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血清活性浓度旋光仪

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血清活性浓度旋光仪相关的论坛

  • 旋光仪检测结果的影响因素

    (1)溶剂旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外,还与光线透过物质的厚度,测量时所用光的波长和温度有关。如果被测物质是溶液,影响因素还包括物质的浓度,溶剂也有一定的影响。因此旋光物质的旋光度,在不同的条件下,测定结果通常不一样。(2)温度温度升高会使旋光管膨胀而长度加长,从而导致待测液体的密度降低。另外,温度变化还会使待测物质分子间发生缔合或离解,使旋光度发生改变。不同物质的温度系数不同,一般在-(0.01~0.04)℃之间。为此在实验测定时必须恒温,旋光管上装有恒温夹套,与超级恒温槽连接。(3)浓度和旋光管长度在一定的实验条件下,常将旋光物质的旋光度与浓度视为成正比,因为将比旋光度作为常数。而旋光度和溶液浓度之间并不是严格地呈线性关系,因此严格讲比旋光度并非常数,旋光度与旋光管的长度成正比。旋光管通常有10cm、20cm、22cm三种规格。经常使用的有10cm长度的。但对旋光能力较弱或者较稀的溶液,为提高准确度,降低读数的相对误差,需用20cm或22cm长度的旋光管。

  • 有人用ICP-MS测量血清锂浓度的么!(帮同学问)

    正常人血清锂浓度约1.4ug/L左右,检测值时高时低,而且重复性也不好!所以想请教大家几个问题:1. 在检测血清标本时,标本处理需要特殊处理要求吗?2. 像这样正常人血清锂浓度是不是超过ICP-MS检测范围。3. 如果血清锂浓度在ICP-MS检测范围内,那检测结果重复性不好可能存在哪些原因?

  • 旋光仪和折光仪的区别?

    [color=#333333]旋光仪可以测定溶质具有旋光性的溶液的浓度[/color][color=#333333]折光仪可以测定折光率与浓度有相关性的溶液的浓度[/color]

  • 【分享】旋光仪的用途及测定范围

    旋光仪是测定物质旋光度的仪器。通过对样品旋光度的测定,可以分析确定物质的浓度、含量及纯度等.自动旋光仪采用光电检测器及电子自动示数装置,具有体积小、灵敏度高,没有人差,读数方便等特点。对目视旋光仪难以分析的低旋光度样品也能适应。因此广泛应用于医药、食品、有机化工等各个领域。一、旋光仪测定浓度或含量先将已知纯度的标准品或参考样品按一定比例释成若干只不同浓度的试样,分别测出其旋光度。然后以横轴为浓度,纵轴为旋光度,绘成旋光曲线。一般,旋光曲线均按算术插值法制成查对表形式。测定时,先测出样品的旋光度,根据旋光度从旋光曲线上查出该样品的浓度或含量。旋光曲线应用同一台仪器,同一支试管来做,测定时应予注意。二、旋光仪测定比旋度、纯度先按药典规定的浓度配制好溶液,依法测出旋光度,然后按下列公式计算出比旋度(α),式中:α— 测得的旋光度(°)C— 溶液的浓度(g/ml) L— 溶液的长度(dm)由测得的比旋度,可求得样品的纯度。三、旋光仪测定国际糖分度根据国际糖度标准,规定用26g纯度糖制成100ml溶液,用200㎜试管,在20°C用钠光测定,其旋光度为+34.626,其糖分度。

  • 光学仪器旋光仪影响因素

    (1)溶剂 旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外,还与光线透过物质的厚度,测量时所用光的波长和温度有关。如果被测物质是溶液,影响因素还包括物质的浓度,溶剂也有一定的影响。因此旋光物质的旋光度,在不同的条件下,测定结果通常不一样。  (2)温度 温度升高会使旋光管膨胀而长度加长,从而导致待测液体的密度降低。另外,温度变化还会使待测物质分子间发生缔合或离解,使旋光度发生改变。不同物质的温度系数不同,一般在-(0.01~0.04)℃之间。为此在实验测定时必须恒温,旋光管上装有恒温夹套,与超级恒温槽连接。  (3)浓度和旋光管长度 在一定的实验条件下,常将旋光物质的旋光度与浓度视为成正比,因为将比旋光度作为常数。而旋光度和溶液浓度之间并不是严格地呈线性关系,因此严格讲比旋光度并非常数,旋光度与旋光管的长度成正比。旋光管通常有250px、500px、550px三种规格。经常使用的有250px长度的。但对旋光能力较弱或者较稀的溶液,为提高准确度,降低读数的相对误差,需用500px或550px长度的旋光管。 (4)[b]还有不按操作规程进行乱操作,而引起误差的人为操作因素![/b]

  • 【求助】血清标本用NMR做H谱,内标TSP老是出不来,浓度应怎样才对?

