电穿孔完全系统

成果名称低压直流细胞电穿孔微流芯片系统单位名称北京大学联系人马靖联系邮箱mj@labpku.com成果成熟度□研发阶段 &radic 原理样机 □通过小试 □通过中试 □可以量产成果简介：电穿孔（电转染）是一种利用外加电场击穿细胞膜，使平时不能穿透细胞膜的大分子(核酸、蛋白质、药物等)进入细胞的技术。电穿孔技术已在细胞实验、基因治疗等领域广泛应用。但目前的技术均需要金属电极，金属电极产生的金属离子渗出、气泡等对细胞有不利影响，降低了转染效率。此外，高压脉冲电源的使用使得目前此类仪器操作复杂、价格居高不下。这些都大大限制了电穿孔技术的广泛应用。针对上述问题，北京大学工学院熊春阳课题组采用微流芯片技术，实现一种不需要微电极，仅利用简单低压直流电源即可实现的细胞电穿孔技术。这一技术将大大降低仪器制造成本，简化操作流程，并可以进一步发展为高通量、高效率的细胞电转染系统。2009年，熊春阳副教授申请的&ldquo 低压直流细胞电穿孔微流芯片系统&rdquo 项目得到了第二期&ldquo 仪器创制与关键技术研发&rdquo 基金的支持。课题组利用微流体中因尺度效应而产生的层流，用高电导率的液体来代替电极，将细胞悬浮液通过流动聚焦技术夹在高电导率溶液之间，形成三个平行流动的稳定流层。通过将电极与两侧的高电导率溶液相连，再与直流电源相连，电压会大部分施加在中间电阻较大的细胞流层。由于微流尺度较小，即使很低的电压都可产生较大的场强，从而可以实现细胞电穿孔。这项工作在基金的支持下得以顺利的推进，通过相关设备的购置和实验测试，课题组完成了微流控芯片的设计和加工、液体导电层的引入、不同类型细胞电转染参数的优化等工作。该项目目前已经顺利结题，相关成果已经申请中国专利，正在申请国际专利。应用前景：该项目实现一种不需要微电极，仅利用简单低压直流电源即可实现的细胞电穿孔技术。这一技术将大大降低仪器制造成本，简化操作流程，并可以进一步发展为高通量、高效率的细胞电转染系统。由于课题组具有完全的自主知识产权，这一工作可以打破目前国外同类仪器建立的技术壁垒，具备较强的市场推广前景。

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近日，东胜创新主办的“电穿孔、电融合技术的应用”巡回讲座分为三场依次在广州、上海、北京举行。在广州的专场已于10月21日圆满结束，来自美国BTX公司的技术专家Robin E. Butler介绍了“Electroporation and Electrofusion——A methodology for efficient gene transfer in In vivo, In Utero,96 Well and Fusion applications”。 接下来的两场分别将于 10月22日下午14:30—17:00在上海中国科学院营养所35号楼2楼多功能厅； 10月24日上午 9:00—11:30在北京中国农业大学新综合楼马协三层举行。 上海的专场还将增加由中国科学院神经科学研究所的丁玉强研究员介绍“在体子宫内胚胎电转技术——在神经科学研究中的应用”；北京的专场还将增加由中国农业大学生命科学学院的卫恒习介绍“电融合技术在转基因动物克隆中的应用”。 背景介绍： 一、电穿孔、电融合技术的应用范围： 哺乳动物细胞或组织的转染、细菌和酵母的转化、动物细胞融合、活体/离体基因或药物导入、卵内基因或药物导入、核转移、植物组织和原生质体的转化、杂交瘤生成、胚胎操作、植物原生质体融合、蛋白质电整合/电插入。 二、美国BTX公司——电穿孔、电融合专家 自1983年成立以来，以电穿孔仪、电融合仪为主要产品，开发了电穿孔、电融合、转染、转化等方面的众多最新技术和产品，成为电穿孔、电融合领域全球领先的专业厂家。 三、东胜创新BTX产品链接 http://www.eastwin.com.cn/product_btx.asp

哈佛仪器网络讲堂第二期- 高效基因导入-电穿孔在生命科学研究中的应用，将于2014年7月8日14：00开课。报名网址：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/1086 ， 欢迎参与研讨!本期简介：现代分子生物学发展的突飞猛进，随着人类基因组计划的完成，21世纪生物学研究已经进入了基因和DNA的微观量级。在这样的大背景下，电穿孔技术经过不断发展正展示出愈发重要的价值和地位。电穿孔技术是利用电场作用使细胞膜的脂双层膜结构进行重新排列，形成许多微小的孔径，从而是外源分子可以通过细胞膜进入细胞的一种重要分子生物学技术。如今被广泛应用于生物医药领域，实现基因和药物导入特定的细胞、siRNA基因沉默和基因疗法、细胞融合和单克隆抗体制备以及核转移和动物克隆。与其他化学和生物导入方式相比，电穿孔有着得天独厚的优势，对导入的外源分子大小没有限制、无细胞毒性、具有很高的实验可重复性并且操作简单快捷。配合专业设计的多样性电极，电穿孔技术的应用对象也拓展至体外悬浮细胞、活体动物、离体组织、子宫内胚胎、卵内胚胎和贴壁细胞，并且可以进行大规模96孔高通量应用，从而使得电穿孔技术的应用领域得到了无限扩展，新的应用技术不断涌现......

据美国物理学家组织网10月16日报道，美国俄亥俄州立大学科学家开发出一种名为“纳米隧道电穿孔”的新技术，或称为NEP。利用其给细胞注射基因治疗药剂时，不用针头，而是用电脉冲通过微小的纳米隧道，几毫秒内就能把精确剂量的治疗用生物分子“注射”到单个活细胞内。该研究发表在最近的《自然纳米技术》杂志网站上。　　长期以来，在进行基因治疗时，人们对插入细胞的药剂数量无法控制，因为人体绝大部分细胞都太小，最小的针头也无能为力。而“NEP让我们能研究药剂和其他生物分子是怎样影响了细胞的生物和基因路径的，现有其他技术都无法达到这么细微的水平。”该校化学与生物分子工程教授詹姆斯李说。他们用这种方法，将定量的抗癌基因成功插入到白血病细胞中并杀死了它们。　　研究人员用聚合物压制成一种电子设备样机，用DNA(脱氧核糖核酸)单链作为模板来构建纳米隧道。詹姆斯李发明了一种使DNA链解旋的技术，并使其按照需要形成精确结构。他们给DNA链涂上一层金涂层并加以拉伸，使之连接两个容器，然后将DNA蚀去，在设备内部留下一条连通两个容器的尺寸精确的纳米隧道。　　隧道中的电极将整个设备变成一个微电路，几百伏特的电脉冲从一个装药剂的容器经纳米隧道到达另一个装细胞的容器，在隧道出口处形成了强大的电场，与细胞自身的电荷相互作用，迫使细胞膜打开一个小孔，足够投放药物而不会杀死细胞。调整脉冲时间和隧道宽度，就能控制药物剂量。　　为了测试NEP能否递送活性药剂，他们把一些治疗用RNA(核糖核酸)插入了白血病细胞，发现5毫秒的电脉冲能递送足够剂量的RNA杀死这些细胞 而更长的脉冲，如10毫秒，能杀死几乎所有的白血病细胞。作为对照，他们还插入了一些无害的RNA到白血病细胞中，这些细胞都没死。　　詹姆斯李指出，由于这种方法一次只能给一个或几个细胞注射，更适合用在实验室。目前他们正在开发一种机械式细胞装载系统，一次能给10万个细胞注射，有望用于临床诊断和治疗。　　“我们希望NEP能最终用于早期癌症检测与治疗，比如在干细胞或免疫细胞中插入精确剂量的基因或蛋白质，引导它们分化改变，不必担心过量注射带来的安全问题，然后把这些细胞放回体内作为一种细胞基础疗法。”詹姆斯李说，这种方法还可能用于白血病、肺癌及其他肿瘤。

基于全身循环的静脉注射给药模式是癌症化疗最常见的方式。在临床上，化疗药物作用剂量与全身毒性之间存在矛盾关系。局部给药策略可以提高药物在靶部位的积累，但在促进药物在肿瘤内高效递送和在细胞内高效转运的效果方面较为欠缺；而仅依靠被动扩散的药物递送常导致肿瘤细胞内化疗药物含量低，肿瘤杀伤效果欠佳。针对这一问题，北京航空航天大学常凌乾等人在《Advanced Functional Materials》 （IF: 18.8）期刊上发表了题为 “Multimicrochannel Microneedle Microporation Platform for Enhanced Intracellular Drug Delivery” 的研究论文。该工作设计了一种3D 高精度打印的（nanoArch S130，摩方精密）、具有中空微通道的微针阵列（图1）。 图1.多微通道微针微穿孔平台靶向给药原理及制备示意图（平台直径8mm，平台分布间隔500μm的21个微针，微针底部直径300μm，高度500μm，每个微针均含8个贯穿孔道，孔道直径40μm）该生物芯片利用微通道装载药物，并在低电压直流电场的作用下，实现药物分子的快速递送；通过微通道聚焦电场的作用，在微针周围的肿瘤细胞膜发生电穿孔，进一步提高药物递送进细胞的能力。在活体实验中，该技术与周身送药、实心微针和局部板电极电穿孔系统进行了在体对比，在药物递送能力、肿瘤抑制、其他器官毒副作用等方面其优势显著（图2）。图2.试验设计的4M Platform介导化疗药（DOX）体内递送及对肿瘤的抑制作用。 该研究第一单位为北京市生物医学工程高精尖创新中心和北航生物与医学工程学院；常凌乾教授为主要通讯作者；南方科技大学郭传飞教授和北京化工大学庄俭副教授为共同通讯作者；研究生林龙、博士后王玉琼和研究生蔡旻堃为论文的第一作者。 文章链接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/adfm.202109187

