液相色谱耐纯水柱

可以完全走纯水的液相色谱柱有哪些呢？和一般的色谱柱有什么不同呢？

高效液相色谱的使用过程中，需要使用到大量的水，这次想和大家讨论一下水质（超纯水）对高效液相色谱的影响。厂家的观点：水对高效液相色谱的性能有促进作用：1.可以使基线低平，排除水质对高效液相色谱的影响；2.可以减少管路堵塞的几率等，延长高效液相色谱泵寿命；3.可以减少色谱柱被堵塞的机会，特别是 uPLC，使工作更高效、色谱耗材消耗更小等；4.其他作用。使用者的观点：有的使用者觉得用超纯水很好，可以提高性能等；有的使用者觉得一般纯水就可以了，比如娃哈哈、屈臣氏等使用效果也不错，用超纯水与不用超纯水的效果是一致的，而且使用超纯水要提高一些费用。您觉得高效夜校色谱的使用过程中，超纯水的使用有必要吗？

有人用纯水作液相色谱的流动相么?我用纯水能分离样品,其他的溶剂效果都不好.但大家都说用纯水对色谱柱不好.我该怎么调整流动相呢?

液相色谱流动相用水可以用注射用水代替超纯水吗？

有人用纯水作液相色谱的流动相么?我的样品用纯水才能很好的分离，专家都不提倡用纯水，我该怎么办？

钙型强酸性阳离子交换树脂为填充剂的色谱柱如何清洗和维护?液相色谱流动相是超纯水

用纯水短时间内冲洗[b][u]色谱柱[/u][/b]，通常不会对色谱柱造成较大的损伤，但如果长时间用水冲洗色谱柱则可能引起固定相流失和相塌陷现象，所以若非必要请尽量避免用纯水冲洗色谱柱，建议在水中加入一定量的甲醇或乙腈进行冲洗，通常水的含量90%不会对色谱柱造成任何影响。原因[u][b]分析[/b][/u]：首先，由于目前所用的色谱柱大多以硅胶为基质，硅胶的溶解特点是在纯水中的溶解度比在含有一定浓度有机溶剂的流动相中要大得多，所以长时间的用纯水冲洗会导致固定相的流失，引起柱效下降。 其次，对于常规的 C18 柱而言，由于C18 长链与水是不互溶的，C18 长链之间的相互作用力大于C18 与水分子的作用力，长时间的用水冲洗，使得C18 长链之间相互靠近，水流的冲刷，导致相互联结的C18 长链倒伏在硅胶基质的表面，对疏水性物质的保留能力下降，即相塌陷。针对用纯水冲洗容易出现相塌陷的现象，有些厂家推出了纯水柱，这种纯水柱可以用纯水作流动相而不会产生相塌陷，这对只溶于纯水的样品的分析提供了一个很好的选择。 第三，如使用过含缓冲盐的流动相的色谱柱，用纯水冲洗，并一定能将缓冲盐完全洗去。因为，由于缓冲盐难溶于有机溶剂，C18 反相柱中用的填料是在硅胶表面上接上许许多多的C18 长链，相当于一个疏水的有机相，而硅胶基体被有机物质包裹着，所以用纯缓冲盐水溶液做流动相时也许缓冲盐不容易到达硅胶基质，不至损害基体。但所用的流动相通常会含一部分有机溶剂，而且这些有机溶剂与C18长链是互溶的，因此有机溶剂的加入增强了流动相渗入硅胶基质的能力，能使部分缓冲盐达到硅胶基质。同样的道理，用纯水冲洗只能洗掉表面的缓冲盐，而渗入深处的缓冲盐则仍然残留在那里。所以最好在水中加入部分有机溶剂进行冲洗，一般的C18 柱通常用含水20％～90％都可以，含水的比例要视分析时使用的流动相来定，原则上，用于冲洗的流动相中水的比例应该等于或高于（缓冲盐用后清洗的情况，推荐使用“等于”）分析时所用流动相中水的比例。

