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冷冻显微切片载物台

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  • 关于冷冻切片机

    冷冻切片机 仪器价格： 12万元 购置日期：2001年 仪器所在地：中医肝病研究所实验室 联 系 人： 顾宏图 联系电话： 51322444 收费标准： 暂未定 开放时间： 8：00～17：00 仪器简介： 徕卡CM1850是应用于组织学和临床组织病理学的一种快速低温恒冷切片机，它是将切片机置于冷冻室以外的低温恒冷切片机。CM1850的特色之一是具有宽敞的冷冻室，快速冷冻室可同时存放多达10个样品，并和一个可持续冷却的吸热器相连，以保证样品托上的样品快速冷却。切片刀温度可冷却到-35℃，样本可以快速冷冻到-40℃。切片机有狭槽盖防护，避免残渣进入机器内部。增强绝热性能（真空面板）及温度控制系统，减低压缩机运作费用及提高耐用性，比传统绝热系统使用寿命长，可以保证冷冻箱温度，例如：在35℃室温保持-35℃。同时可以做到电脑诊断维护。高质量无焊接缝的不锈钢冷冻室表面光滑利于清洁和防止污染。切片机配备双速马达驱动粗进，控制键布置在左方靠手，符合人工学原理。具备自动及人工除霜功能。独特设计的玻璃反卷板可保证连续的切片。切片机具备方便的调节功能，可快速及精确对样本切片定位。切片机推进系统运作平稳、流畅，切片厚度为1～60μm，切片精度可达1μm，最大样品直径55mm。 应用范围 可提供各种冰冻切片服务。 目前应用于： 1. 为快速病理诊断提供冰冻切片。已成为癌症诊断的重要工具。 2. 细胞学：显示脂肪、脂类以及特种组织成份。 3. 免疫细胞化学、免疫组织化学和分子生物学技术等研究工作。 4. 神经生物学研究。 5. 常规组织胚胎学研究。 6. 皮肤病理学研究。 7. 动脉血管外科学研究。 同类仪器情况 ： 中药研究所: SPOCTRA MXA190 2002年 倪跃元 解剖实验室： LION 1998年 余安胜 张建华

  • 【讨论】各位大虾，急求可以做冷冻切片的电镜组

    各位大虾，急求可以做冷冻切片的电镜组已经找过上海医学院和第二军医大学,前者要1000块一个样品,也不能马上做,后者不肯做我们的材料样品想问问在上海还有什么地方可以做材料的冷冻切片,最低温度可以到多少,效果如何大家有没有什么推荐的

  • 【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    最近一直在摸索着用高压冷冻和冷冻替代样品制备技术，刚开始做的时候冰晶特别严重，如下图Hela细胞。冰晶已经把细胞超微结构破坏的不行了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231539_611900_2423894_3.jpg经过很长时间的摸索，得到以下制样方法：1 取样1.1 培养细胞：取适量的细胞悬浮液，低速离心成细胞团，去上清，细胞团呈米糊状，用移液枪取适量细胞，填满Carrier，加入适量冷冻保护液1-Hexadecene，滤纸吸取多余水分，使冷冻保护液液面略高于Carrier（Carrier用丙酮清洗，然后在空气中晾干，用1-Hexadecene浸泡备用）。1.2 小鼠肝脏：从活体上取出的组织，先用锋利的刀片在低温下切成尽可能薄片状，从中挑选合适的部分切下来，然后装入Carrier，加入适量冷冻保护液1-Hexadecene，滤纸吸取多余水分，使冷冻保护液液面略高于Carrier。2高压冷冻高压冷冻仪在使用前，要先做一些准备工作：要先加入足够的液氮，并加入压力液甲基环己烷，然后用空载的carrier高压冷冻三次，保证高压冷冻仪在最佳工作状态。2.1 将上述装有样品的carrier快速安置到高压冷冻仪，准备高压冷冻。2.2 高压冷冻样品，迅速把样品冷冻下来，并做好记录。通过高压冷冻仪冷冻样品后产生的冷冻速度和压力变化曲线，可以选择冷冻效果较好的样品继续下面实验。2.3 转移样品，首先把现配的替代液1%锇酸（0.5g锇酸溶于50mL丙酮）分装到2mL冻存管中，迅速放入液氮冷冻备用，冷冻过程中保持冷冻管直立。与此同时，冷冻替代仪加满液氮，将自制的冻存管架放入样品腔，预冷至-100℃。用预冷的镊子，在液氮下将Carrier分别装入冻存管，冻存管盖不宜拧的过紧，然后迅速转移到冷冻替代仪样品腔室的冻存管架里。3 冷冻替代 步骤 温度 时间 1 -100℃ -90℃ 4h 2 -90℃ 72h 3 -90℃ -60℃ 8h 4 -60℃ 8h 5 -60℃ -30℃ 4h 6 -30℃ 8h 7 -30℃ -20℃ 2h 8 -20℃ 8h 9 -20℃ 4℃ 2h 10 4℃ 1h 温度达到4℃后，用4℃的丙酮浸洗样品3次，每次15分钟。此过程中，会有部分样品与Carrier分离，若还有没分离的可以用解剖针将样品从Carrier中剥离。4 渗透包埋分别用以下渗透液渗透。 步骤 渗透液 浓度 时间 1 Epon812/丙酮 1:1 1.5-2h 2 Epon812/丙酮 3:1 6-12h 3 Epon812 100% 1h 4 Epon812 100% 8h 5 Epon812 100% 1h然后将样品转移至包埋槽，60℃烘箱聚合48h。5 超薄切片把两种生物样品对应的每一个包埋块分别超薄切片，各捞两个铜网，并染色。6 电镜观察观察细胞内超微结构保存情况，对感兴趣区域拍照。终于有所改善，如下图的小鼠肝脏细胞，轮廓十分清楚，结构保存完好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611895_2423894_3.jpg局部放大后观察，能看见核孔，双层核膜，甚至是膜的磷脂双分子层结构（这是在常规化学固定制样中很难看到的），看到这些让人激动不已。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611894_2423894_3.jpg碰巧看见一个正在分裂的线粒体。线粒体脊很清楚，双层膜紧挨着，不像常规制样间隙那么大。另外，线粒体基质保存完好，所以线粒体整体较细胞基质反差大。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611893_2423894_3.jpg以下是常规化学固定制样的结果，可与上面高压冷冻及冷冻替代制样技术结果对比：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231644_611928_2423894_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609

  • 紧急求助：谁知道国内哪家单位有“冷冻电子显微镜”？？？

    我主要是想观察一下纳米颗粒在高分子树脂体系里的分布状态，还有加入纳米颗粒前后分子间氢键变化的情况！谁知道国内哪家单位有“冷冻电子显微镜”？？？最好是能够对外单位开放的，先在这里谢过了！！！问题：冷冻电子显微镜与扫描电镜的区别在何处？ 答：冷冻电镜是透射电镜，看物体内的具体结构；而扫描电镜是利用探针扫描，对大分子不能扫到分子内部，而是表面形貌，不可能是分子内部的结构。如果是研究原子水平，没有问题。但一旦涉及到大分子，就要出现问题了。

  • 低温冷冻设备不同的载冷剂优缺点说明

    低温冷冻设备常用于不同环境工业冷处理环境中，不同温度段的低温冷冻设备所采用的载冷剂也是不同，那么，不同的载冷剂有什么优缺点呢？低温冷冻设备的载冷剂先在蒸发器处被冷却，获得冷量，然后被泵输送到需要冷量的各个地方，吸收热量之后又回到蒸发器再被冷却，如此循环往复，以达到连续供冷的目的，其中，常用的载冷剂有水、盐水、乙二醇、丙二醇、二氯甲烷、三氯乙烯等，使用比较多的还是水。低温冷冻设备采用水作为载冷剂的话，适合温度0度以上的制冷系统，因为水具有比热大、密度小、对低温冷冻设备组和管道腐蚀性小、不燃烧、不爆炸、化学稳定性好、价廉易得，但是由于冰点高，仅能运用在0℃以上的制冷系统，所以载冷剂水适用于制冷温度在0℃以上的场合。其次，低温冷冻设备的载冷剂-盐水可以降低凝固点温度，使低温冷冻设备载冷范围变大，常用做载冷剂的盐水有氯化钠水溶液和氯化钙水溶液，它们适用于中、低温冷冻设备制冷系统，但需要注意盐水可能对低温冷冻设备及管道具有腐蚀性。应用范围：可用于盐水制冰机和间接冷却的冷藏装置，或冷却袋装食品。还有载冷剂-乙二醇和丙二醇使用率也是可以，这两种载冷剂凝固点低，性质稳定，与水混溶，使用的温度范围广，价格便宜，热容量较大，但是，低温下溶液的粘度上升非常迅速，具有腐蚀性，一般用-乙二醇和丙二醇的水溶液作为载冷剂，适用的温度范围为0～-50℃。当然，载冷剂中的二氯甲烷和三氯乙烯也有使用到的，一般用它们的液体作为载冷剂，凝固点低，但是，他们的缺点比较明显，挥发性高，沸点低，损失大，具有腐蚀性，一般用它们的液体作为载冷剂，适用温度范围为-50～-100℃。低温冷冻设备除了上述的载冷剂之外，乙醇、丙三醇等水溶液也可以作为载冷剂使用，一般选择可按照客户需求的型号温度来选择合适的。