将小分子、核酸、蛋白质和药物导入细胞是监测和了解细胞行为以及生物功能的重要途径。然而，质膜是阻止外源分子进入细胞的生物屏障。因此，如何在保持细胞活力的同时高效地将外源分子递送到细胞中是细胞生物学领域的一个重要课题。为了克服现有大规模细胞内递送方法的弱点，例如细胞活性和递送效率不一致，主要基于膜破坏介导机制的微技术已成为一种有前景的解决方案。利用化学质膜穿孔进行单细胞递送的尚未得到广泛研究。2024年4月26日，清华大学化学系林金明教授团队在《ACS Applied Materials & Interfaces》杂志在线发表了题为“Chemical Plasma Membrane Perforation Generated by a Microfluidic Probe for Single-Cell Intracellular Protein Delivery”的工作。该研究使用微流控探针将含有毛地黄皂苷和货物的溶液精确地作用到单细胞上。毛地黄皂苷与质膜中的胆固醇结合诱导质膜穿孔，货物通过孔进入细胞。碘化丙啶 (0.67 kDa) 和 FITC-葡聚糖 (10、40 和 150 kDa) 可以在3分钟内成功引入单细胞，同时保持细胞活力。两种蛋白质（细胞色素C和亲环素A）被递送进入细胞，并观察到它们在细胞中得生理功能。图1. 微流控探针诱导单细胞化学质膜穿孔首先，利用Comsol Multiphysics软件对微流控探针形成的微区域进行数值模拟。使用荧光素（扩散系数=500 μm2 /s）来指示溶质扩散。结果表明，注入的溶液可以被完全吸出，并且溶质被限制在液滴状微区域内而不会扩散。微区内溶质浓度分布均匀。计算了基质上的剪切应力，低剪切应力不会对细胞造成额外的机械损伤。实验在与模拟相同的条件下进行，使用荧光素显示微流控探针产生的微区域，与浓度分布模拟结果一致。溶液的连续流动使微区中毛地黄皂苷和货物的浓度几乎恒定，有利于维持递送过程的连续性和稳定性。图2. 流体的数值模拟通过微流控探针进行碘化丙啶（PI）的细胞内递送来验证该方法的可行性以及优化递送条件。尝试使用 20-100 μg/mL 毛地黄皂苷将 PI 递送至U87细胞。随着毛地黄皂苷浓度的增加，ts（PI开始进入时间）和tm（PI进入速度最大时间）逐渐减少，表明细胞穿孔加速。当毛地黄皂苷浓度为60 μg/mL时，ts约为20 s，1 min内即可观察到清晰的荧光。此外，还尝试了不同的PI浓度进行细胞内递送，较高的PI浓度也使得PI能够更快地进入细胞。还测试了流速对递送结果的影响。注入流量保持2 μL/min，抽出流量在6~14 μL/min之间调整。当抽吸流速大于8 μL/min时，进入细胞的PI量随着流速的增长而显着增加。图3. 毛地黄皂苷浓度、PI浓度和流速对细胞内递送的影响为了证明该方法的效率和通用性，使用该方法将PI递送至U87、HUVEC和A549细胞。当递送时间为20秒时，三种类型的细胞几乎不发出荧光。随着递送时间逐渐增加，细胞的相对荧光强度显着增加，递送处理50 s后观察到强烈的红色荧光。由于洋地黄皂苷的作用，质膜逐渐透化，PI通过质膜上形成的孔继续进入细胞。还检查了该方法递送大分子的能力，使用不同分子量（10、40和150 kDa）的 FITC-葡聚糖作为货物。FITC-葡聚糖可以在3min内进入细胞，并且FITC-葡聚糖进入的量随着递送时间的增加而增加。图4. PI和FITC-葡聚糖递送的结果在验证了这种方法用于单细胞胞内递送的可行性后，作者尝试了细胞内蛋白质递送。Cyt C ( Mw = 13 kDa) 是线粒体中的一种蛋白质，可将电子转移到呼吸链以维持ATP的产生。当cyt C释放到细胞质中时，它会引发细胞凋亡。由于外源cyt C在正常情况下不能进入细胞，利用微流控探针将cyt C递送至A549中作为抗肿瘤药物以诱导细胞凋亡。对照组和仅用毛地黄皂苷或cyt C处理的细胞之间未观察到caspase-3水平和Hoechst 33342染色结果的显着差异。毛地黄皂苷诱导的质膜穿孔不会引起细胞凋亡。仅用cyt C处理的细胞中caspase-3的水平也没有增加，表明正常情况下cyt C不能穿过质膜进入细胞激活凋亡途径。然而，在进行毛地黄皂苷介导的cyt C递送的细胞中，caspase-3水平显著增加，蓝色荧光显著增强。细胞形态发生明显变化，细胞体积缩小，并形成凋亡小体。这些结果表明，递送的cyt C成功诱导细胞凋亡，并且外源蛋白可以通过微流控探针有效地引入细胞内并发挥作用。图5. Cyt C被递送至A549以诱导细胞凋亡为了进一步探索这种方法在细胞研究中的潜力，作者利用它来研究肿瘤耐药性。CypA (M w = 18 kDa) 是一种广泛存在的细胞内蛋白质，可充当抗氧化剂。最近有报道称CypA通过重塑细胞氧化状态介导结直肠癌耐药。BCNU是一种常用的抗肿瘤药物，其诱导细胞毒性的机制之一是谷胱甘肽还原酶的抑制导致ROS的积累。利用微流控探针将CypA递送到U87中，研究CypA对胶质瘤耐药性的影响。与对照组相比，未经CypA递送的细胞经BCNU处理1小时后ROS水平显着升高，并且细胞形态发生改变。对于递送CypA的细胞，ROS含量显着低于未递送细胞，并且细胞保持正常形态。结果表明，递送的CypA在细胞中具有抗氧化作用，这可能增强U87对BCNU的耐药性。抑制CypA表达可能是治疗神经胶质瘤的潜在方法。图6. CypA对胶质瘤耐药性的影响总结作者开发了一种基于开放式微流控探针的方法，以方便高效地实现单细胞递送。该方法通过使用化学试剂对单个细胞进行质膜穿孔，将最大分子量为150 kDa 的外源货物递送到细胞中。与载体介导或场辅助递送方法相比，该方法不需要对货物进行额外处理，无需物理场辅助的温和递送条件也避免了对货物和细胞的额外损伤。作者展示了使用微流控探针进行cyt C和CypA的细胞内递送，证明了该方法能够研究外源蛋白质对细胞生命活动的影响。未来，各种货物（肽、蛋白质、mRNA、DNA、质粒、细胞器等）可以通过这种方法导入细胞内，调节细胞的生理功能和命运。而且该方法不需要昂贵的设备，操作简单，有望成为单细胞递送的一种理想方法。清华大学化学系林金明教授为该论文的通讯作者，清华大学化学系2022级博士生宋扬为本论文的第一作者。该研究受到国家重点研发计划（No.2022YFC3400700）和国家自然科学基金（No.22034005）的支持。关于林金明教授工学博士，分析化学专业。1984年福州大学毕业，1992年在日本昭和大学国际交流基金的资助下前往该大学药学部从事访问研究。1994年获得日本政府奖学金转入东京都立大学攻读博士学位，1997年3月获得工学博士学位，同年留校任教，2000年入选中国科学院“百人计划”，受聘中科院生态环境研究中心研究员、博士生导师；2001年获得国家杰出青年科学基金，2002年3月底回国工作，2004年入选清华大学“百名人才引进计划”，受聘清华大学化学系教授、博士生导师。2008年受聘教育部长江学者特聘教授,2014年入选英国皇家化学会会士。目前主要从事微流控芯片质谱联用细胞分析、化学发光/荧光免疫分析、复杂样品前处理分析、空气负离子检测与健康评估等研究。已培养博士研究生43名（含联合培养，其中留学生2名）、硕士研究生28名、博士后11名（其中留学生3名）、访问学者10名（其中外国访问学者1名）。

