紫外吸收法蒽醌实验

[color=#444444]在紫外吸收光谱测蒽醌试样摩尔吸收系数实验中，为什么测量的摩尔吸收系数ε要比理论值小[/color]

很多实验室器皿都是玻璃的，耐腐蚀，常接触有机试剂，比如丙酮，甲醇，乙腈，乙醇，或者酸等等。液相色谱流动相的瓶子，配制流动相的容量瓶，在做实验时，都不会影响紫外测定结果。那么这些玻璃是比较特别的吗？比如，原料，工艺等等，还是普通实验用的玻璃就有这个性质，在接触有机溶剂，或者酸等等的时候，不会有紫外吸收？前段时间，工程师做了一个测试，用我们的玻璃管转移了甲醇，有一个杂质峰出现了，几次测定都得到一样的结果，因为不用玻璃管就没有杂质峰，当时工程师断定，是玻璃管有紫外吸收，可能有杂质，但是这段时间再做这个测试，却证明玻璃管没有问题，很困惑，对于紫外吸收不是很懂，请大家帮忙扫盲，谢谢

【序号】：【作者】：冼国勇 【题名】：紫外吸收法COD监测技术的实验研究及应用探讨【期刊】：【年、卷、期、起止页码】：【全文链接】：https://cdmd.cnki.com.cn/Article/CDMD-11911-2008083905.htm

[align=center][size=4][font=黑体]COD[/font][/size][size=4][font=黑体]在线分析法之紫外吸收光度计法[/font][/size][/align][size=3][font=宋体] 仪器以低压汞灯作为紫外光源，光源发出的紫外光通过滤光片分离出254nm的紫外光和546nm的可见光，采用双波长分光光度计作为参考波长，并且由光电二极管检测出光强，检测出的信号通过放大器送到微处理器，546nm的光强用于补偿浊度的影响，经过计算后输出测量结果 利用紫外吸收光度法测定排放污水中的有机物的装置，适合于部分行业的污水排放自动监测。通过紫外吸收仪测定的吸光光度值与CODcr有某种相关关系，却只有在水质组成成分恒定或变化很小的水样，才存在一定的相关关系，此时可通过大量的测定找出两者之间的关系。目前在国外采用这种系统控制排放废水的紫外吸光度，若超过某一吸光度值就算超标，不强调与CODc,之间的换算。 该方法的特点是仪器结构和测量方法极为简单，硬件成本低，不需要化学试剂，检测速度快，不怕高氯水,且实时性好到可以作为控制排放废水系统的反馈单元的程度。但它对水质的要求较高，其核心部件比色皿很怕被污染。另外，若将UV计用于排污行业，必须将其换算成CODcr，但这种换算比较困难，原因在于UV测定中需扣除浊度，这样会扣除悬浮物对COD贡献。该法虽在日本已得到较广泛的应用，但在欧美各国尚未推广应用（未得到行政主管部门的认可），我国尚在进行相关研究，未有结论。[/font][/size]

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用：紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

[color=#444444]请教大家一个问题，环己烷在205nm处会不会有紫外吸收？我做的反应反应物是环己烷，打液相色谱时，紫外检测波长设205nm, 直接进环己烷纯品时，在3.3min处会出现一吸收峰，这里我可以确定不是溶剂峰，会不会是环己烷的峰？这个问题困扰我挺长时间了，请高人指点一下。[/color]

大家好，小妹妹做实验遇到一些困难，望各位有经验的老师给帮个忙，我做的是莫能霉素，马杜拉霉素，尼日利亚霉素，那拉霉素，拉沙霉素，盐霉素我上网查不到它们的最大紫外吸收波长，我们现在用GPC净化，需要设波长。先谢谢各位了。

各位大神，我在做实验室发现类似一下结构，点板有吸收，但是过液相无紫外吸收，个人认为可是东西是挂柱子上洗脱不下来，请问应该用什么样的流动相以及酸碱性呢，我目前用过TFA和氨水，和碳酸氢铵。均无吸收，流速1.6ml/min。求各位大神指教

想知道一下使用紫外吸收法时,可能会遇到的干扰因素有哪些.我现在使用的COD在线监测仪,是利用253.7nm下有机物最大吸收值，与其浓度有关，来转化为COD的。可是如果污水中存在其它因素，物质（在些波长上有吸收值的无机物，能发光的物质等），可能性导致相关性很差。请了解紫外吸收的朋友们帮忙分析一下

想看一个物质是否有紫外吸收，应该配多大的浓度，紫外吸收系数多大说明有紫外吸收

我们做试验发现有时候紫外和荧光的吸附峰很相近,请问紫外的最大吸收峰与荧光的发光峰有之间有什么联系呢？

[color=#444444]用紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸收系数。蒽醌在323nm处的吸收系数理论值为4700，而我根据实验求得的实验数据为246。误差太大。误差出现的原因。[/color]