  • 石蜡切片与冷冻切片的区别

    1、从一抗的选择方面来看。有的一抗既能做石蜡切片又能做冰冻切片，而有的一抗只能做冰冻切片，关键取决于所要检测的抗原稳定性，有的抗原不稳定，经过组 织固定，脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等一系列的做石蜡切片的步骤，所检测的抗原易被破坏，这时只能用冰冻切片来做，检测这类抗原的一抗只能做冰冻切片， 而那些稳定的抗原，能经受住石蜡切片的的考验，一般来讲也可以用冰冻切片来做，总得来讲，对于既可以用冰冻切片也可以用石蜡切片检测的抗原，用石蜡切片检 测的染色效果要比冰冻切片好一些。2、从研究目的来看。石蜡切片对组织细胞的定位很准确，而长期冻存组织的冰冻切片可能因冰晶的形成破坏组织细胞形态的结构，并造成抗原的弥散，从而定位不准确。3、从抗原的保真性来看。冰冻切片对抗原的保真很好，而石蜡切片在组织固定，脱水、透明、浸蜡、包埋、脱蜡等过程中可能会对抗原的性质造成影响。4、从操作步骤的繁琐程度看。染色过程冰冻切片简单，而石蜡切片要求脱蜡入水、抗原修复等过程，比较繁琐。5、总之，石蜡切片对标本的长期保存较合适，且组织细胞形态结构保持好；而冰冻切片适合对新鲜组织的制片，然后立即固定、染色效果较好，且免疫荧光中可以相对避免石蜡自发荧光的干扰

  • 冷冻光电关联：让原位微观生命过程可视化

    冷冻光电关联：让原位微观生命过程可视化

    结构生物学是用物理学方法在原子水平阐明生物大分子的三维结构，进而诠释生物大分子的生物学功能及其分子机制的科学。近几年，冷冻电镜在生物物理，特别是结构生物学领域掀起了一轮新的革命。冷冻电镜技术包括单颗粒技术和原位冷冻电镜技术，2017年单颗粒技术已获得诺贝尔奖，放眼未来，冷冻电镜更多的是要应用于获取细胞和组织样品的原位信息，尤其是利用冷冻电镜电子断层扫描成像技术（Cryo-ET）获得三维图像，将细胞内的生命过程可视化，在原位对生物大分子的结构进行解析，并进一步分析其与所处周围环境之间的相互作用关系，进而阐明其发挥功能的分子机制。蛋白质聚集是许多神经退行性疾病的典型症状，包括帕金森病（Parkinson’sdisease）、亨廷顿病（Huntington’sdisease）、以及肌萎缩侧索硬化症（amyotrophiclateral sclerosis）等，至今为止还没有针对这类疾病的有效治疗方案，因此了解这类疾病的致病机理尤为重要。在细胞内表达这些疾病相关的蛋白会导致细胞毒性以及形成大的胞内包涵体，然而这些包涵体的具体致病机理还不清楚，而且这些包涵体的组成以及其精细的细胞原位结构信息也无人知晓。为了回答这一科学问题，德国马克斯普朗克生物化学研究所Baumeister教授组的研究人员利用先进的冷冻电镜光电关联技术（Cryo-CLEM）、冷冻聚焦离子束切割技术（Cryo-FIB）、以及冷冻电子断层扫描三维重构技术（Cryo-ET），在小鼠原代神经细胞原位解析了亨廷顿基因1号外显子中衍生的多聚谷氨酰胺（polyQ）所形成的包涵体及其微环境的原位精细结构，相关结果发表在2017年9月的Cell杂志。他们发现polyQ包涵体是由淀粉样肽的纤维构成，与细胞的内膜系统特别是内质网相互作用，使内质网膜发生形变并扰乱其组成，还改变了包涵体周围的内质网膜的动态性。该研究结果暗示淀粉样肽的纤维和内质网的异常相互作用导致了蛋白质聚集物所产生的细胞毒性。[align=center][img=,690,424]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271518599236_8463_3224499_3.jpg!w690x424.jpg[/img][/align]2018年3月，该研究组在PNAS杂志发表在酵母系统内的polyQ原位分子的结构解析，他们发现在酵母细胞内polyQ蛋白聚集体形成了无定形的包涵体以及少量的纤维丝，并使线粒体和脂滴的形态发生变形。对比这两种不同的机体系统下的差异，我们可以看到同样的polyQ蛋白聚集体在不同的环境中采用了不同的构像并利用特定的机制来靶向不同的细胞结构，从而产生细胞毒性。[align=center][img=,690,770]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519325828_4209_3224499_3.jpg!w690x770.jpg[/img][/align]另外，2018年2月的Cell杂志报道了该研究组在大鼠神经细胞原位解析了一种重复短肽（poly-GA）蛋白聚集体及其微环境的结构，不同于polyQ形成的纤维状结构，poly-GA聚集体是由平面扭曲的长短不一的丝带状结构组成。poly-GA聚集体大量募集了26S蛋白酶体复合物，而其他生物大分子如核糖体或分子伴侣却被排除在聚集体外部。与poly-GA的直接相互作用使蛋白酶体处于失活状态，虽然在整体水平上细胞内的蛋白酶体表达量没有变化，但有功能的蛋白酶体的数量大幅减少，揭示了蛋白质聚集物所产生细胞毒性的另一原因。[align=center][img=,690,378]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/11/201811271519469883_8555_3224499_3.jpg!w690x378.jpg[/img][/align]Baumeister教授组是Cryo-CLEM、Cryo-FIB以及Cryo-ET等关键技术方法发展的开拓者和领航者。Cryo-CLEM-FIB-ET即是在整个细胞内定位荧光标记的特定目标分子，观察其动态变化并在感兴趣的时刻进行快速冷冻，然后转移到冷冻扫描电镜利用冷冻聚焦离子束进行光电关联匹配，精确定位目标分子位置并进行聚焦离子束切割产生一层100-200nm厚的切片，最后利用冷冻电子断层扫描成像从原子分辨率上解析其未被破坏的天然原位结构信息。目前冷冻光电关联的一大瓶颈是光镜的分辨率较低，虽然超分辨光电关联技术在飞速发展，但是其缺点如高强度激光照射可能使样品升温，成像速度慢等还需要一一克服。超分辨光电关联令人振奋的一大潜在应用是来精确指导冷冻聚焦离子束切割，使得大的细胞样品中的任何感兴趣目标分子都能被精确定位切割，进而进行高分辨率数据收集。另外，随着技术进一步发展，用高电子密度标签来标记目标分子并在电镜下直接成像也将会成为可能。结构生物学的终极目标是了解细胞生命过程中每一个分子的结构、功能以及它们之间的相互作用，Cryo-CLEM-FIB-ET则是在结构生物学与细胞生物学之间架起的一座桥梁，让细胞内的微观生命动态过程可视化！[b]参考文献[/b]1. Bauerlein,F. J. B., et al. 2017. In Situ Architecture and Cellular Interactions of PolyQInclusions. Cell 171(1): 179-187.2. Guo, Q., etal. 2018. In Situ Structure of Neuronal C9orf72 Poly-GA Aggregates RevealsProteasome Recruitment. Cell 172(4): 696-705.3. Gruber, A.,et al. 2018. Molecular and structural architecture of polyQ aggregates inyeast. Proc Natl Acad Sci U S A. .4. Wolff, G.,et al. 2016. Towards correlative super-resolution fluorescence and electroncryo-microscopy. Biol Cell 108(9): 245-258.Oikonomou, C. M. 2017. Cellular ElectronCryotomography: Toward Structural Biology In Situ. Annu Rev Biochem 20(86):873-896.来源：【生物成像中心】

  • 北京大学冷冻电镜平台正在寻找北大事业编招聘-双束（FIB/SEM）/冷冻电子断层扫描(cryo-ET)技术主管职位,坐标,谈钱不伤感情！

    [b]职位名称：[/b]北大事业编招聘-双束（FIB/SEM）/冷冻电子断层扫描(cryo-ET)技术主管[b]职位描述/要求：[/b]【岗位职责】1、负责平台Cryo-FIB/SEM双束显微镜和冷冻光学显微镜的日常运行及维护；2、培训、协助用户使用Cryo-FIB/SEM双束显微镜和冷冻光学显微镜制备样品；3、辅助相关课题组合作开展光电联用及冷冻电子断层扫描技术路线的研发、优化；4、协助平台管理其他电镜及附属设备。【岗位要求】1、政治立场坚定，具有良好的职业道德，诚实守信，爱岗敬业，工作细心踏实，服务意识和责任心强；2、能够熟练掌握双束显微镜（FIB/SEM）使用，专业不限；3、具有Cryo-FIB冷冻生物样品制备或者电子断层扫描经验者优先；4、具有博士学位，具备较强的语言表达能力，英语水平较好，学术论文写作能力较强 5、热爱仪器管理工作，新技术研发工作，工作积极主动、认真负责，具备良好的团队协作能力。【薪酬福利】此岗位属北京大学事业编人员，可申请副高级职称，可协助申请学校、国家技术创新类基金，可申请学校政策性住房，子女可入学北大附属幼儿园、小学、中学就读，薪资可面议。特别优秀者（比如受过良好的科研训练、有较高的英语或计算机水平）可提供有竞争力的薪酬。[b]公司介绍：[/b] 作为北京大学双一流重点建设项目，北京大学于2015年启动了学校冷冻电镜平台和学科的建设，2017年平台正式运行。平台目前拥有总价值约1.1亿元的电镜和各类样品制备仪器，其中包括2台高端300 kV Titan Krios G3冷冻透射电子显微镜（K2 Gif 相机、相位板）、一台200 kV Talos Arctica（K2相机）冷冻透射电子显微镜。2020年将购置冷冻双束扫描电镜和光电关联显微镜...[url=https://www.instrument.com.cn/job/user/job/position/70076]查看全部[/url]