沃特世公司推出超效食品安全系统为满足最严格的国际食品安全法规标准而设计新奥尔良 –2008年3月3日 – 沃特世公司今天在分析仪器行业最大的年会和展览会2008年匹茨堡大会上宣布推出第一台基于超高效液相色谱UPLC的MS/MS系统，用于食品安全分析。 沃特世公司超效食品安全系统为迎接日益严格的国际食品安全法规的挑战而设计，是一整套解决方案，分析兽药残留，杀虫剂，霉菌毒素，海洋生物毒素和各类食品中的非法染料。 该系统将沃特世公司市场领先的ACQUITY UPLC 超高效液相色谱技术和Quattro Premier™ XE 串联四极杆质谱仪相联接，可在低于法规限制的范围外，进行灵敏而有选择性地定性和定量污染物。数据采集，处理和报告步骤由沃特世MassLynx™ 软件管理来执行，该软件系统同时包含沃特世公司目标化合物鉴定的TargetLynx™ 管理软件。当和沃特世公司NuGenesis Scientific Data Management System科学数据管理系统相连时，您的实验室可以从该系统或任何实验室里的其它仪器上捕获和整理原始数据，并且在可搜索的数据库中存档。该系统也包括色谱柱化学品和应用方法CD光盘能够比以往更有效地进行数据采集、分析、报告更多结果的一站式解决方案。设在英国的农业食品和生物科学学院使用这台基于超高效液相色谱UPLC的食品安全系统，并采用沃特世公司NuGenesis Scientific Data Management System (SDMS) 科学数据管理系统，一并来测试动物来源的食品中的药物残留，捕获并报告原始数据。除了满足更严格的国际标准，实验室还陆续缩短了分离时间，将他们的HPLC方法减少至五倍，同时减少了溶剂消耗，显著缩短了方法开发周期，并消除上千页报告的纸张。如欲获取更多关于沃特世公司在大会上的活动信息，请浏览网站 www.waters.com/pittcon.关于沃特世公司(www.waters.com)50年来，沃特世公司（美国纽约股票交易代码WAT）在全球范围内，通过传递实用，可持续发展的创新技术，为实验室依赖型单位和组织，在人体保健，环境管理，食品安全和水质分析领域建立商业优势。潜心钻研相互关联的整合分离科学，实验室信息管理，质谱和热分析技术，拥有专家水平的客户服务团队， 沃特世技术突破和实验室解决方案为用户的成功提供了持久的平台。2007年，沃特世公司年销售额14.7亿美元，5000名员工,为全球客户努力推进科学发现并保障卓越性能。Waters, ACQUITY, UPLC，UltraPerformance LC, Quattro Premier, MassLynx, TargetLynx, 和 NuGenesis是沃特世公司注册商标。Pittcon 是匹茨堡分析化学和应用光谱学大会的注册商标。沃特世科技（上海）有限公司蔡卓尔小姐电话：+86 21 68794052 传真：+86 21 68794588Email：joy_cai@waters.com 网址：www.waters.com www.waterschina.com

近日，法雷奥（Valeo）和Teledyne FLIR公司开始战略合作，将热成像技术引入汽车行业，以提高道路使用者的安全。双方已于2023年底从一家全球领先的汽车OEM获得了一份重要合同，交付其作为新一代高级驾驶员辅助系统（ADAS）驾驶员辅助技术的新型热像仪，以提高车辆和道路安全。图片来源：法雷奥法雷奥和Teledyne FLIR将推出首款用于夜视ADAS的ASILB级热成像技术。该系统将补充法雷奥的各种传感器，并依靠法雷奥的ADAS软件堆栈来支持乘用车、商用车以及自动驾驶汽车的夜间自动紧急制动（AEB）等功能。法雷奥与热成像技术公司Teledyne FLIR强强联手，打造下一代汽车安全多光谱传感器融合系统。法雷奥将利用其在汽车视觉系统方面的丰富专业知识，集成Teledyne FLIR热视觉技术，并为OEM提供完整的夜视解决方案，包括基于法雷奥人工智能和图形可视化堆栈的感知软件。图片来源：法雷奥“法雷奥拥有市场上最广泛的感知解决方案组合，我们期待与Teledyne FLIR合作，将热成像技术添加到我们的产品中，”法雷奥舒适和驾驶辅助总裁Marc Vrecko表示。“这款新摄像头及其感知软件将补充我们的产品，并提高ADAS和自动驾驶车辆系统的整体性能，为道路使用者带来更多安全，尤其是在夜间。”Teledyne FLIR副总裁兼总经理Paul Clayton表示：“从售后驾驶员辅助技术到自动驾驶机器人出租车，Teledyne FLIR在开发热成像并将其融入汽车安全系统方面不断取得巨大进步。我们与法雷奥的合作使我们能够使热成像技术广泛应用于从乘用车到半挂卡车的交通运输中，让更多的驾驶员和自动车辆安全系统能够在完全黑暗、杂乱的环境和其他现有传感器无法看到的恶劣天气下看清东西。”

科技日报讯 美国西北大学开发出一种新型电穿孔微流控装置，能对分化中的干细胞进行电穿孔操作，在细胞生命的最重要阶段能够进行分子输送。这提供了研究神经元等原代细胞所必要的条件，为探索神经疾病致病机制打开了一扇门，可能会引发新一代的基因疗法。　　电穿孔技术是分子生物学中强有力的技术手段。利用电脉冲在细胞膜上创建一个临时的纳米孔洞，研究人员就能将化学品、药物和DNA(脱氧核糖核酸)直接输送到单个细胞中。　　但是，现有的电穿孔技术要用很高的电场强度来保持细胞悬浮在溶液中，打断了细胞通路，使敏感的原代细胞处在恶劣的环境中。因此，研究人员要在细胞持续分化和扩大过程中研究细胞的自然属性几乎没有可能。　　据物理学家组织网近日报道，这个新型装置的英文缩写为LEPD，适用于在人工衬底而非自由浮动的培养基中生长的贴壁细胞，这类细胞的生长必需有可以贴附的支持物表面，细胞依靠自身分泌的活培养基中提供的贴附因子才能在该表面上生长和繁殖。　　研究人员说：&ldquo 不破坏分化却能推送分子进入贴壁细胞的能力，是生物技术学研究者进一步了解相关基础知识的必要条件，尤其有利于进行最先进的干细胞研究。在生物学和医学研究领域，对细胞进行正确环境下的无损操作是非常关键的技术。&rdquo 　　相关成果发表在《英国皇家化学学会》杂志上。

外泌体由于其内源性来源、组织特异性以及良好的生物相容性和血液循环时间长等特点，被视为一类理想的小分子药物递送载体，可用于提高姜黄素、紫杉醇、阿霉素、醉茄素A等小分子药物的有效性和药代动力学。目前基于外泌体的药物装载策略主要分为纯化前载药和纯化后载药两大类。前者通过对亲本细胞进行修饰改造，而实现外泌体的药物装载；后者则是对纯化后外泌体通过物理以及化学等方法进行药物装载，其中大多借鉴了脂质体药物递送系统的经验。厦门大学颜晓梅教授团队在Analytical and Bioanalytical Chemistry上发表题为“Single‑ particle assessment of six different drug‑ loading strategies for incorporating doxorubicin into small extracellular vesicles”的文章，以阿霉素(Doxorubicin, Dox)为模型药物，利用nFCM（纳米流式）在单颗粒水平对六种药物装载策略（共孵育、电穿孔、挤出法、反复冻融、超声和表面活性剂处理）进行对比，综合评估几种方法对sEVs药物包封率、药物装载量、表面蛋白功能维持、长期保存稳定性等影响，为基于sEVs的药物装载和递送研究提供了一个快速、灵敏的单颗粒分析方法。图1. nFCM评估EVs药物装载策略EVs质量控制选用HEK293T来源的EVs装载Dox作为标准模型，研究六种药物装载策略对装载Dox药物的效果。经过超速离心的方法从293T细胞上清中分离得到纯化的EVs，首先对EVs粒径、形态、纯度、蛋白等进行表征，评估获取的EVs的质量。利用Triton X-100处理的方法评估EVs的纯度，nFCM结果显示在经Triton X-100处理后，EVs颗粒数明显下降，EVs的纯度高达80%；粒径结果也显示EVs粒径均在220 nm以下，峰值为52 nm，中位值为103 nm，符合MISEV2018中建议的EVs粒径分布范围（图2）。图2. EVs的鉴定和表征载药策略对比由于Dox具有自发荧光特性，与未装载Dox的EVs相比，装载了Dox的EVs表现出明显的橙色荧光信号，阳性颗粒的比例可达46.3%；在共孵育方法中，随着Dox浓度的增加，阳性EVs的比例持续上升，当Dox浓度为100 μM时，EVs的阳性率达到最高，接近50%（图3）；以优化后的Dox浓度(100 μM)为参考，评估对比了共孵育、电穿孔、挤出法、反复冻融、超声和表面活性剂处理这六种方法对EVs载药效率、颗粒浓度、药物装载量等影响。结果显示共孵育和电穿孔法具有最高的装载效率，均为40%以上，而其他几种药物装载策略阳性率在20%-30%之间（图3）。总的来说，考虑到药物包封率、颗粒浓度、药物装载量等因素，共孵育和电穿孔是这几种方法中最理想的EVs药物装载策略。图3. 不同药物装载策略的载药效率、药物装载量对比生物功能分析EVs表面蛋白是其功能形式的重要参与者，对EVs的免疫逃逸和靶向具有重要作用，作者进一步研究了不同药物装载策略对EVs表面蛋白的影响。结果发现，共孵育和电穿孔方法处理后EVs的表面蛋白(CD24、CD47、CD63)表达比例相对更高，说明这两种方法能够最大限度地保持了EVs的生物活性，而挤出法、反复冻融、超声和表面活性剂处理都会不同程度地破坏EVs的表面蛋白（图4）。图4. 不同载药策略对EVs表面蛋白的影响作者进一步评估了不同策略所得载药EVs中药物稳定性和活性（图5）。结果显示在4℃和-80℃条件下保存，随着时间的延长，六种装载策略获得的EVs阳性率均出现下降，而共孵育方法获得的EVs在长期保存下还能保持较高的药物包裹效率（约40%）。综上，无论何种载药方式，都建议将装载Dox的EVs储存在4℃，且共孵育制备的Dox-EVs显示出最高的包封率和稳定性。图5. 载药后EVs的稳定性研究药物作用效果作者还探究了不同药物装载策略所得Dox-EVs的药物活性和细胞摄取效率。共聚焦显微镜和流式细胞术的结果均证实电穿孔的方法获得的EVs具有更高的细胞摄取效率，同时更容易诱导细胞凋亡（图6）。该结果与nFCM测定的不同方法药物包封效率和药物包裹量相吻合，说明了Dox-EVs的治疗效果与细胞摄取率密切相关，并从本质上与Dox的包封率有关，揭示了利用nFCM对EVs进行单颗粒载药表征的准确性和重要价值。图6. 不同载药策略的药物活性总结本研究利用nFCM在单EV水平对六种不同的载药策略进行了全面的评估。实验结果表明：共孵育和电穿孔方法可以获得更高的装载效率，单个EVs中Dox含量也最高；共孵育和电穿孔方法制备的EVs药物具有更高水平的细胞摄取和更显著的促进肿瘤细胞凋亡；共孵育方法获得的EVs无论在4℃或-80℃长期保存条件下，均具有更好的稳定性；nFCM作为一个高效的单颗粒表征平台，可应用于EVs研究的各个环节，包括分离纯化、质量控制、EVs载药方法评估和优化、稳定性监测等方面，加速推进EVs产业化的发展！参考文献Chen, C., Li, Y., Wang, Q. et al. Single-particle assessment of six different drug-loading strategies for incorporating doxorubicin into small extracellular vesicles. Anal Bioanal Chem 415, 1287–1298 (2023). https://doi.org/10.1007/s00216-022-04248-4

