我最近在研究二次谐波光谱,谁能帮帮我。这是一篇挺有用的文章,但愿对大家有用!!![img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=16638]铌酸钾锂晶体的光谱性质和二次谐波产生[/url]
[color=#222222]哪里可以测二次谐波成像?[/color]
传导是指高次谐波按着各自的阻抗分流到电源系统和并联的负载,对并联的电气设备产生干扰;感应耦合是指在传导的过程中,与变频器输出线平行敷设的导线又会产生电磁耦合形成感应干?电磁辐射是指变频器输出端的高次谐波还会产生辐射作用,对邻近的无线电及电子设备产生干扰。要有效地对高次谐波治理,就必须先了解它的危害表现形式。(1)电力电子设备:电力电子设备通常靠精确电源零交叉原理或电压波形的形态来控制和操作,若电压有谐波成分时,零交叉移动、波形改变、以致造成许多误动作。(2)计量仪表:计量仪表因为谐波会造成感应盘产生额外转距,引起误差,降低精度,甚至烧毁线圈。(3)电力电容器:当高次谐波产生时由于频率增大,电容器阻抗瞬间减小,涌人大量电流,因而导致过热、甚至损坏电容器,还有可能发生共振,产生振动和噪声。(4)变压器:电流和电压谐波将增加变压器铜损和铁损,结果使变压器温度上升,影响绝缘能力,造成容量裕度减小。谐波还能产生共振及噪声等。(5)开关设备:由于谐波电流使开关设备在起动瞬间产生很高的电流变化率,使暂态恢复峰值电压增大,破坏绝缘,还会引起开关跳脱、引起误动作。(6)保护电器:电流中含有的谐波会产生额外力距,改变电器动作特性,引起误动作,甚至改变其操作特性,或烧毁线圈。(7)感应电动机:电流和电压谐波同样使电动机铜损和铁损增加,温度升。同时谐波电流会改变电磁转距,产生振动力矩,使电动机发生周期性转速变动,影响输出效率,并发出噪声。另外,高次谐波还会对电脑、通信设备、电视及音响设备、载波遥控设备等产生干扰,使通信中断,产生杂讯,甚至发生误动作,另外还会对照明设备产生影响。
使减少谐波污染成为电力用户自觉行动的建议 (江西省萍乡市计量所 刘彦刚)引 言 电能作为一种特殊商品,它的质量不仅要求电力系统在发电、输电和变电的各个环节上作出努力,同时也要求电力用户予以维护。特别是公用电网的谐波,受用电设备的影响更是明显。随着各种会产生谐波电流的电力电子设备、非线性设备及冲击性用电设备不断增加,例如:电气化铁道、变频空调和变频电梯、变压器和电抗器以及电弧炉,构成了电能质量的主要谐波污染源,使得电网电能质量指标趋于恶化,不仅威胁着电力系统的安全经济运行,而且也对电力用户和通信等行业产生危害和不利影响。电网被谐波污染,将导致输电线路、变压器和电机损耗增加,浪费日趋宝贵的能源;变压器和电机的振动和噪音增大,温升增加,寿命降低;电能表等计量装置误差增大,不能正确计量;电力系统继电保护误动作跳闸,给生产和生活造成不必要的影响、甚至损失,或电力系统继电保护拒动,引起电力系统事故、甚至扩大事故;计算机、数据传送和自动控制系统数据丢失、误显示、误动作和元件损坏;电视机图像变坏、翻滚;给收音机和通信设备引起杂音等。现 状 为了保护供用电双方的利益,必须将公用电网谐波限制在一定范围内,为此原国家技术监督局于1993年制定并颁布了GB/T14549—1993《电能质量 公用电网谐波》标准,针对电力系统的产品——电能的质量要求,规定了公用电网谐波电压(相电压)限值,针对电力用户,限制其谐波污染的排放,规定了注入公共连接点谐波电流的允许值。作为产品质量要严格要求电力系统,使公用电网谐波电压符合国家标准,现在也有成熟的产品能检测电能的质量,并且也有相关的规定,规定了一旦电能质量不合格,电力系统应承担的赔偿责任,余下的就是电力用户自身要善于和勇于维护自已的利益。对于电力用户,一则要求购置的用电设备,是先进合理的产品,产生的谐波电流符合GB17625.1—2003《电磁兼容 限值 谐波电流发射限值(设备每相输入电流≤16A)》等标准的要求。二则对于注入公用电网谐波电流大于GB/T14549—1993《电能质量 公用电网谐波》标准规定值时,则要求安装电力谐波滤波器,以减小注入公用电网谐波电流。但是要购置先进的小谐波电流的用电设备,安装电力谐波滤波器,限制公用电网谐波污染,都需要电力用户增加投资。虽然现在公用电网谐波污染日趋严重,但因为没有相应的强有力的约束机制,电力用户不会主动支付额外的费用来治理谐波污染。也正因为没有强有力的限制公用电网谐波污染的机制,对于电力用户不好说:一旦注入公用电网公共连接点的谐波电流超过允许值,就不让其用电。特别是目前的谐波测控方式,大都是仅由省电力公司的检测机构依次到全省各变电站去检测,如发现变电站谐波电压超标,再去检测是那条出线造成的。电力用户新投运的用电设备,即使造成了注入公共连接点的谐波电流超过允许值,并不能及时发现,只有当其造成了十分严重的后果时才知道,导致了目前公用电网谐波污染日趋严重的局面。 相比之下电网无功电力的就地平衡工作则做得相当成功,用户在努力提高自然功率因数的基础上,还按照有关标准要求设计并安装无功补偿装置,并做到随功率因数和电压的变化,及时投入或切除补偿装置中的电容器,使得电网无功电力分层分区就地平衡。之所以电网无功电力就地平衡工作做得如此成功,得益于原电力部和原水利电力部早在1976年和1983年,先后颁发了《力率调整电费办法》和《功率因数调整电费办法》(后者下发时前者同时作废)。建 议 限制公用电网谐波污染,如能采用电网无功电力就地平衡那样的成功经验,对电力用户注入公共连接点的谐波电流,将其当作电力用户向公用电网排污一样予以计量并实行考核,当电力用户治理得好,谐波电流小时给予奖励(即按一定比例减少电费);若电力用户治理得不好,谐波电流在一定范围时,据排污量按比例加收电费;当电力用户谐波电流超过一定限值时,再责令其停产治理。这样定能使治理公用电网谐波污染,如同电网无功电力就地平衡一样成为电力用户的自觉行动。 对于谐波电压和电流的测量,相关标准明确规定了其测量方法,人们也已有成功的经验,只是要将谐波电流当作排污一样累计,其方法有待探讨。对此我认为最好的方法是分别将各次谐波电流取绝对值后对时间积分,累计各次谐波电流的电荷量,当然在将测得的各次谐波电流取绝对值,对时间积分之前,还应减去由于公共连接点处电压波形畸变,形成的各次谐波电压,在当时电压和负荷电流情况下,所对应的等效线性负载上形成的各次谐波电流,因为该部分谐波电流的存在,责任不在于电力用户。 据了解不少电子式电能表生产厂家的工作用多功能电能表,已具备测量各次谐波电压和电流的功能,只要稍加努力,完全有可能生产出,将谐波电流作为排污累计的计量器具。 值得注意的是,谐波电压和电流的测量,不可能直接在公共连接点的高压下进行。为了准确地测量各次谐波电压和电流,不仅要求二次侧的谐波测量装置的计量准确性,而且将各次谐波电压和电流按比例缩小的取样装置,其计量准确性也犹为重要。现在常用的电压和电流互感器,都是在工频50赫兹基波情况下设计、制造和检验的,其幅频和相频特性一般不可能满足准确测量各次谐波电压和电流(标准要求2-25次谐波)的要求。为了真实反映各次谐波电压和电流,应采用幅频和相频特性均满足标准要求的谐波电压和电流取样装置。结 论 随着电气化铁道、变频空调和变频电梯等会产生谐波的用电设备不断增加,公用电网谐波污染日趋严重,而且至今还没有行之有效的治理谐波的管理办法。特此建议借鉴电网无功电力就地平衡的功率因数调整电费办法,将电力用户在公用电网的公共连接点处,注入公用电网的谐波电流当作排污一样进行累计,并据情予以奖罚,从而使得治理公用电网谐波污染,如同电网无功电力就地平衡一样,成为电力用户的自觉行动。参 考 文 献原电力部1976年颁发的《电热价格》中规定的办法.原水利电力部1983年颁发的文件.