    大侠们,小弟刚接触代谢组学,最近正用NMR测血清中的代谢物谱,试了好几次TSP都很不明显。刚开始是TSP15mg加入100ml双蒸水配成0.015%TSP溶液,血清400微升,加0.01%TSP溶液80微升,再加D[sub]2[/sub]O20微升,震荡10S后加入核磁管中,发现一点TSP峰都没有。查文献说终浓度在0.01%以上,有些甚至高达0.1%,很多是0.016%左右,很不一致。我们增加浓度,用TSP100mg加入100ml双蒸水配成0.1%TSP溶液,其他同上,终浓度是0.016%,结果还是很不明显,再用480微升0.1%TSP加重水20微升做也就一点点高的峰。做实验的老师也说不出什么原因,我担心是TSP会不会质量不行了,会不会失效啊,配溶液的时候发现有些结块,请大家帮我看看问题可能在哪里?先谢啦!

  • HPLC测定血清中营养素含量,如何确认待测血清营养素浓度在所绘制的标准曲线内呢?

    各位老师好!最近我刚开始学习HPLC,沿用的其他课题组的方法测定血清中的营养素含量,但是标准曲线绘制完老师让我确认一下血清中的营养素浓度是否在我绘制的标准曲线范围内,请问如何确认呀?是使用单点法测定嘛?需要用多少血清样本呢?我没有实验基础,也没有师兄师姐带,指导老师也是其他课题组的,现在真的一头雾水,烦请各位老师指导指导,答疑解惑,真心感谢????

  • 68.1 反相高效液相色谱法测定血清中卡马西平浓度

    68.1 反相高效液相色谱法测定血清中卡马西平浓度

    作者: 曾明辉 吴正中 陈秋虹 童荣生 何林 作者单位: 四川省人民医院药剂科【摘要】 目的:快速测定血清中卡马西平的浓度.方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-水-乙腈(40:45:15),流速为1.2 mL/min,检测波长为285 nm,内标物为硝西泮,柱温40℃.结果:回收率为99.7%~101.5%,日内和日间RSD均≤6.9%;标准曲线相关性良好(r=0.999 1).对65例患者作血清浓度监测,临床效果满意.结论:RP-HPLC法可作为卡马西平的血药浓度监测的常规方法. http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2012/09/201209281008_393526_2379123_3.jpg

  • 【原创大赛】旋光法测试味精中谷氨酸钠的含量

    【原创大赛】旋光法测试味精中谷氨酸钠的含量

    旋光法测试味精中谷氨酸钠的含量1. 原理 味精中谷氨酸钠含量是味精行业的一个重要指标,其含量的高低直接决定味精的好坏。谷氨酸钠分子结构中有不对称原子,具有光学活性,因此用旋光仪测定其溶液旋光度,便可换算出谷氨酸钠的含量。2. 测量2.1 仪器和试剂P850A全自动旋光仪(海能仪器)旋光管(200mm)电子天平(感量1mg)100mL容量瓶味精(市售)浓盐酸(分析纯)2.2 操作过程2.1 精确称取样品10g(精确至0.0001g),加少量水稀释并转移至100mL容量瓶中,变搅拌边加入16mL分析纯浓盐酸,冷却后,定容至100mL容量瓶中。2.2 开启旋光仪,待仪器稳定后,用配制试剂的蒸馏水校正零点。2.3 用待测溶液将旋光管洗涤三次,然后注满待测液,置于旋光仪中(不能有气泡),分别测试试样的旋光度和比旋度并记下,同时记下测试时溶液的温度。2.3 结果计算旋光度的计算公式:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308161017_457948_2599013_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308161017_457949_2599013_3.jpg比旋度的计算公式:http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2013/08/201308161017_457950_2599013_3.jpg3. 结果与讨论 表1 味精中谷氨酸钠的旋光度和浓度测试结果T(℃)α(°)X(%)平均值(%)相对平均偏差(%)19.72.50599.599.60.08%19.92.50699.620.1[size=12p

