色谱保留值测试方法

保留时间不重现有两种不同的情况：既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下：　　一色谱柱平衡　　如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。　　流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。应注意：水是很容易污染的流动相成分。　　二固定相稳定性　　固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH为4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。　　经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等　　三色谱柱污染　　保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。　　样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。　　避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。　　使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。　　四流动相组成　　流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。　　五疏水坍塌　 当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相，再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱（如WatersSymmetryShieldRP色谱柱）或非端基封口的色谱柱（如WatersResolve色谱柱）也可避免发生坍塌。

保留时间不重现有两种不同的情况：既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下：　　一色谱柱平衡　　如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。　　流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。应注意：水是很容易污染的流动相成分。　　二固定相稳定性　　固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH为4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。　　经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等　　三色谱柱污染　　保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。　　样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。　　避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。　　使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。　　四流动相组成　　流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。　　五疏水坍塌　 当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相，再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱（如WatersSymmetryShieldRP色谱柱）或非端基封口的色谱柱（如WatersResolve色谱柱）也可避免发生坍塌。

确定色谱峰保留时间不稳定的原因首先需要找出变化的模式。保留时间在多次进样间随机变化 建议首先检查泵和溶剂混合装置。校验泵是否工作正常，可以用量筒和秒表来测量流速。校验流动相组成没有变化，可以在流动相中加入跟踪剂来观察基线的变化。如果流动相组成是稳定的，基线也应该很稳定。如果流动相组成有变化，你会观察到基线的相应变化。举例说明，如果你使用反相条件，UV检测器，可以在有机相溶剂中加入0.1%的丙酮，监测254 nm下的基线变化。另一种方法也可以，你需要人工配制流动相，然后通过溶剂混合装置。如果保留时间的变化消失了，问题就出在溶剂混合装置上。一天之内的进样保留时间一致，但是不同天数之间的保留时间变化 这种情况下，仪器本身不太可能有问题。保留时间变化最有可能的原因是流动相组成的变化。在反相色谱中，保留因子k和流动相中有机溶剂的体积含量成指数关系。根据经验，如果有机溶剂含量误差1%，那么保留时间的变化在5%到15%之间，典型情况在10%左右。建议仔细称量有机溶剂，最好的配制流动相方法是用质量称量代替体积称量。 此外，流动相如何脱气也可能导致保留时间的变化。最好的脱气方法是使用真空超声脱气大约一分钟左右，这会最大程度的减少溶剂蒸汽的挥发。另一个方法是用氦气流喷射，在流动相被氦气平衡后，氦气流必须被关闭，否则氦气会带走溶剂蒸汽，溶剂的组成会由于蒸发而发生变化。 如果样品组成是离子状态或者离子化的，那么控制流动相的pH值非常重要。小到0.1单位的pH变化会导致保留时间漂移10%左右。所以准确测量pH值并保证pH仪被很好地的校准。在反相色谱中，随着流动相pH值的升高，酸保留时间会减少，碱的保留时间会增加。 化学老师常说“缓冲溶液之所以被称为缓冲溶液，因为它是用来缓冲pH 值的。如果它做不到，那就不能称之为缓冲溶液”。举个例子，醋酸铵溶液只是醋酸铵溶液，醋酸缓冲液包括醋酸根离子和醋酸，如果它们的当量相同，此时的pH值就是醋酸缓冲溶液的pK值4.75。缓冲溶液在它的pK值上有最大的缓冲能力。色谱峰保留时间朝同一个方向漂移 如果所有色谱峰的保留时间都朝同一个方向漂移，很可能是温度原因所致。根据经验，每℃的变化导致保留时间变化大约1%到2%左右。在通常情况下没有什么问题，但是在许多地方空调和暖气在周末的时候会关闭，然后会出现样品在周末的保留时间会和平时不一样。使用柱温箱可以很好的避免这个问题。其它原因 在反相色谱中，如果分析离子或离子化的样品，保留时间会受到缓冲溶液的离子强度的影响，但是影响会很小，通常可以忽略不计。典型的状况是缓冲液的摩尔数改变20%，保留时间变化约1%。由于缓冲液组分通常是称量的，那么大的误差是不会发生的。 在离子对色谱中，离子对试剂的浓度会影响离子化样品的保留。与离子对试剂电荷相反的分析物保留时间会增加，相同电荷的保留时间减少，中性化合物基本不受影响。在低浓度下，例如小于5 mM/L，样品组分保留时间的变化受与离子对试剂浓度影响，与离子对试剂的浓度成正比。在高浓度离子对试剂下，例如10 mM/L左右，填料表面被离子对试剂饱和，那么试剂浓度的改变不会对样品保留时间有明显的影响。这是在方法开发时需要考虑的问题。如果你需要把方法做到不受任一个变量的影响，那就应该那么做。 在正相色谱中，保留时间对流动相中极性组分的浓度非常敏感。这个组分无论是你需要还是不需要的，通常是指水。水含量的变化会导致保留时间的变化，比较好的解决办法是使用半饱和的非极性溶剂，例如正己烷或二氯甲烷。为了达到半饱和状态，通常需要往一定体积的溶剂中加一些水，搅拌一段时间使其饱和，然后把它和等体积的“干燥”溶剂混合。通过这个过程，理论上能让你在使用含水非极性溶剂时得到比较好的重现性，避免保留时间的漂移。

