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载物台固定式显微镜

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载物台固定式显微镜相关的资讯

  • OTT SLD 固定式多普勒流量计在人工渠道上的应用
    OTT SLD 固定式多普勒流量计在人工渠道上的应用背景介绍人工渠道作为连接自然河道的补充部分,对于水资源运送和调度起到很大的作用。渠道按用途可分为:灌溉渠道、动力渠道(用于引水发电)、供水渠道、通航渠道和排水渠道(用于排除农田涝水、废水和城市污水)等。了解这些渠道内部的水流量对于反映当地水资源的可利用量以及利用效率尤为重要。本案例为南方某市水务局为监测其市内主要的排水渠及景观河的流量情况,使用OTT SLD固定式多普勒流量计在若干个重点监测区域实现24小时在线流量监测,监测渠道内部流量变化情况,掌握各个渠道水资源动态变化特征的基本信息数据,为防洪排涝和水资源调度提供依据。应用情况 OTT SLD固定式多普勒流量计被安装于人工渠道侧岸之上,侧岸呈垂直状,使用可提拉式滑动支架固定于石质基质上,安装在固定位置进行测量,非测量时段可以提出水面进行仪器维护清洁。岸上集成自动监测的附属设备包括太阳能板、电池、控制器、数据采集器、通讯模块和视频监控等,流量计通过水下电缆与这些设备连接,监测数据通过移动网络上传至客户数据中心查看下载。OTT SLD固定式多普勒流量计通过确定河岸形状进行流量率定得出最终流量值。定时进行设备维护和清洁,以提供精确数据。本案例中OTT SLD固定式多普勒流量计进行24小时连续的流量实时监测,了解市内水资源运移情况调配水量。自动监测无需人工现场操作,节省人力成本。 优势特点§ 无人值守监测§ 方便维护且维护量小§ 同时获得流速、水位、流量数据§ 流量率定方式简便快捷 总结 本案例中的SLD固定式多普勒流量计进行24小时在线实时测量,安装于人工渠道(排水渠、景观河)河岸平直区域流量有代表性的地点,除流量数据外,还可同时得到流速和水位数据,便于客户了解渠道内水量情况,为客户监测域内水资源状况提供帮助。本站点数据变化规律稳定可靠,得到客户认可,可以很好的反映监测区域内的流量情况。
  • 《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》及《基于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》第二次讨论会圆满召开
    p style="text-align: center "  《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》及《基/pp style="text-align: center "  于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》/pp style="text-align: center "  第二次讨论会圆满召开/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/3100d325-e023-4627-8625-004e54e42ad2.jpg" title="image001.jpg" alt="image001.jpg"//pp style="text-align: center "  参会代表合影/pp  《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》及《基于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》第二次讨论会于11月22日在杭州白马湖建国饭店召开。会议由中国质量检验协会主办,青岛中质脱盐质量检测有限公司承办,由中国水利水电科学研究院、珠江水利委员会珠江水利科学研究院、南京河海智慧水利研究院、黄河勘测规划设计研究院、山东省科学院海洋仪器仪表研究所、中国船舶重工集团公司第七一五研究所、哈工大(威海)船海光电装备研究所、中国科学院西安光学精密机械研究所、中国环境科学研究院湖泊环境研究所等单位联合支持。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/b12382a6-96be-4dcf-98af-c4b74f4cc8c4.jpg" title="image003.jpg" alt="image003.jpg"//pp style="text-align: center "  中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会邓瑞德理事长/pp  来自中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会,中国水利水电科学研究院,珠江水利委员会珠江水利科学研究院,山东省科学院海洋仪器仪表研究所、燕山大学等相关单位的领导、专家以及来自水环境集团、珠海云洲、中船重工七一五所、等业内领军与知名企业的技术骨干二十余人参与了本次讨论会。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/acffa86b-fc04-4cf1-b2f6-74224e9decfb.jpg" title="image005.jpg" alt="image005.jpg"//pp style="text-align: center "  珠江水利委员会珠江水利科学研究院水生态室副主任王建国/pp  上午的《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》标准讨论会议由珠江水利委员会珠江水利科学研究院水生态室副主任王建国主持。首先由中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会邓瑞德理事长进行了开幕致辞。/pp  邓瑞德理事长表示,水资源的开发、配置、节约、保护和管理对国家与人民都是大事,标准作为水资源调度的技术支撑,对于行业技术水平的提升以及调度行为本身的规范化管理都具有重要意义。制定好的标准,为不同部门、不同工作环节之间的相互配合提供指导,尽快解决标准的缺失问题是当前工作的重点。希望在座专家本着“有用、能用、好用”的原则,在保质保量的基础上加快编制进度,争取标准早日实施。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/249d6d0a-6015-4a7f-b201-9e8ad40ffc8d.jpg" title="image007.jpg" alt="image007.jpg"//pp style="text-align: center "  中国水利水电科学研究院高工刘业森博士/pp  随后,中国水利水电科学研究院水环境所高工刘业森博士代表标准主笔团队进行了标准编制工作情况汇报。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/914da432-8f9c-4bc8-a745-2712128d32ad.jpg" title="image009.jpg" alt="image009.jpg"//pp style="text-align: center "  中国水利水电科学研究院高工张晶博士/pp  标准讨论环节由中国水利水电科学研究院水环境所高工张晶博士主持。与会专家与企业代表由场景需求和实际情况出发,对标准的范围、格式等内容进行了深入广泛的探讨,并对标准制定的下一步工作计划进行了安排和确认。/pp  下午对《基于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》标准进行了讨论。会议由中国水利水电科学研究院水环境所高工曹峰博士主持。/pp style="text-align: center"img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/0cbd0410-4ca8-4b30-a5a4-721e173ae1f7.jpg" title="image011.jpg" alt="image011.jpg"//pp style="text-align: center "  中国水利水电科学研究院高工曹峰博士/pp  首先由中国水利水电科学研究院高工曹峰博士代表标准主笔团队对《基于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》标准进行了编制工作情况汇报并主持标准讨论环节。标准主笔团队就标准的编制工作情况一一进行解答,并对标准制定的下一步工作计划进行了安排和确认。与会代表就标准相关技术参数、场景需求和实际情况提出了很多宝贵意见及建议。/pp  最后,由中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会邓瑞德理事长进行了总结讲话。邓瑞德理事长表示,本次两项标准讨论会作为2019水环境大会的平行标准讨论会之一,为参会企业提供了一次难得的了解标准化工作,参与标准制定工作的机会。邓理事长指出,标准编制是公益性的活动,对于行业发展、科技进步具有积极深远的影响。希望在座专家在会后继续保持交流沟通,标准编制团队尽快整理意见,修改完成。希望在不远的将来有更多企业加入到队伍中来。/pp style="text-align: center "img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201911/uepic/89797415-167c-4110-8ae5-c5ec71840e03.jpg" title="image013.jpg" alt="image013.jpg"//pp style="text-align: center "  讨论会会场/pp  水是基础性自然资源和战略性经济资源。近年来在“节水优先、空间均衡、系统治理、两手发力”的重要指示精神指导下,水资源工作者在水资源的开发、配置、节约、保护和管理,维护健康水生态、保障国家水安全方面展开了积极探索。将大数据与云技术引入水资源调度工作流程,以最尖端、最前沿的新技术助力水资源开发与保护,保障经济社会可持续发展,对于继续提升水资源工作者的资源管理能力与质量把控能力具有积极的意义。“/pp  标准制定工作组/pp  苑萍/pp  18366223266/pp  0532-80912156/pp  lyndayuan@vip.163.com/ppbr//p
  • InfraTec新推高清级固定式热像仪VarioCAM HD head
    德国英福泰克新推出高清级固定式红外热像仪VarioCAM HD head。采用最先进的1024x768像素微量热焦平面探测器,性能可靠、功能完备。采用专有探测器稳定和非均质化智能校正(NUC)技术,实现了长期无漂移(drift-free)测量。通过专利的ORI光学分辨率提升技术,可生成前所未有的2048× 1536像素高解析度的红外热图。在1024x768像素模式下帧频为30Hz ;开启子窗模式后,VarioCAM HD head的最大帧频更可高达240Hz。VarioCAM HD head是科研、产品开发、制程优化和质量控制等领域,高效率、精确的测量分析被测物热特性、温度场高速变化过程的最佳解决方案。。(详情请洽中国总代理-北京雅世恒源科技发展有限公司)The stationary industrial models VarioCAM HD head are based on the same core technology as the mobile models of the thermographic camera series VarioCAM High Definition NEW High-Resolution Thermographic camera VarioCAM HD headThe new high-resolution thermographic camera VarioCAM HD head was conceived for stationary industrial and scientific applications.Detector resolution: (1,024 x 768) IR pixelsWith optomechanical MicroScan feature up to (2,048 x 1,536) IR pixelsThermal resolution (at 30 ° C): better than 0.05 KSpectral range: (7.5 &hellip 14) µ mTemperature measurement range: (-40 &hellip 1,200) ° C, or optionally 2,000 ° CProtection degree of housing: standard IP54, optionally IP67Frame rate of up to 240 HzIntegrated trigger- and process interfaceHighest Geometric Resolution for Demanding Measurement TasksWith the high geometric resolution of the uncooled microbolometer Focal-Plane-Array detectors of (1,024 x 768) IR pixels, even smallest details are visible. Because of the optomechanical MicroScan technology, thermographic images with up to (2,048 x 1,536) IR pixels can be captured. The innovative MicroScan technology is designed for continuous operation and allows the FPA detectors once again to multiply their number of IR pixels, which is now four times higher than before. This multiplication is not achieved by simple interpolation of data but by generating real measurement data.Application in Harsh Industrial EnvironmentsThe stationary industrial models VarioCAM HD head are based on the same core technology as the mobile models of the thermographic camera series VarioCAM High Definition and are equipped with a GigE-Vision interface as well as digital in- and outputs. With their compact light metal housings, they are perfectly suited for stationary industrial applications under harsh conditions but also excel in computer-aided laboratory applications. Their protection degree IP67 makes them resistant to dust and hose water. The utilisation of high-class protection-degree-maintaining LEMO plugs protects the thermal camera even during computer-aided mains operation.Real-time Transmission of Radiometric Data to Computers with 240 HzRemote control connection to the VarioCAM HD head can be established via GigE-Vision- or RS232 interface. Save radiometric data with up to 240 Hz on your computer. The provided software pack IRBIS 3 allows for comfortable camera operation and efficient evaluation of captured thermographic data.。(详情请洽中国总代理-北京雅世恒源科技发展有限公司)The stationary industrial models VarioCAM HD head are based on the same core technology as the mobile models of the thermographic
  • 监测核辐射危害!生态环境部发布关于公开征求国家生态环境标准《固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)》意见的通知
    近日,生态环境部办公厅发布关于公开征求国家生态环境标准《固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)》意见的通知。为贯彻落实《中华人民共和国环境保护法》《中华人民共和国放射性污染防治法》《中华人民共和国核安全法》,规范辐射环境监测工作,我部组织编制了国家生态环境标准《固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)》,现公开征求意见。标准相关资料可登录我部网站(http://www.mee.gov.cn/)“意见征集”栏目检索查阅。本标准分为 11 个部分,包括前言、适用范围、规范性引用文件、术语和定义、测量系统、空气吸收剂量率测量、放射性核素测量、测量要求、数据报送、质量控制、附录和参考文献。前言部分明确了编制目的,阐述了内容;第 1 章规定了标准适用的范围;第 2 章列出了本标准所引用的标准或文献资料;第 3 章阐述了相关术语和定义;第 4 章描述了碘化钠γ谱仪测量系统的组成和功能,提出了技术指标要求;第 5 章 提出了用于空气吸收剂量率测量时的要求;第 6 章提出了用于放射性核素测量时 的要求;第 7 章规定了其他测量要求;第 8 章提出了数据报送要求;第 9 章提出 了仪器校准、期间核查等质量控制要求;附录部分给出了常用γ放射性核素数据 表、剥谱法参考资料、数据报送格式(详情见附件)。附件征求意见单位名单.pdf《固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)》编制说明.pdf固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿).pdf
  • 《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》及《基 于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》 标准启动会暨第一次讨论会圆满召开
    p style="text-align: center "  《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》及《基/pp style="text-align: center "  于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》/pp style="text-align: center "  标准启动会暨第一次讨论会圆满召开/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/c0de5ea1-0465-496a-a492-4d30382ac966.jpg" title="image001.jpg" alt="image001.jpg"//pp style="text-align: center "  参会代表合影/pp  《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》及《基于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》标准启动会暨第一次讨论会于9月23日在青岛金沙滩希尔顿酒店召开。会议由中国质量检验协会主办,青岛中质脱盐质量检测有限公司承办,由中国水利水电科学研究院、南京河海智慧水利研究院、山东省科学院海洋仪器仪表研究所、中国科学院西安光学精密机械研究所、哈工大(威海)船海光电装备研究所、中国环境科学研究院湖泊环境研究所联合支持。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/b4b48ee8-bc28-4ae5-ad2e-64e9ff50681b.jpg" title="image003.jpg" alt="image003.jpg"//pp style="text-align: center "  中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会邓瑞德理事长/pp  来自中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会,中国水利水电科学研究院,水利部海委科技咨询中心,南京河海智慧水利研究院、河海大学,哈工大(威海)船海光电装备研究所,珠江水利委员会珠江水利科学研究院,山东省科学院海洋仪器仪表研究所,中国海洋大学,中科院西安光学精密机械研究所等相关单位的领导、专家以及来自黄河勘测规划设计院、中船重工七一五所、新元易方、善思明、山东锋士、美国哈希、上海仪电、三泰环境、中天海洋、南京南瑞、聚光科技、诚悦光电、芯世界、青岛清万、怡文环境、清淼光电等业内领军与知名企业的技术骨干五十余人参与了本次讨论会。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/caed6cce-673f-4228-8b38-4d2786f4529a.jpg" title="image005.jpg" alt="image005.jpg"//pp style="text-align: center "  哈工大(威海)船海光电装备研究所所长田兆硕/pp  上午的《基于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》标准讨论会议由哈工大(威海)船海光电装备研究所所长田兆硕教授主持。首先由中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会邓瑞德理事长进行了开幕致辞。/pp  邓理事长在致辞中指出,做好水资源的开发、配置、节约、保护和管理,就是为经济社会可持续发展提供有力支撑。水资源工作者应当认真学习贯彻习近平总书记 “节水优先、空间均衡、系统治理、两手发力”的重要指示精神,统筹做好水资源保护治理、水资源分布与使用均衡。为了满足新形势下统筹兼顾的工作要求,及时为广大水资源工作者引入最尖端、最前沿的新技术、新产品,标准化工作至关重要。希望与会专家集思广益,做好本次标准制定工作,向国家70年诞辰献礼。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/f1f0b879-104c-439a-8dc1-77652ec753b1.jpg" title="image007.jpg" alt="image007.jpg"//pp style="text-align: center "  中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会常务副秘书长苑萍/pp  随后,中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会常务副秘书长、青岛中质脱盐质量检测有限公司总经理苑萍作了协会标准工作汇报。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/d3a68109-2040-48e6-bd59-dcdfd5940f4e.jpg" title="image009.jpg" alt="image009.jpg"//pp style="text-align: center "  中国水利水电科学研究院水环境所高工曹峰博士对《基于移动或固定式浮标生态环境监测系统技术规范》标准进行解读/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/6d841139-6f05-48a0-8e99-a5b98962021e.jpg" title="image011.jpg" alt="image011.jpg"//pp style="text-align: center "  山东省科学院海洋仪器仪表研究所研究员曹煊博士介绍分享了山仪所的研究成果与产品/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/90427381-abe9-4eb7-b0d3-ca745a96af01.jpg" title="image013.jpg" alt="image013.jpg"//pp style="text-align: center "  中国船舶重工集团公司第七一五研究所标准化主管林煜超分享交流了七一五所标准编制工作经验/pp style="text-align: center "img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/fc355970-144d-4784-bcab-6546335e05cd.jpg" title="image015.jpg" alt="image015.jpg"//pp style="text-align: center "  讨论会现场/pp  标准讨论环节由中国水利水电科学研究院水环境所高工曹峰博士主持。标准主笔团队对标准的编制工作情况进行了汇报,并对标准制定的下一步工作计划进行了安排和确认。