  • 影响光学仪器旋光仪的几种因素

    [font=微软雅黑][font=微软雅黑]([/font]1)溶剂[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑] 旋光物质的旋光度主要取决于物质本身的结构。另外,还与光线透过物质的厚度,测量时所用光的波长和温度有关。如果被测物质是溶液,影响因素还包括物质的浓度,溶剂也有一定的影响。因此旋光物质的旋光度,在不同的条件下,测定结果通常不一样。[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑][font=微软雅黑]([/font]2)温度[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑] 温度升高会使旋光管膨胀而长度加长,从而导致待测液体的密度降低。另外,温度变化还会使待测物质分子间发生缔合或离解,使旋光度发生改变。不同物质的温度系数不同,一般在-(0.01~0.04)℃之间。为此在实验测定时必须恒温,旋光管上装有恒温夹套,与超级恒温槽连接。[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑][font=微软雅黑]([/font]3)浓度和旋光管长度[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑] 在一定的实验条件下,常将旋光物质的旋光度与浓度视为成正比,因为将比旋光度作为常数。而旋光度和溶液浓度之间并不是严格地呈线性关系,因此严格讲比旋光度并非常数,旋光度与旋光管的长度成正比。旋光管通常有250px、500px、550px三种规格。经常使用的有250px长度的。但对旋光能力较弱或者较稀的溶液,为提高准确度,降低读数的相对误差,需用500px或550px长度的旋光管。[/font][font=微软雅黑][/font][font=微软雅黑](4)还有不按操作规程进行乱操作,而引起误差的人为操作因素! [/font][font=微软雅黑] [/font]

  • 测比旋度时浓度问题

    有个问题没想明白,既然比旋度是指偏振光通过长1dm且每1ml含旋光物质1g的溶液,在一定的波长和温度下的旋光度,那么资料里测定比旋度时,每个样品配成的浓度不同那?都直接配成C=1g/100ml 的标准不就好吗?(不包括溶解性不好的样品)

  • 【讨论】旋光仪的检出限问题!

    旋光仪的检出限突然变小是什么缘故?前几天测试读数有0.02度的同浓度溶液,现在成0了,高浓度的就没有什么问题其他一切正常型号为WZZ-2S

  • 【原创大赛】HPLC快速识别手性化合物-旋光检测器的原理及应用

    【原创大赛】HPLC快速识别手性化合物-旋光检测器的原理及应用

    [b] 手性异构体[/b]的物理和化学性质极为相似,而其光学活性、生物活性和毒性等通常存在较大差异。依据其光学活性的差异,目前主要开发了[b]旋光检测器 (OR) [/b]和[b]圆二色检测器 (ECD),[/b]可应用在手性异构体的检测中。这两类检测器可与HPLC直接连接使用,或串联在紫外或示差检测器之后。 以下简单介绍通用型旋光检测器的检测特征和应用范围:[b](一)旋光检测器(OR)原理[/b] 旋光检测器主要是利用左、右圆偏振光在被测物介质中折射率差异的原理而设计。 如图1所示,旋光检测器主要由四大部分组成:光源(L)、光调节器(P、F)、样品检测池(C)、检偏器(A)和光电信号处理器(D)。待测液体经过样品检测池(C)时,对光源发出的平面偏振光产生旋光偏振作用,被后端的检偏器(A)收集,最后将偏振光强和偏振角度转换成电压等信号(D),从而达到识别手性异构体的目的。[color=#333333] 在旋光检测器检测中,色谱峰呈现正峰(+)或负峰(-),通常对应手性化合物的右旋体和左旋体,如图2所示。[/color][color=#333333][img=,468,343]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807171504226285_1693_2474245_3.png!w468x343.jpg[/img][/color][b](二)旋光检测器 [b](OR) [/b]的定性应用[color=#333333]1、[/color][color=#333333]区分手性异构体和非手性化合物[/color][color=#333333][img=,454,450]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807171516046788_9491_2474245_3.jpg!w454x450.jpg[/img][/color][color=#333333][color=#333333]2、判断手性异构体的类型和洗脱顺序[/color][/color][color=#333333][color=#333333][img=,690,290]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2018/07/201807171514429866_9742_2474245_3.jpg!w690x290.jpg[/img][/color][/color][color=#333333][color=#333333]3、[b]定量研究:[/b][/color][/color][/b][color=#333333][color=#333333][color=#333333][/color][/color][/color] 在一定的浓度范围内,旋光检测器可达到较好的线性和灵敏度。对不同结构类型的手性异构体,其灵敏度、线性范围皆有所不同。相比其他检测器而言,OR检测器灵敏度相对较差且应用范围较窄,较少用于化合物的含量测定,如章伟光教授课题组和B. Toussaint课题组就曾考察过OR检测器和UV、RI和ELSD检测器的灵敏度。 总的来说,旋光检测器因易受流动相、温度等因素影响,主要应用在手性对映体的检测、识别及色谱制备,较少用于定量检测。[b][color=#333333][color=#333333][b][/b][/color][/color][/b]