近年来,随着节能减排观念的普及,变频器因具有很好的节能效果被在工业生产和民用设备领域得到广泛应用。[b]变频器(Variable-frequency Drive,VFD)[/b]利用集成变频技术与微电子技术,通过改变电机工作电源频率的方式来控制交流电动机的电力控制设备,为能源的高效利用、能效提升和电力系统的稳定运行提供了关键解决方案。变频器的节能效果显著,不仅降低了能耗浪费,而且通过智能监测、软启动和功率因数提高等功能,进一步增强了其在能源节约和电力系统稳定性方面的作用,其在可持续发展中的贡献不可忽视。然而,伴随着这场全球范围内的节能风潮,需要注意到变频器在运行过程中可能产生的谐波隐患,这可能对电能质量造成影响。因此,在变频器的广泛应用中,需综合考虑谐波治理措施,以确保电力系统的稳定性和可靠性。[align=center][img=变频节能设备谐波测试.png]http://upload.gongkong.com/Upload/gongkong/BBSImage/202404/11/b20a30e7a7974c90b1d3445ef4b6f0d0_w.png[/img][/align][b]变频器(Variable-frequencyDrive,VFD)[/b]是一种电力控制设备,主要由整流器、中间电路、逆变器和控制电路这四个核心部分组成。通过利用变频技术和微电子技术,调整电机的工作电源频率,以实现对交流电机的精确控制。整流电路位于变频器输入端,由于存在非线性元件,所以其属于非线性负载,主要作用是将输入的正弦电流信号整形成脉冲波,与此同时产生大量谐波分量反馈给电网,影响电网供电设备的正常运作。逆变电路位于变频器输出端,会对整流后的直流信号进行PWM脉冲调制,输出频率可调的PWM波。由许多高频脉冲信号共同组成的PWM信号,含有丰富的高次谐波,严重的情况下将会导致输出设备运行噪音增大、设备发热,甚至造成设备损坏,危害生产安全与稳定,因此必须对其进行测量与治理。[b]解决方案[/b]尽管变频器在提高能效方面有显著的节能作用,但其电路特性也导致了谐波产生。整流电路位于变频器输入端,由于存在非线性元件,它将正弦电流信号整形成脉冲波,同时产生大量谐波反馈给电网,可能影响电网供电设备的正常运作。采用仪器具备高测量精度SPAW7000功率分析记录仪,精度可达0.01%,采样速率2MS/s。对于市面上常见的变频器,其输出PWM波的高频率高次谐波对测量仪器提出了极高的要求。SPAW7000的高精度测量能力确保对变频器输出PWM波形的准确测量,有效应对高次谐波挑战。此外,SPAW7000支持七通道信号同步输入,保障各电路转换效率和整体效率的实时、可靠测量。同时,它具备FFT变换功能,可对变频器的三相输出信号进行同步分析,实现频谱分布特性的全面把握。[align=center][font=&][size=13px][color=#111111][img=变频节能设备谐波测试方案.png]http://upload.gongkong.com/Upload/gongkong/BBSImage/202404/11/42bb11770efe4736b8475b6ea69ace43_w.png[/img][/color][/size][/font][/align][b]主要优势[/b]1、高测量精度:SPAW7000功率分析记录仪具有最高达0.01%的测量精度和0.1 Hz-5 MHz的高带宽,能够准确测量输入输出电压、电流、功率等关键参数。2、FFT功能:FFT功能可以设置采样点数、采样比等参数,分析输入信号的频谱,这样可以观察到谐波测量中无法显示的频率部分。3、谐波分析:SPAW7000功率分析记录仪可同时对所有7个功率通道进行谐波分析测量,并且可以选择不同的PLL源,大大提高了在变频电机、机器人、照明等领域的谐波测量效率。测量的谐波次数最多可达500次。4、支持多种类型的输入模块:SPAW7000支持不同电压、电流输入范围以及不同精度的模块,一台仪器上最多可安装7个模块,而且可以是不同的规格。这样用户可以根据自己的不同需求,选配不同规格的模块,量身定制所需仪器,只需一台功率分析仪便可实现多种应用。目前提供8种不同规格的模块,并且新的模块在陆续更新中。5、最高10ms更新率+自动更新率:SPAW7000功率分析记录仪的数据更新率为10ms~20s、Auto。最快10ms的更新率,可以在保证高精度的基础上进行高速运算,并通过独立数字滤波器技术确保测量值的稳定性。开启自动更新率模式,可追踪从0.1Hz开始变化的频率信号,根据输入信号的频率自动改变数据更新率,便于对变化的信号进行更精准的测量。
[size=12px]什么是[/size][font=&][size=15px]谐波电流互感器?又[/size][size=12px]什么是[/size][/font][font=&][size=15px]谐波电压互感器?是只测电流(或电压)中约定谐波,还是又测基波又测谐波?[/size][/font]
关于THD的计算公式,不同标准的定义略有不同。 1、《GBT--17626.7-2008电磁兼容 试验和测量技术供电系统及所连设备谐波、谐间波的测量和测量仪器导则》中,对THD的定义如下: 符号G表示谐波分量的有效值,它将按要求在表示电流时被I代替,在表示电压时被U代替,H的值在与限制有关的每一个标准中给出。按照上述定义,THD不包含间谐波,并且,有一固定的谐波上限。[img=,308,90]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707131634_01_3072647_3.png[/img] 上式中,Q为总有效值,Q1为基波有效值,可代表电压或电流,按照上述定义,THD包含间谐波和直流分量。 WP4000变频功率分析仪采用就是这种计算方法。[img=,314,99]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707131634_02_3072647_3.png[/img] THD:不大于某特定阶数H的所有谐波分量有效值Gn与基波分量有效值G1比值的方和根;银河电气为您提供值得信赖的数据!
