大规模幼体培养系统

大规模动物细胞培养的问题及对策动物细胞培养开始于本世纪初，到1962年规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，已成为医药生物高技术产业的重要部分。由于动物细胞体外培养的生物学特性、相关产品结构的复杂性和质量以及一致性要求，动 物细胞大规模培养技术仍难于满足具有重要医用价值生物制品的规模生产的需求，迫切需要进一步研究和发展细胞培养工艺。目前，世界众多研究领域集中在优化细胞培养环境、改变细胞特性、提高产品的产率并保证其质量和一致性上。1.细胞培养环境细 胞培养环境中抑制因素的积聚是提高细胞密度的主要限制因素。体外动物细胞培养中氨离子的积累是抑制细胞生长的主要因素之一。氨的积聚使细胞内UDP氨基己 糖(UDP-N-乙酰葡糖胺和UDP-N-乙酰半乳糖胺)增加，影响细胞的生长及蛋白的糖基化过程。氨抑制Gln代谢途径，使Asp和Glu消耗增加。细胞消耗Asp增加，可能是细胞线粒体膜上苹果酸－天冬氨酸泵转运NADH加快，使细胞维持糖酵解途径的需要。Asp消耗增加可能会从Gln代谢多经天冬氨 酸转氨酶途径而不是丙氨酸转氨酶或谷氨酸脱氢酶途径得以补偿。氨来源于两方面：一是直接来源于培养基，一是细胞代谢所产生。但两者都涉及谷氨酰胺，因此需要防止培养基中Gln自然分解，限制Gln用量，并尽量去除培养基中的氨。乳酸是细胞糖代谢的产物。高浓度乳酸会抑制乳酸脱氢酶(LDH），从而减少乳酸产生。LDH受抑制后阻止了NADH向NAD的再生及其偶联的丙酮酸/乳酸转 换，从而导致NADH[font=T

[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=123451]大规模动物细胞培养[/url]动物细胞培养开始于本世纪初，到1962年规模开始扩大，发展至今已成为生物、医学研究和应用中广泛采用的技术方法，利用动物细胞培养生产具有重要医用价值的酶、生长因子、疫苗和单抗等，已成为医药生物高技术产业的重要部分。由于动物细胞体外培养的生物学特性、相关产品结构的复杂性和质量以及一致性要求，动物细胞大规模培养技术仍难于满足具有重要医用价值生物制品的规模生产的需求，迫切需要进一步研究和发展细胞培养工艺。目前，世界众多研究领域集中在优化细胞培养环境、改变细胞特性、提高产品的产率并保证其质量和一致性上。

微载体培养技术（micro-carrier culture technique）于1967年被用于动物细胞大规模培养。经过三十余年的发展，该技术日趋完善和成熟，广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等。微载体培养是目前公认最具发展前途的一种动物细胞大规模培养技术，其兼具悬浮培养和贴壁培养的优点，且容易放大。该技术已广泛用于培养各类型细胞，如293细胞、成肌细胞、Vero细胞、CHO细胞。一、微载体 微载体是指直径60-250 μm，能适用于贴壁细胞生长的微珠。一般是由天然葡聚糖或者各种合成的聚合物组成。常用商品化微载体有三种：Cytodex1、2、3，Cytopore和Cytoline。二、微载体培养原理与操作 其原理是将对细胞无害的微载体颗粒加入培养容器的培养液中，作为载体，使细胞在微载体表面附着生长，同时通过持续搅动使微载体始终保持悬浮状态。 贴壁依赖性细胞在微载体表面上的增殖，要经历黏附贴壁、生长和扩增三个阶段。细胞只有贴附在固体基质表面才能增殖，因此细胞在微载体表面的贴附是进一步铺展和生长的关键。细胞主要通过静电引力和范德华力与微载体黏附，这取决于细胞与微载体的接触概率和相融性。 由于动物细胞无细胞壁，对剪切力敏感，因此微载体培养在操作中对搅拌转速及搅拌方式的要求都十分严格。微载体培养要求搅拌的速度非常慢，最大速度75 r/min。细胞微载体培养通常分为三个时期：贴壁期，过渡期和培养期。贴壁期和过渡期可以使用超低速细胞磁力搅拌系统进行培养，该系统具有超低的搅拌速度，剪切力小且能在低速下充分混匀细胞。三、微载体培养的优势产业化细胞培养首先需要提供足够大的细胞生长面积，使培养容器单位容积所提供的细胞生长面积有所增加，从而提高疫苗和生化制剂的产量；其次需要加强和改善细胞培养的环境，有利于细胞生长；第三，细胞的均一化程度要高，在一个大发酵罐内培养细胞，生长环境需一致。要满足以上三点要求，常规的培养瓶静态培养，甚至是转瓶都很难满足，而微载体培养技术则能很好的解决这些问题。总结 综上所述，微载体的优势可以归纳为以下几点：表面积/体积大，单位体积培养液的细胞产率高；把悬浮细胞和贴壁细胞培养融合在一起，兼有两者的优点；可用简单的显微镜观察细胞在微珠表面的生长情况；简化细胞生长过程中对各种环境因素的检测和控制，重现性好；培养基利用率较高；放大容易；细胞收获过程不复杂；劳动强度小；培养系统占地面积和空间小等。