  • 【推荐讲座】冷冻电镜，ACD软件，低温样品制备技术，想学的，点进来快快报名啦！

    【推荐讲座】冷冻电镜，ACD软件，低温样品制备技术，想学的，点进来快快报名啦！

    [b]免费在线讲座福利来了[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09505.gif[/img]名额有限，越早报名，通过审核的机会越大呦！[b]新上讲座 1：[img]file:///C:/Users/yulp/AppData/Local/Temp/3%7D[ZNM7[JS%7BT~0%4SR(3~GF.gif[/img][b]《[b]ACD软件化合物成药性评价及结构优化[/b]》[/b] 举行时间：2017-09-7 10:00立即免费报名：[/b][url=http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_2903.html][b][/b][/url][url]http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_2714.html[/url][b]主讲人：[/b]闫朝辉[/b]ACD/Labs软件应用工程师。\于2012年担任ACD/Labs应用工程师至今，有丰富的软件应用及结构解析经验。[b]主要内容：[/b][img]file:///C:/Users/yulp/AppData/Local/Temp/@I%7B54YLBIABZ8W%7DU96V9GV4.gif[/img]在药物研发过程中，随着项目的深入，人力财力的投入也急剧增加，实验失败的风险也随之增大。往往新药研发单位在一期临床才进行药物的安全性方面评价及药物在体内的代谢等项目评估，因此也就存在极大的失败风险。如果在早期如药物的发现及筛选阶段即对候选物进行in sillico吸收、分布、代谢、排泄、毒性等方面的预测评估则可以减少后期失败的几率，并帮助研究者聚焦于具有合理成药性的先导物，做出快速、准确的项目决策。本次会议与您探讨利用ACD软件如何进行化合物成药性评价及结构优化。[b]新上讲座 2：[img]file:///C:\Users\yulp\AppData\Local\Temp\3}[ZNM7[JS{T~0%4SR(3~GF.gif[/img][b]《针对流体材料样品的冷冻断裂及真空冷冻传输等Cryo-SEM制样技术》[/b] 举行时间：2017-09-15 10:00立即免费报名：[/b][url=http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_2903.html][b][img]file:///C:/Users/yulp/Documents/Tencent%20Files/2850501230/Image/Group/[R)(F8H3IKU(@43DQ[32YWO.png[/img][img]file:///C:/Users/yulp/AppData/Local/Temp/8LDO48C$8@[GWU0353$FOVS.png[/img][/b][/url][url]http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_2582.html[/url]主讲人：吴长江镜制样应用工程师。徕卡公司工作八年，主要负责电镜制样产品的售后服务培训及售前技术支持，熟悉徕卡电镜制样全套产品线及电子显微镜样品制备流程，多次组织公司内部员工的产品培训及电镜用户技术交流会。致力于为国内电镜用户提供更好更方便的电镜样品制备方案.[b]主要内容：[/b][img]file:///C:/Users/yulp/AppData/Local/Temp/@I%7B54YLBIABZ8W%7DU96V9GV4.gif[/img]利用最新高压冷冻仪ICE实现流体材料的快速无损固定[img]file:///C:/Users/yulp/AppData/Local/Temp/@I%7B54YLBIABZ8W%7DU96V9GV4.gif[/img]利用冷冻断裂仪ACE900对冷冻后样品进行断裂、刻蚀、镀膜暴露其内部信息[img]file:///C:/Users/yulp/AppData/Local/Temp/@I%7B54YLBIABZ8W%7DU96V9GV4.gif[/img]配合冷冻真空传输系统VCT500及SEM冷台，实现流体样品的低温直接观察。[b]新上讲座 3：高压冷冻、冷冻替代与冷冻切片技术举行时间：2017-09-22 14:00立即免费报名：[/b][url]http://www.instrument.com.cn/webinar/meeting_2903.html[/url][b]主讲人：[/b]孙磊 是中科院生物物理所生物成像中心高级工程师，多年从事电镜生物样品制备工作，在该领域中具有全面的技术和丰富的经验，尤其在包含高压冷冻、冷冻替代、冷冻切片等技术在内的低温样品制备技术方面，走在国内前列。[b]主要内容：[/b][color=black]低温制样技术是近年兴起的生物电镜制样技术，它可以更加真实有效的保存生物体内结构，捕捉某些生理变化，与传统化学制样手段相比较，可以获得更丰富真实的生物体超微结构。低温制样技术包括高压冷冻、冷冻替代、冷冻切片等多种，讲座将围绕几种方法介绍原理、技术、实验仪器以及具体的实验技巧[/color][color=black]。[/color][color=black][/color][color=black][/color][color=black][/color][color=#ff6666][b]及时获取会议信息，进行业大群，获最新鲜资讯，生物领域用户请加微信请备注姓名，兴趣领域哟，呵呵哒[/b][/color][img=,100,100]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708231630_01_2507958_3.jpg[/img] [img=,100,92]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/08/201708231632_01_2507958_3.jpg[/img]

  • 微生物菌种的冷冻干燥和低温冷冻保藏技术规程

    1　范围本规程规定了冷冻干燥和低温冷冻保藏技术的定义、原理、技术要求、方法与步骤。本规程适用于普通病毒、细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌及担子菌等微生物菌种的保藏。对于病原微生物及其他需要特殊操作技术的微生物的参见相应的技术规程。2　规范性引用文件下列文件中的条款通过本规范的引用而成为本规范的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本规范，然而，鼓励根据本规范达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本规范。国务院令第424号《病原微生物实验室生物安全管理条例》 GB 19489 实验室生物安全通用要求科技部自然科技资源平台联合管理办公室文件自然科技资源共性描述规范（试行）3　术语和定义下列术语和定义适用于本规范。3.1冷冻干燥 freeze-drying 将微生物冷冻，在减压下利用升华作用除去水分，使细胞的生理活动趋于停止，从而长期维持存活状态。3.2液氮超低温保藏 preservation in liquid nitrogen 液氮超低温保藏技术是将菌种保藏在-196℃的液态氮，或在-150℃的氮气中的长期保藏方法，它的原理是利用微生物在-130℃以下新陈代谢趋于停止而有效地保藏微生物。3.3 -80℃低温冷冻保藏 preservation in -80℃将菌种保藏在[

  • 关于冷冻台的问题

    很抱歉，只有登录用户才能查看完整内容，请您先登录 如不是本网用户，请注册本人今年刚刚参加工作，被安排管理环境扫描电镜，刚熟悉仪器就突然被通知要写仪器功能开发项目，打算在我的环扫上面加一个冷冻台，但是又有点茫然不知道冷冻台都有什么型号和配件，也不清楚还需要在上面附加什么。请各位大神指点下！附上环扫仪器型号。（第一次发帖，什么都不懂...http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09512.gif）环境扫描电镜品牌：FEI型号：Quanta 250 FEG配有冷台、热台（厂家告诉我的，但是我还没找到...）

  • 南科大冷冻电镜中心正式揭牌，将成为中国规模最大的冷冻电镜设施中心

    2018年11月19日，南方科技大学冷冻电镜中心揭牌仪式在南科大生物楼举行。2017年诺贝尔化学奖获得者、冷冻电镜技术开创者之一Richard Hendersen，深圳市发改委副主任蔡羽，南方科技大学校长陈十一，中国科学院院士隋森芳等出席仪式。[align=center][img=1.png]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/b83644de-356d-4e5f-9341-72a1a5e4725a.jpg[/img][/align][align=center]揭牌仪式现场[/align]南科大冷冻电镜中心是深圳市政府出资、我校牵头建设的重大基础科学设施平台，旨在支撑深圳市、粤港澳大湾区及中国南方在生物医药、精准医学、新能源新材料方面的科学研究及产业升级。南科大冷冻电镜实验室拟安装300千伏冷冻电镜6台，200千伏冷冻电镜2台，120千伏电镜2台，共计10台冷冻透射电子显微镜及其它71台/套相关辅助仪器和样品制备设备，全部建成后，将是我国配套最齐全、最先进的冷冻电镜实验室。经过一年多的前期准备工作，目前项目一期的2台300kv冷冻电子显微镜已经完成安装调试，投入使用。冷冻电镜技术改变了许多生物领域的研究方式，使得诸多研究能够快速取得重大突破。冷冻电镜技术已成为结构生物学研究的利器，这项技术克服了生物分子结构解析中的许多难点，被诺贝尔奖官方称为“使得生物化学进入一个新时代”。[align=center][img=2.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/7a1b61e0-a88d-4542-9e00-fb3cdc96a122.jpg[/img][/align][align=center]陈十一致辞[/align]陈十一在仪式上致辞，他代表南科大对与会嘉宾的到来表示欢迎，对深圳市委市政府对南方科技大学冷冻电镜中心的支持表示感谢，同时也对冷冻电镜中心负责人王培毅和工作人员前期的辛勤工作表示肯定。他表示，未来几年，冷冻电镜中心将致力于把基础知识和药物开发结合起来，在深圳的工业发展中扮演重要角色。南科大将以此为契机，秉承和发扬“敢闯敢试、求真务实、改革创新、追求卓越”的创校精神，为深圳市社会和经济的发展继续贡献力量。[align=center][img=3.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/17b55b90-20aa-4b77-85b2-0fddf9d79466.jpg[/img][/align][align=center]Richard Henderson致辞[/align]Richard Henderson在致辞中对南科大冷冻电镜中心的落成表示祝贺，并表示为这个优秀的冷冻电镜中心的建立感到由衷高兴。他指出，南科大冷冻电镜中心落成之后，将会成为全球最大的三个冷冻电镜中心之一，另外两个分别在美国和英国。目前，世界上大概有100个类似的研究机构，南科大冷冻电镜中心落成之后，其研究能力将会达到全球的前5%，对相关科研领域的研究产生更大的影响。[align=center][img=4.jpg]https://img1.17img.cn/17img/images/201811/uepic/524b4e7f-e049-43a5-8cb4-e08283ee6ed4.jpg[/img][/align][align=center]蔡羽致辞[/align]蔡羽表示，南科大冷冻电镜中心是生命科学、新材料、新能源领域基础性、关键性的重大科研设施，填补了深圳市、广东省、中国南方地区在该领域的空白，为我市及地区相关领域内的科学研究及产业升级转型提供了支撑平台，希望冷冻电镜中心为深圳市、粤港澳大湾区的产业升级及进一步经济社会全面发展提供新的动力源泉。随后，冷冻电镜中心负责人王培毅、Richard Henderson、蔡羽、隋森芳共同为南方科技大学冷冻电镜中心揭牌。Thermofisher Scientific亚太区材料与科学事业部总经理Marc Peeters、Thermofisher Scientific公司代表Jonathan Jing、中国航天科工深圳航天工业技术研究院董事长崔玉平、中国国际金融集团董事总经理陈十游也在仪式上致辞。南方科技大学第二附属医院、深圳市第三人民医院院长刘磊，加州大学洛杉矶分校教授周正洪，加州大学旧金山分校教授程亦凡，牛津大学教授章佩君等参加了揭牌仪式。冷冻电镜发展国际研讨会也于同日在南科大图书馆111报告厅举行。