JJF1055—1997《交流电能表现场校准技术规范》,虽早在1997年11月20日发布,并于1998年6月1日实施。但因为当时我国没有在有谐波情况下的功率和电能标准,不能实现有谐波情况下的功率和电能的量值溯源,而不得不终止该规范的执行。我们是知道电能表的现场校准,不同于在实验室检定,在实验室检定时提供给被检电能表的功率和电能是我们的检定装置生成的,它可以据我们的需要,生成满足我们要求的失真度很小的完好正弦波,此时标准表和被检表都能在合符要求的正弦功率和电能情况下工作,我们能很方便地实现量值溯源。 而电能表现场校准情况就大不一样了,标准表和被检表不得不在不可能是完好的正弦波的真实负荷下工作,现场负荷,由于可控硅等非性用电设备的存在,使得电流和电压或多或少存在谐波。当有谐波的情况下计量功率和电能,自然要求我们的标准表应在有谐波的情况下溯源。 时隔十余年,不知我国现在有谐波情况下的功率和电能标准了吗?昨天我应邀对一铸钢厂的中频电炉的低压电能计量装置(由三只150/5电流互感器和三块单相电子式电能表组成)现校,因为自己的武器不过硬,着实心虚,故特地向各位老师打听一下该方面情况!因为我除现场电能表校准该保留节目外,现主要从事理化计量了,很长时间不在电学室了。
请教大家,变频器谐波需要怎样分析?
[size=4]谢谢大家帮忙解决一下OPUS6.5定量方法产生器的使用方法,谢谢谢谢[/size]
谐波测试报告的主要内容和形式有哪些谐波分析仪 谐波测试仪 电能质量分析仪(1)测试目的:建立电力系统谐波管理档案,查清谐波源,为抑制和消除谐波,或为解决电能质量纠纷,提供技术依据(2)测试对象:系统变电站和电力用户,简要介绍变电(配电)主接线、主变容量及其联接组别;电力用户的用电特点、负荷大小等资料。(3)测试条件:系统条件,系统运行方式的安排;用户的负荷工况等。(4)测试方法:信号的抽取方法,TV/TA的型号及接线方式,特别是TV;是否3s平均,测量的时间间隔,测量的次数和测量的时段等。(5)数据处理:95%概率值的取法,平均值的取法(国标规定至少取5个测量结果相近的值进行平均),给出最后的用于评判是否超标的结果数据,统计结果的格式见下表谐波测试报告格式谐波次数最大值最小值平均值95%概率值允许值基波23…THD 谐波分析仪 谐波测试仪 电能质量分析仪 在发现有谐波电流超标的现象时,首先应指明谐波潮流的方向,即谐波电流是由系统流向用户还是用户流向系统的,以便分清责任。同时采取切实有效的措施,并提出相关治理和监测管理的建议。
二次衍射通常是由于重叠而产生的。二次衍射对衍衬像的影响可以通过做暗场像来辨别,如果是面缺陷导致的二次衍射,也可以通过倾转样品来加以确认。晶格像是相干成像,重叠会产生摩尔条纹,所以在对晶格像做图像的FFT后应该也能看到类似二次衍射斑点的附加斑点。求解惑:我们应该如何区分晶格像做FFT后多出来的附加斑点是由于相变还是二次衍射引起的呢? 重叠对HAADF-Z衬度像会产生什么样的影响?PS:问题有点非主流,做晶格像或者是HAADF-Z衬度像的时候都要求样品要足够薄,通常是不会有这些相关的顾虑的。但是在下的课题和纳米晶相关,晶粒尺寸比较小,在薄区附近也会有些许重叠,实在是无奈QAQ。
中国电网近些年的情况不好,是大家有目共睹的.夏天经常停电、跳闸是常有的事情。可是在停电与跳闸的同时电网里面还存在有一些对设备损害特别大的东西吗?下面就是我要给大家看的一篇关于电力谐波的文章,欢迎大家指导。。。。。。[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=3703]相关附件[/url]
我正在做一个脉冲信号产生器,指标要求是输出信号为方波信号,前、后沿可调,并且输出幅度在50v左右,向专家请教,仪器内部采用什么电路能实现上述指标?
我们厂有喷涂车间但在洗枪过程中产生了很多污染的天拿水,现在是直接废弃有没有什么方法可以过滤二次利用的工艺.
[color=#444444]求《中国计量》第8期《居民用电谐波电能……》一文:[/color][color=#444444][img=,690,377]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/09/201809241414309467_5266_1626275_3.png!w690x377.jpg[/img][/color]
谁有谐波测试仪的通信规约
[align=center][b]化肥二次制样程序[/b][/align][align=center]化工室:高秋荣[/align]一、样品缩分格槽缩分器缩分 将两只接收器分别放在缩分器两侧接收样品的位置,将肥料样品平铺在唐瓷盘内,用两手置样品盘于缩分器加料斗上方,尽可能靠近中心,缓缓地将肥料加入,使其形成一层薄的物料流,颗粒肥料能垂直地、等量地落入所有的格槽中。(注意:一定要使肥料连续加入,否则样品将落在某一接收器中,以致得不到等量的、均匀的、有代表性的样品。)弃去一只接收器中的样品,将另一接收器中样品返回缩分器缩分。注:若需缩分的原始样品较少,则可将第一次缩分所得的两只样品分别重新缩分至需要的样品量。若原始样品量大于缩分器容量,则可将样品先分成若干等份,然后一份一份地进行缩分,丢弃一只接收器中的样品,将另一只接收器中的样品混合在缩分。二、样品研磨取多次所分后的样品约100g,用研钵研磨至全部通过0.50mm孔径筛,混合均匀,置于洁净,干燥瓶,作为分析。三、标签的填写写好样品名称、样品编号、制样日期、制样人、检测项目、样品的生产单位、产品批号等。
最近打算购买扫描电镜,FEI Apreo C可以装几个二次电子探头,Apreo S可以装几个二次电子探头?感谢支持
[center]积分商城回馈用户第二次秒杀通知[/center][center]-- --- - --- -- -- -- -- -- -[/center]为了补偿部分第一次没有秒杀到笔记本的用户,积分商城拟定于本周五(2009.12.4)下午14:00开始第二轮秒杀活动。本次活动依然放出笔记本188个供用户99分兑换,凡没有在11月26日秒杀成功的会员均可参与。活动规则:1.本次活动每位用户只能兑换一件回馈礼品;2.活动结束后积分商城恢复2个月内只能兑换一件礼品的规则,本次兑换记录将作为用户最近一次兑换的时间计入系统;3.如有注册马甲兑换礼品的情况,一经发现除删除其所有兑换记录,所有违规帐号一概作删号处理;4.本次活动所有解释权归仪器信息网所有;
能力验证活动组织方是否给与第二次机会?不二次缴费再重新做一次结果?