史上最大规模干细胞基因研究来自新加坡基因组研究所（GIS）和细胞和分子生物学研究所（IMCB）的科学家发现了人类干细胞“百变”的秘密，而且只要启动这个被称为PRDM14的基因，任何普通细胞都有可能“变身”为干细胞，成功率比现有技术高三倍。该研究发表于10月17日的Nature杂志上。拥有多能性（pluripotency）的胚胎干细胞（embryonic stem cell），能变成人体里200多种细胞中的任何一种，自我“繁殖”能力也强，因此一直被视为各种绝症的希望。不过，由于牵涉道德问题，胚胎干细胞研究一再受阻，科学家只好另觅良方。科学人员近年就开始钻研“培育”多能性干细胞的可能性，通过重编程（re-programme)改变细胞基因，让普通细胞也具多能性。由19名本地科学家组成的研究小组就花了三年，从2万1000组基因中，找到了干细胞“多能性”的重要钥匙。据称这是有史至今，最大规模的干细胞基因研究。

【网络讲座】：基于生物反应器水平的细胞培养工艺开发和放大考虑-默克制药工艺基础课堂十七【讲座时间】：2016年05月12日 14:00【主讲人】：王晖，默克工艺解决方案高级生物工艺工程师，拥有10年生物工艺上游和下游过程开发经验，在细胞培养工艺，一次性产品及系统的应用上经验丰富。熟悉重组蛋白和抗体生产工艺，曾参与多个重组蛋白和抗体项目的研发工作。【会议简介】动物细胞表达药物已经成为目前国内生物医药发展的主流，尤其以单抗药物表现最为活跃。大规模细胞培养，生产规模纯化技术和药物质量检测与控制是目前生物药物产业化的三大核心技术。而作为上游工艺的细胞培养则很大程度上决定了产业化规模，成本以及影响产品关键质量属性。本课程将介绍大规模细胞培养中常用搅拌罐式生物反应器结构原理以及过程检测技术，重点讨论抗体药物细胞培养过程中的关键基础参数，工艺流程，基于产品关键质量因素探讨工艺优化，并结合实践讨论反应器水平工艺放大策略和放大考虑因素。-------------------------------------------------------------------------------1、报名条件：只要您是仪器网注册用户均可报名，通过审核后即可参会。2、报名截止时间：2016年05月12日 13:303、报名参会：http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting/meetingInsidePage/18844、报名及参会咨询：QQ群—171692483http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/03/201603141635_586950_2507958_3.gif

注意事项： 1.配制溶液时必须用新鲜的蒸馏水。2.安装蔡式滤器时通常使用孔径 0.45 微米 和 0.22 微米滤膜各一张，放置位置为 0.45 的位于 0.22 微米的滤膜上方，并且要特别注意滤膜光面朝上。 3.配制 RPMI1640 培养基时因为还要加入小牛血清，而小牛血清略偏酸性，为了保证培养液 PH 值最终为 7.2 ，可在配制时调 PH 至 7.4 。 细胞培养的一般过程 一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器血中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。R 理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置 4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。由组织并分离分散细胞的方法可参阅有关文献。 三、培养将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的 PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和 CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。四、冻存及复苏为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度?－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入 37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。

从大小来讲，细胞培养瓶约可分为约600ml，250ml，50ml和25ml的，一般都经过表面改性处理，适合细胞贴壁和生长。600ml 、300ml的多用于大规模培养时用（如单克隆细胞的培养等），50ml的多用于一般性细胞实验用（一般性的传代，保存细胞，为实验提供细胞等），25ml一般是用来复苏细胞或细胞较少时的培养，还有做原代细胞时也可以做多瓶而避免交叉污染。当然还有其他如圆形的等，都可根据个人爱好和实验需要自己选择。 根据细胞培养瓶制作材料的不同，也有玻璃和塑料之分，这里谈一点自己的浅见（欢迎不同意见的战友拍砖）。不同的细胞对胰酶的敏感度不一样，所以在实验中我们常常会遇到一些细胞消化半天也没有起色，导致细胞状态不断下滑，直至最后的死亡以至于实验进展的不顺利。当然，有时候是可以通过加一些EDTA等来增强胰酶的能力，或者提高胰酶的浓度来实现，在培养一些细胞过程中，我发现，一些细胞对玻璃和塑料制品粘附能力不同，如RAW264.7，平滑肌细胞等，在转换培养瓶之后，可以发现好消化了很多，并且在回到原制品的培养瓶时不会改变它的贴壁能力。这里希望有经验的战友可以分享你们的经验。 关于培养板的购买其实我也没有什么经验，想说的就是要尽量避免购买国产的培养板，国产的一些培养瓶还可以，但是培养板我们买过很多国产的，确实效果不是很好，细胞在里面基本上长的非常非常磕碜。所以经费富余的情况下，这些东西能买进口的就买吧。大公司的基本都可以买，BD，Corning等等。这些东西原则上是一次性的，但是我们大部分实验室根本不可能做到，其实泡酸，洗干净再用也没问题，毕竟我们没有老外那么富足的经费，所以我们就累点吧，多做点体力活锻炼一下身体吧。滴管其实也没什么好说的，国产的就足够了。要说的是图中我比较喜欢用C类的滴管，原因就是塞上棉花后吹打细胞不会怕棉花湿掉而引起污染，而且用完棉花也方便取出，便于下次再用。

蛋白质的翻译后修饰常常会影响蛋白质的结构和功能，反映在生物制药工业上，会对药品的安全性和有效性产生重大影响。翻译后修饰常常表现为电荷变异体，因此电荷异构体的分析成为了质量控制的一个关键项。目前常见的电荷异构体分析方法为IEF／cIEF或iCIEF，可以鉴别生物药，对生物药的纯度进行分析，测定电荷异构体的等电点以及各种异构体的分布。但是，等电聚焦或者毛细管等电聚焦存在很多短板，最明显的就是无法大规模制备异构体。美国基因泰克公司的科学家曾经用一种叫做自由流电泳的工具，高分辨率高通量大规模对单抗的电荷异构体进行分离制备，并结合各种分析手段，对每一个异构体进行了深度表征。现分享论文如下，欢迎大家讨论！