保留时间在多次进样间随机变化建议首先检查泵和溶剂混合装置。校验泵是否工作正常，可以用量筒和秒表来测量流速。校验流动相组成没有变化，可以在流动相中加入跟踪剂来观察基线的变化。如果流动相组成是稳定的，基线也应该很稳定。如果流动相组成有变化，你会观察到基线的相应变化。举例说明，如果你使用反相条件，UV检测器，可以在有机相溶剂中加入0.1%的丙酮，监测254 nm下的基线变化。另一种方法也可以，你需要人工配制流动相，然后通过溶剂混合装置。如果保留时间的变化消失了，问题就出在溶剂混合装置上。一天之内的进样保留时间一致，但是不同天数之间的保留时间变化这种情况下，仪器本身不太可能有问题。保留时间变化最有可能的原因是流动相组成的变化。在反相色谱中，保留因子k和流动相中有机溶剂的体积含量成指数关系。根据经验，如果有机溶剂含量误差1%，那么保留时间的变化在5%到15%之间，典型情况在10%左右。建议仔细称量有机溶剂，最好的配制流动相方法是用质量称量代替体积称量。此外，流动相如何脱气也可能导致保留时间的变化。最好的脱气方法是使用真空超声脱气大约一分钟左右，这会最大程度的减少溶剂蒸汽的挥发。另一个方法是用氦气流喷射，在流动相被氦气平衡后，氦气流必须被关闭，否则氦气会带走溶剂蒸汽，溶剂的组成会由于蒸发而发生变化。如果样品组成是离子状态或者离子化的，那么控制流动相的pH值非常重要。小到0.1单位的pH变化会导致保留时间漂移10%左右。所以准确测量pH值并保证pH仪被很好地的校准。在反相色谱中，随着流动相pH值的升高，酸保留时间会减少，碱的保留时间会增加。化学老师常说“缓冲溶液之所以被称为缓冲溶液，因为它是用来缓冲pH 值的。如果它做不到，那就不能称之为缓冲溶液”。举个例子，醋酸铵溶液只是醋酸铵溶液，醋酸缓冲液包括醋酸根离子和醋酸，如果它们的当量相同，此时的pH值就是醋酸缓冲溶液的pK值4.75。缓冲溶液在它的pK值上有最大的缓冲能力。色谱峰保留时间朝同一个方向漂移如果所有色谱峰的保留时间都朝同一个方向漂移，很可能是温度原因所致。根据经验，每℃的变化导致保留时间变化大约1%到2%左右。在通常情况下没有什么问题，但是在许多地方空调和暖气在周末的时候会关闭，然后会出现样品在周末的保留时间会和平时不一样。使用柱温箱可以很好的避免这个问题。

鉴别方法有：红外光谱法，化学反应有特色现象观察法，色谱保留时间对照法如果某种化工原料，不是合成的关键原料，只是一般原料，国家标准、药典上均没有明确的鉴别方法。那么，如果可以做IR光谱鉴别，但是不想做，只在做色谱含量时，用保留时间对照鉴别，可以接受吗？大家也可以就鉴别试验别的问题展开讨论。

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]器故障排除方法（保留时间不重复）引起保留时间不重复的最可能原因只有两个，一个是柱温不稳定；另一个是流速有变化。而检测器的故障不会造成保留时间的不重复。造成保留时间不重复的其它原因有进样技术不佳，进样量过大及柱损伤等。 排除保留时间不重复故障的步骤如下：（1）重复进样检查：为了进一步证实保留时间不重复故障，应首先检查进样的重复性。在重复进样时最好由一人独立操作，这样能较好地解决进样时间的重复性问题；如果重复进样后保留时间仍然不能重复，则应转入下一步。（2）温控精度及程序升温重复性检查：恒温分析时应首先检查柱室温度是否稳定在原分析操作所要求的设定值上。必要时要检查柱室温度的稳定性，如设定值及实际柱温与原分析条件有偏差，应以原分析条件为准；如果柱室温度在运行中有突然跳动，应进行温度控制故障检查与排除。在应用程序升温的场合下，要检查程序升温过程起始、终止柱温及升温速率与原分析条件是否一致。在检查时应注意，每次重新升温时，是否有足够的时间使起始温度保持一致，特别是起始温度很接近室温时，更应如此。程序升温的升温速率可以通过先测定升温中始、终两点间所需时间值，然后用终温与始温之差除以该时间值而加以验证。程序升温中还有一种情况不易为操作者所发现。那就是在升温过程中温度的变化很不均匀，忽快忽慢。但总的升温速率却看不出变化。对此现象可采取记录程序升温曲线而加以比较。如无自动记录方式可用手工法逐段加以记录，程序升温结束时再逐段加以对照，即可。（3）载气流速检查：载气流速的改变是引起保留时间不重复的另一个重要原因。可用皂膜流量计测定柱后或检测器之后的实际流速加以证实。对于恒温分析来说，主要检测实测值与预定值之间的偏差，必要时重新调整设定值使流速达到预定值要求。对于程序升温来说，必须检查温度处于始、终两点时载气流速是否有较大的变化。如果在始、终两点间流速之差超过2mL/s（当柱内径为4mm时）即认为稳流特性不好，这时需进一步检查系统是否漏气，稳流阀、稳压阀工作压力是否合乎要求。系统漏气不论对程序升温色谱，还是恒温色谱说来都是产生保留值不重复的一个不应忽略的原因。在系统漏气中进样口隔垫的漏气是经常产生的，在高温操作下频繁进样时要注意及时更换。（4）色谱柱检查：如果在气密性及载气流速方面均无异常，就应怀疑是色谱柱本身出了问题，对色谱柱进行检查。首先注意色谱峰形有否拖尾，如拖尾则应减少进样量或稀释样品浓度，以免色谱柱过载。如减少进样量后保留值重复性提高，则说明原柱固定相有少量流失或充填欠佳；此时原色谱柱还仍能使用。如果上述方法也无效，则说明色谱柱已发生损坏，必须更换新柱子。来源：药物分析网