  • 【原创大赛】冷冻食品如何吃？

    [align=left]文/唐三三 （华测检测 食药农化事业部）[/align][align=left]近年来，方便的冷冻食品很受欢迎，特别是忙碌的上班族，更是离不开冷冻食品。市场上销售的冷冻食品的种类很多，有水产类、肉类、蔬菜类、果实及烹调食品等。此外，由于冷冻设备的普及，在家庭中也可用冷冻方法保存食品。随着人们食用冷冻食品的增多，[color=#3c3c3c]很多人出现了这样的困惑，冷冻食品如鸡、鸭、鱼、肉、速冻蔬菜等，解冻后一时吃不完，能不能放回冰箱重新冷冻呢？食品解冻后多长时间内必须吃完？如何正确地解冻食品？本文就这些问题来探讨一下。[/color][/align][align=left][color=#3c3c3c][/color][b]1 解冻食品再次冷冻的弊病[/b]虽然有些人知道解冻食品不能再次冷冻，但[color=#333333]却因为舍不得浪费选择再次冷冻。生活中[/color]经常发生的是人们从电冰箱里取出的冷冻食品或者从市场上购回的冷冻食品, 如冻鱼、冻肉、冻虾、冻禽等, 解冻后一时食用不完又重新放入电冰箱里再次冷冻贮藏。实际上这种做法存在着很多弊病。1.1 降低食品的新鲜程度和营养成分当冻鱼、冻肉等食品从低温的冷冻状态恢复到冰点以上的解冻状态, 其细胞膜遭受到较为严重的损伤, 细胞液大量流失。因此, 重新再冷冻的食品, 其新鲜程度就较原来状态有较大幅度的下降, 营养成分损失较多, 影响食品原有的鲜度和风味。维生素可作为评价冷冻食品营养价值的指标，冷冻食品在冻结中的维生素损失可出现在以下几种情况：在冻结前的热处理过程中水榕性维生素的损失；冻结温度不适当时会造成V c 的损失；长时间的冻结贮藏引起B 族维生素残存率降低。若冻结前的处理、冻结温度、保存方法适当，可以将冻结中维生素损失降低至最小。合适的食品保存法，不仅能安全地保存食品，还能保持食品的营养价值。通常，冷冻食品使用一般的解冻方法，在解冻时常有汁液流失，可溶性营养成分溶解于汁液中，水溶性维生素不可避免地遭到损失，这是冷冻食品在解冻中难以解决的问题。1.2 缩短食品的保存期限食物解冻之后再速冻会促进细菌的繁殖。食物处于冷冻状态的时候，细菌也处于休眠状态。一旦解冻的时候温度慢慢回升，细菌就疯狂繁殖，这时候即使再次速冻，也需要一段时间才能达到凝固状态，这个时间差之内，细菌的数量都不知道翻了多少倍了。由于经过冷冻和解冻的食品细胞膜遭受到损坏，导致汁液流失，温度回升后为细菌和霉菌的生长繁殖提供了良好的环境，食品容易腐败变质。因此, 每解冻一次再重新冷冻, 食品的保存期限就将缩短数天, 即无形中影响了食品应有的保质期。1.3影响人的健康解冻后的食品容易受到细菌和霉菌的污染。据有关医学部门的研究资料表明，食品的再次冻、解冻、特别是肉类反复多次的冷冻、解冻，还容易产生致癌物质。重新冷冻的次数越多，生产的致癌物质的浓度相应就越高，对人体健康的影响也越大。这方面应该引起人们足够的重视和关注。[/align][align=left][b]2 冷冻食品一经解冻要尽快食用[/b]冷冻食品一经解冻要尽快加工食用，不宜存放。如果在常温下存放时间太长，食物很容易变质，还可能引起食物中毒。2.1 冷冻蔬菜冷冻蔬菜存放时间太长，不仅会变色、损失营养、品质下降，也很容易腐烂变质。尤其是在热天，冷冻过的蔬菜，更不宜存放，否则绿叶蔬菜很快会变黄，维生素C也易被破坏。蔬菜放在20℃温度下，比放在6～8℃的温度下，维生素C的分解损失要多2倍。2.2 冷冻肉类一般肉类最容易产生反复速冻的问题。其实我们可以很直观地看到肉类解冻再速冻新鲜程度的降低和营养成分的流失。食品在第一次冷冻的时候，就被挥发了很多水分，解冻的时候又从外吸收一些水分，如果再次速冻，水分又产生循环。肉质在很大程度上已经产生了损伤，味道也会有所改变。其实我们稍微留意一下就会注意到，速冻次数越多的肉，颜色就更惨白，味道更怪异。冷冻的猪肉、鱼、鸡、鸭等肉类，在冷冻时由于水分结晶的作用，其组织细胞便受到破坏。一经解冻，被破坏的组织细胞中，会渗出大量的蛋白质，就成了细菌繁殖的养料。如果存放时间太长，食品里的细菌和酶的活力恢复后，不仅能很快繁殖分解蛋白质引起变质，还能产生有毒的组胺物质，引起食物中毒。有实验表明，将经冷冻1天的鱼，放在30℃温度下6小时，其腐败速度要比鲜鱼快1倍。2.3 冷冻鸡蛋将冷冻的鲜鸡蛋解冻后，放在0～15℃温度下达10天以上，不但卵膜变松、蛋清稀薄，而且还会粘壳、散黄，甚至霉变、发臭，不能食用。将解冻的蛋黄放在18℃温度下2小时，细菌数增加的速度比新鲜鸡蛋黄要快约2倍。[/align][align=left][b]3 正确的解冻方法[/b]1）不要在解冻肉类、鱼类和海鲜的时候，将其放入温水中解冻。一旦接触到温暖的环境，细菌滋生的速度将提高很多倍，所以在解冻的时候最好是让它在常温下自行解冻；2）当你用微波炉对肉类和鱼类进行解冻后，就不要再次冷藏了，否则肉质的口感将会完全丧失。比如鱼肉会变得非常易碎，就像是生面粉一样；3）当塑料包装的食品放在冷水里解冻后，如果解冻时间超过30分钟，最好不要再次冷藏。因为这可能会破坏食物的组织，导致营养流失。其中牛肉最为明显，经过二次解冻后，牛肉会明显出现肉质变老的情况，很难将其炖软；4）对于熟食来说，最好是在半小时内进行再次冷藏，否则冷藏的过程中就会有变质的风险。其实熟食最好不要冷藏，因为大部分的熟食在烹饪的时候仅仅只是加热而已，所以一旦感染细菌，通常是无法彻底消灭的。熟食还是当天吃当天买，吃多少买多少，这样比较安全。因此, 为了便于食品的冷冻和取存，提高食品的冷冻质量，平时生活中可采用补救措施，在冷冻之前，将食物分成一小份一小份的，且以小包装形式包装、冷冻，这样每次食用多少就可取出多少，不宜解冻之后重新再放入冰箱里冷冻贮藏。不过，还要提醒一下，即使是未解冻的冷冻食物，放太久也绝不是一件好事，因为它会影响食物的营养价值。有媒体报道过，一般冷冻的肉最好一个月左右食用完毕，冷冻时间太久的肉通常细菌都已经全面超标，甚至开始变质。[/align]