首先需了解微生物需要的营养物质。 （1）微生物需要的营养物质营养物质应满足微生物的生长、繁殖和完成各种生理活动的需要。它们的作用可概括为形成结构（参与细胞组成）、提供能量和调节作用（构成酶的活性和物质运输系统）。微生物的营养物质有六大类要素，即水、碳源、氮源、无机盐、生长因子和能源。① 水水是微生物的重要组成部分，在代谢中占有重要地位。水在细胞中有两种存在形式：结合水和游离水。结合水与溶质或其他分子结合在一起，很难加以利用。游离水（或称为非结合水）则可以被微生物利用。② 碳源碳在细胞的干物质中约占50%，所以微生物对碳的需求最大。凡是作为微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的营养物质，称为碳源。作为微生物营养的碳源物质种类很多，从简单的无机物（CO2、碳酸盐）到复杂的有机含碳化合物（糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、芳香化合物及各种含碳化合物等）。但不同微生物利用碳源的能力不同，假单孢菌属可利用90种以上的碳源，甲烷氧化菌仅利用两种有机物：甲烷和甲醇，某些纤维素分解菌只能利用纤维素。大多数微生物是异养型，以有机化合物为碳源。能够利用的碳源种类很多，其中糖类是最好的碳源。异养微生物将碳源在体内经一系列复杂的化学反应，最终用于构成细胞物质，或为机体提供生理活动所需的能量。所以，碳源往往也是能源物质。自养菌以CO2、碳酸盐为唯一或主要的碳源。CO2是被彻底氧化的物质，其转化成细胞成分是一个还原过程。因此，这类微生物同时需要从光或其他无机物氧化获得能量。这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质。③ 氮源凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质，称为氮源。细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。氮是组成核酸和蛋白质的重要元素，氮对微生物的生长发育有着重要作用。从分子态的N2到复杂的含氮化合物都能够被不同微生物所利用，而不同类型的微生物能够利用的氮源差异较大。固氮微生物能利用分子态N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质，也能利用无机氮和有机氮化物，但在这种情况下，它们便失去了固氮能力。此外，有些光合细菌、蓝藻和真菌也有固氮作用。许多腐生细菌和动植物的病原菌不能固氮，一般利用铵盐或其他含氮盐作氮源。硝酸盐必须先还原为NH+4后，才能用于生物合成。以无机氮化物为唯一氮源的微生物都能利用铵盐，但它们并不都能利用硝酸盐。有机氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米浆等，工业上能够用黄豆饼粉、花生饼粉和鱼粉等作为氮源。有机氮源中的氮往往是蛋白质或其降解产物。氮源一般只提供合成细胞质和细胞中其他结构的原料，不作为能源。只有少数细菌，如硝化细菌利用铵盐、硝酸盐作氮源和能源。④ 无机盐无机盐也是微生物生长所不可缺少的营养物质。其主要功能是：① 构成细胞的组成成分；② 作为酶的组成成分；③ 维持酶的活性；④ 调节细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位；⑤ 作为某些自氧菌的能源。磷、硫、钾、钠、钙、镁等盐参与细胞结构组成，并与能量转移、细胞透性调节功能有关。微生物对它们的需求量较大（10-4～10-3 mol/L），称为“宏量元素”。没有它们，微生物就无法生长。铁、锰、铜、钴、锌、钼等盐一般是酶的辅因子，需求量不大（10-8～10-6 mol/L），所以，称为“微量元素”。不同微生物对以上各种元素的需求量各不相同。铁元素介于宏量和微量元素之间。在配制培养基时，可通过添加有关化学试剂来补充宏量元素，其中首选是K2HPO4和MgSO4，它们可提供需要量很大的元素：K、P、S和Mg。微量元素在一些化学试剂、天然水和天然培养基组分中都以杂质等状态存在，在玻璃器皿等实验用品上也有少量存在，所以，不必另行加入。⑤ 生长因子一些异养型微生物在一般碳源、氮源和无机盐的培养基中培养不能生长或生长较差。当在培养基中加入某些组织（或细胞）提取液时，这些微生物就生长良好，说明这些组织或细胞中含有这些微生物生长所必须的营养因子，这些因子称为生长因子。生长因子可定义为：某些微生物本身不能从普通的碳源、氮源合成，需要额外少量加入才能满足需要的有机物质，包括氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物，有时也包括一些脂肪酸及其他膜成分。各种微生物所需的生长因子不同，有的需要多种，有的仅需要一种，有的则不需要。一种微生物所需的生长因子也会随培养条件的变化而变化，如在培养基中是否有前体物质、通气条件、pH和温度等条件，都会影响微生物对生长因子的需求。从自然界直接分离的任何微生物，在其发生营养缺陷突变前的菌株，均称为该微生物的野生型。绝大多数野生型菌株只需简单的碳源和氮源等就能生长，不需要添加生长因子；经人工诱变后，常会丧失合成某种营养物质的能力，在这些菌株生长的培养基中，必须添加某种氨基酸、嘌呤、嘧啶或维生素等生长因子。⑥ 能源能源是指为微生物的生命活动提供最初能量来源的营养物或辐射能。化能异养型微生物的能源即碳源；化能自养型微生物的能源都是还原态的无机物，如NH4+、NO2-、S、H2S、H2、Fe2+等，它们分别属于硝化细菌、亚硝酸细菌、硫化细菌、硫细菌、氢细菌和铁细菌等。一种营养物常有一种以上营养要素的功能，即除单功能营养物外，还有双功能，甚至三功能营养物。辐射能是单功能；还原态无机养分常是双功能的（NH4+既是硝化细菌的能源，又是它的氮源）甚至是三功能的（能源、氮源和碳源）；有机物常有双功能或三功能作用。（2）配制培养基必须遵循的原则微生物的培养基通常指人工配制的适合微生物生长繁殖，或积累代谢产物的营养基质。广义上说，凡是支持微生物生长繁殖的介质或材料，均可作为微生物的培养基。一个适当的培养基配方，对发酵产品的产量和质量有着极大的影响。针对不同微生物，不同的营养要求，可以有不同的培养基。但它们的配制必须遵循一定原则。① 营养物质应满足微生物的需要。不同营养类型的微生物对营养的需求差异很大，应根据菌种对各营养要素的不同要求进行配制。② 营养物的浓度及配比应恰当。营养物浓度太低，不能满足微生物生长的需要；浓度太高，又会抑制微生物生长。糖和盐浓度高有抑菌作用。碳氮比（C∶N，以还原糖含量与粗蛋白含量的比值表示）：一般培养基为C∶N=100∶0.5～2。在设计培养基配比时，还应考虑避免培养基中各成分之间的相互作用，如蛋白胨、酵母膏中含有磷酸盐时，会与培养基中钙或镁离子在加热时发生沉淀作用；在高温下，还原糖也会与蛋白质或氨基酸相互作用而产生褐色物质。③ 物理、化学条件适宜。pH：各种微生物均有其生长繁殖的最适pH，细菌为7.0～8.0，放线菌为7.5～8.5，酵母为3.8～6.0，霉菌为4.0～5.8。对于具体的微生物菌种，都有各自的特定的最适pH范围，有时会大大突破上述界限。在微生物生长繁殖过程中，会产生能够引起培养基的pH改变的代谢产物，尤其是不少微生物有很强的产酸能力，如不适当地加以调节，就会抑制甚至于杀死其自身。在设计培养基时，要考虑培养基的pH调节能力。一般应加入缓冲液或CaCO3，使培养基的pH稳定。其他：培养基的其他理化指标，如水活度、渗透压也会影响微生物的培养。在配制培养基时，通常不必测定这些指标，因为培养基中各种成分及其浓度等指标的优化，已间接地确定了培养基的水活度和渗透压。此外，各种微生物培养基的氧化还原电位等也有不同的要求。④ 培养目的：培养基的成分直接影响培养目标。在设计培养基时，必须考虑是要培养菌体，还是要积累菌体代谢产物；是实验室培养，还是大规模发酵等问题。用于培养菌体的种子培养基营养成分应丰富，氮源含量宜高，即碳氮比值应低；相反，用于大量积累代谢产物的发酵培养基，氮源应比种子培养基稍低；当然，若目的产物是含氮化合物时，有时还应该提高培养基的氮源含量。在设计培养基时，还应该特别考虑到代谢产物是初级代谢产物，还是次级代谢产物。如果是次级代谢产物，还要考虑是否需加入特殊元素（如维生素B12中Co）或特殊的前体物质（如生产青霉素G时，应加入苯乙酸）。在设计培养基，尤其是大规模发酵生产用的培养基时，还应该重视培养基组分的来源和价格，应该优先选择来源广、价格低廉的培养基。（3）几种培养基的配制原则① 种子培养基：适用于微生物菌体生长的培养基，目的是为下一步发酵提供数量较多，强壮而整齐的种子细胞。一般要求氮源、维生素丰富，原料要精。② 发酵培养基：用于生产预定发酵产物的培养基，一般的发酵产物以碳源为主要元素。发酵培养基中的碳源含量往往高于种子培养基。如果产物的含氮量高，应增加氮源。在

