快速组织破碎匀浆仪

在用户咨询产品时我们常常把组织研磨仪与组织匀浆器当做是同一种东西，其实我们通常所说的组织研磨仪与组织匀浆器是有一定的区别的：通常所指的组织研磨仪是利用研磨球对样品的撞击、摩擦使组织破碎研磨的仪器，其体积较大，电驱动摇臂运转，应用广泛；而通常说的组织匀浆器是一种玻璃仪器，体积较小，手动研磨，主要适用于柔软的内脏组织。组织匀浆器的常见种类：1. 杜恩斯组织匀浆器（Dounce Tissue Grinder） 硼硅酸盐玻璃材质，有一松一紧两个研磨杵，用于粗磨和精磨2. 杜阿尔组织匀浆器（Duall Tissue Grinder）特点是内面磨砂，适用研磨肌肉，心脏、肺等器官或组织3. 坦布鲁克组织匀浆器(Tenbroeck Tissue Grinder)4. 锥形组织匀浆器（Tapered Tissue Grinders）5. 槌头组织匀浆器（Potter-Elvehjem Tissue Grinders）

[align=center] [b]中草药快速常温提取--组织破碎提取法（闪提）[/b][/align][align=left] 绿色提取（green extraction）是由本团队核心专家刘延泽教授于2013年在南京举行的全国第四届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上首次提出，绿色提取是指：利用安全、易得、无毒、易回收、无残留的适当溶剂，将目标生物活性成分以最快的速度、最低的消耗、最大的收率从动植物材料中转移出来，并且实现目标活性成分与母体残渣全利用、零排放、零污染的一种或一类提取技术。2014、2015年又分别在长沙、青岛举行的全国第五届、第六届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上进一步阐述其原理、应用成果和前景，得到了与会专家的热烈响应和一致认可。[/align] 绿色提取的基础是刘延泽教授等于1993年首次提出并在河南科学上发表的植物组织破碎提取法，当时主要是应用于热敏感成分丹宁及多元酚类化合物的提取。之后，相继在河南省、国家自然科学基金、科技部等的支持下研制出了实现这一方法的设备—中草药组织破碎提取器。经过20余年的实践证明，该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取，其独特的快速、节能、环保、可持续利用的优势是当今任何方法都无可比拟的，完全具有当今人类发展关键元素的“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。但是，由于人们对新生事物的接受及其他多种因素的影响，目前经该方法研究的中草药尚不足百种，并且尽管几乎都取得了预期效果，但仍未真正应用到生产中去，与我们国家的近万种中草药和数十个应用领域相比仅仅沧海一粟，前景极其巨大。 本项目将在20余年成功实践的基础上，首先完善不同规格组织破碎提取器的研制和定型生产，满足本提取计划的需求，包括微量分析型（20ml）、实验研究型（2L）、中试规模型（200L）、和生产应用型（1000L）；对一期目标中的药典提取物、单味中药提取物（药典）、国际标准提取物、特色中草药提取物（色素、香料、调味剂、添加剂）等进行提取。[b] [/b]中草药组织破碎提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术，在室温液体状态下数秒内把植物组织破碎、研磨至细微颗粒状，通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与包容，使组织内有效成分分子迅速解离并进入到溶剂体系中，并迅速实现药材组织内外有效成分分子浓度的平衡，达到快速提取的效果。产品特点及用途：● 室温提取、保护成分： 把溶解提取成分的溶剂装入提取容器内，再将适量中草药饮片也装入提取容器，物料和溶剂混合后在室温状态下进行组织破碎提取，有效的保护了热敏成分；● 剪切研磨、瞬间完成： 提取器利用高速液体组织破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗滤技术，在30秒左右完成组织破碎提取过程；● 速度可调，对不同材料方便个性化处理；● 全不锈钢结构，耐各种有机溶剂；● 刀具与容器一体化设计，清洗更为容易，一冲即可；● 该仪器为集成了高速液体组织破碎、高速研磨、高速匀浆、高速搅拌功能与优势为一体的设备，广泛用于中草药提取、生物工程、农林化工、烟草化工、制药、保健食品、天然美容品、洗浴疗养品及轻工等领域。

想请各位讨论下，组织捣碎机和组织匀浆机的区别，个人感觉区别不大

前处理过程中，为了更有效提取，经常会用均质器（组织捣碎机，匀浆机）进行进一步破碎。但是在做动物组织样品时，经常会有组织塞进探头里面，我想请问一下，哪一种探头好？（好像有内切，还有外切的，有点乱）或者哪一个牌子型号的好用？