  • 透射电子显微镜生物样品制备技术介绍

    基本要求是：①尽可能保持材料的结构和某些化学成分生活时的状态;②材料的厚度一般不宜超过1000埃。组织和细胞，必须制成薄切片以获得较好的分辨率和足够的反差;③采用各种手段，如电子染色、投影、负染色等来提高生物样品散射电子的能力，以获得反差较好的图像。　　样品制备的方法随生物材料的类型以及研究目的而各有不同。对生物组织和细胞等，一般多用超薄切片技术，将大尺寸材料制成适当大小的超薄切片，并且利用电子染色、细胞化学、免疫标记及放射自显影等方法显示各种超微结构、各种化学物质的部位及其变化。对生物大分子(蛋白质、核酸)、细菌、病毒和分离的细胞器等颗粒材料,常用投影、负染色等技术以提高反差,显示颗粒的形态和微细结构。此外还有以冷冻固定为基础的冷冻断裂──冰冻蚀刻、冷冻置换、冷冻干燥等技术。　　一、超薄切片术　　将小块生物材料，用液态树脂单体浸透和包埋，并固化成塑料块，后用超薄切片机切成厚度为500埃左右,甚至只有50埃的超薄切片。超薄切片的制备程序与光学显微镜的切片程序类似，但各步骤的要求以及所使用的试剂和操作方法有很大差别。　　1、固定　　选用适宜的物理或化学的方法迅速杀死组织和细胞,力求保持组织和细胞的正常结构,并使其中各种物质的变化尽可能减小。固定能提高细胞承受包埋、切片、染色以及电子束轰击的能力。主要固定方法有：　　①　快速冷冻，用致冷剂(如液氮、液体氟利昂、液体丙烷等)或其他方法使生物材料急剧冷冻，使组织和细胞中的水只能冻结成体积极小的冰晶甚至无定形的冰──玻璃态。这样，细胞结构不致被冰晶破坏，生物大分子可保持天然构型，酶及抗原等能保存其生物活性，可溶性化学成分(如小分子有机物和无机离子)也不致流失或移位。用冷冻的组织块，可进行切片、冷冻断裂、冷冻干燥和冷冻置换等处理。用此法固定的样品既可提供组织、细胞结构的形态学信息，又可提供相关的细胞化学信息。②化学固定，固定剂有凝聚型和非凝聚型两种，前者如光学显微术中常用的乙醇、二氯化汞等，此法常使大多数蛋白质凝聚成固体,结构发生重大变化,常导致细胞的细微结构出现畸变。非凝聚型固定剂包括戊二醛、丙烯醛和甲醛等醛类固定剂和四氧化锇，四氧化钼等，适用于电子显微。它们对蛋白质有较强的交联作用,可以稳定大部分蛋白质而不使之凝聚,避免了过分的结构畸变。它们与细胞蛋白质有较强的化学亲和力，固定处理后，固定剂成为被固定的蛋白质的一部分。如用含有重金属元素的固定剂四氧化锇(也是良好的电子染色剂)进行固定，因为锇与蛋白质结合，增强了散射电子的能力，提高了细胞结构的反差。采用一种以上固定剂的多重固定方法，如采用戊二醛和四氧化锇的双固定法，能较有效地减少细胞成分的损失。此外，固定剂溶液的浓度、pH及所用的缓冲剂类型、渗透压、固定时间和温度等对固定效果都有不同程度的影响。　　固定操作方法通常是先将材料切成 1立方毫米左右小块，浸在固定液中，保持一定温度(通常为4℃),进行一定时间的固定反应。取材操作要以尽可能快的速度进行，以减少组织自溶作用造成的结构破坏。对某些难以固定的特殊组织，如脑、脊髓等，最好使用血管灌注方法固定，即通过血管向组织内灌注固定液，使固定液在组织发生缺氧症或解剖造成损伤之前，快速而均匀地渗透到组织的所有部分。灌注固定的效果比浸没固定好得多。　　2、脱水　　化学固定后，将材料浸于乙醇、丙酮等有机溶剂中以除去组织的游离水。为避免组织收缩，所用溶剂需从低浓度逐步提高到纯有机溶剂，逐级脱水。　　3、浸透　　脱水之后，用适当的树脂单体与硬化剂的混合物即包埋剂，逐步替换组织块中的脱水剂，直至树脂均匀地浸透到细胞结构的一切空隙中。　　4、包埋　　浸透之后,将组织块放于模具中,注入树脂单体与硬化剂等混合物，通过加热等方法使树脂聚合成坚硬的固体。用作包埋剂的树脂有甲基丙烯酸酯、聚酯和环氧树脂等。最广泛使用的是某些类型的环氧树脂，如618树脂、Epon812、Araldite和 Spurr等商品树脂。它们具有良好的维持样品特性、低收缩率和较强的耐电子轰击能力等优点。　　5、切片　　制备超薄切片要使用特制超薄切片机(大多是根据精密机械推进或金属热膨胀推进原理制成)和特殊的切片刀(用断裂的玻璃板制成的玻璃刀或用天然金刚石研磨而成的金刚石刀)。先将树脂包埋块中含有生物材料的部分，用刀片在立体显微镜下修整成细小的金字塔形,再用超薄切片机切成厚度适中(500埃左右)的超薄片，切片应依次相互联接形成切片带。切片带漂浮于装在切片机上的水槽中的水面上。　　通过装置在切片机上的解剖显微镜，监控切片过程。用荧光灯照射水面上的切片，并根据由此产生的干涉光颜色来判断切片的实际厚度(见表)。　　切片通常用敷有薄的支持膜的特制金属载网，从水面上捞取。快速冷冻固定的生物材料，可用冷冻超薄切片装置制成切片。用醛类或冷冻方法固定的组织，可通过超薄切片术与生物化学技术、免疫技术等结合使用,进行超微结构水平上的蛋白质、核酸、酶及抗原等生物活性物质的定位甚至定量研究。这就是电镜细胞化学技术(见细胞化学)和电镜免疫细胞化学技术。　　6、染色　　电子显微镜主要是依赖散射电子成像，为了增强细胞结构的电子反差，需要对切片进行染色。染色是依据各种细胞结构与染色剂(重金属盐)结合的选择性，而形成不同的对电子散射能力，从而产生借以区别各种结构的反差。电子染色方法分块染色和切片染色两种：①块染色法，在脱水剂中加入染色剂，在脱水过程中对组织块进行电子染色。②切片染色法，最常用，即将载有切片的金属载网漂浮或浸没在染色液中染色。也可使用有微处理机控制的染色机进行自动化染色。一般切片染色所使用的染色剂为金属铀盐和铅盐的双重染色。为显示某种特殊结构，则可采用与该结构有特异性结合的选择性染色剂。　　7、冷冻置换法　　用有机溶剂(如丙酮、乙醚等)在低温条件下(通常，-80～-90℃)，缓慢地置换冷冻固定的小块组织中的冰(“惰性脱水”)，这样可减少常规方法脱水过程中有机溶剂对组织中化学组分的抽取。然后再按常规方法进行树脂包埋、超薄切片和染色等。用冷冻置换法，可以很好地保存快速变化过程中物质的状态和非常脆弱的超微结构以及细胞内某些化学组分。　　8、电镜放射自显影技术　　用超薄切片术与放射性同位素标记技术相结合的电镜放射自显影术(见同位素技术)可获得同位素标记的化合物在组织细胞内存在部位，以及在代谢过程中物质的合成、分解、转运及分泌的信息。　　二、负染色和投影技术 研究分散的颗粒状生物材料,为增强其反差，常采用的方法。　　1、负染色　　研究以蛋白质为主要成分的颗粒状材料的最常用方法。以某些在电子束轰击下稳定而又不与蛋白质相结合的重金属盐类作为负染色剂，使之在支持膜上将颗粒材料包围，形成具有高电子散射能力的背景，衬托出低电子散射能力的颗粒的形态细节。其所成的电子显微像的反差与常规电子染色相反，即暗的背景和亮的颗粒形态的所谓阴性反差。负染色方法简便，所获得的颗粒的电子显微图像反差强,分辨率也高于超薄切片,可广泛用于研究蛋白质分子、细菌鞭毛、蛋白质结晶，以及生物膜及分离的细胞的细微结构，特别适用于蛋白质大分子及病毒颗粒结构的三维重建研究。常用的负染色剂有醋酸铀、磷钨酸钠或磷钨酸钾、 硅钨酸、 铜酸铵及甲酸铀等。用液滴法或喷雾法将颗粒材料的悬液加在载网的支持膜上，然后滴加负染色剂溶液。或将颗粒的悬液与负染色剂按一定浓度混合滴加或喷撒到支持膜上，吸去多余液体，待干燥后，即可用电镜观察。样品颗粒在支持膜上的均匀分散是成功的关键之一。染色剂溶液的pH则是成功的另一关键。一般染色剂的pH应在中性偏酸范围(pH 5～7),但对不同种类的颗粒材料和染色剂，最适pH也不尽相同。　　2、投影　　在真空蒸发器的高真空腔中,加热某些金属至熔化后，金属以细小颗粒沿直线方向蒸发出来。当金属微粒以一定入射角喷镀在载有颗粒材料的载网支持膜表面上时,颗粒向蒸发源的一面即被镀上一层金属薄膜,而背蒸发源的一面及附近区域形成无金属沉积的“阴影”，并且由于各部位散射电子能力存在着差别，这样就能构成具有强烈反差和立体感的电子显微图像。常用于投影的蒸发材料，有金、 铬、 铂、钯以及铂-铱、铂-钯、铂-碳等金属或合金。此外，还可利用电子枪投影装置使钨、钽等高熔点金属以极微细颗粒蒸发，从而获得高分辨率投影。　　三、蛋白质展膜技术　　用电子显微镜研究核酸分子常用的方法。某些碱性球蛋白，如细胞色素c,可以在低浓度盐溶液或蒸馏水表面展成单分子层，在展开过程中，能为蛋白质的碱性氨基酸侧链基团所吸附的、带负电荷的核酸分子同时展开成完整的线状分子。然后，用带有支持膜(有机膜或碳膜)的载网捞起这些蛋白质──核酸展膜,并用染色或金属投影法提高核酸分子的反差,可在电镜下直接观察核酸分子的形态、DNA的双螺旋结构,并可通过分子长度的测量来计算核酸分子量。　　四、冷冻断裂和冰冻蚀刻技术　　研究细胞超微结构，特别是生物膜结构的一种独特的样品制备技术。利用快速冷冻方法固定的生物组织块具有刚性和脆性。在对其施加外力后，组织即在结构上结合最薄弱的部位发生“脆性断裂”，这就是“冷冻断裂”。对于生物膜，断裂沿膜内部疏水区发生，从而暴露出膜内部结构。利用投影和复型技术，制备断裂面的复型,然后将组织腐蚀掉,并用载网捞起复型膜，就可用电镜来研究组织断裂表面所显示的细胞的或生物膜内部超微结构。在高于 10-5毫米汞柱真空度和-100℃温度下，冷冻组织的断裂表面上的冰升华为水蒸汽，而使原表面高度下降，即谓之“冰冻蚀刻”。由