多大规模的项目才需要发布采购公告？是 价格高低？重要性？项目规模？？？？

[color=#000000]3月25日，山西省省长金湘军主持召开山西省政府第36次常务会议，研究安全生产、推动大规模设备更新和消费品以旧换新、美丽山西建设、保障性住房建设、城中村改造等工作。[/color][color=#000000]会议正式通过《山西省推动大规模设备更新和消费品以旧换新实施方案》，并强调，要深入贯彻党中央、国务院决策部署，统筹扩大内需和深化供给侧结构性改革，深入实施工业、农业、建筑、交通、教育、文旅和医疗等重点领域设备更新行动，持续提升先进产能比重，促进产业高端化、智能化、绿色化发展，积极培育新质生产力。实施消费品以旧换新行动，推动汽车、家电、家装等领域高质量耐用消费品更多进入居民生活。实施畅通资源循环利用链条行动，提高废弃物资源化和再利用水平。实施标准提升衔接行动，推动关键领域标准制修订和落地实施。要更好发挥政府作用，强化政策要素保障，形成更新换代规模效应，提高经济循环质量和水平。[/color][来源：仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

[size=16px]在2013年第二阶段监测实施方案和能力建设方案，落实中央建设资金4亿元，带动地方配套资金约2亿元，在145个城市新建了524个空气自动站。截至目前，全国252个地级以上城市按新标准要求建设了1179个空气自动站，比原计划超额完成约37%。[/size][size=16px]　　2014年，环境监测系统要围绕大气、水、土壤污染防治三大战役，全面加强环境监测工作，坚决向污染宣战。特别是要抓好空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量第三阶段建设任务的完成，“到今年年底，全国新空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量监测站建设要全部完成，338个地级城市的空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量监测站要投入使用，这些监测站今年12月31日前要建成，明年1月1日对外公布数据。届时，这将是世界上最大规模的环境空[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/bp][color=#3333ff]气质[/color][/url]量监测系统。[/size][size=16px]　[/size]

