微生物检测过滤系统

微生物过滤检测系统，常见的品牌有哪些？

请教各位高手： 本实验现急需购买一套微生物限度检测的膜过滤系统，请问各位高手给点意见，那种比较好用。电话：13828759450，QQ:240100912

我们部门想新建微生物实验室，前期是进行纯化水的微生物检测，不知道需要什么相关仪器，需要菌种进行方法验证吗？需要什么规格的仪器进行过滤？生物显微镜的规格呢？非常感谢大家的帮助！

1 基本知识1.1 生物安全柜：防止操作过程中含有危险性生物气溶胶散逸的负压空气净化排风柜。1.2 主要用途：生物安全柜广泛应用在医疗卫生、疾病预防与控制、食品卫生、生物制药，环境监测以及各类生物实验室等领域，是保障生物安全和环境安全的重要基础。1.3 生物安全柜的分级：生物安全柜分为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级三大类以满足不同的生物研究和防疫要求。1.3.1Ⅰ级生物安全柜：Ⅰ级生物安全柜有前窗操作口的安全柜，操作者可通过前窗操作口在安全柜内进行操作。用于对人员和环境的保护，不要求对产品的保护。前窗操作口向内吸入的负压气流保护人员的安全；排出气流经高效过滤器过滤后排出保护环境不受污染。是在不要求对产品的保护的条件下，可以满足操作生物危害等级为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级致病因子要求的生物安全柜。1.3.2Ⅱ级生物安全柜：Ⅱ级生物安全柜有前窗操作口的安全柜，操作者可通过前窗操作口在安全柜内进行操作，对操作过程中的人员、产品及环境进行保护。前窗操作口向内吸入的负压气流保护人员的安全；经高效过滤器过滤的垂直下降气流用以保护产品；气流经高效过滤器过滤后排出保护环境不受污染。是用于对人员、受试样本及环境进行保护，且能够满足操作生物危害等级为Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级致病因子要求的生物安全柜。Ⅱ级生物安全柜按排放气流占系统总流量的比例及内部设计结构分为A1、A2、B1、B2共四种类型。1.3.2.1 Ⅱ级A1型生物安全柜：前窗操作口流入气流的最低平均流速不低于0.40m/s；下降气流为安全柜的部分流入气流和部分下降气流的混合气体，经过高效过滤器过滤后送至工作区；污染气流经过高效过滤器过滤后可以排到实验室或经安全柜的外排接口通过排风管道排到大气中；安全柜内的污染部位可以处于正压状态，并且这些正压区域可以没有负压区域包围。Ⅱ级A1型生物安全柜不能用于有挥发性有毒化学品和挥发性发射性核素的实验。1.3.2.2 Ⅱ级A2型生物安全柜：前窗操作口流入气流的最低平均流速不低于0.50m/s；下降气流为部分流入气流和部分下降气流的混合气体，经过高效过滤器过滤后送至工作区；污染气流经过高效过滤器过滤后可以排到实验室或经安全柜的外排接口通过排风管道排到大气中；安全柜内所有生物污染部位处于负压状态或者被负压通道和负压通风系统环绕。Ⅱ级A2型生物安全柜用于进行以微量挥发性有毒化学品和痕量放射性核素为辅助剂的微生物实验时，必须连接功能合适的排气罩。1.3.2.3 Ⅱ级B1型生物安全柜：前窗操作口流入气流的最低平均流速不低于0.50m/s；下降气流大部分由未污染的流入气流循环提供，经过高效过滤器过滤后送至工作区；大部分被污染的下降气流经过高效过滤器过滤后通过专用的排气管道排入大气中；安全柜内所有生物污染部位均处于负压状态或者被负压通道和负压通风系统包围。如果挥发性有毒化学品或放射性核素随空气循环不影响实验操作或实验在安全柜的直接排气区域进行，Ⅱ级B1型生物安全柜可以用于以微量挥发性有毒化学品和痕量放射性核素为辅助剂的微生物实验。1.3.2.4 Ⅱ级B2型生物安全柜：前窗操作口流入气流的最低平均流速不低于0.50m/s；下降气流来自经过高效过滤器过滤的实验室或室外空气；流入气流和下降气流经过高效过滤器后通过排气管道排到大气中，不允许回到安全柜和实验室中；所有污染部位均处于负压状态或者被直接排气的负压通道和负压通风系统包围。Ⅱ级B2型生物安全柜可以用于以挥发性有毒化学品和放射性核素为辅助剂的微生物实验。1.3.3Ⅲ级生物安全柜：具有全封闭、具有不泄漏结构的，最高安全防护等级的安全柜，适用于高风险的生物试验。人员通过与柜体密闭连接的手套在安全柜内实施操作。安全柜内对实验室的负压不低于120Pa。下降气流经高效过滤器过滤后进入安全柜。排出气流经两道高效过滤器过滤或通过一道高效过滤器过滤再经焚烧处理。是能够满足操作生物危害等级为Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级致病因子要求的生物安全柜。2 检测项目和技术指标2.1 箱体泄漏检测：给生物安全柜增压到500Pa，封闭加压空气，30min后压力下降值小于10%；2.2 洁净度：5级(具体参数见下表)；http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609261035_612129_1638093_3.bmp3 检测设备和实验条件3.1环境条件3.1.1环境温度：（15～30）℃；3.1.2相对湿度：≤70%。