项目编号：NMCX22T-0095-ND2022-06项目名称：内蒙古大学科研仪器设备采购预算金额：985.7000000 万元（人民币）最高限价（如有）：985.7000000 万元（人民币）采购需求：第一包：多功能细胞电穿孔电融合系统等，包括多功能细胞电穿孔电融合系统、细胞成像微孔板检测仪、多功能微孔板读板机，具体要求详见招标文件；预算金额为243万元。第二包：高通量单细胞分离系统等，包括高通量单细胞分离系统、荧光定量PCR仪，具体要求详见招标文件；预算金额为232万元。第三包：免疫组化染色系统等，包括免疫组化染色系统、植物光合荧光测定系统，具体要求详见招标文件；预算金额为228万元。第四包：全波长酶标仪等，包括全波长酶标仪、体式荧光显微镜、植物叶绿素荧光成像系统、基因枪系统，具体要求详见招标文件；预算金额为164.7万元。第五包：全自动体视显微镜等，包括全自动体视显微镜、便携式高通量单分子基因测序仪，具体要求详见招标文件；预算金额为118万元。合同履行期限：详见招标文件本项目( 不接受 )联合体投标。

[中国上海]7月17日到19日，2018哈佛仪器亚太区经销商培训会在上海圆满举办，豪沃生物科技（上海）有限公司作为美国哈佛仪器的全资子公司承办了此次会议。来自亚洲各国各地区的经销商都参加了此次会议，共同探讨了BTX新产品、尖端应用以及操作维护使用技巧等，现场反应十分热烈。大会伊始，哈佛仪器亚太区业务总监邓德文先生致欢迎辞。邓总全面介绍了哈佛仪器的创立历史、旗下品牌及公司的经营理念，感谢广大经销商伙伴对哈佛仪器的支持和帮助。BTX作为哈佛仪器旗下品牌至今在电转（电穿孔）和电融合领域已拥有超过30多年的专业经验，世界上第一只著名的克隆羊多利就是利用BTX的电融合仪完成的。邓总表示今后会继续加强合作，争取在亚洲区开辟出更大的天地。 随后，哈佛仪器亚太高级渠道经理张旭先生详细地与大家分享了最新发布的BTX产品。BTX自1983年成立以来，就以电穿孔仪、电融合仪为主要产品，是第一家生产高质量电穿孔仪器的生产厂家，开创了诸多在电穿孔、电融合、转染、转化等方面的最新产品和技术。目前公司在经典款的基础上进行升级，发布了全新的Gemini系列和ECM系列，同时推出了集大容量、电转和电融合于一体的ECM 2001+。新发布的产品，不仅外观更加优雅，性能也日益强大。张经理深入介绍了新款产品的原理特性和市场定位，讲解了如何进行推广，并详细回答了各合作伙伴提出的问题。大家对于BTX电穿孔和电融合仪有了全新的认识，并且充满信心！ BTX是全球专业的转基因、电融合、活体转基因仪及配件的生产厂家，可支持20ul到10mL电转体系，并且可应用于活体、离体、胚胎和卵等等，应用范围非常广泛。亚太区技术专家田蕾女士详尽讲解了BTX电穿孔仪和电融合仪的应用，并结合CRISPR和CAR-T等热门的应用，详细介绍了每款BTX产品的应用方向，大家受益匪浅。 此外，本次会议特别从美国邀请了BTX高级工程师Brian Kangas先生详细地介绍产品的维护和故障判断。Brian Kangas先生以他多年的研发经验，给大家讲解了日常仪器操作技能、仪器条件选择、常见故障判断与排除等。最后会议还安排了上机操作，更换主要配件的方法等学习。通过两天的现场学习，大家对BTX的优越性能和便捷操作给予了肯定，表示以后能更高效率的解决用户在日常操作中遇到的问题，并帮助用户更好的使用BTX产品。 经过三天的交流，与会人员都纷纷表示受益匪浅，大家以热烈的掌声感谢了各位讲演者非常专业的分享，并希望将来能更多的参与此类培训会。至此，2018哈佛仪器亚太区经销商培训会顺利落幕。该培训会不仅提供了高品质的技术交流平台，也加深了哈佛仪器与行业内各企业的沟通、交流、紧密协作。在未来，哈佛仪器将一如既往为广大新老用户提供性能优异的产品和强大的技术支持，共同推动电转电融合应用朝更好更广更深的方向发展！

莱斯大学化学家James Tour团队成功测试了6种分子机器，它们都在短短两分钟内就在革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的细胞膜上打了孔。对于那些对机械入侵没有天然防御能力的细菌，是无法抵抗这种“钻头”的。这为击败随时间推移对标准抗菌治疗产生耐药性的细菌提供了一种新策略。新分子机器从405纳米的蓝色光中获取能量，以每秒2百万—3百万次的速度旋转分子的转子。Tour指出，该波长的光本身具有温和的抗菌特性，而分子机器的加入会使其抗菌性增强。像烧伤患者和坏疽患者等细菌感染者或将成为早期受益目标。这些分子机器是基于诺贝尔奖获得者伯纳德费林加的研究成果进一步开发而来，费林加于1999年开发了第一个带有转子的分子，并使转子可靠地沿一个方向旋转。Tour团队在烧伤感染模型上对新分子机器的首次测试证实，它们能够快速杀死细菌，包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。团队通过添加氮基团实现了可见光激活。研究人员还发现，这些机器有效地分解了生物膜和持久细胞，持久细胞可进入休眠状态以避开抗菌药物。新分子机器还挽回了被认为“无效”的抗菌药物的名誉。研究人员称，钻穿微生物的膜，可让原本无效的药物进入细胞，从而克服细菌对抗生素的耐药性。研究人员目前正致力于更好地靶向细菌，通过将细菌特异性肽标签连接到分子钻头，以将它们引导至目标病原体，从而最大限度地减少对哺乳动物细胞的损害。

近日，清华大学欧阳证教授课题组在analytical chemistry上发表了single-cell mass spectrometry analysis of metabolites facilitated by cell electro-migration and electroporation，且以acs editors' choice形式亮点报道。 文章介绍了基于细胞电迁移-电穿孔的单细胞质谱分析方法，该方法无需细胞高精度操控平台，仅通过对单细胞施加一定序列的电压，即可实现对单个酵母等具有细胞壁的细胞内代谢物的可控释放与质谱分析。 acs美国化学会报道： acs 编辑良择 | 基于细胞电迁移-电穿孔的单细胞质谱分析方法通讯作者：欧阳证，清华大学作者：zishuai li (李自帅)，zhengmao wang (王正茂)，junmin pan (潘俊敏)，xiaoxiao ma (马潇潇)，wenpeng zhang (张文鹏)，zheng ouyang (欧阳证) 单细胞分析对研究细胞在转录组学、蛋白组学以及代谢组学等方面的异质性有着重要的意义。目前，科学家们开发了大量的单细胞分析方法和技术，例如荧光分析法、微流控芯片、流式细胞仪、单细胞测序等。质谱分析，因其低样品消耗量、高灵敏度、高定量准确性等优势，已经被广泛应用于单细胞蛋白组学、脂质组学和代谢组学分析中。然而，目前大部分的单细胞质谱分析方法，都需要依托于高精度操作平台，这给单细胞分析技术的应用带来了一定的挑战。 清华大学欧阳证教授课题组报道了一种基于细胞电迁移-电穿孔的单细胞质谱分析方法。该方法无需细胞高精度操控平台，仅通过对单细胞施加一定序列的电压，即可实现对单个酵母等具有细胞壁的细胞内代谢物的可控释放与质谱分析。如图1所示，在硼玻璃纳喷管中加入适当体积(约0.5 μl)的细胞悬浮液(约104细胞/ml)，该溶液内平均只含有单个细胞。由于细胞表面通常带负电，通过非接触式电极对溶液施加直流负电压，使细胞迁移到纳喷管尖端，并在针尖处封闭一段超小体积(约1.5 pl)的液体。之后施加高压脉冲电压，在细胞膜表面形成电穿孔，细胞内代谢物即释放到前端的超小体积液体中，从而避免了细胞内代谢物的过度稀释。最后，采用非接触式电极加压，由纳升电喷雾离子化将该部分溶液离子化并进行质谱分析。图1. 基于细胞电迁移-电穿孔的单细胞质谱分析方法 该研究中，首先用酵母细胞进行了方法验证。如图2所示，从离子流热图中可以看出，施加脉冲电压后，在质荷比m/z 50到800的范围内出现了大量的代谢物离子信号。图2b-c中比较了施加脉冲电压前后的单细胞分析质谱图。通过精确质量对比、串级质谱分析等方法，该课题组在单个酵母细胞内检测到了71种代谢物。图3a-f展示了几种典型代谢物的串级质谱谱图。 图2. (a)质谱离子流热图。在5 s时刻施加了高压脉冲电压。(b)负离子模式。(c)正离子模式。 图3. 负离子模式下单酵母菌代谢产物典型的串级质谱谱图 (a) glu, (b) gsh, (c) amp, (d) adp, (e)atp, (f) udp-hex. 除了酵母细胞，该方法还可用于其他种类的具有细胞壁结构的单细胞菌类的高灵敏度质谱分析。图4展示了莱茵衣藻(chlamydomonas reinhardtti)、杜氏盐藻(dunaliella salina)、斜生栅藻(scenedesmus obliquus)、绿眼虫(euglena viridis)的单细胞分析质谱图。图4. 不同种类细胞的单细胞质谱谱图。从内向外依次为：莱茵衣藻，杜氏盐藻，斜生栅藻，绿眼虫。 此外，该课题组还研究了不同培养环境下，单个细胞内代谢物相对含量的变化情况。将两组莱茵衣藻细胞，分别在有/无光照条件下培养24小时，之后采用本方法进行单细胞内代谢物的质谱分析。单细胞质谱分析表明，在黑暗条件下，衣藻细胞内的卡尔文循环内的碳固定被终止，细胞内有氧呼吸强度下降，糖酵解代谢增强。此时，细胞的光合作用停止，细胞通过糖酵解分解糖类以提供基本的代谢需求，同时降低有氧呼吸强度以维持生存。图5. 黑暗条件下的莱茵衣藻单细胞内部分代谢物强度比值变化。 本研究的相关结果已发表在analytical chemistry，并以acs editors' choice形式亮点报道。该论文得到了国家自然科学基金项目的支持。 文章链接：https://pubs.acs.org/doi/full/10.1021/acs.analchem.0c02147