我国建成全球最大规模社保体系：每千人病床数6.51张，已超高收入国家标准。

媒体：荷兰爆发大规模反封锁抗议；丹麦“黑衣人”抗议防疫封锁

据中国之声《新闻纵横》报道，近日，福建省宁德市古田县黄田镇到水口镇一带的闽江水面发生了大规模死鱼现象。仅黄田镇养殖户死亡的鱼就达8、9百万尾，大量死鱼漂在江面上，发出令人窒息的恶臭。　　经过当地渔业部门的检测，鱼的死亡原因是缺氧，但是为何养殖户人工打氧却未收到任何效果？作为福建的母亲河，沿岸居民饮用水安全是否受到威胁？中央台驻福建记者今天凌晨从现场发回报道。　　满江死鱼　　昨天晚上8点钟，我开车赶到了最先发生大规模死鱼的宁德市古田县黄田镇，随即坐上渔民的船，到江上的鱼排实地察看鱼死亡的情况。“其实这江面非常宽啊？”“有600米，是闽江最宽的一段。”　　一轮金黄的弯月挂在天空，站在船头，江风习习，本来是一件非常惬意的事情。但是令人心痛的是，江面上漂着大量的死鱼，白花花地堆在江面上，吹过来的江风带着腥臭味，令人几乎无法呼吸。十分钟左右，我们到了江中央的一个鱼排边。只见一艘小船上坐着七、八位鱼民，他们已经清理完鱼排里的死鱼，正准备回家了。“满满的，一筐筐都是满满的。”“刚刚捞了多少啊？”“很多啊，你看，一船船全都是满的。”“这些鱼都全死了吗？”“已经几天喽，几天都在这里清理。”　　这个鱼排本来是在江边的，因为鱼不断的死亡，鱼民只好把绳子砍断，把鱼排拉到江中央，希望水流速度快点，能减少鱼死亡的数量和速度，但仍于事无补。渔民告诉我，这个鱼排里面的鱼全部死掉了。“这个鱼排有多大？”“这个鱼排我们是养了30几万条鱼了，40箱鱼就是120万块，小的不算。”　　尽管我看到的已经让人触目惊心，但渔民们说，这不算多了，前面还有更多死鱼呢。于是，在我的要求下，渔民们开着船，继续带着我沿江而上。　　随着船慢慢地前行，在手电筒的灯光下，我看到越来越多的死鱼，一般的都大概有四、五斤重了，有的估计超过10斤，死鱼的恶臭扑鼻而来，大家咳嗽声四起。我用声音记录下了我当时看到的和想到的：　　“大概一平方米的江面上，会有几十条死鱼。整个江面上都是，天啊，这里死了多少条鱼，这种惨烈的场面确实是我没有见过的。不知是一种怎样的天灾，或是人祸，让满江的鱼全都飘在江面上，死去了。”　　300多万块打了水漂两个小时 全部死掉　　一个多小时后，我回到岸上，采访了古田镇龙丰淡水养殖专业合作社理事长魏茂慈，他的鱼是最先死亡的，也是损失最惨重的人，300多万块打了水漂。　　魏茂慈表示，8月27日晚上，他听工人说鱼有点不正常，到鱼排一看，很多鱼都开始浮出水面了。一开始他还以为是缺氧，于是赶紧让工人开机打氧。“增加一点氧气，没用啊，反正这边在增加，那边鱼在死。到了晚上九点多十点钟，大概100多箱全部都满掉了，全部都是死鱼。就两个小时，全部死掉。”　　渔业局说缺氧 机器打氧无效　　28日，古田县渔业局的人来了，认为鱼死亡的原因是缺氧。但是养殖户用机器打氧，却收不到任何效果。“反正27日，28日，29日，30日，黄田所有的鱼，基本都浮头了。”　　就这样，黄田镇几乎所有养殖的鱼，包括江里的野生鱼，都陆续死亡了。一开始死的不多的时候，渔民们还把死鱼捞上来，在地里深埋了，政府也答应有一定的补贴。后来鱼死得实在太多了，实在无法再捞上岸了，渔民们就开始把死鱼从网箱里捞出来，直接扔到闽江里。“那个时候，连我雇的人站在那边，都没有办法了。大家开始把死鱼往闽江里扔了，没办法，真的没办法了。”　　几乎是倾家荡产　　淡水养殖是古田镇最重要的农业支柱之一，全镇18个村，有8个村在养鱼。平时收益还不错，小户的养殖户每年也能挣5、6万块。今年的鱼眼看过几天就可以上市了，却大规模地死亡，令渔民们损失惨重。魏茂慈说：“非常惨重，几乎是倾家荡产。小户的都损失在2、3十万。”　　渔民：工业污水造成鱼大量死亡　　那究竟是什么原因令这么多的鱼死于非命呢？一开始政府部门认为是水里缺氧，但渔民们认为，一来缺氧不会造成这么大面积的死鱼，二来增加氧气也一点用没有。所以他们反对这一说法，认为是附近几家工厂，包括生产抗生素的药厂，做工程机械的锻造厂和造纸厂等，利用这几天大雨的机会，偷排工业污水，才造成鱼大量死亡。　　溶氧太低却无法测出原因　　昨天下午古田县一位人大副主任带着渔业、环保等部门来到黄田镇，与几十位渔民开会商量。各部门都表示对渔民的损失非常同情，对这一事件高度重视。但鱼死亡的具体原因，还要再等技术部门做出权威的检测。这一说法让渔民非常不满。魏茂慈说：“检测，他说要一个星期。今天下午我也问了环保局，你拿了水去检测，结果出来了吗？他说结果出来了，是溶氧太低。但是什么原因造成的？他说测不出来。后来他又说要拿到省里去，我就说：到底能不能把这个水给我测出来！”　　下游也出现大面积死鱼　　正在有关部门忙于检测的同时，一个更严峻的事实又出现了。在黄田镇下游约三十公里的水口镇，从9月1日起又开始出现大规模的鱼死亡事件，鱼儿死亡的过程与黄田镇非常类似。这令水口镇以及其下游的养殖户非常恐慌。我们了解到，福建省海洋渔业厅今天上午将在水口镇召开会议，分析原因，商议对策。我们期待能有明确的答案和确切的措施，来解决渔民的燃眉之急。　　另外，一个不容忽视的问题是，发生大规模死鱼的闽江是福建的母亲河，水质一直不错，是沿岸各城市包括省城福州的饮用水源。这次死鱼事件对闽江水质有何影响？沿岸地区数百万老百姓的饮用水是否安全？我们期待有关部门迅速行动起来，回应老百姓的关切。（来源：新华网 记者：梁卫浩）

