液相色谱样品池能量

岛津液相色谱样品池在哪里

如何确定液相色谱紫外灯能量，在2000小时外可以继续使用，能量衰减后对检测结果（杂质和含量）基本无影响?以及相应依据？

研究利用反相液相色谱法测定能量饮料中七种水溶性维生素 (VC、VPP、VB1、VB2、VB5、VB6、叶酸)的方法。样品利用Supelco C18 固相萃取柱(500mg/6ml)萃取后，直接注入高效液相色谱柱 Phenomenex C18(250mm × 4.6 mm，5μm)， 采用等度洗脱，流动相为0.1 mol/L KH2PO4 (pH 7.0)- 甲醇( 90:10，V/V)， 流速为 0.5ml/min。根据各个化合物的保留时间以及UV谱图与标准谱图的对比可以确认各化合物。该方法的检测限为0.05～0.2mg/L，平均回收率为94.71%～97.03%。

在仪器运行过程中，样品池和参比池的能量总是不断变化，有时能量相近，有时能量相差几倍，这反应了什么信息？请大家发表一下自己的意见！

我们有一台岛津10A的液相色谱，平时使用的都很正常，最近总是出现峰型拖尾的现象，排除柱子与样品的问题，检测器的流通池也洗过了，还有检测器的能量有800，基线正常，不知道是什么原因

液相色谱仪买回家壹年放置不用，氘灯不使用,那氘灯的能量会有变化吗？一般氘灯能量是保使用1000小时或者2000小时,这样仪器不使用,还能够继续使用1000小时吗?

1.安捷伦1200液相色谱VWD检测器工作原理？2.更换氘灯进行能量测试，最低能量测试没有通过，会是什么原因导致的，氘灯本身的问题么？3.请问如果用这氘灯做正常检测（测树脂）对检测结果有何影响？

我们有一台岛津的液相，刚买来时样品池是1500，参比池是1300，随着使用的增多，能量逐渐减小，现在样品池只有22，参比池256，换了灯之后，样品池466，参比池556，这显然也是不足的，因为，这台仪器刚使用一年，从未维修过，一直使用的较好，我们是在220NM下，注入纯水得到的数据，现在不知道问题出现哪里？或是哪里导致这个问题的存在，大家在更换过灯后有没有测量过池子的能量，大概是多少，我觉得，新灯新机子，应该在800以上才是对的吧

在看液相色谱容易出问题的部件------紫外检测器故障：样品池受污表现：样品池和参比池能量相差较大检查方法：设定250nm波长，通甲醇或水，查看SMPL EN和 REF EN，如两者相差较大，则样品池受污。有几个问题：甲醇和水在250nm波长处有吸收么？SMPL EN和 REF EN 指的是什么？

如何提高液相色谱信噪比1. 使检测器处于良好工作状态。检测器灯能量应达到预定的要求；检测池清洁，否则将影响信噪比。2. 选择合适检测波长。尽量选择被测物吸收最大、杂质吸收最小的检测波长。 3. 选择合适溶剂（当用低波长检测时）。当检测波长低于205nm时，不可用甲醇作流动相。水和乙腈比较适于低波长检测。 4. 提高检测器时间常数，但此法会损失分辩率。5. 使用洗脱能力低的溶剂溶解样品，使样品可以在分离过程中在线富集。若使用洗脱能力较强的溶剂溶解样品，会加快样品在分离过程中的扩散，可能使峰形变形，信噪比降低。 6. 降低柱体积 — 如使用小内径的色谱柱，以提高灵敏度，但要注意克服柱外扩散效应。使用小内径的色谱柱会使用较小的流速，相当于样品在溶剂量较少的情况下被检测，提高了信噪比，从而改善了质量灵敏度。 7. 使用高灵敏度检测器 — 如质谱、荧光或电化学检测器 8. 选择好的色谱柱。好的色谱柱会获得对称的峰形，提高峰高，增加信噪比。若原来的色谱柱拖尾，相应峰高会降低，好色谱柱的优势更为明显。

公司里有台岛津LC-2010型号的液相色谱，在做半年校验的时候，用水跟丙酮走的梯度，运行了两遍，样品的重复性差很多，在咨询过工程师后，可能是氘灯能量不足，在更换了氘灯，灯能量恢复正常，然后样品的重复性正常了，所以，小白想请教下，为什么氘灯的能量跟样品的重复性有关？或者能告诉我样品的重复性跟什么因素有关？当然如果能教我液相的各部件主要影响进样的哪些就再好不过了？

