紫外可见法测量方法

我这里有台紫外可见分光光度计：测量288和277nm的两个药品的检品，它的吸光度隔一个小时就有点变化，从0。6到0。5或从0。475到0。550 。 不知道怎么回事，但原来一直是好的。 我问厂家，厂家叫我做基线和288NM的蒸馏水的稳定性都很好，波长也很好。 这个一般是什么问题呀？ 但我原来测量隔一个月都没有什么问题呀？

求《中国计量》第9期文章《紫外、可见分光光度计检定或校准结果的测量不确定度评定》一文作者：[color=#325cbd]苗苗 张坤宇 岳茂增[/color][color=#325cbd][/color][color=#333333]摘要：无[/color][color=#333333]一、波长示值误差测量结果的不确定度评定[/color][color=#333333]1.概述[/color][color=#333333](1)测量依据JJG178-2007《紫外、可见、远红外分光光度计检定规程》。[/color][color=#333333](2)测量环境条件温度10℃～35℃,相对湿度不大于85%。[/color][color=#333333](3)测量标准氧化钬滤光片不确定度U=0.3nm,包含因子k=2。[/color][color=#333333](4)被测对象用TU-1810双光束紫外-可见分光光度计对标准氧化钬滤光片测试。[/color][color=#333333](5)测量方法在规定的条件下,用双光束紫外-可见分光光……。 [/color][color=#333333]————————————————————————[/color][color=#333333] [/color][b][color=#ff0000] 实在不好意思哦！我所没订《中国计量》该杂志，我是从知网上看到有该文的。我主要是想看一下，现在透射比不确定度是相对量，还是绝对量？订了该杂专的版友，拍个照发给我！恳求哦！[/color][/b]

紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用郑　健　陈焕文　刘宏伟　李宝华　张寒琦　于爱民　金钦汉(长春分析仪器研究和技术开发中心,吉林大学化学系分析教研室,长春,130023)摘　要：本文着重评述了1998年以来国内紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用,展望了其在该领域的发展趋势。关键词:紫外-可见分光光度分析法 药物分析 综述中图分类号:O657.32 R917　　　文献标识码:A　　以分子吸收光谱为基础的紫外-可见区分光光度分析法具有设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点,已在地质[1]、环境[2]、能源[3]、材料[4]、食品[5]等科学中发挥着重要作用,尤其是随着多元络合物、胶束增敏光度法、有机试剂等的发展,它已经成为应用最广泛的分析手段之一[6]。分光光度法的早期应用集中在无机分析化学领域,即对为数众多的无机离子和化合物进行定性分析或定量测定[7]。　　有机物的光度分析较无机物的开展晚,但发展十分迅速,已经从定性、半定量分析发展到定量分析,方法的灵敏度和选择性也有了很大的提高,能够用光度法进行分析测定的物质种类也在不断增多[8-10]。近几年来,随着生命科学的发展,有机物光度分析的研究和应用热点主要集中在生物[11]、临床、药物[12]等方面。光度法在药物分析中的应用历来受到大家的广泛关注和重视,世界各国都进行这一领域的相关研究[13,14]。据统计,在药物分析中,分光光度法占29.1%,色谱法占25.5%,荧光、化学发光法占2.4%,与光度法有关的方法共计占31.5%,由此可见,光度法是药物分析最常用的方法之一[12]。研究结果表明,光度法在药物分析中的可靠性可以和色谱法相蓖美[15],但其设备简单、操作方便、价格低廉、易于普及等特点是色谱法难于做到的。因此,可以相信,光度法在药物分析中将大有作为。　　我国学者在药物光度分析领域开展了大量工作,取得了喜人的成果。建立了紫外-可见分光光度法[16]、发光光度法[17]、荧光光度法[18]等许多新的测量方法和体系[12,19],测定的药物涉及生物碱、苯磺酰胺、芳胺、芳烃、巴比妥、甾体激素、咪唑、噻吩、吡啶、季胺盐、磺酰胺、氯胺酮类、醇、醛、醚、某些杂环化合物、某些糖及苷、抗生素和维生素等几大类。本文只评述1998～2000年间紫外-可见分光光度法在药物分析中的应用和进展,在药物分析中的其它光度分析方法,如荧光光度法[20-22]、发光分析[23],可以参阅相应的近期综述。

