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液相色谱甲苯检测

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液相色谱甲苯检测相关的论坛

  • 邻甲苯胺及其异构体的气质及液相色谱分离

    邻甲苯胺及其异构体的气质及液相色谱分离

    看见同行(看着这话题,绝对是同行,多交流)发着文章http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101012/2857370/,我这把手上的东西整整,算是补充吧。大家多多提意见吧!摘要 针对纺织品偶氮染料检验中常检出的禁用邻甲苯胺及其异构体,结合气相色谱-质谱和高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC/DAD),摸索了以气相色谱-质谱进行初期定性筛选、以高效液相色谱进行确证和定量的芳香胺异构体检测方法,避免了检验中其异构体造成的假阳性检出。本方法在2 μg/mL~100 μg/mL浓度范围内线性关系良好,线性相关系数可达到0.9999;回收率为51%~62%。关键词 纺织品;检测;禁用邻甲苯胺;异构体1 前言采用气相色谱-质谱联用方法检测染料产品中24种有害芳香胺含量,按照现行国家标准中提供的气相色谱条件,会有多种异构体保留时间相同或非常接近,而且这些异构体的质谱图又非常相似,从而造成无法使用特征离子对其进行定性和定量,往往会形成假阳性结果的产生。当前针对有害芳香胺的气相色谱/质谱检测方法,大都采用非极性或极性较弱的色谱柱,如HP-5MS、DB-5MS、DB-35MS,这些色谱柱普遍存在的缺点是对常见的异构体不能很好的分离。有文献报道采用中等极性色谱柱DB - 17MS(固定相等同于50%苯甲基聚硅氧烷),对芳香胺异构体有一定的分离能力,但没能实现禁用芳香胺的基线分离,造成定量上的偏差。高效液相色谱法(HPLC)可同时测定多种芳香胺,在分离异构体上是强有力的确证方法,准确定性和定量,分析方法易于推广。本方法采用气相色谱-质谱联用对异构体进行初期定性筛选、以高效液相色谱进行确证并外标定量,对常检出的的禁用邻甲苯胺及其异构体检测进行了研究。本方法通过进一步摸索优化高效液相色谱条件,使邻甲苯胺及其异构体达到基线分离,有效避免了检测过程中的假阳性检出。2 实验材料与方法2.1 仪器和设备气相色谱/质谱联用仪:美国Agilent 公司7890A /5975 C,带自动进样器,四极杆质谱检测器;气相色谱柱:HP-5MS 5% Phenyl Methyl Silox,325 °C:30 m x 250 μ[size=

  • 液相色谱测废水中的苯和甲苯,出峰时间与标样出峰时间对不上怎么办?

    [color=#444444]用液相色谱,流动相甲醇70%,流速1ml/min,C18柱。苯和甲苯标样用甲醇配的,分开测得,标线基本上达到4个9。苯的出峰时间在4.99min,甲苯在6.898,测水样时直接过膜,进样针50uL,进样口是20uL。水样的一个出峰时间为6.2左右,在4.99处没有出现,前面有峰,但也不知道是不是苯的峰,这是为什么呢?该如何修正呢?[/color]

  • 高效液相色谱检测水中邻苯二甲酸酯

    用高效液相色谱检测水体中邻苯二甲酸酯,有没有标准检测方法?最好用C18色谱柱现在主要考虑到水样预处理萃取比较困难,文献中选用成品固相萃取柱,考虑到价格问题,希望专家推荐一些其他的萃取方式,处理后适合用C18柱萃取,感谢!!萃取方式对后续高效液相色谱检测有没有影响,萃取用液体会不会对柱子造成影响?

  • 邻-;间-;对-甲苯磺酸这三个异构体能用高效液相色谱分离吗?

    [color=#444444]看书上说烷基苯磺酸类的表面活性剂都可以用高效液相色谱直接测出碳链分布,不知道对甲苯磺酸的三个异构体可不可以用液相色谱分离出来?[/color][color=#444444]看文献大多是做成衍生物用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]做的,需要专门的柱子。而我们自己的实验室只有C18的液相色谱。[/color]

  • 邻-;间-;对-甲苯磺酸这三个异构体能用高效液相色谱分离吗?