3.2 检测设备3.2.1微压计：测量范围(0～600)Pa,误差≤±5Pa；3.2.2照度计：测量范围(0～1000)lx,误差≤±10%；3.2.3风速仪：引用误差≤±3%；3.2.4尘埃粒子计数器：直径分辨力0.1μm。4 检测方法4.1 箱体泄漏检测4.1.1封好箱体的前窗和排气孔，使安全柜成为一密封系统；4.1.2移开装饰嵌板和通道上的其他障碍物，露出要测试的压力通风系统；4.1.3在测试区连接压力计以显示内压；4.1.4对生物安全柜加压到500Pa，封闭加压空气，30分钟内压力下降值不超过初始压力值的10%。4.2 洁净度4.2.1开启生物安全柜，在正常工作条件下运行10min；4.2.2使粒子计数器的采样口置于工作台面上200mm，距内表面及工作窗大于100mm位置进行采样，共5个点，各点洁净度均应满足洁净度要求。4.3 垂直气流平均风速4.3.1在距离内侧壁板及工作工作窗100mm围成的，工作台面上方300mm处的平面区域内，使用风速仪测量垂直气流的风速，测量点不少于10个，以各点风速的平均值作为安全柜垂直气流平均风速。4.4 工作窗口进风平均风速4.4.1Ⅰ级、Ⅱ级生物安全柜进风平均风速的检测：1) 测排风量：用套管和排风口连接，套管长度等于排风口长边的2倍，使用风速仪测量排风口风速共6次，以6次读数的平均值作为套管截面平均风速，以套管截面平均风速乘以套管截面积得到排风量。2） 测送风量：在送风散流板垂直向下150mm，距边墙50mm围成的平面区域内测量垂直气流风速，测量点不少于6次，以垂直气流平均风速乘以送风面面积得到送风量。3） 排风量与送风量的差为工作窗口进风风量。4） 用工作窗口进风风量除以工作窗开口面面积，得到工作窗口进风平均风速。4.4.2Ⅲ级生物安全柜进风平均风速的检测：开启生物安全柜，把风速仪探测头放在手套口的中心处测量风速6分钟，每1分钟记录一次读数，共6次。以6次的平均值作为生物安全柜进风平均风速，每个手套口分别检测，均应符合要求。4.5 柜体内外负压差使生物安全柜正常工作，使用压差计测量柜内、外的压差。4.6操作台面平均照度4.6.1在工作台面上均匀选择不少于5个照度测量点，各测量点间的距离不超过300mm，与侧壁距离大于150mm。4.6.2关闭生物安全柜的背景照明，用照度计依次测量各点，以各点测得的照度的平均值作为生物安全柜操作台面平均照度。5 检测周期每年检测一次，仪器修理后应重新检测，确保符合使用要求后再使用。并建议每3个月对生物安全柜进行箱体泄漏检测，并检查洁净等级。6 仪器使用中的注意事项6.1 操作前应将本次操作所需的全部物品移入安全柜，避免双臂频繁穿过气幕破坏气流；并且在移入前用75%酒精擦拭表面消毒，以去除污染。6.2 打开风机5～10分钟，待柜内空气净化并气流稳定后再进行实验操作。将双臂缓缓伸入安全柜内，至少静止1分钟，使柜内气流稳定后再进行操作。6.3安全柜内不放与本次实验无关的物品。柜内物品摆放应做到清洁区、半污染区与污染区基本分开，操作过程中物品取用方便，且三区之间无交叉。物品应尽量靠后放置，但不得挡住气道口，以免干扰气流正常流动。6.4 操作时应按照从清洁区到污染区进行，以避免交叉污染。为防可能溅出的液滴，可在台面上铺一用消毒剂浸泡过的毛巾或纱布，但不能覆盖住安全柜格栅。6.5柜内操作期间，严禁使用酒精灯等明火，以避免产生的热量产生气流，干扰柜内气流稳定；且明火可能损坏HEPA滤器。6.6工作时尽量减少背后人员走动以及快速开关房门，以防止安全柜内气流不稳定。6.7在实验操作时，不可打开玻璃视窗，应保证操作者脸部在工作窗口之上。在柜内操作时动作应轻柔、舒缓，防止影响柜内气流。6.8 安全柜应定期进行检测与保养，以保证其正常工作。工作中一旦发现安全柜工作异常，应立即停止工作，采取相应处理措施，并通知相关人员。6.9 工作完成后，关闭玻璃窗，保持风机继续运转10～15分钟，同时打开紫外灯，照射30分钟。（在紫外灭菌时要关闭通风;紫外光对人体有损害，注意个人保护。）6.10安全柜应定期进行清洁消毒，柜内台面污染物可在工作完成且紫外灯消毒后用2%的84消毒液擦拭。柜体外表面则应每天用1%的84消毒液擦拭。6.11柜内使用的物品应在消毒后再取出，以防止将病原微生物带出而污染环境。6.12 缓慢移动原则：为了避免影响正常的风路状态，柜内操作时手应该尽量平缓移动。6.13 物品平行摆放原则：为了避免物品和物品之间的交叉污染现象产生，在柜内摆放的物品应该尽量呈横向一字摆开，避免回风过程中造成交叉污染。同时避免堵塞背部回风隔栅影响正常风路。6.14 避免震动原则：柜内尽量避免震动仪器（例如离心机、旋涡振荡器等）的

采用滤膜法测定生活用水中所含细菌量。国产品牌中的哪个微生物过滤系统比较好呢？

[em06] 我现在在对一个样品进行微生物方法学验证, 采用的是平皿法计数.结果表明只是对金黄色葡萄球菌有抑制性,现在想采用薄膜过滤法,请问我只需要对金黄色葡萄球菌进行检测?还是其他几种菌也需要同时进行检测?我觉得05版药典上关于微生物方法学验证薄膜过滤法写的不是很具体 请问微生物方法学验证薄膜过滤法具体操作方法是什么呢?