[b][b][color=#008000]设计原理[/color][color=#008000]:[/color][/b][/b]紫外可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理，利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。主要由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池，紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度，将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种：按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计；按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计；按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。[align=left]可见分光光度计（又名可见光度计、分光光度计）是可见光分光光度法是采用新型单片机技术，开发出能够进行定量测量（标准曲线测量，可对物质进行浓度直读）；OD值直接测量（吸光度、透过率和能量等直读）；动力学测试（测出物质浓度随时间变化OD值的变化）；光谱扫描（可以对某一种物质进行全波段扫描，分析物质的特征波长，判断实验过程的误差）；多波长测试（可以对物质同时进行多个波长的测试，分析物质的相关特性）；还有可以进行DNA蛋白质测试、总磷总氮测试、重金属测试、农药残留测试、食品安全检测、热力发电金属离子测试等。[/align] [b][color=#008000]波长范围[/color][/b]可见分光光度计的波长适用范围一般从350nm左右开始到1100nm左右，紫外可见分光光度计的波长适用范围一般从190nm到1100nm。从这点区别上看就是波长的适用范围不一样，紫外可见分光光度计多了从190到350nm左右这段波长。[b][color=#008000]光源不同[/color][/b]可见分光光度计的光源一般只用钨灯，而紫外可见分光光度计是用钨灯 氘灯两个光源，同时还多了这两个光源灯的切换部件。这是因为钨灯的光谱范围主要在可见到近红外这段，氘灯主要在紫外端。也正是因为光源的不一样，紫外可见分光光度计也多了一个专门提供氘灯工作的氘灯电源了。[b][b][color=#008000]光学器件不同[/color][/b][/b]由于玻璃能吸收紫外波，而对可见到近红外端有比较好的透过性，所以可见分光光度计的一些光学部件可以使用玻璃，而紫外可见分光光度计就不能使用玻璃部件，一般使用石英光学部件。同时由于这个原因，在比色皿的选择上也就有不同了，可见分光光度计可以使用玻璃制的比色皿，而紫外可见分光光度计一般使用石英制的比色皿了。 [b][color=#008000]接收器不同[/color][/b]由于紫外可见分光光度计多了紫外波，所以在接收器的选择上也就不一样了。多了对紫外波的灵敏响应功能，这类接收器的价格就比可见分光光度计的接收器贵了很多了。

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。　　该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。　　其测定波长范围为200-1000nm。原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。　　某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。分子光谱特点：　　分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。　　紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。应用：紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析紫外可见分光光度法发展：小型化、便携式、智能化。

紫外—可见分光光度分析法 一、基本要求 掌握：本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法；分子吸收光谱与电子跃迁类型，物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线，摩尔吸收系数与吸收系数，吸光度与透光度，偏离朗伯-比尔定律的原因；掌握显色反应条件及光度测量条件的选择；掌握紫外—可见分光光度计的主要部件，各部件的作用及仪器原理，主要类型及特点；掌握差示分光光度法的原理、特点。 理解：物质分子结构与紫外吸收光谱的关系，吸收波长位移与分子结构变化的关系；紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素。了解：了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径；双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法；紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用。