    [color=#444444]看书上说烷基苯磺酸类的表面活性剂都可以用高效液相色谱直接测出碳链分布,不知道对甲苯磺酸的三个异构体可不可以用液相色谱分离出来?[/color][color=#444444]看文献大多是做成衍生物用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]做的,需要专门的柱子。而我们自己的实验室只有C18的液相色谱。[/color]

  • 有大神试验过拿液相色谱分离7种苯系物的么?求条件

    最近有做7种苯系物的能力验证,结果是不满意。现在要复测归纳原因是我们的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]手动进样,进样准确度不高。突然想到旁边的液相色谱仪是有自动进样器的,至少进样体积上会准确很多。而且曾经看过论坛里也有大神拿液相色谱仪做水中的苯。只是那位大神只单独测了一个苯,而没有尝试着去分离[b]苯、甲苯、乙苯、二甲苯、苯乙烯[/b],一共7种苯系物就想问一下,有没有哪位大神试验过拿液相色谱测定7种苯系物的?这7种苯系物在C18柱子上的出峰顺序怎么样?还有就是分析条件了,检测器、色谱柱、流动相感激不尽。

  • 【求助】用液相色谱仪可以测苯系物吗

    请问用液相色谱仪可以测苯、甲苯、二甲苯吗?比如说测喷涂车间经处理的废弃经排气筒排放,我们要测排出的苯、甲苯、二甲苯的含量而且是在线设备,24小时运行我知道用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]可以做到,那液相的呢?请高人指教!

  • 液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解【转】

    苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标,苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-2003,糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-2003,即可开展实验。 苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目,但是要得到一个准确可靠的结果,也存在一定的难度,许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发,以苯甲酸、山梨酸为着重点,从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面,进行了详细的阐述。 2 样品前处理的注意事项 GB/T5009.28-2003和GB/T5009.29-2003 在文字结构上有缺陷,在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时,只讲述了液体样品的前处理方法,没有涉及对固体样品的前处理。 食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质,对提取极为不利;如处理不干净也会污染色谱柱,影响检测工作。这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂,尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质,且不影响待测物组分的回收率。 GB/T5009.29-2003使用5%硫酸铜溶液沉淀蛋白,对于蛋白质含量较低的食品尚可,对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。如用10%钨酸钠溶液作为沉淀剂,效果好些;如用10%亚铁氰化钾溶液和20%醋酸锌溶液则效果更理想(这是笔者目前用过最理想的沉淀剂)。 具体操作步骤如下: 取一定量样品,捣碎,利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中,加水20ml,浸泡、振荡均匀,加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml,加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液, 9.50mL 20%乙酸锌溶液,定容,振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中,样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。 用这种方法简单易行,接触有机试剂少,重复性和回收率都令人满意;缺点是一定要用液相色谱法检测,有一定局限。 3 检测仪器的选择 虽然液相色谱仪操作起来比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]要复杂,但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。原因如下: 3.1 液相色谱法所用的样品处理方法远比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法简单,且不需使用有机试剂。尤其对于高油脂样品(如月饼)若采用碱化-排油-酸化-提取-挥干-溶解等步骤,再上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]检测,工作量大,试剂毒性也大,且结果由于处理步骤太多而难以保证准确。 3.2 用液相色谱法还可同时完成糖精钠项目的检测,而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法只能做苯甲酸、山梨酸的检测。 3.3 液相色谱仪所用的紫外检测器比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的氢火焰检测器灵敏,可进行更低含量的检测。如用二极管阵列检测器,还可辅助定性,这更是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]氢火焰检测器不可比拟的。 4 选用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]时的注意事项 GB/T5009.29所用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱为 5%DEGS+1%磷酸固定液的60-80目 Chromosorb W AW,。这种柱有性能稳定、重复性好、保留时间稳定的优点,但同时也有稳定时间较长的缺点。 该柱的适用的样品提取溶剂为石油醚或乙醚,如果用甲醇或乙醇,则溶剂峰拖尾效应较大,对山梨酸的测定有影响。 如用毛细管柱,能取得更好的峰形和灵敏度,但其稳定性及特异性不如填充柱。一般可用非极性毛细管柱,0.530mm内径,10-15m长度。色谱条件可能需用程序升温。 在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上的出峰次序为先出山梨酸,后出苯甲酸。 糖精钠不能直接用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行检测,必须衍生化后才能汽化进样。 5 选用液相色谱仪的注意事项 按照GB/T5009.29,流动相应为5:95的甲醇:0.02M醋酸铵溶液,但是这个比例仅是个参考值,我们在工作中应根据实际情况进行调节。 为什么用甲醇溶液?甲醇有两个作用,(1)防腐,液相色谱柱最怕流动相长菌,尤其霉菌。甲醇可使蛋白质变性,有杀菌作用。(2)调节流动相极性,这是最重要的一点。甲醇在溶液中比例的较小变化都会使苯甲酸、山梨酸、糖精钠的保留时间发生明显的改变,因此可以通过改变流动相中甲醇含量,以调节这几个组分的出峰和分离,以得到较理想的色谱图。 5:95是一个通用的比例,如减少甲醇含量,苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间变慢,扩散效应增大,峰形较差,但这三组分的分离情况较好。如增加甲醇含量,苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间提前,扩散效应较小,峰形尖锐,但这三组分的分离情况可能受影响,产生重叠。在选择条件时,只能通过实验手段,如配制3:97,4:96,5:95,6:96,7:93的流动相,综合考虑分离效果和分离时间选择最佳比例。 不同柱的最适比例不同,举例来说,色谱科公司的液相柱最适比例为4:96,而岛津公司液相柱的最佳比例为7:93。就是同一根柱,一年前和一年后的极性也会有变化,需调节溶液配比。 为什么使用0.02M醋酸铵溶液?加入醋酸铵是为了调节离子强度,使待测物的峰形不致于变坏。如果单独检测苯甲酸和糖精钠,加不加醋酸铵没有什么关系,都可以得到较好的峰形;但是检测山梨酸时流动相一定要加醋酸铵,否则得不到一个完整的色谱峰,峰形呈破裂状。 醋酸铵溶液浓度不需严格控制,0.01M、0.02M、0.04M均可。