  • 【原创】糖果工业中折光仪和旋光仪的应用

    在糖果工业中,折光仪和旋光仪有着非常广泛的应用。软糖 – 应用折光仪检测浓度:绝大多数企业都利用折光仪来控制巧克力制品、硬糖和其他糖果制品中混合糖的浓度。当产品本身参数范围较宽(例如从76 到78 °Brix)时,在很多时候,仪器的再现性比准确度更重要。为了能在合适的阶段/时间停止熬煮过程,也要求仪器能够快速读数。过去,光学“发射折光仪” (又称为 ‘Queen Mary’ 或 ‘battleships’) 已经应用在这些领域。它们操作简单,使用起来不需要技巧性,但在检测粘性样品时灵敏度不高。现在这些仪器已经基本上被RFM730数字折光仪所取代。手持式折光仪和阿贝折光仪也同样应用在这些方面,但考虑到样品的熬煮温度,在选择合适的仪器类型时需要特别小心。有时,为了使高浓度的样品保持在液体状态,适当提高仪器温度,及减少冷却时间以加快读数速度也是同样必要的。Abbe 折光仪可以通过连接恒温水浴可以实现在60°C条件下测量,而新的RFM300+系列由于内置了帕尔贴 (Peltier) 电子精确温控元件,可以支持高达70°C条件下的样品检测。过程折光仪也有相同的应用,能够取得实时的 °Brix 值,而无需将样品从容器中移出,从而消除样品表层的蒸发的影响,也无需等待样品冷却的时间。过程折光仪安装到罐体外部的旁通循环回路上作为“出口部分”时,仪器能够实时提供控制信号,以便在到达熬煮终点时自动将产品移入缓冲罐中。硬糖和“口香糖”:在糖果的熬煮过程中,Eclipse 手持式折光仪、阿贝折光仪及数字式仪器都可以用来检测样品。与软糖的类似,在选择合适的折光仪时,产品的温度是一个关键参数。而产成品的质量管理检验则有些困难,因为样品通常都是固态的(例如有的浓度高达 90 °Brix)。有些生产商将样品切成薄片,并在棱镜中心位置滴加接触液,再将切片后的样品放置在棱镜上测量。测量结果可以精确到一位小数。巧克力:粗品巧克力中的脂肪含量的测定是QC的一个重要指标。但折光仪测定的是可溶性固体,因此若不能事先将某些不溶性固体(脂肪)转化为溶液,仪器将无法作出分析。此时,可以添加化学物质“单溴代萘”来解决这一问题。这一混合溶液的折光率常在1.60 RI附近,可以使用阿贝折光仪或数字式折光仪(如RFM960或RFM970)进行检测。软糖 – 各种糖类混合物的调和控制:糖果中心馅的质感和风味依赖于添加到糖果中的各种糖类的精确混合。通常转化糖 与蔗糖 按照一定比例混合可以得到一个乳脂状的中心(如餐后薄荷糖)。由于蔗糖的RI值与转化糖的RI值相近,因此虽然可以检测该混合物的总浓度,但却无法控制混合物中各种糖类的混合比例。然而,不同种类的糖(如蔗糖/转化糖)具有不同的比旋光度,因此可以利用旋光仪来检测糖类混合物是否与预选设定的混合比例相符。ADP410和ADP440旋光仪就可以满足此类应用。食品添加剂及原料:折光仪和旋光仪都可以用于检测制备糖果产品的原材料。例如,在糖果中添加的阿拉伯胶是起到了增稠剂的作用,可以用旋光仪来检测。此外,明胶可用折光仪检测,风味剂,如薄荷油,则可以用旋光仪来检测。废液: 监控糖果厂排出的废液可有助于保护污水处理厂(的反渗透系统设备)免受高糖溶液的损害。在线过程折光仪就适合实现废液的监测,在某些情况下还可对废液流进行控制,帮助企业免受环保机构的处罚。