用于组织破碎，有哪种超声破碎仪好？匀浆机跟超声破碎仪有什么区别吗？

除了某些细胞外的多肽激素和某些蛋白质与酶以外，对于细胞内或多细胞生物组织中的各种生物大分子的分离纯化，都需要事先将细胞和组织破碎，使生物大分子充分释放到溶液中，并不丢失生物活性。不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同，如动物脏器的细胞膜较脆弱，容易破碎，植物和微生物由于具有较坚固的纤维素、半纤维素组成的细胞壁，要采取专门的细胞破碎方法。1.机械破碎(1)研磨研磨是将剪碎的动物组织置于研钵或匀浆器中，加入少量石英砂研磨或匀浆，即可将动物细胞破碎，这种方法比较温和，适宜实验室使用。工业生产中可用电磨研磨。细菌和植物组织细胞的破碎也可用此法。(2)匀浆匀浆这是一种较剧烈的破碎细胞的方法，通常可先用家用食品加工机将组织打碎，然后再用10000r/min-20000r/min 的内刀式组织捣碎机(即高速分散器)将组织的细胞打碎，为了防止发热和升温过高，通常是转10秒-20秒，停10秒-20秒，可反复多次。(3)胶体磨胶体磨的基本原理是流体或半流体物料在离心力的作用下，强制通过高速相对运动的定齿与动齿之间，使物料受到强大的剪切力，磨擦力、高频振动和高速旋涡等复杂力等作用，有效地被粉碎、乳化、均质、混合，从而达到精细超微的效果。定转子间的高速相对运动是使胶体磨工作获得物理微细度的主要条件，只有提高磨盘的精密度与线速度，才能达到良好的加工效果。2. 物理破碎(1)压榨压榨是一种温和的、彻底破碎细胞的方法。在1000×105Pa-2000×105Pa 的高压下使几十毫升的细胞悬液通过一个小孔突然释放至常压，细胞将彻底破碎。这是一种较理想的破碎细胞的方法，但仪器费用较高。(2)冷热交替冷热交替是在90℃左右维持数分钟，立即放入冰浴中使之冷却，如此反复多次，绝大部分细胞可以被破碎，细菌或病毒中提取蛋白质和核酸时可用此技术。(3)反复冻融反复冻融是将待破碎的细胞冷至15℃-20℃，然后放于室温(或40℃)迅速融化，如此反复冻融多次，由于细胞内形成冰粒使剩余胞液的盐浓度增高而引起细胞破碎。(4)超声波超声波是借助超声波的振动力破碎细胞壁和细胞器。破碎微生物细菌和酵母菌时，时间要长一些，处理的效果与样品浓度和使用频率有关。使用时注意降温，防止过热。3.化学与生物化学破碎(1)有机溶剂有机溶剂是利用氯仿、甲苯、丙酮等脂溶性溶剂或SDS(十二烷基硫酸钠)等表面活性剂处理细胞，可将细胞膜溶解，从而使细胞破裂，此技术也可以与研磨法联合使用。(2)自溶自溶是将新鲜的生物材料存放于一定的pH 和适当的温度下，细胞结构在自身所具有的各种水解酶(如蛋白酶和酯酶等)的作用下发生溶解，使细胞内含物释放出来，此法称为自溶法。该法使用时要特别小心操作，因为水解酶不仅可以使细胞壁和膜破坏，同时也有可能会把某些要提取的有效成分分解。(3)溶胀溶胀是在低渗溶液和低浓度的稀盐溶液中，由于存在渗透压差，溶剂分子大量进入细胞，将细胞膜胀破释放出细胞内含物。(4)酶解酶解是利用各种水解酶，如溶菌酶、纤维素酶、蜗牛酶和酯酶等，于37℃，pH8，处理15分钟，可以专一性地将细胞壁分解，释放出细胞内含物，酶解破碎适用于多种微生物。例如从某些细菌细胞提取质粒DNA 时，可采用溶菌酶(来自蛋清)破细胞壁，而在破酵母细胞时，常采用蜗牛酶(来自蜗牛)，将酵母细胞悬于0.1mmol/L 柠檬酸一磷酸氢二钠缓冲液(pH=5.4)中，加1%蜗牛酶，在30℃处理30分钟，即可使大部分细胞壁破裂，如同时加入0.2%疏基乙醇效果会更好。此法可以与研磨联合使用