  • 【实战宝典】如何使用液相色谱法检测水中邻苯二甲酸二甲酯?

    [b][font=宋体]问题描述:[back=white]按照[/back][/font][back=white]HJ/T 72-2001[/back][font=宋体][back=white]方法对标准曲线溶液处理后上机后没有出峰,是什么原因?改用[/back][/font][back=white]C[sub]18[/sub][/back][font=宋体][back=white]色谱柱,流动相采用甲醇,甲醇做溶剂,标准曲线线性非常好。明显用反相色谱柱分离效果好,为什么标准选择了正相色谱分离,正相色谱的优势在哪里?[/back][/font][font=宋体]解答:[/font][/b][font=宋体][back=white]([/back][/font][back=white]1[/back][font=宋体][back=white])由于[/back][/font][back=white]HJ/T 72-2001[/back][font=宋体][back=white]《水质[/back][/font][font=宋体][back=white]邻苯二甲酸二甲(二丁、二辛)酯的测定[/back][/font][font=宋体][back=white]液相色谱法》中在配制标准物质工作溶液时,是将甲醇中的标液用正己烷进行萃取,在萃取的过程中可能导致标准物质损失,可以尝试不萃取进样,如果出峰,则基本可以断定是萃取的问题。[/back][/font][font=宋体][back=white]([/back][/font][back=white]2[/back][font=宋体][back=white])实际上检测[/back][/font][font=宋体]水中邻苯二甲酸二甲酯的方法有很多种,包括[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法、液相色谱法、液相色谱串联质谱法等。根据文献记载,液相色谱法[back=white]检测[/back]水中邻苯二甲酸二甲酯,正相色谱法和反相色谱法都可以满足检测要求。[/font][font=宋体][back=white]([/back][/font][back=white]3[/back][font=宋体][back=white])该标准方法测定的是水和废水中邻苯二甲酸酯,包含了[/back][/font][font=宋体]邻苯二甲酸二甲酯等[/font][back=white]4[/back][font=宋体][back=white]个组分,而非[/back][/font][font=宋体]邻苯二甲酸二甲酯单个组分[back=white]。当然,如果在实际检测过程中,使用反相色谱分离[/back]邻苯二甲酸二甲酯[back=white]效果比较好,完全可以采用反相色谱法来检测,但需要对该方法进行评估和验证。[/back][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

  • 【实战宝典】如何采用液相色谱法分析样品中甲苯二异氰酸酯?

    【实战宝典】如何采用液相色谱法分析样品中甲苯二异氰酸酯?

