液相梯度液相色谱仪

验证液相色谱仪器梯度，AC泵水，BD泵0.4ACE+水，结果走出图谱整体型对（如图），但是不直，跟标准图谱有一定的差距，请教大神这是为什么啊？[img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/05/202105192136203450_935_5186246_3.jpg[/img]

依利特P200II高效液相色谱仪可以做梯度洗脱吗?

各位大侠：请教一个问题，液相色谱仪梯度有高压和低压的区分，我一直弄不明白这两种梯度方式那种更具优势，梯度混合效果更好，请给一个好的答案！！！！！！！！！！！！！中国心中国心中国心

本人刚刚接受液相（用的是伍丰LC-100液相色谱仪）做一个实验需要梯度洗脱，单仪器只有一个泵

近日，以减小梯度延迟体积与实现混合性能最优化为目的，岛津公司推出了用于超快速液相色谱仪Nexera系列的MR40μL、MR100μL、MR180μLII梯度混合器系列。今后该产品线包括MR20μL、MR40μL、MR100μL、MR180μLII这4种产品。此次发售的超快速液相色谱仪用混合器增加了容量的变化，同时在MR100μL、MR180μLII上采用了新设计的混合方式，即使在流动相中含有紫外吸収较大的酸时，也可以获得稳定的基线。http://imgeditor.chem17.com/MTEditor/20120514/634725830246477500.jpg这个梯度混合器能为我们带来什么样的便利呢？敞开你的想象，大胆的来吧！

我们在使用液相色谱仪时，经常会遇到梯度条件。那么用二元高压梯度使用时，最高的比例是多少呢？（二元高压使用的是静态混合器，四元低压一般使用的是动态混合器）希望大家积极讨论！

液相色谱仪的应用 现在液相色谱仪的应用很多、很广，液相能检测有机物的70%以上的物质，检测的项目很多。现在国家规定越来越严，尤其是在食品行业，药品行业，饲料行业，水质，土壤等，这样也是促进液相色谱仪发展的一个机会。在科研、医疗、医药、教学上用的也越来越多。在农业、石油、石化、炼钢、水利、商检、法检、环境、大气、卫生等很多行业都有很大的发展和需求。 市场需求大是液相色谱发展的动力，市场要求高是液相色谱发展的立足点。液相色谱能承受高压，能采用梯度洗脱，能很好的分离化合物，具有多种检测器，能满足各种化合物的检测，有着种类繁多的色谱柱，能满足不同需求及要求。 液相色谱还有一个很大的特点就是现在很多仪器和行业为了达到某种功能，逐渐采用了联用技术。比如液相色谱和原子吸收、原子荧光联用，叫形态分析。液相色谱与ICP联用，与质谱联用等。在很多像制备、纯化技术也在不同程度的采用了液相分离、检测技术。随着微量液相色谱，超高压、超高效液相色谱，手性液相色谱，亲和液相色谱，手性液相色谱，毛细管液相色谱等的发展，相信液相涉及的技术和市场领域还会越来越广，前景还会更好。当然像离子、凝胶色谱这几大类色谱也属与液相色谱范围，这样液相色谱的领域和覆盖面就相当广了吧。 所以液相色谱的市场很大、很好，前景一片光明。

能得出梯度曲线是否证明液相色谱仪能做梯度洗脱！！我很想知道！！请知道的朋友尽快和我联系！！谢谢！！

液相色谱仪求购： 各位朋友，本公司欲购买液相色谱仪一部。要求进口的，价位20-30万，二元高压梯度泵，最好为自动进样器。各位朋友，如有相关资料麻烦发一下。谢谢！

在岛津高效液相色谱仪中怎么设置梯度淋洗？我是液相色谱初学者，希望有高手指点一二，谢谢(∩_∩)O

液相色谱仪开机顺序：1．检查溶剂托盘托盘上的溶剂是否足量，以溶剂液面超过过输液管过滤头5厘米以上为宜。2．检查输液管内部有否气泡，若有，应及时通过排液阀排出。3．对溶剂（针对第1项看是否需要补充溶剂）和样品进行处理，过滤，脱气。4．打开主机电源，依次打开检测器，泵A，泵B，柱箱的电源5．打开电脑，开启色谱工作站6．先在工作站中开启活塞泵，以所需的流动相平衡系统（约需30min）7．打开氘灯，等待系统基线走稳8．开始进样检测液相色谱仪常见故障： 开机后压力在一段时间逐渐变化(升高或降低)，这往往是流动相在色谱柱内还没有平衡好、柱箱温度还没有恒定。这些都不属于仪器问题，只要多平衡一会就会稳定。若使用的是梯度程序，由于流动相的比例正处在变化中，压力也会跟随变化。液相色谱仪开机后压力瞬间变化(3MPa)。原因不外乎以下四种情况：⑴有气泡；(2)漏液；(3)单向阀不良；(4)泵工作相位不正确，可逐个排除。