  • 光学仪器旋光仪的使用方法

    [b]光学仪器旋光仪[/b]是测定物质旋光度的仪器。通过对样品旋光度的测量,可以分析确定物质的浓度、含量及纯度等。广泛应用于制药、药检、制糖、食品、香料、味精以及化工、石油等工业生产,科研、教学部门,用于化验分析或过程质量控制。[b]使用方法[/b]  (1)将旋光仪接于220V交流电源。开启电源开关,约5分钟后钠光灯发光正常,就可开始工作。  (2)检查旋光仪零位是否准确,即在旋光仪未放试管或放进充满蒸馏水的试管时,观察零度时视场亮度是否一致。如不一致,说明有零位误差,应在测量读数中减去或加上该偏差值。或放松度盘盖背面四只螺钉,微微转动度盘盖校正之(只能校正0.5°左右的误差,严重的应送制造厂检修)。  (3)选取长度适宜的试管,注满待测试液,装上橡皮圈,旋上螺帽,直至不漏水为止。螺帽不宜旋得太紧,否则护片玻璃会引起应力,影响读数正确性。然后将试管两头残余溶液揩干,以免影响观察清晰度及测定精度。  (4)测定旋光读数:转动度盘、检偏镜、在视场中觅得亮度一致的位置,再从度盘上读数。读数是正的为右旋物质,读数是负的为左旋物质。  (5)采用双游标读数法求得结果,其中A和B分别为两游标窗读数值。如果A=B,而且度盘转到任意位置都符合等式,则说明旋光仪没有偏心差(一般出厂前旋光仪均作过校正),可以不用对项读数法。  (6)旋光度和温度也有关系。对大多数物质,用λ=5893A°(钠光)测定,当温度升高1℃时,旋光度约减少0.3%。对于要求较高的测定工作,最好能在20℃±2℃的条件下进行。

  • 【讨论】文献中旋光度中提示的浓度C的单位

    在很多文献有旋光值,并注明浓度和溶剂:如某化合物的旋光度为: +9.26(25,C 0.57,乙醇)其中C的单位是多少? 是不是0.57g/100ml?查药典,旋光度计算公式中C为100ml溶剂中溶质的克数,可正文中都基本给出了样品的配制浓度,没有这样的标示方式。

  • 味精中谷氨酸单钠含量的旋光法测定

    一、实验目的掌握旋光法测定谷氨酸单钠的原理,熟悉旋光法测定谷氨酸单钠含量的方法。二、实验原理谷氨酸单钠分子结构中含有一个不对称碳原子,具有光学活性,能使偏振光面旋转一定角度,所以,可用旋光仪测定其旋光度,并根据旋光度换算成谷氨酸单钠的含量。三、仪器与试材1.仪器与器材旋光仪(精度±0.010),带有钠光谱D线589.3nm的钠光灯。2.试剂除特别说明外,实验中所用试剂均为分析纯,水为去离子水或蒸馏水。常规试剂:HCl。3.实验材料2~3种味精(纯度大于99%),各50g。四、实验步骤1.样品处理(1)称取样品10.0000g,加少量水溶解并全部移入100mL容量瓶中。(2)加20mILHCl,混匀,冷却至20℃后,补加水至刻度,摇匀。2.测定在20℃恒温室中,先用标准旋光角校正仪器。然后,将上述试液置于旋光管中(注意不能产生气泡),观测其旋光度,同时记录旋光管中溶液的温度。3.计算样品中谷氨酸单钠的含量按下式计算:a/LcX=─────────×10025.16+0.047×(20-t)式中,X为样品中谷氨酸钠的含量,%;a为实测试液的旋光度;L为旋光管的长度(即液层厚度),·dm;c为1mL试液中含谷氨酸钠的质量,g/mL;25.16为谷氨酸钠的比旋光度苫;t为溶液的温度,℃;0.047为温度校正系数。