    [b][font=宋体]问题描述:液相色谱为[/font]Agilent 1260[font=宋体],取适量甲苯二异氰酸酯样品溶于乙腈中,以乙腈[/font]-[font=宋体]水作为流动相进行分析,但谱图显示,样品峰峰形较差,拖尾严重,在排除色谱柱的影响因素外,猜测该样品可能会在乙腈中分解,导致峰形变差,此物质如何分析?[/font][font=宋体]解答:[/font][/b][font=宋体]([/font]1[font=宋体])甲苯二异氰酸酯([/font]TDI[font=宋体])有两种异构体:[/font]2,4[font=宋体]-甲苯二异氰酸酯和[/font]2,6[font=宋体]-甲苯二异氰酸酯。甲苯二异氰酸酯为无色透明至淡黄色液体,有刺激性气味;遇光颜色变深。该化合物不溶于水;溶于丙酮、乙酸乙酯和甲苯等。容易与包含有活泼氢原子的化合物,如胺、水、醇、酸、碱发生反应,特别是与氢氧化钠和叔胺发生难以控制反应,并放出大量热。[/font][font=宋体]([/font]2[font=宋体])为了判断该样品是否会在乙腈中存在分解行为,设计了试验对该样品进行测试,分离条件如下:色谱柱为[/font]C[sub]18[/sub][font=宋体]柱([/font]4.6mm×250mm[font=宋体],[/font]5μm[font=宋体]);流动相为有机相(甲醇或乙腈):[/font]0.1%[font=宋体]磷酸水溶液([/font][i]V/V[/i][font=宋体])[/font]=60[font=宋体]:[/font]40[font=宋体];检测波长[/font]225nm[font=宋体]。对比试验结果见表[/font]6-3[font=宋体]。[/font][align=center][i][font=宋体]表[/font]6-3[font=宋体]甲苯二异氰酸酯检测方法流动相溶剂对比试验表[/font][/i][/align] [table=549][tr][td] [align=center][font=宋体]目标物[/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]乙腈:[/font]0.1%[font=宋体]磷酸水溶液([/font][i]V/V[/i][font=宋体])[/font][/align] [align=center]=60[font=宋体]:[/font]40[/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]甲醇:[/font]0.1%[font=宋体]磷酸水溶液([/font][i]V/V[/i][font=宋体])[/font][/align] [align=center]=60[font=宋体]:[/font]40[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]TDI[font=宋体](乙腈溶解)[/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]未见目标峰[/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]见图[/font]6-38[/align] [/td][/tr][tr][td] [align=center]TDI[font=宋体](甲醇溶解)[/font][/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]见图[/font]6-39[/align] [/td][td] [align=center][font=宋体]见图[/font]6-40[/align] [/td][/tr][/table][align=center][img=,373,293]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103241045254943_745_3389662_3.jpg!w373x293.jpg[/img][/align][align=center][i][font=宋体]图[/font]6-38[font=宋体]甲苯二异氰酸酯样品色谱图[/font]1[/i][/align][align=center][img=,388,303]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103241045366952_6269_3389662_3.jpg!w388x303.jpg[/img][/align][align=center][i][font=宋体]图[/font]6-39[font=宋体]甲苯二异氰酸酯样品色谱图[/font]2[/i][/align][align=center][img=,428,314]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2021/03/202103241045465587_5164_3389662_3.jpg!w428x314.jpg[/img][/align][align=center][i][font=宋体]图[/font]6-40[font=宋体]甲苯二异氰酸酯样品色谱图[/font]3[/i][/align][font=宋体]([/font]3[font=宋体])试验结果表明,[/font] TDI[font=宋体]样品在乙腈中的确存在分解行为。[/font]a.[font=宋体]当样品用乙腈溶解时,采用乙腈作为流动相时,色谱图中未发现目标峰;采用甲醇作为流动相时,虽然能检测到[/font]TDI[font=宋体],但拖尾严重,无法有效分离和定量。[/font]b.[font=宋体]当样品用甲醇溶解时,无论是采用乙腈还是甲醇作为流动相,均能有效检出[/font]TDI[font=宋体]。相比较之下,甲醇作为流动相保留更好,响应值更高。[/font][font=宋体]([/font]4[font=宋体])根据试验结果,因为[/font]TDI[font=宋体]在乙腈中会发生分解,所以想要有效检测[/font]TDI[font=宋体],应避免采用乙腈溶解样品,流动相中最好也要避免使用乙腈。[/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white]领取更多《实战宝典》请进:[url]http://instrument-vip.mikecrm.com/2bbmrpI[/url][/back][/color][/font][font='微软雅黑','sans-serif'][color=black][back=white] [/back][/color][/font]