[align=center][size=21px]温度对[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统的影响[/size][/align][size=16px] [/size][size=16px] [/size][size=16px] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]能进行很多微量和复杂样品分析，在分析界算是精密仪器。很多精密仪器都有一个共同点，那就是工作时受温度影响，[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]也不列外，一般仪器都受温度影响较大，其中流动相、色谱泵、色谱柱、检测池、氘灯等受温度影响较大。[/size][size=16px] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]工作温度[/size][size=16px]大多[/size][size=16px]都是1[/size][size=16px]5[/size][size=16px]℃[/size][size=16px]-35[/size][size=16px]℃，[/size][size=16px]当然每个厂家，每个型号的仪器也都不太一样，[/size][size=16px]2[/size][size=16px]0[/size][size=16px]℃[/size][size=16px]-30[/size][size=16px]℃一般仪器都能较好的工作，[/size][size=16px]但[/size][size=16px]有的[/size][size=16px]苛刻些，最佳工作温度可能是2[/size][size=16px]2[/size][size=16px]℃[/size][size=16px]-27[/size][size=16px]℃，或者2[/size][size=16px]0[/size][size=16px]℃[/size][size=16px]-25[/size][size=16px]℃等等，要求就更高一些，在这个最佳工作温度内使用，温度影响不大，超过这个温度影响相对就较大。[/size][size=16px] 流动相受温度影响。[/size][size=16px]流动相温度要和系统温度相匹配，不能过低也不能过高。温度过低，流动相中会溶解进较多空气，影响泵流速，如果色谱柱和检测器没有控温装置的，可能还[/size][size=16px]会影响色谱分离、影响基线噪声和基线漂移[/size][size=16px]等。温度过高也可能[/size][size=16px]会影响色谱分离、影响基线噪声和基线漂移[/size][size=16px]，甚至会损坏仪器。[/size][size=16px] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]泵受温度影响。[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]泵主要是指[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]泵泵头，泵头温度过高或过低，一是会影响流动相流速，二是会影响流动相温度，从而导致色谱问题。[/size][size=16px] 色谱柱受温度影响。色谱柱是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]中非常核心的部件，工作中对温度要求一般都很高，大多都是常温到4[/size][size=16px]5[/size][size=16px]℃，有的是3[/size][size=16px]0[/size][size=16px]℃到4[/size][size=16px]5[/size][size=16px]℃，有的分析要求温度稳定在一个温度，否则可能会对分离度，定性、定量检测，基线漂移等指标影响较大。[/size][size=16px] 检测池受温度影响。检测池是检测器的核心部件，它对温度也很敏感，受温度影响比较明显。直接影响就是定量不准确，基线不稳定[/size][size=16px]，有漂移，可能伴随有不规律波动等。[/size][size=16px] 氘灯受温度影响。氘灯温度不稳定，氘灯发出的光能量就不稳定，波长准确性和光路特性可能也会受影响。光能量不稳定，波长不准确，光路不正等情况对检测影响都很大，所以为了保证检测结果的准确、有效，氘灯温度或光路温度也得严格控温。[/size][size=16px] [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]是精密仪器，所做的分析都[/size][size=16px]有较[/size][size=16px]高[/size][size=16px]要求[/size][size=16px]，它的各个重要、核心部件对温度要求都较高，为了保证所做的分析结果的准确、有效，控温[/size][size=16px]必不所少（有些实验室实验室温度控制的较好，最后效果也较好）。[/size]

请问 高效液相色谱走液相的样品能用超声波助溶吗？助溶和不助溶什么区别，助溶后会造成样品的降解吗？

请问液相色谱流通池窗口破裂会出现的现象除了基线波动还有什么？另外流通池里有缓冲盐会造成其窗口破裂吗？

请教大家：最近我们化验室使用的安捷伦高效液相色谱仪1200一直不出峰，然后就灯能量自检，结果未通过。可是取出流通池堵住光线自检又通过了，不是氘灯的原因，怀疑是流通池脏了。就去掉柱子用60度纯水冲，甲醇冲，一直出乱七八糟的峰，冲了一天了都是这样，能量检测还是不通过，哪位大侠帮忙分析分析到底是什么原因，最近快被这货搞疯了

安捷伦液相色谱使用：如何排除活动相/活动池中的气泡？

[size=3][b]儿茶酚胺测定[/b][/size]最近采用液相色谱-电化学检测器测定血浆和尿中的儿茶酚胺，不知各位有否这方面的经验，能否相互交流一下样品预处理条件和色谱条件，谢谢！

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]基线不稳定的可能原因：1、基线漂移:色谱柱没平衡好,柱温不稳定,流动相变化等。2、基线噪音变大可能原因包括:（1）流通池有气泡,流通池被污染,（2）色谱柱和或系统受污染。（3）灯能量不足。（4）外界因素影响,如电源,温度和湿度等。