液相色谱是不是配溶剂需要纯水，那用来配置溶液的的瓶子用之前需要用纯水冲洗吗？还是直接用自来水冲洗就可以了

液相色谱用水，想买millipore的超纯水仪制备超纯水，不知选其哪种型号比较好？谢谢！

色谱最重要的分离，高效液相色谱最重要的是液相色谱柱，能耐高压，分离度好，效率高，效果好。液相色谱的发展离不开液相色谱柱的发展，液相色谱柱是液相色谱发展的关键。

[color=#444444]安捷伦1200高效液相色谱仪，超纯水0.8mL/min脱气时柱压达到了8bar，请问是什么原因，甲醇脱气时正常没这么高[/color]

[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相色谱[/color][/url]用水必须尽可能纯净新鲜，特别是梯度洗脱时。水中最常见的污染来自于微生物的污染。水相的滤吸头如果没有注意及时更换或者清洗，那么这种高比表面的多孔部件将成为微生物繁殖的温床，即使换上新鲜的水相，也会因为其繁殖而产生各种代谢的有机物，当这些物质进入色谱体系就可能成为鬼峰。在各种微生物中，最主要的是革兰氏阴性菌，它们可以在纯水中生存和繁殖，当水中存在如磷酸盐或者乙酸盐时生命活动更加旺盛。在20-35℃时，它们可以迅速繁殖，只需几天就可以在HPLC中检测到它们的存在，而且有研究表明即使pH到9都无法抑制它们的繁殖。建议在水相中至少添加15%的甲醇来抑菌，也有建议至少添加5%的乙腈来达到类似的效果。另外，水相的溶剂瓶也应该经常用有机溶剂清洗并充分干燥，而不是只是简单用水清洗后接着用。除此之外，有些仪器上配置的泵头密封垫清洗装置（seal-wash）中的清洗液如果没有考虑到抑菌操作（如经常更换或者加入有机相）也会引入微生物污染。另外还有一个需要特别注意的事项，那就是千万不要使用洗瓶来补充用于HPLC流动相的水，因为来自洗瓶中的水不仅含有从洗瓶塑料中溶解出来的有机物（如塑化剂），而且往往含有不少的微生物及其代谢物！

我现在需要一套样品/溶剂处理装置和一套纯水装置，是配液相色谱用的，有没有国产的，价位低一点。知道相关信息请推荐一下。谢谢！！！

在总申报～～～ 上面说报全点。。。 按相关规范二级实验室标准配齐设备，又加了液相色谱仪和超纯水机，各位老师用的都是什么型号的机器？？？ 有好用的机器推荐一下 谢谢

液相色谱柱能耐多高温？高温对色谱柱有什么影响？

[font=宋体][font=Calibri]1.[/font][font=宋体]色谱柱的流向不能改变色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这个流入段就是先污染端。这样就为我们日后维护或再生色谱柱做了准备，而我们需要遵循这个规定应该在色谱柱开始做样后。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]2.[/font][font=宋体]色谱柱的说明书定要看清楚色谱柱内保存着什么溶剂定要看清楚，因此色谱柱的说明书定要看清楚，当然也包括说明书上建议的维护保养规定，对我们有用。对于反相柱来说，溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因为正相柱除了可以适用正相系统，也可以适用反相系统，因此定要看清楚，对于你的方法来说是否需要置换色谱柱内保存溶剂。一般色谱柱不能反冲，只有色谱柱使用说明书上标明该柱可反冲才可以反冲除去留在柱头上的杂质。否则，反冲色谱柱的影响是迅降柱效。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]3.[/font][font=宋体]色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理，例如[/font][font=Calibri]ODS[/font][font=宋体]柱宜用甲醇冲洗至基线平衡；当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗；含卤族 元素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触；装在液相色谱仪上的色谱柱如不经常使用，应每隔[/font][font=Calibri]4-5[/font][font=宋体]天开机冲洗[/font][font=Calibri]15[/font][font=宋体]分钟。使用强溶剂冲洗色谱柱对内填料的害是大的，尤是纯水，除的色谱柱是耐水的。冲洗色谱柱好的方法是用流动相比例的水系和有机系来冲洗。如果你认为流动相比例无法把色谱柱冲洗干净或者此比例中有机系占有比例过大，你可以使用内含[/font][font=Calibri]10%[/font][font=宋体]左右的纯水来冲洗。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]4.[/font][font=宋体]保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可以直接使用理论上液相色谱不同于气相色谱柱需要活化，但是由于液相色谱柱内保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内相同的溶剂冲洗一些时间。可以是[/font][font=Calibri]0.5ml/min[/font][font=宋体]，[/font][font=Calibri]120min[/font][font=宋体]，但建议咨询厂家，根据色谱柱参数设定。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]5.[/font][font=宋体]色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或长时间。[/font][/font]