[font=SimSun, STSong, &]我做用全豆工艺做豆浆，菌落检测时没有过滤，10的负1, 10的负2次方，有密密麻麻的点，但是这个点不长大（14小时时是这样，20小时后也是这样），理论上不变大应该不是菌吧，所以请教一下各位朋友这个是菌吗？如果不是那是不是证明有些产品做菌落测试是需要过滤的。[/font]

微生物检验实验使用的膜过滤是怎样的？有没有朋友用过啊？

[font=宋体][color=black][back=white]过滤技术是以压力作为推动力的一种膜分离技术[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]膜孔径为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](20 μm)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。其分离机理主要有两种[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]:(1)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]机械筛分[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]通过膜截留比膜孔径大或与其孔径相当的微生物颗粒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white] (2)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]吸附截留[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]当微生物穿过膜表面进入膜内部时[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]利用膜自身的物理化学性质和静电引力使微生物沉积在膜孔侧壁或膜内部基质上。根据膜孔径大小[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]过滤技术可被分为微滤、超滤、纳滤和反渗透[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在微生物前处理过程中主要采用微滤和超滤技术。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、微滤法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]A[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]．传统微滤法[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]微滤是在压力驱动下利用孔径为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.05[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]10 μm[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]的微孔膜截留直径在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.1[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]10 μm[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]的颗粒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]多用于悬浮物、细菌及大尺寸胶体的膜分离过程。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Shrestha[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等采用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.40 μm[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]聚碳酸酯过滤器和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检测技术相结合的方法对芝加哥[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]8[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]处海滩水样中的肠球菌和大肠埃希氏菌进行了检测。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Haugland[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.40 μm[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]孔径的聚碳酸酯过滤器对美国密歇根州休闲水域水样进行过滤后[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]分别通过培养和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]技术对大肠埃希氏菌进行了检测。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Wolf-Baca[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.20 μm[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]孔径的混合纤维素酯膜过滤器过滤水样[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]提取[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]DNA[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]后用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检测到了热水中的嗜肺军团菌和大肠埃希氏菌。在过去的研究中[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]常用的滤膜主要包括混合纤维素酯膜、醋酸纤维素膜、硝酸纤维素膜和聚碳酸酯膜[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]其中混合纤维素酯膜截留效果最好。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]B[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]．改性微滤法[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]传统的微滤技术因为膜孔径较大[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]只适用于去除体积较大的致病微生物[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]如致病菌、原虫[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]),[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]不适用于去除病毒。基于吸附[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]-[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]洗脱原理利用电正性或电负性膜则可以通过电荷相互作用将病毒颗粒吸附到过滤介质中[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]然后通过调整溶液的[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]pH[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]将病毒洗脱下来。该方法已被广泛用于富集来自水环境的各种病毒。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](1)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]电正性膜过滤法[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]电正性膜过滤法是依赖水中病毒颗粒固有的负电荷来实现病毒的富集。电正性膜过滤器主要包括玻璃[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]/[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]纤维素过滤器[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](1MDS)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和纳米氧化铝[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]/[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]玻璃过滤器[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](NanoCeram)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Soto-Beltran[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等分别采用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]NanoCeram[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1MDS[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]从处理的污水中回收脊髓灰质炎病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],NanoCeram[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]方法的病毒回收率为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]57%,1MDS[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]方法的病毒回收率为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]23%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Ikner[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等采用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]NanoCeram[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]过滤器与超滤相结合的方法对水中的埃可病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、柯萨奇病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]B5[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、脊髓灰质炎病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、腺病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]2[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和大肠埃希氏菌噬菌体[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]MS2[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]进行富集[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]回收率分别为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]83%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]77%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]66%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]14%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]56%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。电正性过滤器的价格昂贵[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]其优点是操作简便[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]无需进行预处理[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]且滤芯的选择性多[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在大多数情况下能够过滤大量水体[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](1 000 L)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]而不会堵塞[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]浑浊度较高的水样除外。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](2)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]电负性膜过滤法[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]病毒在天然水体中通常带负电[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]但在阳离子如[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Mg2+[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Al3+[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]存在或酸性条件下[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]其净电荷变为正电荷时[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]可利用静电作用将病毒吸附在电负性膜上[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]随后通过洗脱获得病毒颗粒。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Haramoto[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等开发了一种结合[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Al3+[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]或[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Mg2+[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]使用电负性过滤器的方法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]并成功从[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]250[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]500 mL [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]超纯水、瓶装水、自来水、河水和池塘水中富集人类诺如病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]回收率分别为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]186%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]167%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]80%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]15%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]39%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Victoria[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等使用电负性膜过滤与[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检测相结合的方法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]实现了在不同环境水体中对人类星状病毒和诺如病毒的富集。电负性膜过滤法的优点在于其价格低廉[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white] [/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]然而该方法在过滤前需要对水样或过滤器进行预处理[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]不适用于大体积水样的过滤和常规监测。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]C[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]．超滤法[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]超滤是一种基于粒度排斥原理实现在大体积水样中同时富集多种致病微生物的前处理技术[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]主要包括死端超滤和错流超滤两种方式。该方法于[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]20[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]世纪[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]70[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]年代作为一种富集水中病毒的方法首次被提出。超滤膜的平均孔径在[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.001[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1.000 μm[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。在过去[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]10[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]年里[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]已有大量研究证明超滤是一种富集饮用水和水源水中致病微生物的强大技术。[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]（[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]1[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]）死端超滤法[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]死端超滤是将水置于膜的上游[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在压力差的推动下使大于膜孔的致病微生物被膜截留的一种方法。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Mull[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等利用死端超滤法对[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]40 L[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]平均浑浊度为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]18 NTU[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]的湖水中的多种微生物进行富集[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]其中[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]大肠埃希氏菌和肠球菌的平均回收率分别为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]81%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]85%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Inkinen[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等对芬兰[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]5[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]个不同的饮用水分配系统的[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]108[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]个水样采用死端超滤法浓缩后再进行核酸提取[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]使用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]检测到古菌群落的存在。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Pascual-Benito[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等采用死端超滤法对西班牙加泰罗尼亚两个供水中心的水样进行粪便指示生物[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](FIO)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和病原体富集[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]平均回收率为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]43.8%±17.5%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。死端超滤法可以对大体积水样中的致病微生物进行回收[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]但是随着过滤时间的延长[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]被截留物质将在膜表面富集[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]过滤阻力增加[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]在操作压力不变的情况下[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]膜的渗透速率将下降。因此[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]死端超滤法只能间歇进行[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]必须周期性地清除膜表面的污染物层或更换膜。[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]（[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]2[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]）错流超滤法[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][back=white] [/back][/font][font=宋体][color=black][back=white]错流超滤是指在错流过滤过程中[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]膜表面同时受到两个力的作用[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]即垂直于膜表面的力与平行于膜表面的力。与死端超滤法相比[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]错流超滤法膜表面污染相对较轻[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]膜通量更稳定[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]可以实现过滤过程的连续运行。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Gibson[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等为了对加纳南部农村社区饮用水源的微生物质量进行更广泛的评估[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]采用了错流超滤和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]相结合的方法对[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]100 L[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]地下水、饮用水和地表水样品进行测定[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]地下水和地表水中大肠埃希氏菌的回收率分别为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]34%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]67%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white](120%)[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Kahler[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等使用错流超滤法从地下水和地表水中富集了大肠埃希氏菌、产气荚膜梭菌、微小隐孢子虫、埃可病毒以及噬菌体[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]结果表明[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]5[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]种肠道致病微生物的平均超滤回收率为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]66%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]～[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]95%[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]Ryu[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]等采用错流超滤和[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]q[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/jp][color=#3333ff]PCR[/color][/url][/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]相结合的方法对德克萨斯州[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]3[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]个匿名废水处理厂的[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]94[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]个水样中的细菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]总大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white])[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]、原虫[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]隐孢子虫和贾第鞭毛虫[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white])[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]和病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]([/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]男性特异性噬菌体、体细胞噬菌体和人腺病毒[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white])[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]进行检测[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white],[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]该方法检出限为[/back][/color][/font][font='Times New Roman',serif][color=black][back=white]0.004PFU/mL[/back][/color][/font][font=宋体][color=black][back=white]。[/back][/color][/font]