高等有机化学没学过，乙腈难道没有办法通过有机反应大规模合成制造吗？

简单、经济，导电性可比传统酸性氧化法高688倍科技日报 2012年03月28日 星期三 本报讯 据美国物理学家组织网3月26日报道，韩国和美国的研究人员近日表示，通过混合固态二氧化碳和相应溶剂，能简单、经济地大规模生产出高质量的纳米石墨烯薄片。相关研究报告发布在本周出版的美国《国家科学院院报》网络版上。 石墨烯源自石墨，因极佳的导电性、导热性和坚固性闻名。全世界的科学家都认为石墨烯将彻底改变计算、电子和医药领域现状，但无法大规模生产石墨烯薄片却阻碍了它的广泛应用。论文的共同作者、美国凯斯西储大学高分子科学和工程系的戴黎明（音译）教授表示，他们开发了一种低成本的简单方式，可大规模生产出质量更好的石墨烯薄片。而目前常用的是酸性氧化法，因需要使用有毒的化学物质，推广受到影响。 此次研究由韩国蔚山国立科技学院的白钟范（音译）教授主导。研究人员将石墨和固态二氧化碳置于充满不锈钢球的筒罐中，两天后可经羧酸和机械力磨制加工，生产出石墨薄片，且边缘处于打开状态，以便产生化学反应。由羧酸处理的边缘可使石墨溶于质子溶剂之中，其中包括水和甲醇；也可溶于极性非质子型溶剂中，包括二甲基亚砜等。 一旦分散在溶剂之中，石墨薄片就会分离成5层或层数更少的纳米石墨烯薄片。为测试这些材料能否直接形成电子应用所需的模塑物体，研究人员将样本压缩为芯块。对比后发现，这些芯块的导电性可比由酸性氧化石墨法生产出的传统芯块高688倍。 为了形成大面积的纳米石墨烯薄膜，科学家基于3.5厘米×5厘米的硅晶片，对压缩芯块进行2小时高达900摄氏度的加热。随后，磨制而成的薄片边缘脱去了羧基，这意味着纳米薄片的边缘可与临近的薄片发生强劲的氢键结合，并保持黏合的状态，而酸性氧化压缩而成的芯块则会在加热过程中发生破碎的状况。研究人员表示，这一过程只会受到晶片的尺寸限制，生成的大面积薄膜的导电性将远超过酸性氧化法的产物，同时还将保有更高的透光率。 此外，通过改用氨或三氧化硫作为干冰的替代物，并使用不同的溶剂，科学家能自定义适用于电子产品、超级电容和可取代铂的无金属催化剂等不同应用的石墨烯薄片边缘，还能定制边缘以组装二维和三维结构等。（张巍巍）