Leo 1530VP场发射扫描电镜,2001年安装投入使用,现二次电子检测器SE1不能使用了,据说是闪烁体时间长了,现在只能使用In Lens检测器,有时候感觉会不大方便,大家有碰到这种问题吗?能否修复二次电子检测器呀。
研磨二次分样机优点:高效-可装载7公斤,研磨速度1公斤/分钟安全-只产生较少的发热和灰尘通用-适用于谷物或小颗粒饲料耐久-坚固的全钢结构保证持久的使用时间便于清洁-可避免样品间的交叉污染取样代表性-真菌毒素检测和管理中最重要尤其适用于粮食企业,粮食检测中心。只有小部分受到污染种子均匀分样是不行的,必须将粉碎后的粉末也均匀分开。Pribolab研磨二次分样机完全可以做到。可将7公斤内的样品,完全平均分开。
单向二次展开薄层色谱法单向二次展开薄层色谱法检识挥发油中各成分时,为什么第一次展开所用的展开剂极性最好大于第二次展开所用的展开剂的极性?单向二次展开薄层色谱法有什么优点?
[align=center][b]二次电子与背散射电子成像区别[/b][/align] 二次电子检测器和背散射电子检测器是扫描电子显微镜常用检测器。二次电子检测器成像速度快,在快速扫描时很容易对焦,图像立体感强,背散射电子检测器在快速扫描时图像有带状条纹,对焦成像条件一般依赖二次电子检测器(即在调整好二次电子像参数后启动背散射电子检测器成像)。 散射电子检测器一般是被嫌弃的,因为它成像分辨率低(图1)。造成分辨率不同的原因是二者检测的信号源不同。二次电子(SE)的能量小于50ev,二次电子信号主要来自试样表层,深度大约5~10 nm,反映试样表面的形貌。背散射电子(BSE)是受到试样原子核的弹性和非弹性散射而被反射回的一部分入射电子,能量大于二次电子(SE)(图2)[sup][/sup]。一般来说,背散射电子的能量大于50ev,背散射电子反映试样表面50~200 nm深度的信息,激发区域大于二次电子。[img=,690,282]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261522354238_7646_2265735_3.jpg!w690x282.jpg[/img][b]图1 金纳米粒子二次电子图像(A)和背散射电子图像(B)。[/b]背散射电子图像分辨率低于二次电子图像(图中红色箭头指示处)。JEOL-7800F扫描电子显微镜,工作距离10mm。[img=,690,518]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261523412701_7969_2265735_3.png!w690x518.jpg[/img][b]图2 当加速电子轰击分析物激发的各种信号[sup][/sup][/b]。二次电子(SE)和背散射电子(BSE)是扫描电镜成像的基础信号。 二次电子和背散射电子有一定的方向性,背散射电子更加靠近入射法线。一般二次电子的探测器装在电镜样品仓侧面(在物镜内部,小工作距离的高分辨二次电子探头不在这里讨论),背散射探头的探测晶体直接安装在物镜下面,中心与物镜光学中心重合。探测器的安装位置和电子不同的反射角度会影响图像的明暗。图3是硅球的扫描电镜图。二次电子图像的有较大阴影,球的中心位置阴影最明显,与之相反背散射电子图像球的中心位置最亮。[img=,690,266]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261527144207_5694_2265735_3.png!w690x266.jpg[/img][b]图3 硅球的二次电子图像(A)和背散射电子图像(B)[/b]。JEOL-7800F扫描电子显微镜,工作距离10mm。 背散射电子检测器也有自己的独特之处,有的时候可以成功逆袭二次电子探测器。背散射电子图像具有一定的Z轴衬度,与晶体取向有关,电子强度与物质组成有关,可以显示样品内部结构,也就是说背散射电子图像可以用来分析复合材料。在试验条件相同的情况下,背散射电子信号的强度随分析物[b]平均原子序数[/b]增大而增强,在样品表层平均原子序数较大 的区域,产生的背散射信号强度较高[sup][/sup]。目前商品化的背散射电子检测器可以区分元素周期表相邻的两个元素。图4显示在基底上镀镍(28号元素)和铜(29号元素),在二次电子图像上几乎看不出是两个不同的镀层,能谱分析显示两个镀层有明显的界限,背散射电子图像不仅可以完美区分两个镀层,对镀层的缺陷也比背散射电子图像更加明确的呈现出来。[img=,690,349]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807261530426736_7830_2265735_3.png!w690x349.jpg[/img][b][b]图4 不同镀层的扫描电子显微镜分析[/b]。A,二次电子图像;B,EDS能谱图像;C,背散射电子图像。JEOL-7800F扫描电子显微镜,工作距离10mm。牛津(oxford)能谱仪。[/b] 目前扫描电镜分析已经逐渐脱离单纯的形貌分析,组成和相分析更加有助于我们深刻理解材料的构成和性质。我们在常规扫描电镜实验中,调用一下常常被忽略的背散射电子检测器,在几乎不增加工作量的情况下也许会有意外的收获。[b]参考文献[/b] 1.JEOL指导手册,A Guide to Scanning Microscope Observation 2.Bozzola, J.J., Russell, L.D., 1999.Electron Microscopy: Principles and Techniques for Biologists, 2nd ed. Jonesand Bartlett Publishers, Boston, NY.
