]

各位老师，做DON毒素，方法GB 5009.111里用到的是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]，现在想换超高压[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]做，需要做仪器的方法验证吗？还是只要仪器检定合格就可以做样了？求助各位老师，非常感谢！

各位老师： 新手上路，求教安捷伦1290-6470超高压液相色谱三重串接四极杆质谱仪操作！

随着Waters的UPLC问世，并得到分析工作者的广泛认可，越来越多的液相厂商也开始研发并推出类似产品。比如Jasco、Agilent、Shimadzu、ThermoFisher和Hitach都开始角逐这个市场，不过好象并不是所有的产品都是真正的超高压，彼此之间都有什么特点，不知道用过这些奢侈品的高人能不能有一些可以分享的经验供大家学习。

ACQUITY UPLC BEH C18 超高压液相色谱柱 有没有人对这个柱子有了解的，具体耐受温度是多少度，换有压力、PH？

配置如下：安捷伦1260 600Bar超高压液相色谱仪（包括四元泵带真空脱气机+自动进样器+温控模块+柱温箱+紫外检测器+软件）：Item NumberProduct Number/DescriptionNet Unit Price(USD)QtyTotal(USD)1G1311B 四元泵带真空脱气机1260 Quaternary Pump12G1311B 001起始工具包HPLC System Tool Kit13G1311B 003起始管线包HPLC Starter Kit incl. 0.12mm id cap1[/

有再次购买液相设备的预算。因为我们就是从事液相检测，对液相设备还是比较了解的。但是买什么就真的不好决定了。备注：我们现有Agilent 1100（自动进样），waters 600（手动）。目前见到很多关于超高压液相的资料和说明，但是毕竟才出来几年，姑且先不考虑其技术成熟问题，认为其可以用。但是目前还是涉及到一个很实际的问题：超高压液相的信价比问题，它真的比目前非常成熟的普通液相好很多吗？买它值吗？？？？？希望诸位有经验的版友能提供一些可参考的信息。谢谢！如果有相关经验的版友最好能够说明是对W还是A的设备评价。

对于超高效（超高压）液相色谱你们使用了吗？日常使用更换配件的频度是多长时间？一般介绍说使用成本高，高在哪里？使用的流动相与常规液相有何特殊要求？

理论塔板数跟保留时间和半峰宽有关，现在的超高压液相用的柱子更短，粒径更小，能在很短时间内实现分离，但是按照现在的标准，往往塔板数就达不到要求，原来10分钟出峰的物质可能只需要不到1分钟就出峰了，峰型是挺尖锐挺好看的，可问题是踏板数缺只有几百。如果按照药典的要求，我相信很多超高压液相是无法达到塔板数要求的，但是超高压的优势在于快速，我们不能因为这个不用吧，而且这是未来的趋势。 小弟在这里抛砖引玉，大家发表一下高见。