1.液相色谱柱的使用说明：(1)液相色谱柱色谱柱使用前注意事项：液相色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意液相色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。(2)流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm 的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。以常规硅胶为基质的键合相填料通常的pH值适用范围是2.0-8.0。当必须要在pH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。(3)样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（spe）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。2.色谱柱的保存(1)反相液相色谱柱色谱柱每天实验后的保养：使用缓冲液或含盐的流动相，实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟，洗掉色谱柱中的盐，再用甲醇冲洗30分钟。注意：不能用纯水冲洗柱子，应该在水中加入10%的甲醇，防止将填料冲塌陷。(2)长期保存色谱柱：如色谱柱要长时间保存，必须存于合适的溶剂下。对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中，正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中，离子交换柱可以储存于水（含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞）中，并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上。储存的温度最好是室温。3.色谱柱在使用过程中易出现的问题和解决办法色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高，如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加，属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高（系统管路堵塞及压力传感器故障除外），可能的原因有如下几点：(1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染；(2)色谱柱头的填料被样品污染；(3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到高浓度的甲醇或其他有机溶剂，形成结晶析出；(4)流动相pH值过大或过小使固定相结构破坏或溶解。解决办法如下：(1)如确定是色谱柱头的过滤筛板被污染，可以将色谱柱反方向用甲醇冲洗至正常压力，或者卸下色谱柱头，将其放在10%的稀硝酸内超声清洗10分钟，后再用纯水超声10分钟，重新装入色谱柱。(2)如确定色谱柱头的填料被污染，将柱头螺丝卸下，挖出柱内前段被污染的填料，用相同的柱填料重新填入，仔细修复后，重新安装上柱头螺丝。(3)如确定定是盐结晶，用10%的甲醇/水冲洗色谱柱使柱内盐全部溶解，再换高浓度甲醇。(4)如果因pH值使用不当，很难恢复。【来源：实验与分析】

关于标示：1.色谱柱的流向不能改变在我们常规思维中，色谱柱上标示的流向是不可改变的，每次使用都要遵循。可是，大家有没有想过这个方向的作用是什么呢？为什么要标示一个使用方向呢？其实色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这个流入段就是最先污染端。这样就为我们日后维护或再生色谱柱做了准备，而我们需要遵循这个规定应该在色谱柱开始做样后。我曾将已经污染过的色谱柱反方向来使用，如果保留时间不是很长，而色谱柱足够长，还是能使用一段时间的。2.不去看说明书，直接就上机使用色谱柱内部保存着什么溶剂一定要看清楚，因此色谱柱的说明书一定要看清楚，当然也包括说明书上建议的维护保养规定，对我们都非常的有用。对于反相柱来说，溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因为正相柱除了可以适用正相系统，也可以适用反相系统，因此一定要看清楚，对于你的方法来说是否需要置换色谱柱内部保存溶剂。关于冲洗：3.用纯水冲洗色谱柱才能把缓冲液冲洗干净使用强溶剂冲洗色谱柱对内部填料的损伤是最大的，尤其是纯水，除非你的色谱柱是耐水的。冲洗色谱柱最好的方法是用流动相比例的水系和有机系来冲洗。如果你认为流动相比例无法把色谱柱冲洗干净或者此比例中有机系占有比例过大，你可以使用内含10%左右的纯水来冲洗。关于保存：4.保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可直接使用理论上液相色谱柱不同于气相色谱柱需要活化，但是由于液相色谱柱内部保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内部相同的溶剂冲洗一定的时间。可以是0.5ml/min，120min，但最好咨询厂家，根据色谱柱参数设定。5.色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中根据第4条，色谱柱内部保存液具有挥发性，因此为了减少其挥发速度，可以添加5%-10%的水，这样的话可以在一定程度上减少一些有机系的挥发。如果再增加一个保险，我们可以在堵紧堵头后，再用封口膜封起来。同样道理，色谱柱一段时间不用后，也应该按照第4条，进行小流速的冲洗色谱柱。关于再生：6.色谱柱污染后把筛板卸下来超声清洗对于色谱柱的污染，首当其冲的就是筛板，因此我们最常用的做法就是把柱头卸下来，把筛板拿去超声清洗。但是我们在拆卸过程中对色谱柱前端填料的损害远远大于污染照成的伤害，因为我们不是专业的。因此建议这一步能不做就不做。7.自己填装色谱柱和第6条相同，这一步做法几乎可以把此色谱柱判死刑了，我们的填装工具有什么呢？就是手工的，其填装压力远远小于工厂内原始的填装压力。那么我们填装的结果会是个什么样也就很明显了。在我看来，自己填装也就是练练手，熟悉一下这个过程，要把色谱柱维修好的可能性几乎为零。8.用异丙醇冲洗再生后，柱子效果更差了这种情况我自己就遇到过，还好那根柱子本来就打算报废了，因此也没有照成多少损失。但是这是什么原因呢？其实很简单，就是在我反向冲洗前没有把管路中的污染物冲洗干净就直接接了柱子。所以说，方法是没有错的，色谱柱受污染时，我们应该先想到仪器也污染了！