都有哪些公司做高效过滤器检测系统？一套高效过滤器检测系统大概要多少钱？很多检测公司都是用TDA-5B气溶胶发生器和TDA-2H光度计，价格怎么样？还有就是做高效检漏一定要用这些仪器吗，特别是要用气溶胶发生器使上游浓度一定要达到3*10^4？平常条件下，直接用粒子计数器扫描行不行的通？问题有点多，请专业人士多多指点！！

NY/T 761检测有机磷时，微孔滤膜过滤时需要弃去初滤液吗？

摘要： 　　微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常用的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。　　概述：　　一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其他生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长通常指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和他们的生长抑制紧密相关。所以有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，可以从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。　　生长量测定法　　体积测量法：又称测菌丝浓度法。　　通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。　　称干重法：　　可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。　　比浊法：　　微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm 处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。　　菌丝长度测量法：　　对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。微生物计数法　　血球计数板法:　　血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1 mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。　　染色计数法：　　为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。　　比例计数法：　　将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。　　液体稀释法：　　对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN（most probably number）得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。　　平板菌落计数法：　　这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9cm的平板上出现50-500个菌落为宜。但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。　　试剂纸法：　　在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。　　膜过滤法：　　用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。　　生理指标法：　　微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。测定含氮量：　　大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。　　测定含碳量：　　将少量（干重0.2-2.0 mg）生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在100 0C下加热30分钟后冷却。加水稀释至5毫升，在580nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。　　还原糖测定法：[/si

我有一种药物需要检测其中是否含有特种微生物(大肠埃希菌,金黄葡萄球菌等),但是他们的抑制作用非常强,用膜过滤法时冲洗量达到2000都不行,请问有其他什么好办法吗?

TOC检测原水样品你们过滤吗？ 我们的管理部门要求我们TOC检测的原水不能过滤，澄清以后直接检测NPOC。可以吗？不过滤不怕仪器堵塞吗 ？ 我们一般是检测过滤样品的NPOC为TOC。没有用TC-IC的做法。