二次离子质谱仪原理简介二次离子质谱仪(Secondary Ion Mass Spectrometry, SIMS)又称离子探针(Ion Microprobe),是一种利用高能离子束轰击样品产生二次离子幵迚行质谱测定的仪器,可 以对固体或薄膜样品迚行高精度的微区原位元素和同位素分析。由于地学样品的复杂性和对 精度的苛刻要求,在本领域内一般使用定量精度最高的大型磁式离子探针。该类型的商业化 仪器目前主要有法国Cameca 公司生产的 IMS1270-1300 系列和澳大利亚ASI 公司的 SHRIMP 系列。最近十年来,两家公司相继升级各自产品,在灵敏度、分辨率及分析精度 等方面指标取得了较大的提升,元素检出限达到ppm-ppb 级,空间分辨率最高可达亚微 米级,深度分辨率可达纳米级。目前,大型离子探针可分析元素周期表中除稀有气体外的几 乎全部元素及其同位素,涉及的研究领域包括地球早期历叱不古老地壳演化、造山带构造演 化、岩石圀演化不地球深部动力学、天体化学不比较行星学、全球变化不环境、超大型矿床 形成机制等。因而国内各大研究机构纷纷引迚大型离子探针(北京离子探针中心的SHRIMP II SHRIMPIIe-MC、中科院地质不地球物理研究所的 Cameca IMS-1280、Cameca IMS-1280HR 和NanoSIMS 50L、中科院广州地球化学研究所的 Cameca IMS-1280HR、 中核集团核工业北京地质研究院的 IMS-1280HR),大大提高了国内微区分析的能力。 本实验室配备了Cameca 公司生产的IMS1280 离子探针和其升级型号 IMS1280HR。 两台仪器的基本原理及设计相同,升级型号IMS1280HR 主要在磁场设计上有所改迚,具 有更高的质量分辨率和传输效率。该型仪器从功能上可分为四部分,如图一所示:一次离子 产生及聚焦光路(黄色部分)、二次离子产生及传输光路(蓝色部分)、双聚焦质谱仪(粉 色部分)和信号接收系统(紫色部分)。Cameca 离子探针可以类比为一台显微镜,离子源 相当于显微镜的光源,传输光路相当于物镜,质谱仪相当于滤镜,而接收器相当于目镜或照 相机。 图一, IMS1280/HR 型离子探针原理示意图 一次离子部分包含了两个离子源分别是可以产生O 离子的双等离子体离子源(Duo Plastron Source)和产生Cs 离子的热电离铯离子源(CsIon Source),一 般分别对应地学领域分析中的正电性元素(如 Pb、U、Th、REE、Li、Ca 等)和负电性元 等)。两个离子源由软件控制选择,所产生的离子通过高压(一般为数千伏特)加速后迚入一次离子质量过滤器(PBMF)迚行质量筛选,常用的一次离子有 16 16O2 133Cs 离子。后续的一次离子光路通过调整离子透镜Lens2,Lens3 和Lens4 电压可以获得两种照明方式:均匀照明(科勒照明或平行光照明)和高斯照明。一次离子光路原理如图二所示。 均匀照明模式使用离子透镜Lens2 将一次离子束调整为“平行光”,幵穿过位于其后 的一次束光阑(PBMF_Aperture),再通过离子透镜Lens4 将该光阑成像到样品表面。在 该模式下,离子束的直径由PBMF_Aperture 的大小决定,由于该光阑受到离子束的剥蚀 而逐渐变大,因此实际上这种模式的离子束直径是随时间丌断变化的,对空间分辨率丌太敏 感的应用可以使用该模式。实验室的常规定年就使用了这种照明模式,由于其离子束密度均 匀,在样品表面留下的剥蚀坑为椭囿形的平底坑。 图二 一次离子光路原理示意图 在高真空条件下,带有数千电子伏特(eV)的高能带电离子轰击固体样品的表面时,部分 一次离子注入到固体内部并不其路径上的样品原子发生弹性或非弹性碰撞。通过碰撞而获得能量 的内部原子又不其周围的原子再次进行碰撞并产生能量传导,这个过程称为级联碰撞。最终,部 分样品内部电子、原子或分子获得了足够的能量逃逸出样品表面,产生了溅射现象。在溅射出的 各种微粒中,有小部分发生了电离,产生了二次离子。这些二次离子被样品表面的+10KV到 -10KV的高压加速,通过离子透镜聚焦后进入双聚焦质谱仪进行质量筛选。溅射及加速示意图 请见图三。 高斯照明模式在PBMF之后使用了三个离子透镜:Lens2、Lens3和Lens4。其中Lens2 不Lens3将离子束汇聚,L4将汇聚后的离子束聚焦到样品表面,形成束流密度中心高周围低 的高斯分布。这种模式下,在样品表面产生的剥蚀坑是接近囿形的V型坑。这种模式下离子 束的直径主要受到L2不L3透镜电压的影响,而对光阑的剥蚀效应很小,因此可以长时间保 持离子束直径丌变。实验室常规的稳定同位素分析以及空间分辨高于10微米的小束斑定年 分析都采用了高斯照明模式。 丌同元素的二次离子产率相差巨大,而且每种元素在丌同基体中的产率也丌尽相同,甚 至同一元素的同位素之间在丌同的基体中也表现出丌固定的产率(基体效应)。在实际分析 时实测值不理论值会产生较大差异。因此,要使用离子探针进行高精度的元素、同位素分析, 必须使用不被测样品成分和结构一致的标准物质进行校正。而标准样品的稀缺性也成为制约 和影响离子探针分析的瓶颈。目前,本实验室目前已开发了锆石氧同位素标准物质 (Penglai)、方解石碳-氧同位素标准物质(OKA)、锆石Li同位素标准物质(M257)、锆 石年龄标准物质(Qinghu)等。 图三,离子探针溅射示意图 二次离子产生后迚入离子传输光路,该部分相当于显微镜的物镜,通过调节该“物镜” 的放大倍数,配合后续的光阑及狭缝的调整,可在质量分辨率确定的条件下对仪器的传输效 率迚行优化,保证分析精度。入口狭缝是传输光路和质谱仪的分界面。离子束通过传输光路 聚焦后,在入口狭缝处汇聚。调节入口狭缝的宽度可控制迚入质谱仪的离子束宽度,从而控 制质谱仪的质量分辨率。质量分辨率要求越高,入口狭缝所对应的宽度就越窄,二次离子信 号的强度损失也就越多。因此,在满足分析要求的前提下,尽量使用较低的质量分辨率。离 子探针分析中,样品表面溅射出的二次离子组成非常复杂,包括了单原子离子、分子离子、 多电荷离子、复杂聚合物离子等,对质量分辨率要求极高。为了兼顾离子探针的质量分辨率 和传输效率,必须采用大磁场半径的设计。该型离子探针的最低质量分辨率为~900,而最 高可用质量分辨率大于20000. 磁式质谱仪主要利用运动离子在磁场中的受力偏转实现对特定质量电荷比值的离子的 选择。磁式离子探针一般使用双聚焦磁式质谱,可以实现速度聚焦和方向聚焦,在二次离子 能量分布范围较大的情况下实现高质量分辨率和高传输效率。双聚焦质谱仪由静电分析器和 扇形磁场质量分析器组成,当二者的能量色散在焦平面上相互抵消时即实现了双聚焦。 IMS1280/HR 离子探针的静电场及磁场半径均为585mm,在质量分辨率5000 的条件下, 其传输效率90%。 离子经过质谱仪的质量色散后迚入离子接收系统。该型仪器的接收系统分为三个部分: 具有5 个接收位置,共7 个接收器的多接收系统;具有三个接收器的单接收系统和微通道 板成像系统。多接收系统能够同时接收的最大的质量差异为17%,最小质量差异为~0.4%, 是典型的同位素质谱配置。5 个接收位置可在各自轨道上沿聚焦面移动,根据被测同位素的 信号强度可选择安装法拉第杯或电子倍增器。