与会专家及企业代表由场景需求和实际情况出发,对标准的格式、条款的设置等多个方面提出了很多宝贵意见及建议。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/5f094870-6f4f-4744-975e-5e066de75374.jpg" title="image017.jpg" alt="image017.jpg"//pp style="text-align: center "  珠江水利委员会珠江水利科学研究院水生态室副主任王建国/pp  下午对《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》标准进行了讨论。会议由珠江水利委员会珠江水利科学研究院水生态室副主任王建国主持。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/40cfa34e-df52-4ca1-bb04-69be00d618e9.jpg" title="image019.jpg" alt="image019.jpg"//pp style="text-align: center "  中国水利水电科学研究院高工刘业森博士/pp  首先由中国水利水电科学研究院高工刘业森博士对《区域水网水质水量联合调度平台技术导则》标准进行了解读。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/5cb69996-86b4-467b-8aa0-4711e2bf2fcb.jpg" title="image021.jpg" alt="image021.jpg"//pp style="text-align: center "  黄河勘测规划设计研究院有限公司工程实验技术研究所所长习晓红就黄河流域典型河段水质水量一体化调配进行了介绍/pp style="text-align: center "img style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/5fe6f7cb-85b2-489f-a7cd-6f45724e1267.jpg" title="image023.jpg" alt="image023.jpg"//pp  珠江水利委员会珠江水利科学研究院水生态室副主任王建国作《西江流域鱼类繁殖期水量调度试验研究生态效果评估探析》的报告/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/43fa7e16-7cf0-496b-9cb7-ca79287e483e.jpg" title="image025.jpg" alt="image025.jpg"//pp style="text-align: center "  中国水利水电科学研究院高工张晶博士/pp  之后的标准讨论环节由中国水利水电科学研究院高工张晶博士主持。标准主笔团队就标准的编制工作情况一一进行解答,并对标准制定的下一步工作计划进行了安排和确认。与会代表就标准相关技术参数、场景需求和实际情况提出了很多宝贵意见及建议。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/8ae6af27-4b98-4986-b066-c89762dd512f.jpg" title="image027.jpg" alt="image027.jpg"//pp style="text-align: center "  南京河海智慧水利研究院、河海大学教授万定生/pp  最后,由中国质量检验协会水环境工程技术与装备专业委员会邓瑞德理事长进行了总结讲话。邓瑞德理事长指出,先进、科学、权威的标准对于新技术、新产品的推广与普及具有强有力的推动作用。企业参与到治水中来,直面挑战,在推动市场发展的同时也将为企业自身带来发展壮大的机遇。希望各编制单位在接下来的标准编制工作中深挖市场需求,倾听行业呼声,积极提供技术支持与人力物力支持,协助做好标准编写的后勤保障工作,争取早日圆满完成标准编写任务。/ppimg style="max-width:100% max-height:100% " src="https://img1.17img.cn/17img/images/201909/uepic/0ca97306-bf27-4a55-8d66-7125e7aaab3b.jpg" title="image029.jpg" alt="image029.jpg"//pp style="text-align: center "  讨论会会场/pp  水是基础性自然资源和战略性经济资源。维护健康水生态、保障国家水安全,以水资源可持续利用保障经济社会可持续发展,是关系国计民生的大事。为了应对新时期、新形势下的新要求,“两只手”统筹兼顾抓好水资源保护治理、水资源分布与使用均衡两项工作,以内陆水体浮标生态环境监测系统、水质水量联合调度平台为代表的新技术、新产品不断涌现。/pp  本次会议所制定的标准将解决眼下相关新技术、新产品标准缺失的问题,对于继续提升水资源工作者的资源管理能力与质量把控能力,进一步贯彻落实习近平同志关于系统治水的重要指导精神,加强创新攻坚,构建安全、健康、优美的水系,为经济社会科学发展提供坚实支撑具有重大意义。/pp  标准制定工作组/pp  苑萍/pp  18366223266/pp  0532-80912156/pp  lyndayuan@vip.163.com/p
  • 生态环境部公开征求国家生态环境标准《固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)》意见
    为贯彻落实《中华人民共和国环境保护法》《中华人民共和国放射性污染防治法》《中华人民共和国核安全法》,规范辐射环境监测工作,我部组织编制了国家生态环境标准《固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)》,现公开征求意见。标准相关资料可登录我部网站(http://www.mee.gov.cn/)“意见征集”栏目检索查阅。  各机关团体、企事业单位和个人均可提出意见和建议。请于2023年11月10日前将书面意见反馈我部,意见电子版请发送至联系人邮箱。  联系人:生态环境部核设施安全监管司李飒、马磊  电话:(010)65646036、65646035  传真:(010)65646904  邮箱:lisa@chinansc.cn  地址:北京市东城区东安门大街82号  邮编:100006  附件:  1.征求意见单位名单  2.固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)  3.《固定式碘化钠γ谱仪连续监测技术规范(征求意见稿)》编制说明  生态环境部办公厅  2023年9月28日  (此件社会公开)  抄送:生态环境部辐射环境监测技术中心。
  • 海顿科克新应用-精密显微镜电动载片平台
    海顿科克直线传动是世界领先的直线运动产品制造商,公司最近发布了一个驱动精密显微镜窄片平台的应用,该工作平台移动的最小步长为15微米,最大推力为13N,在这个非常紧凑空间里的实现传动要求,无疑这是一个完美的机械结构,在精密的微流体或者光学仪器中经常会有这种需求。这个结构大约有22MM宽,25.2MM高,其行程最大可以达到64MM。 一个轻型的经过阳极氧化的铝合金型材做成的底座,底座两端分别安装有螺杆衬套和电机安装支架,整个结构的核心是海顿15000系列的永磁式直线步进电机,该电机已经成功应用在几千种结构应用中,该电机不需要复杂的控制设备,只需要简单的速度脉冲和方向信号。 整个结构的移动滑块是用带有自润滑效果的聚缩醛材料做成,滑块本身带有张紧弹簧,这能使滑块在运动过程中保证运动的精确性,滑块由2根涂有TFE涂层的直线滑轨做导向。滑块由KERK的螺杆驱动,螺杆由303不锈钢制成,并且由5种导程可选,分别是0.3MM,0.4MM,0.5MM,1.0MM,2.0MM,该螺杆一端固定在底座的螺杆衬套中,由于螺杆精密,所以当电机工作时,自然可以实现高精度的运动控制。 该电动载片平台结构还可以客户化定制,比如客户特定的底座,不同的行程(最高可达64MM),传感器安装,客户化的布线等等,都可以根据客户要求定制。 更多信息请访问海顿直线电机(常州)有限公司网站http://www.haydonkerk.com.cn
  • 电镜学堂丨扫描电子显微镜的结构(二) - 探测器系统
    这里是TESCAN电镜学堂第五期,将继续为大家连载《扫描电子显微镜及微区分析技术》(本书简介请至文末查看),帮助广大电镜工作者深入了解电镜相关技术的原理、结构以及最新发展状况,将电镜在材料研究中发挥出更加优秀的性能!第二节 探测器系统扫描电镜除了需要高质量的电子束,还需要高质量的探测器。上一章中已经详细讲述了各种信号和衬度的关系,所以电镜需要各种信号收集和处理系统,用于区分和采集二次电子和背散射电子,并将SE、BSE产额信号进行放大和调制,转变为直观的图像。不同厂商以及不同型号的电镜在收集SE、BSE的探测器上都有各自独特的技术,不过旁置式电子探测器和极靴下背散射电子检测器却较为普遍,获得了广泛的应用。§1. 旁置式电子探测器(ETD)① ETD的结构和原理旁置式电子探测器几乎是任意扫描电镜(部分台式电镜除外)都具备的探测器,不过其名称叫法很多,有的称为二次电子探测器(SE)、有的称为下位式探测器(SEL)等。虽然名称不同,但其工作原理几乎完全一致。这里我们将其统一称为Everhart Thornley电子探测器,简称为ETD。二次电子能量较小,很容易受到其它电场的影响而产生偏转,利用二次电子的这个特性可以对它进行区分和收集,如图3-25。在探测器的前端有一个金属网(称为法拉第笼),当它加上电压之前,SE向四周散射,只有朝向探测器方向的少部分SE会被接收到;当金属纱网加上+250V~350V的电压时,各个方向散射的二次电子都受到电场的吸引而改变原来的轨迹,这样大部分的二次电子都能被探测器所接收。图3-25 ETD的外貌旁置式电子探测器主要由闪烁体、光电管、光电倍增管和放大器组成,实物图如图3-26,结构图如图3-27。从试样出来的电子,受到电场的吸引而打到闪烁体上(表面通常有10kV的高压)产生光子,光子再通过光导管传送到光电倍增管上,光电倍增管再将信号送至放大器,放大成为有足够功率的输出信号,而后可直接调制阴极射线管的电位,这样便获得了一幅图像。图3-26 旁置式电子探测器的工作原理图3-27 Everhart-Thornley电子探测器的结构图一般电镜的ETD探测器的闪烁体部分都使用磷屏,成本相对较低,不过其缺点是在长时间使用后,磷材质会逐步老化,导致电镜ETD的图像信噪比越来越弱,对于操作者来说非常疲劳,所以发生了信噪比严重下降的时候需要更换闪烁体。而TESCAN全系所有电镜的ETD探测器的闪烁体都采用了钇铝石榴石(YAG)晶体作为基材,相比磷材质来说具有信噪比高、响应速度快、无限使用寿命、性能不衰减等特点。② 阴影效应ETD由于在极靴的一侧,而非全部环形对称,这样的几何位置也决定了其成像有一些特点,比如会产生较强的阴影效应。ETD通过加电场来改变SE的轨迹,而当样品表面凹凸较大,背向探测器的“阴面”所产生的二次电子的轨迹不足以绕过试样而最终被试样所吸收。在这些区域,探测器采集不到电子信号,而最终在图像上呈现更暗的灰度。而在朝向探测器的阳面,产生的信号没有任何遮挡,呈现出更亮灰度,这就是阴影效应。如图3-28,A和B区域倾斜度相同,按照倾斜角和产额的理论两者的二次电子产额相同。但是A区域的电子可被探测器无遮挡接收,而B区域则有一部分电子要被试样隆起的部分吸收掉,从而造成ETD实际收集到的电子产额不同,显示在图像上明暗不同。图3-28 ETD的阴影效应阴影效应既是优点也是缺点,阴影效应给图像形成了强烈的立体感,但有时也会使得我们对一些衬度和形貌难以做出准确的判断。如图3-29,左右两者图仅仅是图像旋转了180度,但试样表面究竟是球形凸起还是凹坑,一时难以判断,可能会给人视觉上的错觉。图3-29 球状突起物还是球状凹坑不过遇到这样的视觉错觉也并非无计可施,我们可以利用阴影效应对图像的形貌做出准确的判断。首先将图像旋转至特定的几何方向,将ETD作为图像的“北”方向,电子束从左往右进行扫描。如果形貌表面是凸起,电子束从上扫到下,先是经过阳面然后经过阴面,表现在图像上则应该是特征区域朝上的部分更亮。反之,如果表面是凹坑,则图像上朝上的部分显得更暗。由此,我们可以非常快速而准确的知道样品表面实际的起伏情况。(后面还将介绍其它判断起伏的方法)图3-30 利用阴影效应进行形貌的判断③ ETD的衬度在以前很多地方都把ETD称之为SE检测器,这种叫法其实不完全正确。ETD除了能使得SE偏转而接收二次电子,也能接收原来就向探测器方向散射的背散射电子。所以在加上正偏压的情况下,ETD接收到的是SE和BSE的混合电子。据一些报道称,其中BSE约占10-15%左右。如果将ETD的偏压调小,探测器吸引SE的能力变弱,而对BSE几乎没有什么影响。所以可以通过改变ETD的偏压来调节其接收到的SE和BSE的比例。如果将ETD的偏压改为较大的负电压,由于SE的能量小于50eV,受到电场的斥力,不能达到探测器位置,而朝向探测器方向散射的BSE因为能量较高不易受电场影响而被探测器接收,此时ETD接收到的完全是背散射电子信号。如图3-31,铜包铝导线截面试样在ETD偏压不同下的图像,左图主要为SE,呈现更多的形貌衬度;右图全部BSE,呈现更多的成分衬度。图3-31 ETD偏压对衬度的影响所以不能把使用ETD获得的图像等同于SE像,更不能等同于形貌衬度。这也是为什么作者更倾向于用ETD来称呼此探测器,而不把它叫做二次电子探测器。④ ETD的缺点ETD是一种主动式加电场吸引电子的工作方式,它不但能影响二次电子的轨迹,同时也会对入射电子产生影响。在入射电子能量较高时,这种影响较弱,但随着入射电子能量的降低,这种影响越来越大,所以ETD在低电压情况下,图像质量会显著下降。此外,ETD能接收到的信号相对比较杂乱,除了我们希望的SE1外,还接收了到了SE2、SE3和BSE,如图3-32。而后面三种相对来说分辨率都较SE1低很多,尤其SE3,更是无用的背底信号,这也使得ETD的分辨率相对其它镜筒内探测器来说要偏低。图3-32 ETD实际接收的信号§2. 极靴下固体背散射探测器背散射电子能量较高,接近原始电子的能量,所以受其它电场力的作用相对较小,难以像ETD探测器一样通过加电场的方式进行采集。极靴下固体背散射电子探测器是目前通用的、被各厂商广泛采纳的技术。极靴下固体背散射电子探测器一般采用半导体材料,位置放置在极靴下方,中间开一个圆孔,让入射电子束能入射到试样上,如图3-33。原始电子束产生的二次电子和背散射电子虽然都能达到探测器表面,不过由于探测器表面采用半导体材质,半导体具有一定的能隙,能量低的二次电子不足以让半导体的电子产生跃迁而形成电流,所以二次电子对探测器无法产生任何信号。而背散射电子能量高,能够激发半导体电子跃迁而产生电信号,经过放大器和调制器等获得最终的背散射电子图像,如图3-34。图3-33 极靴下背散射电子信号采集示意图图3-34 半导体式固体背散射电子探测器极靴下固体背散射电子探测器属于完全被动式收集,利用半导体的能带隙,将二次电子和背散射电子自然区分开。探测器本身无需加任何电场或磁场,对入射电子束也不会有什么影响,因此这种采集方式得到了广泛运用。有的固体背散射电子探测器被分割成多个象限,通过信号加减运算,可以实现形貌模式、成分模式和阴影模式等,有关这个技术和应用将在后面的章节中进行介绍。极靴下固体背散射电子探测器除了使用半导体材质外,还有使用闪烁体晶体的,比如YAG晶体。闪烁体型的工作原理和半导体式类似,如图3-36。能量低的二次电子达到背散射电子探测器后不会有任何反应,而能量高的背散射电子却能引起闪烁体的发光。产生的光经过光导管后,在经过光电倍增管,信号经过放大和调制后转变为BSE图像。闪烁体相比半导体式的固体背散射电子探测器来说,拥有更好的灵敏度、信噪比和更低的能带宽度,见图3-35。图3-35 不同材质BSE探测器的灵敏度图3-36 YAG晶体式固体背散射电子探测器一般常规半导体二极管材质的灵敏度约为4~6kV,也就说对于加速电压效应5kV时,BSE的能量也小于5kV。此时常规的半导体背散射电子探测器的成像质量就要受到很大的影响,甚至没有信号。后来半导体二极管材质表面进行了一定的处理,将灵敏度提高到1~2kV左右,对低电压的背散射电子成像质量有了很大的提升。而YAG晶体等闪烁体的灵敏度通常在500V~1kV左右。特别是在2015年03月,TESCAN推出了最新的闪烁体背散射电子探测器LE-BSE,更是将灵敏度推向到200V的新高度,可以在200V的超低电压下直接进行BSE成像。因为现在低电压成像越来越受到重视和应用,但是以往只是针对SE图像;而现在BSE图像也实现了超低电压下的高分辨成像,尤其对生命科学有极大的帮助,如图3-37。图3-37 LE-BSE探测器的超低电压成像:1.5kV(左上)、750V(右上)、400V(左下)、200V(右下)§3. 镜筒内探测器前面已经说到ETD因为接收到SE1、SE2、SE3和部分BSE信号,所以分辨率相对较低,为了进一步提高电镜的分辨率,各个厂商都开发了镜筒内电子探测器。由于特殊的几何关系,降低分辨率的SE2、SE3和低角BSE无法进入镜筒内部,只有分辨率高的SE1和高角BSE才能进入镜筒,因此镜筒内的电子探测器相对镜筒外探测器分辨率有了较大的提高。不过各个厂家或者不同型号的镜筒内探测器相对来说不像镜筒外的比较类似,技术差别较大,这里不再进行一一的介绍,这里主要针对TESCAN的电镜进行介绍。TESCAN的MIRA和MAIA场发射电镜都可以配备镜筒内的SE、BSE探测器,如图3-38。图3-38 TESCAN场发射电镜的镜筒内电子探测器值得注意的是InBeam SE和InBeam BSE是两个独立的硬件,这和部分电镜用一个镜筒内探测器来实现SE和BSE模式是截然不同的。InBeam SE探测器设计在物镜的上方斜侧,可以高效的捕捉SE1电子,InBeam BSE探测器设计在镜筒内位置较高的顶端,中心开口让电子束通过,形状为环形探测器,可以高效的捕捉高角BSE。镜筒内的两个探测器都采用了闪烁体材质,具有良好的信噪比和灵敏度,而且各自的位置都根据SE和BSE的能量大小和飞行轨迹,做了最好的优化。而且两个独立的硬件可以实现同时工作、互不干扰,所以TESCAN的场发射电镜可以实现镜筒内探测器SE和BSE的同时采集,而一个探测器两种模式的设计则不能实现SE和BSE的同时扫描,需要转换模式然后分别扫描。§4. 镜筒内探测器和物镜技术的配合镜筒内电子探测器分辨率比镜筒外探测器高不仅仅是由于其只采集SE1和高角BSE电子,往往是镜筒内探测器还配了各家特有的一些技术,尤其是物镜技术。TESCAN和FEI的半磁浸没模式、日立的磁浸没式物镜和E×B技术,蔡司的复合式物镜等,这里我们也不一一进行介绍,主要针对使用相对较多半磁浸没式透镜技术与探测器的配合做简单的介绍。常规无磁场透镜和ETD的配合前面已经做了详细介绍,如图3-39左。几乎所有扫描电镜都有这样的设计。而在半磁浸没式物镜下(如MAIA的Resolution模式),向各个方向散射的二次电子和角度偏高的背散射电子会在磁透镜的洛伦兹力作用下,全部飞向镜筒内。二次电子因为能量低所以焦距短,在物镜附近盘旋上升并快速聚焦,如图3-39中。因此只要在物镜附近上方的侧面放置一个类似ETD的探测器,只需要很小的偏压,就能将已经聚焦到一处的二次电子全部收集起来,同时又不会对原始电子束产生影响。所以镜筒内二次电子探测器与半浸没式物镜融为一体、相辅相成,提升了电镜的分辨率,尤其是低电压下的分辨率。背散射电子因为能量高,焦距较长,相对高角的背散射电子能够聚焦到镜筒内,在物镜附近聚焦后继续向上方发散飞行。此时在这部分背散射电子的必经之路上放置一个环形闪烁体,就可以将高角BSE全部采集,如图3-39右。图3-39 常规无磁场物镜和ETD(左)、半浸没式物镜和镜筒内探测器(中、右)§5. 扫描透射探测器(STEM)当样品很薄的时候,电子束可以穿透样品形成透射电子,因此只要在样品下方放置一个探测器就能接收到透射电子信号。一般STEM探测器有两种,一种是可伸缩式,一种是固定式,如图3-40。固定式的STEM探测器是将样品台与探测器融合在了一起,样品必须为标准的φ3铜网或者制成这样的形状(和TEM要求一样)。图3-40 可伸缩式STEM(左)与固定式STEM(右)STEM探测器和背散射电子探测器类似,一般也采用半导体材质,并分割为好几块,如图3-41。其中一块位于样品的正下方,主要用于接收正透过样品的透射电子,即所谓的明场模式;还有的位于明场探测器的周围,接收经过散射的透射电子,即所谓的暗场模式。有的STEM探测器在暗场外围还有一圈探测器,接收更大散射角的透射电子,即所谓的HAADF模式。不过即使没有HAADF也没关系,只要样品离可伸缩STEM的距离足够近,暗场探测器也能接收到足够大角度散射的透射电子,得到的图像也类似HAADF效果。图3-41 STEM探测器结构§6. 其它探测器除了电子信号探测器外,扫描电镜还可以配备很多其它信号的探测器,比如X射线探测器、荧光探测器、电流探测器等。不过电镜厂家相对来说只专注于电子探测器,而TESCAN相对来说比较全面,除了X射线外,其它信号均有自己的探测器。X射线探测器将在能谱部分中做详细的介绍。① 荧光探测器TESCAN的荧光探测器按照几何位置分为标准型和紧凑型两种,如图3-42。标准型荧光探测器类似极靴下背散射电子探测器,接收信号的立体角度较大,信号更强,不过和极靴下背散射电子探测器会有位置冲突;而紧凑型荧光探测器类似能谱仪,从极靴斜上方插入过来,和背散射探测器可以同时使用,不过接收信号的立体角相对较小。图3-42 标准型(左)和紧凑型(右)荧光探测器如果按照性能来分,荧光探测器又分为单色和彩色两类,如图3-43。单色荧光将接收到的荧光信号经过聚光系统进行放大,不分波长直接调制成图像;彩色荧光信号经过聚光系统后,再经过红绿蓝三原色滤镜后,分别进行放大处理,再利用色彩的三原色叠加原理产生彩色的荧光图像。黑白荧光和彩色荧光和黑白胶片及数码彩色CCD原理极其类似。一般单色型探测器由于不需要滤镜,所以有着比彩色型更好的灵敏度;而彩色型区分波长,有着更丰富的信息。为了结合两者的优势,TESCAN又开发了特有的Rainbow CL探测器。在普通彩色荧光探测器的基础上增加了一个无需滤镜的通道,具有四通道,将单色型和彩色型整合在了一起,兼顾了灵敏度和信息量。图3-43 黑白荧光和彩色荧光探测器阴极荧光因为其极好的检出限,对能谱仪/波谱仪等附件有着很好的补充作用,不过目前扫描电镜中配备了阴极荧光探测器的还不多。图3-44含CRY18(蓝)和YAG-Ce(黄)的阴极荧光(左)与二次电子(右)图像② EBIC探测器EBIC探测器结构很简单,主要由一个可以加载偏压的单元和一个精密的皮安计组成。甚至EBIC可以和纳米机械手进行配合,将纳米机械手像万用表的两极一样,对样品特定的区域进行伏安特性的测试,如图3-45。图3-45 EBIC探测器与纳米机械手配合检测伏安特性 第三节、真空系统和样品室内(台)电子束很容易被散射,所以SEM电镜必须保证从电子束产生到聚焦到入射到试样表面,再到产生的SE、BSE被接收检测,整个过程必须是在高真空下进行。真空系统就是要保证电子枪、聚光镜镜筒、样品室等各个部位有较高的真空度。高真空度能减少电子的能量损失,提高灯丝寿命,并减少了电子光路的污染。钨灯丝扫描电镜的电子源真空度一般优于10-4Pa,通常使用机械泵—涡轮分子泵,不过一些较早型号的电镜还采用油扩散泵。场发射扫描电镜电子源要求的真空度更高,一般热场发射为10-7Pa,冷场发射为10-8Pa。场发射SEM的真空系统主要由两个离子泵(部分冷场有三个离子泵)、扩散泵或者涡轮分子泵、机械泵组成。而对于样品室的真空度,钨灯丝和欧美系热场的要求将对较低,一般优于2×10-2Pa即可开启电子枪,所以换样抽真空的时间比较短;而日系热场电镜或者冷场电镜则要达到更高的真空度,如9×10-4Pa才能开启电子枪。为了保证换样时间,日系电镜一般都需要额外的交换室,在换样的时候,利用交换室进行,不破坏样品室的真空。而欧美系电镜普遍采用抽屉式大开门的样品室设计。两种设计各有利弊,抽屉式设计一般样品室较大,可以放置更大更多的样品,效率高。或者对于有些特殊的原位观察要求,大开门设计才可能放进各种体积较大的功能样品台,如加热台、拉伸台;交换室相对来说更有利于保护样品室的洁净度,减少污染。不过大开门式设计也可以加装交换室,如图3-46,达到相同的效果,自由度更高。图3-46 大开门试样品室加装手动(左)和自动(右)交换室而且一些采用了低真空(LV-SEM)和环境扫描(ESEM)技术的扫描电镜的样品室真空可分别达到几百帕和接近三千帕。具备低真空技术的电镜相对来说真空系统更为复杂,一般也都会具备高低真空两个模式。在低真空模式下一般需要在极靴下插入压差光阑,以保证样品室处于低真空而镜筒处于高真空的状态下。不过加入了压差光阑后,会使得电镜的视场范围大幅度减小,这对看清样品全貌以及寻找样品起到了负面作用。样品室越大,电镜的接口数量也越多,电镜的可扩展性越强,不过抽放真空的时间会相对延长。TESCAN电镜的样品室都是采用一体化切割而成,没有任何焊缝,稳定性更好;而一般相对低廉的工艺则是采用模具铸造。电镜的样品台一般有机械式和压电式两种,一般有X、Y、Z三个方向的平移、绕Z的旋转R和倾斜t五个维度。当然不同型号的电镜由于定位或者其它原因,五个轴的行程范围有很大区别。一般来说机械马达的样品台稳定性好、承重能力强、但是精度和重复性相对较低;压电陶瓷样品台的精度和重复性都很好,但是承重能力比较弱。样品台一般又有真中央样品台和优中心样品台之分。样品台在进行倾转时都有一个倾转中心,样品台绕该中心进行倾转。如果样品观察的位置恰好处于倾转中心,那么倾转之后电镜的视场不变;但如果样品不在倾转中心,倾转后视场将会发生较大变化。特别是在做FIB切割或者EBSD时,样品需要经过五十几度和七十度左右的大角度倾转,电镜视场变化太大,往往会找不到原来的观察区域。在大角度倾转的情况下如果进行移动的话,此时样品会在高度方向上也发生移动,不注意容易碰撞到极靴或者其它探测器造成故障,这对操作者来说是危险之举。而优中心样品台则不一样,只要将电子束合焦好,电镜会准确的知道观察区域离极靴的距离,在倾转后观察区域偏离后,样品台能自动进行Y方向的平移进行补偿,保持观察的视野不变,如图3-47。图3-47 真中央样品台与优中心样品台【福利时间】每期文章末尾小编都会留1个题目,大家可以在留言区回答问题,小编会在答对的朋友中选出点赞数最高的两位送出本书的印刷版。【本期问题】半导体材质的探测器和YAG晶体材质的探测器哪个更有利于在低加速电压下成像,为什么?(快关注微信回答问题领取奖品吧→)简介《扫描电子显微镜及微区分析技术》是由业内资深的技术专家李威老师(原上海交通大学扫描电镜专家,现任TESCAN技术专家)、焦汇胜博士(英国伯明翰大学材料科学博士,现任TESCAN技术专家)、李香庭教授(电子探针领域专家,兼任全国微束分析标委会委员、上海电镜学会理事)编著,并于2015年由东北师范大学出版社出版发行。本书编者都是非常资深的电镜工作者,在科研领域工作多年,李香庭教授在电子探针领域有几十年的工作经验,对扫描电子显微镜、能谱和波谱分析都有很深