1. 包装材料的大肠埃希菌检查？答：根据包装材料的不同，大肠埃希菌的检查方法大致有两种，一种是将浸提液合并后，取一部分，接种胆盐乳糖培养基进行检查；另一种是将浸提液合并后，薄膜过滤，然后按规定的方法检验。2. 抗真菌药品的微生物限度检查法答：这类产品的霉菌和酵母菌计数方法需要进行调整，可以根据产品剂型的不同，选择薄膜过滤法或培养基稀释法等方法。3. 为什么在日常样品检测中还需要做阳性对照（国外不需要）？答：为了确保每一次检测对可能存在的微生物都是有效的。4. 对于同一个品种，药典为什么不规定统一的检测方法？答：本版药典进行过这样的尝试，也有某些品种已经收载了统一的检测方法，如注射用头孢类抗生素的无菌检查。之所以没有大量收载，主要是由于检测方法还没有经过必要的复核。将微生物检验的统一方法收载在品种的各论项下，始终是努力的方向。5. 梭菌检查中需置厌氧条件下培养48小时，是否指在厌氧培养箱中？答：需要在厌氧培养装置中进行培养，未必一定是厌氧培养箱。6. 控制菌检查方法验证时，采用多种方法均未检出控制菌，如何处理？答：在确保所使用的各种方法都没有错误的情况下，如果仍无法使试验菌生长，则应该采用薄膜过滤法进行检查。理由是该方法能够最大程度地去除产品的抑菌作用。7. 常规的监督抽样检品（包括原料）在进行微生物限度检查时，是否一定要进行活螨检查并在原始记录与报告书中体现？答：需要进行检查。可以在原始记录中体现，报告书上可以不出现，除非当发现有活螨检出。8. 药包材微生物限度检查规定了合格质量水平，通常产量下取样8个，要求8个瓶子均符合规定，如何进行？答：每个瓶子分别进行实验。9. 大肠埃希菌具体操作规程？答：参见中国药品检验标准操作规程。10. 动物组织及动物类原药材的提取物入药，是否需要检沙门菌？答：需要进行沙门菌检查。11. 关于中国药典菌落计数结果的判断还存在疑义，望能举例说明。答：不清楚所指的存在疑义是指哪方面。2010年版对结果报告进行了较大篇幅的修订，目前的规定应该比05版更为清晰、明确。12. 需做沙门菌检验样品量的确定？答：10g（ml）用于样品计数检验和其他控制菌检查，10g（ml）用于沙门菌检查，10g（ml）用于沙门菌检查的阳性对照。需要进行沙门菌检查的样品，检验用量应为30g（ml）。13. 日常的实验室装备能否达到梭菌无氧的培养要求？答：完全可以。可以采用厌氧培养盒（罐）。14. 如果一个产品有两个规格，是否可以取其中之一做阳性对照？答：每个规格均需进行阳性对照。15. 细菌数为100g/g的，样品稀释级只做1:10,1:100的倍数就可以了吗？答：可以。16. 培养时间3天，5天，可理解为72小时，120小时吗？答：可以。这样更为严谨。17. 中国药品检验标准操作规范“已做验证试验的供试品，在检查时刻不必再做阳性对照”如何理解？答：该标准操作规范中在无菌检查法中规定“供试品无菌检查应进行阳性对照试验”，表明不论是否进行了方法验证，在产品的每一次检验过程中，还必须进行阳性对照。在控制菌检查的大肠埃希菌项下，指出“已做验证试验的供试品，在该供试品检查时不必再作阳性对照”。该规定仅适用方法验证与供试品检查同时开展的情况。2005年版药典和2010年版药典在控制菌检查中均对阳性对照试验有明确规定，“进行供试品控制菌检查时，应做阳性对照试验。”产品检验中应以药典规定为准。18. 无菌检查和微生物限度检查中，产品中规定的溶解液是否可以换成其他的溶液？答：可以。19. 制剂通则中，没有微生物检查项目的，是否可不进行微生物项目检测？答：可以。主要是二部制剂通则中口服片剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂。20. 在细菌、霉菌和酵母菌计数中，适用性检查细菌是培养48小时，霉菌和酵母菌是培养72小时，供试品检查中细菌是培养3天，霉菌和酵母菌是培养5天，那方法验证中应参照哪个时间进行培养。答：应按照供试品检验时的条件，即细菌3天，霉菌和酵母菌5天。21. 测定纯化水微生物限度时，每张滤膜过滤量是多少合适？需要先稀释吗？过滤完后需不需要冲洗？假如我取10ml纯化水通过双杯体封闭式薄膜过滤器过滤，每张滤膜上的计数是以5ml为单位还是10ml为单位？答：过滤量应以培养后出现的微生物数不超过100cfu/膜为标准。一般可不稀释。不需要冲洗。每张滤膜的过滤量为5ml。22. 药典中关于纯化水的微生物限度是：细菌、霉菌及酵母菌总数每1ml不得过100个。这句话的意思是细菌总数每1ml不得过100个，霉菌及酵母菌总数不得过100个，还是细菌+霉菌+酵母菌总数每1ml不得过100个。如果是三者总数的话，那细菌总数限度是多少？霉菌及酵母菌总数限度又是多少？答：是总数不得过100个。没有必要考虑各自的限度值。

