请问各位紫外光谱仪带宽与分辨率的关系?看了很多资料,还是有点混淆。分辨率就是带宽么?欧洲药典的分辨率是通过0.02%甲苯的己烷溶液在269,266nm处吸光度比值求得,光谱仪的带宽是仪器本身自带的,或者通过可调档来调节这两个值往往不相同?请问两者的关系?谢谢。
紫外分光光度计的光谱带宽一般是2nm或更小,而液相色谱仪紫外检测器的光谱带宽却多为4-8nm
各位老师,2015版药典对紫外分光光度计的带宽要求是多少
参考JJG178-2007标准6.3.4 最小光谱带宽,非自动扫描的紫外可见分光光度计如何去测最小的光谱带宽,毕竟特征峰也没有。求指教。
紫外的光谱带宽可调和不可调,在实际测试工作的应用有什么区别?
我们如何来评价一台紫外可见分光光度计的优劣呢? 首先,我们要来考察它的外观。然后,我们探讨一下会对仪器的使用有很大影响的几个重要指标: 1、 杂散光 它指不应该有光的地方有了光。它是光谱测量中误差的主要来源。这个值当然越小越好了。 2、 光度准确度 光度准确度指实际测量的光度读数值与真值之差。它是用户对仪器的直接要求,每个用户都必须重视。 3、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。4 、光谱带宽 指从单色器射出的单色光谱线强度轮廓曲线的1/2高度处的谱带宽度。表征仪器的光谱分辨率。按照比耳定律,光谱带宽应该是越小越好的,但是如果仪器的光源能量弱,光学传感器的灵敏度低时,光谱带宽小了,也得不到理想的测量结果的。所以,选择和使用仪器时一定注意。5、 稳定性 稳定性是使用者最关注的指标之一。仪器的宗旨就是稳定可靠,不稳定更谈不上可靠了。6、 噪声 噪声也是仪器的重要指标之一。它表征仪器的做稀溶液的能力。这个指标也是越小越好。7、 波长的准确度和重复性 仪器的每个值都是在一定的波长下测得的,如果所示的波长和实际波长偏差万里,那么测出的值和真值的吻合度从何谈起呢?可见这个指标的重要性。 总之,这几个指标都是相互独立又相互关联的,每个指标对仪器的使用都有很大影响。希望大家在选购紫外、可见分光光度计时,多做比较,多做判断,切实找到一个稳定可靠的好帮手。我们选择时需要根据自己实验室的需要 ,主要考虑光学构造和光源、检测方法、样品类型和数据处理等因素。 1.光学构造 一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。1单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。2.样品类型在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。3.光源和检测方法 分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。 紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。 有的仪器可以选择 多种光源 :紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。分光光度计通常使用光电倍增管和光敏二极管测量吸光值。 4.样品类型在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。用小试管装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。5.数据管理 大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。 由此可见紫外、可见分光光度计是一种常规的实验室分析仪器。可广泛用于无机物、有机物的定性、定量分析中,在科研、制药、化工、环保、卫生、防疫等领域中发挥重要的作用。
最近在学习[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]的知识,里面提到它是基于Lambert-Beer定律来定量的,该定律的前提是单色光、垂直入射、稀溶液。为了满足单色光,故对于宽度为0.00Xnm吸收线线,选择了缩小5~10倍的光源(0.001~0.002nm)。紫外可见分光光度计 定量也是基于L-B定律,按理说也是要求发射光源宽度较窄,但目前的发射带宽均为2nm,有文献指出,只要发射光源的半峰宽/吸收光谱的半峰宽≤1即可获得满意的结果,为什么同样是为了获得线光源,基于分子吸收的分光光度计,比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Wp][color=#3333ff]原子吸收[/color][/url]法对光源的要求要低呢?(一个是要求小于5,一个要求小于1即可)?
可见分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。 通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 常用的波长范围为:(1)200~400nm的紫外光区,(2)400~760nm的可见光区,(3)2.5~25μm(按波数计为4000cm~400cm)的红外光区。所用仪器为紫外可见分光光度计、可见光分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。紫外可见分光光度计测的是分子在紫外光区的吸收强度,紫外可见分光光度计可用于大部分有色物质的定量监测,通常需要使用各种各样的显色剂。紫外可见分光光度计的常用参数: 紫外可见分光光度计的吸光度范围:-0.301-1.999A紫外可见分光光度计的波长范围:200-1000nm 浓度显示范围:0-1999波长准确度:±2nm 杂散光:≤0.5%T@220nm、360nm波长重复性:1nm 稳定性:±0.003A/小时光谱带宽:4nm 配有RS232通讯接口透射比准确度:±0.5%T 打印机:支持透射比重复性:0.2%T 应用软件:支持透射比范围:0.0-125%T
我单位想买一台紫外光度计,没有用过紫外请问哪一家的紫外好些,性能好些,和实际应用中与光度计相比有哪些优势?