  • 冷冻干燥机构成

    冷冻干燥机各组成部分及其使用说明　　冷冻干燥机的冻干法则基本上在0℃以下进行，即在产品冻结的状态下进行，只在后期降低产品的残余水份含量时，才让产品升至0℃以上的温度，但一般不超过40℃。在真空条件下，当水蒸汽直接升华出来后，药物剩留在冻结时的冰架中，形成类似海绵状疏松多孔架构，因此它干燥后体积大小几乎不变。冷冻干燥机再次使用前，只要加入注射用水，又会立即溶解。　　1、压缩机　　冷冻干燥机使用的制冷压缩机目前大多采用中高温型全密封往复式压缩机，其特点是：结构紧凑、体积小、重量轻、振动小、噪声低，能效比高。由于全密封压缩机的电动机与压缩机主体密封在一钢制壳体内，电动机处在冷媒气态环境中运行，冷却条件较好，寿命较长。冷冻干燥机壳体下部存有规定数量的润滑油，在压缩机工作时，对各部自动供油，平时不需再添加润滑油。　　2、热交换、蒸发器　　热交换在冷冻干燥机里的主要作用是利用被蒸发器冷却后的压缩空气所携带的冷量(对绝大多数用户来讲这部分冷量属废冷)并用这部分冷量来冷却携带大量水蒸气的较高温度的压缩空气，从而减轻了冷冻干燥机制冷系统的热负荷，达到节约能源的目的。另一方面，低温压缩空气在热交换器里温度得到回升，使排气管道外壁不致因温度过低而出现结露现象。　　3、冷凝器、二次冷凝器(预冷回热器)　　在冷冻干燥机中冷凝器的作用是将冷媒压缩机排出的高压、过热冷媒蒸气冷却成为液态制冷剂，使制冷过程得以连续不断进行。由于冷凝器排出的热量包括冷媒从蒸发器吸取的热量以及由压缩功转换过来的热量。所以冷凝器的负荷比蒸发器来得大，冷冻干燥机中冷凝器分空气冷却式(风冷型冷凝器)和水冷却式(水冷型冷凝器)两种。　　4、旋风分离器(气水分离器)　　旋风分离器也是一种惯性分离器，较多地用于气固分离。压缩空气沿筒壁切线方向进入分离器后，在里面产生旋转，混在气体中的水滴也跟着一起旋转并产生离心力，质量大的水滴所产生的离心力大，在离心力作用下大水滴向外壁移动，碰到外壁(也是挡板)后再集聚长大并与气体分离。　　5、热气旁路阀　　压缩空气在蒸发器中冷却时，有大量凝结水析出。为了防止这种情况的出现，必须对冷媒蒸发温度加以控制。其简单有效的措施就是在冷凝器和蒸发器之间加设一只热气旁路阀，热气旁路阀的测压管与蒸发压力直接连接。当蒸发压力低于一定程度时，热气旁路阀自动开启，冷凝器中的高温冷媒蒸气直接进入蒸发器，提升蒸发温度，避免冰堵现象。　　6、热力膨胀阀或毛细管(节流阀)　　膨胀阀(毛细管)是制冷系统的节流机构。在冷冻干燥机中，蒸发器制冷剂的供给及其调节者是通过节流机构来实现的。节流机构使制冷从高温高压液体进入蒸发器。毛细管由于结构简单，工作稳定，在小型冷冻干燥机获得普遍应用。　　7、自动排水阀　　在冷冻干燥机中，凝结的冷凝水应及时排放出设备外，避免因冷凝水排放不及时造成空气含水量上升，为了方便冷凝水的排放，在冷冻干燥机上装备了自动排水阀当排水阀贮水杯内水位未达到一定高度时，压缩空气的压力将浮球压下关闭排水孔，就不会造成气流泄漏。　　8、干燥过滤器　　运行中的制冷装置，由于制冷剂和冷冻油存在水分、固体粉未、污垢等杂质，情况严重时会使节流结构的节流孔产生脏堵。因此在冷媒供液管前必须装设干燥过滤器。另外，制冷剂中微量水分对制冷系统的危害最大。对冷媒，冷冻油及蒸发器、冷凝器和配管的干燥处理是极为重要的。 ?

  • 高速冷冻离心机使用维护技巧

    [font=微软雅黑](1)为确保高速冷冻离心机安全和离心效果,高速冷冻离心机必须放置在坚固水平的台面上,塑料盖门上不得放置任何物品,样品必须对称放置,并在高速冷冻离心机开机前确保已拧紧螺母。[/font][font=微软雅黑](2)高速冷冻离心机应经常检查转头及试验用的离心管是否有裂纹,老化等现象,如有须及时更换[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](3)高速冷冻离心机试验完毕后,需将高速冷冻离心机擦拭干净,以防高速冷冻离心机腐蚀[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](4)[/font][font=微软雅黑] 严格按照高速冷冻离心机的开关机程序关机。[/font][font=微软雅黑](5)当高速冷冻离心机的电机碳刷长度小于6mm时,必须及时更换[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](6)在高速冷冻离心机离心机未停稳时不得开盖[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](7)高速冷冻离心机必须有可靠接地[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](8)实验结束后,请关闭高速冷冻离心机后面的电源开关,拨掉高速冷冻离心机电源插头时,请不要忘了打开高速冷冻离心机后面的电源开关[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](9)高速冷冻离心机在日常使用中请注意符合“5.6,5.7”要求。[/font]

  • 【原创】【第三届原创大赛】植物官石蜡切片及显微摄影学习经历

    【原创】【第三届原创大赛】植物官石蜡切片及显微摄影学习经历

    植物的一切生命活动，都是以细胞作为基本结构和功能单位进行的。因此，对植物的组织、器官的研究就显得非常重要。石蜡切片法是动物、植物和病理组织切片制作上最重要、最常用的一种方法。由此方法制作的切片在显微镜下观察清晰，能显示其细致结构，反映其真实性，而且可以长期保存。除某些材料确实经不住石蜡法中各种药剂的处理或加温而不能应用外，一般的材料都可以采用石蜡切片法来制成装片在显微镜下观看或长期保存。本法的优点是可以极薄的切片，并可制作大批或是连续的切片。而且以石蜡包埋的组织块还可以长期保存。番红-固绿染色法可以区分开结构中的木质化和纤维化部分。　　显微摄影是一项重要的显微技术，在生物科学的研究中，从再现显微镜中物体影像的各种方法中比较，显微摄影是最好的方法。基建的结果除文字的描述外，显微照相能客观而生动的记录下生物体的细微结构或形态，它常与生物绘图技术配合，起到相辅相成的作用。本实验采用盆中冲洗的方法。整个冲洗过程需在暗室中进行。若为涂塑像纸则直接晾干，普通像纸要进行上光。　　1 材料　　1.1 材料　　某植株(完整植株，长有新鲜叶片)、乐凯全色黑白胶卷(ASA100)、涂塑相纸、普通像纸　　1.2 试剂　　1.2.1 浓度为35%、70%、85%、95%、100%的酒精　　1.2.2 二甲苯、二甲苯酒精等量混合液　　1.2.3 包埋剂：纯石蜡配制　　1.2.4 染色剂：浓度为2% 番红水溶液(用水配制)、0.1% 固绿(由95%酒精配制而成)　　1.2.5 固定液FAA(福尔马林 、冰醋酸、70%酒精以1:1:6比例配制)　　1.2.6 封固剂：加拿大树胶　　1.2.7 D-72显影液： 50℃温水 750ml，米吐尔 3.1g，无水亚硫酸钠 45g，无水碳酸钠67.5g，对苯二酚 12g，溴化钾 1.9g，然后加冷水至1000ml。　　1.2.8 定影液F-1和F-5。　　F-5定影液：50℃温水600ml，结晶硫代硫酸钠240g，无水亚硫酸钠15g，28% 乙酸 48ml，硼酸 7.5g硫酸铝钾 15g，然后加冷水至1000ml。　　1.2.9 停影液: 水　　1.3 工具及仪器　　双面刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、染色缸、镊子、旋转切片机、金属温台、毛笔、OlympusBH2型显微照相系统、放大仪、印相仪、上光仪等。　　2 石蜡装片的制作　　2.1 取材　　从植株上取新鲜、健康、有代表性的叶片，用锋利的刀片切取幼茎、叶柄、叶片，并用水清洗干净。将幼茎与叶柄切成约5毫米长的小段，将叶片从主脉处切取5mm× 8mm的长方形，并保证切主脉两侧的叶片相等且主脉与短边平行，底部能立于包埋盒内。　　2.2 固定　　将已经配制好的FAA固定液倒入一个小试剂瓶中，再把已经切好的材料浸入其中，在瓶上贴好标签，待用。　　2.3 浸洗　　用50%酒精或70% 酒精浸洗一、二次就可以进行脱水。　　2.4 脱水　　包埋前的第一个重要步骤为脱水。本实验以酒精为脱水剂，采用逐渐提高酒精浓度来减少材料中水分的含量。可以以此梯度进行操作，70% 酒精、85%酒精 、95%酒精、无水酒精I、无水酒精II，在每级酒精中浸2～24小时，使脱水充分。　　2.5 透明　　酒精不能作为石蜡的溶剂，因此必须经过透明剂透明。二甲苯可以溶解石蜡，有利石蜡透入，同时还有脱去酒精的功效。但二甲苯易使组织收缩变脆，故浸留时间不宜过长。同时若脱水不干净，就会引起不良后果。为了避免组织收缩，在纯酒精或丙酮脱水以后，并不直接移入二甲笨中，其间必须经过几个梯度，逐渐置换，在每一级中停留的时间为1—2小时，二甲苯易挥发，在切片透明之后，从染色缸中取出封藏，手段要敏捷，不宜久置。在纯酒精中脱水后需要经过的几种溶液配比如下：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011151102_259410_1856701_3.jpg　　2.6 浸蜡　　石蜡能溶于透明剂二甲苯中。把已透明的材料投入熔化的石蜡中，即可取代透明剂，而使组织中的一切空隙为石蜡透入而填满，即为浸蜡。为了使石蜡更好地浸透到组织中去，浸蜡一般需要经过四个不同配比的溶液，在前三杯溶液中停留半小时左右，在温箱中或在包埋箱中进行。然后取出在经第四种溶液。保温箱的温度要适宜，太高，会使材料收缩，太低，石蜡会冻结而不能透入组织。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2010/11/201011151102_259411_1856701_3.jpg　　2.7 包埋　　包埋是将浸过蜡的组织块包埋于石蜡中以利于切片。将已熔化的石蜡倒入做好的包埋盒内，然后用酒精灯加热的镊子将材料从石蜡液中取出，迅速放入纸盒里的石蜡中。放置的方向要按照切片的方向而定，最好把切面向下，并且放正。若石蜡中有气泡，也可用热针刺入石蜡中，将气泡烫去。材料块放置妥当后，以左右手分持纸盒两耳，半浸于冷水中，并用口吹气使蜡表面凝结，蜡凝后，除去纸盒即成蜡块。　　包埋过程中应注意的事，包埋蜡的温度不宜过高，否则会将组织烫坏。　　2.8 切片　　首先要修块，将已凝固的蜡块取出，用刀片把它切至何时大小，修整平滑。然后将蜡块底部稍融化贴在一小木块上，再用融化的蜡粘在蜡块的四周使蜡块牢固帖在木块上。将带石蜡的木块装在旋转式切片机上，将切片刀装在夹刀部位上，调整切片刀的角度，进行切片。将切下的条状蜡带，用毛笔取下放于一张纸上，挑取较好的一小条蜡带做切片。　　2.9 粘片和展片　　以手指涂一薄层Mayer甘油蛋白于干净载玻片上，再用滴管滴一滴蒸馏水于载玻片上，然后用镊子挑取一段切片蜡带置于载玻片的水面上(注意：要以石蜡切片背面比较光滑的一面放在水上，才易展平)。然后将载玻片放在金属温台上加热，使切片蜡带自由展平。注意，载玻片上的水要多放一点，加热温度不要过高，否则石蜡会熔化，组织脱落。自然风干。　　2.10 番红-固绿染色　　2.10.1 溶蜡　　将切片放入二甲苯溶液中，5～10分钟，彻底除去切片上的石蜡。如果室温过低，需延长脱蜡的时间，脱蜡要彻底，否则染色困难。　　2.10.3 复水　　将切片经纯酒精和二甲苯的1:1的溶液，100%、95%、70%、35%酒精溶液各3分钟。逐步过渡，防止材料收缩。　　2.10.4 蒸馏水浸洗　　因为染色液番红是用蒸馏水配置的，应将切片放入蒸馏水中3分钟，以便彻底复水，然后进行染色。　　2.10.5 初染　　将切片放入2%的番红水溶液中染色10～20分钟，使红色染透，否则材料容易褪色。如果番红染色过度，应返回到酒精中进行轻微脱色，再进行以下操作。　　2.10.6 流水冲洗　　用流水冲去多余染液，以冲洗去切片上的番红余色。而且对一些不易被固绿着色的幼嫩组织材料，其切片经水冲洗后吸水膨胀，染色剂易于渗入组织进行染色。　　2.10.7 镜检　　将载玻片放在显微镜的载物台上，进行镜检，染色效果良好，则可进入下一步操作。　　2.10.8 脱水　　将切片依次经过35%，70%的酒精各30秒。因为固绿是用95%酒精配置的，因此应脱去水分再进行固绿染色。　　2.10.9 复染　　用0.1%固绿染色5～10秒，时间不宜过长，否则绿色太深，将切片变为蓝绿色或深绿色，失去的双重染色的意义。　　2.10.10 镜检　　将切片放入95%的酒精过一下后，进行镜检。所染材料的木质化部分呈红色，纤维素部分呈绿色。　　2.10.11 浸洗　　用100%的酒精溶液浸洗3分钟，以洗去切片上固绿的余色，同时也使切片过度到纯酒精中。该步时间不宜过长，由于固绿在纯酒精中易褪色。　　2.10.12 透明　　将切片放入纯酒精和二甲苯的1:1的混合溶液中浸3分钟，使切片从酒精中逐步过渡到纯的二甲苯溶液中。然后将切片放入纯的二甲苯溶液中，浸5分钟，使切片完全过渡到二甲苯溶液中。至材料完全透明后应立即进行封片(为防止二甲苯使组织收缩)。　　对于脱水不彻底的材料投入到二甲苯溶液中时会出现乳白色雾状，这表明该材料无法进行透明，应该退回到无水酒精和95%的酒精进行重新脱水。　　2.11 封片　　把切片从二甲苯溶液中取出，用纸擦去载玻片上的多余液体。滴一滴加拿大树胶于组织上，用镊子夹取一片盖玻片，与载玻片成一倾斜的角度，使盖玻片的一个边缘与加拿大树胶完全接触，然后轻轻地覆盖下，防止产生气泡。树胶的量要适中，使盖玻片与载玻片之间没有空隙。　　3 显微照相　　3.1 安装好显微照相系统　　将小型显微照相连接器连接到OlympusBH2型显微镜上。　　3.2装胶片　　打开相机后盖，装入35毫米胶片，盖好后盖。注意把胶片头部放入收片轴的片槽里时，不要使它超出片槽的另一端。　　3.3 设置自动曝光器　　根据胶片感光度(ASA)选择控制器上感光度标记，按下感光片类型标记按钮(35)。将胶片倒易律失效特性的修正数设置在中间档。　　3.4 试拍　　通过自动