保留时间不重现有两种不同的情况：既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下： 　　一色谱柱平衡 　　如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。 　　流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。应注意：水是很容易污染的流动相成分。 　　二固定相稳定性 　　固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。 　　经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等。 　　三色谱柱污染 　　保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。 　　样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。 　　避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。 　　使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。 　　四流动相组成 　　流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。 　　五疏水坍塌 　　当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相，再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱（如WatersSymmetryShieldRP色谱柱）或非端基封口的色谱柱（如WatersResolve色谱柱）也可避免发生坍塌。

测试柱子是否保留是设置一个99%纯水的等度方法吗？

[align=center][b][size=24px]气相色谱仪分析的定性依据及定性方法[/size][/b][/align][color=#000000] [size=18px]气相色谱仪[/size][/color][size=18px]的色谱分析包括色谱定性分析和定量分析。今天为大家浅析气相色谱仪的定性分析依据和定性分析方法，仅供色谱工作者参考交流。　　(一)气相色谱仪的定性分析依据：气相色谱主要功能不仅是将混合有机物中的各种成分分离开来，而且还要对结果进行定性及定量分析。所谓定性分析就是确定分离出的各组分是什么有机物质，而定量分析就是确定分离组分的量有多少。色谱在定性分析方面远不如其它的有机物结构鉴定技术，但在定量分析方面则远远优于其它的仪器方法。　　有机物进入气相色谱后得到两个重要的测试数据:色谱峰保留值和面积，这样气相色谱可根据这两个数据进行定性定量分析。色谱峰保留值是定性分析的依据，而色谱峰面积则是定量分析的依据。　　(二)气相色谱仪定性分析方法：气相色谱的定性分析方法主要有保留值定性法、化学[color=#000000]试剂[/color]定性法和检测器定性法。气相色谱的保留值有保留时间和保留体积两种，现在大多数情况下均用保留时间作为保留值。在相同的仪器操作条件和方法下，相同的有机物应有同样的保留时间，即在同一时间出峰。但必须注意：有同样保留时间的有机物并不一定相同。　　气相色谱保留时间定性分析方法就是将有机样品组分的保留时间与已知有机物在相同的仪器和操作条件下保留时间相比较，如果两个数值相同或在实验和仪器容许的误差范围之内，就推定未知物组分可能是已知的比较有机物。但是，因为同一有机物在不同的色谱条件和仪器中保留时间有很大的差别，所以用保留时间值对色谱分离组分进行定性只能给初步的判断，绝对多数情况下还需要用其它方法作进一步的确认。一个最常用的确证方法是将可能的有机物加到有机样品中再进行一次气相色谱仪分析，如果有机样品中确含已知有机物的组分，则相应的色谱峰会增大。这样比较两次色谱图峰值的变化，就可以确定前期初步推断是否正确。[/size]

保留时间不重现有两种不同的情况：即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下：一 色谱柱平衡如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。应注意：水是很容易污染的流动相成分。二 固定相稳定性固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等。三 色谱柱污染保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。四 流动相组成流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。五 疏水坍塌当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相，再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。