中草药提取是指将中草药本身所含的有效或有用成分与无效或无用的部分分离开来，其中的有用部分称之为提取物，无用部分称之为药渣。根据浓缩程度不同，中草药提取物可以是固体，也可以是稠稿和浓缩液。中草药提取物无论在中药制药工业、保健品与食品工业，还是化妆品工业、农兽药工业等都有着广泛的使用并起着不可替代的作用。传统提取技术包括压榨法、升华法、煎煮法、浸渍法、回流法、连续回流发、逆流萃取法、超声波法及其他辅助提取技术。绿色提取（green extraction）是由刘延泽教授于2013年在南京举行的全国第四届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上首次提出，绿色提取是指：利用安全、易得、无毒、易回收、无残留的适当溶剂，在常温状态下将目标生物活性成分以最快的速度、最低的消耗、最大的收率从动植物材料中转移出来，并且实现目标活性成分与母体残渣全利用、零排放、零污染的一种或一类提取技术。2014、2015年又分别在长沙、青岛举行的全国第五届、第六届中草药提取分离关键技术与提取物产业化应用研讨会上进一步阐述其原理、应用成果和前景，得到了与会专家的热烈响应和一致认可。[b] 技术目的：[/b]节约能源、降低消耗，减少排放、保护环境，提高收率、节约资源，促进技术进步，解脱繁重劳动，增进人类健康[b]技术背景：[/b] 绿色提取的基础是刘延泽教授等于1993年首次提出并在河南科学上发表的植物组织破碎提取法，当时主要是应用于热敏感成分丹宁及多元酚类化合物的提取。之后，相继在河南省、国家自然科学基金、科技部等的支持下研制出了实现这一方法的设备—中草药组织破碎提取器（闪提）。经过20余年的实践证明，该方法不仅适用于几乎所有类别中药有效成分的提取，其独特的快速、节能、环保、可持续利用的优势是当今任何方法都无可比拟的，完全具有当今人类发展关键元素的“绿色科技、可持续利用、和谐自然”。[b]技术特点：[/b]1、室温提取、保护成分：[color=#333333]传统的提取方法，例如煎煮、回流等都需要加热，而组织破碎提取法在室温下即可操作，不需要加热，充分保护了热敏成分。[/color]2、快速提取、瞬间完成：[color=#333333]传统提取工艺需要数小时才能完成的提取，组织破碎提取法只需60秒左右即可完成。[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、绿色环保、节约能源[/color][color=#333333]由于提取过程不需要加热，[/color][color=#333333]提取后母体残渣全利用、零排放、零污染，[/color][color=#333333]而且提取时间短，所以整个提取过程节能能源、绿色环保。[/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]技术原理：[/color][/b][color=#333333]组织破碎提取法是在室温液体状态下利用高速破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗透等技术，数分钟内对药材进行组织破碎、研磨至细微颗粒，通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与溶解，使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度、最低的能耗、最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中，实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度的平衡，且不会破坏热敏成分、并达到快速绿色提取的效果。[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]应用领域：[/color][/b][color=#333333]1[/color][color=#333333]、[/color]中药及天然药物成分提取；[color=#333333]2[/color][color=#333333]、化工领域提取等；[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、生物技术、化妆品、食品、保健品等领域。[/color][b][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333] [/color][color=#333333]提取方法比较：[/color][/b] [table][tr][td][b]提取方法[/b][/td][td] [align=center][b]优点[/b][/align] [/td][td] [align=center][b]缺点[/b][/align] [/td][/tr][tr][td]煎煮法[/td][td]经济、安全、易行[/td][td]选择性差、成分易破坏、后期处理困难[/td][/tr][tr][td]回流法[/td][td]选择性好、收率高[/td][td]受热长、效率低、成分易破坏[/td][/tr][tr][td]浸泡法[/td][td]简单、投资小、安全[/td][td]效率低、耗时长、易变质[/td][/tr][tr][td]蒸馏法[/td][td]选择性强、处理方便[/td][td]适用范围窄、需要专用设备[/td][/tr][tr][td]渗漉法[/td][td]室温、简单、节能[/td][td]费时、有污染[/td][/tr][tr][td]连续回流法[/td][td]省溶剂、效率高[/td][td]受热长、规模小、成分易破坏[/td][/tr][tr][td]超临界萃取[/td][td]近室温、安全、收率高[/td][td]设备复杂、投资大、规模小[/td][/tr][tr][td]超声提取法[/td][td]近室温、安全、收率高[/td][td]投资大、规模小、较耗时[/td][/tr][tr][td]微波萃取法[/td][td]快速、易行[/td][td]规模小、成分易变化[/td][/tr][tr][td]组织破碎提取法[/td][td]室温、快速、安全、节能，不破坏成分、规模可调、宜各种溶剂[/td][/tr][/table][b][color=#333333]研究论文、综述等检索：[/color][/b][color=#333333]一、中国专利、CNKI（2016年6月前）[/color][color=#333333]1[/color][color=#333333]、闪式提取 1072篇 [/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、组织破碎提取 82篇[/color][color=#333333] [/color][b][color=#333333]相关论文：[/color][/b][color=#333333]1[/color][color=#333333]、《中国天然药物》2007-11 [/color][color=#333333]植物组织破碎提取法及闪式提取器的创制与实践 [/color][color=#333333]被引用：163 次，下载：855次[/color][color=#333333]2[/color][color=#333333]、《中草药》2010-02[/color][color=#333333]用于中药提取的新技术进展 [/color][color=#333333]被引用：57 次，下载：4100次[/color][color=#333333]3[/color][color=#333333]、《中国医院药学杂志》2015-01[/color][color=#333333]闪式提取技术在中药成分提取中的研究进展[/color][color=#333333]4[/color][color=#333333]、《中药材》2015-07[/color][color=#333333]闪式提取在中药中的应用进展[/color][color=#333333] [/color]