紫外—可见分光光度分析法一、基本要求掌握：本章要求掌握分光光度法的特点、基本原理、测定方法及计算方法；分子吸收光谱与电子跃迁类型，物质对光的选择吸收与吸收光谱曲线，摩尔吸收系数与吸收系数，吸光度与透光度，偏离朗伯-比尔定律的原因；掌握显色反应条件及光度测量条件的选择；掌握紫外—可见分光光度计的主要部件，各部件的作用及仪器原理，主要类型及特点；掌握差示分光光度法的原理、特点。理解：物质分子结构与紫外吸收光谱的关系，吸收波长位移与分子结构变化的关系；紫外—可见分光光度定量分析影响结果准确度的各种因素。了解：了解紫外—可见分光光度法测定灵敏度和选择性的途径；双波长分光光度法等其它分光光度法定量测定的方法；紫外—可见分光光度法在有机化合物的结构解析方面的作用及在其他方面的应用。二、 基本概念与重点内容A概述 1．紫外—可见分光光度法的特点 灵敏度与准确度较高；选择性较好；设备简单、操作简便。 2．分光光度法的发展过程 目视比色法 光电比色法 分光光度法 3． 分子的紫外—可见吸收光谱 分子的紫外—可见吸收光谱是基于物质分子吸收紫外辐射或可见光，其外层电子跃迁而成，又称分子的电子跃迁光谱。紫外—可见分光光度法是基于物质分子的紫外—可见吸收光谱而建立的一种定性、定量分析方法。4． 光的基本性质 5．物质对光的吸收及吸收光谱6．紫外—可见吸收光谱与电子跃迁类型7．生色团与助色团B 光的吸收定律1．光吸收的基本定律（朗伯-比尔定律）2．吸光度与透光率、百分透光率之间的关系3．工作曲线的绘制与应用4．吸光系数、摩尔吸光系数和桑德尔灵敏度5． 偏离朗伯-比尔定律的因素C紫外-可见分光光度计1． 分光光度计的主要部件2． 在紫外和可见光区进行测量时，分别选择何种光源3． 单色器的主要元件 光栅；棱镜4． 分光光度计中的检测器类型早期：光电池；光电管；光电倍增管。 5．紫外-可见分光光度计的类型及特点D显色测定试样的制备和光度测定条件的选择、1．显色反应及其影响因素2．测定读数误差和测定条件的选择 5．入射波长的选择E 分光光度定量测定方法与其他应用 1．单组分的测定 通常采用 A-C 标准曲线法定量测定。 2.多组分的同时测定 3．紫外可见吸收光谱在有机化合物结构解析中的作用 了解共轭程度、空间效应、氢键等；可对饱和与不饱和化合物、异构体及构象进行判别。在有机化合物结构解析中，紫外可见吸收光谱没有红外吸收光谱提供的结构信息多。 4．紫外—可见吸收光谱中有机物发色体系信息分析的一般规律

请问下 用紫外可见光谱仪测试的时候，为什么加个积分球就可以用来测反射率？测量固体或胶体样品的时候，样品池里面是不是自带的那个就是积分球？可以给我说一下测量反射率的原理吗？ 非常感谢

请问一下，使用紫外可见光传感器测量COD，介质中的哪类物质不能被吸收？比如是共轭双键的物质还是不饱和的什么的，不是学化学的不太了解，请各位赐教。另外，这类物质在污水中的比例多吗？如果使用UV-Vis吸收原理测量的话，影响是不是很大？谢谢。

专家您好:用紫外/可见吸光光度法测量样品时,是不是只要是光路通过的路线有样品就可以了?否则,对测量结果会有什么影响?

紫外可见光分光光度测量的原理与使用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=17587]紫外分光光度计的原理与使用.pdf[/url]

