非接触式成像光度计

最近一台光度计出现偏光及波长调节不到位的现象，经检查发现是调节波长的旋钮松动引起的，经紧固后正常，对于偏光现象光度计的钨灯可能在狭缝处成像不好，后仔细调节钨灯的位置即可，最后，通过实验验证效果不错。本人以前从未接触，这一次收益不浅。

那位来说说紫外分光光度计等吸收点法 ？本人刚接触不懂http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/em09502.gif

国标GBT--9758中有一句话，要求的仪器：分光光度计：适用于波长约在520 nm处测量。我想知道，这是表示要配备什么样的分光光度计？ 我很困惑，为什么有紫外/可见光分光光度计，又有分光光度计？它们是什么关系啊，还有什么原子吸收分光光度计，怎么这么多啊。请懂的人给我梳理一下，我初次接触，感激不尽！

测镁离子浓度用的。应该用什么样的光度计呢？可见分光光度计721可以吗？尽量要便宜点，实验室没什么钱。。刚接触这些东西，完全是个外行[em0707] 。。。。多谢~~~~

我的一台北分瑞利的UV-1801分光光度计坏了，开机后屏幕有亮就是不显示内容，问过很多人，也检查过排线的接触，没找到原因啊。这仪器是不是要报废了？

我们化验室用的是PF6-2非色散原子荧光光度计为什么载流空白只有几十

SP型非接触式视频引伸计（国内首创）一、工 作 原理非接触式视频引伸计可配于各类电液伺服万能试验机、电子万能试机上及其它类型机上。它利用亚像素法原理测量试样变形，可以用无接触方式同时测量纵向和横向两个方向的变形量，其测量范围由镜头焦距决定，配备不同焦距的镜头，可获得各种测量范围的量程。二、功 能用于金属及硬质非金属材料的常规拉伸、压缩、弯曲等试验外，还可以用于橡胶、软质塑料等伸长率较大材料的性能试验。1．适用于金属材料的泊松比（μ值）、金属薄板的塑性应变比（r值）及硬化指数（n值）等力学性能的测量。2．可自行判断缩颈部位，并测量出横截面积的变化而得到真实应力。3．可用于一般引伸计不能测量的金属箔、线丝、塑料薄膜等材料变形测量。4．由于能够测量整个试验过程中的变形量而自动测量真实应变、断裂伸长率及总伸长率。三、主要技术特点1．可任意设定原始标距，标距误差对应变量不产生任何影响。2．自动识别被测物的位置。3．按文件形式存储图像，并可随时调出及打印。4．用镜头焦距来调节视野范围。