最外侧的两个接收位置还分别额外加装了一个 法拉第杯,增加配置的灵活性,如图四所示。多接收器分析可以提高效率,并能抵消一部分 因为一次离子或仪器其他参数波动引起的分析误差,是提高分析精度的最直接手段。实验室 的高精度稳定同位素分析(氧同位素、碳同位素及硫同位素等)都是用多接收器的。目前本 实验室两台离子探针采用了丌同的接收杯配置,其中一台偏重于稳定同位素分析,在多接收 器中安装了多个法拉第杯,而另一台则偏重微量元素尤其是Pb 同位素分析,主要配置为电 子倍增器。单接收系统具有一个工作在离子计数模式下的电子倍增器和高低两个丌同量程的 法拉第杯,组成了具有10 动态接收范围的大量程接收系统。对于质量范围超过17%的分析,一般使用单接收系统,例如传统的U-Pb 定年分析,其需要测量的质量数从196-270, 使用的是单接收系统中的电子倍增器收集所有信号。 使用微通道板成像时,仪器工作在离子显微镜模式下,成像的分辨率取决于二次离子光 路的设置,而不一次离子束的直径无关。由于微通道板性能的制约,这种模式一般只用于辅 助的定性判断和仪器参数的调整,而丌用于定量分析。离子探针还有一种二次离子扫描成像 模式。类似于扫描电子显微镜的工作原理,通过同步一次离子的扫描位置和电子倍增器的接 收时间,可以将电子倍增器测量到的信号强度不其在样品上的位置对应起来,从而重构出经 过质量筛选的离子分布图像。该图像的分辨率取决于一次离子束的直径,可用于元素、同位 素二维分布分析
合肥市二次供水管理办法 合政〔2007〕31号 各县、区人民政府,市政府各部门、各直属机构: 现将《合肥市二次供水管理办法》印发给你们,请认真贯彻执行。二○○七年三月三十日 合肥市二次供水管理办法 第一条 为加强二次供水管理,保证二次供水的水质、水压和供水安全,保障公众身体健康,根据《合肥市城市供水条例》,制定本办法。 第二条 本市城市公共供水区域范围内二次供水设施的设计、施工、监理、管理维护、清洗消毒、使用以及对二次供水的监督管理,适用本办法。 第三条 本办法所称二次供水是指从城市公共供水管道取水后,另行通过贮存、加压等设施为用户提供生活、生产用水。 本办法所称二次供水设施是指为二次供水设置的水箱、储水池、水泵、供水泵房、电机、气压罐、电控装置、水处理设备、消毒设备、供水管道、阀门等设施。 第四条 市、县建设行政主管部门负责二次供水的监督管理工作。卫生行政主管部门负责二次供水的卫生监督管理工作。 规划、房地产、价格、质量技术监督等部门应当按照规定的职责分工,负责二次供水的有关监督管理工作。 第五条 新建、扩建、改建工程项目,水压要求超过国家规定的标准时,应当设置二次供水设施。二次供水设施应当与主体工程同时设计、同时施工、同时交付使用。 二次供水设施的工程建设投资,应当包括在建设工程项目总概算中。 第六条 二次供水设施的设计、施工、监理应当执行国家、省相关技术标准和规范,由具有相应资质的单位承担。 第七条 新建住宅供水工程设计方案中必须包括水表出户、一户一表、计量到户的设计内容。 二次供水设施设计方案中应当包括防止污染的具体措施,确保供水安全。 建设单位应当征求供水企业对二次供水设施设计方案的意见,设计方案应当满足与城市公共供水管网连接的基本条件和管理要求。 第八条 二次供水设施所用材料必须符合国家质量标准,不得使用国家明令禁止和淘汰的管材、配件和设备。 第九条 二次供水工程竣工后,建设单位应当组织供水企业参与验收。 验收合格的二次供水工程,建设单位应当组织冲洗、试压、消毒,经质量技术监督部门认证的水质检测机构检测合格后,方可投入使用。 第十条 二次供水设施由产权人或其委托的管理维护单位管理维护。 新建住宅工程的二次供水设施经验收和水质检测合格后,应当交由供水企业统一管理维护。 第十一条 已建住宅的二次供水设施需要进行更新改造的,在保修期内,由建设单位负责;超过保修期的,由产权人负责。 实行二次供水的已建住宅,其二次供水设施和小区庭院管网经检测合格,并按规定完成水表出户改造的,按照自愿原则,可以移交给供水企业进行统一管理维护,供水企业应当予以接收。 第十二条 二次供水设施移交给供水企业统一管理维护的住宅,其楼面层高16米以上的部分,水价实行全市统一定价,由市价格行政主管部门按照价格法的相关规定确定,水价包括二次供水设施的日常管理维护和运行费用、大修和更新改造费用等。 二次供水设施未移交给供水企业统一管理维护的已建住宅,物业管理维护单位应当公示水费计收的相关成本和费用,价格行政主管部门应当加强监督检查。产权人要求移交的,物业管理维护单位应当予以配合。 第十三条 二次供水设施管理维护单位(以下简称管理维护单位)应当保证二次供水设施完好,符合国家有关标准和技术规范的要求,保证水质、水压合格。在设施发生故障时,管理维护单位应当立即进行抢修。 直接从事二次供水管理维护的人员必须进行专业培训和健康检查,取得体检合格证后方可上岗。 第十四条 管理维护单位应当定期进行水质常规检测,每季度不得少于1次。 管理维护单位不具备自行检测能力的,应当委托质量技术监督部门认证的水质检测机构进行检测。 第十五条 管理维护单位应当根据水质情况定期组织对二次供水设施进行清洗消毒,每半年不得少于1次。 从事二次供水设施清洗消毒的单位应当具备清洗消毒的相应条件,其从事清洗消毒工作的专业人员,必须经卫生知识培训和健康检查,取得体检合格证后方可上岗。 二次供水设施清洗消毒完毕,经检测合格,方可投入使用。检测结果应当向相关用户公布。二次供水水质受到污染时,管理维护单位应当立即组织清洗消毒。 管理维护单位应当建立二次供水设施清洗消毒档案。 第十六条 卫生行政主管部门应当加强对二次供水水质的监督检查,抽检每年不少于1次。 第十七条 管理维护单位应当保证二次供水设施不间断供水。 由于工程施工、设备维修等原因需要停水或降压供水的,管理维护单位应当提前24小时告知用户做好储水准备;因设备故障或紧急抢修不能提前通知的,应当在抢修同时通知用户。 因水质污染或水质不符合国家卫生标准需要停水的,管理维护单位应当及时告知用户,向建设和卫生行政主管部门报告,并在12小时内采取措施及时处理。 超过24小时不能恢复供水的,管理维护单位应当采取应急供水措施,解决居民基本生活用水。 第十八条 管理维护单位有下列行为之一的,由建设行政主管部门责令改正,可以并处500元以上2000元以下的罚款: (一)供水水质、水压不符合国家规定标准的; (二)未按规定检修二次供水设施或在二次供水设施发生故障后不及时采取修复措施的; (三)擅自停水或者未履行停水通知义务、未按规定采取应急供水措施的; (四)未按规定对二次供水设施进行清洗消毒的。 第十九条 管理维护单位安排健康检查不合格的人员直接从事二次供水管理维护的,由卫生行政主管部门责令改正,可以并处200元以上1000元以下的罚款。 第二十条 设计、监理单位未按相关技术标准和规范进行二次供水工程设计、监理的,由建设行政主管部门责令改正,可以并处5000元以上2万元以下的罚款。 施工单位在二次供水工程中使用不符合国家标准的设备、管材、配件的,由建设行政主管部门责令改正,并处以工程合同价款2%以上4%以下的罚款。 第二十一条 自建设施供水区域内二次供水管理可以参照本办法执行。 第二十二条 本办法自2007年4月1日起施行。
各位: 薄层作二次展开时,两次用的展开剂极性不同的话,先用哪个?