大家实验室一般用什么匀浆机啊，最近打算买一个，但不知道品牌、型号哪个合适。我们多数用来粉碎动物组织，有时候样品量不大，只有几克，不知道哪种合适？匀浆机太大的话，会不会打不碎，因为样品量太少？多谢大家啦！

[color=#333333]组织破碎提取法是在常温液体状态下利用高速破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗透等技术，数分钟内对药材进行组织破碎、研磨至细微颗粒，通过细胞组织的破裂和组织外围溶剂的快速渗透与溶解，使药材组织细胞内的目标生物活性成分以最快的速度、最低的能耗、最大的收率迅速从细胞中解离出来进入溶剂体系中，实现药材组织细胞内外有效成分分子浓度的平衡，且不会破坏热敏成分、并达到快速绿色提取的效果。[/color]

请问有没有适合动物少量组织匀浆用的匀浆机 价格如何呢 性能如何 请各位达人推荐

[b][font=微软雅黑][size=10.5pt]一、机械破碎法：[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器[/font] [font=微软雅黑]等将细胞破碎开来[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1. 高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]二、物理破碎法：[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt]指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]1．用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂(借助超声的震动力破碎细胞壁和细胞器）。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]机制：可能与强声波作用溶液时，气泡产生、长大和破碎的空化现象有关，空化现象引起的冲击波和剪刀力使细胞裂解。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]超声波破碎的效率取决于声频、声能、处理时间、细胞浓度和细胞类型等。（使用时注意降温，防止过热）。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]2. 高压破碎：细胞悬浮液从高压室的环状隙喷射到静止的撞击环上，被迫改变方向经出口管流出。此过程中细胞经历了高速造成的剪切的碰撞及高压到常压的变化，从而破碎释放内含物。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]这是一种温和的、彻底破碎细胞的较理想的方法。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]3. 反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。[/size][/font][b][font=微软雅黑][size=10.5pt]三、化学破碎法：[/size][/font][/b][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]指利用甲醛、丙酮等有机溶剂或表面活性剂作用于细胞膜，使细胞膜的结构遭到破坏或透性发生改变[/font] [font=微软雅黑]。[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（[/font]SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏。浓度一般为1mg/ml。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]四、酶学破碎法[/font] [font=微软雅黑]：[/font][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]选用合适的酶，使细胞壁遭到破坏，进而在低渗溶液中将原生质体破碎开来。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt]细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果更好。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]裂解液标准配方[/font]: ：50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 。[/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][font=微软雅黑]综合叙述：无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（[/font]DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力，但不是全部，而且应该在破碎的同时多加几次；另外，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使这些条件都要适合于目的物质的提取。[/size][/font]