释放疲惫的身心——超高效液相色谱EX1700作者：朱志华在科技越来越发达的今天，人们似乎比任何时候都有着更强烈的追求美好生活的愿望，而频频爆出的食品药品安全问题不时给人们带来冲击。分析仪器的重要性从未有过如今这般受人重视。随着分析仪器在社会生活的各个领域日益普及，作为分析仪器家族一个重要成员——液相色谱仪也有了巨大的发展，从昔日的高端宠儿变身为实验室必备基础仪器。从上个世纪70年代高效液相色谱法正式建立以来，经过40多年的发展，高效液相色谱仪已经成为实验室最为常用的分离和检测仪器之一。广泛应用于化学化工、医药食品、环境监测、商品检验等各个领域。自从高效液相色谱诞生那一刻开始，高效和快速分析一直是色谱柱分析技术永恒不变的主题。研究出能够进行高速分离，同时又超快速分析的液相色谱仪是色谱工作者们长期努力的方向。根据经典的液相色谱理论，当色谱柱填料粒径接近或低于亚2μm水平时，不但能获得极高的柱效，而且柱效不会随流速或线速度的增大而减小。根据这一理论，超高效液相色谱诞生了。EX1700S-HPLC是伍丰公司10年液相色谱制造技术集中体现的核心产品，她集自动化、智能化、高可靠性于一身，与传统的高下液相色谱技术相比，效率更高，分离能力更强，结束了人们多年来人们不得不在速度和分离度之间不断取舍的历史。EX1700S-HPLC的出现，也将带领国产液相分析技术进入全新的时代。EX1700S-HPLC 由超高压恒流泵，超高压自动进样器，超高速紫外检测器，柱温箱以及相匹配的数字工作站组成。EX1700S-HPLC 超高压恒流泵采用新的输液技术，在0～5ml范围内实现60MPa的超高压输液能力，实现高分析速度和分离度的统一，与在其他平台上开发的方法兼容；采用双柱塞往复式并联泵设计，运行更稳定，无缝对接LC/UV，LC/MS应用相匹配的超快速梯度分离方法；采用流量补偿技术，提供实时流量监控优化技术，噪音降至最低，确保获得最高精度的保留时间特性；使用性能优异的进口宝石柱塞杆，密封垫寿命更长，延长了仪器正常运行时间。EX1700S-HPLC 配备自主研发生产的超高压自动进样器，采用计量泵和定量环双系统进行定量，可完成0.1～50μl可靠进样，在不更换定量环的情况下，保证大体积和小体积进样都有高度的重现性。EX1700S-HPLC 采用高精度电动进样阀，死体积更小，延迟时间更短，基本无记忆效应，可工作在60MPa系统下；使用超耐磨材料加工自主专利设计的切换阀阀芯部件，系统工作更稳定，使用寿命更长；具有超强的自我保护功能，尽可能降低由于操作不当造成的对仪器的损害；可自动识别托盘规格，自由使用2ml，4ml，10ml规格的样品托盘；采用取样针内外壁清洗方式，让样品的交叉污染无处遁形。为了保证EX1700S-HPLC和常规HPLC下都能达到优越的检测灵敏度，EX1700 S-HPLC采用带微流控制技术的最大光强卡套式流通池设计，最大限度的降低通过流通池的光强的损耗，使得光传输率几乎达到100%，使用普通氘灯就能满足[font=Times New Roman

在大家使用的超高压液相色谱中有没有碰到管接件发生问题的?比如接头松动，管道不均匀等。

单位买了一台超高压[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]做农残，大家能交流一下都用什么柱子做农残比较好哇

用Thermo LCQ型号的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]分析儿茶素，可是现有的柱子只有Phenomenex的一个50*2mm的C6柱子，请问这是超高压液相色谱用的柱子吗？能否用在这？流速多好合适？

液相色谱仪的应用 现在液相色谱仪的应用很多、很广，液相能检测有机物的70%以上的物质，检测的项目很多。现在国家规定越来越严，尤其是在食品行业，药品行业，饲料行业，水质，土壤等，这样也是促进液相色谱仪发展的一个机会。在科研、医疗、医药、教学上用的也越来越多。在农业、石油、石化、炼钢、水利、商检、法检、环境、大气、卫生等很多行业都有很大的发展和需求。 市场需求大是液相色谱发展的动力，市场要求高是液相色谱发展的立足点。液相色谱能承受高压，能采用梯度洗脱，能很好的分离化合物，具有多种检测器，能满足各种化合物的检测，有着种类繁多的色谱柱，能满足不同需求及要求。 液相色谱还有一个很大的特点就是现在很多仪器和行业为了达到某种功能，逐渐采用了联用技术。比如液相色谱和原子吸收、原子荧光联用，叫形态分析。液相色谱与ICP联用，与质谱联用等。在很多像制备、纯化技术也在不同程度的采用了液相分离、检测技术。随着微量液相色谱，超高压、超高效液相色谱，手性液相色谱，亲和液相色谱，手性液相色谱，毛细管液相色谱等的发展，相信液相涉及的技术和市场领域还会越来越广，前景还会更好。当然像离子、凝胶色谱这几大类色谱也属与液相色谱范围，这样液相色谱的领域和覆盖面就相当广了吧。 所以液相色谱的市场很大、很好，前景一片光明。