引起保留时间不重复的最可能原因只有两个，一个是柱温不稳定；另一个是流速有变化。而检测器的故障不会造成保留时间的不重复。造成保留时间不重复的其它原因有进样技术不佳，进样量过大及柱损伤等。 排除保留时间不重复故障的步骤如下：（1）重复进样检查：为了进一步证实保留时间不重复故障，应首先检查进样的重复性。在重复进样时最好由一人独立操作，这样能较好地解决进样时间的重复性问题；如果重复进样后保留时间仍然不能重复，则应转入下一步。（2）温控精度及程序升温重复性检查：恒温分析时应首先检查柱室温度是否稳定在原分析操作所要求的设定值上。必要时要检查柱室温度的稳定性，如设定值及实际柱温与原分析条件有偏差，应以原分析条件为准；如果柱室温度在运行中有突然跳动，应进行温度控制故障检查与排除。在应用程序升温的场合下，要检查程序升温过程起始、终止柱温及升温速率与原分析条件是否一致。在检查时应注意，每次重新升温时，是否有足够的时间使起始温度保持一致，特别是起始温度很接近室温时，更应如此。程序升温的升温速率可以通过先测定升温中始、终两点间所需时间值，然后用终温与始温之差除以该时间值而加以验证。程序升温中还有一种情况不易为操作者所发现。那就是在升温过程中温度的变化很不均匀，忽快忽慢。但总的升温速率却看不出变化。对此现象可采取记录程序升温曲线而加以比较。如无自动记录方式可用手工法逐段加以记录，程序升温结束时再逐段加以对照，即可。（3）载气流速检查：载气流速的改变是引起保留时间不重复的另一个重要原因。可用皂膜流量计测定柱后或检测器之后的实际流速加以证实。对于恒温分析来说，主要检测实测值与预定值之间的偏差，必要时重新调整设定值使流速达到预定值要求。对于程序升温来说，必须检查温度处于始、终两点时载气流速是否有较大的变化。如果在始、终两点间流速之差超过2mL/s（当柱内径为4mm时）即认为稳流特性不好，这时需进一步检查系统是否漏气，稳流阀、稳压阀工作压力是否合乎要求。系统漏气不论对程序升温色谱，还是恒温色谱说来都是产生保留值不重复的一个不应忽略的原因。在系统漏气中进样口隔垫的漏气是经常产生的，在高温操作下频繁进样时要注意及时更换。（4）色谱柱检查：如果在气密性及载气流速方面均无异常，就应怀疑是色谱柱本身出了问题，对色谱柱进行检查。首先注意色谱峰形有否拖尾，如拖尾则应减少进样量或稀释样品浓度，以免色谱柱过载。如减少进样量后保留值重复性提高，则说明原柱固定相有少量流失或充填欠佳；此时原色谱柱还仍能使用。如果上述方法也无效，则说明色谱柱已发生损坏，必须更换新柱子。