[color=#DC143C][size=4][font=黑体]食品微生物快速检测方法[/font][/size][/color][color=#DC143C][size=4][font=黑体]微生物的快速检测方法按检出时间可分为三类：[/font][/size][/color] 第一类方法是在比相应的传统方法短的时间 内得出结果。此类方法的典型例广是：膜过滤一微 菌落一荧光法。具体方法是将一定量的样品(或样 品稀释液)经膜过滤(过滤膜φ巾≤0．45μm)，再过滤 膜放在培养基上或放在浸行液体培养基的厚纸板 上在适宜温度条件下培养一段时间，然后将膜放 在浸过0．1％ANS(8一苯胺基萘磺酸镁)溶液的纸 片上作用10分钟，将膜揭下，在80℃条件下干燥 5—10分钟，最后在100倍的荧光显微镜(入=340~ 380nm)下计数蓝绿色菌落的数目。 　　对于不同样品，膜过滤一微菌落一荧光法使 用的培养基和培养时间不同。检验凝乳中酵母菌 时，可采用含琼脂的固体培养基，也可放在2ml双 料液体培养基浸润的纸片上培养15—24小时。检 验食品中需氧性细菌数时，可用琼脂计数平板，也 可用营养肉汤或酪蛋白胨一豆粉蛋白胨液体培养 基，培养8小时。食品中酵母和霉菌的选择性检测 可使用添加100ppm氯霉素的麦芽汁提取物琼脂培 养基，或添加100ppm氯霉素的双料麦芽汁提取物 液体培养基。糖果中耐渗透酵母的检测可采用50% 葡萄糖液体培养基，培养时间为48小时(菌数10个／克)—72小时(菌数≤10个／克)。

ICP测器吹扫为三级过滤器，以便最大限度保护检测器。必须使用仪器纯氩气，无潮气、微粒和其他污染物。检测器吹扫干燥剂过滤器检测器吹扫分子筛过滤器,检测器吹扫微粒过滤器,主要在面板内，大家了解这个吗？还是不同ICP有区别？

想要进行过滤布选型，已经检测了几种过滤布的透气量，发现透气量数值差不多但是使用效果很大的不同。想进行更为细致的检测，查资料说可以检测过滤布最大通过粒径和加压滤布性能，不知道国内哪里能做？哪里比较权威？检测费用是多少？请知道的告知一下。不胜感激[em09511]

吸取微生物检样时，总堵塞吸管，怎么办？是用什么过滤 ？

[size=4]节选自《中国药品检验标准操作规范》2005年版无菌检查、微生物限度检查的所有操作均需在严格控制微生物污染的环境下进行，操作环境的无菌保证程度将直接影响无菌检查结果，为了保证无菌检查用洁净室（区）环境的稳定性，确保检查结果的可靠性，对洁净室（区）的环境质量采取合理的控制措施和评价方法是必要的。无菌检查、微生物限度检查应在环境洁净度10000级和局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行，其全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。单向流空气区、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。隔离系统按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。无菌室应采光良好、避免潮湿、远离厕所及污染区。面积一般不超过10平方米，不小于5平方米；高度不超过2.4m。由1~2个缓冲间、操作间组成（操作间和缓冲间的门不应直对），操作间与缓冲间之间应具备灭菌功能的样品传递箱。在缓冲间内应有洗手盆、毛巾、无菌衣裤放置架及挂钩、拖鞋等，不应放置培养箱和其他杂物；无菌室内应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。墙壁与地面、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，不留死角。操作间内不应安装下水道。无菌操作室应具有空气除菌过滤的单向流空气装置，操作区洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室内温度控制18~26℃，相对湿度45%~65%。缓冲间及操作室内均应设置能达到空气消毒效果的紫外灯或其他适宜的消毒装置，空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5Pa，洁净室（区）与室外大气的静压差大于10Pa。无菌室内的照明灯应嵌装在天花板内，室内光照应分布均匀，光照度不低于300lx。缓冲间和操作间所设置的紫外线杀菌灯（2~2.5W/平方米），应定期检查辐射强度，要求在操作面上达40/μW/平方厘米，不符合要求的紫外杀菌灯应及时更换。无菌室应每周和每次操作前用0.1%新洁尔灭或2%甲酚液或其他适宜消毒液擦拭操作台及可能污染的死角，开启无菌空气过滤器及紫外灯杀菌1小时。在每次操作完毕，同样用上述消毒溶液擦拭工作台面，除去室内湿气，用紫外灯杀菌半小时。无菌室的洁净度检查无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数，以此来判断无菌室是否达到规定的洁净度，常有沉降菌和浮游菌测定方法。沉降菌检测方法及标准；以无菌方式将3个营养琼脂平板带入无菌操作室，在操作区台面左、中、右各放1个；打开碟盖扣置，平板在空气中暴露30分钟后将碟盖盖好，置32.5℃±2.5℃培养48小时，取出检查，3个平板上生长的菌落数平均不超过1个。浮游菌检测方法及标准：用专门的采样器，宜采用撞击法机理的采样器，一般采用狭缝式或离心式采样器，并配有流量计和定时器，严格按仪器说明书的要求操作并定期校验，采样器和培养皿进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌，使用的培养基为营养琼脂培养基或药典认可的其它培养基。使用时，先开动真空泵抽气，时间不少于5分钟，调节流量、转盘、转速。关闭真空泵，放入培养皿，盖上采样器盖子后调节缝隙高度。置采样口于采样点后，依次开启采样器、真空泵，转动定时器，根据采样量设定采样时间。全部采样结束后，将培养皿置32.5℃±2.5℃培养48小时，取出检查，浮游菌落数平均不得过5个/平方米。每批培养基应选定3只培养皿做对照培养。无菌操作台面或超净工作台还应定期请有关部门检测其悬浮粒子，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪）检测尘埃粒径≥0.5μm的粒数不得超过3.5个/升，≥5μm的粒数为0，空气流速应≥0.35m/s，可根据无菌状况必要时置换过滤器。[/size]

gb/t32470-2016检测土臭素时，天然水样要求过滤,要求经过0.45um滤膜过滤（抽滤？）。问题1，抽滤是否会将土臭素和异莰醇抽走，降低被测浓度？问题2，既然是顶空富集，萃取纤维与被测溶液不直接接触，为啥还要过滤？问题3，萃取纤维如何放进色谱进样口？直接放进衬管吗？