  • 北京将装150套固定遥感监测设备
    &ldquo 尾气遥测,合格&rdquo ,随着车辆正常驶过,黄色和绿色的字体在黑屏幕上跳动,白色的遥感车旁,工作人员正记录着数据。北京市机动车排放管理中心副主任厉凛楠介绍,北京将加强整治机动车污染,增加遥感车的数量,在全市重要路段安装150套固定式遥感监测设备。  采用激光遥感监测技术检测机动车排放,是指利用遥感设备发出的部分光红外光和紫外光照射机动车尾气,对尾气中不同物质的吸收光谱进行分析,检测出一氧化碳(CO)、二氧化碳(CO2)、碳氢化合物(HC)、氮氧化物(NOX)的浓度。  目前,北京机动车保有量已达550余万辆,机动车排放的一氧化碳、碳氢化合物、氮氧化物分别占空气污染总量的86%、32%、56%。PM2.5来源中,机动车排放占本地排放源的31.1%。  厉凛楠介绍,遥感车能够在不影响机动车正常行驶的情况下,对机动车的动态排放进行实时检测,具有检测速度快(0.7秒检测一辆车)、效率高、监测范围广、节省人力的特点,已在很多发达国家和地区采用。  &ldquo 遥感监测,填补了对上路行驶的机动车的监管空白&rdquo ,厉凛楠说。他指出,遥感检测车是执法的重要方式,为北京机动车排放监管增添了新手段,增加了执法检查的科技含量。  他介绍,数据将自动进入数据库,对于检测超标的车辆,将通过发送短信、书面信件等通知车主进行维修,罚款300元。他说,通过对大量监测数据的分析,评估机动车年检场尾气检测工作情况,可有针对地加强机动车检测场的管理 也可筛选出排放水平较高的机动车类型,加强对车辆的治理。  他介绍,目前北京各区县环保部门积极协调交管部门,在全市85个遥感监测点位开展执法检查,市环保局购置了19辆激光遥感检测车配发给全市各区县及亦庄经济开发区,在全国率先对上路行驶的机动车尾气排放实施大规模动态监测。  2014年前9个月里,北京市遥感监测597万余辆,处罚超标车4168辆。  &ldquo 将不断扩大应用范围&rdquo ,厉凛楠说。他称,在充分发挥现有移动式遥感监测车灵活特性的基础上,北京将补充20辆搭载新型汽柴一体化遥测设备的监测车,并在全市重要路段安装150套固定式遥感监测设备,&ldquo 搭建全市的遥感监测网络信息平台。&rdquo
  • 蔡司Axio Observer倒置式显微镜升级版荣耀上市
    pbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"img style="FLOAT: none" title="Observer 3m.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/c8573f28-1b28-4279-8e15-034e0721454c.jpg"//ppbr//ppbr//ppbr//ppbr//ppbr//ppbr//ppbr//ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: justify" 近期,光学领导品牌德国蔡司公司推出了全新升级版的Axio Observer倒置式金相显微镜,系统升级后增加了全新的光强记忆功能,结合专业的光学系统与自动化设计,使系统更稳定,重复操作更简便。创新的Axio observer系统是一个开放的成像平台:按照目前的需求进行配置,无论何时分析研究需求有变化时,仅需一个简单的升级就可以满足所有材料应用。/pp /ppstrong产品优势:/strong/ppstrong金相分析中节省时间/strong/pp· 使用 Axio Observer 让样品制备和检测更省时。/pp· 倒置设计利于与物镜的平行排列。/pp· 在最短的时间内观察最多的样品:将样品放置在载物台上,一旦聚焦,无论再次改变放大倍数或更换样品都无需再次聚焦。/ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"img title="图片1.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/3664f3d3-2515-4ddc-a52a-503c5f911001.jpg"/ /ppbr//ppstrong值得信赖的检测结果和优异的成像质量/strong/pp style="TEXT-ALIGN: justify" 您会震惊于对Axio Observer所提供的高品质图像,尤其是在高倍工作环境下。/pp style="TEXT-ALIGN: justify" Axio Observer能够提供均匀的照明环境保证整个视野都能呈现清晰的图像,结合自动化组件的与ICCS光学系统,保证了每一次的测量结果都是可靠的并且可重复的。/pp style="TEXT-ALIGN: justify" 利用专业的分析软件模块,您可以在短时间内对金相组织结构进行分析,如夹杂物、晶粒度及多相面积含量等。/ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"img title="图片2.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/46a72e34-ee00-4e31-86f1-e70f9eeadb5f.jpg"/ /ppbr//ppstrong多种分析对比技术,灵活选择/strong/pp style="TEXT-ALIGN: justify" 明场和暗场,采用光陷阱技术及强大的杂散光消除技术大幅降低图像的背景噪音,获得最丰富的组织细节、最锐利的图像。/pp style="TEXT-ALIGN: justify" 偏光分析技术,利用固定式起偏器检偏器、360& #176 旋转检偏器或具有全波段补偿器的可旋转检偏器,无需旋转载物台既实现对各向异性材料的双反射性及多色性分析。/pp style="TEXT-ALIGN: justify" 圆偏光微分干涉(C-DIC),利用专利的圆偏光干涉技术可顺利实现对样品表面轮廓的全组织干涉图像分析,且无需配置旋转载物台。/pp /ppstrong应用图像/strong/pp style="TEXT-ALIGN: center" /pp style="TEXT-ALIGN: center"img style="WIDTH: 542px HEIGHT: 515px" title="图片4.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/68485178-ffbf-44a4-9b52-f961b87d0fd1.jpg"//ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"strong巴克蚀刻铝,反射光,偏光/strong/pp style="TEXT-ALIGN: center" /pp style="TEXT-ALIGN: center"img style="WIDTH: 541px HEIGHT: 462px" title="图片5.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/ed4e37ff-0dc0-4462-8525-9157b3027deb.jpg"//ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"strong球状石墨,反射光,明场/strong/pp style="TEXT-ALIGN: center"br//pp style="TEXT-ALIGN: center"img style="WIDTH: 545px HEIGHT: 503px" title="图片6.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/f96bdede-de78-4fe6-851e-e6a43b891afa.jpg"/ /ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"strong铸造铝硅,反射光,暗场/strong/pp style="TEXT-ALIGN: center" /pp style="TEXT-ALIGN: center"img style="WIDTH: 541px HEIGHT: 499px" title="图片7.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/e3967ef9-3330-4168-a7ed-5c5a8a3a2efc.jpg"//ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"strong巴克蚀刻铝,反射光,C-DIC/strong/pp style="TEXT-ALIGN: center" /pp style="TEXT-ALIGN: center"img style="WIDTH: 539px HEIGHT: 461px" title="图片8.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/4340e6fa-e814-4050-bcac-2f924c67a40e.jpg"//ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"strong锌,反射光,带& #955 板偏光/strong/pp style="TEXT-ALIGN: center"br//pp style="TEXT-ALIGN: center"img style="WIDTH: 543px HEIGHT: 467px" title="图片9.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201512/uepic/dd977ca9-9f5a-455c-8ead-ab22ce824700.jpg"/ /ppbr//pp style="TEXT-ALIGN: center"strong红砷镍矿,反射光,带& #955 板偏光/strong/pp /ppbr//ppbr//p
  • 观察者---显微镜下的空间与时间
    从古至今,人类一直在追寻更高更远的真相,从远洋航行到太空探索,人们不断征服一个个宏伟的目标,但是人们肉眼所见的宏观世界不是世界的全部,还有人眼无法看清的微观世界,它同样也吸引着无数人去探索和追寻。无论宏观还是微观事物,我们的观测都是基于三维空间的属性,即XYZ三维,而对事物形态变化的观察则需要再引入一个衡量因素--时间T,因此对事物观察的最完备方式一定是XYZT的同时记录,即形态+时间的长时间摄影,这也是显微镜的终极功能。经过三百多年的发展,现代显微镜提出分辨率、景深、视野等概念,并不断提出解决方案,显微镜已经初步满足我们对微观世界观察的需求,帮助我们记录下微观世界的空间和时间。微观世界观察最重要的是细节的分辨,分辨率的概念便由此诞生,分辨率是指人眼可以区分的两个点之间的最小距离,只在XY维度有效,根据瑞利判据,Rayleigh Criterion,正常人能分辨的极限是明视距离25cm处0.2mm的两个点,当我们使用显微镜后,我们可以看清更小距离的两个点,这便提升了我们观察的分辨率。随着现代研究的不断深入,人们对分辨率的要求也在不断提高,而科学家们也在不断的提升显微镜的分辨率,如电子显微镜将分辨率提升至纳米级别,实现了对病毒的观察,超高显微成像技术,将显微镜的分辨率从200纳米提升到几十纳米,实现了对活细胞细胞器的观察。分辨率的提升也带来了新的问题,即视野和景深的减小,当用普通中央照明法(使光线均匀地透过标本的明视照明法)时,显微镜的分辨距离为d=0.61λ/NA,可见光波长范围为400—700nm,取其平均波长550nm,波长是固定常量,因此,增大NA数值,即可得到更小的D值,也就是可以分辨的两点之间的距离更小,可以让人眼看清楚更小的物体。NA值即数值孔径,描述了透镜收光锥角的大小,NA = n * sinα,即透镜与被检物体之间介质的折射率(n)和孔径角(2α)半数的正弦之乘积。n为物镜与样本之间介质的光折射率,当显微镜物方介质为空气时,折射率n = 1 , 采用折射率高于空气的介质,可以显著提高NA值,水浸介质是蒸馏水,折射率为1.33;油浸物镜介质是香柏油或其它透明油,其折射率一般在1.52左右,接近透镜和载玻片的折射率,因此,油镜的NA值高于空气镜。孔径角又称“镜口角”,是透镜光轴上的物体点与物镜前透镜的有效直径所形成的角度,增大镜口角,可以提高正弦值,其实际上限约为72度(正弦值为0.95),乘以香柏油折射率1.52,可以得出最大NA值为1.45左右,代入分辨率计算公式,可以得出常规显微镜极限XY平面分辨率为0.2um左右。NA值还会直接影响显微镜的视野亮度(B)。由公式B∝N.A.2/ M2 我们可以推出,亮度随数值孔径(N.A.)的增大或者物镜倍率(M)的降低而增加。从理论上来说,我们应该追求尽可能高的NA值,以获得更好的XY平面分辨率和视野亮度。然而凡事都有两面性,XY平面分辨率的提升,会带来Z轴景深和观察视野的减小。显微镜一般都是垂直向下取景的,通过视场直径内观察到的物体表面凸起的位置与凹下的位置都能够看的很清楚时,那么凸点与凹点之间的高度差就是景深了,对于显微镜来说景深越大越好,景深越大在观察高低不平整的物体表面时,能够得到更好更立体的清晰度画面,大景深有助于我们对微观世界进行垂直方向形态的观察,也就是XYZ三维形态中的Z轴信息。景深就是象平面上清晰的象所对应物平面的前后空间的深度:dtot=(λ*n)/NA + n/(M∗NA) * e,dtot:景深,NA :数值孔径,M :总放大率,λ:光波波长, (通常λ=0.55um),n: 试样与物镜之间介质的折射率(空气: n=1、油: n=1.52)根据这个公式,我们可以知道,Z轴景深与XY平面NA值成反比。除了景深外,视野也受到NA值的影响,通过仪器固定注视一点时所能看见的空间范围即视野,它的计算与物镜的放大倍数直接相关,观察所看到的实际视野直径等于视场直径除以物镜的放大倍数,目镜会表明对应视场数,如10/18,即放大倍数10倍,视场直径18mm,因此当目镜确定后,放大倍数越大则观察的视野越小。XY平面分辨率是对局部细节的解析,而视野则决定了我们对样本的观察范围,视野必然是越大越好,但受限于当前的技术,我们必须采用高倍物镜,才可以得到良好的NA值,因此,视野和NA值有间接的负相关系。当我们需要观察的样本大于我们的视野时,每次观察只能看到一个局部,为了解决这个问题,拼图技术便应运而生。通过在XY方向移动样本,连续拍下不同位置的图像,最后拼接在一起,就可以得到一张全视野的图像。▲镜下局部视野▲拼接后全视野▲手动拼接▲自动拼接(图源:Echo显微镜)拼接分为手动和自动两种,手动拼图成本低廉,但是对人员的操作水平,经验要求很高,如上图,操作人员稍有不慎,就会出现图片接缝问题,同时手动拼图速度慢,不适合大批量,高通量样本处理,比如医院病理科日均上百病理切片观察,手动拼图方式无法满足要求。自动拼图的核心部件是全自动载物台,结合软件,可自动实现全自动,大范围全视野拍摄,结合自动Z轴对焦补偿,即可得到全视野的清晰图像。Echo Revolution 全自动荧光显微镜Echo Revolution全自动荧光显微镜,将XYZ三轴全部实现电动化,从而实现自动完成多图拼接的大视野高分辨率成像,而电动化的Z轴可以帮助用户实现自动聚焦、自动定焦和Z-Stacking 多层扫描大景深成像。Echo Revolution全自动荧光显微镜还添加了延时摄影功能,可以帮助用户实现长时间观察和时间回溯,使用户可以进行更全面的观察实验。
  • 光学显微镜、电镜用于地震灾区石棉粉尘检测
    2013年4月20日上午八时零二分,四川省雅安市芦山县地区发生7.0级地震,地震造成重大人员伤亡和财产损失。地震发生后,科技部紧急研究部署四川雅安地震抗震救灾科技工作,并在科技部门户网站发布抗震救灾实用技术手册,供地震灾区选用。在抗震救灾实用技术手册中,发布了地震灾区石棉粉尘检测技术。具体信息如下:  灾后各灾区的损坏建筑的清理、拆除、重建工作非常繁重,在这个过程中,粉尘的污染是个十分重要的问题,特别是很多建筑使用了或多或少的石棉材料,由此产生的石棉粉尘会对人体健康造成危害。本手册内容为针对石棉粉尘的分析监测技术和使用了石棉材料的建筑物的拆解及石棉废弃物的安全处理处置操作技术,以备地震灾区在工作中参照采用。  地震灾区使用了石棉材料的建筑物的安全拆解及石棉废弃物的处理处置应遵循专人按章操作,严密防护,安全、妥善贮存运送,指定地点集中处置,在整个过程中均设立明显示警标志,确保在拆解、处理处置过程及处置后的环境安全的原则。在工作过程中,要针对工作现场及周边进行石棉纤维污染的监测,防止造成污染,确保人体健康。  石棉纤维的检测方法有多种,主要有光学显微镜法、电镜法、X-射线衍射法等。其中光学显微镜法原理简单、所使用光学显微镜较为常见。而电镜法则准确度比较高,可以检测出较为细小的石棉纤维颗粒。  一.固体样品的检测  可参照HJ/T 206-2005《环境标志产品技术要求 无石棉建筑制品》的分析方法。主要方法如下:  1.样品的采集  固体材料中石棉检测工作的样品采集方法如下。  在材料的不同部位取下样品若干块,取样量约50-200克左右。  2.样品的预处理  1)被测样品中有机物质的去除。采用高温烘烤方法,在马弗炉中在400-500℃的温度下加热2小时左右,除去被测样品中的有机物质。  2)块状样品的粉碎。采用机械手段进行破碎和研墨至粉末状。(若使用破碎机,粉碎时间不要太长。不然会造成石棉纤维成为细小颗粒,无法辨别)  3)纤维束状和絮状样品。用剪子剪碎后,可用研钵稍做研磨,以使缠绕成团的纤维和过粗的纤维束可以分离舒展。或用镊子等工具从边缘剥离少许。  4)将粉碎或研磨好的样品进行充分的混匀待用。  3.样品的分析  采用光学显微镜法分析参照HJ/T 206-2005《环境标志产品技术要求 无石棉建筑制品》。  采用扫描电镜检测参照ISO 14966-2002《环境空气—无机纤维颗粒计数浓度的测定—扫描电子显微镜法》。  二.空气样品中石棉纤维的检测  1.光学显微镜法  样品采集就是将含石棉尘的空气抽取通过采样滤膜,石棉尘于滤膜上透明固定后,在相衬显微镜下计数,根据所采气体体积计算出每立方厘米气体中的石棉尘的根数。  采样及测定方法参照HJ/T41-1999《固定污染源排气中石棉尘的测定-镜检法》。  2.扫描电镜法  样品采集及测定可参照ISO 14966-2002《环境空气—无机纤维颗粒计数浓度的测定—扫描电子显微镜法》。  样品采集时可使用适用于扫描电镜观测的0.2微米或者0.4微米孔径的核孔膜。采样流量5-10L/min.。采样时间根据粉尘污染情况确定,以不造成颗粒物重叠为宜。  参照ISO 14966-2002 标准,在2000倍下进行观察和计数,计数规则参照上述标准。  技术来源  单位名称: 国家环境分析测试中心  联系地址: 北京朝阳区育慧南路1号 邮编:100029  联系人: 董树屏  联系电话:13601358418  e-mail: yrhuang@cneac.com  石棉的定义及可能含有石棉材料的建筑材料  石棉定义:石棉主要有两类,一类指属于蛇纹岩类的纤维状矿物硅酸盐,即温石棉(白石棉) 另一类是指闪石类纤维状矿物硅酸盐,即阳起石、铁石棉(棕石棉、镁铁闪石-铁闪石)、直闪石、青石棉(蓝石棉)、和透闪石。  石棉粉尘是指环境中悬浮在空中的石棉微粒。直径小于3微米,长度与直径之比大于3,纤维测量长度大于5微米的石棉纤维对人体的危害最大。  我国建筑材料中使用的主要是温石棉。可能含有石棉材料的建筑材料包括:石棉水泥瓦,钢丝网石棉水泥波瓦,石棉水泥平板,TR建筑平板,石棉硅酸钙板,石棉水泥管,石棉纱、线,石棉绳,石棉布,石棉带,热绝缘石棉纸,衬垫石棉纸、板,保温石棉板,泡沫石棉,石棉衣著,石棉被等。在这些材料中水泥制品比较坚固稳定,而保温石棉板、绝缘材料、泡沫石棉的材料较为松散易碎,更易于进入空气中造成污染。
  • 飞纳推出世界首款车载可移动扫描电子显微镜
    飞纳扫描电镜自2006年问世以来,一直不断技术创新,从用户的角度研发出一系列新的产品,2014年隆重推出世界首款车载可移动的扫描电镜,突破了传统电镜安置在固定场所、怕震动等局限性,为科学研究、生产制造带来全新的用户体验。 完全集成扫描电子显微镜(SEM)和EDX分析一体机能够对任意地方的样品进行快速和准确的调查和分析。通过车载可移动的扫描电镜,飞纳能够随时随地的为用户进行现场直观的演示,飞纳12S抽真空、30S快速成像、简单方便的操作界面能够为用户优化操作时间,及时获取样品信息,提高工作效率。 放眼过去,从飞纳电镜在荷兰诞生到2014年,全球销售总量已经突破2600台。在中国,安装并使用飞纳电镜的用户已经超过300位,并且还在高速增加,公司已经在中国取得了辉煌的成绩。未来,飞纳电镜将依托市场平台优势,整合全方位资源,进一步扩展项目、提高品质,开拓更广阔的市场!
  • 如何选择一台适合自己的显微镜——显微镜的种类选择
    2022年的春节已接近尾声,科研的小伙伴已经开始忙碌起来了,对于新学期是不是也有新的计划,发一篇sci的文章顺利毕业,脱单flag,头发多一点点,细胞养好,科研项目进展顺利,老师能给买台心仪已久的显微镜;你想知道选择什么种类的显微镜,正置还是倒置,宽场显微镜、超高分辨率显微镜、激光共焦显微镜等等,小本本备好,我们开始了。1不同成像原理,不同分辨率的显微镜如何选择显微镜作为生命科学领域研究的必须工具,其结构复杂,配置繁多,根据不同的配置和结构,相应的价格有很大的差异。那很多用户在实际采购过程中,看到长串的配置不知如何去选择,怎么用合理的价格去买到一个完全能够满足自己实验需求的显微镜呢?从今天这期推文开始,将会着重介绍选择显微镜的几个关键核心问题,目的是让用户能够在自己的预算范围内选择出符合自己实验需求的显微镜。首先要知道显微镜从开始诞生发展到现在,主要通过分辨率来划分,分为宽场显微镜、超高分辨率显微镜、激光共焦显微镜以及电镜。这一系列显微镜的分辨率从光镜的200纳米到超高与共聚焦的100多到几十纳米再到电镜的0.2纳米。并不是说显微镜的分辨率越高,就越适合我们的研究。分辨率越高,意味着其价格和操作的难度系数是逐级增长的。那我们如何去选择一个适合我们的显微镜呢?要根据老师和用户自己样品的大小去选择。2不同机型的选择我们在根据样品的大小和观察的实验需求,确定了某一类型的显微镜之后。我们需要根据实验样品去选择相对应的合适机型。显微镜的主要机型,根据其光路设计的不同,主要分为体视显微镜、正置显微镜和倒置显微镜。体视显微镜:体视显微镜,是一种具有正像立体感的显微镜,被广泛应用于材料宏观表面观察、失效分析、断口分析等工业领域。以及生物学、医学、农林、工业及海洋生物各部门。因为体视显微镜的光路设计,符合人体眼睛夹角的偏角,所以通过体视显微镜观察物体时,类似于我们眼睛的成像光路,这样会让我们看到立体的图像呈现。正是由于此设计,体视显微镜的分辨率要远低于传统的正置或倒置显微镜。体视显微镜更多的是观察小物体的宏观表象,而不是更为精细的细节。正置显微镜:正置显微镜作为最早诞生的机型它更多的是要配合玻片来对样品实现显微观察。如何来定义正置显微镜呢?显微镜物镜朝下,观察的样品在物镜的下方,这样的显微镜我们称之为正置显微镜。一般适用于的观察样品为:透明样品、薄的样片、生物切片、涂片等。但由于正置显微镜的机械设计,样品位于载物台与物镜中间。低倍物镜齐焦时,与载物台之间的距离大约为三厘米左右。像无法切割的厚样品,类似矿石、零件或者是在孔板、培养皿、培养瓶中培养的细胞,就无法在正置显微镜下进行观察,那由此人们设计了倒置显微镜。倒置显微镜:顾名思义,倒置显微镜与正置显微镜正好相反,那么定义也是相反的,物镜朝上,要观察的样品在物镜的上方,此类显微镜我们称之为倒置显微镜。我们可以看到倒置显微镜,物镜和载物台之间不再放观察的样品,样品是放于载物台的上面,所以样品的厚度就不会受到载物台与物镜之间距离的限制。因此倒置显微镜主要用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察。介绍了三种不同形式的显微镜,相信我们的老师和用户对自己的样品适用于什么类型的显微镜已经有了一个大体的判断。当我们更多的去观察样品的立体结构,对细节和分辨率没有更高追求的时候,我们通常会选择体视显微镜。当我们的样品无法制成玻片或者不能放在玻片上时,我们就去选择倒置显微镜。如果能制成玻片就选择正置。为什么说能制成玻片就去选择正置呢?因为对于倒置显微镜来说,正置显微镜的高倍数观察更方便,比如60X和100X的油镜。同时,因为它的光路要比倒置更短,搭配高分辨率聚光器后分辨率更高,对比度更好。通过我们这期推文的介绍,老师对于选择哪种分辨率水平的显微镜,以及什么类型的显微镜会有一个较为清楚的了解。这些只是我们采购或选择显微镜的第一步,就是我们确定显微镜的类型。针对不同的观察样品,又会有其更为适应的观察方式,又有不同的光源,不同品质的物镜,供我们去选择。欲知后事如何,且听下回分解。|申请试用|ECHO 显微镜可以申请试用哦!关注“深蓝云生物科技”公众号,点击“云活动”→“试用中心”即可。
  • 经验分享:透射电子显微镜应用领域及样品制备方法