北京倍辉科技诚邀辽宁、吉林，黑龙江三省独家合作代理商倍辉科技有限公司是国内创新科技的引领代理商，位于科技密集的北京中关村。我们致力于将先进的产品及技术更好的服务于中国快速发展的生命科学及药物研究领域，涵盖活体动物成像，基因表达研究，非标记细胞成像研究，蛋白功能研究，转基因领域及纳米技术。有意向的代理商，请发邮件至：info@bio-sun.com.cn 或联系13701242384 蔡经理，也诚挚邀请其他省份的代理商联系合作。一． 两大重量级常规仪器（独家代理）1. 美国Denovix公司DS-11/DS-11+超微量分光光度计，采用安卓智能app触摸屏操作，高端悬臂式检测模式（远优于微量比色杯式），自动感应变换光程，最新的斜率检测技术，终生无需校准，堪称目前性能最好的超微量分光光度计2. 日本BEX公司CUY21EDIT II超级多模式细胞/活体基因电转化仪， BEX专利多模式脉冲技术，不用任何专用试剂即可高效转染原代细胞，血液细胞，免疫细胞等难转细胞，以及最佳的动物活体基因电转功能，既1998年BEX研发出全球第一款专业活体基因电转化仪之后又一款具有里程碑意义的电转化仪。CUY21Vitro-ex电穿孔仪，常规细胞电穿孔明星产品。LF301细胞融合仪，具备最佳的融合性能。二． 两大高端细胞研究利器（独家代理）1. 瑞典Phiab公司激光全息细胞成像及分析系统。激光全息技术是目前最佳的非标记细胞分析技术，可以提供完整的细胞形态学参数及图像分析，尤其适合于细胞增殖分化，细胞计数，细胞迁移，细胞凋亡，细胞3D成像分析等的研究。产品分为M3高端型和M4 mini型2. 瑞典Ridgeview公司Green蛋白-细胞相互作用分析系统。瑞典Ridgeview公司的创建者也是SPR技术的发明人。SPR技术是小分子互做研究的经典，但不适合于细胞样品的分析。Green是目前唯一一款细胞基础上的互做研究产品，应用广泛，包括病毒-细胞，细菌-细胞，蛋白-细胞，药物-细胞，细胞-细胞等的互做研究三． 其他著名品牌1. 日本ATTO公司，著名的基因表达发光检测仪，电泳，凝胶成像制造商。最新款RGB多色凝胶成像分析系统，超高性价比（独家代理）。2. 美国MDI公司，著名的拉针仪，煅磨针中心，细胞超微注射泵制造商（独家代理）3. 丹麦Labogene公司，著名的冻干机，真空浓缩仪，冷却循环水浴制造商（一级代理）北京倍辉科技有限公司www.bio-sun.com.cn发布者：倍辉科技有限公司联系电话：010-51581369/E-mail：info@bio-sun.com.cn

项目编号：GDJY220929003HG047项目名称：仲恺农业工程学院农业农村部岭南果蔬病虫害绿色防控重点实验室采购项目采购方式：公开招标预算金额：13,400,000.00元采购需求：合同包1(仲恺农业工程学院农业农村部岭南果蔬病虫害绿色防控重点实验室采购项目):合同包预算金额：13,400,000.00元品目号品目名称采购标的数量（单位）技术规格、参数及要求品目预算(元)最高限价(元)1-1其他农业和林业机械场发射扫描电子显微镜1(台)详见采购文件--1-2其他农业和林业机械激光共聚焦显微镜1(台)详见采购文件--1-3其他农业和林业机械高分辨全景玻片扫描显微镜1(台)详见采购文件--1-4其他农业和林业机械高校液相色谱仪1(台)详见采购文件--1-5其他农业和林业机械气质联用仪1(台)详见采购文件--1-6其他农业和林业机械分析半制备型液相色谱仪1(台)详见采购文件--1-7其他农业和林业机械傅里叶变换红外光谱仪1(台)详见采购文件--1-8其他农业和林业机械电穿孔仪1(台)详见采购文件--1-9其他农业和林业机械微滴式数字PCR系统1(台)详见采购文件--1-10其他农业和林业机械冷冻干燥机1(台)详见采购文件--1-11其他农业和林业机械电动体视荧光显微镜1(台)详见采购文件--1-12其他农业和林业机械快速样品制备仪1(台)详见采购文件--1-13其他农业和林业机械气质微电压生理测定系统1(台)详见采购文件--1-14其他农业和林业机械卵母细胞钳记录分析系统1(台)详见采购文件--1-15其他农业和林业机械昆虫刺探电位测量仪1(台)详见采购文件--1-16其他农业和林业机械昆虫三维轨迹跟踪系统1(台)详见采购文件--本合同包不接受联合体投标合同履行期限：合同签订生效之日起8个月内完成供货、安装、调试及验收。

如何将多种生物分子(如DNA，siRN和肽)原位转染进入原代细胞和难转染细胞成为许多科研工作者面临的挑战，传统的电穿孔转染仪是通过将高压电脉冲直接作用于细胞悬浮液上，这就不可避免的造成很大部分细胞的损伤或未被转染。而新一代的基于自适应式电穿孔转染则是通过将精确控制的电流作用于生长在微孔膜上的单层细胞来完成的，同时利用电注射技术，在精确控制的电场作用下将带电荷的分子主动导入细胞，使其在被高效的被转染的同时依然保持着极低的细胞死亡率。中国科学院广州生物医药与健康研究院五洲东方新一代原位转染技术交流研讨会现场4月1日五洲东方公司（www.ostc.com.cn）在广州市中科院广州生物医药与健康研究院举办新一代原位转染技术交流研讨会。研讨会针对目前细胞转染中常见的问题，不同的转染方法的比较，新一代原位转染仪的特点与优势，利用新一代原位转染仪iPorator成功案例分享等方面进行了全方位的探讨交流，新一代原位转染仪iPorator得到多个实验室到会人员认可并留下试用。实验楼新一代原位转染仪iPorator凭借着高效率、低损伤、低干扰的电转染技术正在逐步进入广大生命科学领域的实验操作平台。更多实验室最新技术与仪器新品请关注五洲东方官方微博：http://e.weibo.com/ostc