[font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]1.色谱柱的流向不能改变[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]色谱柱前后端的填料及填装工艺都是一样的，标示方向的目的就是让我们在使用中记住流动相从哪个方向流入色谱柱，那么这个流入段就是先污染端。这样就为我们日后维护或再生色谱柱做了准备，而我们需要遵循这个规定应该在色谱柱开始做样后。[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]2.色谱柱的说明书定要看清楚[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]色谱柱内保存着什么溶剂定要看清楚，因此色谱柱的说明书定要看清楚，当然也包括说明书上建议的维护保养规定，对我们有用。对于反相柱来说，溶剂基本就是乙腈或甲醇。但正相柱就不同了，因为正相柱除了可以适用正相系统，也可以适用反相系统，因此定要看清楚，对于你的方法来说是否需要置换色谱柱内保存溶剂。一般色谱柱不能反冲，只有色谱柱使用说明书上标明该柱可反冲才可以反冲除去留在柱头上的杂质。否则，反冲色谱柱的影响是迅降柱效。[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]3.色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡；当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗；含卤族 元素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触；装在液相色谱仪上的色谱柱如不经常使用，应每隔4-5天开机冲洗15分钟。使用强溶剂冲洗色谱柱对内填料的害是大的，尤是纯水，除的色谱柱是耐水的。冲洗色谱柱好的方法是用流动相比例的水系和有机系来冲洗。如果你认为流动相比例无法把色谱柱冲洗干净或者此比例中有机系占有比例过大，你可以使用内含10%左右的纯水来冲洗。[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]4.保存在乙腈或甲醇中的新色谱柱可以直接使用[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]理论上液相色谱柱不同于[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱需要活化，但是由于液相色谱柱内保存的有机系具有挥发性，因此在使用前还是应该用小流速的和色谱柱内相同的溶剂冲洗一些时间。可以是0.5ml/min，120min，但建议咨询厂家，根据色谱柱参数设定。[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]5.色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中[/color][/size][/font][font=微软雅黑][size=10.5pt][color=#333333]保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇，柱接头要拧紧，防溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或长时间。[/color][/size][/font]