    透射电子显微镜是使用较为广泛的一类电镜,具有分辨率高、可与其他技术联用的优点。已广泛应用于医学、生物学等各个研究领域,成为组织学、病理学、解剖学以及临床病理诊断的重要工具之一。常规电镜样品制备包括常温化学双固定、常温脱水包埋、常规超薄切片、普通电镜观察几个步骤。样品制备过程历时约一周,超薄切片经醋酸双氧铀和柠檬酸铅染色后,电镜观察。所有操作均按照以下流程进行。一、试剂0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液Na 2 HPO 4 2H 2 O 35.61 g 或Na 2 HPO 4 7H 2 O 53.65 g / Na 2 HPO 4 12H 2 O 71.64 gNaH 2 PO 2 H 2 O 27.60 g 或NaH 2 PO 4 2H 2 O 31.21 g加双蒸水(ddH2O)到1000 mL0.1 mol/ L磷酸盐缓冲液(PBS)0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 250 mL加双蒸水到500 mL2 % 低温琼脂低温琼脂 1.0 g加双蒸水到 50 mL加热到沸腾,溶液均匀后备用1 % 戊二醛固定液25 %(m/v)戊二醛水溶液 2 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 25 mL加双蒸水到50 mL1 % 锇酸固定液2 %(m/v)锇酸水溶液 10 mL0.2 mol/ L磷酸盐缓冲液 10 mL包埋剂A液Epon 812 树脂 50 mL十二烷基琥珀酸酐(modecenyl succinic anhydride, DDSA) 80 mL包埋剂B液Epon 812 树脂 50 mL六甲酸酐(methyl nadic anhydride, MNA) 44.5 mL2 , 4 , 6 - 三甲氨基甲基苯酚( 2, 4, 6 - tridimethylamino methyl phenol, DMP-30 )甲苯胺蓝染液甲苯胺蓝 1 g1 mol/ L NaOH 10 mL加双蒸水到50 mL混匀过滤后使用1 % 醋酸双氧铀染液醋酸双氧铀 0.2 g加双蒸水到10 mL封口膜封口,4℃避光保存1 % 柠檬酸铅染液硝酸铅 0.265 g柠檬酸钠(含2分子结晶水) 0.352 g加双蒸水到10 mL①① 配制铅染液时,要先加水6 mL,超声震荡30 min,使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH,并不是晃动,直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照,即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定,藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定,总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。封口膜封口,4℃保存仪器修块机 Leica EM TRIM切片机 Leica EM UC6光学显微镜 Nikon 80i 及配套拍照系统DS-L1透射电子显微镜 JEOL-1230Gatan Bioscan Camera 792低电压透射电子显微镜 JEM-1230二、实验流程一、 取材与固定A. 植物样品1. 自来水冲洗表面泥尘后,使用灭菌水清洗2-3次,置于铺有预湿滤纸的培养皿中。2. 使用干净锋利的刀片切取目标材料,所取材料体积不大于3 mm3。切取样品时应注意动作迅速、减小损伤,避免来回切拉;使用的灭菌水及器具应4℃预冷,并在操作中尽量保持低温以降低组织细胞活性。3. 将切下材料放入装有预冷的戊二醛固定液的青霉素小瓶中后抽气,抽几次后轻摇小瓶,并打开瓶盖。重复2-3次,直到样品沉入瓶底。4. 室温静置1h,或摇床轻摇1h。5. PBS清洗3次,10min/次。6. 1%锇酸固定液固定1h。7. PBS清洗3次,10min/次。B. 动物样品1. 4℃预冷生理盐水冲洗组织块,迅速切取组织块,体积不大于3 mm32. 将切取的组织块投入装有预冷戊二醛固定液的青霉素小瓶中,并抽气直至样品沉底。3. 室温静置1h,或摇床轻摇1h。4. PBS清洗3次,10 min/次。5. 1%锇酸固定液固定1 h。6. PBS清洗3次,10 min/次。C. 单层培养细胞或悬浮培养细胞样品②1. 3000 rpm离心5 min,收集细胞样品,尽量多的吸弃培养液上清。2. 加入4℃预冷PBS液,充分吹吸混匀,静置4 min,3000 rpm离心5 min,吸弃上清。① 配制铅染液时,要先加水6 mL,超声震荡30 min,使乳白色柠檬酸铅悬液充分混匀。然后滴加1 mol/L NaOH,并不是晃动,直至溶液变清亮。最后定容至10 mL。② 细胞样品处理和藻类及其他游离样品处理流程可相互参照,即细胞样品可以酌情使用琼脂铸模法取材固定,藻类及其他游离样品也可以使用血清预包埋法取材固定,总体视样品密度及其对于温度的耐受等条件而定。3. 重复步骤2一次。4. 加入预冷的血清或蛋清,充分吹吸混匀,3000 rpm离心10 min,吸弃大部分上清,留少部分,吹吸悬浮沉淀细胞。(或离心后吸弃上清,留少部分上清,不悬浮沉淀细胞,视样品浓度而定)5. 缓慢加入戊二醛固定液,小心放入4℃冰箱,固定过夜。6. 吸弃上清,刀片小心划开离心管壁,用钳子拉开离心管,小心取出已凝成固体的血清包埋块。7. 使用干净的单面刀片或手术刀,将血清包埋块切成2 mm3左右的小块,取3-5个富集细胞样品效果较好的包埋小块继续下面实验。8. PBS清洗3次,10 min/次。9. 1%锇酸固定液固定1 h。10. PBS清洗3次,10 min/次。D. 藻类及其他游离培养样品1. 吸取2%低温琼脂液200μL到0.2mL离心管,并将离线管置于冰上,取10μL枪头迅速插入琼脂中并保持离心管竖直,且枪头竖直靠中的包裹在琼脂中。2. 静置1 min,待琼脂凝固后,小心拔出枪头,形成琼脂空腔,待用。3. 3000 rpm离心5 min,收集样品,尽量多的吸弃培养液上清。4. 加入4℃预冷PBS液,充分吹吸混匀,静置4min,3000 rpm离心5min,吸弃上清。5. 重复步骤2清洗,吸弃大部分上清,留极少部分上清液,吹吸悬浮样品。6. 使用10μL 移液器小心将样品加入已经制备好的琼脂空腔中,使样品充满空腔大部分,添加过程中尽量避免气泡出现。7. 吸取50μL溶化的琼脂,快速滴加到空腔琼脂上封口,冰浴5 min,待琼脂完全凝固。8. 使用单面刀片小心划开离心管壁,用钳子拉开离心管,小心取出已凝成固体的琼脂包埋块,稍作修葺。9. PBS清洗3次,10 min/次。10. 1%锇酸固定液固定1 h。11. PBS清洗3次,10 min/次。二、 脱水1. 按丙酮与灭菌水体积比3:7配制30%脱水剂。吸弃样品管/瓶中的PBS,快速加入现配的脱水剂(脱水换液过程禁止出现样品暴露空气中现象,可不全部吸完,略有剩余,使样品浸润;动作应迅速准确),室温放置或摇床轻摇45 min。加入按30%、50%、70%、90%、100%(v/v)的浓度梯度进行脱水。2. 配制50%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。3. 配制70%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。4. 配制90%脱水剂,快速换液,室温轻摇45 min。5. 使用纯丙酮快速换液,室温轻摇30 min③。6. 重复步骤5一次。三、 渗透包埋在此步脱水操作完成后即可开始配制渗透用包埋剂,以免安排不周。样品浸泡在纯丙酮中时间不宜过久,以免造成样品较脆,不利于超薄切片。1. 配制渗透用树脂包埋剂1) 取干净的10 mL注射器,拔去活塞,用封闭针头堵住注射口,放于通风橱中。2) 小心倾倒B液9 mL到注射器中;然后再小心倾倒A液1 mL。3) 插入活塞,堵住注射器后,颠倒摇匀至液体颜色均匀,无丝状液体。4) 小心拔去活塞,通风橱中操作,缓慢滴加14滴DMP-30。5) 插入活塞,堵住注射器后,颠倒摇匀至液体颜色完全均匀,无丝絮状分色,竖直放置待用。2. 按照包埋剂与丙酮体积比3:7配制30%渗透剂,快速吸弃样品管中纯丙酮并加入渗透剂,轻摇渗透3 h。3. 按照包埋剂与丙酮体积比7:3配制70%渗透剂,快速换液,轻摇渗透过夜。4. 重新配制包埋剂,并小心推按注射器,将包埋剂挤到包埋模具中至液面略凸。5. 解剖针挑取样品到纯包埋剂中,渗透3 h。6. 小心挑取样品,滤纸上稍微沾下吸弃部分粘附的包埋剂,轻轻放置到未渗透过样品的包埋孔中,小心将样品按到底,摆放好位置。记录各样品对应包埋块编号。7. 梯度温度聚合包埋1) 37℃烘箱中12 h,期间定时观察样品有无漂移现象,如有,则再次小心摆放样品位置。2) 45℃烘箱中12 h。3) 60℃烘箱中24 h。四、 修块与切片1. 拿到包埋块后检查样品位置是否得当,选取位置好的包埋块优先进行修块、切片。2. 粗修包埋块1) 使用六角扳手将包埋块固定在样品头上,露出长度合适。2) 将样品头固定在修块机上,体视镜观察修块,分四个方向将包埋块头部多余的包埋剂修去,暴露出组织块。3) 使用锋利的单面刀片修去组织块周围毛刺的包埋剂,使其四边光滑清晰。4) 卸下样品头装至切片机上,使用玻璃刀修片,直至样品表面光滑清晰。3. 半薄切片1) 将粘有水槽的玻璃刀装至切片机刀台上,体视镜下小心对刀,不时转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮,使整个样品高于刀刃,点控制面板Start,设置切片区域上边界;转动手轮,使整个样品低于刀刃,点控制面板End,设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品,至出现彩色干涉光,继续步进刀台,并通过体视镜观察干涉光谱变化,直至干涉光消失。4) 转动手轮,使样品离开刀刃区域,使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中,体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度,按控制面板Run/Stop键,开始切片。体视镜观察可见900nm厚度切片反光为亮绿色。6) 待有切片下来形成4-6片的切片带,按Run/Stop键停止切片,体视镜观察下,使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃,并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域,根据水膜表面张力捞取切片,放到干净载玻片上,酒精灯略微加热,使水蒸干,并对着光亮用记号笔标示切片所在位置。4. 半薄切片染色1) 吸取20μL甲苯胺蓝染液,滴加到载玻片放有切片的位置,室温静置30 s 。2) 去离子水冲洗玻片,直至不再有蓝色。吸水纸上沥干,酒精灯略微加热,加速切片上的水分蒸发。3) 显微镜观察切片质量和样品位置。5. 精修包埋块1) 移去装有水槽的玻璃刀,取下装有包埋块的样品头,装至修块机上。2) 根据半薄切片结果,使用新的锋利刀口,小心修理包埋块四边,使其尽可能的光滑、平整。6. 超薄切片1) 将钻石刀装至切片机刀台上,体视镜下小心对刀,不时转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的距离相等。2) 转动手轮,使整个样品高于刀刃,点控制面板Start,设置切片区域上边界;转动手轮,使整个样品低于刀刃,点控制面板End,设置切片区域下边界。3) 手动步进刀台靠近样品,至出现彩色干涉光,转动手轮,使样品上下移动,调整刀台左右角度及样品上下角度,直至包埋块整个表面与刀刃的干涉光谱颜色一致;继续步进刀台,并通过体视镜观察干涉光谱变化,直至干涉光消失。4) 转动手轮,使样品离开刀刃区域,使用滴管将干净的去离子水加到玻璃刀水槽中,体视镜观察直至液面略低于刀刃。5) 调整切片厚度与速度,按控制面板Run/Stop键,开始切片。体视镜观察可见70nm厚度切片反光为亮灰色及浅灰色。6) 待有切片下来形成10-20片的切片带,按Run/Stop键停止切片,体视镜观察下,使用睫毛笔将所需薄片拨离刀刃,并将所需切片聚拢一起。7) 用干净捞片环轻轻沾取切片所在区域,根据水膜表面张力捞取切片,轻轻放到干净载膜铜网上,用尖角滤纸靠近铜网边缘缓慢吸干水分。8) 轻轻移去捞片环,将载有切片的铜网放到铺有滤纸的平皿中,晾干待染色观察。五、 染色1. 醋酸双氧铀染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液,13 200 rpm离心5 min。2) 将放有切片的载网小心放到染色盘上,有切片面靠上,并稍微用镊子按载网边缘,使其与染色盘接触粘附牢固。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面,盖上平皿防尘,室温染色30 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中,轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘,更换水洗液,轻摇清洗5min。6) 重复清洗2次。2. 柠檬酸铅染色1) 按每片载网20μL染液的量吸取醋酸双氧铀染液,13 200 rpm离心5 min。④2) 在放置染色盘的平皿中放入2片固体NaOH,用以吸收平皿中CO2气体。3) 吸取20μL染液滴加到载网上面,盖上平皿防尘,室温染色8 min。4) 将染色盘整个放到装有去离子水的清洗缸中,轻摇清洗1 min。5) 小心取出染色盘,更换水洗液,轻摇清洗5min。连续染色时,载网不需要从染色盘上拿下,清洗后直接进行铅染即可,但是铅染液要现用现取。6) 重复清洗2次。7) 小心夹取载网,放置到铺有滤纸的干净平皿中,晾干待电镜观察。六、 电镜观察1. 取出样品杆,打开样品夹,小心放入载网,合上样品夹,并转动样品杆,轻敲确保样品夹已准确固定载网。2. 将样品杆插入透射电镜样品室,开始抽气。3. 打开灯丝开关,等待检测电流出现后,打开观察窗开始观察。4. 先在低倍下找到切片,再高倍观察切片,寻找待看目标,仔细对焦。5. 将切片目标区域遇到观察窗中间后,调整灯丝电流密度为3.8 pA/cm2。6. 插入拍照CCD,Start View,微调焦距,Start Acquire 拍照。7. 拍照完毕,按格式需求保存照片到指定文件夹。8. 使用专用写保护闪存盘拷贝数据到公共电脑观察、使用。三、应用领域1、材料领域材料的微观结构对材料的力学、光学、电学等物理化学性质起着决定性作用。透射电子显微镜作为材料表征的重要手段,不仅可以用衍射模式来研究晶体的结 构,还可以在成像模式下得到实空间的高分辨像,即对材料中的原子进行直接成像,直接观察材料的微观结构。2、物理学领域在物理学领域中,电子全息术能够同时提供电子波的振幅和相位信息,从而使透射电子显微镜在磁场和电场分布等与相位密切相关的研究上得到广泛应用。目前,透射电子显微镜结合电子全息已经应用在测量半导体多层薄膜结构器件的电场分布、磁性材料内部的磁畴分布等方面。3、化学领域在化学领域,原位透射电子显微镜因其超高的空间分辨率为原位观察气相、液相化学反应提供了一种重要的方法。利用原位透射电子显微镜进一步理解化学反应的机理和纳米材料的转变过程,以期望从化学反应的本质理解、调控和设计材料的合成。目前,原位电子显微技术已在材料合成、化学催化、能源应用和生命科学领域发挥着重要作用。透射电子显微镜可以在极高的放大倍数下直接观察纳米颗粒的形貌和结构,是纳米材料Z常用的表征手段之一。4、生物学领域在生物学领域,X射线晶体学技术和核磁共振常被用来研究生物大分子的结构,已经能够将蛋白质的位置精度确定到0.2nm,但是其各有局限。X射线晶体学技术基于蛋白质晶体,研究的常常是分子的基态结构,而对解析分子的激发态和过渡态无能为力。生物大分子在体内常常发生相互作用并形成复合物而发挥作用,这些复合物的结晶化非常困难。核磁共振虽然能够获得分子在溶液中的结构并且能够研究分子的动态变化,但主要适合用来研究分子量较小的生物大分子。
  • 电镜学堂丨扫描电子显微镜样品要求及制备 (二) - 特殊试样处理&试样放置
    Hello,好久不见距离上次更新已有时日,这段时间小编没密集更新是因为知道大家在忙着立新年flag!但2018年的计划一定不能少的是跟随tescan电镜学堂持续输入电镜知识,稳定输出科研成果! 这里是TESCAN电镜学堂第7期,将继续为大家连载《扫描电子显微镜及微区分析技术》(本书简介请至文末查看),帮助广大电镜工作者深入了解电镜相关技术的原理、结构以及最新发展状况,将电镜在材料研究中发挥出更加优秀的性能!第二节 特殊试样的处理对于一些特殊的试样,除了常规制样方法外,可能还需要一定的特殊处理。§1. 金相试样金相试样要经过严格的抛光程序,为了在电镜下观察能有更好的衬度,需要进行一定的腐蚀处理。不同的金属需要不同的腐蚀剂以及腐蚀时间,这需要去慢慢摸索。腐蚀不能过度,否则表面会有太多的腐蚀坑,此外,腐蚀剂要清洗干净。§2. 生物试样对于生物样品,为了保证在电镜样品室的高真空下不发生变形而保持原貌,需要对试样进行一系列的处理,需要经过清洗、固定、脱水、干燥等步骤。① 清洗:试样取材好后可用生理盐水或缓冲液清洗,或用5%的苏打水清洗;用超声震荡或酶消化的方法进行处理。② 固定:常用戊二醛及锇酸双固定。③ 脱水:样品经漂洗后用逐级增高浓度的酒精或丙酮脱水,然后进入中间液,一般用醋酸异戊酯作中间液。④ 干燥:可用空气干燥法、临界点干燥、冷冻干燥等方法。§3. 石墨烯试样石墨烯是近年特别火热的样品,不过利用扫描电镜进行石墨烯的观察需要一定的技巧,否则难以有很好的说服力。理论上石墨烯厚度非常小,在扫描电镜下难以有很好的衬度。而那些铺展的很平整,却有着很好的明暗衬度的试样,本人觉得只能算是石墨薄片而不能算石墨烯。扫描电镜分辨率还不足以观察到石墨烯的碳原子结构,也没有探测器能证明其碳结构,不过扫描电镜可以定性判断其膜层的厚薄,当然这需要特殊的制样。我们可先对硅片这种平整基底镀上一层较厚的金膜,然后将石墨烯分散镀金硅片上。我们对镀金的形貌有着非常清晰的认识,如果表面有一层石墨烯的话,金膜就会像蒙了一层纱一样。石墨烯膜层越薄,金颗粒越清楚;反之如果金颗粒越不清楚,则膜层越厚;当完全看不见金颗粒时,则膜层已经相当厚,完全不算是石墨烯了,这点可以通过蒙特卡罗模拟来得到印证。之所以选择先镀金,就是让被覆盖的与未被覆盖的区域进行一个对比,这样可以定性判断石墨烯的膜厚。图4-9 石墨烯分散在硅片和镀金硅片上的对比如图4-9,左边四张图片是石墨烯直接分散在硅片上,因为没有参照物,只能判断出不同区域的厚薄,而这些厚薄是否能达到石墨烯要求的水准则难以判断;而右边六张图片是分散在镀金硅片上的图片,我们很容易通过与空白处金颗粒的对比来大致判断其膜层厚度是否符合石墨烯的要求。第三节 试样的放置问题 试样在放入电镜室中需要满足一定的几何条件。首先,一次性放置多个样品时,尽量保持高度一致。遇到高度不等的情况,可以将较矮的样品放置在加高台上,如图4-10。将不同高度的样品垫平。 图4-10gm-163-r样品台其次,样品如果表面凹凸不平,如断口材料或楔形样品,在放置样品的时候尽量将要观察的区域的朝着eds或etd的方向,避免在电镜观察时,因为观察面背向探测器而有强烈的阴影或者没有eds信号。还有,对于截面样品观察,有时候并非在90度的绝对垂直下效果最好。特别是对于一些膜面质量不是很好有点撕裂的薄膜,有时候倾转一点的角度,在非正入射的条件下有更好的立体感和景深,有时候更能观察到膜面和基体的结合情况。不过在进行测量的时候要记住需要进行倾斜修正。如图4-11上图,在正90度下虽然能观察到膜面,但是膜面质量的好坏及整体情况却无法判断,而在70度下则能看出膜层的整体情况。将倍数放大后,也可看到70度下有更好的景深和立体感,也更有助于进行膜面和基底结合的判断。 图4-11 膜的截面在90度和70度倾转下的对比再如图4-12,试样为两层同样成分的薄膜,如果在正90度下进行观察,膜之间的界线很不明显,而如果旋转到55度,可以发现膜在断裂过程中有发生“错位”地方,这个角度的观察使得对膜层的观察更加清楚。图4-12 双层膜的截面在90度和55度倾转下的对比特别是一些半导体的截面样品,时常都是先在非正入射的情况下进行观察,再转到90度的情况下进行测量。?福利时间每期文章末尾小编都会留1个题目,大家可以在留言区回答问题,小编会在答对的朋友中选出点赞数最高的两位送出本书的印刷版。?奖品公布上期获奖的这位童鞋,请后台私信小编邮寄地址,我们会在收到您的信息并核实后即刻寄出奖品。 【本期问题】截面样品观察,是否一定是在90°的绝对垂直下效果最好,为什么?(快去留言区回答问题领取奖品吧→)简介《扫描电子显微镜及微区分析技术》是由业内资深的技术专家李威老师(原上海交通大学扫描电镜专家,现任TESCAN技术专家)、焦汇胜博士(英国伯明翰大学材料科学博士,现任TESCAN技术专家)、李香庭教授(电子探针领域专家,兼任全国微束分析标委会委员、上海电镜学会理事)编著,并于2015年由东北师范大学出版社出版发行。本书编者都是非常资深的电镜工作者,在科研领域工作多年,李香庭教授在电子探针领域有几十年的工作经验,对扫描电子显微镜、能谱和波谱分析都有很深的造诣,本教材从实战的角度出发编写,希望能够帮助到广大电镜工作者,特别是广泛的TESCAN客户。这里插播一条重要消息: TESCAN服务热线 400-821-5286 开通“应用”和“维修”两条专线啦!按照语音提示呼入帮你更快找到想要找的人 ↓ 往期课程,请关注“TESCAN公司”微信公众号查看:电镜学堂丨扫描电子显微镜的基本原理(一) - 电子与试样的相互作用电镜学堂丨扫描电子显微镜的基本原理(二) - 像衬度形成原理电镜学堂丨扫描电子显微镜的基本原理(三) - 荷电效应电镜学堂丨扫描电子显微镜的结构(一) - 电子光学系统电镜学堂丨扫描电子显微镜的结构(二) - 探测器系统电镜学堂丨扫描电子显微镜样品要求及制备 (一) - 常规样品制备统
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    生命科学是从微观层面观察和研究生命过程,从而揭示生命的物质基础和基本现象。显微成像是观察微小物体的重要手段,但其分辨能力受光学成像系统的限制(即衍射极限),无法满足现代生命科学研究要求的更高解析度、更准确的成像需求。熵智科技作为中国原创3D视觉创业公司第一梯队,横跨机器视觉与微纳光学两大领域,深刻认识到微纳光学在生命科学研究领域中的巨大价值。9月23日,熵智科技在西安发布自研的超分辨及共聚焦显微成像分析系统。该系统易用、性价比高,相较于国内外显微成像产品,不仅突破了光学成像系统的限制,轻松实现纳米尺度的2D/3D动态图像解析能力,还将共聚焦+超分辨+后处理分析完美融合,软件结合场景模块化。无论新手用户还是专家用户,只需通过一套界面即可获取一流的超高分辨率图像及分析结果。熵智科技超分辨及共聚焦显微成像分析系统工作原理超分辨显微成像分析系统采用结构光照明显微成像术(英文Structured Illumination Microscopy, 简称SIM),突破传统显微镜的阿贝衍射极限,实现生物组织、细胞、神经元等活动样本的快速超分辨率成像,为生命科学、生物工程等领域提供创新的超分辨率成像技术产品,几乎可集成于任何荧光显微镜。共聚焦显微成像分析系统的软硬件均采用模块化设计,硬件集成SIM超分辨模块、软件支持多种后处理功能,从而提供精确的2D/3D成像,以及动态过程的成像。目前,共聚焦和超分辨光路共用了光源准直部分、物镜部分、聚焦成像部分。主要功能超分辨及共聚焦显微成像分析系统视野超10倍扩展,达1mm,拥有精确的多微细胞结构生物显微影像分析功能,实现双光路同时,宽场、共聚焦、超分辨三种模式自由切换。大视野拼图:多种不同的图像获取方式、可实现500um*500um视场上图片进行拼接。图像增强及处理:可对采集到荧光图像进行增益调节、对比度调节、亮度调节以及色阶调节。反卷积处理:在原有采集到图像基础上,对图像数据做实时清晰度优化,达到消除背景噪声,有用信息表达更精准的作用,处理速度10ms以下,速度快;可进一步结合DNN方法,提高应用场景的鲁棒性。特征统计分析:对于识别出的细胞,对其强度、直径、周长等15个属性做数值量化。特征标记分类:可对细胞的特征进行标记和分类。单细胞定量分析:可以准确分割出相互重叠的细胞,精度更高,在专业单细胞识别的基础上,结合深度学习AI算法,可以精确识别互相挤压重叠的细胞核,而且对于细胞轮廓边界识别更加准确。亚细胞结构分析:可以定位某种蛋白或者某个基因表达产物在细胞的具体存在部位,如细胞核,胞浆内,结合AI图像分析方法,以表格和数据统计输出结果。细胞亚群圈选分析:筛选特定的感兴趣细胞亚群,进行了10余种参数分析。特殊细胞/结构识别:提供特殊细胞如脂肪细胞的识别和数量统计。多重荧光染色:实现细胞核、细胞质、细胞膜的各种形态和染色,精确寻找目的细胞及其结构。细胞寻找及跟踪:实现特定细胞的动态识别和跟踪。核心参数激光共聚焦超分辨显微参数配置普通光纤激光器激光405nm、488nm、561nm、640nm扩展HC-PCF激光器920nm探测器 PMT3个;波长:400-750nm,GaAsP最大拍摄速度8fps@512×512像素;2fps@1024×1024像素;4096×4096最高;更多可配置;扫描方式X-Y, X-Y-Z, X-Y-T分辨率250nm in x, y and 550nm in z 共聚焦120 nm in x, y and 320nm in z (488nm wavelength) 超分辨共焦视场Φ18mm-Φ25mm 内接正方形成像深度100μm灵敏度提升4倍相对信噪比 SNR优良级 50dB显微镜电动显微镜奥林巴斯 倒置IX73显微镜,具备明场、微分干涉、荧光等观察方式物镜奥林巴斯或Mitutoyo平场复消色差物镜(防腐蚀陶瓷表面以及红外色差矫正)选型载物台奥林巴斯 电动IX3-SSU 扫描精度优于0.7μm光学放大1.0X;1.5X;3.2X;20X 适配/转换器共聚焦/超分辨率光路切换(电动)、6位电动物镜转换器荧光装置配荧光光阑*相机(lattice)SCMOS,分辨率2048×2048,100fps@全幅面,位深12bit工作站Windows10 Pro 64 bit;硬盘≥1TB;内存16GB软件控制软件:图像采集及2D/3D/4D处理;共聚焦和超分辨配置;*成像分析:细胞自动识别、单细胞定量分析、亚细胞结构分析、细胞亚群圈选分析等防震台频率范围(5~30Hz):≤30μm/s均方根;频率范围(>30Hz): ≤60μm/s均方根增配双光子成像激光生成组件、高速扫描头、前置补偿单元应用场景超分辨及共聚焦显微成像分析系统可应用于基础生物学、临床医学、病毒学、精准药物筛选等领域,为活细胞超分辨率智能成像提供解决方案。基础生物学:皮肤病例研究、类器官培养观察、微生物形态研究、胚胎发育成像、组织结构三维重构。如通过斑马鱼胚胎发育过程的成像,研究血管疾病和血管药物的新兴模型,从而更好解决人类血管疾病;通过光学切片, 确定其复杂的内部结构与组织功能之间的关系。临床医学:细胞形态结构鉴定、病理显微成像、异常细胞跟踪检测、组织形态学观察。利用计算机进行图像处理, 不仅可观察固定的细胞、组织切片, 还可对活细胞的结构、分子等进行实时动态观察和检测。通过它可以直接观测细胞形态学的组织、细胞之间的相互作用、组织微环境、伤口的愈合等成像,有助于了解病理机制,以开发疾病治疗方法从而促进人体健康有重要的意义。病毒学:植物病毒研究、动物病毒研究、医学病毒研究、环境病毒研究、噬菌体研究。采用超分辨技术,可以实现病毒感染细胞及复制、组装、释放等动态过程的研究。药物筛选:药材显微鉴别、载药微粒结构、药物扩散跟踪、制药成型和释药研究、药理药效研究。通过药物筛选确定干预的潜在治疗方法,加速早期药物的研发和确定疾病的模型。利用显微镜观察植(动)物药材内部的细胞、 组织构造,从而达到鉴定药材的目的。选择合适的药物靶分子,针对高分辨率成像的固定样品及活细胞进行分析,从而满足不同实验的需求。关于熵智科技熵智科技是国家级高新技术企业,拥有底层成像系统和算法开发能力,软硬件一体化,致力于通过高性能的成像技术解决机器人柔性化、微纳级检测与测量等问题。熵智科技自2018年成立至今,先后获得字节跳动、拓金资本、松禾资本、远望资本、华控资本等投资。深圳、武汉、西安三地联合办公,目前研发和工程团队70余人,核心技术人员均硕士及以上学历,博士6人。未来,熵智科技将继续深耕微纳光学领域,以更优的产品与服务回馈广大合作伙伴及客户。
  • 北京印发新版《北京市固定污染源自动监控管理办法》