简述紫外可见光纤光谱仪吸收测量的应用光谱分析是一种非常成熟的分析方法，在化学分析、环境学检测、气体色谱学、光学镜片吸收和透过率测量、食品检测、生物化学、生命科学、医学和制药业等诸多应用领域应用十分广泛, 几乎涉及到无机分析的所有领域, 在有机分析中也占有一定比重, 并呈逐渐上升之势。传统的分光光度计由于其价格昂贵、体积大、操作复杂、需要专人维护、测量速度慢等缺点，使其一直只能在实验室中应用。而随着微电子领域中的多像元光学探测器和光纤技术的迅猛发展，使生产低成本光谱仪成为可能。新一代的微型光纤光谱仪具有低成本、高分辨率、便携和高速测量等优点，可以很方便的应用在在线检测和实验室测量中。下面我们以深圳高利通公司的微型光纤光谱仪GLA600为例，介绍微型光纤光谱仪在紫外可见吸收测量中的应用。2. GLA600光纤光谱仪一、仪器原理 GLA600-UVN光纤光谱仪，采用Czerny-Turner光学结构，包括光纤接头（标准SMA905接口，也可以选择其它类型的接口）、准直镜、衍射光栅、3648像素线阵CCD 探测器， 波长范围190-1000nm，最高分辨率0.83nm，提供USB1.1 或USB2.0 接口、RS232接口和/模拟接口。二、功能及特点2.2.1 Czerny-Turner光学结构，在更宽光谱范围具有更高分辨率 2.2.2 体积小巧，只有手掌大小 2.2.3 即插即用，无需手动设置 2.2.4 温度稳定性好，热漂移小 GLA600-UVN光纤光谱仪的光学元件和底板间采用无应力装配，出厂前经过特殊工序处理，因此环境温度对光谱仪影响极小，优秀的温度稳定性确保了其长时间测量的精确性和可重复性。

各位，请教一下如何用紫外可见光分度计测量光学能隙——optical band gap，先谢了。

想问问各位大佬，在紫外分光测量中，有用单光束三波长的方法来测量吗？三种波长分别是测量波长，参考波长和混合介质的平均波长。请问这种测量方法有什么好处？能提供这种测量方法的基本原理吗？

紫外可见吸收光谱法 利用物质分子对紫外可见光的吸收光谱，对物质的组成含量和结构进行分析测定的方法。 该方法具有灵敏度高、准确度好、选择性优操作简便、分析速度好、应用广泛等特点。 其测定波长范围为200-1000nm。 原理：物质的分子的电子能级、振动能级都是量子化的，只有当辐射光子的能量恰好等于两能级间的能量差（两能级间的能量差与分子中价电子的结构有关）时，分子才能吸收能量。 某一种分子的结构是确定的，所以一种分子只能吸收波长在一定范围内光子。我们就可以通过测量分子对其所吸收的光子的波长范围，来确定分子的结 构。 分子光谱特点： 分子光谱与原子光谱不同，它是一种连续的宽的吸收带，而不是简单的锐线光谱。 紫外可见吸收光谱仪的基本结构一般由：光学系统、机械系统和电学系统三部分组成。 应用： 紫外可见分光光度法在有机物定性分析中有着广泛的应用，在无机物方面用于矿物、半导体、天然产物和化合物的研究。 紫外可见分光光度法在定性方面主要依靠化合物的光谱特征，如吸收锋数目、位置、形状与标准光谱相比较，来确定某些基因的存在。 尽管紫外可见分光光度法是一种比较常用的方法，但是，在一些情况下它不能单独用来确定一个未知化合物，还要与其它方法连用，才能实现准确分析

本人急需测量样品的微区紫外－可见－近红外反射（或者透射）光谱，样品为附着于基片（玻璃或者石英片）上的膜。微区大小为几十微米。请教各位大虾：有没有紫外－可见分光光度计可以测量微区的光谱性质，并且测量的波长范围可以达到近红外区。或者有哪种仪器具有相关的附件可以达到这种要求（本人现在采用的紫外－可见分光光度计是日立公司的UV-4100型。）请各位大虾指教。先谢过了！

所谓光度准确度是指实际测得的光度值和真值或理论上的光度值之差。国际上对紫外可见分光光度计准确度的表示方法主要有两种：一种是吸光度准确度或吸光度误差用△A表示，另一种是透射比准确度或透射比误差，用△T表示。光度准确度是一个非常重要的技术指标，能直接反应仪器测试数据的准确程度。　　目前国内外生产厂家对光度准确度的测量方法不一，主要是各国的国家标准不同，美国国家标准规定：选择合适的标准参比材料，在规定的波长处，连续测10个吸光度或透射比读书，去10个读数的平均值，实际吸光度或透射比与观测值的平均值之差，即为光度准确度。　　测试光度准确度一般采用铬酸钾、重铬酸钾等标准物质，但目前国内大部分采用固体中性滤光片来进行测试。固体中性滤光片操作简单、携带方便，避免了寻找理想参照片基的麻烦，也可以得到多个所需要的、较理想的峰和谷。