改为超高压液相分析，其方法要验证吗。我们公司检查提到这个问题，我感觉是需要验证的，但是苦于没有这样的经验，希望园子的前辈指点啊！

[align=center][b]液相色谱柱的发展历程[/b][/align]每次我们看到色谱柱的时候，都会想到明亮的不锈钢柱管，但是色谱柱柱管发展到今天也是历经坎坷的，科学技术的发展进步从来都是曲折的。1、玻璃柱管时代最早的色谱柱填料是填充在玻璃管里面的，玻璃管的机械强度，所以那个时代的色谱柱柱压不能太高，属于低压液相色谱的年代。这个是现代液相色谱分析的雏形，曾经的屠呦呦老先生靠最原始的柱层析提取出了青蒿素，这个是时代的进步！2、塑料柱管时代塑料取代玻璃是色谱技术的一大进步，塑料的工程强度要大于玻璃。所以用塑料装填色谱填料也流行一时。今天，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]的色谱柱柱管依然使用的是塑料。但是液相色谱柱却摒弃了塑料。液相色谱的流动相多为甲醇乙腈等有机溶剂，塑料可能与有机溶剂相互作用，甚至发生溶解。3、不锈钢柱管时代不锈钢色谱柱柱管的产生，意味着液相色谱的发展进入了一个崭新的时代。色谱柱可以耐更高的压力，所以通常我们说液相色谱是高效液相色谱或者高压液相色谱，其原因应该来源于此。我在网上看到，有的人说是当初液相色谱进入中国的时候，翻译错误造成的。但是本人认为从事物发展的脉络来看，叫高压液相似乎更加合理。随着填料技术的不断发展，液相色谱又被推陈出新到一个新的高度，超高压液相色谱。色谱柱的发展历程是色谱柱柱管的发展历程，也是色谱填料技术发展的历程，这两个因素相互作用，相互促进，才有了今天色谱柱技术的飞跃发展！我们在使用不锈钢色谱柱的时候，不应该忘记液相色谱柱的前世今生！尽管今天我们不会叫液相色谱仪为“高效液相色谱仪”！所以，我们说色谱柱是液相色谱的核心！

[align=center][b]浅谈超高效液相色谱柱和液相色谱柱的区别[/b][/align]从色谱柱填料的发展大趋势来讲，色谱柱填料一直是超更小粒径微粒的方向发展的，2004年超高效液相色谱应运而生。更小的粒径，意味着更高的泵压。在色谱柱的发展历程中，泵压、粒度、柱长、柱效这四个因素是相互制约的。随着技术的发展超高效液相色谱可以提供的泵压为140Mpa,而大多数液相色谱仪的最大压强仅为40Mpa。泵技术的突破为超高效液相色谱的产生奠定了基础。两者的区别如下：1、UPLC比HPLC有更好的分离度；我们不难理解填料粒径变小以后，分离度会变好。1.8um颗粒的分离度比5um颗粒提高了70%；2、UPLC比HPLC有更高的分析速度；常规的液相色谱通常在20分钟内完成分离，而超高效液相通常情况下5分钟内就可以完成分析；3、UPLC比HPLC有更高的灵敏度。分析过程中峰展宽变窄，峰高会更高，提升了色谱检测的灵敏度。单纯从色谱柱填料来讲，主要有三个方面的区别 1、Kromasil提供给超高效液相色谱柱的填料粒径为1.8um,普通色谱柱通常填料的粒径为5um。作为液相色谱来说，填料硅胶球的尺寸分布要求非常严格，填料的粒径越小，实际上对硅胶球的要求更高。所以超高效液相色谱柱的填料成本也是高于液相色谱柱的。2、超高效液相的柱压更高，要求填料的抗压性更强，这就要求在填料合成过程中要考虑抗压性的影响，无疑增加了合成难度。3、色谱柱的装填也更加严苛，超高效液相对装填工程师的要求也更高。超高效液相的柱管和柱塞板也是升级和优化过的。