液相色谱对样品定量分析，偶尔有一针标样的峰面积不重现液相色谱对样品进行定量分析，在进样的过程中，为什么偶尔会出现一针标样的峰面积不重现呢？

液相色谱最大的故障是漏液问题 液相色谱现在在分析实验室应用的很多，对样品分析分析做出了巨大的贡献。当然由于这种仪器的固有特性（高压或超高压），在实验过程中也可能会出现很多故障问题，给实验带来很多麻烦，给操作者带来很多烦恼。 液相色谱在使用中可能会出现很多问题，其中最常见的故障那肯定是漏液问题了。由于系统长期处于高压状态，那很多部件漏液就在所难免了。再就是液相泵是在线输液，在高压状态下动态工作也是漏液的有一大因素。另外液相可能会用到酸碱盐溶液，这些溶液可能会对系统造成污染或堵塞等，这就使得系统的压力更高，造成漏液。 液相色谱溶液漏的地方有泵头处（密封圈或柱塞杆损伤所致），单向阀处，阻尼器处，混合器处，进样阀处，放空阀处，色谱柱处，检测池处，接头处等等。 漏液是液相常见的问题，不够是进口仪器还是国产仪器，只要是液相仪器就都可能会漏液，只是漏液的程度和频率问题。这个问题我们只能是竭力控制或减少缺很难彻底解决，尤其是寿命较长的老仪器，那就更难避免了。 其实漏液、漏气问题在其它分析类产品中也可能会出现，只是可能没有液相这么严重。 液相色谱漏液问题解决办法一般都是换件，比如密封圈、密封垫、柱塞杆，刃环、滤片、接头等。另外清洗、疏通管路、液路也是常见的解决办法。

做了几天的液相色谱了，还是很迷糊，我的仪器是泵waters1525，监测器紫外可见2487和荧光2475，柱子是C18柱，给我个样品我要查一下文献，如果我找到适合我的仪器的方法我就认为可以做，但是我现在不知道我的仪器到底可以做那些东西，我只是知道液相色谱可以用来做高沸点难挥发的非极性和中等极性的样品，比如有一次有人拿来柴油里的一些东西要用液相做，还有一次有人要做咔唑，我都不知道到底能不能做，那位可以告诉我我怎么处理这种情况呢

请教：液相色谱，样品同时进入色谱柱，但是在柱子里会分散，导致并不能同时出柱子，那么就不能同时进入流通池，反映在谱图上的就是峰宽是吗？峰的最高点就是样品在流通池最多的时候吗？峰也就是信号为什么会对称呀？求指点，谢谢！

仪器：最重要的是仪器的检定/校准。使用前确保仪器在有效期内正常运行，可以进行期间核查来保证仪器的正常运行状态。色谱条件：a.水要求用超纯水或一级水，试剂要求色谱级别。b.色谱柱：根据说明书进行使用和清洗，特别注意避免纯水相造成色谱柱塌陷、柱效下降和色谱柱使用寿命缩短等危害。c.检测器：注意观察检测器氘灯能量的变化，比如基线波动大，响应值突然变小等，都有可能是氘灯的能量不足所引起的，需要根据实际情况进行更换。环境：[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]应安装于水平、远离振动、电磁干扰的室内台面上，保持温度、湿度在仪器要求的范围内。人员：认真学习[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]的说明书，掌握[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]硬件和软件的操作，掌握日常的维护保养，掌握最基础故障的排除和维修。重点关注：1.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]使用前a.流动相使用与储存：有机相（色谱纯）密封，避光保存。盐溶液现用现配，防止长时间使用，微生物生长堵塞吸滤器，影响[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]系统的正常运行。b.流动相过滤：杂质微粒会磨损柱塞杆、密封圈、单向阀等。可采用抽滤装置过滤，过滤装置应及时清洗。C.流动相排气：流动相中气泡会引起泵输液不畅和检测器产生噪声和漂移。流动相使用前超声排气，仪器准备时打开排液阀，使用注射器吸液排除气泡。2.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]使用中a.流动相走空：泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转会磨损柱塞杆、缸体和密封圈，造成漏液。b.漏液与堵塞：检查色谱柱、管路、接头是否漏液，仪器运行压力是否正常。c.废液排放及储存：注意排废管路流通正常，无漏液，废液桶标识清晰。3.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]使用后a.清洗色谱系统：含有缓冲盐液的流动相在停泵长时间后可能析出盐的微细晶体，这些晶体将和固体微粒一样损坏密封圈和柱塞杆等。因此，必须使用大比例水相将泵及仪器管路充分清洗后，再换成适合于色谱柱保存和有利于泵维护的有机溶剂（可以是甲醇或甲醇-水）。b.仪器长期不用：将滤头浸泡在甲醇里，色谱柱用有机相保存，堵头密封。总结：需要特别指出的是——[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]的日常维护保养很重要，比如流动相的过滤、脱气、泵密封圈的清洗、系统管路的清洗、溶剂过滤头的清洗等，倘若不坚持，很容易导致色谱柱堵塞、系统压力过大、色谱峰异常等不必要的故障，浪费时间。操作人员在配制[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]分析用样品溶液时，最好由同一个人单独完成，以免不必要的偶然误差。