分光光度计 一、概述 分光光度计是利用物质对光的选择吸收现象，进行物质的定性和定量分析的光电式分析仪器，也是一种光谱仪器。根据电磁辐射原理，不同的物质具有不同的选择吸收，也即具有不同的吸收光谱。通过对吸收光谱的分析可方便的判断物质的内部结构和化学组成。随着工业生产和科学技术的不断发展，以及人们对物质认识的不断深化，，迫切要求发展新的先进的分析技术和仪器，分光光度计就是在这种历史条件下问世和发展的。 分光光度计是分光仪器和光度计的一种组合。按工作光谱原理的不同，分光光度计可分为研究物质分子吸收光谱的分光光度计、研究物质中[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]分光光度计、研究物质分子荧光发射的荧光分光光度计和研究物质原子荧光发射的原子荧光分光光度汁、研究分子喇曼散射光谱的喇曼光谱仪等。由于分光光度法具有分析精度高、测量范围广、分析速度快、样品用量少等优点，分光光度计已成为探索自然、改造自然、发展科学技术和生产的强有力的工具，是现代化分析实验室必备的常规仪器之一。二、分光光度计的基本组成 分光光度计主要构成部分有光源部分、光度计部分、单色器和接受记录部分。分光光度计的主要组成部分可以用图1表示：光源 单色仪 样品池 接受放大系统 显示记录系统 图1 分光光度计框图下面分别叙述这几个部分的光学系统的特性。1光源系统分光光度计的光源系统由光源和照明系统组成。1.1光源 分光光度计中对光源有一定要求，理想的辐射光源应具备以下一些特性： (1)在所使用的被长范围内提供连续辐射，即光源应发射连 (2)辐射能量随波长的变化尽可能小，且有足够的强度。 (3)使用寿命较长。 (4)要有良好的稳定性，特别是对单光束仪器。 在190一360nm波长范围紫外波段，常用的光源是氢弧灯和氘弧灯，氘灯的紫外光发射强度比氢灯强。在360一2500nm波长范围可见和进红外波段，常用白炽钨灯作为光源。图2为氢灯、钨灯的光谱能量分布图。在2—50µ m波长的中远红外波段内，常用的光源是能斯脱和硅碳棒，其光谱能量分布如图3所示。另外，对于要求较低的仪器，灼热的金属丝(如镍铬丝)可以作为红外光源；而在远红外区高压汞灯也是一种常用的光源。 图2 光源能量分布 图3 红外辐射光源A－氢灯，B一钨灯，C一不同温度T的黑体辐射 A－能斯脱，B－硅碳棒1.2照明系统 光源系统的照明系统一般有两中：单光束照明系统和双光束照明系统。光源系统中的反射镜的作用是把光源发出的光线集中在单色器的入缝上，使整个狭缝照明均匀并充满单色器的孔径。在照明系统为单光束的仪器，只要求光源反射镜引入一个高通量的光束即可，对光源的成像质量要求不高。图4为一种单光束照明系统光路图。在双光束照明系统的分光光度计中，光源系统并不直接照明单色仪的狭缝，如图5所示。光度系统处于单色器和光源之间，而在光度系统中，有一个梳形减光楔，光源必须首先成像在减光楔上。减光楔通过光度系统要求清晰地成像在单色器的入缝上。 图4单光束照明系统 图5双光束照明系统2单色器系统单色器是分光光度计的核心部分，仪器的主要光学特性和工作特性基本上由单色器决定。它的作用是将光源发出的白光色散成各种波长的单色光，从出射狭缝中导出，照于样品上。分光光度计中的单色器是一个完整的色散系统，除了色散元件——棱镜或光栅外，还有入射和出射狭缝以及一组反射镜。根据工作光谱范围、色散率、分辨串等性能指标的要求，可分别选用棱镜或光栅分光的单色器，双联单色器，也可采用滤色片分光的单色器等。2.1虑光片滤光片是最简单、最廉价的单色装置。由于它的单色性不好，使测定精度大大受到限制。它的特性可以用最大透光波长(或称中心波长)和谱带半宽度(有效带宽)来表征。最大透光波长是指在此波长光源的辐射最强。有效带宽是指最大透光度值的一半处的谱带宽度。在分光光度计中，滤光片一般用来消除单色器的杂散光。滤光片可分为五种：中性滤光片，截止滤光片，通带滤光片，干涉滤光片以及校正滤光片(标准滤光片)。