[align=center][b]双光子激光扫描显微镜的检测模式及其在生物医学领域的应用[/b][/align][align=center][font=宋体]刘皎[/font][sup]1[/sup],吴晶[sup]1[/sup][/align][align=center]1. [font=宋体]北京大学医药卫生分析中心,北京,[/font]100191[/align][b][font=黑体][[/font]摘要] [/b]双光子激光扫描显微镜(two-photon laser scan microscope, TPLSM[font=宋体])具有低光毒性、高时空分辨率、高信噪比等优点,结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术,广泛应用于脑科学、免疫学、肿瘤、胚胎发育等生物医学相关研究领域。本文结合作者所在的北京大学医药卫生分析中心共聚焦平台的工作经验,概述了[/font]TPLSM适用的样本、检测模式以及在生物医学领域的应用,以期为相关科研技术人员提供参考。[b][font=&][Abstract][/font] [/b]Two-photon laser scan microscopy (TPLSM) has the advantages of low phototoxicity, high spatial and temporal resolution, and high signal-to-noise ratio.TPLSM combines laser scanning confocal microscopy with two-photon excitationtechnology and it is widely used in brain science, immunology, tumor, embryodevelopment and other biomedical related research fields. Based on the author'swork experience in the confocal center of Peking University Medical and HealthAnalysis Center, this paper summarizes the applicable samples, detection modesand applications of TPLSM in the biomedical field, in order to provide referencefor related scientific researchers and technicians.[b][font=黑体][[/font]关键词] [/b]显微镜双光子,检测模式,应用[b]1 引言[/b]双光子激发技术的基本原理是在高光子密度情况下,荧光分子可同时吸收2个长波长光子,产生一个一半波长光子去激发荧光分子的相同效果。双光子激光扫描显微镜(two-photon laser scan microscope, TPLSM[font=宋体])在激光扫描共聚焦显微镜的基础上,以红外飞秒激光作为光源,长波长的近红外激光受散射影响小,易穿透标本,可深入组织内部非线性激发荧光,对细胞毒性小且具有高空间分辨率,适合生物样品的深层成像及活体样品的长时间观察成像[/font][1]。使用高能量锁模脉冲激光器,物镜焦点处的光子密度最高,在焦点平面上才有光漂白及光毒性,焦点外不损伤细胞。双光子效应只发生在焦点处,所以双光子显微镜无需共聚焦针孔,也能做到点激发点探测,提高了荧光检测效率[2]。[b][/b]双光子激光扫描显微镜显微镜可以通过XYZ,XYT,XYλ,XYZT,XYλT等多种模式实现多维成像,亦可进行更复杂实验的拍摄,比如二次谐波成像(Second Harmonic Generation Imaging,SHG[font=宋体])、双光子荧光寿命成像([/font]Two-photon Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy, TP-FLIM[font=宋体])、荧光寿命[/font]-[font=宋体]荧光共振能量转移成像([/font]FluorescenceLifetime - Fluorescence Resonance Energy Transfer Imaging, FLIM-FRET[font=宋体])等实验以满足对样品的定性、定量、定位、共定位等多维度多功能的研究。[/font]TPLSM已成为生命科学各领域重要的研究工具,可在细胞及亚细胞水平对活体动物的神经细胞形态结构、离子浓度、细胞运动、分子相互作用等生理现象进行直接的长时间成像监测,还能进行光激活染及光损伤等光学操纵,广泛应用于脑科学、免疫学、肿瘤、胚胎发育等生物医学相关研究[3-5]。本文拟通过按TPLSM常见的检测模式分别阐述其在生物医学领域的应用,以其为相关科研技术人员提供参考。[b]2. TPLSM适用的样本[/b]TPLSM适用的样本非常广泛,从液体、固体等形式的材料或制剂、细菌、细胞、细胞团、类器官、组织切片、到各种模式动物(如线虫、果蝇、斑马鱼、小鼠、大鼠、兔、猴等)及其[font=宋体]脑、脊髓、肝脏、肺、皮肤等器官[/font],都可以通过搭载不同载物台进行测试。相对于传统激光扫描共聚焦显微镜200μm的成像深度极限,双光子显微镜成像深度可达800μm,如果是透明化样品可更厚。TPLSM尤其适合活体动物成像,且比小动物荧光成像有更高的分辨率和信噪比,一般TPLSM的XY轴分辨率为200 nm左右,Z轴分辨率为300 nm左右。[b]3. TPLSM的检测模式[/b]3.1 二维成像模式TPLSM可以实现点扫描、点探测,得到生物样品高反差、高分辨率、高灵敏度的二维图像,从而获得细胞/组织等光学切片的物理、生物化学特性及变化。也可以对所感兴趣的区域进行准确的定性、定量及定位分析。激光扫描显微镜的zoom功能,可以用来调节扫描区域的放大倍数。但受物镜分辨率的限制,一味的增大zoom值,不能得到相应的高清图像,需根据实际情况参考piexl size进行设定。TPLSM可以实现XY、XZ或XT的二维成像模式,XT线扫会在后文与XYT时间序列成像一起进行举例说明(图2b)。3.2 三维成像模式3.2.1 Z轴序列三维成像(XYZ)[align=left]TPLSM可沿Z轴方向通过电动载物台的连续扫描对样品进行无损伤的光学切片(XYZ),获得三维立体图像。同理,通过沿Y轴方向连续扫描,可获得连续的XZY图像。如图1所示TPLSM[font=宋体]可以顺利观察到可以观察到血管清晰形态结构:单个胚胎的胎盘微血管(图[/font]1a)、肝脏血窦微血管(图1b)和后肢微血管(图1c)[6]。[/align][align=center][img=,690,230]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151626576232_4807_3237657_3.png!w690x230.jpg[/img][/align][align=center]图1(a)胚胎胎盘微(b)肝脏血窦和(c)后肢的微血管三维成像[/align]3.2.2 时间序列扫描模式(XYT)[align=left]按照一定的时间间隔重复采集,则可实现对该样品的实时监测(XYT)。此类实验可观察组织区域内特异荧光探针标记的单个细胞或细胞内不同部位接受刺激后的整个变化过程。[font=宋体]如图[/font]2[font=宋体]([/font]a[font=宋体]),可以根据微血管[/font]XYT[font=宋体]序列扫描的成像结果中某一血细胞在前后两张图的位置移动和这两帧图的扫描时间间隔计算血流速度。若血流速度很快,[/font]XYT扫描不足以捕捉实际流速,可以使用XT线扫计算。