是否可以将普通光度计中的钨灯换成氘灯就可以做成紫外光度计了?换一个氘灯多少钱?
如何选择紫外分光光度计?主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,已经形成了一种能解决广泛难题的仪器,从单一波长的测量到高性能多光谱的测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。光源和检测方法(LIGHT SOURCES AND DETECTION)分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。 Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。样品类型(SAMPLE FORMAT)在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。数据管理(DATA MANAGEMENT)大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。(生物通:亚历)(http://www.ebiotrade.com/)
想问问大家的紫外分光光度计,是如何做基线扫描或者是噪声扫描的??还有就是紫外光度计开机时,不是会弹出:定点扫描,波长扫描,时间扫描,就是那个时间扫描的用途是什么??好象很少用到。希望知道的朋友能否回个萜,在此谢谢了!!
你好!我们使用的紫外可见分光光度计上有谱带带宽,请问是什么意思?我们现在调的带宽是2nm,但是,在228nm处不能调零和调100%。期望专家给予解释!
如何校正紫外光度计的波长,具体的步骤,谢谢大家
一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。1单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。2双光束型则是通过一个斩光轮(mirroredchopperwheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lampdrift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。有的仪器可以选择多种光源:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3,000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。分光光度计通常使用光电倍增管和光敏二极管测量吸光值。
各位,有谁用过上海精科759(s)或其他型号的紫外光度计啊?机子性能如何?售后如何?求使用心得!!谢谢!
[align=left]紫外分光光度计大量用于实验室研究。如何选择和购买紫外分光光度计对于研究人员来说是很重要的。紫外分光光度计该如何选择呢?[/align][align=left]紫外分光光度计的选择主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。[/align][align=left]研究者们有众多的新紫外光分光光度计可选。自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,这种能解决广泛难题的仪器可以从单一波长的测量到高性能多光谱进行测量分析。科学家们选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)[/b][/color][/align][align=left]一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。[/align][align=left]双光束型则是通过一个斩光轮(mirrored chopper wheel)将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以最小化光漂移(lamp drift)和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。[/align][align=left][color=#4687dd][b]数据管理(DATA MANAGEMENT)[/b][/color][/align][align=left]大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。[/align][align=left]另外一个值得考虑的因素是数据的最终使用。各独立实验室都有各自感兴趣的实验结果。例如一些药物机构需要考虑美国FDA的要求和欧联盟的药物评价机构的要求选择不同的数据处理方式。[/align][align=left][color=#4687dd][b]光源和检测方法(LIGHT SOURCES AND DETECTION)[/b][/color][/align][align=left]分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。如果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。[/align][align=left]紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。[/align][align=left]一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780nm至3000nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380nm到800nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。[/align][align=left]分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。[/align][align=left]为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管(photo-multiplier tubes,PMTs)和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。[/align][align=left][color=#4687dd][b]样品类型(SAMPLE FORMAT)[/b][/color][/align][align=left]在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。[/align][align=left]用小试管cuvette装样品容量一般从1μl~5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。[/align]
各位大侠,我最近检定我们单位的日本岛津UV-2201型紫外可见分光光度计,按照国家计量检定规程检定,由于现在没有仪器的说明书,光谱带宽不知道怎么检定,谁能告诉我?顺便如果哪位有关于UV-2201型的说明书或者有关资料能否给我传一份!谢谢顺便看看这个,放在一起讨论???http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20070705/898990/李昌厚教授的论文中有讨论,不过有点深奥,没看太明白?
用紫外光度计时,吸收池大小影响测定吗?大家好!我在用紫外分光光度计测样品是,国标上会注明用1CM(或3CM,5CM)的吸收池测定,而我们买的仪器只是1CM的,这会不会影响测定呢?
咨询大家个问题,有没有1万左右的能扫描紫外光谱的分光光度计?