  • 高效液相色谱在橡胶检测中的应用

    [align=center][b]高效液相色谱在橡胶检测中的应用[/b][/align]高效液相色谱是一种高效能的分离手段,在橡胶原材料检测以及硫化橡胶中配合剂检测等方面应用广泛.高效液相色谱是一种常温分离分析方法,对于高温条件下易发生反应的硫化促进剂,防焦剂等的分析具有其独特的优势。一、 橡胶原材料的检测高效液相色谱可以对橡胶防老剂,促进剂进行定性定量的检测。现行的相关标准和方法中涉及诸多高效液相色谱定量检测方法,如防老剂RD有效含量的测定 (包含二聚体、三聚体以及四聚体的相对含量),防老剂4020纯度的测定,防老剂4010NA纯度的测定,促进剂NS纯度的测定,促进剂CZ纯度的测定等。其中促进剂在高温条件下极易发生分解,因此对其进行检测一般采用可进行常温分析的高效液相色谱法。二、 硫化橡胶中配合剂的检测高效液相色谱法可以通过对硫化橡胶抽提液的分析,定性检测其中的配合剂。本实验室建立了多种相关的检测方法,如防老剂的定性检测,促进剂CZ和促进剂NS的定性检测,防焦剂的定性检测等。现行的橡胶防老剂、促进剂的定量检测方法,一般是采用面积归一的数据处理方法。这种方法在分析时具有明显的局限性,本实验室曾采用外标法处理实验数据,方法的精密度好,准确度高。

  • 液相色谱产品,农药生产检测

    各位大侠,我有一问题向各位请教。在家药生产过程中进行反应控制,主要反应是2,4-二氯苯酚与三氯氧磷反应产生2,4-二氯苯酚的三苯酯,这个东西可不可以用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行检测,如果需要液相色谱的话哪种牌子的液相产品比较可靠又要价格低廉,色谱的配置要怎样(是否双泵,流动相是什么,要不要柱温箱,色谱柱要配啥样的,检测器要哪种)谢谢!