紫外-可见光谱法概述： 熟练掌握紫外可见吸收光谱与分子结构的关系　了解生色团、助色团、共轭效应、取代基效应及其相互关系　熟练掌握朗伯-比尔定律及其成立条件　了解紫外-可见光谱仪器的基本构成、主要部件的构成材料及其作用　了解差示分光光度法、导数分光光度法、双波长分光光度法等的测定对象及其原理　初步掌握荧光、磷光和化学发光的产生原理及其与分子结构的关系　了解重要发光参数的物理意义　了解发光光谱仪与紫外-可见吸收光谱仪的异同　掌握荧光分析的定量关系式

[align=center][size=4][font=黑体]COD[/font][/size][size=4][font=黑体]在线分析法之紫外吸收光度计法[/font][/size][/align][size=3][font=宋体] 仪器以低压汞灯作为紫外光源，光源发出的紫外光通过滤光片分离出254nm的紫外光和546nm的可见光，采用双波长分光光度计作为参考波长，并且由光电二极管检测出光强，检测出的信号通过放大器送到微处理器，546nm的光强用于补偿浊度的影响，经过计算后输出测量结果 利用紫外吸收光度法测定排放污水中的有机物的装置，适合于部分行业的污水排放自动监测。通过紫外吸收仪测定的吸光光度值与CODcr有某种相关关系，却只有在水质组成成分恒定或变化很小的水样，才存在一定的相关关系，此时可通过大量的测定找出两者之间的关系。目前在国外采用这种系统控制排放废水的紫外吸光度，若超过某一吸光度值就算超标，不强调与CODc,之间的换算。 该方法的特点是仪器结构和测量方法极为简单，硬件成本低，不需要化学试剂，检测速度快，不怕高氯水,且实时性好到可以作为控制排放废水系统的反馈单元的程度。但它对水质的要求较高，其核心部件比色皿很怕被污染。另外，若将UV计用于排污行业，必须将其换算成CODcr，但这种换算比较困难，原因在于UV测定中需扣除浊度，这样会扣除悬浮物对COD贡献。该法虽在日本已得到较广泛的应用，但在欧美各国尚未推广应用（未得到行政主管部门的认可），我国尚在进行相关研究，未有结论。[/font][/size]

[size=4]各位好，我最近刚开始用紫外，遇到一点问题，请教一下：我用的是瑞利UV2600双光束紫外可见分光光度计，测量蜂蜜5—羟甲基糠醛时，出现如下问题： 基线校准后，在284nm和336nm处测吸光度，三个平行样同时测量，数据为：284nm 1#池2.186、2#池2.788、3#池2.821；336nm 1#池0.076、2#池0.276、3#池0.276，而将三个样品的位置交换位置后284nm 1#池2.182、2#池2.795，3#池2.832；336nm 1#池0.071，2#池0.277，3#池0.283这是怎么回事呢？也就是说在1号池中测量跟在其余的样品池中不同，我实在搞不明白了。 还有一个问题就是基线校准时是只在参比池和1号样品池中放参比液就行，对吗？（[size=3]一共有8个样品池，介绍里写着◆丰富的测量方法，具有波长扫描、时间扫描、多波长测定、多阶导数测定、双波长、三波长等多种测量方法，可满足不同测量的要求。◆自动10mm八连样品池设计，可更换自动宽大四连样品池附件）[/size]可是当我按下zero校准时，它每个池子都走一遍呢？对于这个问题很迷茫，是不是这样倒置1#池测出的数据跟在别的池子种不同呢？这个仪器我来之前就有了，实验室的人也换了，他们都不清楚怎么用。[/size]