匀浆机大致可分为：组织捣碎匀浆机，可调高速分散器（匀浆机）、固体样品粉碎机。组织捣碎匀浆机广泛应用于科研，医疗，化工制药，食品工业等领域，物料在匀浆杯中通过电机旋转驱动旋刀同时进行劈裂，碾碎，掺和等过程，是物料搅拌捣碎的过程。可调高速匀浆机是科研单位，大专院校，医药工业，农业，环境卫生，森林保护等部门实验室进行细碎，匀化，分散，强烈搅拌，润温，溶解有机物或无机物等的理想设备。 采用高速串激电机，稳定的硅控调节系统，操作较简单。固体样品粉碎机适用于工业，农业，厂矿，医药卫生，煤炭地质等科研单位。可以对各种植物，土壤，矿石，矿物质以及各种粮食进行粉碎处理。

用QE做组织的非靶向代谢组学，由于五一假期不能使用仪器，所以只能放假前进正离子，放完假后进负离子，想问一下组织匀浆后放在 -80冰箱可以保存多久啊，或者可不可以都匀浆取上清吹干后放在-80啊

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质[/color][/url]处理前，组织匀浆需要加什么溶液呢？加水和甲醇是否就可以了，然后超声离心过滤。

我用QuEChERS法，先用食品加工器将蔬菜打为浆状，再加入乙腈以及其他的药品，在上离心机之前要用到匀浆机，实验室没有，可以用超声波细胞粉碎仪代替吗？

1、高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度http://www.39kf.com/Txt2Img/ju.png此法适用于动物内脏组织、植物肉质http://www.39kf.com/Txt2Img/named.png子等。　　2、玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机http://www.39kf.com/Txt2Img/iuy87612.png高，适用于量少和动物脏器组织。　　3、超声波处理法：用http://www.39kf.com/Txt2Img/2008-9-13.png定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法http://www.39kf.com/Txt2Img/kmmn675.png适用于微生物材料，用http://www.39kf.com/Txt2Img/datu.png肠杆菌制备各种酶，常选用50-100毫克菌体/毫升浓度，在1KG至10KG频率下处理10-15分钟，此法的缺点是在处理过程会产生大量的热，应采取相应降温措施。对超声波敏感和核酸应慎用。　　4、反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构破碎。　　5、化学处理法：有些动物细胞，例如肿瘤细胞可采用十二烷基磺酸钠（SDS）、去氧胆酸钠等细胞膜破坏，细菌细胞壁较厚，可采用溶菌酶处理效果http://www.39kf.com/Txt2Img/877667jkdkk.png好。　　　　无论用哪一种方法破碎组织细胞，都会使细胞内蛋白质或核酸水解酶释放到溶液中，使大分子生物降解，导致天然物质量的减少，加入二异丙基氟磷酸（DFP）可以抑制或减慢自溶作用；加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性，加入苯甲磺酰氟化物（PMSF）也能清除蛋白水解酥活力，但不是全部，还可通过选择pH、温度或离子强度等，使http://www.39kf.com/Txt2Img/jsdh766289sdmkxu.png些条件都要适合于目的物质的提取。

实验用搅碎机和匀浆器哪个厂家的好用啊。希望大家推荐下 方便的话发张图片看卡看

用QE做组织的非靶向代谢组学，由于五一假期不能使用仪器，所以只能放假前进正离子模式，假期过后进负离子模式，想问一下组织匀浆液放在-80冰箱可以放多久啊？或者取一定体积上清吹干后放在-80能放多久呢