广泛应用于研究单位、检验检疫机构、质量监控机构、天然矿泉水行业、饮用水行业、制药行业、饮料行业等部门的滤膜法微生物检测。本公司生产的MFS系列不锈钢过滤系统具有安全可靠，性能优越、外形美观、环保、高效、节能等优点，是微生物研究领域、微生物质量监控检测实验室必备设备之一。

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检测食品中微生物的仪器主要包括以下几种：　　无菌均质器：这种仪器广泛应用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理，特别适合于微生物检测样本的制备。它具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点。样本装在特制的一次性无菌均质袋中，不与仪器接触，有助于预防交叉污染。　　微生物鉴定系统/药敏分析仪：细菌鉴定药敏分析仪适用于对病原微生物进行种类鉴定和体外抗生素敏感试验、分析。其检测范围广泛，菌种库包含2000种以上，可鉴定临床致病菌550种以上，测试200种以上药物的敏感性。这种仪器能够实现细菌鉴定的自动化、标准化和药物试验的定量化，对于食品安全国家标准GB4789系列所要求的食源性致病菌(如弯曲杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌等)的分离鉴定非常有用。　　微生物检测仪：便携式微生物检测仪广泛应用于活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、粪肠球菌(链球菌)、酵母(酵母菌)等微生物的快速检测。这种仪器便携一体化，防水抗压，可随时随地进行检测。　　微生物限度仪：如JC-WX600微生物限度检测系统，采用不锈钢金属材料制成，配有内置隔膜液泵，不需外接抽滤瓶，液体直接通过隔膜液泵排除，减少了抽滤瓶使用上的繁琐，避免了连接不好造成抽滤速度慢等缺点。　　以上这些仪器都是食品微生物检测中常用的设备，它们为食品的安全和质量控制提供了强有力的技术支持。

大家好！我想请教大家一下：我现采用滤膜法检测功能饮料，饮料外观颜色是黄色的，过滤后滤膜很黄，这样会影响计数吗？是不是应该去除色素再过滤呢？有什么方法可以去除色素呢？

在看药典薄膜过滤法微生物方法验证时，是在滤膜最后一次冲洗完加入菌，再与阳性对照比较看回收率，想问的是，是不是这样做完，回收率合格方法验证就结束了，不用再验证冲洗次数冲洗量是不是对菌有损伤什么的吗，因为最后一次冲洗完再加菌，回收率合格是不是只能说明供试品的抑菌性被消除了，但不能说明供试品中如果有菌，其数量是不是能准确的被检验出来？ 一个论坛朋友向我提的问题。

在甲醛含量的检测（乙酰丙酮法）中,标准要求用2号坩埚漏斗，但滤液是悬浊液，用4号较清澈，但速度太慢，可不可以加个过滤泵类的东西呢？怎样加呢？直接用纤维含量的过滤泵太大本来就10ml的东西倒出来没多少了，用小柱造价太高了。请教各位大侠有何建议？？[em09512]