紫外可见分光光度计是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的仪器。在生物制药、精细化工、环境监测等领域有着广泛应用,并被纳入《中华人民共和国强制检定的工作计量器具明细目录》,需要根据检定规程定期检定。但实际检定过程中经常会出现对同一台仪器不同的检定机构给出的检定结果完全不同,判定不合格的仪器返厂修理时并未发现问题的情况发生。实际上很多时候并不是仪器发生了问题,而是在对仪器的检定过程中,检定人员对一些细节问题了解不足、重视不够造成的。一、波长误差检定中需注意的问题波长误差是一项重要指标,规程中对该项指标的检测,给出了多种标准物质进行选择。选择哪一种标准物质,要根据仪器的情况。一般最常用的波长标准物质是氧化钬玻璃滤光片、镨钕玻璃滤光片。因其使用最方便(不用打开仪器光源部分),汞灯等波长标准需放到光源部分,操作起来相对麻烦。但由于氧化钬玻璃等滤光片需要通过高等级紫外可见分光光度计对参考波长定值后才可使用,所以使用时需充分考虑定值时使用的紫外可见分光光度计的性能,尤其需要考虑到仪器的光谱带宽,定值用仪器的光谱带宽多设定为2nm。但大多数仪器的光谱带宽是固定的,而且较大,尤其是低档仪器,如752型紫外可见分光光度计光谱带宽为4nm,721型可见分光光度计光谱带宽为5nm。表1、表2分别为同一台紫外可见分光光度计在其他条件不变下,光谱带宽分别设定为0.5nm、2.0nm、5.0nm时使用氧化钬玻璃和镨钕滤光片扫描得到的峰值数据,可见当仪器的光谱带宽发生变化时,使用氧化钬玻璃或镨钕玻璃滤光片检测得到的波长误差存在着较大的差异,对于光谱带宽较大的仪器甚至部分波峰检测不到。所以检定过程中应尽量将仪器的光谱带宽设定为滤光片定值时所使用的紫外可见分光光度计的光谱带宽。而且虽然镨钕玻璃滤光片的波长范围可以达到(500~900)nm,但不建议将镨钕玻璃滤光片作波长主标准器,原因是镨钕玻璃滤光片的峰值并不尖锐,比较圆滑。仅可作为对某一空白波段的补偿。例如使用氧化钬玻璃滤光片作为主标准器检测(200~700)nm 范围的波长值,再用镨钕玻璃滤光片补充(700~900)nm波段的波长值。对于光谱带宽不可调且较大的仪器如果使用滤光片检定不合格时切不可急于判定,而应该改用汞灯等自然标准重新对仪器波长误差进行检定,以此为依据做出判断。光谱带宽(nm)0.52.05.0波长(nm)536.5537.0537.0460.2460.4459.9453.9454.0/445.8446.3446.9418.4418.7418.2360.9361.2361.5287.4287.8288.3279.4279.5279.0241.6241.8[
选择紫外分光光度计时主要考虑光学构造、光谱范围、样品类型和分析工具。 光学构造(OPTICAL CONFIGURATION)一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。分光光度计的带宽(bandwidth)很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。 微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。用小试管cuvette装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。数据管理(DATA MANAGEMENT)大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。
现在有些搞糊涂了,红外、可见、紫外光度计以及火焰光度计主要都测定哪些组份啊?我只知道火焰用来测定钾、钠、钙,可其它的都用来测什么呢?谢谢
公司准备购买岛津LC-20A的液相色谱仪,配备的紫外检测器的波带宽为8nm,设备部的老同志说药典规定为2nm,所以配置太差,不予购买。但我查了很多牌子的HPLC,波带宽4-8nm的都有,不知药典规定的是否紫外分光光度计的波带宽呢?为什么HPLC的紫外检测器的波带宽大概都在4-8nm范围?8nm的波带宽是否很差,不适合购买?本人是新手,这个弱弱的问题希望大家能够给予解答,先谢啦![em0808]
俺们实验室用的还是752紫外光栅分光光度计问题多多,尤以不稳定显著经常使用也摸出一点心得了现拿出来与大家共享---------------通常老式的机子里面都是有干燥剂的(一般为变色硅胶)以前认为一个礼拜换一次差不多了后经实践表明:若真是要使用起来每天都得更换,这样752才能一方面预热时间可以减少,同时也比较稳定。------------------
大家好,我最近在我们的生活小区采了点水样测定,但是数据重现性不是很好,我想问一下用紫外光度计测定水样的标准曲线或一般生活污水的波长范围大概是在哪个范围?A220和A275
第三方公司主要做环境检测,未来有可能扩展到食品检测,原来的国产欣茂UV7504逐渐步入老年,去年返厂修了一次花了1千多,机器总价也就几千元,今年又不能自检了,准备放弃治疗了。想问下第三方公司采购紫外可见分光光度计主要关注哪些方面的性能呢,波长准确度,波长重复性,噪声,杂散光这些指标都怎么看,光谱带宽可调有没有必要?国产和进口设备有没有可比性,进口的好贵啊,都几万起步,国产一两千到几万都有