  • 液相色谱法检测苯甲酸、山梨酸、糖精钠的疑难详解

    苯甲酸、山梨酸、糖精钠是衡量食品卫生质量的重要指标,苯甲酸、山梨酸的检测参照GB/T5009.29-1996,糖精钠的检测参照GB/T 5009.28-1996,即可开展实验。苯甲酸、山梨酸、糖精钠虽是较常见的检测项目,但是要得到一个准确可靠的结果,也存在一定的难度,许多新手常出现因对方法理解发生偏差而检测出错的事故。笔者根据自己多年该方面工作的实际经验出发,以苯甲酸、山梨酸为着重点,从样品前处理、检测仪器的选择、超标时的判断等几个易出问题的方面,进行了详细的阐述。2 样品前处理的注意事项 GB/T5009.28-1996和GB/T5009.29-1996 在文字结构上有缺陷,在涉及用仪器法测定苯甲酸、山梨酸、糖精钠时,只讲述了液体样品的前处理方法,没有涉及对固体样品的前处理。食品样品往往含有大量的油脂、蛋白质,对提取极为不利;如处理不干净也会污染色谱柱,影响检测工作。这类样品处理的关键在于如何找到一种较理想的沉淀剂,尽量排除待测样品中的油脂、蛋白质,且不影响待测物组分的回收率。GB/T5009.29-1996使用5%硫酸铜溶液沉淀蛋白,对于蛋白质含量较低的食品尚可,对于豆粉、奶粉、月饼等高油脂、高蛋白样品则沉淀效果不理想。如用10%钨酸钠溶液作为沉淀剂,效果好些;如用10%亚铁氰化钾溶液和20%醋酸锌溶液则效果更理想(这是笔者目前用过最理想的沉淀剂)。具体操作步骤如下:取一定量样品,捣碎,利用四分法原理称取样品5.0 克于50ml比色管中,加水20ml,浸泡、振荡均匀,加入氢氧化钠溶液(1mol/L)1.0 ml,加入9.5mL10%亚铁氰化钾溶液, 9.50mL 20%乙酸锌溶液,定容,振荡使其充分混匀后,用滤纸初滤除去沉淀物, 初滤液过0.45μm微孔滤膜,收集滤液于样品瓶中,样品处理液和标准有溶液各进样5uL测定。用这种方法简单易行,接触有机试剂少,重复性和回收率都令人满意;缺点是一定要用液相色谱法检测,有一定局限。3 检测仪器的选择虽然液相色谱仪操作起来比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]要复杂,但笔者建议如条件许可仍尽量用液相色谱法检测。原因如下:3.1 液相色谱法所用的样品处理方法远比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法简单,且不需使用有机试剂。尤其对于高油脂样品(如月饼)若采用碱化-排油-酸化-提取-挥干-溶解等步骤,再上[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]检测,工作量大,试剂毒性也大,且结果由于处理步骤太多而难以保证准确。3.2 用液相色谱法还可同时完成糖精钠项目的检测,而[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]法只能做苯甲酸、山梨酸的检测。3.3 液相色谱仪所用的紫外检测器比[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]的氢火焰检测器灵敏,可进行更低含量的检测。如用二极管阵列检测器,还可辅助定性,这更是[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]氢火焰检测器不可比拟的。4 选用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]时的注意事项 GB/T5009.29-1996所用的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]柱为 5%DEGS+1%磷酸固定液的60-80目 Chromosorb W AW,。这种柱有性能稳定、重复性好、保留时间稳定的优点,但同时也有稳定时间较长的缺点。该柱的适用的样品提取溶剂为石油醚或乙醚,如果用甲醇或乙醇,则溶剂峰拖尾效应较大,对山梨酸的测定有影响。如用毛细管柱,能取得更好的峰形和灵敏度,但其稳定性及特异性不如填充柱。一般可用非极性毛细管柱,0.530mm内径,10-15m长度。色谱条件可能需用程序升温。在[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]上的出峰次序为先出山梨酸,后出苯甲酸。糖精钠不能直接用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱[/url]进行检测,必须衍生化后才能汽化进样。5 选用液相色谱仪的注意事项 按照GB/T5009.29-1996,流动相应为5:95的甲醇:0.02M醋酸铵溶液,但是这个比例仅是个参考值,我们在工作中应根据实际情况进行调节。 为什么用甲醇溶液?甲醇有两个作用,(1)防腐,液相色谱柱最怕流动相长菌,尤其霉菌。甲醇可使蛋白质变性,有杀菌作用。(2)调节流动相极性,这是最重要的一点。甲醇在溶液中比例的较小变化都会使苯甲酸、山梨酸、糖精钠的保留时间发生明显的改变,因此可以通过改变流动相中甲醇含量,以调节这几个组分的出峰和分离,以得到较理想的色谱图。