保留时间是色谱法的常用术语，是指被分离样品组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值时的时间，当提到保留时间、死时间、调整保留时间时，你是否清楚？当涉及[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]、[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相[/color][/url]中保留时间波动时，你是否明白，本篇文章为你做出了概括！一 区分几个概念保留时间(T)：从进样开始到某个组分的色谱顶点的时间间隔称为该组分的保留时间。即从进样到柱后某组分出现浓度极大时的时间间隔。死时间(t)：分配系数为0的组分的保留时间称为死时间。通常将空气或者甲烷视为此种组分，用来测定死时间。调整保留时间（t）：某组分由于溶解（或者吸附）于固定相，比不溶解（或者不吸附）的组分在柱中多停留的时间称为调整保留时间；调整保留时间=保留时间—死时间；（Vd）。※在实验室条件下（温度，固定相等）一定时，调整保留时间仅决定于组分的性质，因此调整保留时间是定性的基本参数。二 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]中保留时间的波动与哪些因素有关一般而言，与如下因素有关：1 操作因素；2 色谱柱的质量；3 仪器系统，尤其是输液泵的性能。三 [url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp][color=#3333ff]气相色谱仪[/color][/url]保留时间不重复故障排除方法引起保留时间不重复的最可能原因只有两个:柱温不稳定；流速有变化。※检测器的故障不会造成保留时间不重复,造成保留时间不重复的其它原因有进样技术不佳，进样量过大及柱损伤等。排除保留时间不重复故障的步骤如下： （1）重复进样检查：为了进一步证实保留时间不重复故障，应首先检查进样的重复性。在重复进样时最好由一人独立操作，这样能较好地解决进样时间的重复性问题；如果重复进样后保留时间仍然不能重复，则应转入下一步。（2）温控精度及程序升温重复性检查：恒温分析时应首先检查柱室温度是否稳定在原分析操作所要求的设定值上。必要时要检查柱室温度的稳定性，如,设定值及实际柱温与原分析条件有偏差，应以原分析条件为准；如果柱室温度在运行中有突然跳动，应进行温度控制故障检查与排除。在应用程序升温的场合下，要检查程序升温过程起始、终止柱温及升温速率与原分析条件是否一致。在检查时应注意，每次重新升温时，是否有足够的时间使起始温度保持一致，特别是起始温度很接近室温时，更应如此。程序升温的升温速率可以通过先测定升温中始、终两点间所需时间值，然后用终温与始温之差除以该时间值而加以验证。程序升温中还有一种情况不易为操作者所发现：那就是在升温过程中温度的变化很不均匀，忽快忽慢，但总的升温速率却看不出变化。对此现象可采取记录程序升温曲线而加以比较。如无自动记录方式可用手工法逐段加以记录，程序升温结束时再逐段加以对照，即可。（3）载气流速检查：载气流速的改变是引起保留时间不重复的另一个重要原因。可用皂膜流量计测定柱后或检测器之后的实际流速加以证实。对于恒温分析来说，主要检测实测值与预定值之间的偏差，必要时重新调整设定值使流速达到预定值要求。对于程序升温来说，必须检查温度处于始、终两点时载气流速是否有较大的变化。如果在始、终两点间流速之差超过2mL/s（当柱内径为4mm时）即认为稳流特性不好，这时需进一步检查系统是否漏气，稳流阀、稳压阀工作压力是否合乎要求。系统漏气不论对程序升温色谱，还是恒温色谱说来都是产生保留值不重复的一个不应忽略的原因。在系统漏气中进样口隔垫的漏气是经常产生的，在高温操作下频繁进样时要注意及时更换。（4）色谱柱检查：如果在气密性及载气流速方面均无异常，就应怀疑是色谱柱本身出了问题，对色谱柱进行检查。首先注意色谱峰形有否拖尾，如拖尾则应减少进样量或稀释样品浓度，以免色谱柱过载。如减少进样量后保留值重复性提高，则说明原柱固定相有少量流失或充填欠佳；此时原色谱柱还仍能使用。如果上述方法也无效，则说明色谱柱已发生损坏，必须更换新柱子。四 怎样解决[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]保留时间的漂移？为什么会漂移？保留时间飘移可能的原因有：1 柱子没有达到平衡；解决：平衡更长的时间来解决。2 实验环境温度发生变化；保留时间和温度有很大的关系，一般温度高，出峰快。解决：这里的温度不仅指柱温，其实还包括流动相温度。柱温一般都有规定，用柱温箱就可以平衡了，但是流动相温度没有规定，很多人不知道也要保持不变。在空调房里做，保持住室温不变，一般会好很多。3 流动相比例发生变化；解决：配置时尽量混合均匀；配置时尽量保证比例没有偏离；使用时尽量保证导管接口处不挥发泄漏；长时间不用的要密封，最好废弃不用。4 长期使用后柱子损耗；解决：重新，再生柱子，或更换新的。五 你要如何锁定保留时间？ 所谓保留时间锁定，就是使特定化合物的保留时间在不同仪器、不同色谱柱（但标称固定相和相比相同）之间保持不变。为了讨论这一技术的基本原理，要从影响保留时间重现性的因素说起！化合物的性质、固定液的性质和操作条件；如果前两个因素不变（对于特定的化合物和GC仪器系统，这当然是成立的）；只有操作条件会变，即，载气流速、柱温、毛细管柱规格和检测器类型等。载气控制：对于同种载气来说，压力和流速是影响保留时间的参数；不同厂家的压力表和流量计的制造精度有所不同，故当不同仪器的压力和流量显示完全一致时，柱内流量也不尽相同；现在有了EPC，这一问题基本得到了解决；虽然同一厂家制造的EPC不可能每项都严格一致，但差异微小，通过压力的自动调节完全可以补偿这一差异。温度控制：保留时间对温度极为敏感，过去采用水银温度计测量柱温时，重现性显然有问题。现在都用热敏元件与电子线路来控制温度，精度大为提高。不同仪器间温度重现性令人满意。即使有0.5℃的温度差异，我们仍能通过调节柱前压的办法来使保留时间达到重现。色谱柱规格：一、不同厂商的色谱柱，尽管标称规格一致，但难免有内径的不均匀、固定液膜厚的变化、以及柱长的不精确，这些都会造成保留时间的波动。二、同一根色谱柱在使用过程中会发生变化，比如，重新安装或因柱污染而截去1～2cm后，若其他操作条件不变，保留时间就不能重现了。目前，同一厂商的色谱柱制造重现性已相当高，而不同厂家的色谱柱尚不能完全重现，尤其是极性柱。但我们如果采用同一厂家的色谱柱，就可基本解决这一问题。至于色谱柱长度的变化，可以通过调节柱前压来补偿。检测器类型：常规检测器：常压下工作； MS：高真空下工作；AED：高于大气压（如，10kPa）下工作。这样，当比较常规检测器和MS或AED所得结果时，即使柱前压严格一致，柱压降也不同，保留时间就不能重现。采用EPC时，就很容易通过调节压力使柱压降保持相同。通过上述分析我们可以得出结论，只要仪器的载气和温度控制精度足够高，只要色谱柱标称规格一致，就可以通过调节柱前压的方法来补偿操作参数的微小变化，从而实现保留时间的重现，这就是RTL的基础。六 小结保持保留时间的重复性是重中之重！同时，也要尽可能避免保留时间的漂移！关注保留时间的稳定性也能反映流动相、检测器等的正常情况

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/3p][color=#3333ff]离子色谱[/color][/url]测试过程中，目标离子的保留时间由哪些因素决定呢？欢迎各位老师指点！