1、同无菌室的灭菌、消毒措施。2、小规模的培养可不启用恒温培养室，而在恒温培养箱中进行。

[b]2024年《政府工作报告》提出，推动各类生产设备、服务设备更新和技术改造，鼓励和推动消费品以旧换新。[/b]在十四届全国人大二次会议经济主题记者会上，国家发改委主任郑栅洁表示，[b]设备更新初步估算是一个年规模5万亿元以上的巨大市场。[/b]2024年3月1日，李强总理主持国务院常务会议审议通过《推动大规模设备更新和消费品以旧换新行动方案》。[b]3月13日，国务院印发《推动大规模设备更新和消费品以旧换新行动方案》。[/b]那么，仪器企业将获得哪些机会？一起来看看！[align=center][size=20px][b][color=#ffffff][back=#c00000] 目标 [/back][/color][/b][/size][/align]到2027年，[b]工业、农业、建筑、交通、教育、文旅、医疗[/b]等领域设备投资规模较2023年增长25%以上；重点行业主要用能设备能效基本达到节能水平，环保绩效达到A级水平的产能比例大幅提升，规模以上工业企业[b]数字化研发设计工具普及率、关键工序数控化率[/b]分别超过90%、75%；[b]再生材料[/b]在资源供给中的占比进一步提升。[align=center][size=20px][b][color=#ffffff][back=#c00000] 这些行业/领域，更新仪器设备 [/back][/color][/b][/size][/align][color=#c00000][b]重点行业[/b][/color]△ 围绕推进[b]新型工业化[/b]，以节能降碳、超低排放、安全生产、数字化转型、智能化升级为重要方向，聚焦[b]钢铁、有色、石化、化工、建材、电力、机械、航空、船舶、轻纺、电子[/b]等重点行业，大力推动生产设备、用能设备、发输配电设备等更新和技术改造。△ 加快推广能效达到先进水平和节能水平的用能设备，[b]分行业分领域实施节能降碳改造[/b]。△ 推广应用[b]智能制造设备和软件[/b]，加快工业互联网建设和普及应用，培育数字经济赋智赋能新模式。[color=#c00000][b]建筑和市政基础设施领域[/b][/color]△ 围绕建设[b]新型城镇化[/b]，结合推进城市更新、老旧小区改造，以[b]住宅电梯、供水、供热、供气、污水处理、环卫、城市生命线工程、安防[/b]等为重点，分类推进更新改造。△ 推进各地[b]自来水厂及加压调蓄供水设施设备[/b]升级改造。△ 有序推进[b]供热计量[/b]改造，持续推进[b]供热设施设备[/b]更新改造。△ 加快推进[b]城镇生活污水垃圾处理设施设备[/b]补短板、强弱项。△ 推动[b]地下管网、桥梁隧道、窨井盖等城市生命线工程配套物联智能感知设备[/b]建设。△ 加快重点公共区域和道路视频监控等[b]安防设备[/b]改造。[b][color=#c00000]交通运输领域[/color][/b]△ 加强[b]电动、氢能[/b]等绿色航空装备产业化能力建设。[color=#c00000][b]教育领域[/b][/color]△[b] 推动符合条件的高校、职业院校（含技工院校）更新置换先进教学及科研技术设备[/b]，提升教学科研水平。△ 严格落实[b]学科教学装备配置标准[/b]，保质保量配置并及时更新教学仪器设备。[color=#c00000][b]医疗领域[/b][/color]△ 加强优质高效医疗卫生服务体系建设，推进医疗卫生机构装备和信息化设施迭代升级，鼓励具备条件的医疗机构加快[b]医学影像、放射治疗、远程诊疗、手术机器人[/b]等医疗装备更新改造。[align=center][size=20px][b][color=#ffffff][back=#c00000] 这些仪器设备，淘汰和退出 [/back][/color][/b][/size][/align]△ 建立激励和约束相结合的长效机制，加快[b]淘汰落后产品设备[/b]，提升安全可靠水平。△ 严格落实能耗、排放、安全等强制性标准和设备淘汰目录要求，依法依规[b]淘汰不达标设备[/b]。△ 推动再生资源加工利用企业集聚化、规模化发展，引导[b]低效产能逐步退出[/b]。[align=center][size=20px][b][color=#ffffff][back=#c00000] 回收循环利用行动 [/back][/color][/b][/size][/align][color=#c00000][b]废旧产品设备——回收[/b][/color]△ 加快“换新+回收”物流体系和新模式发展，支持耐用消费品生产、销售企业建设逆向物流体系或与专业回收企业合作，上门回收废旧消费品。△ 进一步完善再生资源回收网络，支持建设一批集中分拣处理中心。△ 完善公共机构办公设备回收渠道。△ 支持废旧产品设备线上交易平台发展。[color=#c00000][b]二手商品——支持流通交易[/b][/color]△ 推动二手商品交易平台企业建立健全平台内经销企业、用户的评价机制，加强信用记录、违法失信行为等信息共享。[color=#c00000][b]有序推进再制造和梯次利用[/b][/color]△ 鼓励对具备条件的废旧生产设备实施再制造，再制造产品设备质量特性和安全环保性能应不低于原型新品。△ 推广应用[url=https://www.instrument.com.cn/show/sort-18/][b]无损检测[/b][/url][b]、增材制造、柔性加工[/b]等技术工艺，提升再制造加工水平。△ 深入推进[b]汽车零部件、工程机械、机床[/b]等传统设备再制造，探索在[b]风电光伏、航空[/b]等新兴领域开展高端装备再制造业务。△ 加快[b]风电光伏、动力电池[/b]等产品设备残余寿命评估技术研发，有序推进产品设备及关键部件梯次利用。[color=#c00000][b]推动资源高水平再生利用[/b][/color]△ 推动[b]再生资源加工利用企业[/b]集聚化、规模化发展，引导低效产能逐步退出。△ 完善[b]废弃电器电子产品[/b]处理支持政策，研究扩大废弃电器电子产品处理制度覆盖范围。△ 支持建设一批[b]废钢铁、废有色金属、废塑料[/b]等再生资源精深加工产业集群。△ 积极有序发展以废弃油脂、非粮生物质为主要原料的[b]生物质液体燃料[/b]。△ 探索建设符合国际标准的[b]再生塑料、再生金属[/b]等再生材料使用情况信息化追溯系统。△ 持续提升[b]废有色金属[/b]利用技术水平，加强[b]稀贵金属[/b]提取技术研发应用。△ 及时完善[b]退役动力电池、再生材料[/b]等进口标准和政策。[align=center][b][size=20px][color=#ffffff][back=#c00000] 支持与保障 [/back][/color][/size][/b][/align][color=#c00000][b]财政支持[/b][/color]△ 把符合条件的设备更新、循环利用项目纳入中央预算内投资等资金支持范围。△ 进一步完善政府绿色采购政策，加大绿色产品采购力度。[color=#c00000][b]税收支持[/b][/color]△ 加大对节能节水、环境保护、安全生产专用设备税收优惠支持力度，把数字化智能化改造纳入优惠范围。△ 推广资源回收企业向自然人报废产品出售者“反向开票”做法。△ 配合再生资源回收企业增值税简易征收政策，研究完善所得税征管配套措施，优化税收征管标准和方式。[color=#c00000][b]金融支持[/b][/color]△ 运用再贷款政策工具，引导金融机构加强对设备更新和技术改造的支持；中央财政对符合再贷款报销条件的银行贷款给予一定贴息支持。△ 发挥扩大制造业中长期贷款投放工作机制作用。[b][color=#c00000]创新支撑[/color][/b]△ 聚焦长期困扰传统产业转型升级的产业基础、重大技术装备“卡脖子”难题，积极开展重大技术装备科技攻关。△ 完善“揭榜挂帅”、“赛马”和创新产品迭代等机制，强化制造业中试能力支撑，加快创新成果产业化应用。[color=#7f7f7f][i]延伸阅读：[/i][/color][color=#7f7f7f][i][url=https://www.instrument.com.cn/news/20240313/708621.shtml]国务院印发《推动大规模设备更新和消费品以旧换新行动方案》[/url][/i][/color][来源：仪器信息网] 未经授权不得转载[align=right][/align]