2.2单色器从波长范围宽广的光源辐射中分出波长单一的单色光的光学装置称为单色器。单色器是由入射狭绕、准直元件、色散元件(常用核能或光栅)、和出射狭绕组成。棱镜可以作为从紫外到中红外区的合适的色散元件。在紫外范围，常用的材料是硅、矾土和人造蓝宝石。矾土和人造蓝宝石能用于200到4000nm，但昂贵，所以常用熔融石英作棱镜材料。在可见范围，硅的色散次于光学玻璃，所以可见分光光度计常用廉价的光学玻璃作棱镜材科。玻璃和石英棱镜担色器的色散特性模式图见图6。为了便于比较，将显示线性色散的光栅单色器的色散特性也列在一起．图6 三种材料单色器的色散特性棱镜单色器的光谱纯度主要决定于棱镜的色散特性和光学设计。通常使用两种形式的棱镜单色器——本生(Bunsen)单色器和利特罗(Littrow)单色器。光栅是一种十分重要、应用范围很广的色散元件，可以用于紫外、可见、近红外范围的色散。光栅分透射光栅和反射光栅。透射光栅是在一块玻璃上或其它透明材料上刻一系列平行的和紧紧相靠的凹槽。生产这样的母光栅需要精密的装置，比较昂贵。复制光栅比较便宜，虽在性能上次于母光栅，但能满足应用。反射光栅是在复制光栅的表面上喷涂铝的薄膜制成的。也可在抛光的玻璃表面或金属表面镀铝，然后在铝表面上刻大量的平行线制成的。光栅的刻线越多，分辨率越高，每单位长度的刻线越多，它的色散就越大。闪耀波长是闪耀光栅的另一个重要的参数，在闪耀波长，光栅有最大能量输出。光栅的主要缺点是有次级光谱干扰分析，且杂散光的影响比棱镜更大，故常配虑光片以去除杂散光。棱镜的主要缺点是色散波长的非线性分布。光栅单色器有几种排列方式，通常用的一种是埃伯特（Ebert)式（图7），是埃伯特1889年发明的。它用一个球面镜准直和聚焦，并对称地放置两个狭缝，波长选择是通过旋转光栅实现的。后来采尼(Czerny)和特纳(Turner)对其进行了改进，用两个小的球面镜来代替大而昂贵的埃伯特球面镜（如图8），使得结构紧凑，后为现代仪器所常采用。图7 埃伯特衍射光栅单色器 图8采尼和特纳衍射光栅单色器入射和出射狭缝狭缝是单色器的重要组成部分之一，关系到分辨率的优劣。它是由具有很锐刀口的两片金属片精密加工制成的。刀口相互之间是严格平行的，并且是在相同的平面上。狭缝宽度有两种表示方法，一是用狭缝的两刀口之间的实际宽度表示，单位是毫米（mm）；另一是用从单色器出来的有效带宽表示，单位是纳米（nm），通常用后者表示。3光度系统 紫外可见和近红外分光光度计的光度系统分为单光束和双光束两种。3.1单光束的光度系统单光束的光度系统简单，如图9所示。此系统在采用比较法测量样品的光谱透过率或反射率时，通常有两种方式：图9 单光束的光度系统方式1：在整个工作波段测定完标准后，再测样品，得出的结果进行比较。此方式的缺点：波长的重复性不高，这是由于两次测量标被及样品的时间间隔长，光源的不稳定，波长的重复性、接收系统的不稳定等因素造成的。方式2：在待测的每一波长处标准和样品依次快速地替换，分别进行测量，进行比较。此方式的优点是严格保持标准和样品完全相同的照明及测试条件，但却使样品和标准不断地处于运动状态，因此采用较小。现代的自动分光光度计多采用双光束法来实现比较测量。3.2双光束的光度系统双光束光度系统的显著的特点和最基本要求是保持光路对称。即两光路中的反射次数和相应的反射角、透射次数和相应透射面的曲率以及射入接收器的角度和照射面积等，尽量要求做到对称，并且光路应尽量缩短，光学零件也应尽量减少。图10所示是在紫外——可见和近红外分光光度计中常用的双光束光度系统。图10 紫外—可见和近红外分光光度计中常用的双光束光度系统红外分光光度计中光学系统的基本要求与紫外一可见分光光度计相同。但在光学平衡法测定中，应用减光器Wl改变参考光束的强度来实现零点平衡。为了校正仪器的100％透过率，在样品光路中设有减光器W2。图11为红外分光光度计的光度系统图。图11 对称式红外分光光度计光度系统