    p  北京市生态环境局近日印发了新修订的《北京市固定污染源自动监控管理办法》,此办法从总则、自动监测设备的安装、运行管理、数据使用以及违法行为认定等方面详细规定了北京市行政区域内固定污染源水污染物和大气污染物排放自动监控系统的监督管理。新修订的办法自2019年1月1日起实施。/pp  对于监测数据提出了严格要求,传输的自动监测数据与现场监测数据偏差大于1%,即视为未保证大气或水污染物排放自动监测设备正常运行。/pp  全文如下:/pp style="text-align: center "  北京市固定污染源自动监控管理办法/pp  strong第一章 总则/strong/pp  第一条 为加强污染源监管,根据《中华人民共和国环境保护法》《中华人民共和国水污染防治法》《中华人民共和国大气污染防治法》《北京市水污染防治条例》《北京市大气污染防治条例》《污染源自动监控管理办法》和《污染源自动监控设施现场监督检查办法》等法律法规和有关规定,结合本市实际,制定本办法。/pp  第二条 本办法适用于北京市行政区域内固定污染源水污染物和大气污染物排放自动监控系统的安装、运行和监督管理。/pp  第三条 本办法所称自动监控系统,由排污单位的自动监测设备和生态环境行政主管部门的监控设备组成。/pp  自动监测设备安装在固定污染源现场,包括用于监控、监测污染物排放的仪器,流量(速)计、采样装置、生产或治理设施运行记录仪、数据采集传输仪等仪器、仪表、传感器、视频监控、污染源排放过程(工况)监控等,自动监测设备及其配套辅助设施是污染防治设施的组成部分。/pp  生态环境行政主管部门的监控设备通过通信传输线路与现场端自动监测设备联网,包括用于对固定污染源实施自动监控的信息管理平台、计算机机房硬件等监控设备。/pp  第四条 本办法所称自动监测数据,是指排污单位安装使用的自动监测设备产生的实时数据及其累计数据、统计数据等。/pp  排污单位应当按照国家和本市有关规定安装使用自动监测设备,与生态环境行政主管部门监控设备联网,并保证自动监测设备正常运行,对自动监测数据的真实性和准确性负责。/pp  第五条 排污单位自动监测设备的安装和运行维护经费由排污单位自筹 生态环境行政主管部门监控设备的建设安装、运行维护经费由生态环境行政主管部门编报预算申请。/pp  第六条 污染源自动监测设备的生产者和销售者,应当保证其生产和销售的污染源自动监测设备符合国家规定的标准。/pp  第七条 任何单位和个人都负有保护自动监控系统的义务,并有权对闲置、拆除、破坏自动监测设备以及擅自改动自动监测设备参数和数据等不正常使用自动监控系统的行为进行举报。/pp  strong第二章 自动监测设备的安装/strong/pp  第八条 列入《北京市大气污染物排放自动监控计划》和《北京市应当安装水污染物排放自动监测设备的重点排污单位名录》的排污单位,应当按照国家和本市的相关标准、规范和文件的要求,安装、配备污染物排放自动监测设备,并与生态环境行政主管部门的监控设备联网。/pp  第九条 排污单位应当在下列排放口安装自动监测设备:/pp  (一)按照已发布的相关行业排污许可证申请与核发技术规范、自行监测技术指南和相关排放标准等文件要求筛选出的主要废气有组织排放口 /pp  (二)按照已发布的相关行业排污许可证申请与核发技术规范、自行监测技术指南和相关污染物排放标准等文件要求筛选出的废水排放口 /pp  (三)已核发排污许可的单位,排污许可证中载明的应实施自动监测的排放口 /pp  (四)排污单位通过相关行业排污许可证申请与核发技术规范、自行监测技术指南和相关排放标准等文件筛选后,仍难以确定纳入的排放口范围的,可以在专家论证基础上,通过“一厂一策”方式,制定排放口自动监测技术方案。技术方案应满足相关法律法规和标准的要求,具备合理性和可行性。被监测排放口的污染物年排放量,应不低于该项污染物全部有组织年排放量的65%。/pp  第十条 安装、配备污染物自动监测设备的监控项目应当符合下列规定:/pp  (一)锅炉废气排放口,监测项目至少包含二氧化硫、氮氧化物、颗粒物以及相关烟气参数(包括温度、压力、流速或流量、湿度、含氧量等),其中使用天然气的可以暂不监测二氧化硫和颗粒物 /pp  (二)固定式燃气轮机的废气排放口,监测项目至少包含二氧化硫、氮氧化物、颗粒物以及相关烟气参数(包括温度、压力、流速或流量、湿度、含氧量等),其中使用天然气的可以暂不监测二氧化硫和颗粒物 /pp  (三)固定式内燃机机组的废气排放口,监测项目至少包含氮氧化物、一氧化碳以及相关烟气参数(包括温度、压力、流速或流量、湿度、含氧量等) /pp  (四)垃圾焚烧炉和危险废物焚烧设施的废气排放口,监测项目至少包含二氧化硫、氮氧化物、颗粒物、一氧化碳、氯化氢以及相关工艺参数(包括烟气温度、压力、流速或流量、湿度、含氧量和炉膛内温度等) /pp  (五)冶金、建材行业及其他工业炉窑等的废气排放口,监测项目至少包含二氧化硫、氮氧化物、颗粒物以及相关烟气参数(包括温度、压力、流速或流量、湿度、含氧量等),其中使用天然气的可以暂不监测二氧化硫和颗粒物 /pp  (六)产生挥发性有机物的生产设施,其废气排放口监测项目至少包含非甲烷总烃和相关废气参数(包括温度、压力、流速或流量、湿度等)。排放标准中规定需要按含氧量折算污染物排放浓度的,还应监测含氧量 /pp  (七)小时处理能力大于8万立方米(含8万立方米)的废气污染物治理设施,还应在废气进入治理设施前,对相应监测项目进行监测。同时,安装污染源排放过程(工况)监控系统,监控生产、排放及治理设施的关键参数。监控项目至少包含表征生产负荷的参数、污染物处理用原料输送泵电流、污染物处理用原料供应量、脱硫岛pH值、除尘器运行信号等 /pp  (八)集中污水处理设施的废水排放口,监测项目至少包含化学需氧量、氨氮、pH值和流量。纳入国家或者本市规定的氮、磷重点排放行业的排污单位还应当监测总氮和(或)总磷两项污染物 /pp  (九)设计日处理能力大于1万吨(含1万吨)的集中污水处理设施,还应监测进水的化学需氧量、氨氮、pH值和流量。同时,安装污染源排放过程(工况)监控系统,监控相关生产、排放及治理设施的关键参数。监控项目至少包含鼓风机电流、鼓风量、曝气设备运行状况、曝气池溶解氧浓度、污泥浓度和剩余污泥流量等 /pp  (十)排污许可证或者其他法律、法规和标准规定的情形。/pp  第十一条 污染源自动监测设备的安装应当满足下列要求:/pp  (一)自动监测设备应当选用符合国家有关环境监测和计量规定的设备 /pp  (二)自动监测设备的安装和调试应当符合污染源自动监测设备现场端建设技术规范等标准和要求 /pp  (三)自动监测数据的采集和传输应当符合有关污染源自动监控(监测)系统数据传输标准 /pp  (四)排污单位应在完成自动监测设备安装和调试工作后10个工作日内申请与生态环境行政主管部门联网,并如实提供单位名称、地址、排污口名称、监测和监控项目、排放标准等信息 /pp  (五)排污单位应在自动监测设备满足技术规范要求的验收条件并与生态环境行政主管部门联网后3个月内,按照建设项目竣工环境保护验收管理相关法律法规的规定,组织完成验收工作,验收合格后5个工作日内向所在区生态环境行政主管部门登记备案。验收具体项目和要求,按照自动监测相关技术规范执行 /pp  (六)其他相关技术规范、标准的要求。/pp  第十二条 排污单位更换自动监测设备,或者出现采样位置变更、设备核心部件更换等重大变化的,应当重新进行验收,并报所在区生态环境行政主管部门登记备案。/pp  strong第三章 自动监测设备的运行管理/strong/pp  第十三条 排污单位对自动监测设备的运行和维护,应当遵守以下规定:/pp  (一)自动监测设备的操作人员应当按照国家相关规定,经培训考核合格、持证上岗 /pp  (二)自动监测设备应当按照有关标准、规范与生态环境行政主管部门监控设备联网,及时准确地传输监控信息和数据 /pp  (三)自动监测设备的操作和运营维护应当符合有关标准和技术规范,符合仪器设备厂商提供的运维手册或者使用说明书 /pp  (四)自动监测设备应当按照有关标准、规范定期校准,定期开展手工比对校验 设备所需的试剂、标准物质和质控样,应注明制备单位、制备人员、制备日期、物质浓度和有效期限等重要信息 /pp  (五)自动监测设备应每半年至少开展一次比对监测,比对监测结果应符合相关技术规范要求。若采取委托监测的形式,应委托具备检验检测机构资质认定证书的环境监测机构开展 /pp  (六)自动监测设备因故障不能正常监测、采集、传输数据的,应当于发生故障后12小时内向生态环境行政主管部门报告,并在5日内恢复正常运行。停运期间,排污单位应当采用手工监测的方式对污染物排放状况进行监测,并向生态环境行政主管部门报送手工监测数据,每天不少于4次,间隔不得超过6小时。排污单位自行开展手工监测的,其实验室建设运行应当符合国家和本市相关标准 若采取委托监测的形式,应当委托具备检验检测机构资质认定证书的环境监测机构开展 /pp  (七)自动监测设备需要进行更换的,应当至少提前5日向生态环境行政主管部门报告,设备更换时间不得超过5日,期间应当采用手工监测的方式对污染物排放状况进行监测,并向生态环境行政主管部门报送手工监测数据,每天不少于4次,间隔不得超过6小时。排污单位自行开展手工监测的,其实验室建设运行应当符合国家和本市相关标准 若采取委托监测的形式,应当委托具备检验检测机构资质认定证书的环境监测机构开展。确因特殊原因无法在5日内完成设备更换的,最长不超过30日 /pp  (八)排污单位任意连续90日内自动监测数据有效传输率应当达到90%以上 /pp  (九)排污单位应建立污染源自动监测设备运行、维护、管理制度和记录台账 自动监测历史数据应保存5年以上、污染源排放过程(工况)监测历史数据应保存1年以上 /pp  (十)其他标准、技术规范等规定的要求。/pp  strong第四章 自动监测数据的使用/strong/pp  第十四条 排污单位排放污染物过程中,自动监测设备正常运行情况下产生的自动监测数据,可以作为生态环境行政主管部门实施监督管理的依据。自动监测数据与其他有关证据共同构成证据链后,可以用于环境行政处罚。/pp  第十五条 自动监测数据用于判定污染物排放浓度超标时,排污许可证、相关行业排污许可证申请与核发技术规范、国家及本市污染物排放标准明确规定使用小时均值、日均值(24小时均值)或者其他数据类型的,从其规定 没有明确规定的,水污染物排放浓度是否超标以日均值判定,大气污染物排放浓度是否超标以小时均值判定。排污单位或者其委托的自动监测运营单位,依据有关标准、规范对异常、缺失数据进行修约补遗的,人工修约补遗数据不作为判定超标或达标的依据。/pp  第十六条 自动监测数据用于计算排放量时,人工修约补遗数据可作为计算污染物排放量的依据。/pp  第十七条 同一时段的生态环境行政主管部门委托开展的现场监测数据与排污单位自动监测数据不一致,现场监测数据符合法定的监测标准和监测方法的,以现场监测数据作为优先证据使用,作为判断污染物排放是否达标、自动监测设备是否正常运行的依据。/pp  strong第五章 违法行为的认定/strong/pp  第十八条 有下列行为之一的,视为未按照规定安装大气或水污染物排放自动监测设备:/pp  (一)排污单位未按照《北京市大气污染物排放自动监控计划》或《北京市应当安装水污染物排放自动监测设备的重点排污单位名录》以及相关技术标准和规范的要求,安装污染物排放自动监测设备并与生态环境行政主管部门联网的 /pp  (二)排污单位使用未通过验收的大气或水污染物排放自动监测设备的。/pp  第十九条 有下列行为之一的,视为未保证大气或水污染物排放自动监测设备正常运行:/pp  (一)自动监测设备因故障不能正常监测、采集、传输数据时,未于12小时内向生态环境行政主管部门报告或者未在5日内恢复正常运行的 /pp  (二)传输的自动监测数据与现场监测数据不一致,数据偏差大于1%的 /pp  (三)生产工况、污染治理设施运行与自动监测数据相关性异常的 /pp  (四)违反技术规范要求对仪器、试剂进行变动操作的 /pp  (五)自动监测设备所需的试剂、标准物质和质控样,未注明制备单位、制备人员、制备日期、物质浓度和有效期限等重要信息 未按要求开展比对监测,或者使用的标准物质、质控样的实验结果不符合技术指标的 /pp  (六)任意连续90日内自动监测数据有效传输率低于90%的 /pp  (七)其他不正常运行自动监测设备的情况。/pp  第二十条 排污单位自动监测历史数据保存低于5年或污染源排放过程(工况)监测历史数据保存低于1年的,视为未保存自动监测原始监测记录。/pp  第二十一条 排放污染物超过国家或者地方规定的污染物排放标准,或者超过重点污染物排放总量控制指标的,可以依照《中华人民共和国水污染防治法》第八十三条第(二)项或者《中华人民共和国大气污染防治法》第九十九条第(二)项的规定处理。/pp  第二十二条 不按照规定公开大气污染物自动监测数据的,可以依照《中华人民共和国大气污染防治法》第一百条第(四)项的规定处理。/pp  第二十三条 排污单位通过自动监测数据弄虚作假,骗取环保电价、税收减免等各种优惠的,生态环境行政主管部门可以通报有关部门,取消相关优惠。/pp  第二十四条 违反技术规范要求,对污染源自动监控系统功能进行删除、修改、增加、干扰,造成污染源自动监控系统不能正常运行,或者对污染源自动监控系统中存储、处理或者传输的数据和应用程序进行删除、修改、增加的操作,构成违反治安管理行为的,生态环境行政主管部门可以依据《中华人民共和国治安管理处罚法》第二十九条的规定移送公安部门处理 涉嫌构成犯罪的,移送司法机关依照《中华人民共和国刑法》第二百八十六条或第三百三十八条追究刑事责任。/pp  strong第六章 附则/strong/pp  第二十五条 储油库、加油站、油烟产生单位等固定污染源大气污染物自动监测设备的安装、验收、运行维护等具体要求另行发布。/pp  第二十六条 本办法由北京市生态环境局负责解释。/pp  第二十七条 本办法自2019年1月1日起施行。原《北京市固定污染源自动监控管理办法》同时废止。/p
  • 中科院分子植物卓越中心蔡文娟博士:激光扫描共聚焦显微镜使用和管理心得分享
    生命科学基础研究与人类健康和社会经济发展密切相关,在科学和经济社会领域中的重要性日渐增强。Science 曾发布125 个挑战全球科学界的重要基础问题,其中涉及生命科学的问题约占 54%。生命科学研究过程离不开各类科学仪器的帮助,今年,仪器信息网特别策划话题:“生命科学技术平台经验分享”,邀请高校、科研院所公共技术平台的老师分享技术心得和经验,方便生命科学领域研究人员了解相关技术进展、学习仪器使用方法。 本篇为中国科学院分子植物科学卓越创新中心细胞结构分析技术平台主管蔡文娟撰写,蔡老师根据多年工作经验,详细介绍了激光扫描共聚焦的发展、系统组成和应用,并分享了工作中仪器使用的心得体会。以下为供稿内容:1957年, Malwin Minsky博士在其博后阶段首次阐明了激光扫描共聚焦显微镜技术的基本工作原理,但由于当时没有足够强度的照明光源,工作一直停留在理论阶段。20世纪60年代,伴随着激光器技术的发展,激光扫描共聚焦技术开始进一步发展,直到80年代中期才基本成熟,有了成熟的商业化产品(Bio-Rad)。由于该系统所用光源为激光,成像方式为逐点扫描成像,因此又被称为“laser scanning confocal microscope”, 简称为LSCM。激光扫描共聚焦仪器发展至今,已经不再是简单的光学显微镜 ,而是整合了光学显微镜 、激光、检测器、工作站和图像处理软件的复合型显微成像系统。1987年,White和Amos在英国《自然》杂志发表了“共聚焦显微镜时代的到来”一文,标志着LSCM已成为进行科学研究的重要工具。作为细胞生物学研究的必备工具,激光扫描共聚焦显微镜堪称各个成像平台的“扛把子”,其对各种标本和荧光标记方法具备很强的普适性,即使在各种高端显微成像技术飞速发展的当下,也依然占据着极高的使用率。中国科学院分子植物科学卓越创新中心所级中心细胞结构分析技术平台成立于2010年,经过10余年的发展,拥有多种细胞成像设备,包括激光扫描共聚焦(7台)、转盘共聚焦和SIM超高分辨等高端显微系统(http://cfc.cemps.ac.cn/xibao.php),为中心内部及周边科研院所和企业提供专业的显微成像服务,最大程度地满足中心及周边的成像需求。一、 激光扫描共聚焦显微镜的组成和应用激光扫描共聚焦显微镜(以下简称为LSCM)的灵魂部件是针孔(pinhole),针孔与物镜的焦平面共轭,因此被称为“共(共轭)聚焦”。由于共轭针孔的存在,只有标本焦平面的荧光信号才会透过针孔被检测器捕捉,而非焦平面的信息被阻挡在针孔之外,形成类似光学CT的效果。配合针孔成像, LSCM硬件部分通常包括光学显微镜、激光器、扫描振镜、检测器和图像工作站组成,每一个重要部件均可根据实验需求选择合适的配置,以下将结合分子植物卓越中心细胞平台的实际需求,逐一进行简要介绍。1、光学显微镜 LSCM可以搭建在正置或倒置荧光显微镜上。生命科学研究中,倒置显微镜使用更为广泛,适合组织切片、贴壁细胞等相对较薄的标本。样品固定在载玻片上,可以方便地倒置观察。在植物研究领域,倒置显微镜也经常用于观察拟南芥根/叶片、烟草叶片、原生质体等标本,这类标本的特点是相对较薄,制片简单,可以通过简单压片的方式,利用水或其他压片溶剂在载玻片盖玻片之间形成的吸附力,将标本固定住,从而可以倒置观察。但也存在部分无法使用倒置观察的应用场景,如茎尖分生组织、较厚的作物叶片或根等,由于标本过于厚重,倒置观察时容易掉落,不方便固定,或者由于压片会导致表面形态发生变化或组织破裂,从而影响定位观察。针对这类应用,正置显微镜就显得尤为重要,尤其是搭配合适的浸入式水镜,可以帮助这类厚标本实现清楚方便的显微成像。作为光学显微平台,需要考虑到研究所各个课题组之间的应用差异,保证正置与倒置的合理配备,设备组合可最大程度地满足各类研究需要。2、激光器 为了激发出足够的荧光信号,LSCM采用激光作为照明光源。根据标记和成像需求,一般LSCM至少配置4个波段的激光器,包括405/488/561/633nm等,涵盖了整个可见光波段的激发需求,能满足大多数荧光染料和蛋白的成像。在此基础上,研究组经常涉及荧光共振能量转移(FRET)相关实验,需要对CFP和YFP等分子对进行特异性激发,这种情况下,必须选择配置有458和514nm激光器的LSCM系统。红色荧光蛋白中,mCherry以单体形式存在,不易出现由荧光蛋白多聚化带来的artifact定位现象,因此现在很多研究组选择mCherry荧光蛋白标记,543nm和561nm等波长都能够激发mCherry蛋白,但如果希望得到更为明亮和特异的红色荧光信号,最好选择含594nm激发波长的系统。除了固定波段的激光器,还可选择搭配脉冲式白色激光器,自由选择所需激发波段。由于白色激光器在激发波段方面调节的灵活性,以及其特有的脉冲式而非连续激发,可以配合检测器做基于门控技术的荧光寿命成像,有助于过滤部分自发荧光信号,或者得到荧光寿命信息。分子植物卓越中心细胞平台(辰山园区)就配备了该系统,配合脉冲式白激光和高灵敏度检测器,可以进行FLIM-FRET实验,在荧光强度成像的基础上,增加荧光寿命维度的检测。3、扫描振镜 扫描振镜一般由x和y两个方向的振镜组成,通过高速振动控制激光在成像视场内逐点扫描,“点动成线,线动成面”,形成一个完整的2D图片。根据振动速度的区别,在LSCM中一般分为检流式振镜(galvanometer)和共振振镜(resonant)。检流式振镜是应用最多的扫描振镜,单个像素点上停留时间在微秒层级,可激发出更多的荧光信号,保证图像信噪比。常规拍摄荧光2D/3D图像和非毫秒级变化的time-series,检流式振镜一般都可以满足需求。共振振镜的振动频率相比检流式有显著提高, 能实现万赫兹,512X512分辨率的图像采集频率可达到30fps。如果涉及到钙波捕捉、相分离小体快速融合/FRAP实验、囊泡运动等快速变化,使用该振镜更容易检测完整的运动变化。细胞平台2015年后购买的系统,多为混合式振镜(含有两种振镜),在实际实验中,会根据需求选择合适的振镜使用。但必须注意的是,由于共振振镜速度很快,牺牲了每个像素点上的激发时间,图像的信噪比下降严重,一般需结合合适的图像处理,才可以得到相对清晰的共聚焦图片。近三年植物领域由于相分离和钙信号相关研究逐渐增多,对扫描成像速度的要求也日渐提高,共振振镜的存在可以很好地补充检流式振镜的不足,两种振镜同时存在,可兼顾成像分辨率和时间分辨率,更好地满足不同研究方向的需求。4、检测器 配合振镜的点扫描方式,光电倍增管(PMT)和雪崩式光电二极管(HyD)均可用于激光扫描共聚焦系统的荧光检测,实现光电子信号的倍增放大。除了常规的PMT(一般以多碱作为光阴极感光材料),细胞平台每套LSCM系统上也会配置高灵敏度的GaAsP检测器(镓砷磷为感光材料的PMT)或HyD检测器,目的是提高检测灵敏度,提升弱信号的捕捉能力。对于较明亮的荧光信号,常规PMT即可满足需求;碰到相对较弱的信号,建议使用高灵敏度的GaAsP或HyD检测器,以获得信噪比更高的图片。但实际使用中,高灵敏度检测器并非万能,如果荧光发射在近红区域(Cy5.5和Cy7等),常规PMT的检测效率会相对更高,这是因为不同的感光材料对各个光谱波段的响应效率不一样。作为细胞成像平台,需要保证各类型检测器的存在,根据荧光染料的强度和特性,给出专业的建议和设置,能够更好地保证成像效率。5、图像工作站 激光扫描共聚焦系统需要整合多种硬件协同工作,因此对图像工作站和操作软件都提出了较高的要求。操作软件和工作站必须能稳定运行,精准控制各电动部件,流畅采集显微图片,针对3D/time series等较大的图像数据,能够保证后期图像处理速度。一般来说,成熟的商业化共聚焦系统在硬件控制上都可以做到稳定流畅,但对于后期的图像处理,则需要根据平台常见的数据做合理配置。反卷积处理,3D重构和AI分析等图像数据处理都对图形处理显卡有一定的要求,因此我们平台一般都会选择配备有GPU的工作站,以满足越来越高的分析需求。同时,在实际使用中,尽量避免在采集电脑上使用USB等移动存储设备,以最大可能杜绝电脑病毒的存在引起整机系统故障。二、 激光扫描共聚焦系统管理心得和未来可提升空间细胞平台成像设备类型多样化,各有特点,作为其中的“扛把子”成员,激光扫描共聚焦系统使用频率极高,受众很广,应用方向也更为多样化。作为平台管理人员,如何管理统筹多台LSCM系统的使用,使其更好地服务于科研工作,也是常思常修的一门功课。现将日常管理心得和提升空间分享如下:1、激光扫描共聚焦系统的日常维护必不可少,尤其是物镜的清洁和光路的校准。每位用户根据观察标本的不同,会选择空气镜/水镜/油镜等不同介质类型的物镜,很容易存在交叉污染,导致物镜使用不当。在培训用户遵守使用章程的同时,平台工作人员必须保证2-3天检查一次常用物镜的清洁程度。光路校准方面,建议根据仪器使用状况每半年或一年检查一次光路状态,保证光路的准直。如果共聚焦光路上搭载了超高分辨系统,使用中尤其需要注意光路状态,以确保使用效率。2、激光扫描共聚焦系统的基础操作培训是重中之重。平台工作人员要精通已有设备的软件使用和参数调节,组织小范围培训,每次上机培训不超过5人,确保培训效果。培训必须结合考核进行,第一次上机实验须保证培训老师陪同,以了解用户的实验和使用薄弱点,巩固培训效果。3、预约体系和微信用户群的合理使用。目前中科院仪器平台有统一的预约体系,可以在网预约所需仪器机时。但作为使用频率极高的激光扫描共聚焦系统,经常面临僧多粥少难以预约的状况。我们针对高频使用的LSCM建立了仪器专用微信用户群,培训考核通过后即可入群。用户在使用结束或临时取消后会在微信群内公告,便于后续用户及有需求的用户及时知晓,提升使用效率。同时,该仪器如有任何不合理使用和故障,管理人员也可在群内及时公告,方便用户调整实验。4、拓宽平台设备的应用边界,提升管理人员的技术能力。作为平台管理人员,需要密切关注生命科学领域的研究进展,尽可能从应用角度提前布局所需的成像设备,做到有备无患,不断拓展应用边界。另外,必须时刻关注显微成像的技术前沿,结合用户的实验特性和科研目的,立足已有的设备进行必要的改造和改进,提升自身的技术能力。5、国产化成像设备的落地展望。2019年已有相关国产化LSCM设备搭建成功的报道(苏州医工所),2021年也有商业化SIM超高分辨显微镜的落地(北京大学),今年再传出国产超分辨显微成像设备商业交付的消息(中科院生物物理所),这表明国产化设备正在显微成像赛道不断发力,相信其能够更好地结合国内科研用户的应用需求,不断突破瓶颈,落地于细胞平台,提升平台的技术实力。作者简介: 蔡文娟 博士,高级工程师,中国科学院分子植物科学卓越创新中心(植物生理生态研究所)细胞结构分析技术平台主管。2012年中国科学院上海生科院植生所获博士学位,2012-2017年中科院上海生科院植生所担任助理研究员, 2017-2020在奥林巴斯中国有限公司担任应用工程师,2020年12月加入中科院分子植物科学卓越创新中心,担任细胞结构分析技术平台主管,主要负责所级中心细胞结构分析技术平台的管理维护和运行,承担院级功能开发研制项目,承担和参与多项国自然基金等。
  • 光学显微镜技术和应用简介