随着重组DNA技术得到广泛应用以来，生物技术发生了质的飞跃。很多基因工程产物都是胞内物质，必须将细胞破壁，使产物得以释放，才能进一步提取，因此细胞破碎是提取胞内产物的关键步骤，破碎方法的得当与否，直接影响到所提取产品的产量、质量和生产成本。现将近年来常用的几种细胞破碎方法介绍一下。 　　1. 高压匀浆法 　　设备是高压匀浆器，它由高压泵和匀浆间组成，美国Microfluidics公司和ATS公司均有产品出售。其破碎机理：细胞在一系列过程中经历了高速造成的剪刀，碰撞以及由高压到常压的变化从而造成细胞的破碎。 　　存在的问题；较易造成堵塞的团状或丝状真菌，较小的革兰氏阳性首以及有些亚细胞器，质地坚硬，易损伤匀浆阀，也不适合用该法处理。 　　2. 高速珠磨法 　　设备是珠后机，瑞士WBC公司和德国西门子机械公司均制造各种型号的珠磨机，其破碎机下：微生物细胞悬浮液与极细的研磨剂在搅拌浆作用下充分混合，珠子之间以及珠子和细胞之间和互相剪切、碰撞，促使细胞壁破碎，释出内含物，在珠波分离器的协助下，珠子被滞留在破碎室内，浆液流出，从而实现连续操作，破碎中，生的热量由夹套中的冷却液带走。 　　存在的问题：操作参数多，一般赁经验估计并且珠子之间的液体损失30％左右。 　　3. 超声破碎 　　频高于15-20KHz的超声波在高强度声能输入下可以进行细胞破碎。其破碎机理：可能与空化现象引起的冲击波和剪切力有关。超声破碎的效率与声频、声能、处理时间、细胞浓度及首种类型等因素有关。 　　存在问题；超声波破碎在实验室规模应用较普遍，处理少量样品时操作简便，液量损失少，但是超声波产生的化学自由基团能使某些敏感性活性物质变性失活。而且大容量装置声能传递，散热均有困难。 　　4. 酶溶法 　　就是用生物酶将细胞壁和细胞腊消化溶解的方法。常用的溶酶有溶菌酶β-1．3-葡聚糖酶、蛋白酶等。 　　存在的问题；易造成产物抑制作用，这可能是导致胞内物质释放率低的一个重要因素。而且溶酶价格高，限制了大规模利用。若回收溶酶，则又增加百分离纯化溶酶的操作。另外酶港法通用性差，不同菌种需选择不同的酶。 　　5. 化学渗透法 　　某些有机溶剂（如苯、甲苯）、抗生素、表面活性剂、金属螯合剂、变性剂等化学药品都可以改变细胞壁或膜的通透性从而使内合物有选择地渗透出来。其作用机理；化学渗透取决于化学试剂的类型以及细胞壁和膜的结构与组成。 　　存在的问题；时间长，效率低；化学试剂毒性较强，同时对产物也有毒害作用，进一步分离时需要用透析等方法除去这些试剂；通用性差：某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。 　　本文介绍了几种细胞破碎的方法，可谓各有千秋，在实际应用中，应尽量考虑全面，选择最科学、有效的方法。