请大家谈谈液相色谱中样品溶液的浓度问题，已同事说可以看色谱图中的峰面积，差不多在7000000左右，还有就是响应值在500mV左右，他说的有道理吗？还是必须要做浓度线性关系呢？

那位朋友做过液相色谱用样品小瓶清洁效果的验证？欢迎讨论大家的样品瓶是怎么样清洗的？清洁效果是怎么样验证的。

液相色谱测试 样品分离相关问题？求助—phenomenex luna氨基柱分离碱基不知各位大虾们有没有做过分解后的DNA的液相色谱的分离？求教适合这种柱子的A,T,C,G四种碱基标准品的溶解方法及标准曲线的制作。

[b]一、液相色谱结构[/b]从液相色谱仪的硬件结构来看，按照流动相经过的顺序有以下组成部分：流动相溶剂瓶→高压泵→进样器→色谱柱→检测器→废液。[b]二、液相色谱维护[/b]1.流动相日常维护溶剂瓶是流动相的起点，通常是盛放水相溶液或是有机相溶液。（1）水相溶液对于水相溶液来说，首要的问题是防止污染。虽然液相用的水大都经过杀菌处理，但是细菌的生命力很顽强，在适当的温度和光照情况下，它们就会活跃起来，如果在流动相里加入磷酸盐一类的添加剂，它们更是如虎添翼。所以，对于溶剂瓶我们要做的非常重要的工作就是勤换流动相，常换常新。（2）有机相溶液对于有机相溶液，可以不用担心细菌繁殖的问题。但是有机相容易发生聚合，特别是乙腈在适宜的光照条件下极易发生聚合，瓶子里就会出现一些絮状的聚合沉淀物。为了防止聚合过程的发生，装乙腈时要用棕色的溶剂瓶，避免阳光直射，更换乙腈时应当弃去瓶底剩余的溶液。（3）清洗过滤溶剂瓶里的过滤头，其作用是为了防止溶液瓶中的颗粒杂质进入到仪器的流路系统中，它的材质通常分为玻璃烧结石英和不锈钢，如果不慎堵塞会造成流动相吸液不畅，因此必须进行清洗，玻璃材质的通常是用稀硝酸泡，而不锈钢材质的可以直接进行超声清洗。（4）流动相的脱气脱气的目的是为了除去流动相中溶解的气体，使色谱泵的输液准确，保留时间和色谱峰面积再现性提高 使基线稳定，信噪比增加，防止气泡引起尖峰，从而提高检测器性能 减少死体积，防止填料氧化，从而保护色谱柱。2.高压泵的保养（1）泵压力波动很多情况下，泵的问题反映在压力上，压力波动又是最常见的一类问题。泵正常的压力波动通常会在2%以内，且平稳规律 不正常的波动通常由气泡和盐造成。如果流动相中的气泡没有被脱气机除掉而到了泵以后，就会造成压力波动，通常我们可以通过重新清洗(purge)流路和再次脱气流动相加以解决。由盐造成的波动主要是因为流动相中加入了浓度较高的缓冲盐，在含盐流动相与有机相混合的时候，盐会有微小的析出，从而导致压力异常波动，解决这类问题可以考虑适当降低盐的浓度，或者使用甲醇取代乙腈有机相。如果一定要用到此类流动相，可以考虑在有机相中加入一定比例的水，然后适当提高梯度结束的终点。（2）过滤白头保养在泵的维护里还有一项常做的工作就是更换清洗阀上的过滤白头，通常判断的标准是纯水以5mL/min流速清洗的时候，如果压力超过1MPa则考虑更换。根据更换下来的过滤白头，可以大致判断仪器的使用状况。如果白头是白色的且不脏，但是堵，那有可能是流动相中有盐析出造成的 如果白头是灰黑色的，这是最常见的状况，是由于泵头密封垫磨损造成的；如果白头是黄色、绿色等怪异的颜色，仪器污染较严重，可能是流动相里的微生物造成的。[b]除此之外，在泵的使用过程中，常会遇到更换流动相的情况，这种更换是指从反相溶剂更换到正相溶剂或者反过来的过程。这个过程要考虑流动相的兼容性，常用的正反相色谱溶剂是不互溶的，所以在更换期间，一定要用异丙醇彻底冲洗系统，保证管路里所有的原有溶剂都被异丙醇替换掉后再更换流动相。[/b]3.进样器的保养(1) 防止交叉污染进样器分手动和自动两大类。自动进样器最常见的问题是交叉污染，交叉污染产生的原因很直接，样品残留在进样针内外表面，并随下一次进样进入色谱系统。要解决交叉污染，主要靠清洗。