液相色谱柱决定最终分离效果，所以在选择色谱柱时候有必要考虑清楚自己的需求。 首先液相色谱柱目前来说分为正反相色谱柱，正相有SI等，反相有C18等。正相主要分离极性物质，反相主要分离非极性物质，氨基柱等主要分离二者之间的。 明确了色谱柱大概功能之后，确认下自己样品信息，基本就有点眉目了，方向对了，剩下的事情就是细节了如：键合相、粒径、孔径、碳载量等 键合相：确定了正反相后基本就简单了，正相很简单，我们重点讨论下反相，C18主要分离非极性和弱极性物质，因为是键合硅胶，所以C18也分好几种有常规的如C18-A，耐纯水的OL Apple C18-AQ、耐酸碱的OL Apple C18-EX等，如果发现C18保留很弱，调整流动相也不行，这个时候可以考虑C8甚至C4等。 粒径：色谱法追求的是高效、高分辨、高速等。目前来说亚2um填料或者2UM核壳填料是很理想的模型，基本具备“三高”特征尤其是高速，线速度不在影响分离度，不过附带的缺点就是高压，要升级相应的硬件，成本高昂，需要谨慎考虑。 5um填料最普遍，目前来说完全可以胜任各种日常检测，即使有特殊要求，3um色谱填料基本上也能全覆盖，不过该模型下线速度和分离度是成反比的。 孔径：目前很多60~300A都有，甚至更高或者更低的。开孔的填料多了个类似分子筛功能，所以选择孔径一定要关注分子量，蛋白（分子量5000以上）一般都需要在160A以上，多肽（分子量上限在3000左右）在120A左右，一般快速柱孔径都很小，可以缩短样品路径。所以国际上还有无孔硅胶柱子，也很适合蛋白分离，彻底解决蛋白分子量大和太粘稠堵住孔径问题。 碳载量：快速柱碳载量很低，如A家等，省时间，省溶剂，但分析部分复杂样品如中药等有点力不从心，这个时候可以考虑英国OL Apple色谱柱，碳载量15~23%，碳载量数值就像河床的水草，越高代表越密集，保留样品能力越强，越有可能分离开难分离物质。 以上信息仅供参考，个人能力有限，欢迎大伙补充！

(1)液相色谱柱色谱柱使用前注意事项：液相色谱柱的储存液无特殊说明，均为评价报告所示的流动相。在使用前，一定要注意液相色谱柱的储存液与要分析样品的流动相是否互溶。在反相色谱中，如用高浓度的盐或缓冲液作洗脱剂，应先用10%左右的低浓度的有机相洗脱剂过渡一下，否则缓冲液中的盐在高浓度的有机相中很容易析出，堵塞色谱柱。(2)流动相：流动相中所使用的各种有机溶剂要尽可能使用色谱纯，配流动相的水最好是超纯水或全玻璃器皿的双蒸水。如果将所配得流动相再经过0.45μm 的滤膜过滤一次则更好，尤其是含盐的流动相。另外，装流动相的容器和色谱系统中的在线过滤器等装置应该定期清洗或更换。以常规硅胶为基质的键合相填料通常的pH值适用范围是2.0-8.0。当必须要在pH值适用范围的边界条件下使用色谱柱时，每次使用结束后立即用适合于色谱柱储存并与所使用的流动相互溶的溶剂清洗，并完全置换掉原来所使用的流动相。(3)样品：样品也要尽可能清洁，可选用样品过滤器或样品预处理柱（spe）对样品进行预处理；若样品不便处理，要使用保护柱。在用正相色谱法分析样品时，所有的溶剂和样品应严格脱水。

欲购买液相色谱柱，水相柱，能支持纯水相。主要用来做有机酸，维生素，氨基酸，但是不知道用哪个牌子的，阿波罗的怎么样？各位能否推荐个性价比高点的？本人前几天买过，但是柱子里居然有很多气泡，并且一走梯度基线就陡的一塌糊涂（里面还是有气泡），很郁闷。另外还想请教下，水相柱与普通的C18柱在使用上有什么区别吗？

液相色谱柱的保存1.反相色谱柱每天实验后的保养使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用10%的甲醇/水冲洗30分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗30分钟.注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入10%的甲醇,防止将填料冲塌陷.2.长期保存色谱柱:如色谱柱要长时间保存,必须存于合适的溶剂下.对于反相柱可以储存于纯甲醇或乙腈中,正相柱可以储存于严格脱水后的纯正己烷中,离子交换柱可以储存于水(含防腐剂叠氮化钠或柳硫汞)中,并将购买新色谱柱时附送的堵头堵上,储存的温度最好是室温.