5:95是一个通用的比例,如减少甲醇含量,苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间变慢,扩散效应增大,峰形较差,但这三组分的分离情况较好。如增加甲醇含量,苯甲酸、山梨酸、糖精钠的出峰时间提前,扩散效应较小,峰形尖锐,但这三组分的分离情况可能受影响,产生重叠。在选择条件时,只能通过实验手段,如配制3:97,4:96,5:95,6:96,7:93的流动相,综合考虑分离效果和分离时间选择最佳比例。不同柱的最适比例不同,举例来说,色谱科公司的液相柱最适比例为4:96,而岛津公司液相柱的最佳比例为7:93。就是同一根柱,一年前和一年后的极性也会有变化,需调节溶液配比。为什么使用0.02M醋酸铵溶液?加入醋酸铵是为了调节离子强度,使待测物的峰形不致于变坏。如果单独检测苯甲酸和糖精钠,加不加醋酸铵没有什么关系,都可以得到较好的峰形;但是检测山梨酸时流动相一定要加醋酸铵,否则得不到一个完整的色谱峰,峰形呈破裂状。醋酸铵溶液浓度不需严格控制,0.01M、0.02M、0.04M均可。苯甲酸、山梨酸、糖精钠在液相上的出峰次序很有特点。在流动相5:95及以下比例时,次序是苯甲酸、山梨酸、糖精钠(注意一下[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相[/url]的出峰次序),逐步增大甲醇含量,苯甲酸、山梨酸的出峰时间逐步提前,而糖精钠是出峰时间迅速提前,随着甲醇比例的逐步增大(15%-30%),原先在最后出峰的糖精钠集次和前面的山梨酸、山梨酸重叠,并位于最前面,其次序变为糖精钠、苯甲酸、山梨酸。再提高甲醇浓度,次序不变。用高甲醇比例条件(甲醇15%以上)做出的三种标准物质色谱图峰形较好,出峰时间也较快,但做实际样品时干扰较大;因此建议尽量使用低甲醇比例条件(甲醇5%左右)。6 苯甲酸、山梨酸超标时的判断苯甲酸、山梨酸超标的样品较多,由于它们往往牵涉到一批货物是否合格,因此责任重大。由于该方法定量较准确,因此遇到超标样品时应将精力集中于定性方面。如同时有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url]和液相色谱仪,建议用这两种性质相差较大的仪器进行对照,如定量结果差不多,即可确认。如只有[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Mp]气相色谱仪[/url],应利用其在填充柱保留时间稳定的特性,同时进五针标准液和五针样品液(注:峰面积应差不多,否则需对一方按比例稀释),如标准和样品液的保留时间相差时间超过1 秒,可认为不是。(如进针的技术不过关,请不要做此实验)如用液相色谱仪,当检测器为二极管阵列检测器时,根据保留时间和紫外吸收图结合定性,当只有紫外检测器时,改检测波长为220nm,230nm,250nm,重复进标准和样品液,由标准和样品在不同波长的峰高比值看是否吻合。如有微生物检测手段,可加样品于有菌培养基中,观察有无抑菌现象,如无抑菌现象则无防腐剂。不是很推荐用双柱法,因为有时柱极性相差不大,反而会影响最终判断。7 糖精钠超标时的判断当检测糖精钠超标时,除了采用二极管阵列检测器或波长验证,还可以利用糖精钠的荧光特性,用荧光检测器进行验证。荧光条件是激发波长为277nm,荧光波长为410nm。只有当用荧光检测器和用紫外检测器做出的定量结果相差不多,才可以判断为是。还有一个简单粗糙、却也行之有效的验证方法,即感官法。糖精钠是一种甜味剂,用舌头可以感觉到它的甜味,如果含量超标,一定能尝出来。8 标准溶液的配制贮存问题苯甲酸、山梨酸、糖精钠的标准溶液如用水、乙醇作基体,一般几个月后会严重降解,。如用甲醇溶解再放于冰箱冷冻层,可保持稳定一两年。因此推荐用甲醇作溶剂。在配制标准溶液时,初学者常犯的错误多为用甲醇溶解苯甲酸钠,用水溶解苯甲酸,晃了半天才发现怎么也不没溶解。应该用弱碱性水溶解苯甲酸钠、山梨酸钾,用甲醇溶解苯甲酸、山梨酸。9 苯甲酸、山梨酸的应用范围首先应注意到,并不是所有食品都需要加入防腐剂,只有那些富含营养物质,且需要长时间暴露于空气的才有这样的需要,否则对厂家来说会增加不必要的成本。酱油、酱料、咸菜、浓缩果汁等由于开封后不可能短期内吃完,月饼等需在货架上摆放,如不加防腐剂很快会发霉变质,有添加防腐剂的必要。而利乐装或易拉罐装的饮料由于很快可以食用完毕,即在细菌大量繁殖前己被消化了,因而没有添加的必要。苯甲酸、山梨酸如果要起到防腐的作用,含量就不能太低。如果我们检测样品时只有几个ppm的浓度,有可能是从原料中带来的或由其它添加剂转化来的,而不是厂家出于防腐目的加入的。苯甲酸、山梨酸也只是防腐剂中的两种。并不是所有需要加入防腐剂的食品都会添加苯甲酸、山梨酸,有可能使用防霉剂或其它种类的防腐剂,或自行规定需冷藏(如某些月饼)。因此有些食品检测不出也属正常。另外,我们应该比较清楚地理解苯甲酸与苯甲酸钠、山梨酸与山梨酸钾之间的关系。在食品中添加防腐剂通常以苯甲酸钠、山梨酸钾形式加入,它们不易汽化,易溶于水,但不溶于甲醇等有机试剂;而苯甲酸、山梨酸易汽化,易溶于有机试剂,但

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