第八课 液相色谱仪－输液系统 输液系统高效液相色谱的输液系统包括流动相贮存器、高压泵和 梯度淋洗装置。流动相贮存器为不锈钢或玻璃制成的容器，可以贮存不同的流动相。高压泵是高效液相色谱仪最重要的部件之一。由于高效液相色谱仪所用色谱柱直径细，固定相粒度小，流动相阻力大，因此，必须借助于高压泵使流动相以较快的速度流过色谱这。高压泵需要满足以下条件：能提供150－450kg/cm2的压强；流速稳定，流量可以调节；耐腐蚀。目前所用的高压泵有机械泵和气动放大泵两种。梯度淋洗装置可以将两种或两种以上的不同极性溶剂， 按一定程序连续改变组成，以达到提高分离效果，缩短分离时间的目的。它的作用与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中的程序升温装置类似。梯度淋洗装置分为两类：一类叫外梯度装置；一类内梯度装置。外梯度装置是流动相在常压下混合，靠一台高压泵压至色谱柱；内梯度装置是先将溶剂分别增压后，再由泵按程序压入混合室，再注入色谱柱。

各位同仁，我现在想配液相色谱仪，做化验用，工作量大，包括自动进样，四元梯度洗脱，柱温箱，全波长扫描检测器，脱气系统，中文工作站。我要从三个厂家waters，agilent和岛津中选一个，想买一个比较新的型号，请大家帮忙，从价钱和性能上，比较一下，哪个厂家哪个型号的更号，最基本要求是结实，耐用。精度，重现性，稳定性等其他方面的性能还请各位帮忙评价，谢谢!

高效液相色谱仪的使用1．色谱柱它包括空柱和填料。空柱是内壁抛光的不锈钢管，内径为4～5mm，长100～250mm。按[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法中洗涤空柱的方法洗净，用匀浆法填充固定相。将此柱装入仪器的管路中，用柱式机械往复泵输入新鲜脱气的流动相。等基线平直后可用苯、萘、菲的混合试液，用正己烷（含0.05%甲醇）或甲醇：水（83：17）为流动相测定柱效及分离度塔板数在2～3万/ml以上及分离度在1.5以上者，柱效好。为防止柱污染，常用1个50mm长，4~5mm内径，装有硅胶（40-50mm）或立柱相同填料的保护柱（预柱）接在主柱之前，以延长色谱柱的寿命。反相键合相柱用毕。必须用水充分流经，以洗去盐类、酸碱等杂质防止柱生锈及填料中杂质的积聚，再用甲醇流经洗涤使色谱柱获得再生。　　2．流动相的洗脱方式配好经脱气的流动相放于贮液瓶中，经过有滤过头、内径2mm的聚四氟乙烯管流入高压泵进入色谱柱，最后自检测器流出或收集或作废液回收。用流动相洗脱的方式有恒溶剂脱洗法（isocratic dlution），即自洗脱开始到结束，溶剂的配比恒定。另一类为梯度洗脱法（gradicnt clution）,即使溶剂的极性强度在色谱过程中逐渐增加。须按一定程序不断改变流动相的浓度配比，从而使同一个试样中组分性质相差较小的及较大的都能在一次色谱过程中很好分离，而整个色谱过程缩短。必须注意，梯度洗脱法不能用于分子排阻色谱及用电化学检测的反相高效液相色谱法中。　　3．检测器适用于血药浓度的检测器有紫外线吸收，荧光发射和电化学三种。紫外检测器应用于对紫外光有吸收的药物，大多数药物分子对紫外光有吸收，故能较普遍采用，检测限有0.1μg左右。紫外检测器有固定波长型、可变波长型及扫描器，既能使流动相停流作组分的定性定量检测，又能提高测定灵敏度，重现性较好。荧光发射检测器对能产生荧光的药物才能使用。80年代应用激光替代氙灯光源，光强度增加了3~4倍，对某些药物的检测限可达pg级。电化学检测器是由一个碳糊或破碳做成的蒲层电解池。常用于检测儿茶酚胺类及有酚类基团的各种药物和代谢物。流出组分进入2μl的薄层电解池，在一暄电压下电解产生电流，放大后检测，检测限pg级。　　4．数据处理现代高效液相色谱仪带有数据处理系统，除记录谱外，还能自动记录峰的保留时间，能自动积分求算峰面积，并能按照预定的程序作有关计算，报告分析结果。高效液相色谱仪使用过程中常见问题及其解决方法 1 液相色谱仪系统 液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱、柱温箱、检测器、数据处理系统组成（如图1所示）。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件，同时也是容易出事故的主要场所。 2 常见问题及解决方法2．1 针对柱压问题（表1）柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值，而是指压力波动范围在50PSI之间。压力过高、过低及波动较大都属于柱压问题，但柱压的高低与色谱柱的种类、品牌、液相系统本身及使用的流动相种类相联系。值得注意的是在使用梯度洗脱时，进柱压的平稳缓慢的变化是允许的。在实际应用中柱压过高可从以下几个方面来考虑[1]。首先考虑柱子是否被堵，此时可更换一根新柱子进行检测。2．2 针对保留时间漂移的问题 [2，3] （表2）保留时间的改变是很多液相色谱使用者常碰到的问题，其包括了保留时间增大和减小。它的产生与很多原因有关。2．3 针对异常色谱峰问题[2-4] 异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。具体情况与原因分析如表3。3 高效液相色谱仪的保养[5-7]3．1 HPLC的日常操作条件 工作温度10～30℃； 相对湿度80％； 最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 3．2 泵的保养 使用流动相尽量要清洁；进液处的沙芯过滤头要经常清洗；流动相交换时要防止沉淀；避免泵内堵塞或有气泡。3．3 进样器的保养 每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。3．4 柱的保养 柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；当柱子和色谱仪连接时，阀件或管路一定要清洗干净；要注意流动相的脱气；避免使用高粘度的溶剂作为流动相；进样样品要提纯；严格控制进样量；每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。3．5 检测器(UV)的保养 紫外灯的保养要在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。同时样品池要保养。4 结语 在高效液相色谱使用过程中故障排出时要遵守以下原则：一次只改变一个因素，从而确定假定因素与问题之间的联系；如果通过更换组件来排查故障时要注意将拆下的完好组件装回原位，从而避免浪费；养成良好的记录习惯，一个良好的记录是成功地进行故障排除的关键。 总之，在使用高效液相色谱时一定要注意样品的前处理与仪器的正确操作和保养，仪器系统的干净是用好仪器和维护维修仪器的关键。