  • 化学发光应用2

    3. 化学化光在生物领域的应用 化学发光在生物学领域也有着很多应用,主要简介如下: 3.1 Fe 2 + 离子催化的化学发光自由基启动的脂质过氧化 (L PO) 是一个链式反应过程。 在链式反应过程中, Fe 2 + 离子起着启动和催化的作用。 反应过程中产生脂自由基 (R - ) 、烷氧自由基 (RO - ) 、共轭二烯和脂过氧化自由基 (ROO - ) 等中间产物。 ROO - 自反应会产生激发的烷氧自由基 (RO 3 ) 和单线态氧 (O 2 ) ,其回到基态时产生发光。 另外,两个 O 2 分子相互作用也可产生发光。 因此,把 Fe 2 + 盐加入含有脂肪的系统中,如细胞膜、线粒体、微粒体、血浆、组织匀浆、尿液等,可产生化学发光。 化学发光的动力学曲线,可分为快速闪光期、潜伏期、缓慢发光期和稳定发光期。有报告提出,快速闪光期的发光强度与样品中过氧化氢含量有关,潜伏期的长短与样品中抗氧化剂含量有关,而缓慢发光期和稳定发光期的发光强度则反映了系统的过氧化水平,即系统产生活性氧的能力。 3.2 血浆和血清的化学发光 许多实验研究对加入 Fe 2 + 盐的不同疾病患者血浆和血清的化学发光进行的测量表明,与正常健康人相比,腹腔器官局部缺血、肢端闭合性局部缺血、血氧含量下降以及出血、手术性休克病人血浆和血清的发光强度降低。 与此相反,风湿性关节炎、阑尾炎、胆囊炎、胰腺炎等炎性疾病患者血浆和血清的发光强度升高。 降低和升高的幅度与疾病的严重程度有关。 有研究提出,利用此方法有可能对非典型的心肌梗塞和腹腔器官炎性疾病做出区别诊断。 3.3 血浆脂蛋白的化学发光 有研究提出,以分离的血浆脂蛋白悬液作为系统模型可以研究不同物质对系统过氧化的调节机制。在分离的血浆脂蛋白悬液中加入胆固醇,温育一定时间后在加入 Fe 2 + 盐,测量化学发光,发现胆固醇能使系统的发光强度降低。分析认为,这可能是由于类固醇的存在抑制了系统的过氧化。对实验性胆固醇过多血症家兔和动脉粥样硬化早期病人进行的测量发现,载脂蛋白 APO – B 。在 Fe 2 + 存在条件下的发光强度出现了增长。同样的现象在肝硬化和慢性肝炎患者身上也被发现。 3.4 尿液的化学发光 利用尿液的化学发光可以研究肾脏功能的变化。将 Fe 2 + 盐加入尿液中,测量其化学发光,发现肾功能不足者尿液的发光强度降低。与正常健康人相比,阑尾炎患者尿液的发光强度则有不同程度的提高。利用这一方法可以评估肾脏的排泄及收缩功能。 3.5 物质抗氧化活性的测定 利用发光测量技术可以评价某些生物组织和体液的抗氧化活性。以某一稳定的发光系统为模型,如脂肪体、线粒体、卵黄脂蛋白等,将待测的抗氧化物质加入该系统,然后加入 Fe 2 + 盐,测量其化学发光。 根据系统化学发光被抑制的程度可以评价物质的抗氧化活性。 利用这一方法进行的研究证明,不同疾病患者血浆和血清的抗氧化活性是不同的。 3.6 H 2 O 2 激发的化学发光 3.6.1 血浆和血清的化学发光 在血浆和血清中加入 H 2 O 2 溶液后能激发化学发光。有报告提出,发光强度与血浆中血红素的水平呈线性相关,相关系数为 + 0. 71 。在上述发光系统中,加入过氧化氢酶或松香油后,发光被抑制,加入叠氮化钠 (NaN 3 ) 后,发光几乎完全消失。 H 2 O 2 激发的血浆和血清的化学发光,其启动因素很可能是血红素过氧化物酶催化 H 2 O 2 分解引起的。血红素过氧化物对 H 2 O 2 的分解是以 H 2 O 2 氧化其底物为前提的。在这一反应过程中导致自由基及其中间产物生成,并与机体分子相互作用,产生 O2 等活性物质,产生发光。 NaN 3 和松香油是 O2 的抑制剂,所以在上述发光系统中加入松香油的 NaN 3 后,发光被抑制。血液中血红素过氧化物酶等以自由基方式分解 H 2 O 2 ,而过氧化氢酸则以非自由基方式分解 H 2 O 2 ,生物体内这两类反应体系协同作用,能很好的清除细胞内的 H 2 O 2 。病理条件下,这一反应体系的平衡被破坏, H 2 O 2 激发的化学发光强度将发生相应改变。因此,根据血浆和血清化学发光的变化,有可能对某些疾病进行区别诊断。 3.6.2 红细胞的化学发光 1981 年 Cepгиеко 等人在分离出的红细胞悬液中加入 H 2 O 2 溶液,对其化学发光进行测量。 发现,随着红细胞的老化和溶解,系统发光强度呈增长趋势。随后对实验性动脉粥样硬化家兔红细胞化学发光进行的测量发现,与正常对照组相比,发光强度出现了降低。这可能是由于细胞膜中胆固纯含量过高造成的。对恶性肿瘤患者的调查也发现发光强度的改变。红细胞的衰老与脂质过氧化有关。 H 2 O 2 能引发膜脂过氧化, H 2 O 2 和脂质过氧化产物都能引起血红蛋白释放 Fe 2 + , Fe 2 + 是诱发一系列自由基反应、起动脂质过氧化的催化剂。自由基的产生不仅促进了红细胞的衰老和溶解,而且引发的脂质过氧化还可以导致膜脂组分和结构的改变,直接影响红细胞的生理功能。