752型分光光度计为紫外光栅分光光度计，测定波长200nm～800nm。 1.结构原理 752型分光光度计由光源室、单色器、样品室、光电管暗盒、电子系统及数字显示器等 部件组成，仪器的工作原理如图1所示。 仪器内部光路系统如图2所示。 从钨灯或氢灯发出的连续辐射经滤色片选择聚光镜聚光后投向单色器进狭缝，此狭缝正好位 于聚光镜及单色器内准直镜的焦平面上，因此进入单色器的复合光通过平面反射镜反射及准 直镜变成平行光射向色散光栅。光栅将入射的复合光通过衍射作用形成按照一定顺序均匀排 列的连续单色光谱，此时单色光谱重新返回到准直镜，然后通过聚光原理成像在出射狭缝上 。出射狭缝选出指定带宽的单色光通过聚光镜落在试样室被测样品中心，样品吸收后透射的 光经光门射向光电管阴极面。根据光电效应原理，会产生一股微弱的光电流。此光电流经电 流放大器放大，送到数字显示器，测出透光率或吸光度，或通过对数放大器实现对数转换， 显示出被测样品的浓度C值。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=91635]752型分光光度计结构原理及使用方法.doc[/url]

最近刚接触废水的生物监测，看到标准中有利用青海弧菌Q67自身发光的特性，通过测定其发光强度来评估水样的毒性。实验中用到了生物化学发光光度计，请教下，该仪器长什么样子，是否有国内的供应商提供仪器，一般价格多少？希望不要太贵了，否则老板肯定不会考虑的，O(∩_∩)O谢谢··

大家好，我是刚接触紫外分光光度计的，在用DR5000分光光度计做水中锰时，标准曲线可以做的很好，可是回测标准溶液时，分光光度计读数一直再跳动，不能稳定，为什么，我要怎么解决？请各位专家多多指教

各位大侠，我是做颗粒增强金属基复合材料的。我这种材料的抗拉强度可达900MPa级别, 但塑性很低，断后伸长率不足3%，所以可能会震坏普通的接触式引伸计，请问一下哪里有带非接触式引伸计的试验机，并能帮我做下实验？我可以支付实验经费。我的邮箱：wang.yaomian@gmail.com

有一台721可见分光光度计需要报废处理了，想知道仪器里面还有那些东西是可以拆下来备用的？指针式的~

哪位前辈用过以下四种便携式分光光度计:L-9000TW系列多功能水质分析仪、美国HACH DR2800便携式分光光度计、英国百灵达8000型光度计、7500型光度计。我们公司预计买一台用于检测电镀废水中的铜、镍、铬及COD的便携式分光光度计，以上四种都可以但不知哪个相对好一些！哪位前辈能给指点一下！谢谢！

最近老板让买紫外分光光度计，我开始没注意到，老板的意思是只买紫外的，我之前接触的多台分光光度计都是紫外可见分光光度计，没听说过有仅是紫外的分光光度计？仅是紫外分光光度计有吗？请教。

我有一个问题想咨询各位，最近试验中需要测定有机物的降解后的毒性，具体的方法是通过考察发光细菌发光度的变化进行计算，其中提到了生物发光光度计。因为从来没有接触过生物的试验，设备及仪器，所以对这方面的知识不太了解。想问问各位是否知道具体的测试设备及名称，以及大概的价格。如果太贵的话，老板恐怕不会投资哦！先在这里谢谢大家了！

各位同仁，本人从没接触过分光光度计，对它的原理稍有了解，我现在想确切知道影响分光光度计响应值的因素有哪些？多谢了！

721分光光度计的使用规程：该仪器应放在干燥的房间内，使用时放置在坚固平稳的工作台上，室内照明不宜太强。 热天时不能用电扇直接向仪器吹风，防止灯泡灯丝发亮不稳定。721分光光度计中的“721”是什么意思啊？！721是分光光度计的型号，除此之外还有721W分光光度计，722N分光光度计，722S分光光度计等。没有什么特殊的意义。这个型号是某个生产厂家制定的，然后被各光度计生产厂家采用，最终成为一个行业标准。721分光光度计故障及其排出1.保险丝不通,更换新的 0.5A20mm 保险丝（GB×P型） 2.电源开关由于使用时间长接触不良,或开关本身质量不 好而失灵,需要更换新的规格为KN×2W2D 3.电源变压器初级线圈不通

最近化验室要换紫外分光光度计，做总氮用，以前用的752的，还是指针的，误差太大，根本不能准确指示到275nm,最近领导终于松口可以换新的分光光度计了，刚接触，看不太懂各个参数的意思，问经销商都说你自己先确定参数再说，咕~~(╯﹏╰)b，我确定不了啊，大神们，做总氮的大神们，有没有人指点一下，我们暂时确定的三款都是双光束的，数字型，三款的光谱带宽分别是1nm，2nm,2nm,（PS：发这个帖子会不会有广告的嫌疑啊，我真的是来求助的），我只是想找一款能准确到220nm和275nm的分光光度计，还有，那个光谱带宽在实际中的意义是什么啊？对最后结果影响大吗？