我们公司的紫外光光度计出现了故障,现在是灯有时亮,里面还能听到工作的声音,就是无显示了,怀疑是显示器有问题,但不知哪里有维修站,朋友们帮忙看一下那里有相关的维修人员,帮忙提供一下,以便联络,谢谢! 机器的相关资料如下: 机器上的铭牌: SHIMADZNUV-VISIBLE RECORDINGSPECTROPHOTOMETERUV-160
[font=微软雅黑][size=16px]自从60年前紫外分光光度计出现在实验室的工作台之后,已经形成了一种能解决普遍难题的仪器,从单一波长的测量到高性能多光谱的测量分析。实验室选择时需要根据自己实验室的需要和目的用途来考虑,光学构造和光源、探测方法、样品类型和数据处理等都是要考虑的因素。瓦赛带您了解如何选择紫外可见分光光度计。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]一、光学构造[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]一般来说,紫外光分光光度计分为单光束和双光束两类。顾名思义,单光束型主要是依赖单束光进行测量。一束给定波长的光通过对照物,然后再通过实际样品溶液,就能得到吸光结果。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]双光束型则是通过一个斩光轮将一束光分成两束,分别测量对照样品和实际样品。可以至小化光漂移和减少测量时间。一些双光型光度计不利用斩光轮,而是利用一种光束分光器来代替,将一束光分成两束平行的光然后同时测量对照样品和目的样品。因为增加了测量的速度,所以双光束分光光度计在测量一些溶液随时间动态变化的研究中大有用处。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]二、光源和检测方法[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]分光光度计的光谱也是需要考虑的一个重要因素。实验室研究人员希望省钱购入专门仪器定量核酸、蛋白或者细菌的生长情况。例如Amersham Biosciences of Piscataway公司的GeneQuant II能在230、260、280、320、595和600nm的波长下测量样品。果果需要更大的灵活性,研究者可以考虑一种更高性能的宽光谱仪器,可以程序性地进行ELISAs分析和比色分析。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]紫外分光光度计一般覆盖190nm和380nm波长,通常利用氘灯照明。一些特殊的仪器可以提供满足光子学和半导体研究需要的光谱范围。Varian of Palo Alto公司的Cary Deep UV和Hitachi High Technologies of Tokyo的U-7000 Automated Vacuum UV System就是这样的仪器。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]一些仪器具有多种光源供选择:紫外光、可见光和甚至红外光(780 nm 至3,000 nm)。钨灯和卤素灯一般只覆盖可见光部分(大约380 nm 到800 nm)。而氙灯则可以覆盖紫外光和可见光区域。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]分光光度计的带宽很大程度上依赖于单色仪的狭缝的宽度。可以投射出实验精确要求的光谱。一种严格带宽使得仪器能对复杂的混合物进行高分辨率的吸光测量。可变的单色仪的狭缝宽度能使一台分光光度计满足多种实验需要。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]为了测量吸光值,分光光度计制造商通常使用光电倍增管和光敏二极管。PMTs提供快速的反应时间和良好的灵敏度,并且可以在紫外光谱调节至特定的范围。但一些制造商依赖于光敏二极管的动态范围在数秒内行使所有的光谱测量。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]三、样品类型[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]在大部分的样品类型中,分光光度计可接受样品孔、小玻璃管cuvette、吸浆管和微孔板。微孔板主要是满足高通量的需要和大规模的实验室需求。但尽管对于小实验室来说,制造商仍然提供了多种容器转换器来满足通量的要求和减少实验时间。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]用小试管cuvette装样品容量一般从1 μl-5ml,并且一些仪器装备了各种样品固定物来满足各种改变需要。体现了柔韧性。[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]四、数据管理[/size][/font][font=微软雅黑][size=16px]大部分单机型的分光光度计包含了驱动仪器运行和管理数据的软件。高性能的仪器,通常与PC机一起联用,需要从制造商提供额外的软件。同时用户也可以选择升级软件以满足他们的需要。[/size][/font]另外一个值得考虑的因素是数据的使用。各单独实验室都有各自感兴趣的实验结果。
紫外分光光度计用来测紫外光时,石英皿用来调零时不稳定,是由那些原因?