自动进样器都会有洗针的功能，如果样品浓度较高或者是吸附性比较强，一定要打开此功能；如果未打开洗针功能，污染可能已经残留在了针座或流通阀上，那么这两个部件需及时超声清洗。出现在自动进样器上的另外一个问题是峰面积重现性差，考虑可能与自动进样器吸取样品有关。首先观察样品的液面是不是足够高，以保证进样器可以吸到样品。排除这个问题后，再察看自动进样器的设置，对于一些粘度大的样品，要降低自动进样器的吸取速度。4.色谱柱的保养(1) 色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈振荡。安装时要保证阀件或管路的清洁；(2) 流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相；(3) 在满足灵敏度的情况下，尽可能使用小进样量。如果样品比较“脏”，要进行净化或提纯处理；(4) 分析结束后，要清洗进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱；(5) 如色谱柱长期不用，应该用适当的有机溶剂保存并封闭或定期给柱子补充合适的流动相。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以存放于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水中。5.检测器的保养(1) 光源部分检测器中非常重要的部件是光源，光源对发射能量有要求，一旦能量衰减到一定程度，就会出现基线噪声变大，灵敏度降低等一系列影响使用的问题，因此光源是一个消耗品。通常紫外灯的寿命是2000h，当到达这个时限的时候，我们就要特别关注灯的能量状况，可以通过仪器维护软件中自带的“灯能量测试”功能来判断，测试的结果会分别评估低、中、高三个波长段的能量，一旦某个波长段的测试结果显示失败，就表示需要更换灯。(2) 检测池检测器中另一个重要部件是检测池，也叫流通池。通常大家最关心的一个问题是检测池被堵掉，因为检测池通常不是很耐压，所以一旦被堵就很可能造成损坏。事实上检测池通常不太容易被堵，原因是几乎所有的颗粒杂质都会被色谱柱拦下了，所以堵塞检测器的东西基本都不是来自样品的，很可能是后来“产生”的，比如含盐流动相残留在检测池中导致盐析出。[b]三、知识拓展[/b]1.流动相中气泡的来源（1）液体对于气体都是有一定的溶解度。液体的压力越高，对于气体溶解度越好。（2）溶解气体的液体在振荡和运动过程中，也容易让气泡析出（3）如果你把一升甲醇倒进一生纯水里面，你可以看到大量的气泡出来。所以在不同溶剂混合的时候，也会有气泡析出，而且混合的体积竟然不是两升。（4）综上所述，溶解在液体里面的气体，在环境压力变低、振动和与其它流体混合的时候，都会产生气泡析出。2.目前常用的脱气方法有以下4种(1) 氦气脱气法:利用液体中氦气的溶解度比空气低，连续吹氦脱气，效果较好，但是成本高(2) 加热回流法:效果较好，但操作复杂，且有毒性挥发污染；(3) 真空脱气法(4) 超声脱气法:流动相放在超声波容器中，用超声波振荡10～15min，此方法效果较差，但操作简单。实际工作中，超声脱气法操作简单，仍被广泛应用，虽然此方法有时会引起气体溶解度的增加，但基本上能满足日常分析操作的要求。

本人做人工湿地实验，现想测下里面灰岩和钢渣的一些离子成分和物质含量，钢渣测Ca2+,Fe2+,Al3+,NH4+，Mn2+,Na+,K+,NO2-,NO3-,HPO42-离子的含量，灰岩测Ca2+,PO43-，NH4+,NO2-,NO3-,离子的含量并测其中差劲基磷酸钙和磷酸氮盐含量哪位知道样品怎么处理和先取什么样的柱子和柱温，流动相成分，流速等的麻烦告诉下，固体样品我不知道怎么处理才能用液相色谱测，是消解还是提取？对液相色谱不太懂，拿别人那去测，得告诉别人怎么处理样品和测试方法。[em09505]

高相液相色谱样品，样品最大浓度有没有限制啊，是多少啊？