[align=center][b][font=微软雅黑][color=#333333][font=微软雅黑]【我们不一[/font][font=微软雅黑]YOUNG】[/font][/color][/font][font=微软雅黑][color=#333333]大学里的分光光度计[/color][/font][/b][/align][font=宋体][size=18px][font=宋体] 分光光度计是一种很普通的实验仪器，刚上大学时，用到的第一台分光光度计就是[/font][font=Times New Roman]721[/font][font=宋体]型分光光度计。该光度计没有电子工作站，所有操作都是通过旋钮或拉杆来完成，功能也很简单，只能测量吸光度或透过率。由于设计简单，老师对照仪器跟我们讲解原理时非常容易理解，操作起来也没什么难度。后来又逐渐接触到更高级的分光光度计，全部都设计了电子工作站，几乎所有操作都是在电脑上完成。当然功能也更多了，全波长扫描、示差、双波长、导数等高级功能都有了。虽然功能多了，但得益于电子计算机的应用，因此操作难度也没增加多少，基本的操作可以说是“傻瓜式”的，但也因为这种“傻瓜式”的操作，导致很多人只学会按部就班的流程，而对于其背后的原理很少去深究，这对于进入职业生涯后的工作是非常不利的。[/font][/size][/font]

谁用过便携式的光度计？有时候出去采样几天需要现场分析的就用得到便携式的光度计，我想咨询一下大概价格！

NY/T 1615－2008标准中要求使用火焰光度计，测试钾钠需要使用火焰光度计 火焰光度计仪器没有接触过，请问有老师用过吗？使用时哪家的，用的怎么样？ 还有火焰[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]也可以测定钾钠，为什么选用火焰光度计测试

大家好，以前没接触过荧光光度计，哪位能给我提供一些仪器方面的介绍和应用文章？谢了i_era@tom.com

721分光光度计百科名片721分光光度计采用经典的光路系统和精良的制造工艺，使仪器的测试精度及稳定性较传统产品有很大的提高；广泛适用于冶金、化工、机械、医学、生物、农业、环保、教学等行业和领域。该仪器也是食品厂、饮用水厂办QS认证中的必备检验设备。主要技术指标有： 波长范围：360∽800nm 波长精度：360∽600±3nm 600∽700±6nm 700∽800±8nm 透射比正确度：±2.5% 透射比重复性：0.5721分光光度计中的“721”是什么意思？！721是分光光度计的型号，除此之外还有721W分光光度计，722N分光光度计，722S分光光度计等。没有什么特殊的意义。这个型号是某个生产厂家制定的，然后被各光度计生产厂家采用，最终成为一个行业标准。721分光光度计故障及其排出:1.保险丝不通,更换新的 0.5A20mm 保险丝（GB×P型） 2.电源开关由于使用时间长接触不良,或开关本身质量不好而失灵,需要更换新的规格为KN×2W2D

[size=16px][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#05073b]触摸屏钾钠火焰光度计是什么仪器[/color][/font]触摸屏钾钠火焰光度计是一种专门用于测定钾、钠元素浓度的分析仪器。它结合了触摸屏技术和火焰光度计的原理，使得操作更加便捷和直观。该仪器通过雾化器将样品喷射到火焰中，激发光发射。火焰中的热能使得碱土金属中的局部[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]能量后跃迁至上一个能量级，这个被释放的能量具有特定的光谱特征，即定的波长范围。在分光之后，检测器测量发射强度，这个强度与样品中待测元素的含量成正比。触摸屏的引入使得用户可以更方便地控制仪器、查看数据和进行参数设置。同时，该仪器具有体积小、操作方便、稳定可靠等特点，广泛应用于农业肥料、土壤、水泥、陶瓷等行业以及硅酸工业的分析和测定，还有医疗卫生的病理研究等领域。需要注意的是，虽然触摸屏钾钠火焰光度计具有诸多优点，但在使用过程中仍需遵守安全操作规程，确保人员和环境的安全。同时，仪器的准确性和可靠性也依赖于正确的操作和维护，因此用户应定期对仪器进行校准和保养。总之，触摸屏钾钠火焰光度计是一种功能强大、操作便捷的仪器，对于钾、钠元素的测定具有重要意义。[img=,400,300]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2024/03/202403071007051399_5991_6098850_3.jpg!w400x300.jpg[/img][/size]