想购买一台二元或四元的梯度的高效液相色谱仪。做药品检验。不知道哪家的好，请大家帮忙指点

1．色谱柱它包括空柱和填料。空柱是内壁抛光的不锈钢管，内径为4～5mm，长100～250mm。按[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法中洗涤空柱的方法洗净，用匀浆法填充固定相。将此柱装入仪器的管路中，用柱式机械往复泵输入新鲜脱气的流动相。等基线平直后可用苯、萘、菲的混合试液，用正己烷（含0.05%甲醇）或甲醇：水（83：17）为流动相测定柱效及分离度塔板数在2～3万/ml以上及分离度在1.5以上者，柱效好。为防止柱污染，常用1个50mm长，4~5mm内径，装有硅胶（40-50mm）或立柱相同填料的保护柱（预柱）接在主柱之前，以延长色谱柱的寿命。反相键合相柱用毕。必须用水充分流经，以洗去盐类、酸碱等杂质防止柱生锈及填料中杂质的积聚，再用甲醇流经洗涤使色谱柱获得再生。　　2．流动相的洗脱方式配好经脱气的流动相放于贮液瓶中，经过有滤过头、内径2mm的聚四氟乙烯管流入高压泵进入色谱柱，最后自检测器流出或收集或作废液回收。用流动相洗脱的方式有恒溶剂脱洗法（isocratic dlution），即自洗脱开始到结束，溶剂的配比恒定。另一类为梯度洗脱法（gradicnt clution）,即使溶剂的极性强度在色谱过程中逐渐增加。须按一定程序不断改变流动相的浓度配比，从而使同一个试样中组分性质相差较小的及较大的都能在一次色谱过程中很好分离，而整个色谱过程缩短。必须注意，梯度洗脱法不能用于分子排阻色谱及用电化学检测的反相高效液相色谱法中。　　3．检测器适用于血药浓度的检测器有紫外线吸收，荧光发射和电化学三种。紫外检测器应用于对紫外光有吸收的药物，大多数药物分子对紫外光有吸收，故能较普遍采用，检测限有0.1μg左右。紫外检测器有固定波长型、可变波长型及扫描器，既能使流动相停流作组分的定性定量检测，又能提高测定灵敏度，重现性较好。荧光发射检测器对能产生荧光的药物才能使用。80年代应用激光替代氙灯光源，光强度增加了3~4倍，对某些药物的检测限可达pg级。电化学检测器是由一个碳糊或破碳做成的蒲层电解池。常用于检测儿茶酚胺类及有酚类基团的各种药物和代谢物。流出组分进入2μl的薄层电解池，在一暄电压下电解产生电流，放大后检测，检测限pg级。　　4．数据处理现代高效液相色谱仪带有数据处理系统，除记录谱外，还能自动记录峰的保留时间，能自动积分求算峰面积，并能按照预定的程序作有关计算，报告分析结果。高效液相色谱仪使用过程中常见问题及其解决方法 1 液相色谱仪系统 液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱、柱温箱、检测器、数据处理系统组成（如图1所示）。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件，同时也是容易出事故的主要场所。 2 常见问题及解决方法2．1 针对柱压问题（表1）柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值，而是指压力波动范围在50PSI之间。压力过高、过低及波动较大都属于柱压问题，但柱压的高低与色谱柱的种类、品牌、液相系统本身及使用的流动相种类相联系。值得注意的是在使用梯度洗脱时，进柱压的平稳缓慢的变化是允许的。 在实际应用中柱压过高可从以下几个方面来考虑[1]。首先考虑柱子是否被堵，此时可更换一根新柱子进行检测。2．2 针对保留时间漂移的问题 [2，3] （表2） 保留时间的改变是很多液相色谱使用者常碰到的问题，其包括了保留时间增大和减小。它的产生与很多原因有关。2．3 针对异常色谱峰问题[2-4] 异常的色谱峰指的是色谱图中无峰或出现负峰、宽峰、双峰、肩峰、峰形不对称等情况。具体情况与原因分析如表3。3 高效液相色谱仪的保养[5-7]3．1 HPLC的日常操作条件 工作温度10～30℃； 相对湿度80％； 最好是恒温、恒湿，远离高电干扰、高振动设备。 3．2 泵的保养 使用流动相尽量要清洁；进液处的沙芯过滤头要经常清洗；流动相交换时要防止沉淀；避免泵内堵塞或有气泡。3．3 进样器的保养 每次分析结束后，要反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染。3．4 柱的保养 柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；当柱子和色谱仪连接时，阀件或管路一定要清洗干净；要注意流动相的脱气；避免使用高粘度的溶剂作为流动相；进样样品要提纯；严格控制进样量；每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭。3．5 检测器(UV)的保养 紫外灯的保养要在分析前、柱平衡得差不多时，打开检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。同时样品池要保养。4 结语 在高效液相色谱使用过程中故障排出时要遵守以下原则：一次只改变一个因素，从而确定假定因素与问题之间的联系；如果通过更换组件来排查故障时要注意将拆下的完好组件装回原位，从而避免浪费；养成良好的记录习惯，一个良好的记录是成功地进行故障排除的关键。 总之，在使用高效液相色谱时一定要注意样品的前处理与仪器的正确操作和保养，仪器系统的干净是用好仪器和维护维修仪器的关键。