如图2(b),微血管XT扫描图像中绿色荧光背景里的黑色线条代表单个血细胞的流动轨迹,每条线条的横坐标代表血细胞移动的距离(distance / μm[font=宋体]),纵坐标代表此段时间([/font]time/ ms[font=宋体]),根据这两个数据可以计算出单位时间内血细胞的流动速度([/font]μm / ms)[6]。[/align][align=center][img=,690,262]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/12/202212151627102569_8367_3237657_3.png!w690x262.jpg[/img] [/align][align=center]图2 微血管(a)XYT扫描结果和(b)XT一维扫描结果图像计算血流说明示意图[/align]3.2.3 光谱扫描模式(XYλ/XYΛ)通常配置有可调节接受范围的检测器的TPLSM,可以实现从400nm-800nm的发射波谱扫描。通过配置具有连续可调波长的双光子激光器,还可以实现750nm-1300nm激发波谱扫描。这对于开发研制特殊染料探针的课题来说是很方便、全面的检测功能。3.3四维成像模式(XYZT/XYλT/XYΛT)基于上述三维成像模式,结合时间序列扫描,可以实现TPLSM的四维成像。3.4二次谐波成像(SHG)SHG是一个二阶非线性过程,且一般为非共振过程,适合富含胶原纤维的样本成像,如角膜、鼠尾肌腱、皮肤等。生物组织产生的二次谐波最主要的转换源自胶原,不同生物组织中的二次谐波信号强弱与组织中的胶原含量密切相关,含胶原丰富的组织包括结缔组织和肌肉组织等二次谐波信号也比较强,另外还有一些能产生强二次谐波的生物结构是微管,如细胞分裂中纺锤体。对于具有中心对称性的生物结构,如果局部中心对称性的破坏也会产生二次谐波:在两中心对称介质的界面,不同物态分子的相互作用使局部微观场特性在交界面(如细胞膜)发生突变,从而产生界面二次谐波[7]。除了动物组织外,一些含有特殊分子结构的植物组织也能产生二次谐波。二次谐波显微成像具有高空间分辨率、深成像深度、低损伤、以及对结构对称性的高度敏感性的特点,如果能与其他成像技术结合,将成为生物样品研究的有力工具[8]。3.5双光子荧光寿命成像(TP-FLIM)[9]FLIM技术是研究细胞内生命活动状态的一种非常可靠的方法。荧光寿命是荧光团在返回基态之前处于激发态的平均时间,是荧光团的固有性质,因此其不受探针浓度、激发光强度和光漂白效应等因素影响,且能区分荧光光谱非常接近的不同荧光团,故具有非常好的特异性和很高的灵敏度。此外,由于荧光分子的荧光寿命能十分灵敏地反映激发态分子与周围微环境的相互作用及能量转移,因此FLIM技术常被用来实现对微环境中许多生化参数的定量测量,如细胞中折射率、黏度、温度、pH值的分布和动力学变化等,这在生物医学研究中具有非常重要的意义。目前FLIM技术在细胞生物学中一些重要科学问题的研究、临床医学上一些重大疾病的诊断与治疗研究以及纳米材料的生物医学应用研究等方面均有广泛应用,并取得了许多利用传统的研究手段无法获取的数据。FLIM检测需要脉冲激光,TPLSM带有的高能量锁模脉冲激光器可以满足激发要求。3.6荧光寿命-荧光共振能量转移成像(FLIM-FRET)[10]传统的FRET过程分析通常是基于荧光强度成像来实现,分析的结果容易受光谱串扰的影响。而将FLIM技术应用于FRET过程分析,利用FLIM技术可定量测量这一优势,可非常灵敏地反映供体荧光分子与受体荧光分子之间的能量转移过程。当受体分子与供体之间的距离10nm时,供体的能量转移到受体,受体从基态发生能量跃迁,从而影响供体的荧光寿命。与没有受体分子的时候相比,发生FRET的供体分子的荧光寿命降低。因此,FRET-FLIM联合能够实时监测生物细胞中蛋白质的动态变化,如蛋白质折叠、分子间(蛋白-蛋白,蛋白-核酸)相互作用和细胞间信号分子传递、分子运输以及病理学研究等。[b]4 结论和展望[/b]综上,TPLSM应用灵活,具备多种检测模式,适用于多种样本,亦可实现多种实验目的,如荧光的定量、定性、定位、共定位,动态荧光的测定等。一些特殊的实验模式,将TPLSM在生物医学领域的应用进一步扩大。通过结合其他技术(多手段联合拓展,如膜片钳、原子力显微镜、光电联用等),TPLSM必将成为助力生物医学领域研究的有力工具。双光子荧光成像由于具有天生的三维层析能力以及深穿透能力,在活体生物组织成像上广受欢迎。双光子显微镜镜下空间增大后,可广泛应用于猴、大小鼠、兔等较大的模式动物的活体成像。且可结合电生理技术、光遗传技术,广泛应用于麻醉、清醒或运行行为等生理状态下的动物脑科学神经相关研究,在单细胞、单树突精度上对神经元群体活动进行监控。如结合膜片钳技术,对活体脑组组急性切片神经元进行双光子深层成像[11];结合光遗传技术,实现视觉皮层同一神经元和神经元群体的稳定操控和长期多次重复记录[12];对在健身球上移动的头部固定小鼠小脑进行成像,探讨觉醒状态和运动行为对胶质网络中钙离子的激发的影响[13];结合多种疾病模型,探讨大脑皮层神经元及胶质细胞活性的改变及作用等[14]。随着多种双光子显微镜系统的出现,双光子显微镜成像技术将以其实时、无损地探测、诊断及检测能力,在生物医药及临床医学应用中发挥更大作用。[b]参考文献[/b][1] [font=宋体]李娟[/font],[font=宋体]张岚岚[/font],[font=宋体]吴珏珩[/font].[font=宋体]双光子显微镜的应用优势与维护要素[/font][J].[font=宋体]中国医学装备[/font],2021,18(12):158-163.[2] HendelT,Mank M, Schnell B,et al.Fluorescence changes of genetic calcium indicatorsand OGB1correlated with neural ac tivity and calcium in vivo and in vitro[J].JNeurosci, 2008,28(29):7399-7411.[3] DolginE.What leva lamps and vinaigrette can teach us about cellbiology[J].Nature,2018,555(7696):300-302.[4] Noguchi J,Nagaoka A, Watanabe S,et al.in vivo two-photon uncaging of glutamate revealingthe structure-function relatio nships of dendritic spines in the neocortex ofadult mice[J]. 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粒度测试有一个不太好定性的问题,那就是一次粒径和二次粒径问题。对于多数粉体颗粒,它有一定的大小,广义角度看单个颗粒是一个个体。但是从严谨角度说它依然是个可再分的由更小颗粒组成的群体。这时候问题就产生了,我们对颗粒进行粒度分析时,到底是希望测试粉体被分散到什么程度时的粒度分布呢?举个例子:某硫酸钡粉体,电镜拍摄的照片显示,单晶颗粒都在几百纳米级别,但是激光粒度仪测试结果微米级别的粒度分布,相差一个数量级。有些测试人员片面认为照片拍摄的东西绝对可靠,是粒度仪测试不准。这样判断过于主观了。这类问题晶粒如果处理后的样品体系中,超微粒子是均匀的,检测方法一般是一次粒度分析。如直观观测法,主要采用扫描电镜(SEM)、透射电镜(TEM)、隧道扫描电镜(STM)、原子力显微(AFM)等手段观测单个颗粒的原始粒径及型貌。但如果处理后的样品微粒是不均匀的,且团聚体是不易分散体,此时电镜法得到的一次粒度分析结果一般很难代表实际样品颗粒的分布状态。因此,对处理后的物料体系必须作二次粒度统计分析。目前,较先进的3种典型方法按原理上可分为高速离心沉降法、激光粒度分析法和电超声粒度分析法。 这个问题其实也是一个粉体分散问题,测试粒度分布时,到底使用什么手段分散?分散到什么程度才是正确的?希望各路高手一起探讨,也让小弟多开阔眼界。