[font=黑体][size=4]分光光度计的应用常识[/size][/font]分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸，蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。　　分光光度计的简单原理　　分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光源，光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。　　核酸的定量 　　核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸，单链、双链DNA，以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长 260 nm。 每种核酸的分子构成不一，因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。如：1OD 的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA，37μg/ml的ssDNA，40μg/ml的RNA，30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上 述系数的换算，从而得出相应的样品浓度。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积，尔后测试空白液和样品液。然而，实验并非一帆风顺。读数不稳定 可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器，表现出的吸光值漂移越大。　　事实上，分光光度计的设计原理和工作原理，允许吸光值在一定范围内变化，即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%（1A）。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动，都是正常的。另外，还需考虑核酸本身物化性质和 溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等：在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液，如TE，可大大稳定 读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素：由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒，尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗 粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1-1.5A。在此范围内，颗粒的干扰相对较小，结果稳定。　　从而意味着样品的浓度不能过低，或者过高（超过光度计的测试范围）。最后是操作因素，如混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值；混合液不能存在气 泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈；必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则浓度差异太大；换算系数和样品浓度单位选择一致；不能采用窗口磨损的 比色杯；样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等多个操作事项。　　除了核酸浓度，分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度，如 A 260 / A 280 的比值，用于评估样品的纯度，因为蛋白的吸收峰是 280 nm。纯净的样品，比值大于 1.8（DNA）或者 2.0（RNA）。如果比值低于 1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。A 230 表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0。A 320 检测溶液的混浊度和其他干扰因子。纯样品，A 320 一般是 0。　　蛋白质的直接定量（UV法）　　这种方法是在280 nm波长，直接测试蛋白。选择 Warburg公式，光度计可以直接显示出样品的浓度，或者是选择相应的换算方法，将吸光值转换为样品浓度。　　蛋白质测定过程非常简单，先测试空白液，然后直接测试蛋白质。由于缓冲液中存在一些杂质，一般要消除 320 nm的“背景”信息，设定此功能“开”。与测试核酸类似，要求 A 280 的吸光值至少大于 0.1A，最佳的线性范围在 1.0-1.5 之间。实验中选择 Warburg 公式显示样品浓度时，发现读数“漂移”。这是一个正常的现象。事实上，只要观察A 280 的吸光值的变化范围不超过 1%，表明结果非常稳定。　　漂移的原因是因为 Warburg 公式吸光值换算成浓度，乘以一定的系数，只要吸光值有少许改变，浓度就会被放大，从而显得结果很不稳定。　　蛋白质直接定量方法，适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。紫外直接定量法相对于比色法来说，速度快，操作简单；但是容易受到平行物质的干扰，如 DNA 的干扰；另外敏感度低，要求蛋白的浓度较高。　　比色法蛋白质定量　　蛋白质通常是多种蛋白质的化合物，比色法测定的基础是蛋白质构成成分：氨基酸（如酪氨酸，丝氨酸）与外加的显色基团或者染料反应，产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关，从而反应蛋白质浓度。　　比色方法一般有 BCA，Bradford，Lowry 等几种方法。　　Lowry 法：以最早期的 Biuret 反应为基础，并有所改进。蛋白质与Cu2+反应，产生蓝色的反应物。但是与 Biuret 相比，Lowry 法敏感性更高。缺点是需要顺序加入几种不同的反应试剂；反应需要的时间较长；容易受到非蛋白物质的影响；含 EDTA，Triton x-100，ammonia sulfate 等物质的蛋白不适合此种方法。　　BCA（Bicinchoninine　acid　assay）法：这是一种较新的、更敏感的蛋白测试法。要分析的蛋白在碱性溶液里与Cu2+反应产 生 Cu+，后者与 BCA 形成螯合物，形成紫色化合物，吸收峰在 562 nm 波长。此化合物与蛋白浓度的线性关系极强，反应后形成的化合物非常稳定。相对于 Lowry 法，操作简单，敏感度高。但是与 Lowry 法相似的是容易受到蛋白质之间以及去污剂的干扰。　　Bradford 法：这种方法的原理是蛋白质与考马斯亮兰结合反应，产生的有色化合物吸收峰 595 nm。其最大的特点是，敏感度好，是 Lowry 和 BCA 两种测试方法的 2 倍；操作更简单，速度更快；只需要一种反应试剂；化合物可以稳定１小时，方便结果；而且与一系列干扰 Lowry，BCA 反应的还原剂（如 DTT，巯基乙醇）相容。但是对于去污剂依然是敏感的。最主要的缺点是不同的标准品会导致同一样品的结果差异较大，无可比性。　　某些初次接触比色法测定的研究者可能为各种比色法测出的结果并不一致，感到迷惑，究竟该相信哪种方法？由于各种方法反应的基团以及显色基团不一，所以 同时使用几种方法对同一样品得出的样品浓度无可比性。例如：Keller 等测试人奶中的蛋白，结果 Lowry，BCA 测出的浓度明显高于Bradford，差异显著。即使是测定同一样品，同一种比色法选择的标准样品不一致，测试后的浓度也不一致。如用Lowry 测试细胞匀浆中的蛋白质，以 BSA 作标准品，浓度1.34 mg / ml，以 a 球蛋白作标准品，浓度 2.64 mg / ml。因此，在选择比色法之前，最好是参照要测试的样本的化学构成，寻找化学构成类似的标准蛋白作标准品。另外，比色法定量蛋白质，经常出现的问题是样品 的吸光值太低，导致测出的样品浓度与实际的浓度差距较大。关键问题是，反应后的颜色是有一定的半衰期，所以每种比色法都列出了反应测试时间，所有的样品 （包括标准样品），都必须在此时间内测试。时间过长，得到的吸光值变小，换算的浓度值降低。除此，反应温度、溶液PH值等都是影响实验的重要原因。此外， 非常重要的是，最好是用塑料的比色法。避免使用石英或者玻璃材质的比色杯，因为反应后的颜色会让石英或者玻璃着色，导致样品吸光值不准确。　　细菌细胞密度（OD 600）　　实验室确定细菌生长密度和生长期，多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验，需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600 是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。 以未加菌液的培养液作为空白液，之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作，必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数，做出校正曲线。实验 中偶尔会出现菌液的OD值出现负值，原因是采用了显色的培养基，即细菌培养一段时间后，与培养基反应，发生变色反应。另外，需要注意的是，测试的样品不能 离心，保持细菌悬浮状态。　　分光光度计的重要配件 —— 比色杯　　比色杯按照材质大致分为石英杯、玻璃杯以及塑料杯。根据不同的测量体积，有比色杯和毛细比色杯等。 一般测试核酸和紫外定量蛋白，均采用石英杯或者玻璃杯，但是不适合比色法测定。因为反应中的染料（如考马斯亮兰）能让石英和玻璃着色，所以必须采用一次性 的塑料杯。而塑料杯一般不适合用于在紫外范围内测试样品。　　由于另外测试的样品量不同，所以一般分光光度计厂家提供不同容积的比色杯以满足用户不同的需求。 目前市场已经存在一种既可用于核酸、紫外蛋白质定量，亦可用于蛋白比色法测定的塑料杯，样品用量仅需 50μl，比色杯单个无菌包装，可以回收样品。如Eppendorf UVette?塑料比色杯，是目前比色杯市场上一个革新。 随着生命科学以及相关学科发展，对此类科学的实验研究提出更高的要求，分光光度计将是分子生物学实验室不可缺少的仪器，也成为微生物、食品、制药等相关实 验室的必备设备之一。