色谱纯水对分析结果的影响大家都知道，再这讨论一下大家都使用的哪家的纯水机，目前主流可能是默克密理博 赛多利斯 颇尔的大家来谈谈这些产品的性能怎么样。对我们液相使用的利弊

液相色谱柱使用及保养 (转贴) 液相色谱仪由高压液体泵、检测器及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键；也是液相色谱工作者获得正确可靠的实验数据的必经之路。一、液相色谱柱的安装： 1、液相色谱柱的结构： a、空柱由柱接头、柱管及滤片组装而成。 柱接头采用低死体积结构，柱接头是两端螺纹组件，一端是为7/16英寸外螺纹，另一端是3／16英寸的内螺纹(国内外已规范化)。7／16英寸外螺纹与1／4英寸柱管(Φ6.35mm)连接，中间放置压坏用于密封。3／16英寸的内螺纹与1／16英寸(Φ1.57mm)的连接管连接，中间也放置压环用于柱接头的密封。为了尽量减少柱外死体积，在安装色谱柱时，用Φ1.57mm连接管通过空心螺钉压环后要尽量插到底，然后再拧紧空心螺钉。压环被空心螺钉挤压变形后紧箍在连接管上(连接管通过压环后露出的管长度应严格控制在2．5mm长或其他固定尺寸)。 在两端柱接头内，柱管两端各放置一片不锈钢滤片(或滤网)，用于封堵柱填料不被流动相冲出柱外而流失。空柱各组件均为316#不锈钢材质，能耐受一般的溶剂作用。但由于含氯化物的溶剂对其有一定的腐蚀性，故使用时要注意，柱及连接管内不能长时间存留此类溶剂，以避免腐蚀。 b、柱填料： 液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的，柱子的分类是依据填料类型而定。 正相柱：多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种，其颗粒直径在3—10 μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。 反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。 常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10 μm之间。 2，色谱柱的安装： a、拆开柱包装盒，确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。 b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。 c、 按柱管上标示的流动相流向，将色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许，建议在柱前使用保护柱)；柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。连接管的两端均有空心螺钉及密封用压环。在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底，然后顺时针拧紧空心螺钉，直到拧不动为止，再用扳手继续顺时针拧1／4-1／2圈，切记不要用力过大。如色谱柱通过流动相加压后有漏液现象，请用扳手继续顺时针拧1／4圈，直至不漏液为止。二、液相色谱柱的使用： 色谱柱在使用前，最好进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同；另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是最佳条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。 1、样品的前处理： a、最好使用流动相溶解样品。 b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。 c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。 2、流动相的配制： 液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点： a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。 b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。 c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果；同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。 d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。 e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。 f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。 3、流动相流速的选择： 因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求最佳柱效，最好使用最佳流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml／min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml／min为佳。 当选用最佳流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量)。 注意： a．由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。 b．对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相，没有提纯的己烷不得使用。用水最好使用超纯水(电阻率大于18兆欧)，去离子水及双蒸水中含有酚类杂质，有可能影响分析结果。 c．含水流动相最奸在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最好加入叠氮化钠，防止细菌生长。 d．流动相要求使用0.45 μm滤膜过滤，除去微粒杂质。 e．使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。 4、柱性能测试： 启动液相色谱仪：a、流动相流速设定为1ml／min。 b、UV检测器波长设定为254nm。 使用出厂测试时使用的流动相组成及测试样品。 记录并计算测试结果。*参考(标准JB5226-91)液相色谱仪测试用标准色谱柱

刚不小心让色谱柱进了1.7分钟的纯水，现在感觉柱压和柱效有所变化，怎么恢复？

[color=#444444]我最近用液相色谱测1，6-萘二磺酸钠的纯度，一直没有找到特别合适的流动相，目前用的是甲醇：水：四丁基溴化胺=450:550（ml）：1.6g的流动相，有一个类似于直角三角形的宽峰，该怎么找一个合适的流动相让峰型正常一点呢 [/color]

由于周末安捷伦公司不上班，周五问的问题他也没来得及解决完就下班了，所以来问下有没有大神指导，此纯水柱子用完如何清洗呢？跟普通的C18的柱子清洗方法是一样的吗？

请问液相色谱的柱子用纯甲醇清洗，可以吗？