外泌体内容物包含蛋白质、RNA、DNA和脂类，可以被设计用于药物传递系统与疾病的新型诊断标志物，具有重要的研究意义。但传统的技术方法如Western Blot，ELISA，无法获得单个外泌体的蛋白表型，更不能将检测内容物与粒径分析、浓度分析、计数等联系起来，大地制约了外泌体内容物的相关研究。单外泌体表征分析（Exoview）是将免疫学与光学结合的一种新技术[1]。先利用免疫识别将特定的外泌体进行捕获分离，然后再对目标外泌体的表面标志物及内容物（如携带的蛋白质、RNA、DNA及细胞因子）进行定量分析，从而更加全面地反映外泌体内容物的特性。相对于传统的手段主要优势有：☛ 无论是尿液、血清、血浆、组织液、细胞液均无需纯化，即可检测；☛ 检测灵敏度高，单外泌体水平探测；☛ 一次性输出指标丰富，单次检测即可输出外泌体的：粒径、技术、表面标志物（CD9/CD63/CD81）、荧光表达及亚群分布；本文选取了部分单外泌体表型分析技术在内容物方向的新进展，供大家参考。J Extracell Vesicles：单外泌体水平的蛋白内容物检测与定量 外泌体的内容物可以通过生物工程手段修饰。其中，将选择的蛋白内容物与外泌体的EV-sorting proteins通过细胞工程融合是常用的方法。这种方法既可以在腔内储存可输送到靶细胞的内容物，也可以让内容物与靶细胞表面受体结合来增强它们的治疗信号特性或靶向能力。因此，Silva等[2]在单外泌体水平上，通过分析工程化外泌体技术对不同外泌体的EV-sorting proteins在促进蛋白内容物的装载效率进行了评估。研究人员分别将含有7种EV-sorting proteins（GFP偶联）的质粒分别转染Expi293F细胞，分离纯化了细胞分泌的外泌体后检测外泌体的表型并进行蛋白定量。ExoView芯片上包被的CD63/CD81/CD9抗体捕获外泌体后，使用带红色荧光的CD63/CD81/CD9荧光抗体标记所有外泌体，带绿色荧光的GFP荧光抗体标记表达GFP的外泌体（图1a）。图1b是外泌体的荧光扫描图像，可以确认每个荧光标记了GFP外泌体同时也被CD63/CD81/CD9标记，由此可以计算出含目标蛋白外泌体占总数的比例（图1c）。ExoView还可以检测单个外泌体的荧光强度，进而得到样品荧光强度的均值（图1d），可以表示GFP的相对含量。以上结果表示，CD63，TSPAN14和CD81TM能够使目的蛋白内容物高效地装载外泌体。图1. ExoView检测外泌体表型与相对含量 Lab on a Chip：细胞外囊泡介导的母胎之间HMGB1信号诱导早产早产（PTB，小于37周的妊娠）每年影响了全球约11％的孕妇，造成100万新生儿的死亡。高迁移率族蛋白B1（HMGB1）是一种警报素，是衰老羊膜细胞通过细胞外囊泡释放的炎症信号之一。羊水、脐带血和孕妇血液中的HMGB1水平升高与足月和早产有关。Enkhtuya Radnaa等[3]通过电穿孔把正常羊膜上皮细胞的外泌体改造为装载HMGB1的外泌体（eHMGB1）并对其进行表征。结果显示导致PTB的装载HMGB1的外泌体（eHMGB1）与增加的母-胎界面（FMi）炎症有关。该研究证明了胎儿外泌体介导的旁分泌信号传导可以产生炎症并诱导分娩。其中，研究人员使用单个外泌体表型分析技术( ExoView )检测了电穿孔法向外泌体载入HMGB1的效率。ExoView的芯片上包含了CD63/CD81/CD9抗体，分别捕获了未装载（eCTRL）和装载HMGB1的外泌体（eHMGB1），使用试剂盒自带的穿膜试剂对外泌体进行处理后，再使用荧光抗体分别标记HMGB1/CD63/CD9，进行粒径检测和表型分析。图2粒径检测结果显示，eCTRL和装载HMGB1的外泌体（eHMGB1）的粒径分布没有显著差异，表示电穿孔处理没有改变外泌体的粒径。 图2. ExoView检测未装载（eCTRL）和装载HMGB1的外泌体（eHMGB1）的粒径分布 图3荧光计数结果显示，装载HMGB1的外泌体（eHMGB1）中HMGB1阳性外泌体数量明显高于eCTRL，而CD9和CD63阳性的外泌体在两个样本中数量接近，这表明HMGB1已成功装载到eHMGB1中（图3）。图3 ExoView检测未装载（eCTRL）和装载HMGB1的外泌体（eHMGB1）的表型 在以上的研究中，ExoView系统能够以高的灵敏度和特异性地检测到外泌体的内容物，同时对外泌体的表型进行准确全面的表征。外泌体内容物的研究、编辑和外源分子导入，是当今外泌体研究的重点，在临床诊断和生物治疗方面具有巨大的潜力。作为外泌体表征分析的倡导者，美国NanoView Biosciences于2018年推出了全自动外泌体荧光检测分析系统ExoView，该系统一经推出，便引起了外泌体领域科研工作者的广泛关注，凭借其稳定、出色的性能，短短几年在全球已有近百个客户，发表文献100多篇。ExoView的表征，能够帮助科学家更深入地了解外泌体与疾病之间的关系，助力疾病诊断和新药开发。参考文献： [1] Radnaa, E., Richardson, L. S., Sheller-Miller, S., Baljinnyam, T., de Castro Silva, M., Kammala, A. K., ... & Menon, R. (2021). Extracellular vesicle mediated feto-maternal HMGB1 signaling induces preterm birth. Lab on a Chip, 21(10), 1956-1973.[2] Silva, A. M., Lázaro‐Ibáñez, E., Gunnarsson, A., Dhande, A., Daaboul, G., Peacock, B., ... & Dekker, N. (2021). Quantification of protein cargo loading into engineered extracellular vesicles at single‐vesicle and single‐molecule resolution. Journal of Extracellular Vesicles, 10(10), e12130. 全自动外泌体荧光检测分析系统（ExoView R100）简介Nanoview所开发的全自动外泌体荧光检测分析系统（ExoView R100）采用单粒子干涉反射成像传感器（SP-IRIS）技术，是一款无需纯化的全自动的新型外泌体表征设备。该设备能够提供全方位的外泌体表征信息，包括颗粒大小、计数、表型与生物标志物共定位等，提供多层次和全面的外泌体测量解决方案。 为了更好的服务中国客户，Quantum Design中国子公司在北京建立了专业的客户服务中心，正式推出专业的全方位外泌体表征测试服务，您只需要少量样品即可获得全方位的外泌体表征数据。欢迎各位老师垂询：010-85120280。前10名订购服务的老师，可享受8折优惠！扫描上方二维码，即刻订购吧！

日本BEX成立近20年，是一家从事分子生物学仪器、试剂研发、生产的科研型公司。至今，产品已经销往100多个国家，已有数百篇使用BEX电穿孔、电融合系统的文献发表在国际知名杂志如Science、Nature上。　　BEX的产品早期曾经以“半贴牌”方式通过NepaGene等几家公司销售。自2008年后，BEX在原有产品基础上开发一些新的型号，开始拓展自己的全球销售渠道。从此，用户可以用便宜20%的价格买到更高级的产品。　　长期通过销售BEX产品牟取暴利的OEM经销商从此走上绝路，他们四处散播不实言论迷惑用户，以期鱼目混珠。甚至某孙姓经销商，公然宣称BEX是NepaGene的代理商，销售的是仿制NepaGene的产品，这些谎言指鹿为马，不攻自破!　　奥然科技呼吁国内代理商凭借自己的实力拓展市场，不要散布不实言论，更不要期望垄断市场以获暴利。适当的利润是企业生存的需要，也是做好售后的保证，但单纯的暴利只会让用户远离我们!　　注：“半贴牌”意思是在保留原厂家品牌、型号基础上，另外再贴一个销售商的名字

项目编号：GZCQC2202HG04033项目名称：海南热带农业资源研究院2022年仪器设备购置预算金额：250.0000000 万元（人民币）最高限价（如有）：250.0000000 万元（人民币）采购需求：1.采购项目内容：具体内容详见招标文件《第三章 采购人需求》。2.手动单道移液器、手动八道移液器、手动12道移液器、灭菌锅、电穿孔仪、荧光定量PCR、垂直电泳系统（电泳仪+电泳槽）、全能型半干蛋白转印仪、超临界萃取仪允许采购本国产品或不属于国家法律法规政策明确规定限制的进口产品。合同履行期限：合同签订后，国产产品60天（日历天）内，进口产品90天（日历天）内完成交货、安装、调试、提供相应技术服务，保证项目交付采购人验收通过。本项目( 不接受 )联合体投标。