  • 【转帖】冷冻干燥机冷冻干燥的原理

    干燥是保持物质不致腐败变质的方法之一。干燥的方法许多，如晒干、煮干、烘干、喷雾干燥和真空干燥等。但这些干燥方法都是在0℃以上或更高的温度下进行。干燥所得的产品，一般是体积缩小、质地变硬，有些物质发生了氧化，一些易挥发的成分大部分会损失掉，有些热敏性的物质，如蛋白质、维生素会发生变性。微生物会失去生物活力，干燥后的物质不易在水中溶解等。因此干燥后的产品与干燥前相比在性状上有很大的差别。 而冷冻干燥法不同于以上的干燥方法，产品的干燥基本上在0℃以下的温度进行，即在产品冻结的状态下进行，直到后期，为了进一步降低产品的残余水份含量，才让产品升至0℃以上的温度，但一般不超过40℃。 冷冻干燥就是把含有大量水分物质，预先进行降温冻结成固体，然后在真空的条件下使水蒸汽直接升华出来，而物质本身剩留在冻结时的冰架中，因此它干燥后体积不变，疏松多孔在升华时要吸收热量。引起产品本身温度的下降而减慢升华速度，为了增加升华速度，缩短干燥时间，必须要对产品进行适当加热。整个干燥是在较低的温度下进行的冷冻干燥机有下列优点： 一、冷冻干燥在低温下进行，因此对于许多热敏性的物质特别适用。如蛋白质、微生物之类不会发生变性或失去生物活力。因此在医药上得到广泛地应用。 二、在低温下干燥时，物质中的一些挥发性成分损失很小，适合一些化学产品，药品和食品干燥。 三、在冷冻干燥过程中，微生物的生长和酶的作用无法进行，因此能保持原来的性装。 四、由于在冻结的状态下进行干燥，因此体积几乎不变，保持了原来的结构，不会发生浓缩现象。 五、干燥后的物质疏松多孔，呈海绵状，加水后溶解迅速而完全，几乎立即恢复原来的性状。 六、由于干燥在真空下进行，氧气极少，因此一些易氧化的物质得到了保护。 七、干燥能排除95-99%以上的水份，使干燥后产品能长期保存而不致变质。 因此，冷冻干燥目前在医药工业，食品工业，科研和其他部门得到广泛的应用。 产品的冷冻干燥需要在一定装置中进行，这个装置叫做真空冷冻干燥机，简称冻干机。 冻干机按系统分，由致冷系统、真空系统、加热系统、和控制系统四个主要部分组成。按结构分，由冻干箱或称干燥箱、冷凝器或称水汽凝集器、冷冻机、真空泵和阀门、电气控制元件等组成。 冻干箱是一个能够致冷到-40℃左右，能够加热到+50℃左右的高低温箱，也是一个能抽成真空的密闭容器。它是冻干机的主要部分，需要冻干的产品就放在箱内分层的金属板层上，对产品进行冷冻，并在真空下加温，使产品内的水分升华而干燥。 冷凝器同样是一个真空密闭容器，在它的内部有一个较大表面积的金属吸附面，吸附面的温度能降到-40℃以下，并且能恒定地维持这个低温。冷凝器的功用是把冻干箱内产品升华出来的水蒸气冻结吸附在其金属表面上。 冻干箱、冷凝器、真空管道和阀门，再加上真空泵，便构成冻干机的真空系统。真空系统要求没有漏气现象，真空泵是真空系统建立真空的重要部件。真空系统对于产品的迅速升华干燥是必不可少的。

  • 高速冷冻离心机维护技巧

    [font=微软雅黑](1)为确保高速冷冻离心机安全和离心效果,高速冷冻离心机必须放置在坚固水平的台面上,塑料盖门上不得放置任何物品,样品必须对称放置,并在高速冷冻离心机开机前确保已拧紧螺母。[/font][font=微软雅黑](2)高速冷冻离心机应经常检查转头及试验用的离心管是否有裂纹,老化等现象,如有须及时更换[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](3)高速冷冻离心机试验完毕后,需将高速冷冻离心机擦拭干净,以防高速冷冻离心机腐蚀[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](4)[/font][font=微软雅黑] 严格按照高速冷冻离心机的开关机程序关机。[/font][font=微软雅黑](5)当高速冷冻离心机的电机碳刷长度小于6mm时,必须及时更换[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](6)在高速冷冻离心机离心机未停稳时不得开盖[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](7)高速冷冻离心机必须有可靠接地[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](8)实验结束后,请关闭高速冷冻离心机后面的电源开关,拨掉高速冷冻离心机电源插头时,请不要忘了打开高速冷冻离心机后面的电源开关[/font][font=微软雅黑]。[/font][font=微软雅黑](9)高速冷冻离心机在日常使用中请注意符合“5.6,5.7”要求。[/font]

  • 轴承冷冻箱制冷原理说明

    轴承冷冻箱是工业冷冻箱在轴承行业的冷冻处理，由于轴承冷冻箱的使用需求比较大，所以，轴承冷冻箱的性能是很重要的，那么轴承冷冻箱原理大家都知道么？　　轴承冷冻箱的制冷剂在压缩机产生的机械能的作用下，在制冷系统内循环流动，并重复工作在气态、液态。在这过程中，制冷剂通过板式换热器不断地吸收冷却水的热量，并通过冷凝器将热量排出。通过设定温控板的温度，控制压缩机的工作，达到设定的水温温度。　　轴承冷冻箱制冷系统由 压缩机、冷凝器、风扇、毛细管、干燥过滤器、板式换热器等配件组成。轴承冷冻箱压缩机从管路吸收低压、低温制冷剂后，对其进行压缩产生高压、高温的制冷剂， 再通过热功能转换，实现制冷目的。冷凝器主要用于散热，使其内部的制冷剂凝结为液体。轴承冷冻箱压缩机排出的高温、高压气态制冷剂，通过管路进入冷凝器后。冷凝器完成散热冷凝的作用。在这过程中，制冷剂在冷凝器中的压力保持不变。　　轴承冷冻箱风扇强制空气对流循环，对冷凝器进行散热。轴承冷冻箱毛细管控制流入板式换热器制冷剂的流量。保持一定的蒸发压力和冷凝压力，以便汽化吸热、冷凝散热。轴承冷冻箱干燥过滤器主要用于吸收制冷系统中残留的水分和灰尘、油垢、金属物等异物，以避免制冷剂中杂质和水分进入毛细管，产生“冰堵”或“脏堵”，导致制冷系统不能正常工作。轴承冷冻箱板式换热器主要用于吸收冷却水的热量，使其内部制冷剂吸热汽化。制冷剂通过毛细管节流后进入板式换热器。进入板式换热器后，实现液体—气体装换，完成吸热任务。　　轴承冷冻箱建议向轴承冷冻箱专业厂家进行购买，高质量，全心全意售后服务能够使得轴承冷冻箱更加有效的运行。