液相色谱最大的故障是漏液问题 液相色谱现在在分析实验室应用的很多，对样品分析分析做出了巨大的贡献。当然由于这种仪器的固有特性（高压或超高压），在实验过程中也可能会出现很多故障问题，给实验带来很多麻烦，给操作者带来很多烦恼。 液相色谱在使用中可能会出现很多问题，其中最常见的故障那肯定是漏液问题了。由于系统长期处于高压状态，那很多部件漏液就在所难免了。再就是液相泵是在线输液，在高压状态下动态工作也是漏液的有一大因素。另外液相可能会用到酸碱盐溶液，这些溶液可能会对系统造成污染或堵塞等，这就使得系统的压力更高，造成漏液。 液相色谱溶液漏的地方有泵头处（密封圈或柱塞杆损伤所致），单向阀处，阻尼器处，混合器处，进样阀处，放空阀处，色谱柱处，检测池处，接头处等等。 漏液是液相常见的问题，不够是进口仪器还是国产仪器，只要是液相仪器就都可能会漏液，只是漏液的程度和频率问题。这个问题我们只能是竭力控制或减少缺很难彻底解决，尤其是寿命较长的老仪器，那就更难避免了。 其实漏液、漏气问题在其它分析类产品中也可能会出现，只是可能没有液相这么严重。 液相色谱漏液问题解决办法一般都是换件，比如密封圈、密封垫、柱塞杆，刃环、滤片、接头等。另外清洗、疏通管路、液路也是常见的解决办法。

我公司有台岛津LC-20A高效液相色谱仪，双泵，单泵最高压可达25mpa ，有没有可能配置成超高效液相色谱，请大家指点！

要实现超高效液相色谱分析,除必须制备出装填粒度小于2μm固定相的色谱柱外,还必须提供高压溶剂输送单元、低死体积的色谱系统、快速的检测器、快速自动进样器和高速数据采集、控制系统等，才能促成超高效液相色谱的实现。超高效液相色谱的优点基于1.7μm小颗粒技术的超高效液相色谱与人们熟知的高效液相色谱(HPLC)技术,具有相同的分离原理。不同的是,超高效液相色谱不仅比HPLC具有更高的分离能力,而且结束了人们多年不得不在速度和分离度之间取舍的历史。使用超高效液相色谱可以在很宽的线速度、流速和反压下进行高效的分离工作,并获得优异的结果。提高分离度超高效液相色谱发挥了1.7μm颗粒提供柱效增高的全部优越性。尤其是1.7μm颗粒提供的柱效比5μm颗粒提高了3倍。因为分离度与粒度的平方根成反比,1.7μm颗粒的分离度比5μm颗粒提高了70%。在梯度分离中也具有同样的优越性。提高分析速度由于超高效液相色谱系统采用1.7μm颗粒,柱长则可以比使用5μm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变,而且使分离在高3倍的流速下进行,结果使分离时间缩短而分离度保持不变。提高检测灵敏度浓缩样品和采用各种高灵敏度的检测器都能提高灵敏度,而在超高效液相色谱中通过减小颗粒度,使色谱峰变得更窄,信噪比(S/N)增大,灵敏度得到额外的提高。提高质谱离子化效率减小基质效应[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]LC-MS[/color][/url]已经是液相色谱发展的主流,能够充分发挥LC高分离度和MS高灵敏度的优势,超高效液相色谱与MS的联用使这种优势更加明显:一方面,超高效液相色谱系统达到最佳线速度时,其流动相流速一般在0.25~0.50ml/min之间,这与质谱能承受的流速更加匹配(API接口一般能承受0.20ml/min),使离子化效率增加,而新的nano超高效液相色谱的流量更可低至200nl/min,可以不需分流而直接进入质谱 另一方面,超高效液相色谱的分离度比HPLC有很大提高,其色谱峰扩展很小,峰浓度很高,这样不但有利于化合物的离子化,同时有助于与基质杂质分离,在一定程度上能降低基质效应,从而使灵敏度和重现性得到提高。