我们公司向购买二手的液相色谱仪。主要是安捷伦、沃特世、戴安公司的。配制须有在线脱气机、紫外可见检测器、能梯度洗脱的。请与我联系。qq号380141546，谢谢。

[font=&][color=#666666] 对于初学者来说，分析液相色谱仪方法可能会让人不知所措。此类方法通常包含与实验中每个步骤相关的信息和说明。熟悉实验室中液相色谱仪方法的格式很重要，这样您就可以轻松找到整个过程的方法。[/color][/font][font=&][color=#666666]对液相色谱仪器进行设置[/color][/font][font=&][color=#666666] 准备好一台[url=https://www.risun-tec.com]液相色谱仪器[/url]、色谱柱和化学品，下一步就是开始设置您的仪器进行测试。检查液相色谱仪器的校准状态非常重要。所选仪器必须成功通过所有校准测试；这通常由仪器上的贴纸或标签指示，说明上次和下一次校准的结果和日期。进行校准测试以确保仪器的每个部分都在适当的范围内工作。例如，必须检查泵的流量以匹配数字输入；对检测器、进样器和色谱柱加热器进行了类似的测试。目的是确保实验室中的所有仪器都能正常工作并且在预定的误差范围内。[/color][/font][font=&][color=#666666] 选择仪器后你必须对其进行清洁并准备色谱柱。清洁步骤对于去除之前工作中的任何残留物很重要；因此可以获得稳定的基线和准确的结果。许多方法规定了在测试之前清洗系统的特殊顺序。通常，清洁程序包括先用流水去除任何缓冲液残留物，然后再用纯甲醇或异丙醇/甲醇混合物。最后，将 50% 的有机溶液冲洗通过系统。最终冲洗液的组成很大程度上取决于所使用的色谱类型：反相或正相。还根据色谱柱的类型和要使用的流动相的组成对色谱柱进行冲洗。查阅色谱柱的宣传单以确定适合您的色谱柱的最佳冲洗和储存解决方案。[/color][/font][font=&][color=#666666]用于液相色谱仪测试的溶液的制备[/color][/font][font=&][color=#666666] 首先要制备的溶液通常是流动相。有时，当使用梯度系统时，您需要为您的分析方法制备多个流动相。使用液相色谱仪级水和溶剂来制备流动相非常关键。准备好流动相后，就可以开始用相应的溶液冲洗系统并开始平衡色谱柱了。大多数 HPLC 系统本质上是四元系统，即可以从四个不同的入口管线泵送。如果要使用多条管线（即该方法涉及梯度），那么通过每条管线冲洗的最终溶液应该是与流动相兼容的溶剂。[/color][/font][font=&][color=#666666] 例如，如果流动相的缓冲液含量高，则入口管线必须用至少 50% 的冲洗水溶液冲洗，以防止流动相中的盐析出并堵塞入口管线。所有冲洗液和流动相都应通过微过滤器（0.45 μm 或 0.2 μm）过滤以去除细菌和有机碎片。[/color][/font][font=&][color=#666666] 冲洗系统并开始平衡色谱柱后（在某些情况下可能需要 3 小时或更长时间，具体取决于色谱柱类型和流动相组成），您应该开始处理样品和参考溶液。在许多情况下，您在制备这些溶液时需要采取特殊的预防措施，例如减少暴露在光线或湿气中的时间，以防止分析物降解并产生错误结果。这些特殊的注意事项通常会在分析方法中提及。参考溶液和样品溶液也应通过称为注射器过滤器的特殊过滤器进行过滤（因为它们安装在注射器上）。但是，所用过滤器的类型和材料应与分析物和溶剂兼容，以避免吸附或污染。[/color][/font][font=&][color=#666666]处理色谱图并计算出结果[/color][/font][font=&][color=#666666] 一旦您确定您的系统工作正常，请恢复进样顺序以进样样品溶液。完成序列后，您可以使用特定软件对采集的色谱图进行处理，从而得出有意义的结果。一些软件程序允许您“整合”所有峰，无论它们有多小。计算每个峰下的面积，并使用生成的数字来确定测试结果。液相色谱仪实验后有两种主要的计算方式：首先，通过使用测定来确定一种或多种活性成分的含量，例如计算片剂中扑热息痛的含量。或者，您可能希望确定色谱图，即确定杂质的类型及其相对比例。在您输入分子量和稀释因子后，当前的软件可以进行计算并生成最终报告。[/color][/font]