空白组的组织匀浆液一次也用不完，请教各位大佬，组织匀浆液用冰箱冷冻能保存多久呀？直接冷冻组织用的时候解冻匀浆好还是先匀浆再冷冻的好呀？求解答

[color=gray]都说“生物是新世纪的朝阳行业”，不知道有多少人和我一样，因此在高考时奋不顾身的报考了生物专业，从此开始了朝（an）气（wu）蓬（tian）勃（ri）的科研狗生涯… 也不知道有多少人在毕业后依然选择了这个方向从业？从毕业到工作十年，时间过的如此之快，让人不禁感慨——我们这些人虽然天天浸泡在EB、聚丙稀酰胺里，五毒不侵，但也天天又是液氮又是干冰，绝对“冻龄”有方…[/color][color=gray]在这里我想简单小结一下“冻龄”的秘密… 其实这也是这些年自己感触最深的一些经验教训，那就是对于每天相处的E.coli也好、Hela细胞也好、果蝇也好、小白鼠也好… 多种多样的生物样本，要想分析过程省力、省心，那提取基因组DNA时的前处理真的是不能小觑。[/color][color=gray]提取的时候，样本所处的环境温度应该尽量低，以保证DNA完整，这样才能确保下游的实验操作的稳定性，例如PCR扩增、限制性酶切等等，免得天天提心吊胆，怕PCR条带不好，酶切切出杂带等等，倒不是怕凝胶回收的麻烦，而是这种品质的DNA往往还会出别的“幺蛾子”，那时候真的叫天天不应叫地地不灵… 老板就算再有钱也是连吃了你的心都有。[/color][color=gray]但矛盾的是，以我们现有的方法去做样本破碎，这个破碎过程本身，无论是研磨还是匀浆，都会因为高速的处理过程而产生热量，导致样本温度升高。那么下面在这里分享一下以往做实验的小结，看看能不能帮到更多人？如果大家有更好的方法也欢迎拍砖：）[/color][b][color=gray]（一） [/color][color=gray]实验室常年备有干冰或液氮：[/color][color=gray]使用液氮：[/color][/b][color=gray]传统方法是使用陶瓷研钵，清洗干净之后灭菌、烘干、冷却，然后倒入液氮先预冷研钵和研磨杵，再放入剪切好的动物或植物组织，补充一些液氮，进行手工研磨。补充液氮后动植物组织内的水分会迅速成冰，如果想研磨成粉，女生会感觉比较费力，所以作者本人已经开始使用仪器的方法研磨，成本很低，也不需要方法验证，如果一个批次要处理很多个体的话会更高效、在提取基因组的时候也可以让第一个样品与最后一个样品的处理结果更加一致。[/color][img=,262,400]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709142130_01_3141229_3.png[/img][color=gray]这种小研磨机实验室有好多，主要因为研磨杯和刀头的材质可以耐受液氮的温度，另外主机的马达有防护隔板，可以用酒精擦拭清洁，就能满足基因组提取的要求了。[/color][color=gray] [/color][b][color=gray]使用干冰：[/color][/b][color=gray]干冰的话也是比较方便的，因为不想液氮那样要稍微等待挥发，干冰是可以伴随样品一起研磨的。如果用研钵的话就会很费力了，依然可以采用仪器的方法——[/color][img=,690,611]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709142131_01_3141229_3.png[/img][color=gray]这台研磨机我们实验室现在只有一台，一般都是拿来做野外回来的比较珍贵的样品。因为研磨杯有一次性的，这样不用担心样品间有痕量的交叉污染，还可以作为容器把剩下来的样本保存在冰箱里。如果需要提RNA，也可以用DEPC浸泡之后上高温蒸汽然灭菌后再烘干。[/color][color=gray] [/color][b][color=gray]（二）[/color][color=gray]不使用干冰或液氮，低温破碎：[/color][color=gray]低温下的匀浆：[/color][/b][color=gray]① [/color][color=gray]可以在样品容器外加上冰水浴，保持样品的低温。[/color][color=gray]② [/color][color=gray] [/color][color=gray]对于温度敏感的样品，在匀浆过程中，建议采用与分散时间（30秒~1分钟）等长的冷却时间，这样可以极为显著地控制液体温度，然后视样品特性，可重复1次或多次；例如：样品保存温度在6~7℃以下，匀浆破碎使用10000 rpm ，1 min，冷却 1 min，此时样品已得到充分分散，同时样品温度几乎维持不变。[/color][color=gray]③ [/color][color=gray]常见样品分散时间无需过长，匀浆后继续分散对大部分样品来说没有帮助。[/color][b][color=gray]低温下的研磨：[/color][/b][color=gray]可以选择机身带有夹层的分析研磨机，研磨室不需要很大，以免浪费样品。开始处理样本前就可先通入3℃冷却水，这样在没有其它物质接触样品的情况下同样可以维持研磨室内的低温环境。[/color][color=gray] [/color][b][color=gray]（三） [/color][color=gray]不使用干冰或液氮，常温裂解液裂解：[/color][/b][color=gray]有裂解液的情况下，一般用恒温水浴孵育就可以了，中间间歇振荡一下，帮助样本裂解，但消化时间一般也比较长。有一段时间我天天做小白鼠的“大屠杀”，对比不同组织用同一种试剂盒的提取效果，但小白鼠只有肝脏是比较好做的，脾脏、心脏多筋膜，脑部组织又多油脂，需要不同的手法来处理，孵育时间不一样，但又要尽量统筹所有样品在一个时间段内完成，避免步骤之间的时间差影响结果，所以就借用了师姐她们的“神器”，预设几个程序，免得出错，对于有筋膜的就用正反转，对于有油脂的就用低转速的方法，拿来塞上玻璃球做球墨也是好的，总之黑猫白猫能解决问题就是好猫了。[/color][color=#008000][img=,600,600]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/09/201709142132_01_3141229_3.png[/img][/color]

我们做农残检测，样品前处理需要均质匀浆，按761方法，称取粉碎后的样品25克加入乙腈50毫升于150ml三角瓶中，用匀浆机进行匀浆，却发现匀浆机刀头过短，而刀头接触不到液面，而无法进行匀浆。拆开匀浆机刀头看，刀头长并是固定的，而无法伸长。后又咨询专家，都说国产的匀浆机刀头都较短，除非购买进口的。请问有何好的办法可以解决此问题。

生理盐水处理过的组织匀浆，乙酸乙酯涡旋离心之后，能直接做液质联用吗？