巴浦洛夫说：“科学是依赖于方法的进步程度推动而前进的。”被列为二十一世纪十大尖端科技之一的超高压生物处理技术，是一次工业革命，它将对生物工艺学产生巨大的影响。它提出了大量的新的研究课题，丰富了生物学理论，蕴含着极大的技术开发潜力，具有广阔的市场前景。　　超高压生物处理技术应用领域非常广泛，为生物、医药和食品工程的科学研究、产品开发、工艺改革提供新的平台。1.病毒灭活　　200～300Mpa超高压能破坏病毒膜结构内部的非共价键结合。使膜衣壳蛋白亚单位之间解体，空间结构变化，构象转换，生物活性改变，从而使病毒颗粒丧失感染性。但超高压不破坏共价键，因此抗原的单个亚单位未被破坏，保持了免疫原性不变。用此方法可以获得没有传染性而免疫原性不变的完整的病毒颗粒。２.制取疫苗　　传统的制取疫苗方法均采用热力和化学处理灭活病毒，这些方法存在很大弊端。例如流感病毒灭活疫苗传统制备方法为化学方法。它使用化学试剂甲醛灭活病毒，易使病毒表面粒子受损，影响疫苗的免疫原性。同时甲醛具有刺激性和副作用，接种后易引起人体反应。超离心机和层析色谱技术使病毒纯度大大提高，但儿童使用仍有不良反应。流感病毒亚单位和表面抗原疫苗接种，虽然不良反应有所减少，但其免疫原性不如纯化的全病毒粒疫苗。而超高压250Mpa灭活疫苗的方法，不仅保留流感全病毒完整结构不被破坏，而且病毒完全灭活，同时抗原的免疫原性不受影响，反而效价提高。它不残留化学物质成分，使用安全。超高压灭病毒具有广谱性，对于这种变异快，变种多的流感病毒最为适宜，它工艺简便，生产周期短，成本低。３.处理血浆　　目前已有多种方法应用于血液制品的病毒灭活处理，如：巴斯德法、S/D法、亚甲兰光照法等。但现有的这些方法都有一定缺陷。S/D法只对有脂质包膜的病毒有效，而且在给病人输血前必须将灭活剂彻底清除。过滤法处理过程缓慢，价格昂贵，而且只对高纯度血液制品有效。加热处理会使蛋白质变性，需加入稳定剂。更重要的是目前所采用处理过程都有降低血液及血液制品中蛋白质治疗功能的可能性。超高压灭活血浆中的病毒是一个物理过程，无化学品加入，也不同于高温处理，施压和泄压都是即时的，均匀的。它对致病微生物的杀灭有广谱效果。没有交叉污染。实验证明，适当的超高压对血液制品的活性成分无明显的损伤，是一种高效的、简洁的、可靠的病毒灭活方法，具有很好的应用前景。

[size=3]超高效液相色谱仪是本世纪发明的高端分析仪器。Waters公司推出Aquity UPLC[sup]TM[/sup]后，世界上知名的液相制造商如Jasco、Agilent、Thermo Fisher Scientific(原热电公司)、岛津公司等也推出超高效液相色谱仪，其在国内尚无同类产品。[/size][size=2][b]2010年2月26日上海市科委在[color=#f10b00]上海伍丰科学仪器有限公司[/color]主持召开了“超高效液相色谱仪”项目验收会。此次和上海市计算技术研究所合作研发“超高效液相色谱仪”，在性能方面,其关键技术指标更集中突出在“三超方面”，即超高压(100Mpa)、超高分离、超高灵敏度。在功能方面,要求系统能实现自动化、智能化、安全化的操作。因此新型超高效液相色谱仪的研制大量使用新技术、新材料、新器件 色谱仪部件的制造采用模块化、固态化、集成化。研制“超高效液相色谱仪”，是利用“高效液相”向“超高效液相”发展的阶跃和机遇，支撑标准重新修订(支撑目前液相色谱类分析、检定的国家标准重新修订) 是建立新的分析、分离方法的的重要依据和重要手段。[/b][/size][size=2][b]验收专家组对参加研制“超高效液相色谱仪”项目的上海伍丰科学仪器有限公司、上海市计算技术研究所予以充分的肯定，一致认为研制的超高效液相色谱仪具有新颖性，综合技术达到国内领先，部分关键技术达到国际先进水平。[/b][/size][color=#f10b00][size=4][b]在为国产仪器在高端产品上取得成绩高兴的同时，你是否会考虑购买国产色谱的高端产品呢？你认为国产色谱仪器是否真的赶了上来？国产仪器是否可以在高端市场分一杯羹了呢？[/b][/size][/color]