[font=宋体][font=宋体]梯度准确度是衡量一款[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]性能的重要指标，梯度如果不准确，将直接影响色谱峰的峰形、保留时间等，导致分析结果的精密度降低。一般我们认为仪器的梯度准确度在[/font][font=宋体]±[/font][font=Calibri]0.5%[/font][font=宋体]以内对结果的影响是可以接受的。本人根据日常的工作经验，总结了一套[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱仪[/color][/url]梯度准确度的测试方法。[/font][/font][font=宋体]测试条件：[/font][font=宋体][font=宋体]流动相[/font][font=Calibri]A-[/font][font=宋体]纯水，[/font][font=Calibri]B-[/font][font=宋体]甲醇[/font][/font][font=宋体][font=宋体]色谱柱：粒径[/font][font=Calibri]5 um[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]4.6*100 mm[/font][font=宋体]，反相[/font][font=Calibri]C18[/font][font=宋体]柱[/font][/font][font=宋体][font=宋体]流速：[/font][font=Calibri]0.5 mL/min[/font][/font][font=宋体]柱温：设定为室温附近[/font][font=宋体][font=宋体]进样量：[/font][font=Calibri]10 uL[/font][font=宋体]满定量环[/font][/font][font=宋体][font=宋体]检测器：[/font][font=Calibri]UV[/font][/font][font=宋体][font=宋体]检测波长：[/font][font=Calibri]272 nm[/font][/font][font=宋体]测试标准品：咖啡因（溶剂纯水）[/font][font=宋体]测试方法：[/font][font=宋体][font=宋体]将流动相比例设置为[/font][font=Calibri]A/B=59.5/40.5[/font][font=宋体]，充分平衡色谱柱，[/font][font=Calibri]UV[/font][font=宋体]检测器预热充分，重复进样[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]次，记录检测结果为[/font][font=Calibri]Fai[/font][font=宋体]组。将流动相比例改为[/font][font=Calibri]A/B=60.5/39.5[/font][font=宋体]，充分平衡色谱柱后，重复进样[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]次，记录检测结果为[/font][font=Calibri]Fbi[/font][font=宋体]组。设置梯度比例为[/font][font=Calibri]A/B=60/40[/font][font=宋体]，[/font][font=宋体]充分平衡色谱柱后[/font][font=宋体]，重复进样[/font][font=Calibri]10[/font][font=宋体]次，每次进样结束后，将梯度比例更改为任意比例后再改回[/font][font=Calibri]A/B=60/40[/font][font=宋体]，并充分平衡色谱柱后再进样，记录测试结果为[/font][font=Calibri]Fi[/font][font=宋体]组。（[/font][font=Calibri]Fai[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fbi[/font][font=宋体]、[/font][font=Calibri]Fi[/font][font=宋体]表示各组测试结果中的第[/font][font=Calibri]i[/font][font=宋体]次测试结果）[/font][/font][font=宋体][font=宋体]将[/font][font=Calibri]Fai[/font][font=宋体]与[/font][font=Calibri]Fbi[/font][font=宋体]组测试结果分别计算加权平均值，近似看作两次流动相比例下的保留时间真值。比较[/font][font=Calibri]Fi[/font][font=宋体]组的测试数据，观察其保留时间是否落在两组的加权平均值的区间之间。[/font][/font][font=宋体]总结：[/font][font=宋体]该方法只能测量梯度准确度的预估值，测量结果并不能代表仪器真实的梯度准确度，因为柱温稳定度、流量稳定性都会影响测试结果。[/font][font=宋体]当我们在日常测试工作中发现结果的紧密度与重现性不符合要求时，可以用此方法来测试仪器的梯度准备度，以此衡量输液系统是否需要维护。[/font]