我有一样品，在365nm波长下连续照射的情况下，会不断产生一种新的物质，这种新物质可以在400nm和600nm左右有吸收，因此，可以在照射后每隔50秒扫描一次，这样在400nm和600nm左右处会有吸收峰，而且，随着照射的时间增长，峰会越来越高，即峰按50s、100s、150s、200s的顺序增大。可以在普通的紫外可见扫描仪中做这个实验吗？我今天试了，没试处来，用的紫外比较老，岛津UV-1601，里面有指定波长，而且有重复扫描选项，可是指定波长365nm，每隔50s扫一次，每次得到的图都一样（当然可能是溶液没配好）。现在的问题是用紫外扫描仪可以做这种固定波长，并连续照射，然后每隔一定时间扫描一次样品，得到吸收谱图吗？是不是高档的紫外扫描仪才能做？或者我的照射实验应该单独在外面做（紫外仪中的强度不够，不足以激发产生新物质），然后每隔50s取一次样品，测它的吸收光谱？只是这样做时间上不好把握，误差很大。请大家指教，如何做好这样的实验？

没有紫外吸收的化合物怎么用制备型[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]分离化合物呢？

??紫外可见吸收光谱法是利用某些物质的分子吸收10～800nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。?这种分子吸收光谱产生于?价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁。当物质吸收特定波长的光时，电子会从低能级跃迁到高能级，形成吸收光谱。

流动相的紫外吸收与待分离物质的紫外吸收有重叠，可以吗有解决的方法吗，请指教试验是要求这么做的谢谢

溶液的紫外吸收边怎么从紫外吸收光谱图上得出来

红外吸收光谱法与紫外吸收光谱法有何区别

[color=#444444]在做实验的时候发现本人用分光光度计，测的几种物质最大紫外吸收波长都在200nm，用紫外光谱扫描也都是在200nm出峰，而这几种物质都有不同的吸收波长，请问这是什么问题？[/color]

溶液的紫外吸收边怎么从紫外吸收光谱图上得出来

?红外吸收光谱和?紫外吸收光谱的主要区别 ?吸收的电磁辐射类型?： ?红外吸收光谱?：检测的是分子吸收红外电磁辐射后引起的振动能级跃迁。通常使用微米或波数（cm?1）为单位，检测范围在400-4000 cm?1。??紫外吸收光谱?：检测的是分子吸收紫外电磁辐射后引起的电子态跃迁。通常使用纳米（nm）为单位，检测范围在200-900 nm。 ?反映的意义?： ?红外吸收光谱?：主要用于研究分子的振动和转动能级变化，可以鉴定未知物的结构组成或确定其化学基团。??紫外吸收光谱?：主要用于研究分子的电子能级结构，特别是共轭体系的有机化合物，可以判断分子的共轭性质。 ?应用领域?： ?红外吸收光谱?：广泛应用于化学、生物、医学等领域，用于定性和定量分析，鉴定化合物和测定分子结构。??紫外吸收光谱?：常用于研究不饱和有机物，特别是具有共轭体系的有机化合物。 红外吸收光谱和紫外吸收光谱的产生机理、测试光源、测试范围及溶剂选择等方面的区别 ?产生机理?：红外光谱涉及分子振动和转动能级的跃迁，而紫外光谱则是电子能级的跃迁。??测试光源?：红外光谱使用红外辐射作为光源，而紫外光谱使用紫外辐射作为光源。?测试范围?：红外光谱的测试范围在400-4000 cm?1，而紫外光谱的测试范围在200-900 nm。??溶剂选择?：两种光谱技术在样品测试装置和制样方法上也有所不同，需要根据具体实验需求选择合适的溶剂。

大家好，最近做实验遇到一个问题，想请教一下：我所测量的化合物A最大吸收位于264 nm。该化合物在215 nm处也有较强吸收，但是并非特征吸收。样品溶液中除A外，还有一种基质，在215 nm也有吸收。在测量过程中使用的空白溶液为精确测量的相同浓度的基质溶液。我准备同时测量264 nm及215 nm处的紫外吸收，通过标准曲线分别测得A的含量，并比较含量的高低。结果发现化合物A的回收率在264nm处接近100 ％，而在215 nm处不太稳定，为88-93％。我知道一般做紫外吸收时都会选择最大吸收峰，但是为什么在215nm处的回收率会不正常呢？应该说基质的吸收已经全部被扣除掉了。各位能否解答一下，不胜感谢！