刚刚接触分析,所以求助有关可见分光光度计的一些问题,望老师们赐教:1,可见分光光度计只可以测量金属离子吗?其他的物质可以吗?2,如果是交替状的分散在水溶液中可以直接测量吗?比如Al2O3胶体分散在水溶液中.谢谢了 .

各位同仁 小弟刚接触分光光度计 用的是尤尼柯uv2000 敢问各位光在520nm光斑显色应是啥颜色？偏红还是偏绿？还是其他别的颜色？还有就是比方说我在波长580处有偏差加减60 可不可以在测算时直接调节到520处或是640处？ 不胜感激啊[em17]

邻菲啰啉分光光度计法测铁中，关于0.1(m/V)的盐酸羟胺溶液如何配置？同时对于缓冲溶液：40g乙酸铵加50ml冰乙酸用水稀释至100ml,对于加入的乙酸铵好像难以完全溶解？最好能够详细说明使用什么方法可使其溶解，同时0.1(m/V)的溶液如何配置？

在分光光度计的标准曲线中，看到资料说通常的校准曲线有三大类12种，有波长不校正、双波长等点校正、三波长梯形校正三种，每一种又分为线性、过零点线性、二次、三次四种，总计12种。请大神帮忙解释一下什么是双波长等点校正、三波长梯形校正？什么情况下用二次、三次？一直以来都是用线性拟合，没接触过其他的拟合曲线，谢谢