招 标 编 号：**************加 入 日 期：****.**.**截 止 日 期：***.**.**招 标 代 理：**************地 区：山东省内 容：1 液相色谱仪 二级管阵列检测器，四元梯度（带柱塞清洗），脱气机、自动进样器，柱温箱，色谱工作站软件，电脑，打印机 1台 2 液相色谱仪 紫外检测器，四元梯度（带柱塞清洗），脱气机、自动进样器，柱温箱，色谱工作站软件，电脑，打印机 1台****对液相色谱仪进行社会招标竞价采购的公告一、具体要求：*、条件：投标单位原则上不局限为我公司正式供应商或受邀供应商；*、本次招标对投标单位考察的因素除报价外还包括：最新的企业法人营业执照、质量体系认证证书、环境体系认证证书、生产许可证、税务登记证、组织机构代码证以及其它有必要提供的文件资料。(来自中国招标网)(要求相关资质资料必须为复印件加盖红章)*、投标方必须按标书要求进行报价，并注明产地和制造商，不得有空项，投标方必须报实价，低于成本价的投标文件将视为废标，公司将根据所报价的情况，决定是否中标，决定后不再进行议价，投标方之间不能串标，一经发现投标文件作废，以后也没有资格参与****的招标采购。*、中标单位应按照招标单位的要求及时供货，并能够持续保证产品质量符合招标方的产品质量要求。出现质量问题，双方要在合同中约定索赔。*、双方一经签订供需合同，中标方不得更改和变更产品质量参数，交货时提交出厂检验合格证书（报告）。*、其他未尽事宜，招标单位将在与中标单位签定的供应合同中具体规定。*、具体招标细节见附件*。二、投标、开标相关事项：*、投标截止日期：****年*月**日（以招标单位收到日期为准）*、投标地点：******股份有限公司采购物控部*、开标地点：采购物控部会议室*、开标时间：****年*月**日三、请投标单位于****年*月**日**：**前按要求将投标函（包括附件*、附件*）和贵公司相关资质证明文件加盖贵公司印章后寄我公司采购物控部。投标文件请区分商务标和技术标，商务标单独密封,技术标书中不得含有价格，如果不单独分别密封而做在一起视为废标。信封或特快传递封口处加盖贵公司单位公章，并在信封或特快传递封面上注明“招标”字样（未加以区分而出现误**的情况则意味着投标书的作废）。四、通讯地址：**省**市***单位：******股份有限公司采购部邮编：******联系人：*****电话：****-*******传真：****-*******Email：***********附件* 高效液相色谱仪招标文件*. 总则*.*本次招标涉及液相色谱仪*套。*.*投标人（供方）应遵守以下要求：*.*.*供方必须按需方要求进行投标；*.*.*供方必须详述设备技术特征、履约保证及技术服务条款；*.*.*供方提供与设备相关的安全生产、工业卫生、环保、劳动保护、维护所需的装置及技术服务；*.*.*产品质量要求不低于招标文件所描述的质量要求；*.*.*生产技术要保证做到经济、先进、成熟，以达到获得最大经济效益的目的；*.*.*供方报价分总报价及每台设备报价，并注明产地和制造商；*.*.*供方必须详述其报价设备的优势及特点；*.*.*供方必须承诺履行合同。*. 主要技术参数及要求*.*液相色谱仪*套，型号不限。*.*其中*套参数为二级管阵列检测器，四元梯度（带柱塞清洗），脱气机、自动进样器，柱温箱，色谱工作站软件，电脑，打印机。另外*套配置为紫外检测器，四元梯度（带柱塞清洗），脱气机、自动进样器，柱温箱，色谱工作站软件，电脑，打印机。*.*要求提供详细配置清单。*.*提供易损易耗件清单。*. 备品备件及特殊工具*.*供方必须提供一年内的备品备件并列明备品备件清单及报价，需方保留购买部分或全部备品备件的权利；*.*投标时应提供设备的备品备件及易耗易损件明细表。*. 技术文件资料*.*供方提供的技术文件应完整清晰、便于查阅，中文简体编写；*.*设备的技术方案及说明；*.*设备外型尺寸、总重量、安装尺寸等；*.*随机资料齐全；*.*供货进度一览表。*. 产品质量、质量保证*.*供方应保证在合同规定的质保期内，对因其提供的设计、工艺、制造、安装、调试或材料缺陷及所有供方责任引起的任何缺陷、故障和损坏负责并免费更换或维修。*.*供方应在投标文件中提供质量保证。*. 产品制造标准和要求供方提供的仪器必须符合国家、行业相关的标准、法律和法规。*. 技术服务和优惠条件*.*仪器设计、备料、生产现场安装过程中如有修改或未明确的遗漏问题，签约双方应本着****的态度及时通知对方，以便妥善处理；*.*供方负责免费指导安装、调试，对调试过程中因供货厂家损坏的零部件免费更换；*.*供方负责免费对有关人员进行操作、维修及调试培训；*.*供方提出售后服务承诺；*.*供方还可以提出自己独特的技术服务方式和优惠条件，将作为评标依据之一。*. 交货进度 ****年*月**日前。*. 投标报价总体要求*.*投标方应如实填报企业生产经营情况，包括：企业规模、技术力量、经营状况、财务状况、产品简介、同规格型号的产品终端用户及使用情况证明、各种资质及认证材料等；*.*备品备件、外协外购件需列出表格，包括：品名、规格、数量、制造商、技术要求、单价、总价等；*.*供货范围内的用于安装、维修、调试、检验测量、生产所用的专用工具等应列出清单；*.*供方负责运输到需方仓库，并提供一切运杂费及其他费用。*.*我方付款方式：合同签订预付**％，货到现场支付**％，供方开具**％增值税专用发票，安装运行调试合格后支付**%货款，，**%质保金设备运行正常一年后付清；各公司可以根据实际情况做出商务偏离注明要求的付款方式，不注明付款方式者视为接受付款方式。**. 评标办法本次招标采用综合评标，综合评议最优者中标。附件* ******股份有限公司招标采购投标函致：******股份有限公司在审阅了贵公司所有招标文件后，我方决定按照招标文件的规定和作为中标合同一部分的投标报价表确定的招标项目及价格参与投标。我方保证所提供的全部报价和其他资质证明文件具备真实性、合法性，并愿赔偿因上述报价和其他资质证明文件的瑕疵给贵公司所带来的全部经济损失。如果我方中标，我方将按照招标方的要求确保合同的履行。我方同意本投标函在当月内有效，并对我方具有约束力。我方承诺，我方不会为达成此项目同招标人进行任何不正当联系，不会在竞争性投标过程中有任何违法违规行为。在正式合同准备好和签字前，本投标函及贵方的中标通知书将构成约束我们双方的合同。 投标方（盖章）：法定代表人（签字）：年 月 日附件* ******股份有限公司液相色谱仪采购投标报价表单位：万元序号名称规格数量价格交货地点交货时间*液相色谱仪二级管阵列检测器，四元梯度（带柱塞清洗），脱气机、自动进样器，柱温箱，色谱工作站软件，电脑，打印机*台*液相色谱仪紫外检测器，四元梯度（带柱塞清洗），脱气机、自动进样器，柱温箱，色谱工作站软件，电脑，打印机*台*合计：需要说明的问题：请附报价清单说明：*、请认真、完整填写上述表格。填写不完整的投标方有可能失去中标机会。*、价格为到货价格。*、投标方有另行需要说明的事项请附页说明。*、物资数量最终以双方签订的合同为准。*、本次招标竞价解释权归******股份有限公司。投标方名称：（盖章）法定代表人签字：年 月 日来自：中国招标网