理论上：最大激发波长与紫外最大吸收波长是一致的。那么，对于多激发的的样品呢？是否认为，和紫外最大吸收相对应的波长是最大激发，利用这个多大激发去寻找发射波长？http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/brow/emyc1010.gif

一种紫外激发荧光物质，不知道具体的激发波长，据说可先用紫外吸收谱确定一下。那么测紫外吸收的时候，样品被紫外线激发同时会产生荧光，荧光会不会被检测器一起检测到计入光强啊？要是被计入的话岂不有可能出现紫外不仅没吸收反而发射的结果？要是荧光不被计入，检测器之前就需要用单色器过滤的吧新手，大家多多指教！！！

紫外-可见吸收光谱分析 1 紫外-可见吸收光谱法概述 2 紫外-可见吸收光谱的理论基础 3 紫外-可见吸收光谱的定量基础——吸收定律 4 紫外-可见分光光度计 5 分光光度测定方法 6 紫外-可见分光光度法的应用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=41998]紫外-可见吸收光谱分析[/url]

[size=4]利用紫外吸收光谱法直接测定COD是一种不用化学试剂、对样品无须加热消解、快速、简洁、无二次污染的绿色技术。[size=3][font=宋体]仪器的基本测量原理[/font][/size][size=3][font=宋体]是基于污水中的有机物对紫外线的吸收。[/font][/size]通过对地表水、生活污水和工业废水样品的紫外吸光度与化学需氧量(或高锰酸盐指数)测定值进行线性回归分析,得出不同类型水体的紫外吸光度与化学需氧量(或高锰酸盐指数)之间具有良好的相关性,在一定条件下,可利用测定的紫外吸光度推算出化学需氧量(或高锰酸盐指数)结果。仪器厂家提供了校准液。 大家有没有这方面的资料啊，特别是原理、校准液方面的资料。还有就是厂家提供的校准液本身有没有COD值。[/size]

蛋白质分子中，酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，使蛋白质具有吸收紫外光的性质。吸收高峰在280nm处，其吸光度(即光密度值)与蛋白质含量成正比。此外，蛋白质溶液在238nm的光吸收值与肽键含量成正比。利用一定波长下，蛋白质溶液的光吸收值与蛋白质浓度的正比关系，可以进行蛋白质含量的测定。紫外吸收法简便、灵敏、快速，不消耗样品，测定后仍能回收使用。低浓度的盐，例如生化制备中常用的(NH4)2SO4等和大多数缓冲液不干扰测定。特别适用于柱层析洗脱液的快速连续检测，因为此时只需测定蛋白质浓度的变化，而不需知道其绝对值。此法的特点是测定蛋白质含量的准确度较差，干扰物质多，在用标准曲线法测定蛋白质含量时，对那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异大的蛋白质，有一定的误差。故该法适于用测定与标准蛋白质氨基酸组成相似的蛋白质。若样品中含有嘌呤、嘧啶及核酸等吸收紫外光的物质，会出现较大的干扰。核酸的干扰可以通过查校正表，再进行计算的方法，加以适当的校正。但是因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定的结果还是存在一定的误差。此外，进行紫外吸收法测定时，由于蛋白质吸收高峰常因pH的改变而有变化，因此要注意溶液的pH值，测定样品时的pH要与测定标准曲线的pH相一致。1.280nm的光吸收法因蛋白质分子中的酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸在280nm处具有最大吸收，且各种蛋白质的这三种氨基酸的含量差别不大，因此测定蛋白质溶液在280nm处的吸光度值是最常用的紫外吸收法。测定时，将待测蛋白质溶液倒入石英比色皿中，用配制蛋白质溶液的溶剂(水或缓冲液)作空白对照，在紫外分光度计上直接读取280nm的吸光度值A280。蛋白质浓度可控制在0.1~1.0mg/ml左右。通常用1cm光径的标准石英比色皿，盛有浓度为1mg/ml的蛋白质溶液时，A280约为1.0左右。由此可立即计算出蛋白质的大致浓度。许多蛋白质在一定浓度和一定波长下的光吸收值(A1%1cm)有文献数据可查，根据此光吸收值可以较准确地计算蛋白质浓度。下式列出了蛋白质浓度与(A1%1cm)值(即蛋白质溶液浓度为1%，光径为1cm时的光吸收值)的关系。文献值A1%1cm,λ称为百分吸收系数或比吸收系数。蛋白质浓度= (A280´10 )/ A1%1cm,280nm (mg/ml)(Q 1%浓度»10mg/ml)

同样的缓冲液，同样的对照品，昨天进的时候紫外吸收还是显著的，今天就变成了一条直线，为什么呢？苦恼！用的Tris-磷酸二氢钾缓冲液，不加乙腈还有紫外吸收，加了10%乙腈后就没了，问题是昨天这么做的时候还是有的啊？！