2011年7月15日，浙江省成套招标代理有限公司发布公告，就“浙江省疾病预防控制中心科研仪器设备项目”公开中标结果，该项目共计采购133台/套仪器设备，如蛋白互作分析系统、液相色谱仪、全自动固相萃取仪、等离子发射光谱仪等，采购金额高达1113万元，具体详情请见下：招标项目编号：CTZB-H110523AWZ-SJK1标段数量仪器设备名称中标厂商及金额一1便携式γ能谱仪浙江省科学器材进出口有限责任公司￥620,000元1低本底αβ测量仪(四通道)二1等离子发射光谱仪浙江省科学器材进出口有限责任公司￥748,000元三1蛋白质垂直电泳槽杭州宝诚生物技术有限公司￥198,000元1蛋白电泳系统1电穿孔仪1半干转印系统1小型垂直电泳7凝胶电泳槽1迷你双垂直电泳槽（小号）1小型转印槽四1动物行为分析系统上海吉量软件科技有限公司 ￥398,000元五1激光共聚焦系统取消该标段六1核酸自动纯化仪杭州宝诚生物技术有限公司￥235,000元七1化学发光成像系统杭州合众生物科技有限公司￥245,500元八1冷冻台式离心机杭州三合创新科技有限公司￥491,100元1落地式冷冻离心机1普通离心机1小型离心机1台式低速离心机15810离心机角转九1高压灭菌器浙江省科学器材进出口有限责任公司￥866,000元196微孔板发光检测仪1超纯水仪1组织粉碎机1千分之一电子天平1MD全波长多功能酶标仪十1氮气发生器浙江省科学器材进出口有限责任公司￥627,000元1固体直接测汞仪1水中有机物富集浓缩装置3氢空氮气发生器一体机十一1全自动固相萃取仪杭州祥盛科技有限公司￥599,000元十二1生物除污染系统杭州弘健生物科技有限公司￥1,090,000元十三1全数字化手提式彩色多普勒超声诊断系统杭州万润医疗设备有限公司￥380,000元十四1自动核酸分离纯化重新组织招标1全自动微生物鉴定及药敏分析系统十五1荧光显微镜浙江省科学器材进出口有限责任公司￥663,000元1倒置显微镜1生物显微镜1全自动染片系统十六1液相色谱仪浙江省科学器材进出口有限责任公司￥720,000元十七1连续加样器杭州格陵科学仪器有限公司￥115,000元9电动辅助吸液器4多通道加样枪25ML移液器112头移液器2可调加样器（200-1000ML）2连续可调加样器（10-5000ML）1移液器（0.1-3μl）3移液器十八1自动溶剂快速提取仪浙江纳德科学仪器有限公司￥377,000元十九1样品保存箱重新组织招标1试剂样品保存箱1过氧化氢设备灭菌机1自动细胞计数仪2恒温震荡金属浴1液氮罐11二氧化碳培养箱1试剂保存箱11马福炉1梯度PCR仪1液氮罐21纯水器过滤柱1超声波清洗机1水浴恒温振荡器1电动玻璃匀浆机1血红蛋白分析仪1常见急性食物中毒快检箱1皮肤水分油分测试仪16噪声录音仪（高保真）1试剂保存箱21722分光光度计1紫外线辐照度计1稳压电源14稳压电源2二十1手持式尘埃粒子计数仪杭州祥盛科技有限公司￥1,081,500元3撞击式空气微生物采样器1大流量PM10采样仪5GIS样品采样定位仪1扫描电迁移率颗粒物粒径谱仪（SMPS)1纳米颗粒气溶胶监测仪（表面积）招标项目编号：CTZB-H110523AWZ-SJK2序号标项内容数量中标厂商及金额1低温冰箱及纯水仪各1台浙江省科学器材进出口有限责任公司￥138,500元招标项目编号：CTZB-H110523AWZ-SJK3序号标项内容数量中标厂商及金额1蛋白互作分析系统1浙江省科学器材进出口有限责任公司￥1,538,000元　　感谢各投标单位对本次招标工作的支持!如有异议，请于本公告发布之日起七个工作日内以书面形式向采购代理机构反映。　　采购人：浙江省疾病预防控制中心　　联系人：周老师　联系电话：0571-87115070　　采购代理机构：浙江省成套招标代理有限公司　地址：杭州市文晖路42号现代置业大厦西楼17楼1703室　　联系人：王小姐　联系电话：0571-85830257浙江省成套招标代理有限公司2011年7月15日　　近日仪器信息网“资讯频道”转载发布的招标中标信息一览：　　河南药检所采购色谱、质谱等63台/套仪器 　　潍坊质监局千万元采购大批国产仪器设备 　　烟草公司750万采购3台色谱与1台气质联用仪 　　大连产品质监所780万LED检验仪器采购中标公告 　　塔里木大学采购435台/套实验室仪器 　　农科院特产所1250万元仪器采购大单揭晓 　　广西药检所采购千万元专用仪器设备 　　大连化物所105万美元采购光谱、气质、液质3套仪器 　　福建省质监局1386万元采购7套LC-MS 　　广东省药检所采购近千万元仪器设备

Indee LabsIndee Labs宣布与Sunko Instruments在中国达成独家营销和分销协议。加州伯克利2023年5月25日日电 /美通社/ -- Indee Labs是一家生物技术公司，开发用于非病毒细胞内递送的Hydropore&trade ，该技术可以替代传统的病毒转染和电穿孔技术，产生产生数百万至数十亿个具有保留细胞活力和功能的高质量细胞。昇科仪器是中国科学和实验室仪器的专业分销商。“Sunko与来自美国和欧洲的许多供应商合作，很高兴与Indee Labs合作。我们确信Hydropore 是我们现有产品线的补充，并将在中国市场拥有良好的曝光率，“Sunko首席执行官Aaron Liu表示。作为合作伙伴关系的一部分，Indee Lab为Sunko Instruments提供了在中国的独家营销和分销权。Sunko在为中国的生命科学行业分销微流体仪器方面拥有丰富的经验。此次合作将为Indee Labs提供Hydropore RUO和未来版本（如Hydropore Cell Therapy）的中国营销和分销渠道。“Hydropore改善了修饰免疫细胞的功能，并在基于细胞的测定中实现了高通量筛选。我们很高兴通过与Sunko Instruments签订独家营销和分销协议，将Hydropore的业务扩展到中国，“Indee Labs首席执行官Ryan Pawell阐述道。与多个行业标准电穿孔和新生递送平台相比，Hydropore&trade 平台的主要优势包括提高产量、减少试剂消耗以及改善修饰细胞的功能。与Sunko的合作将帮助中国的研究人员使用Hydropore，以小型化和提高其基于细胞的研究工作的质量。昇科仪器现有的客户群包括中国领先的生物制药、生物技术和生命科学公司。关于英迪实验室Indee Labs是一家开发Hydropore&trade 的生物技术初创公司。Hydropore&trade 使用简单的工作流程、商用GMP级缓冲液和小占地面积，实现改良免疫细胞研究和开发，提高产量和功能。Indee Labs 的团队与前 3 大制药公司中的 10 家、各种生命科学和生物技术公司以及加州大学旧金山分校、南卡罗来纳医科大学和斯坦福大学合作。Indee Labs得到了IndieBio/SOSV，Y Combinator，Social Capital，Founders Fund等机构的支持，包括美国国立卫生研究院。更多信息请访问 indeelabs.com。关于昇科经验、贴近客户和最高的产品质量——这些是我们在Sunko的核心竞争力。这就是我们每天都在做的事情，遍及整个中国，充满热情。Sunko 成立于 2014年，此后一直稳步增长。Sunko的重点是向中国的微生物学、细胞生物学和生物技术市场的客户和研究人员销售和分销高质量的实验室设备。我们的产品组合包括众所周知的可靠技术，由于高效控制和高操作舒适性，这些技术可用于实验室操作和生产。许多公共机构、实验室、高等教育机构、大学和上市制药公司都依赖于我们始终如一的高质量产品，并欣赏我们在咨询和服务方面的专业知识——这些价值观总是会带来精确的解决方案。然而，作为一家充满活力和面向未来的公司，我们也给新想法一个机会，并非常重视在我们的计划中加入全球领先的技术解决方案。

奥然科技于2009年10月在中国农科院海南香饮所的设备采购中，中标一套日本BEX* LF301细胞电融合仪。 日本BEX是世界知名的电穿孔仪、细胞融合仪生产商，LF301是其最新型号的细胞电融合仪。奥然是BEX的中国总代理。

项目详细信息如下：一、项目编号：YFGP-2022-B-0376二、项目名称：天津师范大学气相色谱仪等仪器购置项目三、预算金额：391.02万元最高限价：391.02万元四、采购需求：采购需求：包号是否设置最高限额预算（万元）最高限额（万元）采购目录采购需求第1包否57.3857.38原子吸收分光光度计见附件第2包否5555高通量微孔板检测仪见附件第3包否49.549.5手持式近红外光谱仪见附件第4包否43.6643.66固液总有有机碳分析仪见附件第5包否3939气相色谱仪见附件第6包否37.9637.96傅立叶变换红外光谱仪见附件第7包否30304D核转染系统见附件第8包否28.4728.47便携式土壤动态气体含量检测仪见附件第9包否25.5525.55全自动纤维分析仪见附件第10包否1515多功能电穿孔系统见附件第11包否9.59.5TDR土壤水分测量仪见附件五、获取采购文件时间：2022年12月15日到 2022年12月21日，每天上午08:30至12:00，下午13:00至16:00（北京时间，法定节假日除外）地点：昱丰（天津）项目管理有限公司企业信息（天津市河西区解放南路与湘江道交口海河大观三期18号楼85底商三层）方式：填表发售领取售价：300元六、响应文件提交截止时间：2022年12月25日 09点00分（北京时间）地点：天津市河西区解放南路与湘江道交口海河大观三期18号楼85底商三层七、凡对本次采购提出询问，请按以下方式联系。1.采购人信息名称：天津师范大学地址：天津市西青区宾水西道393号联系方式：022-23766401.项目联系方式项目联系人：吴建芳电 话：15620612730