4.1.0紫外可见光谱法概述4.1.1 电磁辐射的特性4.1.2 电磁辐射与光谱分析法4.1.3 紫外-可见吸收光谱法概述4.2.1 分子结构与吸收光谱 4.2 紫外-可见吸收光谱14.2 紫外-可见吸收光谱24.2.2 影响紫外-可见吸收光谱的因素14.2.2 影响紫外-可见吸收光谱的因素24.2 紫外-可见吸收光谱1 4.2 紫外-可见吸收光谱24.2 紫外-可见吸收光谱3 4.2 紫外-可见吸收光谱44.3 吸收定律4.3.2 吸收定律的适用性比尔定律在有化学因素影响时不成立解离、缔合、生成络合物或溶剂化等会对比尔定律产生偏离。比尔定律在有仪器因素影响时也不成立非单色光对比尔定律的偏离杂散光(非吸收光)也会对比尔定律产生影响其他影响因素包括溶剂、光效应等也应考虑4.4 紫外-可见分光光度计4.4.1 紫外-可见分光光度计的基本结构4.4.2 紫外-可见分光光度计的工作原理14.4.2 紫外-可见分光光度计的工作原理24.4.3 分光光度计的校正4.5.1 分光光度滴定4.5.2 差示分光光度法4.5.3 导数分光光度法4.5.4 双波长分光光度法4.5.5 胶束增溶分光光度法4.5.6 动力学分光光度法4.5.7 反射光谱法4.5.8 光声光谱法光声效应光声光谱仪光声光谱法的定量基础光声光谱法的特点及应用4.6.1 定性分析4.6.2 单组分定量分析溶剂的选择测定浓度的选择测定波长的选择标准曲线法标准加入法4.6.3 混合物分析4.6.4 平衡常数的测定4.6.5 络合物结合比的测定摩尔比法连续变换法或JOB法斜率比法B-H方程4.7.1 分子荧光、磷光和化学发光 4.7.2 发光参数4.7.3 影响物质发光的因素4.7.4 荧光定量关系式4.7.5 荧光和磷光分析仪器4.7.6 荧光和磷光分析应用4.7.7 化学发光简介[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=98048]《紫外可见光谱法》清华大学课件[/url]

（紫外/可见）吸光光度法讲座（1）吸光光度法是采用分光器（棱镜或光栅）获得纯度较高的紫外/可见单色光，基于物质对单色光的选择性吸收测定物质组分的分析方法。位于波长10～390nm之间的电磁辐射为紫外光，位于波长390～770nm之间的电磁辐射为可见光。各类电磁辐射的波长列于表1。 表1 各类电磁辐射的波长 辐 射 波长，λ/nm 无线电波 ＞1012～109 微 波 109～106 红外线 远红外 106～3×104 中红外 3×104～3×103 近红外 3×103～770 可见光 770～390 紫外线 390～10 X射线 10～10－2 γ射线 10－2～10－5 吸光光度法是一种历史久远的分析手段，具有灵敏度高、准确度和稳定性较好、适用范围广、所需仪器简单价廉等优点。它通常用于微量组分的测定，业已广泛应用于各个领域的分析测试。 吸光光度法也称做分光光度法，但是分光光度法的概念有些含糊，分光光度是指仪器的功能，即仪器进行分光并用光度法测定，这类仪器包括了分光光度计与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]法（AAS）仪。吸光光度法的本质是光的吸收，因此称吸光光度法比较合理，当然，称分子吸光光度法是最确切的。

（紫外/可见）吸光光度法讲座（1）吸光光度法是采用分光器（棱镜或光栅）获得纯度较高的紫外/可见单色光，基于物质对单色光的选择性吸收测定物质组分的分析方法。位于波长10～390nm之间的电磁辐射为紫外光，位于波长390～770nm之间的电磁辐射为可见光。各类电磁辐射的波长列于表1。表1 各类电磁辐射的波长‘辐 射－－－－－－－波长，λ/nm无线电波－－－－－－＞10（12）～10（9）【注：10的12次方到10的9次方】微 波－－－－－－－－－－109～106红外线a 、远红外－－－－－－－－106～3×104b、中红外－－－－－－－－3×104～3×103c 、近红外－－－－－－－－3×103～770可见光－－－－－－－－－－770～390紫外线－－－－－－－－－－390～10X射线－－－－－－－－－－－10～10－2【10的负2次方】γ射线－－－－－－－－－－－10－2～10－5吸光光度法是一种历史久远的分析手段，具有灵敏度高、准确度和稳定性较好、适用范围广、所需仪器简单价廉等优点。它通常用于微量组分的测定，业已广泛应用于各个领域的分析测试。吸光光度法也称做分光光度法，但是分光光度法的概念有些含糊，分光光度是指仪器的功能，即仪器进行分光并用光度法测定，这类仪器包括了分光光度计与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收光谱[/color][/url]法（AAS）仪。吸光光度法的本质是光的吸收，因此称吸光光度法比较合理，当然，称分子吸光光度法是最确切的。