美国召回1.63万吨“毒火鸡” 77人染病1人已亡http://photocdn.sohu.com/20110805/Img315502024.jpg被召回的火鸡肉。　　美国肉制品行业巨头卡吉尔公司3日晚宣布召回3600万磅、即大约1.63万吨火鸡肉,是美国迄今最大规模的肉制品召回事件。调查显示,这些火鸡肉可能致使26个州77人感染沙门氏菌,其中一人死亡。　　美最大规模肉制品召回　　美国农业部和总部位于明尼苏达州的卡吉尔公司3日晚宣布,召回阿肯色州斯普林代尔加工厂2月20日至8月2日期间生产的全部冷冻和新鲜火鸡肉制品。　　这批火鸡肉制品涉及多个品牌,具有相同行业代码“Est. P-963”。卡吉尔公司承诺,消费者可持已经开封或未开封的火鸡肉制品前往销售点退货并领取全额退款。过去5个月内,多个地区报告消费者感染沙门氏菌病例。农业部、卫生与公众服务部下属疾病控制和预防中心正在查找细菌来源,尚未确认卡吉尔公司产品是致病源。检测显示一名患者家中的剩余火鸡肉含有沙门氏菌,且细菌特征与多名患者体内菌种相同。至于患者如何染上沙门氏菌，相关部门仍在调查中。　　卡吉尔公司在美国境内设有4家火鸡肉加工厂,这次召回事件不涉及另外3家加工厂。食品安全律师比尔·马勒定期更新一个疫情数据库,称这是美国最大规模的肉制品召回事件。

今年武汉首度启动大规模土壤修复工程，为受污染土地“排毒”。常务会上原则通过的《2011年全市两型改革试验工作要点》提出，重点启动古田化工地区、汉阳赫山原武汉农药厂片区、江岸谌家矶片区土壤修复治理工程。 武汉期望通过土壤修复，消除局部被污染土地可能存在的潜在危害。武汉市环保部门介绍，根据土壤污染状况的不同，将采取焚烧处理等不同的修复措施，对污染严重的将全部换土。 位于汉阳赫山的原武汉农药厂厂区地块，已于近期启动了污染土地修复工程。这片区域约16万平方米，修复工程耗资2.32亿元，包括挖走被污染土壤、污水处理、土壤修复、场地平整等。武汉农药厂于2003年整体搬迁，原厂区去年初被确认土壤含有机磷和有机氯农药残留，需修复才能再利用。 武汉市还计划投资24亿元，通过土壤固化、淋洗、化学氧化还原等技术，对硚口古田化工区的受污染土壤及地下水进行修复。目前，工程建议书已编制完成。 2008年开始，硚口古田化工区将在4年内迁出中心城区，可腾退土地270万平方米，但部分土壤汞、铅、砷等重金属含量超标。 其他地区什么时候能给土壤排排毒呢？？

新型细胞培养系统研制成功作者：张笑 来源：科学网美国威斯康辛大学麦迪逊分校的科学家们近日开发出一套新细胞培养系统，有望为细胞治疗提供更加一致和安全的细胞培养物。11月14日的《自然—方法学》刊登了这一成果。领导这项研究的Laura Kiessling教授表示这套系统并不昂贵，可承担多能细胞培养中的大量预估工作。这项技术“很简单”，“任何人都能使用”。目前，大部分人类胚胎干细胞的培养都是作为实验室研究用途的，而通常所采用的培养方法又容易造成各种污染。这套新系统采用一种化学合成制得的可与干细胞相结合的蛋白片段底物，并通过与特定培养基结合，可将细胞培养固定在未分化阶段达三个月或者更长时间。据报告显示，该系统亦可用于诱导多功能干细胞培养。“科学家现在普遍采用的培养系统都有着非特定的缺点，并且缺乏一致性，以致出现质量差异”， 领导这项研究的Laura Kiessling教授解释，“我们研发的这套系统特定性很好，而且并不贵”。（科学网 张笑/编译）相关仪器及方法：新型细胞培养系统 IX81显微镜 7500 Fast实时PCR系统 发光光度计

广东：中山发现1例无症状，此前在南京、无锡活动，曾在珠海换乘。中山全市开展大规模核酸检，23日起离开中山旅客需持48小时内核酸阴性证明.

日本首次在废水中检测出新冠病毒，专家建议大规模污水监控。

在培养过程中都会遇到培养体系出现泡沫的情况，大家经常会采用机械除泡或用消泡剂除泡。但是泡沫对培养物的影响一直未能搞清楚，至少我手头的基本资料都没有合理的解释，可是泡沫对培养物会造成负面的影响这是肯定的，甚至会造成污染。 大家对泡沫的起因和对发酵造成的影响有何理解？在发酵过程中控制泡沫的形成有何方法？

国家卫健委：将大规模开展60岁以上老年人群的新冠疫苗接种