青海省政府采购中心依据青海省财政厅下达的采购计划，现对青海大学2012年省级重点学科实验室设备采购项目进行国内公开招标，欢迎合格的供应商参加投标。　　一、 项目名称：青海大学2012年省级重点学科实验室设备(青政采公招字(QC)2012-075)　　二、招标内容：共6个包　　包1：食品科学实验仪器及加工设备 预算控制额度：50万元　　自动压力控制定时型立式压力蒸汽灭菌器、凯氏定氮仪、全自动磁力搅拌发酵罐、冰激凌制造机、小动物疲劳仪、小动物跳台仪、多功能小鼠自主活动记录仪、净化工作台、高速组织分散均质机、分光光度计、电子分析天平、酸度计、粘度计、旋转蒸发仪、真空干燥箱、冷冻离心机、灌肠机、自动蛋白核酸分离层析仪、实验室专用超纯水机、罐头封口机、双恒电泳仪、水平电泳槽、循环水真空泵、电导率仪、卤素快速水分测定仪、肌肉嫩度仪、实验型干酪槽　　包2：镁合金材料创新平台项目专业设备 预算控制额度：94万元　　高温真空膨胀仪(热膨胀仪) (进口)、四柱万能式液压机、布氏硬度计(含自动测量系统)、二辊实验热轧机　　包3：草业学科仪器设备 预算控制额度：217万元　　元素分析仪(总有机碳)(进口)、开路式土壤呼吸测定仪(土壤碳通量自动测定仪)(进口)、光合生理分析仪(进口)、智能人工气候箱、霉菌培养箱(生化培养箱)、全自动纤维分析仪(进口)、数显不锈钢电热板、全自动凯氏定氮仪(进口)、可见光分光光度计、红外线水分测定仪、实体显微镜(进口)、生物显微镜(进口)、数字式多光谱植被测量仪/冠层相机(进口)、便携式土壤三参数测量仪(进口)、台式高速冷冻离心机、土壤紧实度仪(进口)、土壤水分监测系统(进口)、土壤养分速测仪、不锈钢电热蒸馏水器、高压灭菌锅、记忆式数字式照度计(RS232)、电子天平、便携式天平、电热恒温水浴锅、台式鼓风干燥箱、电磁炉　　包4：医学实验设备 预算控制额度：208.15万元　　生物显微镜及图像处理系统、人体塑化模型、流式细胞仪(进口)、全波长酶标仪(进口) 、大型垂直电泳槽(进口)、大型蛋白转印槽(进口)、细胞废液抽取设备、血样分离设备、三气培养箱(低氧模拟)、PCR仪器(带梯度)(进口)、全自动化学发光/荧光/可见光成像分析系统(进口)、高压灭菌锅(进口)、移液器(进口)、普通冰箱　　包5：生物学专业仪器 预算控制额度：131.2万元　　超纯水仪(进口)、蛋白转印系统(进口)、电穿孔仪(进口)、凝胶成像系统(进口)、PCR仪(进口)、高速离心机(进口)、台式高速冷冻离心机(进口)、根系分析系统(进口)、高效液相色谱(进口)、混合型球磨仪(进口)、蛋白核酸检测仪(进口)、手动可调程单道移液器 (进口)、手动可调程八道移液器 (进口)、手动可调程单道移液器、十二道数字可调移液器、数显电热恒温箱、数显恒温水浴锅、酸度计、微波炉、智能鼓风干燥箱、脱色摇床、12管干热可调式氮吹仪、医用X光洗片机、低温恒温循环器、恒温磁力搅拌器、加热磁力搅拌器、双温控制数字型干式加热器、可制冷恒温摇床、抽滤器、冷藏柜、冰箱、可见分光光度计、紫外可见分光光度计、层析冷柜、扫描仪、电子精密天平、低温人工气候箱、洁净工作台 、可调高速匀浆机　　包6：盐湖化工专业仪器 预算控制额度：116万元　　空调、钢瓶固定架(4轮单瓶气瓶推车)、立式冰柜、阿贝折射仪(双目)、电热鼓风干燥箱、电导率仪、计算机电化学分析系统配件、高速逆流色谱仪(半制备)、旋转蒸发仪、循环水式多用真空泵、超声波清洗器、移液器、涡旋振荡器、暗箱式紫外分析仪、台式过滤离心机、迷你离心机、磁力搅拌器、pH计、苏泊尔电磁炉、电子天平、真空干燥烘箱、烘箱、薄层扫描仪、电热套、低温冷却液循环泵、恒温水浴锅、反相C18液相色谱柱、索式提取器、挥发油提取器、冰箱、荧光分光光度计(进口)　　三、投标要求：　　1、投标人可对该项目各包进行投标，但不得就一个包中项目拆分投标，所投包内项目必须完全响应招标文件所列示内容。　　注：投标文件中未特别标注为“进口”字样的，均须采购国产产品。所采购的货物、服务必须符合国家的强制性标准。　　2、报价范围、采购范围及所应达到的要求，以招标文件中商务、技术和服务的相应要求为准。　　3、交货时间：按需方实际要求。　　4、招标内容如有变动，以招标文件及澄清文件为准。　　四.参与投标的供应商应具备的资格条件　　1.符合《中华人民共和国政府采购法》第22条的规定 　　2.已在青海省政府采购中心登记备案 (具体要求详见青海政府采购信息网) 　　3. 投标企业的经济实力足以承担所投标项目的经济责任。　　4.招标文件规定的其他资质条件。　　五.所投产品参数要求：详见招标文件。　　六.供应商购买招标文件须携带的资料：法人授权委托书(提供原件)或单位介绍信。　　七.招标文件发售及截止时间：　　1. 招标文件发售时间：2012年11月1日至2012年11月9日(上午9：00-11：30，下午15：00-17：30，节假日除外)　　2.招标文件发售地点：青海省政府采购中心1楼信息科(西宁市黄河路30号)　　八.开标时间及地点：　　1.开标时间： 2012年11月22日上午9：00开标。　　2.开标地点：青海省政府采购中心1楼开标大厅　　九.联系人及联系方式：　　采购单位：青海大学 0971-5312959-801　　招标机构：青海省政府采购中心 标书购买联系人：康先生　　电话及传真：0971-6140806 邮编：810001　　青海省政府采购中心　　二〇一二年十一月一日

近日,大连医科大学附属第二医院王琪教授牵头、与北京大学微纳米技术国家重点实验室王玮教授联合申报的国家重大科研仪器研制项目“面向肿瘤转移可视化研究的自体循环肿瘤细胞‘捕获-标记-回输一体化’设备”获国家自然科学基金委员会批准立项，直接经费580万元。这是大连医科大学首次获批国家重大科研仪器研制项目，也是辽宁省医学院校首次获批该类型项目。　　该项目以肺癌为研究对象，针对“肿瘤转移演进中循环肿瘤细胞(CTC)时空异质性规律”这一亟待解决的重大科学问题，首次提出应用微流控与微机电集成技术平台，结合分子影像与原位电穿孔等技术，构建一个用于活体动物全身血液CTC高通量透析式捕获、高特异多模态标记和高活性无损回输的自体CTC“捕获-标记-回输一体化”设备，实现肿瘤转移中自体CTC体内运动轨迹及靶器官选择的实时动态可视化监测。与现有成像系统结合，将能够为CTC时空异质性与肿瘤转移的可视化研究提供体内与体外、离体与在体融合的一体化平台，为CTC在体研究开辟新的领域和方法，推动肿瘤转移机制的研究。　　国家重大科研仪器研制项目面向科学前沿和国家需求，以科学目标为导向，资助对促进科学发展、探索自然规律和开拓研究领域具有重要作用的原创科研仪器与核心部件的研制，以提升我国的原始创新能力。2020年国家自然科学基金委员会受理该类型项目申请600余项，医学科学部资助8项。　　2020年大连医科大学还获批国家自然科学基金面上项目22项、青年科学基金32项，获直接经费共计2569万元。

继13年2月圆满举办北区代理商工作会议后，8月8日-8月10日北京五洲东方科技发展有限公司2013年代理商（南区）工作年会在北京五洲东方公司总部顺利举行，本次会议得到南区多家代理商的大力支持与参与。 工作会议首先由五洲东方公司总经理介绍了公司上一年取得的优异业务成果和公司三年发展战略规划，之后由产品经理详细介绍了公司各个独家代理产品和优势产品如iporation原位电穿孔转染仪等多家产品的技术特点和市场定位；为给公司代理商合作伙伴提供更全面的支持，公司售后服务、商务运作、市场营销等平台分别介绍了为分销代理业务的支持方案和流程。 之后各位代理商共同分享交流了13年国内科学仪器市场的行业特点和市场需求，大家对13年国内市场发展达成一致的共识。会议期间五洲东方专程安排与各位合作伙伴参加了多项客户联谊活动。

挑战赛大合影春暖花开、万象更新。2月26-3月1日北京五洲东方科技发展有限公司2013年代理商(北区)工作年会在北京五洲东方公司总部顺利举行，本次会议得到北区9个省24家代理商近40人的大力支持与参与。工作会议首先由五洲东方公司总经理介绍了公司12年取得的优异业务成果和公司三年发展战略规划，之后由产品经理详细介绍了公司各个独家代理产品和优势产品如iporation原位电穿孔转染仪等多家产品的技术特点和市场定位 为给公司代理商合作伙伴提供更全面的支持，公司售后服务、商务运作、市场营销等平台分别介绍了为分销代理业务的支持方案和流程。前三名颁奖在隆重热烈的&ldquo 2012年度长期合作伙伴奖&rdquo 和&ldquo 2012年百万俱乐部优秀合作奖&rdquo 颁奖典礼后，来自于黑龙江、吉林、辽宁、内蒙古、山西、陕西、河南、湖北、山东等共24家各区域仪器代理商经理分别发言，共同分享交流了13年国内科学仪器市场的行业特点和市场需求，大家对13年国内市场发展达成一致的共识。比赛现场会议现场会议期间五洲东方专程安排与各位合作伙伴参与了包括北京德云社相声演出的老北京民俗游和卡丁车挑战赛等多项客户联谊活动。更多精彩请关注五洲东方微博：http://e.weibo.com/ostc

水牛是一种分布于热带和亚热带气候条件下的一种家畜，可为人类提供奶、役力和牛肉。全世界水牛总数约为15.8亿头，亚洲存养的水牛数占世界的97%。 由于其经济效益和应用价值，繁殖动物学家需要对牛、羊等大型动物进行研究。近年来，转基因经济动物，如转基因牛、乳腺发生器等研究非常热门。但牛不是一种常规实验室的模式生物，所以在细胞转染和基因改造时，可参考的经验不多。 文献表明，脂质体转染法对水牛细胞的转染效率不高，常规的电穿孔仪常带来较高的细胞死亡率、且转染率也不理想。一些新型的电转染仪，虽然能为许多难转染的细胞带来福音，但其转染试剂盒多针对人、鼠等动物开发，没有专用于牛的试剂盒。 NEPA21不需要转染试剂盒，利用优化的程序即可达到高的转染效率，为水牛甚至其它经济动物的转基因研究带来了便利。 2012年4月，华粤行仪器有限公司在广西大学展开水牛胎儿成纤维细胞的转染试用活动，获得了较高的转染效率和细胞存活率。实验者对NEPA21的转染效果给予了较高的评价。 GFP标准质粒转染水牛胎儿成纤维细胞效果图