我们如何来评价一台紫外可见分光光度计的优劣呢？ 首先，我们要来考察它的外观。然后，我们探讨一下会对仪器的使用有很大影响的几个重要指标： 1、 杂散光 它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源。这个值当然越小越好了。 2、 光度准确度 光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的直接要求，每个用户都必须重视。 3、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。4 、光谱带宽 指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。表征仪器的光谱分辨率。按照比耳定律，光谱带宽应该是越小越好的，但是如果仪器的光源能量弱，光学传感器的灵敏度低时，光谱带宽小了，也得不到理想的测量结果的。所以，选择和使用仪器时一定注意。5、 稳定性 稳定性是使用者最关注的指标之一。仪器的宗旨就是稳定可靠，不稳定更谈不上可靠了。6、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。7、 波长的准确度和重复性 仪器的每个值都是在一定的波长下测得的，如果所示的波长和实际波长偏差万里，那么测出的值和真值的吻合度从何谈起呢？可见这个指标的重要性。 　　总之，这几个指标都是相互独立又相互关联的，每个指标对仪器的使用都有很大影响。希望大家在选购紫外、可见分光光度计时，多做比较，多做判断，切实找到一个稳定可靠的好帮手。我们选择时需要根据自己实验室的需要 ，主要考虑光学构造和光源、检测方法、样品类型和数据处理等因素。 1.光学构造 一般来说，紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。1单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物，然后再通过实际样品溶液，就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮（mirrored chopper wheel）将一束光分成两束，分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移（lamp drift）和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮，而是利用一种光束分光器来代替，将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度，所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。2.样品类型在大部分的样品类型中，分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml，并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。3.光源和检测方法 分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。 紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长，通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。 有的仪器可以选择 多种光源 ：紫外光、可见光和甚至红外光（780 nm 至3,000 nm）。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分（大约380 nm 到800 nm）。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽（bandwidth）很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。分光光度计通常使用光电倍增管和光敏二极管测量吸光值。 4.样品类型在大部分的样品类型中，分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml，并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。5.数据管理 大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器，通常与PC机一起联用，需要从制造商提供额外的软件。 由此可见紫外、可见分光光度计是一种常规的实验室分析仪器。可广泛用于无机物、有机物的定性、定量分析中，在科研、制药、化工、环保、卫生、防疫等领域中发挥重要的作用。

紫外-可见吸收光谱分析 1 紫外-可见吸收光谱法概述 2 紫外-可见吸收光谱的理论基础 3 紫外-可见吸收光谱的定量基础——吸收定律 4 紫外-可见分光光度计 5 分光光度测定方法 6 紫外-可见分光光度法的应用[img]http://www.instrument.com.cn/bbs/images/affix.gif[/img][url=http://www.instrument.com.cn/bbs/download.asp?ID=41998]紫外-可见吸收光谱分析[/url]

紫外可见近红外分光光度计可测量样品在紫外可见近红外范围内的光学特征，原位变温紫外可见近红外光谱通过测量材料在不同温度下的光谱变化分析样品的结构和性质。本视频以具有热致相变性质的二氧化钒薄膜为例，通过原

[color=#444444]五价钨离子紫外可见光谱最大吸收峰是多少？在测量前是否需要加入别的显色剂？[/color]