[b][font=宋体]问题描述[/font][font=宋体]：使用标准方法做阿莫西林等物质，色谱峰保留时间不断的往后漂移，柱压波动，逐渐变大，这是什么原因导致的？[/font][font=宋体]解答：[/font][/b][font=宋体]保留时间的漂移多数时候是由于固定相流失、色谱柱污染等原因导致的色谱柱柱效下降而引起的，具体总结如下：[/font][font=宋体]（1）[/font][font=宋体]固定相流失：固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的[/font]pH[font=宋体]范围内使用，固定相也会慢慢水解，水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定，长链键合相比短链键合相稳定，烷基键合相比氰基键合相稳定。经常清洗色谱柱也会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中同样也发生水解，如氨基键合相等。[/font][font=宋体]（[/font]2[font=宋体]）色谱柱污染：色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，对于反相色谱柱，样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质，如食品及生物样品（如血清）中的蛋白脂肪等大分子物质。在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然，可以通过使用固相萃取等前处理方法来尽量去除样品基质的影响。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进：[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

气相色谱法各种保留值的特点是什么

药典上高效液相色谱法做药物鉴别时经常这样表述：在含量测定项下记录的色谱峰中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。但在实际检测过程中，样品溶液的主峰的保留时间多少有些差异，怎么判断是保留一致？请问在哪儿能够找到官方依据或权威依据，谢谢！

反相液相色谱仪分析中溶质保留值主要由键合相种类、固定相表面积和流动相组成决定。1键合相种类：溶质保留值通常随链长增长或键合相疏水性增强而增大。2固定相表面积：溶质保留值与固定相表面积成正比。当其它条件相同时，溶质在低表面积色谱柱上的保留值小。3流动相组成：溶质保留值可通过改变流动相组成或溶剂强度来调整，溶剂强度取决于有机溶剂的性质和其在流动相中的浓度。

保留时间不重现有两种不同的情况：既保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，我们称之为漂移；而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如，保留时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。事实上，保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等。保留时间漂移的几种最常见的原因如下：一、 色谱柱平衡 如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。 流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。应注意：水是很容易污染的流动相成分。二、 固定相稳定性 固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH4时水解稳定性最好。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。 经常用高比例的水清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等。三、 色谱柱污染 保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。 样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。 使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。四、 流动相组成 流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。五、 疏水坍塌 当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失以及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法是先用含大量有机组分的流动相浸润固定相，再用高水含量的流动相进行平衡。使用内嵌极性基团的反相色谱柱（如Waters SymmetryShield RP色谱柱）或非端基封口的色谱柱（如Waters Resolve色谱柱）也可避免发生坍塌。

如图，液相色谱，方法一样，压力流速也基本不变，但是保留时间却往后推移了一段，三个不同时间测试，三个保留时间，越来越往后移，请问有哪些因素造成呢？流动相是甲醇和水。用的是荧光检测器，测苯并芘。谢谢ヽ(○^?^)??柱子是碳18[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/04/202104151157558855_8023_4061307_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/04/202104151157559118_2002_4061307_3.png[/img][img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/04/202104151157559206_1736_4061307_3.png[/img]