    自然界中一些最基本的过程发生在微观尺度上,远远超出了我们肉眼所能看到的极限,这推动了技术的发展,使我们能够超越这个极限。早在公元4世纪,人们发现了光学透镜的基本概念,并在13世纪,人们已经在使用玻璃镜片,以提高他们的视力和放大植物和昆虫等对象以便更好地了解他们。随着时间的推移,这些简单的放大镜发展成为先进的光学系统,被称为光学显微镜,使我们能够看到和理解超越我们感知极限的微观世界。今天,光学显微镜是许多科学和技术领域的核心技术,包括生命科学、生物学、材料科学、纳米技术、工业检测、法医学等等。在这篇文章中,我们将首先探讨光学显微镜的基本工作原理。在此基础上,我们将讨论当今常用的一些更高级的光学显微镜形式,并比较它们在不同应用中的优缺点。    什么是光学显微镜?  光学显微镜用于通过提供它们如何与可见光相互作用(例如,它们的吸收、反射和散射)的放大图像来使小结构样品可见。这有助于了解样品的外观和组成,但也使我们能够看到微观世界的过程,例如物质如何跨细胞膜扩散。  显微镜的部件以及光学显微镜的工作原理  从根本上说,显微镜包括两个子系统:一个用于照亮样品的照明系统和一个成像系统,该系统产生与样品相互作用的光的放大图像,然后可以通过眼睛或使用相机系统进行观察。  早期的显微镜使用包含阳光的照明系统,阳光通过镜子收集并反射到样品上。今天,大多数显微镜使用人造光源,如灯泡、发光二极管(LED)或激光器来制造更可靠和可控的照明系统,可以根据给定的应用进行定制。在这些系统中,通常使用聚光透镜收集来自光源的光,然后在聚焦到样品上之前对其进行整形和光学过滤。塑造光线对于实现高分辨率和对比度至关重要,通常包括控制被照亮的样品区域和光线照射到它的角度。照明光的光学过滤,使用修改其光谱和偏振的光学过滤器,可用于突出样品的某些特征。图1:复合显微镜的基本构造:来自光源的光使用镜子和聚光镜聚焦到样品(物体)上。来自样品的光被物镜收集,形成中间图像,该图像由目镜再次成像并传递到眼睛,眼睛看到样品的放大图像。  成像系统收集与样品相互作用的照明光,并产生可以查看的放大图像(如上图1)。这是使用两组主要的光学元件来实现的:首先,物镜从样品中收集尽可能多的光,其次,目镜将收集的光中传递到观察者的眼睛或相机系统。成像系统还可包括诸如选择来自样品的光的某些部分的孔和滤光器之类的元件,例如仅看到已从样品散射的光,或仅看到特定颜色或波长的光。与照明系统的情况一样,这种类型的过滤对于挑出某些感兴趣的特征非常有用,这些特征在对来自样本的所有光进行成像时会保持隐藏。  总的来说,照明和成像系统在光学显微镜的性能方面起着关键作用。为了在您的应用中充分利用光学显微镜,必须充分了解基本光学显微镜的工作原理以及当今存在的变化。  简单复合显微镜  单个镜头可以用作放大镜,当它靠近镜头时,它会增加物体的外观尺寸。透过放大镜看物体,我们看到物体的放大和虚像。这种效果用于简单的显微镜,它由单个镜头组成,该镜头对夹在框架中并从下方照明的样品进行成像,如下图2所示。这种类型的显微镜通常可以实现2-6倍的放大倍率,这足以研究相对较大的样本。然而,实现更高的放大倍率和更好的图像质量需要使用更多的光学元件,这导致了复合显微镜的发展(如下图3)。图2:通过创建靠近它的物体的放大虚拟图像,将单个镜头用作放大镜。图3:左:简单显微镜。右:复合显微镜。  在复合显微镜中,从底部照射样品以观察透射光,或从顶部照射样品以观察反射光。来自样品的光由一个由两个主要透镜组组成的光学系统收集:物镜和目镜,它们各自的功率倍增,以实现比简单显微镜更高的放大倍率。物镜收集来自样品的光,通常放大倍数为40-100倍。一些复合显微镜在称为“换镜转盘(nose piece)”的旋转转台上配备多个物镜,允许用户在不同的放大倍数之间进行选择。来自物镜的图像被目镜拾取,它再次放大图像并将其传递给用户的眼睛,典型的目镜放大率为10倍。  可以用标准光学显微镜观察到的最小特征尺寸由所使用的光学波长(λ)和显微镜物镜的分辨率决定,由其孔径数值(NA)定义,最大值为NA =1空中目标。定义可区分的最小特征尺寸(r)的分辨率极限由瑞利准则给出:  r=0.61×(λ/NA)  例如,使用波长为550nm的绿光和典型NA为0.7的物镜,标准光学显微镜可以分辨低至0.61×(550nm)/0.7≈480nm的特征,这足以观察细胞(通常为10µm大小),但不足以观察较小生物的细节,例如病毒(通常为250-400nm)。要对更小的特征成像,可以使用具有更高NA和更短波长的更先进和更昂贵的物镜,但这可能不适用于所有应用。  在标准复合显微镜(如下图4a)中,样品(通常在载玻片上)被固定在一个可以手动或电子移动以获得更高精度的载物台上,照明系统位于显微镜的下部,而成像系统高于样本。然而,显微镜主体通常也可以适应特定用途。例如,立体显微镜(如下图4b)的特点是两个目镜相互成一个小角度,让用户可以看到一个略有立体感的图像。在许多生物学应用中,使用倒置显微镜设计(如下图4c),其中照明系统和成像光学器件都在样品台下方,以便于将细胞培养容器等放置在样品台上。最后,比较显微镜(如下图4d)常用于法医。图4:复合显微镜。a)标准直立显微镜指示(1)目镜,(2)物镜转台、左轮手枪或旋转鼻镜(用于固定多个物镜),(3)物镜、调焦旋钮(用于移动载物台)(4)粗调,(5)微调,(6)载物台(固定样品),(7)光源(灯或镜子),(8)光阑和聚光镜,(9)机械载物台。b)立体显微镜。c)倒置显微镜。  光学显微镜的类型  下面,我们将介绍一些当今可用的不同类型的光学显微镜技术,讨论它们的主要操作原理以及每种技术的优缺点。  亮视野显微镜  亮视野显微镜(Brightfield microscopy,BFM)是最简单的光学显微镜形式,从上方或下方照射样品,收集透射或反射的光以形成可以查看的图像。图像中的对比度和颜色是因为吸收和反射在样品区域内变化而形成的。BFM是第一种开发的光学显微镜,它使用相对简单的光学装置,使早期科学家能够研究传输中的微生物和细胞。今天,它对于相同的目的仍然非常有用,并且还广泛用于研究其他部分透明的样品,例如透射模式下的薄材料(如下图5),或反射模式下的微电子和其他小结构。图5:亮视野显微镜。左图:透射模式-在显微镜下看到的石墨(深灰色)和石墨烯(最浅灰色)薄片。在这里,图像上看到的亮度差异与石墨层的厚度成正比。右图:反射模式-SiO2表面上的石墨烯和石墨薄片,小的表面污染物也是可见的。  暗视野显微镜  暗视野显微镜是一种仅收集被样品散射的光的技术。这是通过添加阻挡照明光直接成像的孔来实现的,这样只能看到被样品散射的照明光。通过这种方式,暗场显微镜突出显示散射光的小结构(如下图6),并且对于揭示BFM中不可见的特征非常有用,而无需以任何方式修改样品。然而,由于在最终图像中看到的唯一光是被散射的光,因此暗场图像可能非常暗并且需要高照明功率,这可能会损坏样品。  图6:亮视野和暗视野成像。a)亮视野照明下的聚合物微结构。b)与a)中结构相同的暗视野图像,突出显示边缘散射和表面污染。c)与a)和b)相似的结构,被直径为100-300nm的纳米晶体覆盖。仅观察到纳米晶体散射的光,而背景光被强烈抑制。  相差显微镜  相差显微技术(Brightfield microscopy,PCM)是一种可视化由样品光路长度变化引起的光学相位变化的技术.这可以对在BFM中产生很少或没有对比度的透明样品进行成像,例如细胞(如下图7)。由于肉眼不易观察到光学相移,因此相差显微镜需要额外的光学组件,将样品引起的相移转换为最终图像中可见的亮度变化。这需要使用孔径和滤光片来操纵照明系统和成像系统。这些形状和选择性地相移来自样品的光(携带感兴趣的相位信息)和照明光,以便它们建设性地干涉眼睛或检测器以创建可见图像。图7:人类胚胎干细胞群落的相差显微图像。  微分干涉显微镜  与PCM类似,微分干涉显微镜(differential interference contrast microscopy,DICM)通过将由于样品光路长度变化引起的光学相位转换为可见对比度,从而使透明样品(例如活的未染色细胞)可视化。然而,与PCM相比,DICM可以实现更高分辨率的图像,并且减少了由PCM所需的光学器件引入的清晰度和图像伪影。在DICM ,照明光束被线性偏振器偏振,其偏振旋转,使其分裂成两个偏振光束,它们具有垂直偏振和小(通常低于1µm)间隔。穿过样品后,两束光束重新组合,从而相互干扰。这将创建一个对比度与图像成正比的图像差在两个偏振光束之间的光相位,因此命名为“差”干涉显微镜。DICM产生的图像出现与采样光束之间的位移方向相关的三维图像,这导致样品边缘具有亮区或暗区,具体取决于两者之间的光学相位差的符号(如下图8)。图8:微分干涉对比显微镜。左:DICM的原理图。右图:通过DICM成像的活体成年秀丽隐杆线虫(C.elegans)。  偏光显微镜  在偏振光显微镜中,样品用偏振光照射,光的检测也对偏振敏感。为了实现这一点,偏振器用于控制照明光偏振并将成像系统检测到的偏振限制为仅一种特定的偏振。通常,照明和检测偏振设置为垂直,以便强烈抑制不与样品相互作用的不需要的背景照明光。这种配置需要一个双折射样品,它引入了照明光偏振角的旋转,以便它可以被成像系统检测到,例如,观察晶体的双折射以及它们的厚度和折射率的变化(如下图9)。图9:偏光显微镜。橄榄石堆积物的显微照片,由具有不同双折射的晶体堆积而成。整个样品的厚度和折射率的变化会导致不同的颜色。  荧光显微镜  荧光显微镜用于对发出荧光的样品进行成像,也就是说,当用较短波长的光照射时,它们会发出长波长的光。示例包括固有荧光或已用荧光标记物标记的生物样品,以及单分子和其他纳米级荧光团。该技术采用了滤光片的组合,可阻挡短波长照明光,但让较长波长的样品荧光通过,因此最终图像仅显示样品的荧光部分(如下图10)。这允许从由许多其他非荧光颗粒组成的样品中挑出和可视化荧光颗粒或已被染料染色的感兴趣细胞的分布。同时,荧光显微镜还可以通过标记小于此限制的粒子来克服传统光学显微镜的分辨率限制。例如,可以用荧光标记标记病毒以显示其位置在生物样品的情况下,可以表达荧光蛋白,例如绿色荧光蛋白。结合各种新颖形式的样品照明,荧光显微镜的这一优势实现了“超分辨率”显微镜技术,打破了传统光学显微镜的分辨率限制。荧光显微镜的主要限制之一是光漂白,其中标记物或颗粒停止发出荧光,因为吸收照明光的过程最终会改变它们的结构,使它们不再发光。图10:荧光显微镜。左:工作原理-照明光由短通激发滤光片过滤,并由二向色镜反射到样品。来自样品的荧光通过二向色镜,并被发射滤光片额外过滤以去除图像中残留的激发光。右图:有机晶体中分子的荧光图像(晶体轮廓显示为黄色虚线)。由于来自其他分子和晶体材料的荧光,背景并不完全黑暗。  免疫荧光显微镜  免疫荧光显微镜是主要用于在微生物的细胞内的生物分子可视化的位置荧光显微镜的具体变化。在这里,用荧光标记物标记或固有荧光的抗体与感兴趣的生物分子结合,揭示它们的位置。(如下图11)图11:免疫荧光显微镜。肌动蛋白丝(紫色)、微管(黄色)和细胞核(绿色)的免疫荧光标记的两个间期细胞。  共聚焦显微镜  共聚焦显微镜是一种显微镜技术,它可以逐点成像来自样品的散射或荧光。不是一次对整个样品进行照明和成像,而是在样品区域上扫描源自点状光源的照明点,敏感检测器仅检测来自该点的光,从而产生2D图像。这种方法允许以高分辨率对弱信号样本进行成像,因为来自采样点之外的不需要的背景信号被有效抑制。在这里,所使用的波长和物镜在所有三个维度上都限制了成像光斑的大小。这允许通过将物镜移动到距样品不同的距离,在样品内的不同深度处制作2D图像。然后可以组合这些2D图像“切片”以创建样本的3D图像,这是所讨论的其他宽视场显微镜技术无法实现的,并且还允许以3D方式测量样品尺寸。这些优势的代价是无法一次性拍摄图像,而是必须逐点构建图像,这可能非常耗时并阻碍样本的实时成像(如下图12)。图12:单分子荧光的共聚焦荧光图像。小点对应于单个分子的荧光,而较大的点对应于分子簇。此处的荧光背景比简单的荧光显微镜图像弱得多,如亮点之间的暗区所见。  双光子显微镜  双光子显微镜(Two-photonmicroscopy,TPM)是荧光显微镜的一种变体,它使用双光子吸收来激发荧光,而不是单光子激发。在这里,通过吸收两个光子的组合来激发荧光,其能量大约是单个光子激发所需能量的一半。例如,在该方案中,通常由单个蓝色光子激发的荧光团可以被两个近红外光子激发。在TPM中,图像是逐点建立的,就像在共聚焦显微镜中一样,也就是说,双光子激发点在样品上扫描,样品荧光由灵敏的检测器检测。与传统荧光显微镜相比,激发和荧光能量的巨大差异导致了多重优势:首先,它允许使用更长的激发波长,在样品内散射较少,因此穿透更深,以允许在其表面下方对样品进行成像并创建3D样品图像。同时,由于激发能量低得多,光漂白大大减少,这对易碎样品很有用。激发点周围的荧光背景也大大减少,因为有效的双光子吸收仅发生在激发光束的焦点处,因此可以观察到来自样品小部分的荧光(如下图13)。  TPM的一个缺点是双光子吸收的概率远低于单光子吸收,因此需要高强度照明,如脉冲激光,才能达到实用的荧光信号强度。图13:双光子显微镜。花粉的薄光学切片,显示荧光主要来自外层。  光片显微镜  光片显微技术是荧光显微术的一种形式,其中样品被垂直于观察方向的薄“片”光照射,从而仅对样品的薄切片(通常为几微米)进行成像。通过在样品在光片中旋转的同时拍摄一系列图像,可以形成3D图像。这要求样品大部分是透明的,这就是为什么这种技术通常用于形成小型透明生物结构的3D图像,例如细胞、胚胎和生物体。(如下图14)图14:光片显微镜。左:工作原理。右:通过荧光成像用光片显微镜拍摄的小鼠大脑的荧光图像。  全内反射荧光显微镜  全内反射荧光(Totalinternal reflection fluorescence microscopy ,TIRF)是一种荧光显微技术,可通过极薄(约100nm厚)的样品切片制作2D荧光图像。这是通过照明光的渐逝场激发样品的荧光来实现的,当它在两种不同折射率(n)的材料之间的边界处经历全内反射时就会发生这种情况。消逝场具有与照明光相同的波长,但与界面紧密结合。在TIRF显微镜中,激发光通常在载玻片(n=1.52)和样品分散的水介质(n=1.35)之间的界面处发生全内反射。渐逝场的强度随距离呈指数下降来自界面,这样在最终图像中只能观察到靠近界面的荧光团。这也导致来自切片外区域的荧光背景的强烈抑制,这允许拾取微弱的荧光信号,例如在定位单个分子时。这使得TIRF非常适用于观察参与细胞间相互作用的荧光蛋白(如下图15)的微弱信号,但也需要将样品分散在水性介质中,这可能会限制可以测量的样品类型。图15:TIRF图像显示培养的视网膜色素上皮细胞中的蛋白质荧光。每个像素对应67nm。  膨胀显微镜  膨胀显微镜背后的基本概念是增加通常需要高分辨率显微镜的样品尺寸,以便可以使用标准显微镜技术(尤其是荧光显微镜)对其进行成像。这适用于保存的标本,例如生物分子、细胞、细菌和组织切片,可以使用下图16中所示的化学过程在所有维度(各向同性)均匀扩展多达50倍。扩展样本可以隔离感兴趣的个别特征通常是隐藏的,可以使它们透明,从而可以对它们的内部进行成像。图16:膨胀显微镜的样品制备。细胞首先被染色,然后连接到聚合物凝胶基质上。然后细胞结构本身被溶解(消化),使染色的部分随着凝胶各向同性地膨胀,从而使染色的结构更详细地成像。  光学显微镜中的卷积  除了使光学系统适应特定用例之外,现代光学显微镜还利用了数字图像处理,例如图像去卷积。该技术通过补偿光学系统本身固有的模糊,可以提高空间分辨率以及光学显微镜拍摄图像的定位精度。这种模糊可以在校准步骤中测量,然后可以用于对图像进行去卷积,从而减少模糊。通过将高性能光学元件与先进的图像处理相结合,数字显微镜可以突破分辨率的极限,以更深入地观察微观世界。(如下图17)图17:图像解卷积。左:原始荧光图像。右:解卷积后的图像,显示细节增加。  光学显微镜与电子显微镜  光学显微术通常使用可见光谱中的光波长,由于瑞利准则,其空间分辨率固有地限制为所用波长的大约一半(最多约为200nm)。然而,即使使用具有高NA和高级图像处理的物镜,也无法克服这一基本限制。相反,观察较小的结构需要使用较短波长的电磁辐射。这是电子显微镜的基本原理,其中使用电子而不是可见光照亮样品。电子具有比可见光短得多的相关波长,因此可以实现高达10000000倍的放大倍数,甚至可以分辨单个原子。(如下图18)  图18:同心聚合物结构中纳米晶体放大15000倍的扫描电子显微镜图像,即使是细微的细节,例如基材的孔隙,也能分辨出来。  总结与结论  光学显微镜是一种强大的工具,可用于检查各种应用中的小样本。通过调整用于特定用例的照明和成像技术,可以获得高分辨率图像,从而深入了解样品中的微观结构和过程。文中,我们讨论了各种光学显微镜技术的特点、优势和劣势,这些技术在光线照射和收集方式上有所不同。显微镜种类优点技术限制典型应用亮视野显微镜结构相对简单,光学元件很少低对比度、完全透明的物体不能直接成像,可能需要染色对彩色或染色样品和部分透明材料进行成像暗视野显微镜显示小结构和表面粗糙度,允许对未染色样品进行成像所需的高照明功率会损坏样品,只能看到散射图像特征细胞内颗粒成像,表面检测相差显微镜实现透明样品的成像复杂的光学设置,需要的高照明功率会损坏样品,通常图像较暗跟踪细胞运动,成像幼虫微分干涉对比显微镜比PCM更高的分辨率复杂的光学设置,需要的高照明功率会损坏样品,通常图像较暗活的、未染色的细胞和纳米颗粒的高分辨率成像偏光显微镜来自样品非双折射区域的强背景抑制,允许测量样品厚度和双折射需要双折射样品成像胶原蛋白,揭示晶体中的晶界荧光显微镜允许挑出样品中的单个荧光团和特定的感兴趣区域,可以克服分辨率限制需要荧光样品和灵敏的检测器,光漂白会减弱信号成像细胞成分、单分子、蛋白质免疫荧光显微镜使用抗体靶向可视化特定的生物分子大量样品制备,需要荧光样品,光漂白识别和跟踪细胞和蛋白质共聚焦显微镜低背景信号,可以创建3D图像成像速度慢,需要复杂的光学系统3D细胞成像,荧光信号较弱的成像样品,表面分析双光子显微镜样品穿透深度、背景信号低、光漂白少成像速度慢,需要复杂的光学系统和大功率照明神经科学,深层组织成像光片显微镜图像仅样品的极薄切片,可通过旋转样品创建3D图像成像速度慢,需要复杂的光学系统细胞和生物体的3D成像全内反射荧光显微镜强大的背景抑制,极精细的垂直切片成像仅限于样品的薄区域,需要复杂的光学系统,样品需要在水介质中单分子成像,成像分子运输膨胀显微镜提高标准荧光显微镜的有效分辨率需要对样品进行化学处理,不适用于活体样品生物样品的高分辨率成像  参考:  1. Rochow TG, Tucker PA. A Brief History of Microscopy. In: Introduction to Microscopy by Means of Light, Electrons, X Rays, or Acoustics. Springer US 1994:1-21. doi:10.1007/978-1-4899-1513-9_1  2. Smith WJ. Modern Optical Engineering: The Design of Optical Systems. McGraw-Hill 1990. ISBN: 0070591741  3. Shribak M, Inoué S. Orientation-independent differential interference contrast microscopy. Collected Works of Shinya Inoue: Microscopes, Living Cells, and Dynamic Molecules. 2008 (Dic):953-962. doi:10.1142/9789812790866_0074  4. Gao G, Jiang YW, Sun W, Wu FG. Fluorescent quantum dots for microbial imaging. Chinese Chem Lett. 2018 29(10):1475-1485. doi:10.1016/j.cclet.2018.07.004  5. Chalfie M, Tu Y, Euskirchen G, Ward W, Prasher D. Green fluorescent protein as a marker for gene expression. Science. 1994 263(5148):802-805. doi:10.1126/science.8303295  6. Baranov M V., Olea RA, van den Bogaart G. Chasing Uptake: Super-Resolution Microscopy in Endocytosis and Phagocytosis. Trends Cell Biol. 2019 29(9):727-739. doi:10.1016/j.tcb.2019.05.006  7. Miller DM, Shakes DC. Chapter 16 Immunofluorescence Microscopy. In: Current Protocols Essential Laboratory Techniques. Vol 10. 1995:365-394. doi:10.1016/S0091-679X(08)61396-5
  • 用超低价显微镜拯救无数生命
    乔尼· 布莱切/文  显微镜是科研领域最典型的象征之一,提起它,很多人的脑海里都会浮现出身穿白大褂在实验室里寻求重大突破的科研人员。你或许还记得童年时期第一次透过显微镜观察池水中的草履虫,或洋葱上的细胞结构时的场景。数十年来,在显微镜的帮助下,我们诊断了无数的致命疾病,拯救了无数人的 生命 。然而,在世界的很多地方,这种设备却依然非常短缺。  但这种情形即将改变。科技正在发挥它应有的作用,它正在将智能手机、iPad甚至纸片变成耐用而便携的显微镜,而花费却只有区区几美元。  美国能源部太平洋西北国家实验室的科学家开发了一种小型设备,可以直接固定在智能手机或平板电脑上,将这些设备的摄像头变身为显微镜。他们使用3D打印机制作了这种配件,用它来固定价格低廉的玻璃珠,以此实现放大效果。    一旦安装了这种配件,你就可以使用它观察标准载玻片上的样本,效果可以直接显示在屏幕上。目前有100倍、350倍和1000倍3种规格:100倍可以观察盐晶或叶片结构,350倍可以观察血液中的寄生虫(疟疾)或饮用水中的原生动物(隐孢子虫),1000倍可以观察炭疽孢子。这种配件的设计图可以直接在网上查看,所以如果你也有3D打印机,大约只需使用1美元的打印材料即可自己制作一个这样的显微镜。  澳大利亚国立大学的史蒂夫· 李(Steve Lee)博士已经找到了一种方法,可以直接在烤炉上烘烤显微镜镜头,并将其固定在智能手机上。方法与Shrinky Dink很相似,只不过使用的是与隐形眼镜相同的材料。为了制作这样的镜头,史蒂夫· 李将一滴胶状的聚二甲硅氧烷滴在载玻片上,并在158华氏度(70摄氏度)的温度下烘烤至变硬为止。史蒂夫· 李把另外一滴聚二甲硅氧烷滴在底座上,将载玻片翻转后再次烘烤,利用重力作用来形成水滴的形状。还可以多加几滴来制作最佳的镜头形状。  制作完成后,便可将镜头直接嵌入3D打印机打印的框架内,从而制作智能手机镜头。尽管放大倍数不算高,大约只有160倍,但仍然可以用于诊断黑色素瘤等疾病。这种小镜头的成本大约只有几美元。    如果手头没有3D打印机和智能手机,还可以使用一些技术含量更低的方法:使用一张纸来制作,成本甚至不足1美元。斯坦福大学Prakash实验室的研究团队开发的Foldscope从折纸中获得了灵感,但却可以提供超过2000倍的放大效果。它看起来只是一张纸,把各个部位拆下来后便可以开始折叠了。研究人员并没有提供书面说明,但设计方案却很直观。一旦组装完成,便可使用这种显微镜观察常见的细菌和寄生虫。要制作Foldscope,只需要一张专门设计的聚丙烯纸、一个140倍的低倍数镜头或2180倍的高倍数镜头、一个3伏纽扣电池、一个白色LED灯泡、一个电滑块和一条铜带。  Foldscope的设计者表示,他们希望达成两大使命:通过&ldquo 让全世界的每个孩子都有一台显微镜&rdquo 来影响科学教育,通过开发坚固、易用的诊断设备来影响人们的健康。  这款产品已经提供给1万名用户进行测试,想要阅读测试者的故事,可以查看他们的官方博客Microcosmos。
  • 与BC43一见如故 | ANDOR台式共聚焦显微镜BC43新鲜来袭
    牛津仪器ANDOR--专业的高性能科学成像解决方案提供商,在11月2日宣布,BC43一款颠覆时代的台式共聚焦显微镜,将载入屡获殊荣的产品集册。通常来说,显微镜拍摄3D图像成本高昂,操作复杂,并且要求环境配备暗室。毋庸置疑,共聚焦技术唯有如此才能提供高质量的3D图像,尤其是厚样本和临床相关标本。ANDOR将用BC43台式共聚焦显微镜扭转这一局面,2D共聚焦图像以毫秒之速呈现,实时生成3D视图以供审视。紧凑的设计使其节时省地,轻轻松松即可置于普通实验室工作台之上。BC43台式共聚焦显微镜综合了从单细胞水平的亚细胞结构细节到稍大的模式生物与大型组织样本的多种成像体验,包括一些其他显微镜难以应付的厚样品。它同时适合研究新手和经验丰富的显微镜专家,简单到能让用户首次使用设备就在一小时内获得图像,也足够复杂到可以处理从活样品到固定样品等多样化成像需求。借此,越来越多的研究学者能够在日常工作流程中以超乎其他共聚焦多倍的速度获取精彩的图像。ANDOR的BC43产品经理Dr.Geraint Wilde评论道:“真的非常高兴能通过我们的BC43台式共聚焦显微镜可以将常规的高质量三维成像带入普通实验室。这个项目的启动是基于我们理解科学家都很繁忙,争分夺秒想尽可能快地收集到大量有意义的数据。如今科学家可以在同一工作台上制样并使用共聚焦技术,仅需短短几分钟就可以看到结果。我们的客户致力于在各个领域取得突破性进展,我们希望可以支持客户并且也相信BC43将会为客户的努力贡献价值。”来自阿尔加维大学的CBMR小组负责人Prof. Alvaro Tavares,在过去的12个月里他大量使用了BC43台式共聚焦显微镜。“这台共聚焦显微镜性能出色,成像质量卓而不凡。而且其结构紧凑,实验台即可放置,无需暗室。最主要是它操作太简单了,任何学生都可以在一个小时内使用这台共聚焦显微镜并产生高质量的结果。对于我这样的实验室的产出,它真的是一款理想的共聚焦显微镜。”
  • 如何选择一台适合自己的显微镜——总有一款ECHO显微镜适合你
    导读经过前面的几期学习,相信大家对显微镜的基础知识已经有了足够的了解,自信心提的满满的吆!接下来就可以根据实际需求来选择对应的显微镜了。让我们一起走进ECHO显微镜的世界,挑选一台属于你的显微镜吧。荧光电动显微镜—RevolveECHO显微镜颠覆了大家对显微镜的认知,是对传统显微镜设计的重新思考,是真正意义上的设计一体化和操控显示一体化,易学易用,使枯燥的实验变得简单有趣。高分辨率3D成像,获得最佳成像效果Revolve显微镜采用实时反卷积(DHR),增加宽场荧光显微镜图像锐度,抑制噪声减少模糊,提高荧光检测分辨率。自动Z轴配合实时反卷积(DHR)功能,在保持高分辨率的同时,对较厚样本进行全景深扫描合成,实现3D高分辨成像。正倒置一体,一机两用Revolve显微镜既可以正置观察,也可以倒置观察,在正置和倒置之间自由转换。使用户不再因为样品的不同而分别购置正置和倒置两类显微镜,一机实现切片、培养皿、培养瓶和多孔板等多种样本类型的观察需求。在降低设备成本的同时,也节约了空间。试问:我还需要纠结选择买正置还是倒置吗,当然是都要喽。智能化操作,高效便捷Revolve显微镜采用自动荧光的方式,可以快速捕捉荧光信号,避免荧光淬灭。自动双相机系统保证了明场和荧光条件下都可以获得最好的观察效果。智能化的软件使操作变得更加简单。明场显微镜—Rebel随着Revolve的问世,ECHO显微镜的设计理念深受用户的喜欢,但是对于没有荧光需求的用户,一款正倒置兼备的Rebel足矣。自动细胞计数软件,无需特殊耗材Rebel为满足更多的用户需求,特别开发了自动细胞计数软件。区别于市场上的细胞自动计数仪,Rebel兼具显微镜与计数功能于一身。不再需要特殊的观察耗材,可使用玻片、培养皿、培养瓶等耗材进行细胞自动计数。高效便捷的网络共享方式Rebel还具有非常高效便捷的网络共享方式,通过WIFI、Internet等多种通讯方式,可以实现实时实验教学、病例分享和多人会诊。全电动显微镜—Revolution针对更高级别用户需求,ECHO又推出了Revolve进阶版Revolution,正倒置一体化设计,带来更多应用场景;双相机系统保证了确保效果最优;实时反卷积功能配合高速Z-stacking功能,提高荧光检测的分辨率。独特的触屏控制XY自动载物台功能,便于观察样品的定位;对于大样品扫描成像,电动载物台和Hyperscan功能结合,使扫描速度提升了一倍。对于活细胞的观察,活细胞工作站和多功能智能化联动,保证了活细胞长时间的观察。最后,我们一起来看一下ECHO显微镜下的微观世界吧。看到这样一台成像质量好,操作简单,适用范围广的显微镜,有没有心动呀,想不想体验一下操作极简,体验极佳的显微镜呀,想不想让我们珍贵的实验样本也有一个如此美轮美奂的瞬间,那就赶紧联系我们,申请试用吧,三款产品,总有一个适合你的吆!