名称：[url=http://www.gdkjfw.com/machines.php?id=1093]液相色谱仪[/url]【简称LC】定义：用液相色谱法对物质进行定性、定量分析的仪器。利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。[align=center][img=,600,347]http://www.gdkjfw.com/images/image/141525845408.jpg[/img][/align][b]简介[/b]液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱(LLC）及液-固色谱(LSC）。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。对高沸点化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。[b]工作原理[/b]系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱（固定相）内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来高效液相色谱仪主要有进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统，下面将分别叙述其各自的组成与特点。[align=center][img]http://www.gdkjfw.com/bdimages/upload1/20180509/1525845706164122.jpg[/img][/align]01进样系统一般采用隔膜注射进样器或高压进样间完成进样操作，进样量是恒定的。这对提高分析样品的重复性是有益的。02输液系统该系统包括高压泵、流动相贮存器和梯度仪三部分。高压泵的一般压强为l．47～4．4X10Pa，流速可调且稳定，当高压流动相通过层析柱时，可降低样品在柱中的扩散效应，可加快其在柱中的移动速度，这对提高分辨率、回收样品、保持样品的生物活性等都是有利的。流动相贮存器和梯度仪，可使流动相随固定相和样品的性质而改变，包括改变洗脱液的极性、离子强度、PH值，或改用竞争性抑制剂或变性剂等。这就可使各种物质（即使仅有一个基团的差别或是同分异构体）都能获得有效分离。03分离系统该系统包括色谱柱、连接管和恒温器等。色谱柱一般长度为10～50cm（需要两根连用时，可在二者之间加一连接管），内径为2～5mm，由"优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金等材料制成，住内装有直径为5～10μm粒度的固定相（由基质和固定液构成）．固定相中的基质是由机械强度高的树脂或硅胶构成，它们都有惰性（如硅胶表面的硅酸基因基本已除去）、多孔性（孔径可达1000?）和比表面积大的特点，加之其表面经过机械涂渍（与[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]中固定相的制备一样），或者用化学法偶联各种基因（如磷酸基、季胺基、羟甲基、苯基、氨基或各种长度碳链的烷基等）或配体的有机化合物。因此，这类固定相对结构不同的物质有良好的选择性。例如，在多孔性硅胶表面偶联豌豆凝集素（PSA）后，就可以把成纤维细胞中的一种糖蛋白分离出来。另外，固定相基质粒小，柱床极易达到均匀、致密状态，极易降低涡流扩散效应。基质粒度小，微孔浅，样品在微孔区内传质短。这些对缩小谱带宽度、提高分辨率是有益的。根据柱效理论分析，基质粒度小，塔板理论数N就越大。这也进一步证明基质粒度小，会提高分辨率的道理。再者，高效液相色谱的恒温器可使温度从室温调到60度，通过改善传质速度，缩短分析时间，就可增加层析柱的效率。[b]应用[/b]高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离HPLC成为解决生化分析问题最有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。液相色谱-质谱连用技术受到普遍重视，如分析氨基甲酸酯农药和多核芳烃等；液相色谱-红外光谱连用也发展很快如在环境污染分析测定水中的烃类，海水中的不挥发烃类，使环境污染分析得到