[size=3][font=宋体][color=#fe2419]维权声明：本文为[/color][color=#0365bf]wuweicheng85[/color][color=#fe2419]原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。[/color][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]是我们化验室最重要最常用的仪器之一，也是化验室最昂贵的仪器之一，我们的工作中经常要用到[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]，但是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]也是比较复杂的仪器，不是一天两天就能精通的仪器，所以我们在使用的过程中会经常出现很多的问题，而我们在遇见这些问题后，有的通过同事间的探讨，得到了解决。有些可能就一直没有解决。今天我们就大家在工作中遇到的色谱仪基线不稳，保留时间改变方面的问题展开讨论，将自己在工作中遇到的，或者是查取资料得到的这些方面的东西说出来供大家分享，促进大家的共同提高。[/font][/size][b][size=3][font=宋体]一、基线不稳及处理办法。[/font][/size][/b][size=3][font=宋体]所谓基线不稳定，也就是基线的噪音、漂移以及该检测器的基流等超出了仪器所要求的最低指标。[/font][/size][size=3][font=宋体]引起基线不稳的因素很多，如外围条件、工作站、电路、气路都有可能。我们就我们所知道的列出以下几种。[/font][/size][size=3][font=宋体]1[/font][/size][size=3][font=宋体]、在我们做煤气时曾经遇见过由于载气的纯度不够而产生基线不稳，通过更换载气问题解决。[/font][/size][size=3][font=宋体]2[/font][/size][size=3][font=宋体]、有一次工作中我们发现基线不稳，我们通过检查发现载气压力开的太小，我们通过调整问题得以解决，后来经过上网查证，发现载气总压力小于0.2Mpa就可能引起基线不稳定。另外[/font][/size][size=3][font=宋体]载气压力若不稳定、载气流速过高、以及稳定阀、稳流阀控制精度差，也会导致基线不稳，稳定载气压力后可解决。[/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size][size=3][font=宋体]3[/font][/size][size=3][font=宋体]、由于仪器接地不好导致基线不稳。我们的有些仪器非常灵敏，记得我们以前的高麦色谱，因为接地线没有弄好，导致基线很乱。还有放置仪器的地方机械振动太大导致基线不稳。[/font][/size][size=3][font=宋体]将仪器放到合适的地方解决。[/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size][size=3][font=宋体]4[/font][/size][size=3][font=宋体]、系统某处泄漏导致基线不稳。检查隔垫、柱子连接处看是否有漏气。[/font][/size][size=3][font=宋体]5[/font][/size][size=3][font=宋体]、隔垫用的时间过长，[/font][/size][size=3][font=宋体]被污染[/font][/size][size=3][font=宋体]会有残渣而产生噪声，从而基线不稳，更换隔垫或者清洗[/font][/size][size=3][font=宋体]衬管[/font][/size][size=3][font=宋体]可解决。[/font][/size][size=3][font=宋体]6[/font][/size][size=3][font=宋体]、FID气体配比不合适导致火焰不稳，从而反映出基线不稳。调整气体配比可解决此问题。[/font][/size][size=3][font=宋体]7[/font][/size][size=3][font=宋体]、气路出口管道中有冷凝物或异物，通过清理解决。[/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size][size=3][font=宋体]8[/font][/size][size=3][font=宋体]、柱箱或者检查器温度不稳定导致基线不稳，通过调整柱箱或者检测器温度解决，若是温度控制出现问题，进一步修理可解决问题。[/font][/size][size=3][font=宋体]9[/font][/size][size=3][font=宋体]、柱填充物松动，柱中固定相流失导致基线不稳，更换色谱柱解决。[/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size][size=3][font=宋体]10[/font][/size][size=3][font=宋体]、热导池污染，清理检测器。[/font][/size][size=3][font=宋体]11[/font][/size][size=3][font=宋体]、样品太脏导致基线不稳。过滤或者蒸馏处理样品后再做。[/font][/size][size=3][font=宋体]12[/font][/size][size=3][font=宋体]、电源电压太低或波动太大，通过调整可解决（网上查取）。[/font][/size][size=3][font=宋体]13[/font][/size][size=3][font=宋体]、桥路配置电位器接触不良，修理检测器解决（网上查取）。[/font][/size][size=3][font=宋体][/font][/size][size=3][font=宋体]14[/font][/size][size=3][font=宋体]、仪器环境空气中尘埃太多（网上查取）。[/font][/size][b][size=3][font=宋体]二、保留时间改变及处理办法[/font][/size][/b][size=3][font=宋体]导致保留时间改变（推迟或者提前）的原因很多，今天就我们平时遇到或者查资料的原因总结如下：[/font][/size][size=3][font=宋体]1[/font][/size][size=3][font=宋体]、色谱条件改变导致保留时间提前或者推迟,如改变载气流速、色谱柱温度等条件都能使保留时间推迟或者提前，通过调节到合适的条件可解决。[/font][/size][size=3][font=宋体]2[/font][/size][size=3][font=宋体]、气路泄漏导致保留时间提前或者推迟，检查进样隔垫、进样口和色谱柱接口。从理论上说,如果载气泄漏恒定,对保留时间的影响不会太大。通过重新安装可解决。[/font][/size][size=3][font=宋体]3[/font][/size][size=3][font=宋体]、我们在拆卸过色谱后某个部件没有安装好导致保留时间改变。重新安装可解决。[/font][/size][size=3][font=宋体]4[/font][/size][size=3][font=宋体]、样品中所测成分含量改变较大，也会使保留时间稍微的推迟或者提前。[/font][/size][size=3][font=宋体]5[/font][/size][size=3][font=宋体]、进样量不合适导致保留时间改变，通过进正确合适的进样量解决。[/font][/size][size=3][font=宋体]6[/font][/size][size=3][font=宋体]、色谱柱变短，或者固定相流失导致保留时间提前，通过更换新的色谱柱可解决此问题。[/font][/size][size=3][font=宋体]7[/font][/size][size=3][font=宋体]、手动进样时，进样方法不规范也会导致保留时间推迟或者提前，规范进样方法可解决此问题。[/font][/size][size=3][font=宋体]8[/font][/size][size=3][font=宋体]、进样隔垫或者衬管过脏也可导致保留时间改变，适时清洗或者更换可以解决此问题。[/font][/size][size=3][font=宋体]9[/font][/size][size=3][font=宋体]、色谱柱时间用长以后，柱头被污染也会导致保留时间推迟。通过将柱头切除一截可解决。[/font][/size]