  • 扫描隧道显微镜助力“药物击靶”可视化:原来药物分子也会“玩乐高”
    p  8月5日,Science Advances期刊发表我国学者论文,其上登载了一张“药物击靶”显微镜照片。据论文通讯作者之一的中国医学科科学院基础医学研究所副研究员王晨轩介绍,这是科学家首次直观看到“药物击靶”的状态,可用于指导药物分子的设计。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 500px height: 489px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/a84d5415-9f82-46e6-9b7b-49dcd99b74d4.jpg" title="微信图片_20200813111429.png" alt="微信图片_20200813111429.png" width="500" height="489" border="0" vspace="0"//pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 600px height: 363px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/3faeb35b-438a-4004-a05c-ddb29962f12d.jpg" title="1b2fd81ff88d4487bc9adafb2c51ee14.jpg" alt="1b2fd81ff88d4487bc9adafb2c51ee14.jpg" width="600" height="363" border="0" vspace="0"//ppspan style="font-family: 楷体, 楷体_GB2312, SimKai "strong  照片显示:当药物分子(硫黄素T)要与生命体内的靶蛋白结合、起药效时,不是像人们想象的单个分子去结合蛋白,而是自动像“乐高积木”一样组装后,合力“击靶”,这种“机灵劲儿”与之前人们的想象完全不同。/strong/span/pp  本以为它只身赴命,没想到它两两成对、凑四成团、甚至6人成伍… … 这个新发现可能带来哪些颠覆性改变?据王晨轩介绍:“教科书中有一个经典的‘锁钥模型’,是说药物分子能够‘击靶’必须要和蛋白严丝合缝,像一把钥匙开一把锁,但现在的显微镜观测结果表明,药物分子用寡聚态的方式‘工作’,或许我们只需要半个钥匙就能开锁。”/pp  “药物设计是个‘配钥匙’的过程。人们已知一个疾病相关的蛋白质结构,想设计一种反向性的药物,需要有机化学家、计算机辅助药物设计的理论化学家等一起构筑一个和蛋白质活性中心匹配的足够大的钥匙才能工作。药物合成越长越难,每个基团像“粘胳膊”一样,到了产业化的时候对工艺的要求更是指数级的增加。如果药物其实只需要合成原来的很小一段,1/4或者是1/8,那么难度将大大降低。此发现可以简化药物合成路径。/pp  据悉,蛋白质的照片拍摄很困难,先是晶体衍射法,再是冷冻电镜的方法,但是至今仍不是所有的蛋白都能拍摄成功,原因是都必须要让蛋白排列成有序的阵列,才能满足成像要求。“这就好比,只有阅兵式上的解放军方阵才能成像,而后面的群众大联欢方阵是拍不上的。”王晨轩打了个特别形象地比方,因此要拍摄和药物分子结合的蛋白分子,就要用新的拍摄设备。/pp  扫描隧道显微镜勇最初是物理学家用来探测原子、亚原子的微观结构,具有超高的分辨能力。王晨轩说,把物理设备引进生物领域是上世纪90年代的事情,需要完成对设备的硬件、软件、算法的全新研制,中国团队在国际上是较早进入这一领域的。/pp style="text-align: center"img style="max-width: 100% max-height: 100% width: 300px height: 400px " src="https://img1.17img.cn/17img/images/202008/uepic/bdfe1e18-3132-4394-88b3-5eff33787fac.jpg" title="1597292515109044001.jpg" alt="1597292515109044001.jpg" width="300" height="400" border="0" vspace="0"//pp  由于它是通过量子力学中的隧穿效应,通过记录穿越样品的电子直接捕捉蛋白质和药物分子的“模样”,最开始的扫描隧道显微镜操作必须在真空中。中国科学家团队很早解决了常态下用扫描隧道显微镜观测的问题,在世界上首次使用了扫描隧道显微镜,实现了在大气室温下对化学分子的观察。/pp  为了拍摄首张“药物击靶”显微镜照,医科院基础所王晨轩、于兰兰、张文博,与国家纳米科学中心的王琛、杨延莲、方巧君团队等几代科研人打磨多年,不仅发明了蛋白质对基底的吸附技术、分子伴侣的固定技术、扫描探针的脉冲技术等一系列专利技术,还对整个“拍照”的流程进行优化和摸索。/pp  “整套(拍照)技术非常复杂,很难形成照搬流程,只能像是匠人之间的口口相传,需要知识、经验和揣摩,专业人员可能需要一年或者几年的训练时间跟着走下来,才能系统掌握。”王晨轩说。/p
  • 太原市中心医院148.30万元采购切片机,荧光显微镜,光源,液氮罐
    详细信息 太原市中心医院高质量发展全省免疫性皮肤病诊疗与预防管理中心建设项目荧光相差显微系统、快速组织脱水机等医疗设备公开招标采购的采购公告 山西省-太原市-小店区 状态:公告 更新时间: 2023-09-28 招标文件: 附件1 一、项目基本情况项目编号:1401992023AGK00985 项目名称:太原市中心医院高质量发展全省免疫性皮肤病诊疗与预防管理中心建设项目荧光相差显微系统、快速组织脱水机等医疗设备公开招标采购资金来源:财政资金预算金额:1,483,000元最高限价:1,483,000元采购需求:共一包,具体以第四部分采购需求为准。采购清单 序号 名称 数量 预算单价(元) 金额小计(元) 对应的中小企业划分标准所属行业 1 取材台 1台 80,000 80,000 工业 2 染色通风柜 1台 28,000 28,000 工业 3 标本柜 1台 25,000 25,000 工业 4 荧光相差显微系统 1台 500,000 500,000 工业 5 气相液氮罐 1套 250,000 250,000 工业 6 快速组织脱水机 1台 350,000 350,000 工业 7 石蜡切片机 1台 250,000 250,000 工业 总价(元) 1,483,000 产品描述 序号 名称 参数要求 1 取材台 1.1 支持取材工作站风量、风速、风压与实验室总通风系统(含排风及新风补充)风量、风速、风压的调节变化联锁互动。1.2材质及制造工艺:整体材质标准不低于SUS316L#不锈钢标准,台面及台顶厚度≥2mm的整张钢板一体成型,结构框架及柜体钢板厚度≥1.5mm。1.3结构设计:具有全不锈钢背板,及双侧面滑动式透明视窗,顶部双风幕系统,与背板下部侧吸风结合。1.4病理废气控制与排放方式: 背板下部后侧抽吸负压排气技术,通过背板内置空气导流装置将污染物吸入顶部排气管道,风量可调,能够排除组织异味及有毒有害气体,并可与实验室总排风系统互锁控制,实现三方多地操控管理(含远程操控设备废气排放方式)。1.5自动消毒功能:具备智能自动翻转紫外线消毒系统,工作时间自动翻转隐蔽,非工作时间自动切换翻转消毒。1.6辅助功能配置:配备≥三种台面冲洗装置;须配备骨组织粉碎装置;须配备标本图像采集系统专用通道、可调式万向成像光源、隐蔽式LED照明系统;中控台激光雕刻毫米级刻度尺、进口尼龙取材砧板,高度可调节;须配备双重用电安全防护装置。1.7内置骨组织粉碎装置,处理取材过程中废弃物。1.8取材工作站与通风防护系统主管道连接采用全不锈钢可伸缩管道,管道伸缩范围0mm-400mm,管道厚度≥1.0mm。1.9双人位操作。1.10腰部配备吸风系统,顶部配备出风系统。1.11照明装置,紫外线杀菌装置,组织观察射灯。1.12PP防腐风阀,耐强酸强碱,独立控制,互不影响,互不串风。1.13集成控制电路系统,在取材台下柜设置有电路控制箱。1.14标本取材板,方形铁木材质,底部安装不锈钢调节搁脚。1.15带负4℃-10℃恒冷系统。1.16数字式温度显示。1.17柜门采用铝合金或全钢门框和双层以上真空玻璃。1.18配置空气抽吸风机。1.19噪音≤50db。1.20标配:≥8道取材移液器、双屏显示器。 2 染色通风柜 1.1 通风柜采用全不锈钢材质。1.2 超强抽吸功能,排除组织异味及固定液挥发气体。1.3 设有日光照明和臭氧紫外线消毒双重功能,并独立控制。1.4其它要求可以根据需要定制。1.5尺寸范围:长1600mm -1800mm,宽750mm-800 mm,高2350 mm -2450 mm1.6 结构:顶部配备排风系统,下面配备操作台。 3 标本柜 1.1 标本柜采用全不锈钢材质。1.2 超强抽吸功能,排除组织异味及固定液挥发气体。1.3 设有日光照明和臭氧紫外线消毒双重功能,并独立控制。1.4其它要求可以根据需要定制。1.5尺寸范围:长1200mm -1500mm,宽750mm-800 mm,高1900 mm -2100 mm1.6 结构:顶部配备排风系统,双门对开结构。 4 荧光相差显微系统 ★提供所投产品的生产企业《医疗器械生产许可证》、《医疗器械注册证》1.1光学系统齐焦距离:必须为国际标准≤45mm。1.2 调焦:同轴粗微调模块化调焦管理装置,带聚焦粗调限位器,防止下滑,粗调旋钮扭矩可调,高灵敏微调旋钮最小调节精度≤1微米。可以设置调焦上下限。1.3 与显微镜同一品牌的明场照明装置:LED照明光源1.4 LED光源照明器强度=100W卤素灯的光强1.5 电动LIM系统切换物镜转盘1.6 配备中灰滤色片,无需工具即可更换滤色镜组,左右手都能控制的荧光照明光闸。1.7 配有白平衡的滤色片。1.7.1 载物台:右手低位置同轴驱动选钮的陶瓷覆盖层载物台,防尘,防玻片蜡污染,伸缩长度为≤15mm。1.7.2 观察镜筒。1.7.3 观察镜筒倾角为≥5°-35°可调,屈光度可调。1.7.4 必须为三目人机工程学镜筒,视场数26.5mm1.8 目镜1.8.1 瞳距:可调。1.8.2 10倍超宽视野目镜,视场数26mm;1.9 主机设备原厂物镜1.9.1 半复消色差物镜10×(NA≥0.30, WD≥10mmFN/FOV26.5)1.9.2 半复消色差物镜40×(NA≥ 0.75, WD≥0.71mmFN/FOV26.5)1.9.3 半复消色差物镜20×(NA≥0.5, WD≥2.1mmFN/FOV26.5)1.9.4 半复消色差 100XO(NA≥1.30FN/FOV26.5)1.10 物镜转换器:≥6孔位编码物镜转盘,模块化管理设计,带有光路稳定装置。1.11 聚光镜:万能非摆动式高分辨率多功能聚光镜:NA≥1.41.12 荧光系统:1.12.1 ≥三组荧光激发块1.12.2 荧光照明器:≥八孔编码荧光照明器1.12.3 荧光光源:≥100W光强的汞灯光源。1.13 高分辨率彩色制冷型显微专用数码相机1.13.1 芯片规格:≥1/1.2 英寸。1.13.2 最大图像分辨率:≥2000万,≥5760 X 3600(像素移动)1.13.3 感光灵敏度:(ISO 200 / 400 / 800 / 1600 / 3200 / 64001.13.4 像素混合:提供≥2×2像素混合1.13.5 图像速度:1≥920×1200 (1×1): 60 fps,1920×1080 (1×1): 60 fps 1.13.6 测光方式:全幅,30% ,1%,0.1%1.13.7 测光模式:手动,自动,超级荧光自动(SFL)1.13.8 曝光时间:39μsec~60sec1.13.9 制冷模式:Peltier制冷1.13.10 动态范围:12bit1.13.11 色彩模式:3CCD模式1.13.12 数据接口:PCI Express1.13.13 成像类型:具备明场和弱荧光高质量成像1.14 软件1.14.1 应用范围:用于多色荧光显微镜下FISH荧光的合成及分析,并且可以直接输出一体化的图文报告 1.14.2 具备荧光原位杂交功能,同一标本的多色荧光的叠加合成;具备荧光颜色根据各类染料的不同而进行选择及伪彩添加;1.14.3荧光图像处理:可以进行图像增强,对于目标荧光点进行增强,背景优化,杂质去除;可以进行单通道的荧光景深叠加,多通道的荧光合成;ROI区域图像选择处理及放大,自动信号识别计数;1.14.4在原始图上均可进行文字或符号注释,对分析图进行标准条带注释,且注释的文字符号颜色任意选择;1.14.5数据库固有的多应用数据管理,具备专家系统词库/模板,提供分级分类词库,包括所有常用探针种类等,并编辑对应的部位和内容的模板,避免重复录入。无需使用汉字输入方法,即可在专家系统的帮助下,迅速完成诊断报告。其中的专家词库和常用模板可以根据具体需要随时进行修改和补充;1.14.6病例统计功能:数据检索功能、统计、查询功能,可以根据已填的病人资料进行查询,也可以进行复合条件查询,同一条件内的分段查询,数据查询方式≥14种;如按年龄段进行查询统计,可按任意条件组合查询,自动分析客户需要范围内的数据,并打印统计结果;也可进行多病种查询统计,并可自定义。 5 气相液氮罐 1.1 兼容气相和液相两种储存方式。1.2 罐体总容量≥750升;冻存管存放支架平台下的液氮量≥80升。1.3 存储空间扇形排布,可容纳2ml冻存管≥35000支。1.4可锁定罐盖,并可记录追踪。1.6 温度均一性:真空隔热不锈钢罐体结构。1.7 样本存储温度≤-180℃。1.8 48小时内维持箱体内温度不高于-150℃。1.9 液氮静态消耗量≤8 L/天。1.10 温度监控系统,≥4个温度探头(底部,顶部,罐体3/4处和罐外热排位置),基于微处理器和铂金电阻温度探头(PT100)的监控系统可实时显示箱体内的高中低温度,精度为±1℃。可自行设置报警点,具有报警静音选项,可联网远程监控。1.11 辅助工作台。1.12 一体式折叠台阶。1.13 查找及取放样品的指示标。 1.14 内部旋转托盘备用开口。1.15 标配热气旁路,热气旁路可在液氮注入前,先排除管道中的室温氮气,确保只有深低温液氮注入罐中,避免了加液过程中液氮罐发生温度波动,同时也减少了额外的液氮消耗。1.16 液位监控系统实时显示液面高度,精度±1mm,测量误差为±8mm。1.17 手动+自动控制的液氮填充系统。自动填充系统由≥3个电磁阀控制,其中一个位于气液分离处,防止单电磁阀故障可能导致的液氮满溢和样品污染。1.18 一体化≥13英寸液晶触摸屏,可显示温度、液位高度及运行状态等参数。1.19 智能化管理系统,数据记录间隔时间可设定,本地存储量≥10万条,存储满后可自动覆盖。1.20 具有一键除雾功能。1.21 液氮补给罐有效容积≥240L。 6 快速组织脱水机 ★提供所投产品的生产企业《医疗器械生产许可证》、《医疗器械注册证》1.1 实现组织快速固定、脱水、透明、浸蜡。未固定新鲜小组织可直接上机,能处理全规格的各种组织。1.2 标本处理量:单缸可处理≥60个组织标本,双缸组织处理量≥120个组织标本。1.3≥12寸高清触摸液晶屏,系统设有专门的脂肪组织脱水程序,标本处理量记录、试剂使用量记录、石蜡的更换提醒都有智能设定。1.4 可定时开机融蜡,并在开始组织处理前对温度、压力、堵塞等进行自动检测,提醒换缸和完成脱水后会有呼吸灯带闪烁和轻音乐的提醒。1.5 样本处理工作方式为超声波和热效应,可以常压、负压、正压、正压/负压交替的方式进行脱水。1.6 一个试剂缸,可以实现三种试剂自动抽吸,试剂重复使用;一个蜡缸,可以自动抽吸实现三缸蜡的依次浸泡,储蜡缸可实现自动排蜡、换蜡功能。1.7 温度采用电脑程序实现精确加热控制,并自带降温系统。1.8 脱水盒、脱水篮框设计。 7 石蜡切片机 ★提供所投产品的生产企业《医疗器械生产许可证》、《医疗器械注册证》1.1切片厚度设定范围: 0.5μm-100μm。1.2修片设定范围: 1μm-600μm。1.3样本进样:以步进马达进样。1.4垂直距离: ≥70mm。1.5切片模式: ≥2种手动模式。1.6样本回缩: 5μm-100μm。1.7电动粗进: 300μm/s -900μm/s。1.8最大样本(长x高x宽): ≤ 50mm x 60mm x 40mm。1.9标本精确定位系统。 注:1.所有招标内容除特别标注为“进口产品”外,均采购国产产品,即非“通过中国海关报关验放进入中国境内且产自关境外的产品”,投标货物及服务各项技术标准应当符合国家强制性标准。2.招标内容标注为“进口产品”的,满足需求的国产产品和进口产品按照公平竞争原则实施采购。合同履行期限:签订合同之日起30日历天内完成。本项目不接受联合体投标。二、投标人资格要求:1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定:(1)具有独立承担民事责任的能力;(2)具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度;(3)具有履行合同所必需的设备和专业技术能力;(4)有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录;(5)参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录;(6)法律、行政法规规定的其他条件。2.落实政府采购政策需满足的资格要求:无3.本项目的特定资格要求:投标人投标时须提供投标人的《医疗器械经营许可证》或《第二类医疗器械经营备案凭证》。三、招标文件获取时间及方法 自公告发布之日起 5 个工作日,登录中国政府采购网山西分网(www.ccgp-shanxi.gov.cn),通过项目采购公告下方点击“潜在供应商”免费下载招标文件。四、提交投标文件截止时间、开标时间、地点和方式提交投标文件截止时间及开标时间:2023年10月23日09点30分(北京时间)方式:登录中国政府采购网山西分网上传投标文件。投标截止时间前未完成提交的,将拒收投标文件。开标时登录中国政府采购网山西分网在规定时间内解密电子投标文件,解密设备及网络环境由投标人自行准备。五、招标公告期限自本项目招标公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜1.投标人应于开标前在中国政府采购网山西分网(www.ccgp-shanxi.gov.cn)进行供应商注册。 联系电话:957632.投标人参与项目遇到系统操作问题,请及时联系客服电话。联系电话:95763 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系1.采购人信息名称: 太原市中心医院 地址: 山西省太原市小店区汾东大街256号 联系人: 张玉梅 联系电话: 13835116510 2.集中采购代理机构信息名称:太原市公共资源交易中心 地址:太原市万柏林区南屯路1号太原市为民服务中心四层 联系人:才贺涛 联系电话:0351-2377096 附件信息: 公开招标文件.doc413.6K × 扫码打开掌上仪信通App 查看联系方式 基本信息 关键内容:切片机,荧光显微镜,光源,液氮罐 开标时间:2023-10-23 09:30 预算金额:148.30万元 采购单位:太原市中心医院 采购联系人:点击查看 采购联系方式:点击查看 招标代理机构:太原市公共资源交易中心 代理联系人:点击查看 代理联系方式:点击查看 详细信息 太原市中心医院高质量发展全省免疫性皮肤病诊疗与预防管理中心建设项目荧光相差显微系统、快速组织脱水机等医疗设备公开招标采购的采购公告 山西省-太原市-小店区 状态:公告 更新时间: 2023-09-28 招标文件: 附件1 一、项目基本情况项目编号:1401992023AGK00985 项目名称:太原市中心医院高质量发展全省免疫性皮肤病诊疗与预防管理中心建设项目荧光相差显微系统、快速组织脱水机等医疗设备公开招标采购资金来源:财政资金预算金额:1,483,000元最高限价:1,483,000元采购需求:共一包,具体以第四部分采购需求为准。采购清单 序号 名称 数量 预算单价(元) 金额小计(元) 对应的中小企业划分标准所属行业 1 取材台 1台 80,000 80,000 工业 2 染色通风柜 1台 28,000 28,000 工业 3 标本柜 1台 25,000 25,000 工业 4 荧光相差显微系统 1台 500,000 500,000 工业 5 气相液氮罐 1套 250,000 250,000 工业 6 快速组织脱水机 1台 350,000 350,000 工业 7 石蜡切片机 1台 250,000 250,000 工业 总价(元) 1,483,000 产品描述 序号 名称 参数要求 1 取材台 1.1 支持取材工作站风量、风速、风压与实验室总通风系统(含排风及新风补充)风量、风速、风压的调节变化联锁互动。1.2材质及制造工艺:整体材质标准不低于SUS316L#不锈钢标准,台面及台顶厚度≥2mm的整张钢板一体成型,结构框架及柜体钢板厚度≥1.5mm。1.3结构设计:具有全不锈钢背板,及双侧面滑动式透明视窗,顶部双风幕系统,与背板下部侧吸风结合。1.4病理废气控制与排放方式: 背板下部后侧抽吸负压排气技术,通过背板内置空气导流装置将污染物吸入顶部排气管道,风量可调,能够排除组织异味及有毒有害气体,并可与实验室总排风系统互锁控制,实现三方多地操控管理(含远程操控设备废气排放方式)。1.5自动消毒功能:具备智能自动翻转紫外线消毒系统,工作时间自动翻转隐蔽,非工作时间自动切换翻转消毒。1.6辅助功能配置:配备≥三种台面冲洗装置;须配备骨组织粉碎装置;须配备标本图像采集系统专用通道、可调式万向成像光源、隐蔽式LED照明系统;中控台激光雕刻毫米级刻度尺、进口尼龙取材砧板,高度可调节;须配备双重用电安全防护装置。1.7内置骨组织粉碎装置,处理取材过程中废弃物。1.8取材工作站与通风防护系统主管道连接采用全不锈钢可伸缩管道,管道伸缩范围0mm-400mm,管道厚度≥1.0mm。1.9双人位操作。1.10腰部配备吸风系统,顶部配备出风系统。1.11照明装置,紫外线杀菌装置,组织观察射灯。1.12PP防腐风阀,耐强酸强碱,独立控制,互不影响,互不串风。1.13集成控制电路系统,在取材台下柜设置有电路控制箱。1.14标本取材板,方形铁木材质,底部安装不锈钢调节搁脚。1.15带负4℃-10℃恒冷系统。1.16数字式温度显示。1.17柜门采用铝合金或全钢门框和双层以上真空玻璃。1.18配置空气抽吸风机。1.19噪音≤50db。1.20标配:≥8道取材移液器、双屏显示器。 2 染色通风柜 1.1 通风柜采用全不锈钢材质。1.2 超强抽吸功能,排除组织异味及固定液挥发气体。1.3 设有日光照明和臭氧紫外线消毒双重功能,并独立控制。1.4其它要求可以根据需要定制。1.5尺寸范围:长1600mm -1800mm,宽750mm-800 mm,高2350 mm -2450 mm1.6 结构:顶部配备排风系统,下面配备操作台。 3 标本柜 1.1 标本柜采用全不锈钢材质。1.2 超强抽吸功能,排除组织异味及固定液挥发气体。1.3 设有日光照明和臭氧紫外线消毒双重功能,并独立控制。1.4其它要求可以根据需要定制。1.5尺寸范围:长1200mm -1500mm,宽750mm-800 mm,高1900 mm -2100 mm1.6 结构:顶部配备排风系统,双门对开结构。 4 荧光相差显微系统 ★提供所投产品的生产企业《医疗器械生产许可证》、《医疗器械注册证》1.1光学系统齐焦距离:必须为国际标准≤45mm。1.2 调焦:同轴粗微调模块化调焦管理装置,带聚焦粗调限位器,防止下滑,粗调旋钮扭矩可调,高灵敏微调旋钮最小调节精度≤1微米。可以设置调焦上下限。1.3 与显微镜同一品牌的明场照明装置:LED照明光源1.4 LED光源照明器强度=100W卤素灯的光强1.5 电动LIM系统切换物镜转盘1.6 配备中灰滤色片,无需工具即可更换滤色镜组,左右手都能控制的荧光照明光闸。1.7 配有白平衡的滤色片。1.7.1 载物台:右手低位置同轴驱动选钮的陶瓷覆盖层载物台,防尘,防玻片蜡污染,伸缩长度为≤15mm。1.7.2 观察镜筒。1.7.3 观察镜筒倾角为≥5°-35°可调,屈光度可调。1.7.4 必须为三目人机工程学镜筒,视场数26.5mm1.8 目镜1.8.1 瞳距:可调。1.8.2 10倍超宽视野目镜,视场数26mm;1.9 主机设备原厂物镜1.9.1 半复消色差物镜10×(NA≥0.30, WD≥10mmFN/FOV26.5)1.9.2 半复消色差物镜40×(NA≥ 0.75, WD≥0.71mmFN/FOV26.5)1.9.3 半复消色差物镜20×(NA≥0.5, WD≥2.1mmFN/FOV26.5)1.9.4 半复消色差 100XO(NA≥1.30FN/FOV26.5)1.10 物镜转换器:≥6孔位编码物镜转盘,模块化管理设计,带有光路稳定装置。1.11 聚光镜:万能非摆动式高分辨率多功能聚光镜:NA≥1.41.12 荧光系统:1.12.1 ≥三组荧光激发块1.12.2 荧光照明器:≥八孔编码荧光照明器1.12.3 荧光光源:≥100W光强的汞灯光源。1.13 高分辨率彩色制冷型显微专用数码相机1.13.1 芯片规格:≥1/1.2 英寸。1.13.2 最大图像分辨率:≥2000万,≥5760 X 3600(像素移动)1.13.3 感光灵敏度:(ISO 200 / 400 / 800 / 1600 / 3200 / 64001.13.4 像素混合:提供≥2×2像素混合1.13.5 图像速度:1≥920×1200 (1×1): 60 fps,1920×1080 (1×1): 60 fps 1.13.6 测光方式:全幅,30% ,1%,0.1%1.13.7 测光模式:手动,自动,超级荧光自动(SFL)1.13.8 曝光时间:39μsec~60sec1.13.9 制冷模式:Peltier制冷1.13.10 动态范围:12bit1.13.11 色彩模式:3CCD模式1.13.12 数据接口:PCI Express1.13.13 成像类型:具备明场和弱荧光高质量成像1.14 软件1.14.1 应用范围:用于多色荧光显微镜下FISH荧光的合成及分析,并且可以直接输出一体化的图文报告 1.14.2 具备荧光原位杂交功能,同一标本的多色荧光的叠加合成;具备荧光颜色根据各类染料的不同而进行选择及伪彩添加;1.14.3荧光图像处理:可以进行图像增强,对于目标荧光点进行增强,背景优化,杂质去除;可以进行单通道的荧光景深叠加,多通道的荧光合成;ROI区域图像选择处理及放大,自动信号识别计数;1.14.4在原始图上均可进行文字或符号注释,对分析图进行标准条带注释,且注释的文字符号颜色任意选择;1.14.5数据库固有的多应用数据管理,具备专家系统词库/模板,提供分级分类词库,包括所有常用探针种类等,并编辑对应的部位和内容的模板,避免重复录入。