(二)泌尿系统感染病原菌的快速检测　　因泌尿系统感染的中段尿样本中的细菌量相对很高, 中段尿样本也是MALDI-TOF MS直接检测的理想选择[30], 并且常常是单一菌种感染, 避免了MALDI-TOF MS在鉴定混合菌样本的不足[31]。泌尿系统感染是人类常见的感染性疾病, 临床泌尿系统感染最常见的病原菌为大肠埃希菌(70%~95%)、腐生葡萄球菌(5%~10%)以及其它肠杆菌科细菌, 如奇异变形杆菌和肺炎克雷伯菌。有研究表明MALDI-TOF MS对尿液样本中这些细菌的鉴定效率和准确率要优于传统鉴定方法和其他鉴定系统[7, 32, 33]。1.鉴定效能 FERREIRA等[7]选取尿液中细菌大于1× 105 cfu/mL的样本进行直接的MALDI-TOF MS鉴定, 结果显示尿液样本经过差速离心法处理后, 可将91.8%的菌株鉴定到种、92.7%的菌株鉴定到属的水平。　　杨溪等[33]使用MALDI-TOF MS技术对临床收集到的1 040份尿液样本进行直接快速检测, 共鉴定出含细菌的样本526份, 其中尿细菌培养菌落数≥ 1× 105 cfu/mL, 培养出1种/2种菌的尿液样本MALDI-TOF MS的直接鉴定率分别为92.7%(430/464)和75%(96/128)。MALDI-TOF MS直接检测法的鉴定结果与尿细菌培养法鉴定出的细菌菌种一致, 符合率为100%。2.与流式细胞术联用 怀疑泌尿系统感染的尿液样本一般经离心后取沉淀直接进行检测, 但考虑到临床上有60%~80%的尿液样本是阴性的, 为了减少分析的时间和人工的工作量, 有学者将MALDI-TOF MS与流式细胞术联用检测, 用流式细胞术筛除细菌数量不足的尿液样本, 而MALDI-TOF MS用来检测筛选结果为阳性的尿液样本, 取得了良好的鉴定效果[34, 35]。MARCH ROSSELLó 等[34]建立了这样一种微生物鉴定程序:先用流式细胞仪进行菌落计数筛查出单一细菌阳性的尿液样本, 然后再进行MALDI-TOF MS检测, 发现细菌数在1× 107 cfu/mL时是足够的细菌浓度, 有87.5%的敏感性, 而细菌数在(1× 105)~(1× 107)cfu/mL之间的样本经过4 h的预增菌, 得到用于分析的足够的细菌数量后, 可以达到91.7%的敏感性。3.细菌含量对鉴定结果的影响 由于中段尿中病原菌数 2.0), 而随着样本中细菌数的降低, 鉴定成功的比例和鉴定分数也在下降, 当菌落数 1× 104 cfu/mL的中段尿样本, 应用MALDI-TOF MS直接检测即可取得满意的鉴定效果。4.中段尿样本直接检测的新方法 DEMARCO等[31]近期描述了一种透析过滤的方法, 通过脱盐、分馏、富集等步骤对100例阳性尿液样本在MALDI-TOF MS分析前进行了预处理, 实验结果表明这种预处理方法能够正确地鉴定阳性尿液样本, 并且正确分类了所有临床相关菌尿症的阴性尿液样本, 包括一组污染的尿液样本和一组临床上无关紧要的定植菌。敏感性和特异性分别是67%和100%。5.中段尿样本直接检测的不足之处 与直接检测培养阳性的血样本一样, 对于含有2种或2种以上细菌感染的中段尿样本, MALDI-TOF MS常常表现为鉴定能力不足[33, 35] 尿液蛋白质如α -防御素[8]会造成鉴定结果不能正确匹配数据库 对酵母菌的鉴定能力也有待于进一步提高 对于核糖体蛋白序列差异很小的菌种也常常不能区分。(三)其它无菌体液　　MALDI-TOF MS直接检测和鉴定其它无菌体液样本如脑脊液、胸腹水和关节液等中细菌的报道尚不多。NYVANG HARTMEYER等[37]首次报道了通过直接将脑脊液样本离心取上清直接进行MALDI-TOF MS分析, 肺炎链球菌性脑膜炎可以在30 min内做出诊断, 为后续治疗方案的选择和结果的解释提供了重要的参考依据。SEGAWA等[38]也用同样的方法对一例肺炎克雷伯菌引起的脑膜炎做出了诊断, 但同时也指出在实际应用中能获得的样本量少, 细菌数少可能会限制它的应用。另外, 还可将无菌体液样本转移到血培养瓶中进行孵育, 待报阳后进行检测也是可行的。有研究应用MALDI-TOF MS检测了46份液体, 包括移植养护液、关节液、深部脓疱样本、骨小孔样本用血培养基孵育, 发现44/46(96%)能鉴定到种的水平, 余下的2份被鉴定到属的水平[18]。四、总结与展望　　MALDI-TOF MS是一种简单、快速、高通量和高效的微生物鉴定手段, 在临床样本直接检测方面较传统的鉴定方法具有更大的优势, 能显著降低样本检测的周转时间和成本, 但尚存在着一些不足之处, 主要表现在:(1)MALDI-TOF MS在检测和鉴定细菌方面的敏感性还不高, 不能直接鉴定患者血样本中的病原菌(细菌数量太少) (2)对于一些核糖体蛋白差异较小的细菌用其辨别有较大的困难 (3)目前的研究都有各自不同的操作过程, 在样本处理、质谱图采集和分析等方面没有统一的标准, 可能会影响分析结果在实验室内和实验室间的可重复性 (4)标准的鉴定参考图谱数据库尚不够完善, 需要进一步拓展 (5)对一些细胞壁难以破坏的细菌(如革兰阳性菌、酵母菌)和混合菌等的鉴定能力还不够高。但是相信随着更加有效的样本预处理方法、更加严格的检测过程控制和更高分辨率的图像处理技术的实现, MALDI-TOF MS用于直接检测临床样本中的微生物会有更广阔的前景。

10个／克)—72小时(菌数≤10个／克)。 第二：类快速检测方法一般在6—12小时内得 出检验结果。典型的方法有放射性示踪法和阻抗 测定法。 放射性示踪法是以放射性标记物作碳源，测 定经微生物发酵产生的有放射性标记的CO2量，从 而确定样品中含菌量。测定菌数小于1000个／毫 升的样品，大约需要7小时。 阻抗测定法可根据食品的微生物污染程度在 一天内完成检测。这种方法依据的原理是：微生 物在培养基中不断缯殖，其代谢产物的增加会导 致液体培养基中电阻的变化，使介质的导电性增 强，即电阻减小。只有当微生物数目达到106~107 个／毫升时，这种电阻的变化才能被记录到。样品 最初的含菌量越高，电阻的可检测变化就越容易 被确定。电阻或导电性变化达到可检测的时刻，称 为检出时间。 阻抗测定法可以用于各种食品的总菌数测 定。鲜肉表面菌数为107个／cm2时。检出时间为2小 时；作猫狗粮的动植物性原料中需氧菌检测，约需 要6小时(106个／克)—10小时(105个／克)；色拉中 乳酸菌的检测需要15—20小时(104个／克)；浓缩 果菜汁小酵母菌检测约需要9—15小时(104个／毫 升)；蔬菜汁小芽孢杆菌营养体的检测约需要10小 时(104个/毫升)~18小时(102个／毫升)。 应注意，对代谢不活跃的微牛物不能用阻抗 代谢法测定。除了检测需氧菌菌数，这一类方法还 可以进一步用于食品中非致病菌和致病菌的选择 性检测及其它领域。例如，抗生素—抗药性检测、 消毒剂检测、维生素检测、药物和化妆品中微生物 检测及生物胺的检测等方面。 第三类食品中微生物快速检测的方法一般可 以在1~3小时内得出结果，其中较为典型的方法 有：Limulus—测试法，ATP测定法，直接表面荧光 过滤技术以及氧气消耗测定法等。