[font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#333333]色谱峰保留时间不固定原因：[/color][/size][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#333333]首先，我们需要找到这种变化的模式。如果保留时间从一次运行到下一次运行随机变化，那么我将首先检查一下泵和溶剂混合装置。为验证泵是否正常工作，请使用带刻度的量筒和秒表来测量流速。如果流动相组成恒定，则基线将稳定。如果成分发生变化，您将在基线中观察到相应的变化。例如，如果您使用的是带紫外检测器的反相色谱法，你可以向有机溶剂中添加0.1％丙酮，并在254 nm处监测基线。或者，您可以手动配置流动相从而绕过溶剂混合设备。如果保留时间的波动消失了，那么问题的根源就是混合设备。[/color][/size][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px][color=#333333]假如是同一天不同针之间的保留时间很稳定，但是不同天之间的保留时间不固定？[/color][/size][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][color=#333333][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &]引起这种变化的最可能原因是流动相组成。在反相色谱中，保留因子k与流动相中有机溶剂的体积分数之间存在指数关系。根据经验，如果有机溶剂的用量误差为1％，则保留时间可在5％至15％之间变化，通常约为10％。这意味着您必须非常仔细地测量溶剂的量。最好的方法是按重量而不是按体积制备流动相。另外，如何给流动相脱气也可能导致保留时间变化。最好的脱气方法是同时采用真空和超声约一分钟。另一种好的方法是氦气吹扫。在流动相与氦气达到初步平衡后，应将氦气流量调低。否则，氦气将携带溶剂蒸气，而流动相溶剂组成可能会因此蒸发而发生变化。如果您的样品成分是离子型或可离子化的，那么控制流动相的pH值就非常重要。小至0.1pH单位的变化都可能导致保留时间10％的偏移。因此，准确测量pH值并维持pH计校准良好非常重要。在反相系统中，随着pH值的增加，酸的保留时间缩短，而碱的保留时间延长。顺便说一句，我的化学老师总是说：“缓冲液之所以称为缓冲液，是因为它应该缓冲pH值。如果不这样做，就不是缓冲液。”例如，乙酸铵溶液就是乙酸铵溶液。乙酸盐缓冲液包含乙酸根离子和乙酸。如果缓冲液中它们的存在量相同，则所得的pH值就是缓冲液的pKa值，以乙酸盐为例其pKa值为4.75。缓冲液总是在溶液pH=pKa时，缓冲能力最强。[/font][/color][/font][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px]另一个因素是温度。如果所有峰的保留时间沿同一方向移动，你就可以怀疑是温度是引起这种波动的原因。经验告诉我们，温度每变化每1摄氏度，保留时间将变化约1％至2％。在正常情况下，这变化并不显著。但在许多地方，周末会关闭暖气或空调，然后你就会疑惑为什么在周末自动运行的分析显示的保留时间与在工作日时运行的分析的保留时间不同。显然，通过使用柱温箱可有效避免这种情况发生。在检测离子型或可电离样品化合物的反相色谱法中，保留时间还受到缓冲液离子强度的影响，但影响很小，通常可以忽略不计。通常20％摩尔浓度的缓冲液变化对保留时间的影响在在1％以下。因为总是对缓冲盐进行称重后配置缓冲液，因此不可能发生如此大的错误。[/size][/font][/font][color=#333333][font=-apple-system, BlinkMacSystemFont, &][size=15px]在离子对色谱中，离子对试剂的浓度会影响离子样品组分的保留。与离子对试剂带相反电荷的分析物的保留时间增加，带相同电荷的分析物的保留时间减少。中性化合物几乎不受影响。当离子对试剂浓度低时，即低于5 mM/L，与试剂相互作用的样品成分的保留时间会随离子对试剂浓度的变化成比例地变化。当离子对试剂浓度高时，即大约10 mM/L，基团表面被离子对试剂吸附饱和，此时离子对试剂浓度的变化不会导致分析物的保留时间发生明显变化。在正相色谱中，保留时间对流动相中极性成分的浓度非常敏感。无论是否想要，这些成分中总是存在的一种是水。因此，水分含量的不同就可能导致保留时间的不同。解决该问题的一种诀窍是使用用水半饱和过的非极性溶剂，如己烷或二氯甲烷。为此，您需要取一定量的此溶剂并通过向其中添加一些水再搅拌一会儿使其饱和，，然后将这种水饱和的溶剂混匀后与等体积的“干燥”溶剂混合。该么操作的结果是非极性溶剂的水含量具有相当好的重现性。它还有助于防止保留时间的漂移。[/size][/font][/color]

[align=center][b]非极性键合相色谱的保留机制探讨[/b][/align] 今天，我们做的液相色谱多是非极性键合相液相色谱，但是其中的原理是什么？早期的液相色谱模型一般为分配模型和吸附色谱模型。在科技发展的过程中，各种模型都在某一方面推动了理论的进步，但是[b]模型毕竟是模型，各有各的局限性[/b]。比如，塔板理论源于化学工业，与液相色谱理论结合，也被运用到液相色谱中，其实仔细想想这个理论只是局部解决了分析化学中的问题，只是把宏观概念微观化了，所以只是[b]理论[/b]塔板数而已。非极性色谱法的固定相表面可以被流动相中的成分高度溶剂化，所以其保留机制就相对复杂了，单独的以分配理论和吸附理论去解释，难免有偏颇之处。科学界一直在试图寻找一种相对合理的模型去解释。目前比较合理的解释模型为[b]疏溶剂作用理论[/b]和[b]双保留机制[/b]。有关[b]疏溶剂作用理论和双保留机制[/b]本文不再阐述，希望各位网友自行脑补，如有疑问，请回帖讨论。

请问谁有乙二醇的测试方法啊,[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]相应的参数怎么设置????

新的色谱柱购买回来后您会不会及时按照包装盒内的性能测试报告对色谱柱的性能进行测试？厂家的性能测试报告您会保留多久？欢迎版友讨论，也可以谈谈您是如何验收新色谱柱的