  • TEM到冷冻电镜，中国研发断档：设备、耗材配件仰赖进口

    5月29日，清华大学生命科学院博士生张森森的蛋白样品9时准时在液氮环境下进入冷冻电镜。几天后，埃(10-10)级精度的蛋白质“高清3D彩照”将出炉。研究人员可以“直视”单个蛋白质的分子结构，并解出生命运转机理。　　这期间，冷冻电镜中的电子枪将持续发射电子，每次看一个小单元。为了解释这个“小单元”，张森森为科技日报记者示意了一个“镊子尖”大小的小金片，“金片上约有200个左右的均匀小孔，每个小孔中再分150个小孔，电子束一次只‘看’其中一个小孔。”金片类似蛋白质的“载玻片”，与光学显微镜不同的是，载玻片透光，小金片要透电子，容许电子束透过样品时受到散射。散射信号被捕捉记录下来，计算后可呈现分子结构。　　透射式电镜的生产能力是冷冻电镜制造能力的基础之一。“国内没有一家企业生产透射式电镜。”赛默飞公司技术支持陈宝庆说得不假思索，他毕业于北京大学地球物理专业，对行业非常了解，他介绍，“之前还有几个企业制造，比如原江南光学仪器厂现在就不造了。”[align=center][img=,450,324]http://img1.17img.cn/17img/images/201806/insimg/5bbc5225-5cff-4593-b15c-7a70f246a589.jpg[/img][/align][align=center][color=#00b0f0]透射式电镜[/color][/align]　　[b]能做到单电子束控制的灯丝，只有进口[/b]　　“理论上说，只要施加足够强的电场，电子就会从材料中‘游’出来。”陈宝庆说。但“游”的状态与可以使用的电子状态相距甚远。　　什么样的电子才能为蛋白质拍摄高清3D彩照呢?东南大学材料科学与工程学院万克树教授描述了理想的状态：速度完全一样的电子，从“源头”的一个点上、非常多地发射出来。　　“这些要求是相互矛盾的。”万克树解释，电子从材料表面溢出，要发射电子多，面积就要大，但是面积大了就难以满足一致性要求。　　如果把电子枪想象成一把枪，它必须以“狙击”的精度完成机枪的扫射，“子弹”的角度、速度完全一致。　　“电子的能量要做到高度一致，虽还达不到激光的程度，但也必须是很窄的分布。”陈宝庆解释，电子“子弹”一致性是提高图像分辨率的前提。　　为此，电子枪的核心构造其实是一根极细的“陀螺针”，形似陀螺，尖端却比针还细。电子从尖端出发，在真空的环境下，前去与大分子“相撞”，进而反映出分子构象。　　“之前的技术路线是通过加热让电子枪发射电子，发射源(俗称“灯丝”)用钨丝或六硼化镧，需要2500℃左右，高温促使电子发射，但也使电子异常活跃、难以控制，因此热发射电子枪的电镜精度低。”万克树说。　　“场发射是通过高压电场，把电子从‘灯丝’里拉出来，室温下可完成。”万克树说，“所用灯丝国内没有生产，全部依赖进口，每根上万美元左右。”　　他提到的常温场发射枪(肖特基电子枪)是将氧化锆沉积在单晶钨的晶体的特定面上。FEI公司后来在电子枪生产上又有了新的突破，将热和场结合起来，稳定性进一步提升。在清华大学冷冻电镜实验室的仪器介绍中可以看到，一台2013年购买、2015年到货的最新型号电镜在电子枪一栏标明“X-FEG”，有中文翻译为超稳定高亮度电子枪。“所用灯丝在材质上与之前的一致，工艺不同能够使亮度更强。”陈宝庆介绍。　[b]　上了邮票的科研成就，被中断[/b]　　场发射的另一个关键部分是牵拉出电子的外加电场，电场电压高达300千伏。“在这样的高压下保持电压稳定，才能‘拉’出稳定一致的电子，专业上称为‘单色性好’。”万克树说。　　据题为《中国透射式电子显微镜发展的历程》的文章记载，1963年，我国就开始了高压100kV电子枪稳定因素探讨的实验，1965年完成样机，中国自主研制透射式电镜于1979年达到当时的国际先进水平，还专门为国产的电子显微镜发行过纪念邮票。　　该领域的研发却由于种种原因一度中断。“直到几年前，中国也试图重启这方面的公司，也曾立项想要完成场发射透射电镜的自主研发。”陈宝庆回忆，曾经有相关的科研人员，辗转找到他询问，为什么FEI公司没有相关专利。　　“他们想到的捷径之一是把生产厂商的专利拿来参考，但是其中很多生产工艺是秘方级别的，根本不会外传。”陈宝庆说。　　[b]从“看人影”到“辨雀斑”，中国研发没使上劲[/b]　　“如今，中国只有一家企业生产扫描电镜，透射电镜完全不生产了。”陈宝庆说，德国蔡司公司也停止了透射电镜的生产，目前世界上生产透射电镜的厂商只有3家，分别是日本电子、日立、FEI(2016年被赛默飞公司以42亿美元收购。)　　没有市场是设备巨头纷纷放弃透射电镜的原因。“透射电镜之前的清晰度，使得冷冻电镜在科学研发上基本没有实际作用。”陈宝庆说。可以理解为，以前只能看清楚个人影，现在却能辨认清楚脸上的雀斑。　　除了电子枪的原理变化，冷冻电镜上其他的技术精进，例如三维重建算法的实现、样品制作机器人的研发成功等，使得冷冻电镜的分辨率大规模提升，成为生命科学研究的利器。　　在冷冻电镜从“看人影”到“辨雀斑”的发展历程中，中国没有使上劲。在冷冻电镜实验室中，从耗材到配件都必须进口。“加样台10万元一个、小金片50元一个、外托150元一个??”张森森说，所有匹配冷冻电镜使用的工具都需要原装，根本不存在“山寨版”。零件坏了找不到人修理，只能等待零件邮寄到货后进行更换。对于中国的冷冻电镜使用者们来说，这样的体验可能还要持续不短的时间。

  • 高速离心机与高速冷冻离心机的区别

    高速离心机和高速冷冻离心机最大的区别是一个具有冷冻功能，一个不具备冷冻功能。高速离心机属常规实验室用离心机，广泛用于生物，化学，医药等科研教育和生产部门 ，它利用转子高速旋转产生的强大离心力，分离液体与固体颗粒或液体混合物中各组分，适用于微量样品快速分离合成。由于转速较高，产生离心力大，是对样品溶液中悬浮物质进行高纯度分离、浓缩、精制，提取各种样品进行研究的有效制备仪器。是医学、药物学、生物学、化学、农业科学、食品环保等科研生产部门使用的重要仪器设备，广泛用于各种药物、生物制品，如血液、细胞、蛋白质，酶、核酸、病毒、激素等等。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2012-10-19/98.html][b][img=台式高速常温离心机H/T16MM,550,550]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/6bfd6b3f06ca31aa81c99915b3eb562e.jpg[/img][/b][/url][/align][align=center][b]台式高速常温离心机H/T16MM[/b][/align][b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/]高速离心机[/url]：[/b]高速离心机转速一般在10000～30000r/min之间，和高速冷冻离心机相比，除不具备冷冻的性能外，它采用的是无刷电机驱动,数字化显示,这类离心机广泛用于生物学、农业科学及临床医学研究，特别适用于样品量少，要求离心力大的实验工作。赫西高速离心机特点是，全电脑控制，无刷变频电机驱动, 流线型设计，全钢结构，不锈钢离心腔，采用TFT真彩4.3寸屏，触摸按键双控系统，智能化控制、简单方便地操作、触摸面板，同时显示设定参数和运行参数。转子经严格的过速安全实验,安全、体积小、重量轻、低噪音、振动小、运转平稳。[align=center][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2012-10-17/58.html][b][img=台式高速冷冻离心机3H20RI,550,550]http://www.hexiyiqi.com/d/file/hexi2012chanpinzhongxin/luodishigaosulengdonglixinji/2019-05-14/4b60dacaa256bcc4fe665e2eb3536c0a.jpg[/img][/b][/url][/align][align=center][b]台式高速冷冻离心机3H20RI[/b][/align][b][url=http://www.hexiyiqi.com/hexi2012chanpinzhongxin/gaosulengdonglixinji/]高速冷冻离心机[/url]： [/b]高速冷冻离心机的转速一般在10000～30000r/min之间，并且带有致冷系统。除具有冷冻离心机的性能和结构外，高速冷冻离心机所用角式转头多采用用钛合金或铝合金制成。离心管为具盖聚乙烯硬塑料制品。高速冷冻离心机(也叫恒温离心机)多用于对温度有一样要求的恒温环境的实验,如收集微生物、细胞碎片、细胞、大的细胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。同时它还具有样品目测平衡，操作方便，相对离心力大，加速度快，以及转速、温度、时间显示精确稳定等特点。高速冷冻离心机由外壳、离心室、转头、冷冻装置和控制电路等部分组成。冷冻装置其作用是降低离心室温度。类型可分为台式高速冷冻离心机和立式高速冷冻离心机。赫西高速冷冻离心机采用进口无氟制冷压缩机组及环保制冷剂R404a，具有宽泛的温控范围：-20℃－ 40℃ ，并可在离心机运行期间设置；具备预制冷功能，可迅速降温至设定温度；具备待机冷却功能，可在待机状态下维持设定温度；具有加热化霜功能。

  • 哪些样品进行前处理时，需要冷冻？

    看到文献上测定植物油中104种农药残留时，前处理时用到冷冻，将乙腈提取层放入-18度冰箱内冷冻，达到2h后再净化，哪些样品需要冷冻后净化。效果好吗？

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