无需使用汉字输入方法,即可在专家系统的帮助下,迅速完成诊断报告。其中的专家词库和常用模板可以根据具体需要随时进行修改和补充;1.14.6病例统计功能:数据检索功能、统计、查询功能,可以根据已填的病人资料进行查询,也可以进行复合条件查询,同一条件内的分段查询,数据查询方式≥14种;如按年龄段进行查询统计,可按任意条件组合查询,自动分析客户需要范围内的数据,并打印统计结果;也可进行多病种查询统计,并可自定义。 5 气相液氮罐 1.1 兼容气相和液相两种储存方式。1.2 罐体总容量≥750升;冻存管存放支架平台下的液氮量≥80升。1.3 存储空间扇形排布,可容纳2ml冻存管≥35000支。1.4可锁定罐盖,并可记录追踪。1.6 温度均一性:真空隔热不锈钢罐体结构。1.7 样本存储温度≤-180℃。1.8 48小时内维持箱体内温度不高于-150℃。1.9 液氮静态消耗量≤8 L/天。1.10 温度监控系统,≥4个温度探头(底部,顶部,罐体3/4处和罐外热排位置),基于微处理器和铂金电阻温度探头(PT100)的监控系统可实时显示箱体内的高中低温度,精度为±1℃。可自行设置报警点,具有报警静音选项,可联网远程监控。1.11 辅助工作台。1.12 一体式折叠台阶。1.13 查找及取放样品的指示标。 1.14 内部旋转托盘备用开口。1.15 标配热气旁路,热气旁路可在液氮注入前,先排除管道中的室温氮气,确保只有深低温液氮注入罐中,避免了加液过程中液氮罐发生温度波动,同时也减少了额外的液氮消耗。1.16 液位监控系统实时显示液面高度,精度±1mm,测量误差为±8mm。1.17 手动+自动控制的液氮填充系统。自动填充系统由≥3个电磁阀控制,其中一个位于气液分离处,防止单电磁阀故障可能导致的液氮满溢和样品污染。1.18 一体化≥13英寸液晶触摸屏,可显示温度、液位高度及运行状态等参数。1.19 智能化管理系统,数据记录间隔时间可设定,本地存储量≥10万条,存储满后可自动覆盖。1.20 具有一键除雾功能。1.21 液氮补给罐有效容积≥240L。 6 快速组织脱水机 ★提供所投产品的生产企业《医疗器械生产许可证》、《医疗器械注册证》1.1 实现组织快速固定、脱水、透明、浸蜡。未固定新鲜小组织可直接上机,能处理全规格的各种组织。1.2 标本处理量:单缸可处理≥60个组织标本,双缸组织处理量≥120个组织标本。1.3≥12寸高清触摸液晶屏,系统设有专门的脂肪组织脱水程序,标本处理量记录、试剂使用量记录、石蜡的更换提醒都有智能设定。1.4 可定时开机融蜡,并在开始组织处理前对温度、压力、堵塞等进行自动检测,提醒换缸和完成脱水后会有呼吸灯带闪烁和轻音乐的提醒。1.5 样本处理工作方式为超声波和热效应,可以常压、负压、正压、正压/负压交替的方式进行脱水。1.6 一个试剂缸,可以实现三种试剂自动抽吸,试剂重复使用;一个蜡缸,可以自动抽吸实现三缸蜡的依次浸泡,储蜡缸可实现自动排蜡、换蜡功能。1.7 温度采用电脑程序实现精确加热控制,并自带降温系统。1.8 脱水盒、脱水篮框设计。 7 石蜡切片机 ★提供所投产品的生产企业《医疗器械生产许可证》、《医疗器械注册证》1.1切片厚度设定范围: 0.5μm-100μm。1.2修片设定范围: 1μm-600μm。1.3样本进样:以步进马达进样。1.4垂直距离: ≥70mm。1.5切片模式: ≥2种手动模式。1.6样本回缩: 5μm-100μm。1.7电动粗进: 300μm/s -900μm/s。1.8最大样本(长x高x宽): ≤ 50mm x 60mm x 40mm。1.9标本精确定位系统。 注:1.所有招标内容除特别标注为“进口产品”外,均采购国产产品,即非“通过中国海关报关验放进入中国境内且产自关境外的产品”,投标货物及服务各项技术标准应当符合国家强制性标准。2.招标内容标注为“进口产品”的,满足需求的国产产品和进口产品按照公平竞争原则实施采购。合同履行期限:签订合同之日起30日历天内完成。本项目不接受联合体投标。二、投标人资格要求:1.满足《中华人民共和国政府采购法》第二十二条规定:(1)具有独立承担民事责任的能力;(2)具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度;(3)具有履行合同所必需的设备和专业技术能力;(4)有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录;(5)参加政府采购活动前三年内,在经营活动中没有重大违法记录;(6)法律、行政法规规定的其他条件。2.落实政府采购政策需满足的资格要求:无3.本项目的特定资格要求:投标人投标时须提供投标人的《医疗器械经营许可证》或《第二类医疗器械经营备案凭证》。三、招标文件获取时间及方法 自公告发布之日起 5 个工作日,登录中国政府采购网山西分网(www.ccgp-shanxi.gov.cn),通过项目采购公告下方点击“潜在供应商”免费下载招标文件。四、提交投标文件截止时间、开标时间、地点和方式提交投标文件截止时间及开标时间:2023年10月23日09点30分(北京时间)方式:登录中国政府采购网山西分网上传投标文件。投标截止时间前未完成提交的,将拒收投标文件。开标时登录中国政府采购网山西分网在规定时间内解密电子投标文件,解密设备及网络环境由投标人自行准备。五、招标公告期限自本项目招标公告发布之日起5个工作日。六、其他补充事宜1.投标人应于开标前在中国政府采购网山西分网(www.ccgp-shanxi.gov.cn)进行供应商注册。 联系电话:957632.投标人参与项目遇到系统操作问题,请及时联系客服电话。联系电话:95763 七、对本次招标提出询问,请按以下方式联系1.采购人信息名称: 太原市中心医院 地址: 山西省太原市小店区汾东大街256号 联系人: 张玉梅 联系电话: 13835116510 2.集中采购代理机构信息名称:太原市公共资源交易中心 地址:太原市万柏林区南屯路1号太原市为民服务中心四层 联系人:才贺涛 联系电话:0351-2377096 附件信息: 公开招标文件.doc413.6K
  • nanoart——电子显微镜捕捉的美丽瞬间
    通过电子显微镜可观察肉眼看不到的纳米世界,现已广泛应用于医学、生物、材料开发等领域。我们身处在美丽的自然环境中,生活和谐美满,而只有电子显微镜才能呈现的微观世界,更是魅力四射。“nanoart”是通过电子显微镜真实展现金属、矿物、生物等的微观形态美,并利用计算机软件的伪彩技术制作出的“艺术”影集。以下,将为您展示由日本显微镜学会自1993年主办的“显微摄影大赛”优秀参赛和获奖作品。2018年度作品“海中盛开的仙人掌花”© 日立高新技术公司 应用开发部谷友树、宫木充史2018年(第74届)日本显微镜学会显微摄影大赛 参赛作品提取墨鱼身上的寄生虫-尼柏绦虫(Nybelinia)进行观察。突出头部的吻(固定器官)宛如海中盛开的仙人掌花一般。通过离子液体处理,无需破坏样品结构,即可成功观察图像。墨鱼也可能正在我们的餐桌上悄然“绽放”,大放异彩吧。拍摄条件样品:尼柏绦虫(Nybelinia)使用设备:扫描电子显微镜 SU3500信号:二次电子加速电压:1.5 kV放大倍率:270倍前处理:8% Ga固定、5% 离子液体2019年度作品“站起来的小怪兽!”© 日立高新技术公司 盐野正道、坂上万里2019年(第75届)日本显微镜学会显微摄影大赛 参赛作品看起来好像一件工艺品,但其实它是一种叫角星鼓藻的单细胞微藻。这种微藻具有突起,细胞中央区较细。角星鼓藻遍布于世界各地,十分普遍,但这种上下各有四处突起的却十分罕见。通过使用离子液体处理,无需对特征性突起进行变形,即可拍摄到图像。拍摄条件样品:单细胞藻类、角星鼓藻使用设备:扫描电子显微镜 SU3500加速电压:10.0 kV检测信号:二次电子观察倍率:2,500倍 2019年度作品“纳米晶体”© 名城大学 上山智© 日立高新技术公司 相泽由花、佐藤高广2019年(第75届)日本显微镜学会显微摄影大赛 参赛作品拍摄排列整齐的单晶GaN纳米线的局部,得到如图的几何图案。一模一样的六角锥GaN,远看就像小水晶(晶体)柱!拍摄条件样品:单晶GaN纳米线使用设备:FIB-SEM Triple Beam系统 NX2000加速电压:4.0 kV检测信号:二次电子观察倍率:300,000倍2019年度作品“找到小小的幸福!”© 出云市立盐冶小学校 椋千晶© 鸟取大学医学部 稻贺SUMIRE© 日立高新技术公司 市川薫、高木幸太2019年(第75届)日本显微镜学会显微摄影大赛 特别奖获奖作品哇~好多的四叶草!这个充满小确幸的世界,其实是小番茄花萼的表面。完全不用固定、金属喷镀等前处理,直接在低真空SEM(二次电子)中观察,可以惊喜的发现,就连虫子都会讨厌的"臭味根源"(腺毛),其形状是如此的漂亮!拍摄条件样品:新鲜的小番茄使用设备:台式显微镜 TM3030Plus加速电压:15kV检测信号:二次电子观察倍率:200倍*: 参赛人公司为拍摄作品时所在公司。*: 本作品为日本显微镜学会主办的“显微摄影大赛”的参赛作品。*: 未经同意严禁转载nanoart上刊登的图片和文章。*: “nanoart”是日立高新技术公司在日本的注册商标。公司介绍:日立科学仪器(北京)有限公司是世界500强日立集团旗下日立高新技术有限公司在北京设立的全资子公司。本公司秉承日立集团的使命、价值观和愿景,始终追寻“简化客户的高科技工艺”的企业理念,通过与客户的协同创新,积极为教育、科研、工业等领域的客户需求提供专业和优质的解决方案。 我们的主要产品包括:各类电子显微镜、原子力显微镜等表面科学仪器和前处理设备,以及各类色谱、光谱、电化学等分析仪器。为了更好地服务于中国广大的日立客户,公司目前在北京、上海、广州、西安、成都、武汉、沈阳等十几个主要城市设立有分公司、办事处或联络处等分支机构,直接为客户提供快速便捷的、专业优质的各类相关技术咨询、应用支持和售后技术服务,从而协助我们的客户实现其目标,共创美好未来。
  • 日光显微镜为何能独领风骚近百年
    在科学技术发展的历史上,出现过许多风靡一时、但如今只存在于博物馆的科学仪器,日光显微镜就是一例。现代显微镜大多使用人造光作光源,“日光”与“显微镜”的组合确实已经过时。但其实日光显微镜作为一种独特的光学仪器,其使用方式和实际效果远远超出现代人的想象——它从18世纪中期开始,独领风骚近百年,自有其独特之处。顾名思义,日光显微镜是以太阳光作为光源的显微镜,但它实际上可看作显微镜和投影仪的结合。日光显微镜有一块方形的木板 ,一边置反光镜,另一边固定一支镜筒,玻片安装在镜筒末端。日光显微镜必须在黑暗的房间里使用,操作者将它固定在窗户上,反光镜在室外,在室内调整反光镜的角度,阳光可反射进入镜筒,并通过镜筒内的聚光镜和凸透镜,将标本的图像放大,投射到墙上的屏幕供人观看。日光显微镜于18世纪40年代问世,发明者是德国的医生、解剖学家和物理学家约翰纳撒尼尔利伯库恩,除了研制日光显微镜,他最广为人知的工作还包括肠道研究——大肠黏膜中广泛分布的利氏肠腺窝(Crypts of lieberkuhn)就是以他的名字命名的。利伯库恩在1739年左右发明了日光显微镜,不过据说当时该装置还没有镜子,在它进入英国后,伦敦著名的光学仪器工匠约翰卡夫为它添加了镜子。倡导用显微镜开展科学研究的英国博物学家亨利贝克随后发表了关于日光显微镜使用的论文。日光显微镜开始在英国流行起来。亨利贝克明确指出“当使用这种显微镜时,房间必须尽可能黑暗,因为房间的黑暗和阳光的亮度决定了图像的清晰度和完美度”。可以说,借助自然的阳光和黑暗的房间,日光显微镜创造了一个场景,在此场景中,微观世界的物体从镜片之下被释放出来,它们的图像进入宏观世界——观众可以不直接通过显微镜,就能观看它们的样貌,欣赏它们的活动。1694年,荷兰数学和物理学教授尼古拉斯哈特索克发明了螺旋筒型显微镜,这种仪器便于携带到现场,易于使用,并且可以大规模生产。1702年,英国眼镜和仪器制造商詹姆斯威尔逊简化和推广了这种显微镜。大多数螺旋筒型显微镜由一个宽螺纹圆柱体组成,可以拧入或拧出镜筒,以便在固定于铜板之间的载玻片上聚焦。哈佛大学就收藏了一台用螺旋筒型显微镜改造的日光显微镜,其设计者爱德华布罗姆菲尔德是毕业于哈佛大学的一位发明家和艺术家。这台日光显微镜可能是美国殖民地时期制造的第一台显微镜,其制作拼接图纸现保存在哈佛医学院。日光显微镜及其技术在18世纪下半叶引起了特别关注,据印刷品描述和现存日光显微镜的数量可以推测其在当时非常流行。伦敦精密光学仪器制造商爱德华奈恩出售仪器所附的传单中有句话:“在所有类型的显微镜中,日光显微镜可以被认为是最有娱乐性的。”由此可窥见日光显微镜为何受欢迎。在18世纪一些自然哲学著作中,日光显微镜被认为是哲学仪器,与普通显微镜和望远镜处于同一类别。而到了19世纪,人们已经开始把日光显微镜当成玩具,专业的研究者甚至对日光显微镜持鄙视的态度,英国显微镜学家戈林曾这样评价日光显微镜:普通日光显微镜的图像可以被认为是一个单纯的影子,只适合于娱乐妇女和儿童……它最多只能给我们提供一个跳蚤的影子,或者一个像鹅或驴子一样大的虱子……无聊的庸人总是会对这种镜片感到满意,因为他们不知道显微镜除了能将物体的体积放大之外,还能做什么。在19世纪,光学仪器逐渐进入家庭生活和公共展览,成为非常受欢迎的一种娱乐仪器。伦敦的科学仪器制造商菲利普卡彭特1808年开始在伯明翰生产眼镜和显微镜,此后他积极投身万花筒和改良型幻影灯的研发和销售中,均取得了不俗的成绩,其研发的产品非常受消费大众的喜爱。1826年,卡彭特在伦敦威斯敏斯特摄政街24号开设了一家商店,策划了一个名为“微观世界”的展览,成为当地颇受欢迎的景点。这个展览最初就使用日光显微镜吸引顾客前来观看,观众们坐在提前准备的座位上,观看放大的图像。展览从早上11点持续到晚上8点,天黑后,卡彭特以燃烧可燃气体作为光源,后来在阴天时也如此操作,从而使图像更加明亮。可以说,在卡彭特这位19世纪的科学仪器制造商看来,科学和娱乐并没有明确的界限,他抓住了大众日益增长的娱乐需求,成功地将这种上个世纪中期的光学仪器转化成一种流行的新奇事物。如今我们去电影院看电影,其实也可以看作是这种科学+娱乐活动的延续。
  • 牛津仪器ANDOR发布台式共聚焦显微镜新品
    11月2日,牛津仪器官方公众号发布消息,ANDOR发布BC43台式共聚焦显微镜。产品介绍:BC43台式共聚焦显微镜,经济易用,小巧简约,能够帮助研究者轻松将3D图像纳入囊中同时节省时间和成本。自下而上的组件设计都恰到好处地平衡了高性能与易用性。通常来说,显微镜拍摄3D图像成本高昂,操作复杂,并且要求环境配备暗室。毋庸置疑,共聚焦技术唯有如此才能提供高质量的3D图像,尤其是厚样本和临床相关标本。ANDOR将用BC43台式共聚焦显微镜扭转这一局面,2D共聚焦图像以毫秒之速呈现,实时生成3D视图以供审视。紧凑的设计使其节时省地,轻轻松松即可置于普通实验室工作台之上。BC43台式共聚焦显微镜综合了从单细胞水平的亚细胞结构细节到稍大的模式生物与大型组织样本的多种成像体验,包括一些其他显微镜难以应付的厚样品。它同时适合研究新手和经验丰富的显微镜专家,简单到能让用户首次使用设备就在一小时内获得图像,也足够复杂到可以处理从活样品到固定样品等多样化成像需求。借此,越来越多的研究学者能够在日常工作流程中以超乎其他共聚焦多倍的速度获取精彩的图像。ANDOR的BC43产品经理Dr.Geraint Wilde评论道:“真的非常高兴能通过我们的BC43台式共聚焦显微镜可以将常规的高质量三维成像带入普通实验室。这个项目的启动是基于我们理解科学家都很繁忙,争分夺秒想尽可能快地收集到大量有意义的数据。如今科学家可以在同一工作台上制样并使用共聚焦技术,仅需短短几分钟就可以看到结果。我们的客户致力于在各个领域取得突破性进展,我们希望可以支持客户并且也相信BC43将会为客户的努力贡献价值。”来自阿尔加维大学的CBMR小组负责人Prof. Alvaro Tavares,在过去的12个月里他大量使用了BC43台式共聚焦显微镜。“这台共聚焦显微镜性能出色,成像质量卓而不凡。而且其结构紧凑,实验台即可放置,无需暗室。最主要是它操作太简单了,任何学生都可以在一个小时内使用这台共聚焦显微镜并产生高质量的结果。对于我这样的实验室的产出,它真的是一款理想的共聚焦显微镜。”ANDOR是一家市场领先的科学相机、显微镜系统和摄谱仪在开发和制造用于学术、工业和政府应用的高性能科学数码相机、显微镜系统和摄谱仪方面,安和或处于全球领先地位。2014年被牛津仪器以1.76亿英镑“无条件”收购。
  • 中科院研发太赫兹扫描隧道显微镜
    ▲图 | 太赫兹扫描隧道显微镜系统(来源:资料图)太赫兹,是介于远红外和微波之间的电磁波,具有光子能量低、穿透性好等特点,在高速无线通信、光谱学、无损伤成像检测和学科交叉等领域具备广泛应用前景,被誉为“改变未来世界的十大技术”之一。简单来看,太赫兹扫描隧道显微镜系统就是一个超快摄影机,只不过它要观察和拍摄的对象是分子和原子世界,并且拍摄的帧率在亚皮秒量级。对于非线性太赫兹科学来说,控制太赫兹脉冲的“载波包络相位”,即激光脉冲的载波与包络之间的关系至关重要,特别是用于超快太赫兹扫描隧道显微镜时。太赫兹载波包络相位移相器的设计和实现,在利用太赫兹脉冲控制分子定向、高次谐波生成、阈上电离、太赫兹波前整形等领域,均具备潜在应用价值。(来源:Advanced Optical Materials)1. 为调控太赫兹的载波包络相位提供新方案据介绍,王天武在中科院空天信息研究院(广州园区)-广东大湾区空天信息研究院担任主任和研究员等职务,研究方向为太赫兹技术。目前,其主要负责大湾区研究院的太赫兹科研队伍建设。该研究要解决的问题在于,常规探测手段只能得到静态的原子形貌图像,无法观察物质受到激发,例如经过激光辐照后的动态弛豫过程图像,即无法观察到激子的形成、俄歇复合、载流子谷间散射等过程,而这些机理的研究,对于凝聚态物理学包括产业化应用都非常重要。原因在于,这些动力学过程发生的时间尺度,往往都在皮秒量级,即万亿分之一秒的时间,任何普通调控手段均无法达到这一时间量级。利用飞秒脉冲激光技术,能显著提高扫描隧道显微镜(Scanning Tunneling Microscope,STM)这一扫描探针显微术工具的时间分辨率。但是,目前仍受到多种因素的限制,比如样品和针尖制备困难、针尖的电容耦合效应、脉冲光引起的热膨胀效应等。太赫兹的脉冲宽度位于亚皮秒尺度,其电场分量可被看作一个在很宽范围内、连续可调的交流电流源。因此,将太赫兹电场脉冲与 STM 结合,利用其瞬态电场,即可作用于扫描针尖和样品之间的空隙,从而产生隧穿电流进行扫描成像,能同时实现原子级空间分辨率和亚皮秒时间分辨率。如前所述,太赫兹扫描隧道显微镜系统好比一个超快摄影机。但是,太赫兹电场脉冲和 STM 的实际结合过程,却并非那么简单,中间要攻克诸多难题。其中一个最基础的重要难题,在于太赫兹源的相位调控技术。太赫兹扫描隧道显微镜系统是利用太赫兹激发针尖尖端和样品之间的空隙,来产生隧穿电流并进行采样。不同相位太赫兹源的电场方向不一样,这样一来所激发的隧穿电流的方向亦不相同。根据不同样品施加不同相位的太赫兹源,可以更好地匹配样品,进而发挥系统性能优势,借此得到高质量光谱。因此,通过简单高效的途径,就能控制太赫兹脉冲的载波包络相位,借此实现对于隧道结中近场太赫兹时间波形的主动控制,同时这也是发展超快原子级分辨技术的必备阶段。通常,超短脉冲的载波包络相位,必须通过反馈技术来稳定。除少数例子外,比如用双色场激光等离子体产生的太赫兹辐射源,大多数商业化设备产生的太赫兹脉冲的载波包络相位都是锁定的,例如人们常用的光整流技术生成的太赫兹脉冲。多个太赫兹偏振元件组成的复杂装置,可用于控制太赫兹脉冲的载波包络相位。然而,鉴于菲涅耳反射带来的损耗,致使其插入损耗很大,故无法被广泛应用。另外,在太赫兹波段,大部分天然材料的色散响应较弱、双折射系数较小,很难被设计成相应的载波包络相位控制器件,因此无法用于具有宽频率成分的太赫兹脉冲。与天然材料相比,超材料是一种由亚波长结构衍生而来的、具有特殊光学特性的人工材料,其对电磁波的色散响应和双折射系数,均可进行人为定制。虽然超材料技术发展迅猛。但是,由于近单周期太赫兹脉冲的宽带特性,利用超材料对太赫兹脉冲的载波包络相位进行控制,仍是一件难事。为解决这一难题,王天武用超材料制备出一款芯片——即柔性太赫兹载波包络移相器,专门用于控制太赫兹脉冲的载波包络相位。该芯片由不同结构的超材料阵列组成,可在亚波长厚度和不改变太赫兹电场极化的情况下,实现对太赫兹载波包络相位的消色差可控相移,其对太赫兹脉冲的载波包络相位的相移调制深度高达 2π。相比传统的太赫兹载波包络相位移相器,该移相器具有超薄、柔性、低插损、易于安装和操作等优点,有望成为太赫兹扫描隧道显微镜系统的核心部件。近日,相关论文以《基于超材料的柔性太赫兹载波环移相器》(Flexible THz Carrier-Envelope Phase Shifter Based on Metamaterials)为题发表在 Advanced Optical Materials 上,李彤和全保刚分别担任第一和第二作者,王天武和空天信息创新研究院方广有研究员担任共同通讯作者。▲图 | 相关论文(来源:Advanced Optical Materials)审稿人认为:“此研究非常有趣、简明扼要,研究团队完成了一套完备的工作体系。该芯片的设计和实现,为调控太赫兹的载波包络相位提供了新的解决方案。”2. 建立国际领先的太赫兹科学实验平台据介绍,王天武所在的研究院,围绕制约人类利用太赫兹频谱资源的主要科学问题和技术瓶颈,致力于形成一批引领国际的原创性理论方法和太赫兹核心器件技术,以建立国际领先的太赫兹科学实验平台。他说:“太赫兹扫描隧道显微镜是我们院的一大特色,该设备摒弃了此前施加电压的方式,以太赫兹为激发源,去激发探针尖端和样品之间的间隙,从而产生隧穿电流并进行成像。相关技术在国内属于首创,在国际上也处于领先水平。”在诸多要克服的困难中,太赫兹载波包络相位的调制便是其中之一。入射太赫兹的相位大小对激发的隧穿电流的幅值、相位等信息影响甚大,是提高设备时间和空间分辨率必须要解决的重要问题之一。由于设备腔体比较长,并且腔体内部为高真空环境,与外界空气是隔绝的。传统的太赫兹相位改变方式比较难以实现,因此需要研发新型的相位调制器件。而该课题立项的初衷,正是希望找到一种结构简单、但是对太赫兹载波包络相位调制效率高的方法和装置,以便更好地服务于太赫兹扫描隧道显微镜系统。在文献调研的初始阶段,该团队商定使用超材料来制作太赫兹相位调制器。具体来说,其利用特定的金属分裂环谐振器的几何相位、以及共振相位,来控制太赫兹脉冲的载波包络相位值。之所以选择金属分裂环谐振器作为基本相控单元,是因为在一定条件下,它对太赫兹具有宽谱响应。当任意方向的线偏振波与谐振器耦合时,入射电场分量可映射到平行于谐振器对称轴和垂直于谐振器对称轴,借此可以激发谐振器的对称本征模和反对称本征模。此时,通过改变金属分裂环谐振器的几何相位和共振相位,散射场的某一偏振分量的电场相位会相应延迟,大小可以轻松覆盖 0-2π。但是,由于存在电偶极子的双向辐射,导致金属分裂环谐振器存在明显的反射和偏振损耗。为此,课题组引入了一对正交的定向光栅,利用多光束干涉的方式解决了谐振器插入损耗大的问题。随之而来的另一难题是,由于正交光栅的存在,导致入射波和透射波之间的电场偏振始终是垂直的,在太赫兹扫描隧道显微镜系统的工作中,这是不被允许的。好在样品均是由互易材料制成的,于是这一问题很快迎刃而解。随后,该团队采用常规紫外光刻、电子束沉积以及聚酰亚胺薄膜上的剥离技术,制备出相关样品,并利用太赫兹时域光谱系统,对所制备的样品性能进行表征。当入射的太赫兹脉冲,依次被样品中不同的微结构阵列调制时,研究人员通过太赫兹时域光谱测量,清晰观察到了太赫兹脉冲的时间波形的变化,且与仿真结果十分吻合。此外,课题组还在广角入射和大样品形变时,验证了该样品的鲁棒性。总而言之,该成果为宽带太赫兹载波包络相位的控制,提供了一种新型解决方案,并在不改变太赫兹电场极化的情况下,利用“超材料”在亚波长厚度的尺度上,实现了针对宽带太赫兹载波包络相位的消色差可控相移。关于这一部分成果的相关论文,也已发表在《先进光学材料》期刊。(来源:Advanced Optical Materials)据介绍,此次芯片能把太赫兹的相位最高移动至 2π 大小,并且具有大的光入射角度和良好的柔韧性等优点,在太赫兹扫描隧道显微镜系统,以及其他相关领域有较高的应用价值。但是,该芯片目前仍存在一个缺点,即无法做到太赫兹载波包络相位的连续调制。这是由于,采用的金属分裂环谐振器是单次加工制成的,所能调制的几何相位和共振相位已经确定,无法再被人为改变。因此,使用过程中只能通过加工特定结构的芯片,来实现所需相位的调制。未来,该团队打算将当下比较热门的二维材料、相变材料、液晶材料等材料集成到芯片中,这些材料的优势在于光学性能可被人为改变。同时,其还将综合电、光、热等手段,实现金属分裂环谐振器几何和共振相位的主动控制,从而实现对太赫兹脉冲的连续载波包络相位调制。此外,课题组也会继续优化微加工工艺和原料制备流程,进一步提升芯片的综合性能指标,比如器件的低插入损耗、高工作带宽等,同时也将降低制造成本,以便后续的产业化推广。
  • 实验室技能小课堂--显微镜玻片的制作
    导读显微镜玻片做不好,哎呀,心痛!怎么办?实验技能小课堂开课了!!✨今天小编给大家总结了显微镜玻片的不同制作方法,希望能和大家一起渡过难关。 01涂片法 涂片材料有单细胞生物、小型藻类、血液、细菌培养液、动植物的疏松组织等。涂片时应注意:(1)载玻片要持平。(2)涂层须均匀且薄。(3)固定,可用化学固定剂或干燥法(细菌)固定。(4)染色,染色液要盖住全部涂面。(5)冲洗,用吸水纸吸干或烤干。(6)封片。 02压片法 将生物材料置于载玻片和盖片之间,施加一定压力,将组织细胞压散的一种制片方法,一般过程:(1)取材。(2)固定:取材后立即压片观察,可不作单独固定处理;取材后不立即视察,可将材料用固定液固定。(3)离析:对细胞团用水解分离液处理。(4)染色。(5)压片:将材料放在载玻片上,加一滴清水或染液,盖上盖玻片用拇指轻轻压片。(6)观察。 03切片法 观察机体各部的微细结构时常用,其中以石蜡切片最为常见。其制备程序大致如下:(1)取材与固定:取得新鲜材料后,切成适当的小块立即投入固定剂中进行固定。(2)脱水、透明与包埋:把固定好的材料的水分脱掉,经透明处理后,再浸入已融化的石蜡中进行浸透、包埋。(3)切片与染色:用切片机切成薄片,贴于载玻片上。脱蜡后进行染色。(4)封固:滴加中性树胶和盖片进行封固备用。
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