  • 【转帖】化学发光的一些基础知识

    [size=2][font=新宋体]化学发光反应所以能用于分析测定,是因为化学发光强度(ICL)与化学反应速度(dc/dt)相关联,而一切影响反应速度的因素都可以作为建立测定方法的依据。化学发光反应一般可表示为:A+B → C*, C* → C+hv化学发光的反应既包括一个发光过程也包括了一个化学发光反应的过程,因此该发光反应的化学发光强度取决于化学反应的速率dc/dt和反应的化学发光量子效率( ΦCL ) ICL= ΦCLdc/dt.b6u4X!d(P5@-_式中ΦCL可表示为:ΦCL=ΦrΦf;Φr:生成激发态产物的量子产率,也就是每一个参加反应的分子产生的激发态; Φf :激发态产物分子的发光量子产率,也就是每一个激发态产生的光子数,对于一定的化学发光反应, 为一定值。由于化学发光测定易受化学反应条件,如pH值、离子强度、溶液组成、温度等的影响,影响反应速率或任意一个量子效率的因素都会改变发光强度。因此,在一定的化学反应条件下,通过测定化学发光强度就可以测定反应体系中某种物质的浓度。化学发光分析测定的物质对象可分为三类:第一类物质是化学发光反应中的的反应物;第二类物质是化学发光反应中的催化剂,增敏剂或抑制剂 第三类是偶合反应中反应物,催化剂,增敏剂等。这里所说的偶合反应其实就相当于前面提到的间接化学发光反应,它将一个化学发光反应与另一个或一系列反应进行偶合,只要这一个或一系列反应中的任何一种反应物或产物或催化剂(包括酶)能参与化学发光反应,就可以根据所产生的化学发光信号强度获得该反应中某一组分的量。通过标记方式利用这三类物质还可以来测定人们感兴区的其他物质。进一步扩大了化学发光分析的应用范围化学发光分析最初是以分立式进样化学发光仪作为研究手段,由于化学发光现象一般比较短暂且随时间变化较大,使用间歇式手工操作是较难取得良好的重现性,因此人们将流动注射技术引入到化学发光分析中。流动注射技术是hansen于1975年建立的,把一定体积的试样注入到流动试剂(载流)中,可以保证混合过程与反应时间的高度重现性,特别是在非平衡状态下高效率的完成试样的在线处理与测定。在化学发光分析中,化学反应器可以正面放置在接近光检测器的部位,因此检测器的仪接受较大分量的发射光子,从而提高了灵敏度,其灵敏度可达10-21mol,甚至可检测至单分子水平。化学发光分析的检测线并不受仪器的检测极限的限制,多数是受试剂的杂质污染以及由于浓度极低而带来的其他一些问题的限制。另外,由于化学激发作用具有电子激发态的均一性特点,通常其现行范围所展示的浓度区间较宽,可高达3~6个数量级。对于化学发光分析来说,由于激发能来源于化学反应,无须专门的激发光源以及相应的单色器和聚焦透镜等,所以仪器设备简单、廉价、易微型化。分析化学,论由于化学发光现象一般比较短暂,因此化学发光分析所要求的时间也较短,但其最大的缺点是选择性差。因为化学发光分析的测定大多是在相同条件下,沿用同一个化学发光反应进行的,因而选择性较差。如典型的鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,就能被10多种无机离子和30多种有机物催化或者增敏,且均在pH8~11的碱性条件下完成。近年来,化学发光检测与色谱以及毛细管电泳等分离技术的联用,在很大程度上解决了化学发光分析选择性差的问题,扩大了化学发光分析的应用范围。为了提高化学发光分析法的选择性,将高灵敏度的化学发光检测技术与高效能、高分辨力的高效液相色谱或毛细管电泳以适当的方式相结合,集合2种技术的优势,为人们展示了一个分离效能高、检测先低、分析速度快的方法。%I/_8e*液相色谱化学发光检测仪主要包括分离柱、泵系统、混合器和化学发光检测器。柱后的反应和化学发光检测是这一联用方法成功的关键。需要注意的是,化学发光的最佳条件往往并不是分离的最佳条件,比如色谱分离金属离子对常用酸性的流动相,而金属离子与鲁米诺的化学发光反应多在pH10时才有最强的发光强度,因此实际分析中要综合考虑各个方面的因素,选择合适的条件,使其既有利于分离又能保证灵敏、稳定的检测。