液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。1.高效液相色谱仪系统液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。对于整个系统而言，柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。2.常见问题及解决方法高效液相作为一种高精密仪器，如果在使用过程中不按照正确操作的话，就容易导致一些问题。其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。2.1柱压问题柱压问题是使用高效液相色谱过程中需要密切注意的地方，柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在50PSI（3.3Bar）之间（在使用梯度洗脱时，柱压平稳缓慢的变化是允许的）。压力过高、过低都属于柱压问题。2.1.1压力过高这是高效液相在使用中最常见的问题，指的是压力突然升高，一般都是由于流路中有堵塞的原因。此时，我们应该分段进行检查。（1）首先断开真空泵的入口处，此时PEEK管里充满液体，使PEEK管低于溶剂瓶，看液体是否自由滴下，如果液体不滴或缓慢滴下，则是溶剂过滤头堵塞。处理方法：用30%的硝酸浸泡半个小时，在用超纯水冲洗干净。如果液体自由滴下，溶剂过滤头正常，在检查；（2）打开Purge阀，使流动相不经过柱子，如果压力没有明显下降，液相色谱仪则是过滤白头堵塞。处理方法：将过滤白头取出，用10%的异丙醇超声半个小时。如果压力降至100PSI（6.7Bar）以下，过滤白头正常，在检查；（3）把色谱柱出口端取下，如果压力不下降，则是柱子堵塞。处理方法：如果是缓冲盐堵塞，则用95%的水冲至压力正常。如果是一些强保留的物质导致堵塞，则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降，则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上，用流动相冲洗柱子。这时，如果柱压仍不下降，只有换柱子入口筛板，但一旦操作不甚，很容易造成柱效下降，所以尽量少用。

液相色谱仪的故障排除 封跃鹏 邱赫男(国家环保总局标准样品研究所，北京，100029)来源：« 分析仪器 » 1日常维护1．1 泵 泵是液相色谱仪的心脏，须精心维护和保养。处于良好工作状态的泵，其基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而平稳。要使泵具备良好的操作性能，应该保持泵系统的清洁。具体做法如下：（1）要选择优质的容剂和试剂，在进入仪器前用0。45um膜过滤，并进行脱气处理。（2）泵开始使用时，一定要用合适的流动相彻底清洗干净。（3）定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，并经常清洗进液处的微孔滤头。（4）改变流动相时，应避免沉淀产生，以防止泵堵塞。1．2 色谱柱 色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱应具有很高的塔板数，且仪器基线平稳。色谱柱比较娇气，在平时的工作中须注意以下事项：（1）色谱柱不能够碰撞、弯曲或强烈震荡；安装时，一定要保证阀件或管路的清洁。（2）流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相。（3）在满足灵敏度的情况下，尽可能使用小进样量。如果样品比较“脏”，要进行净化或提纯处理。（4）分析结束语后，要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。（5）如色谱柱长期不用，应该用适当的有机溶剂保存并封闭或定期给柱子补充合适的流动相。1．3 检测器对于紫外检测器，在分析柱平衡的差不多时，开启检测器；在分析完成后，马上关闭检测器。1．4 进样器分析结束后，应反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染或堵塞。2 常见故障的分析与排除既使日常精心维护的液相色谱仪，随着使用时间的增加或使用者经验不足也会出现一些问题或故障。现将液相色谱仪容易出现的故障及解决办法介绍如下：2．1 保留时间变化保留时间的变化有三中情况：波动、缩短、延长。保留时间出现波动时，应检查柱温是否处于恒温状态，如果设置为室温，气温的变化会引起保留时间的波动，应该设置为恒定温度；等度和梯度间还没有充分达到平衡状态时，应该用十倍以上柱体积的流动相去平衡色谱柱；缓冲液浓度太低时，应换用＞25mmol/L的缓冲液；色谱柱被污染或已经接近柱寿命时，应更换保护柱或换新色谱柱。 保留时间缩短时，流速增加，应检查流速的设定；柱温高时，应检查柱的设置；进样量太大时，减少样品用量或降低样品浓度；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；流动相的PH值应保持3~7.5范围内，否则会引起柱键合相的流失。 保留时间延长时，流速减小，应检查流速的设定和管路是否有泄露；柱温低时，检查柱温的设置；流动相的组成发生了改变，比如流动相中易挥发有机相蒸发，两相之间互溶不好，会导致流动相不均匀或某一相出现部分沉淀；检查流动相的pH值是否3~7.5范围内，否则会引起柱键合相的流失。

液质联用仪有国家标准，但没有液相色谱仪的检测标准，我能参考液质的前处理和液相色谱仪的条件，用液相色谱仪检测吗？

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