|分析化学|化学分析|仪器分析|分析测试|色 发光在生物学领域也有着很多应用,主要简介如下:1 血浆和血清的化学发光 亚铁离子催化的化学发光自由基启动的脂质过氧化 (L PO) 是一个链式反应过程。反应过程中产生脂自由基 (R - ) 、烷氧自由基 (RO - ) 、共轭二烯和脂过氧化自由基 (ROO - ) 等中间产物。 ROO - 自反应会产生激发的烷氧自由基 (RO 3 ) 和单线态氧 (O 2 ) ,其回到基态时产生发光。因此,把 Fe 2 + 盐加入含有脂肪的系统中,如细胞膜、线粒体、微粒体、血浆、组织匀浆、尿液等,可产生化学发光。许多实验研究对加入 Fe 2 + 盐的不同疾病患者血浆和血清的化学发光进行的测量表明,与正常健康人相比,腹腔器官局部缺血、肢端闭合性局部缺血、血氧含量下降以及出血、手术性休克病人血浆和血清的发光强度降低。 与此相反,风湿性关节炎、阑尾炎、胆囊炎、胰腺炎等炎性疾病患者血浆和血清的发光强度升高。 降低和升高的幅度与疾病的严重程度有关。 可以看出,利用此方法有可能对非典型的心肌梗塞和腹腔器官炎性疾病做出区别诊断。 2血浆脂蛋白的化学发光 有研究提出,以分离的血浆脂蛋白悬液作为系统模型可以研究不同物质对系统过氧化的调节机制。在分离的血浆脂蛋白悬液中加入胆固醇,温育一定时间后在加入 Fe 2 + 盐,测量化学发光,发现胆固醇能使系统的发光强度降低。分析认为,这可能是由于类固醇的存在抑制了系统的过氧化。对实验性胆固醇过多血症家兔和动脉粥样硬化早期病人进行的测量发现,载脂蛋白 APO – B 。在 Fe 2 + 存在条件下的发光强度出现了增长。同样的现象在肝硬化和慢性肝炎患者身上也被发现。 3尿液的化学发光 利用尿液的化学发光可以研究肾脏功能的变化。将 Fe 2 + 盐加入尿液中,测量其化学发光,发现肾功能不足者尿液的发光强度降低。与正常健康人相比,阑尾炎患者尿液的发光强度则有不同程度的提高。利用这一方法可以评估肾脏的排泄及收缩功能。 4物质抗氧化活性的测定 利用发光测量技术可以评价某些生物组织和体液的抗氧化活性。以某一稳定的发光系统为模型,如脂肪体、线粒体、卵黄脂蛋白等,将待测的抗氧化物质加入该系统,然后加入 Fe 2 + 盐,测量其化学发光。 根据系统化学发光被抑制的程度可以评价物质的抗氧化活性。 利用这一方法进行的研究证明,不同疾病患者血浆和血清的抗氧化活性是不同的。 [/font][/size]化学发光研究的热点方向直接化学发光反应是当前化学发光分析研究的一个重要方向,人们通常通过大量试验筛选氧化反应及反应介质来证明某种有机药物、农药是否具有化学发光特性。以化学发光试剂标记核酸,运用化学发光分析进行核酸分子杂交分析是化学发光分析的前沿,其发展将为基因工程、基因诊断和治疗提供有效的检测手段。分析通常进行化学发光分析都是在现有化学发光试剂的基础上开展研究,而新型化学发光试剂的开发性研究较少,此领域还有研究空间。金属配合物,特别是钌等过渡金属配合物在化学发光分析中的作用正逐渐受到人们的重视。比如钌(Ⅱ)-联吡啶常用作电致化学发光试剂

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    [b]稀土离子Tb抖能与药物培氟沙星形成1:2络合物,并发出Tb。 的特征荧光,加入表面活性剂十二烷基硫酸钠(sDs)能显著增强该体系的荧光强度,据此建立了一种表面活性剂敏化Tb 荧光探针测定培氟沙星的新方法。在pH 5.8~6.8,Tb。 和SDS浓度分别为5.0×10 toolL 和1.0×10 toolL 的条件下,培氟沙星的浓度与体系的荧光强度呈良好的线性关系,线性范围为3.0×10 ~7.9×10 toolL ;检出限为3.0×10 toolL 。该方法可用于培氟沙星制剂和血清中药物含量的直接测定。[/b]

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